Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / In the present study, the sera levels of soluble CD40 ligand (sCD40L) and matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) were quantified by Luminex assay in Visceral leishmaniasis patients before and during treatment follow-up and after regular antimony treatment and also in individuals exposed to infection, living in endemic areas. Different from the other molecules present in sera from classic VL patients, sCD40L and MMP-9 are fairly increased, and increase over time during the follow-up of VL patients undergoing antimony treatment. sCD40L and MMP-9 sera levels were also high in individuals living in endemic settings at high risk of infection (endemic controls). On the other hand, sCD40L and MMP-9 were not observed in sera from non-endemic controls, which are not exposed of infection. Additionally, negative correlations were found between spleen sizes and MMP-9 before treatment and sCD40L at day 15 of treatment. Negative correlations were also found between parasite load with both sCD40L and MMP-9. These findings indicate that both molecules can be used in monitoring therapeutic efficacy in VL. Furthermore, these data suggest a protective effect of these molecules, since the individuals exposed to infection without the symptoms of disease have high sera levels of sCD40L and MMP-9. These data were published in BMC Infectious diseases journal [1]. To confirm the protective effect of sCD40L present in sera of VL patients and determine if this molecule had biological activity, the ability of sera from patients containing high levels of this molecule sCD40L to control infection in vitro in Leishmania infantum infected macrophages, and the ability to induce cytokines production. Thereby, macrophages from of healthy donor were infected with Leishmnia infantum, and later incubated in presence of sera from individuals exposed to infection in presence of anti-CD40L. The infection was evaluated by counting of the number of infected macrophages/100 and the number of intracellular amastigotes/100 macrophages. The data showed that serum sCD40L decrease the number of infected macrophages and the number of intracellular amastigotes. The blockage of sCD40L activity with specific antibody, increase the infection. Moreover, the analysis of cytokines in supernatant of these macrophage cultures by Luminex assay demonstrated that sCD40L induces the IL-12, IL-23, IL-27, IL-15 e IL-1 production. The levels of these cytokines is inversely correlated with infection rate and the number of intracellular parasites from infected macrophages. A second manuscript with these data were published in PLOS One [2] . These results demonstrated that serum sCD40L from individuals exposed to VL improve the microbicide effect and the inflammatory cytokine production, suggesting its potential use in VL immunotherapy. Nevertheless, there is still a long way to be approached in future experimental and clinical studies. / No presente estudo, os níveis séricos dos marcadores inflamatórios CD40 ligante solúvel (sCD40L) e da metaloproteinase de matrix-9 (MMP-9) foram quantificados por Luminex nos pacientes com leishmaniose visceral antes, durante e após o tratamento com antimonial, e em indivíduos controles expostos à infecção, residindo em áreas endêmicas. Ao contrário das outras moléculas inflamatórias presentes nos soros de pacientes com LV, as moléculas sCD40L e MMP-9 apresentaram elevação moderada, havendo um aumento significativo de ambas no decorrer do tratamento com antimonial. Níveis séricos elevados de sCD40L e MMP-9 também foram encontrados nos indivíduos controles sem doença, provenientes de áreas endêmicas e expostos a infecção. Entretanto, o sCD40L e a MMP-9 não foram detectados nos soros de indivíduos de áreas não endêmicas, os quais não estão expostos a infecção. Adicionalmente, correlações negativas entre o tamanho do baço com a MMP-9 antes do tratamento e com o sCD40L 15 dias após o início do tratamento foram observadas, bem como correlações negativas entre ambas as moléculas com a carga parasitaria dos pacientes. Estes resultados indicam que estas moléculas podem ser utilizadas no monitoramento da eficácia terapêutica na leishmaniose visceral. Além disso, estes dados nos sugerem um efeito protetor dessas moléculas contra a doença, desde que os indivíduos expostos e sem a doença apresentaram concentrações elevadas dessas moléculas. Estes dados foram publicados no BMC Infectious diseases [1]. Para confirmar o efeito protetor do sCD40L e investigar se a molécula presente nos soros dos pacientes com LV tinha atividade biológica, foi avaliado se o sCD40L presente no soro dos indivíduos infectados teria ação na resposta leishmanicida e na produção de citocinas por macrófagos infectados por Leishmania infantum. Dessa forma, macrófagos de doadores normais foram infectados com L. infantum e posteriormente incubados com soro de indivíduos expostos a infecção na presença de anti-CD40L. A avaliação da infecção através da contagem de células infectadas e do número de parasitas intracelulares demonstrou que a presença do sCD40L sérico diminui o número de macrófagos infectados e o número de amastigotas intracelulares. O bloqueio da atividade do sCD40L com anticorpo específico reverteu este efeito, aumentando a infecção. Além disso, a análise de citocinas no sobrenadante das culturas de macrófagos por Luminex mostrou que a adição de sCD40L induziu a produção de IL-12, IL- 23, IL-27, IL-15 e IL-1. As concentrações destas citocinas correlacionaram-se inversamente com as taxas de infecção e com o número de parasitas intracelulares nos macrófagos infectados. Um segundo artigo com estes resultados foi publicado na PLOS One [2]. Estes resultados demonstram que o sCD40L sérico dos indivíduos expostos à LV melhora a capacidade microbicida e a produção de citocinas inflamatórias, sugerindo seu potencial uso na imunoterapia na LV humana, embora este seja um longo caminho a ser abordado em estudos futuros experimentais e clínicos.

In this work we studied the magnetic properties referring to the MgFe2O4 nanoparticles precipitated in monocrystalline solid solution of [Mg, Fe]O, with 2.2% iron, obtained at different temperatures and times. These particles grow coherently with the matrix lattice and present shapes of small octahedrons whose diagonals are parallel to the [100] directions. The results presented here refer to samples treated in the temperature range between 400 and 900 º C for 2, 6 and 10 hours. They were analyzed by X-ray diffraction (XRD), magnetization as a function of field (hysteresis curves) and magnetization as a function of temperature (Zero Field Cooled e Field Cooled Warming). It was observed that in samples treated for 6 hours, the system shows increasing values of magnetization remanent and coercive field for temperatures of precipitation from 600 º C, which can be attributed to the precipitation and growth of nanoparticles magnesioferrite matrix. The variation of coercive field with temperature measurement was studied using two different theoretical models. By comparing the remanent magnetization and coercive field of the samples, it was found that the variation of the inversion parameter of magnesioferrite in the studied range of precipitation temperature decreases as reported by other authors. / Neste trabalho foram estudadas as propriedades magnéticas do sistema de nanopartículas de MgFe2O4 obtidas por precipitação em solução sólida monocristalina de [Mg;Fe]O, com 2,2% de ferro, em diferentes tempos e temperaturas de precipitação. Estas partículas crescem de forma coerente com a matriz, exibindo a forma de pequenos octaedros cujas diagonais são paralelas às direções [100] da rede cristalina da matriz, que possui simetria cúbica. Os resultados aqui apresentados são referentes a amostras tratadas no intervalo de temperaturas entre 400 e 900ºC durante 2, 6 e 10 horas. As mesmas foram analisadas por difração de raios X (DRX), magnetização em função do campo (curvas de histerese) e magnetização em função da temperatura (Zero Field Cooled e Field Cooled Warming). Observou-se que, em amostras tratadas durante 6 horas, o sistema apresenta valores crescentes de magnetização remanente e campo coercivo para temperaturas de precipitação a partir de 600ºC, fato que pode ser atribuído à precipitação e ao crescimento de nanopartículas de magnesioferrita na matriz. A variação do campo coercivo com a temperatura de medição foi estudada utilizando-se dois diferentes modelos teóricos e, a partir da comparação da magnetização remanente e do campo coercivo das amostras tratadas em diferentes temperaturas, verificou-se que a variação do parâmetro de inversão da magnesioferrita na faixa de temperaturas de precipitação estudada decresce como reportado por outros autores.

Orientador: Rogerio Custodio / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-12T23:54:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Angelotti_WagnerFernandoDelfino_D.pdf: 827045 bytes, checksum: 044a9aecfaec7ac3e14153480c625d9f (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Esta tese explorou diferentes objetivos envolvendo o método Monte Carlo Quântico, dos quais se destacam: avaliação do método convencional em propriedades eletrônicas; formalização das relações existentes entre a teoria de matriz densidade e os métodos Monte Carlo Quântico Variacional e de Difusão; estudo da correlação eletrônica com diferentes funções correlacionadas e também através de método misto envolvendo a teoria de perturbação e o Monte Carlo Quântico Variacional; aplicações para átomos do primeiro e segundo período da tabela periódica e moléculas diatômicas. Experimentos computacionais com o método Monte Carlo Quântico e separação de spins foram realizados produzindo excelentes resultados para cálculos de potenciais de ionização sucessivos para átomos, ionização atômica e molecular e construção de curvas de potencial para moléculas simples. Foram ainda obtidas duas formulações analíticas que descrevem exatamente o vínculo formal entre a matriz densidade e o Monte Carlo Quântico. Esta associação proporcionou ótimos resultados para os métodos Variacional e de Difusão, apresentando semelhanças e significativas diferenças quando comparado ao tratamento convencional com respeito à estrutura nodal para cada estado eletrônico estudado. Além disso, a matriz densidade aliada às funções correlacionadas é capaz de recuperar parte da correlação eletrônica e torna possível a correção de funções de onda dentro da associação do Monte Carlo Quântico e teoria de perturbação. / Abstract: This thesis explored different goals involving the quantum Monte Carlo method, of which stand out: assessment of the conventional method in electronic properties; formalization of relations between the density matrix theory and the variational and diffusion quantum Monte Carlo methods; study of the electronic correlation with different correlated functions and also through mixed method involving the perturbation theory and variational quantum Monte Carlo; applications to atoms of the first and second period of the periodic table and diatomic molecules. Computational experiments with the quantum Monte Carlo method and separation of spins were achieved producing excellent results for calculations of successive ionization potentials for atoms, single ionization of atoms and simple molecules and calculation of potential curves for simple molecules. Two analytical formulations were obtained that describes exactly the formal link between the density matrix and quantum Monte Carlo. This association has provided excellent results for variational and diffusion methods, presenting similarities and significant differences when compared to conventional treatment with respect to the nodal structure for each electronic state studied. Furthermore, the density matrix together with correlated wave functions is able to recover part of the electronic correlation and makes possible the correction of the wave functions within the association of quantum Monte Carlo and perturbation theory. / Doutorado / Físico-Química / Doutor em Ciências

Orientadores: Paulo Inacio de Knegt Lopez de Prado, Carlos Roberto Sorensen Dutra da Fonseca / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-08T17:25:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Becker_CarlosGuilherme_M.pdf: 2929831 bytes, checksum: 6d4d242a4fbe6aac18c4546b538bce05 (MD5) Previous issue date: 2007 / Resumo: O nicho dos anfíbios muda drasticamente ao longo da ontogenia, forçando larvas e pós-metamórficos a ocuparem dois hábitats distintos. Em áreas desmatadas, sítios reprodutivos aquáticos e fragmentos florestais podem ser muito desconectados, isolando o hábitat dos girinos do hábitat dos adultos, em um padrão de fragmentação que chamamos de desconexão de hábitats. Neste estudo, avaliamos os impactos da desconexão de hábitats sobre os anfíbios (i) através de migrações reprodutivas e de padrões de abundância populacional dos anfíbios com larva aquática entre fragmentos com e sem riachos em uma paisagem fragmentada de Mata Atlântica; (ii) através do uso diferencial de hábitat por diferentes guildas nesta mesma paisagem; (iii) por meio de uma análise macroecológica avaliando o efeito da desconexão entre riachos e fragmentos florestais sobre anfíbios de serrapilheira ao longo de 13 pontos na Mata Atlântica. Em nível populacional, detectamos um forte padrão de migração dos anfíbios florestais com desenvolvimento larval aquático entre fragmentos sem riachos e os riachos da matriz de pastagem. Estas espécies foram dramaticamente mais abundantes em fragmentos com riachos do que sem riachos. A estrutura de comunidades variou consistentemente entre hábitats, sendo a guilda das espécies florestais de desenvolvimento larval aquático a mais prejudicada pela desconexão. Tratando-se de grande escala geográfica, a desconexão de hábitat foi o único atributo da paisagem afetando negativamente a riqueza de espécies com desenvolvimento larval aquático, enquanto que a perda de habitat teve influência negativa somente nas espécies com desenvolvimento direto. Estes resultados sugerem que paisagens com altas taxas de desconexão entre fragmentos florestais e sítios reprodutivos têm maior chance de sofrerem declínios populacionais, especialmente de anfíbios associados à floresta e com desenvolvimento larval aquático. Estratégias de conservação em qualquer país devem considerar o fortalecimento das leis, tendo em mente a importância das matas de galeria e a configuração de cada paisagem, minimizando a desconexão entre hábitats florestais e os sítios reprodutivos dos anfíbios / Abstract: The niche of amphibians changes drastically along the ontogeny, forcing larvae and post-metamorphics to occupy two distinct habitats. In deforested areas, aquatic breeding sites and forest fragments can be far apart, isolating the habitat of tadpoles from the habitat of adults, in a landscape pattern we call habitat-split. In this study, we evaluated the impacts of habitat-split on amphibians (i) through breeding migrations and abundance patterns of species with aquatic larvae between fragments with and without streams in a severely fragmented landscape of Brazilian Atlantic Forest; (ii) by the habitat use of different guilds in this landscape; (iii) through a macroecological analysis, evaluating the effect of habitat-split on litter-amphibians throughout 13 Atlantic Forest sites. At the population level, we detected a migration pattern for the stream-breeding forest amphibians between the fragments without streams and the streams of adjacent grass fields. These species were dramatically more abundant in fragments with streams than in fragments without streams. The community structure varied consistently across habitats, being the guild of forest-associated species with aquatic larvae the most affected by habitat-split. At a larger geographic scale, habitat-split was the only landscape attribute negatively affecting the richness of species with aquatic larval stage, whereas habitat loss had negative influences on direct development species only. These results suggest that landscapes with high mismatches between forest fragments and breeding sites are more prone to experience population declines, especially of forest-associated amphibians with aquatic larval stage. Conservation strategies in any country must regard the law reinforcement, considering the importance of riparian buffers and the configuration of each landscape, minimizing the mismatch between non-reproductive habitats and breeding sites for amphibians / Mestrado / Ecologia / Mestre em Ecologia

Orientador: Ketty Abaroa de Rezende / Dissertação (mestrado) - Universidade Esstadual de Campinas, Instituto de Matematica, Estatistica e Computação Cientifica / Made available in DSpace on 2018-08-15T16:45:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paulo_NaiaraVergiande_M.pdf: 3206526 bytes, checksum: 8b9412f659496d0b15142c86dfe55a5d (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O objetivo deste trabalho é apresentar a matriz de conexão, estabelecendo um paralelo entre as abordagens contínua e discreta. O índice homológico de Conley, principal elemento para a definição da matriz de conexão, assume formas distintas quando lidamos com fuxos ou com aplicações contínuas. Tal índice trata-se apenas de um espaço vetorial graduado no caso contínuo, enquanto no caso discreto toma a forma de um par que consiste de um espaço vetorial graduado junto com um isomorfismo. Como consequência, a matriz de conexão para uma decomposição de Morse é definida diferentemente quando consideramos sistemas dinâmicos contínuos ou discretos. No primeiro caso, a matriz de conexão é uma matriz de aplicações lineares entre os índices contínuos homológicos de Conley dos conjuntos de Morse que codifica uma trança de espaços vetoriais graduados, conhecida como trança do índice contínuo homológico. Já no segundo caso, a matriz de conexão é um par de matrizes que têm como entradas aplicações lineares definidas entre os índices discretos homológicos de Conley dos conjuntos de Morse e, agora, este par de matrizes codifica uma trançaa de espaços vetoriais graduados com isomorfismos, chamada trança do índice discreto homológico. Apesar do índice homológico de Conley e da matriz de conexão serem elementos puramente algébricos, ambos são capazes de fornecer informações dinâmicas sobre um fuxo e mais ainda sobre uma aplicação contínua. Especificamente, estes elementos podem detectar a existência de órbitas de conexão entre conjuntos de Morse de um conjunto invariante isolado e exemplos desta situação são apresentados neste trabalho / Abstract: The goal of this work is to present the connection matrix by establishing a parallel between the continuous and discrete settings. The homological Conley index, the main element in the definition of the connection matrix, has a diferent form for flows or continuous maps. This index is a graded vector space in the continuous case whereas in the discrete case it takes the form of a pair consisting of a graded vector space together with an isomorphism. Consequently, the connection matrix for a Morse decomposition is defined diferently when we consider continuous or discrete dynamical systems. In the prior case, the connection matrix is a matrix of linear maps between the continuous Conley homology indices of Morse sets which codes the information of a graded vector space braid known as the continuous homology index braid. In the latter case, the connection matrix is a pair of matrices where the entries in both case are linear maps de?ned between the discrete Conley homology indices of Morse sets and, in this setting, this pair of matrices codes the information of a graded vector space braid with isomorphism known as discrete homology index braid. Although the Conley homology index and the connection matrix constitute purely algebraic elements, they are capable of providing dynamical information of a fow and of a continuous map. More precisely, these elements can detect the existence of connecting orbits among Morse sets of an isolated invariant set and examples of this situation are presented in this work. / Mestrado / Sistemas Dinamicos Topologicos / Mestre em Matemática

Orientadores: Paulo Inácio de Knegt López de Prado, Emerson Monteiro Vieira / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-16T00:11:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Paise_Gabriela_D.pdf: 1506226 bytes, checksum: 2321b37857a637b42de135349a06edea (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo : Os efeitos negativos da fragmentação de habitats sobre pequenos mamíferos são amplamente reconhecidos. Entretanto, a intensidade desses efeitos depende de diversos fatores como o padrão de fragmentação, a escala avaliada, a permeabilidade de diferentes tipos de matrizes e a plasticidade comportamental de diferentes grupos de espécies. Neste estudo avaliamos os efeitos da fragmentação, em uma paisagem extremamente fragmentada de Mata Atlântica, na comunidade de pequenos mamíferos (i) através do uso diferencial de habitats pela comunidade e por guildas de espécies que usam habitats florestais, áreas abertas ou ambos (generalistas); (ii) através dos padrões de utilização de micro-habitats; (iii) através da similaridade na utilização da paisagem, entre sexos e espécies generalistas de habitat, em diferentes escalas espaciais. Nós utilizamos armadilhas de intercepção e queda em seis sítios de amostragem, nos quais avaliamos cinco habitats: floresta com rio, floresta sem rio, borda de floresta, matriz de pasto com rio e matriz de pasto sem rio. Nós detectamos que o habitat mais antrópico e inóspito, a matriz sem rio, suportou menor abundância de espécies. As guildas de espécies responderam diferentemente aos habitats da paisagem. Houve menor tolerância das espécies florestais ao habitat matriz sem rio. Até mesmo as espécies generalistas sofrem os efeitos negativos da matriz sem rio, diminuindo em abundância. Um pequeno aumento na estrutura da vegetação, como observado nas matrizes ripárias, mitigam o efeito negativo da matriz, tornando a abundância, riqueza e diversidade da matriz com rio comparável aos habitats florestais. A riqueza e abundância das guildas de espécies associadas à macro-habitats foram em geral influenciadas pela estrutura da vegetação em escala de micro-habitats e revelam um alto grau de especificidade de micro e macro-habitat. Esta especificidade mostra que, mesmo em paisagens altamente fragmentadas e alteradas, não ocorre a invasão das áreas florestais pela guilda de espécies de áreas abertas e que guildas de espécies florestais são incapazes de utilizar micro-habitats extremamente modificados. Nossos resultados indicam que a similaridade na utilização da paisagem varia entre espécies e sexos, entre diferentes escalas espaciais e pode ser fortemente dependente do padrão de fragmentação. O manejo das paisagens fragmentadas requer a existência de matrizes permeáveis, como a matriz de pasto com rio, as quais poderão funcionar como habitats potenciais, diminuindo a divisão da paisagem e facilitando a manutenção da comunidade original na paisagem fragmentada. / Abstract: The negative effects of habitat fragmentation on small-mammals are widely recognized. Nevertheless, the intensity of these effects depend on multiple factors such as the pattern of fragmentation, the evaluated scale, the permeability of different types of matrices, and the behavioral plasticity of different groups of species. In this study, we evaluated the effects of fragmentation on the community of small-mammals in a severely fragmented landscape of Brazilian Atlantic forest (i) through the differential use of habitats by the small-mammal community and by small-mammal guilds that use forest habitats, open areas or both (generalists); (ii) through the patterns of utilization of micro-habitats by small-mammal guilds; (iii) through the similarity in the use of the landscape, between sexes and generalist species in different space scales. We used pitfall traps installed in six sites. In each site, we sampled five habitats: forest fragments with streams, forest fragments without streams, forest edge, pasture matrix with streams, and pasture matrix without streams. We have detected that the pasture matrix without streams harbored lower species abundance than all other landscape units. The guilds responded differently to the different landscape units. The pasture matrix without streams is inhospitable for forest species which, even for generalists, suffer their effect, decreasing in abundance. A slight increase in the complexity of the vegetation, as observed in riparian matrices, mitigates its negative effect, making the abundance, richness and diversity of matrices with streams comparable to forest habitats. The richness and the abundance of macro-habitat-related guilds were, in general, influenced by the complexity of vegetation into the micro-habitat's scale and revealed a high degree of specificities of the macro- and micro-habitats. This specificity shows that, even in highly fragmented and altered landscapes, the invasion of forest habitats by open-area dwellers does not occur and that the forest dwellers are incapable to use the severely altered micro-habitats. Our results also indicate that in highly fragmented landscapes, the similarity in the use of the landscape varies between species and sexes, among different space scales, and can be strongly dependent on the pattern of fragmentation. The management of fragmented landscapes requires the existence of permeable matrices, as the pasture matrix with stream, which may function as potential habitat, decreasing the division of the landscape and facilitating the maintenance of the original community in the fragmented landscape. / Doutorado / Ecologia / Doutor em Ecologia

Orientador: Sergio Roberto Peres Line / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-10T16:39:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EspiritoSanto_AlexandreRibeirodo_D.pdf: 9422040 bytes, checksum: 9034465ff462c933a4d9d5ab9721b610 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O esmalte envolve a porção coronária dos dentes e constitui a estrutura mais mineralizada do corpo vertebrado. Seu desenvolvimento tem início com secreção, processamento proteolítico e auto-agregação de uma complexa mistura de proteínas. O estabelecimento de uma matriz orgânica ordenada parece ser fundamental para a formação adequada da fase mineral do esmalte. Microscopia de luz polarizada mostra que a matriz orgânica do esmalte secretório (MOES) apresenta-se fortemente birrefringente em cortes não corados de 5 µm de espessura. Esta propriedade reflete alto grau de organização em nível molecular com possível relevância funcional. Alterações no brilho de birrefringência da MOES podem indicar desordens moleculares e estar associadas a alterações na formação da fase mineral. Atraso no processo de fixação da MOES pode levar a uma rápida perda de sua birrefringência, comprometendo o seu estudo por meio de microscopia de luz polarizada. No presente trabalho, analisaram-se os efeitos do nocauteamento dos genes Amelx e Mmp20 (experimento 1), dos bisfosfonatos (experimento 2) e de inibidores de serina proteinases e metaloproteinases (experimento 3) sobre a birrefringência da MOES. O experimento 1 mostrou quecamundongos fêmeas Amelx+/- apresentam redução significativa no brilho debirrefringência quando comparados aos animais Amelx+/+ do mesmo gênero (p=0,0029). A MOES dos camundongos fêmeas Amelx-/- não exibiu birrefringência. Os camundongos Mmp20-/- mostraram uma expressiva diminuição nos valores de retardo ótico em comparação aos camundongos Mmp20+/+ e Mmp20+/- (p=0,0000). Os animais Mmp20+/+ e Mmp20+/- apresentaram birrefringência semelhante (p=1,0000). O experimento 2 mostrou que ratos tratados com alendronato de sódio não apresentam alterações morfológicas na MOES, mas exibem diminuiçãoexpressiva no brilho de birrefringência quando comparados a ratos controles (p<0,01). Interessantemente, os ratos tratados com etidronato dissódico apresentaram alterações morfológicas severas na MOES, mas mostraram brilho de birrefringência na matriz secretada semelhante ao dos ratos controles (p>0,05). O experimento 3 mostrou que a fenantrolina (inibidora de metaloproteinases, como a Mmp20) e o fenilmetilsulfonil fluoreto (inibidor de serina proteinases, como a Klk- 4) preservam a birrefringência da MOES ex vivo. Os resultados aqui apresentados sugerem que: 1) a birrefringência da MOES depende da organização supramolecular das amelogeninas e é influenciada pela atividade proteolítica da Mmp20; 2) o alendronato de sódio pode induzir alterações quantitativas na organização supramolecular da MOES; 3) o etidronato dissódico não altera a ordem molecular da matriz orgânica do esmalte secretada e pode induzir defeitos no esmalte maduro através de interferência direta sobre a atividade secretora dos ameloblastos; 4) a rápida perda de birrefringência da MOES em amostras não imediatamente fixadas é resultante da atividade de proteinases do esmalte. Palavras-chave: Esmalte dentário, Birrefringência, Bisfosfonatos, Fenantrolina, Fenilmetilsulfonil fluoreto / Abstract: Enamel covers dental crown and is the most mineralized structure in the vertebrate body. Its development begins with the secretion, processing and selfassembly of a complex mixture of proteins. The establishment of an ordered organic matrix seems to be a crucial step for the proper formation of enamel mineral phase. Polarizing microscopy shows that the secretory-stage enamel organic matrix (SEOM) is strongly birefringent in non-stained 5 µm-thick sections. This property indicates high level of molecular organization, which may be physiologically important. Changes in SEOM birefringence brightness may reflect molecular disorders and may be associated with alterations in the forming enamel mineral phase. Delay in fixation of SEOM may lead to rapid loss of birefringence, impairing analysis of that tissue with polarized light microscopy. In the present work, we analyzed the effects of Amelx and Mmp20 knocking out (experiment 1), bisphosphonates (experiment 2) and metallo and serine proteinases¿ inhibitors (experiment 3) on SEOM birefringence. Experiment 1 showed that Amelx+/- female mice exhibit a significant reduction in the birefringence brightness when compared to Amelx+/+ female animals. (p=0.0029). The SEOM from Amelx-/- female mice did not show birefringence. Mmp20-/- mice presented an expressive reduction in the optical retardation values in comparison to Mmp20+/+ and Mmp20+/- animals (p=0.0000). Mmp20+/+ and Mmp20+/- mice presented similar birefringence (p=1.0000). Experiment 2 showed that rats treated with sodium alendronate do not present morphological alterations in the SEOM, but exhibit significant decrease in the birefringence brightness when compared to control rats (p<0.01). Interestingly, bisodic etidronate rats showed severe morphological alterations in the SEOM, but exhibited SEOM birefringence brightness similar to that observed in control rats (p>0.05). Experiment 3 evidenced that 1,10-phenanthroline (metalloproteinase inhibitor) and phenylmethylsulphonyl fluoride (serine proteinase inhibitor) preserve SEOM birefringence brightness ex vivo. The results presented here support the following conclusions: 1) SEOM birefringence results from amelogenin supramolecular organization and is influenced by proteolytic activity of Mmp20; 2) sodium alendronate can induce quantitative changes in the supramolecular organization of the SEOM; 3) bisodic etidronate does not disturb molecular order of the secreted enamel organic matrix and may induce changes in mature enamel by affecting directly secretory activity of ameloblasts; 4) rapid loss of birefringence in no immediately fixed SEOM is caused by the activity of enamel proteinases. Key Words: Dental enamel, Birefringence, Bisphosphonates, Phenanthroline, Phenylmethylsulphonyl Fluoride / Doutorado / Histologia e Embriologia / Doutor em Biologia Buco-Dental

As neoplasias mieloproliferativas (NMPs) BCR-ABL1 negativas compreendem a mielofibrose primária (PMF), trombocitemia essencial (TE) e a policitemia vera (PV). A patogênese e progressão dessas NMPs não estão completamente elucidadas. As metaloproteinases de matriz (MMPs) degradam a matriz extracelular, ativando citocinas e fatores de crescimento que, por sua vez, participam da tumorigênese e angiogênese. O objetivo deste estudo foi avaliar a relação da expressão gênica das MMPs, TIMPs, HIF1-&#945; e SPARC com os marcadores angiogênicos bFGF e VEGFA em pacientes com MF e TE, considerando o status mutacional; bem como avaliar a regulação desses genes em camundongos submetidos à hipóxia, e em modelos HIF1-&#945;(-/-) e VHL(-/-). Foram incluídos 21 pacientes com MF, 21 com MF pós-TE, 6 com MF pós-PV, 23 com TE e 78 indivíduos controle. As análises realizadas foram: dosagem sérica e expressão de RNAm de MMP2, MMP9, TIMP1, TIMP2 e SPARC, hemograma, determinação da proteína C reativa ultrassensível, determinação das concentrações de VEGFA e bFGF e avaliação das mutações nos genes JAK2, cMPL e CALR. A avaliação da densidade microvascular da medula óssea foi feita em 30 dos pacientes incluídos. Os pacientes com MFP, MFPTE e TE apresentaram maior expressão de MMP2, SPARC, TIMP1, TIMP2 e bFGF quando comparados aos seus controles (P<0,05), enquanto MMP9 foi mais expressa nos pacientes com MFPTE e TE (P= 0,011 e P=0,047, respectivamente). Os pacientes com TE apresentaram maior expressão de HIF1-&#945; e VEGFA em relação ao grupo controle (P<0,05). Pacientes com MF JAK2V617F positivos apresentaram maiores concentrações de MMP9, TIMP2, bFGF e VEGFA quando comparados aos pacientes portadores de mutações na CALR (P<0,05). Os pacientes com TE JAK2V617F positivos apresentaram maiores concentrações de MMP2 e TIMP2 (P=0,049 e P=0,020, respectivamente). As concentrações das proteínas estudadas não apresentaram correlação com a carga alélica de JAK2V617F e nem com a densidade microvascular da medula óssea. Células de medula óssea de camundongos submetidos à hipóxia apresentaram maior expressão de MMP2 e TIMP1 comparados aos camundongos em normóxia. Camundongos VHL(-/-) apresentaram aumento na expressão dos genes MMP2, MMP9, TIMP1, TIMP2 e VEGFA. Diferentemente, embriões HIF1-&#945;(-/-) não foram considerados um bom modelo para este estudo devido ao envolvimento das MMPs na embriogênese/organogênese. Frente aos resultados encontrados, pode-se sugerir que a maior expressão de MMP2, SPARC e de bFGF estão associadas às NMPs. A mutação JAK2V617F foi associada a maiores concentrações de MMPs, TIMP2 VEGFA e bFGF. HIF1-&#945; foi mais expresso na PV e na TE, sugerindo uma possível regulação da expressão das MMPs e TIMPs nessas doenças. / Myeloproliferative neoplasms (MPNs) BCR-ABL1-negative include primary myelofibrosis (PMF), essential thrombocythemia (ET) and polycythemia vera (PV). The mechanisms underlying the pathology and disease progression in MPN are not completely elucidated. The matrix metalloproteinases (MMPs) cleave extracellular matrix, activating cytokines and growth factors that, in turn, regulate tumorigenesis and angiogenesis. The aim of this study was to evaluate the relationship of MMPs, TIMPs, HIF1-&#945 and SPARC gene expression with angiogenic markers bFGF and VEGFA in patients with MPN considering their mutational status; as well as to assess the regulation of these genes in animal models HIF1-&#945 and VHL knockouts. Twenty-one MF, 21 MF post-ET, 6 MF post-PV, 23 ET patients and 78 controls were enrolled. The analysis performed in peripheral blood were: serum and mRNA expression of MMP2, MMP9, TIMP1, TIMP2 and SPARC, blood count, high-sensitivity C-reactive protein determination and VEGFA and bFGF measurements in plasma. We also evaluate mutations in JAK2, MPL and CALR. The assessment of microvascular density (MVD) in bone marrow was performed in 30 patients. Patients with MFP, MFPET and ET presented higher expression of MMP2, SPARC, TIMP1, TIMP2 and bFGF compared to their controls (P <0.05), while MMP9 expression was higher in patients with MFPET and ET (P=0.011 and P=0.047, respectively). Higher expression of HIF1-&#945; and VEGFA was found in ET patients compared to the controls (P <0.05). PMF JAK2V617F patients had higher concentrations of MMP9, TIMP2, bFGF and VEGFA compared to CALR mutated ones (P <0.05). ET patients JAK2V617F positive had higher levels of MMP2 and TIMP2 (P=0.049 and P=0.020, respectively). The JAK2V617F allele burden was not associated with MVD in the bone marrow. Bone marrow cells from mice in hypoxia condition showed higher MMP2 and TIMP1 expression compared to the control. VHL(-/-) mice exhibited increased expression of MMP2, MMP9, TIMP1, TIMP2 and VEGFA. In contrast, the HIF1-&#945;(-/-) embryos were not considered an applicable model for this study due to MMPs role in embryogenesis/organogenesis. In view of these findings, we can conclude that increased expression of MMP2, SPARC and bFGF are associated with MPN. The JAK2V617F mutation was associated with higher concentrations of MMPs, TIMP2 VEGFA and bFGF. HIF1-&#945; is upregulated in PV and ET and perhaps regulate the MMPs and TIMPs expression in these diseases.

Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2015-01-23T12:49:43Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao - Guilherme Xavier da Silva - 2014.pdf: 1348232 bytes, checksum: ef81fbadddc57191d926e83047838007 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-01-28T11:39:48Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertacao - Guilherme Xavier da Silva - 2014.pdf: 1348232 bytes, checksum: ef81fbadddc57191d926e83047838007 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-28T11:39:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao - Guilherme Xavier da Silva - 2014.pdf: 1348232 bytes, checksum: ef81fbadddc57191d926e83047838007 (MD5) Previous issue date: 2014-08-29 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Two experiments were conducted to evaluate the supplementation of digestible valine in the diet for the pre-starter and starter phases of rearing chickens. The variables evaluated were performance, metabolization of nutrients, development of digestive organs and lymphoid organs, and lymphocyte count of lymphoid organs of broilers from breeders of two ages. In Experiment I and II the supplemental digestible valine for broilers were evaluated in the pre -start and early stage at each stage using 400 day-old chicks old commercial Cobb, were obtained from arrays of 37 and 52 weeks of age, respectively, housed in experimental batteries until 21 days of age, fed different levels of digestible valine 0.92%, 1.02%, 1.12%, 1.22% and 0.83%, 0.93 %, 1.03% and 1.13% in the pre-starter and starter ration, respectively. The experimental design in both experiments was a completely randomized factorial 2 x 4 (ages matrices x levels of valine) totaling eight treatments with 5 replicates (10 birds per replicate). Data were subjected to analysis of variance and levels of digestible valine polynomial regression was applied. In the pre-starter phase, birds from arrays of 52 weeks showed greater weight of arrival compared the birds from arrays of 37 weeks. In the initial phase, effect of dietary valine for feed intake, which decreased the amount of feed consumed with inclusion of 1.03% digestible valine was observed. For the data of metabolism of nutrients, four to seven days of age of the bird, negative quadratic effect was seen when evaluating the levels of amino acid in the pre-starter diet as the nitrogen balance, coefficient of metabolism of nitrogen and retained nitrogen with point maximum of 1,156; 1.114 and 1.172% digestible valine in the diet, respectively. Breeder age significantly influenced the coefficient of nitrogen metabolism with higher values for chicks from arrays of 37 weeks. In the analysis of the morphology of the duodenum, jejunum and ileum, the effect of age in isolation matrix was observed for villus height and villus: crypt in the duodenum with higher values for birds from arrays of 52 weeks to seven days old. By analyzing the different levels of digestible valine positive linear effect was observed in villus height and villus: crypt ratio and negative linear effect on crypt depth in the duodenum to seven days old. The age of the matrix effect on weight of total gut of chickens after seven and 21 days old, with higher values for arrays chicks from 52 week-old. Likewise, the higher age of the matrix positively influenced in the production of lymphocytes in the thymus at seven days old and the bursa at 21 days of age. There was interaction between breeder age and levels of digestible valine analyzed for spleen at seven days of age. When using the recommendations of the Brazilian Tables, which is 1.02% digestible valine to the pre-starter phase, the spleen showed lower lymphocyte production for younger mothers. But was verified by regression analysis of data, which when increased levels of digestible valine inclusion in the pre -starter diet, there is a positive linear improvement in the production of lymphocytes. / Foram realizados dois experimentos para avaliar a suplementação de valina digestível na ração para as fases pré-inicial e inicial de criação de frangos. As variáveis avaliadas foram desempenho, metabolização de nutrientes, desenvolvimento de órgãos digestórios e órgãos linfoides, e contagem de linfócitos de órgãos linfóides de frangos de corte oriundos de matrizes de duas idades. No Experimento I e II foram avaliadas as suplementações de valina digestível para pintos de corte na fase pré-inicial e inicial utilizando em cada fase 400 pintos de um dia de idade da linhagem comercial Cobb, machos, provenientes de matrizes de 37 e 52 semanas de idade, respectivamente, alojados em baterias experimentais até 21 dias de idade, alimentados com diferentes níveis de valina digestível: 0,92%, 1,02%, 1,12%, 1,22% e 0,83%, 0,93%, 1,03% e 1,13% na ração pré-inicial e inicial, respectivamente. O delineamento experimental em ambos os experimentos foi o inteiramente casualizado em esquema fatorial 2 x 4 (idades das matrizes x níveis de valina) totalizando 8 tratamentos com 5 repetições (10 aves por repetição). Os dados foram submetidos à análise de variância e para os níveis de valina digestível foi aplicada a regressão polinomial. Na fase pré-inicial, aves provenientes de matrizes de 52 semanas apresentaram peso de chegada superior quando comparadas as aves provenientes de matrizes de 37 semanas. Na fase inicial, foi observado efeito da suplementação de valina para consumo de ração, que apresentou redução na quantidade de ração consumida com inclusão de 1,03% de valina digestível. Para os dados de metabolização dos nutrientes, de quatro a sete dias de idade da ave, foi verificado efeito quadrático negativo ao avaliar os níveis de aminoácido na ração pré-inicial quanto ao balanço do nitrogênio, coeficiente de metabolização do nitrogênio e nitrogênio retido com ponto de máxima de 1,156; 1,114 e 1,172 % de valina digestível na ração, respectivamente. A idade da matriz influenciou significativamente o coeficiente de metabolização do nitrogênio com maiores valores para pintos provenientes de matrizes de 37 semanas. Na análise da histomorfometria do duodeno, jejuno e íleo, foi observado efeito da idade da matriz de forma isolada, para altura de vilo e relação vilo: cripta no duodeno com maiores valores para aves provenientes de matrizes de 52 semanas aos sete dias de idade. Ao analisar os diferentes níveis de valina digestível foi observado efeito linear positivo na altura de vilo e relação vilo:cripta e efeito linear negativo para profundidade de cripta no duodeno aos sete dias de idade. A idade da matriz influenciou o peso do intestino total de pintos aos sete e aos 21 dias de idade, com maiores valores para pintos oriundos de matrizes de 52 semanas de idade. Da mesma forma, a maior idade da matriz influenciou positivamente na produção de linfócitos no timo aos sete dias de idade e na bursa aos 21 dias de idade. Houve interação entre a idade da matriz e os níveis de valina digestível analisado para o baço aos sete dias de idade. Quando se utiliza as recomendações das Tabelas Brasileiras, que é de 1,02% de valina digestível para a fase pré-inicial, o baço apresentou menor produção de linfócitos para matrizes mais novas. Porém foi verificado através da análise de regressão dos dados, que quando aumentados os níveis de inclusão de valina digestível na ração pré-inicial, há uma melhora linear positiva na p rodução de linfócitos.

Submitted by karolyne souza (karolm340@gmail.com) on 2018-04-23T15:24:58Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Mestrado Maria Luciney da Silva Nascimento.pdf: 2213207 bytes, checksum: 8bc088334633639ebb1fbb345d8c4f5d (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-04-26T12:27:40Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Mestrado Maria Luciney da Silva Nascimento.pdf: 2213207 bytes, checksum: 8bc088334633639ebb1fbb345d8c4f5d (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-04-26T12:30:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação Mestrado Maria Luciney da Silva Nascimento.pdf: 2213207 bytes, checksum: 8bc088334633639ebb1fbb345d8c4f5d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-26T12:30:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação Mestrado Maria Luciney da Silva Nascimento.pdf: 2213207 bytes, checksum: 8bc088334633639ebb1fbb345d8c4f5d (MD5) Previous issue date: 2017-12-20 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The research entitled "Application of multicriteria method in management decision making: a study on the maintenance of logistics equipment" is a study that proposes a matrix for decision making, considering all the criteria of importance, choosing among the alternatives, the most favorable to the current need. Its general objective is to propose a multicriteria analysis model, as an alternative to support in the management decision making, achieved by the following specific objectives: Define the qualitative and quantitative variables of the process; Express the importance of system variables; Propose the best alternative that meets the needs of the system; Demonstrate the tolerance / flexibility margins of the system and Validate the multicriteria analysis model. The theoretical support of the research was based on bibliographical research, documentary analysis and Focus group instrument, starting from the understanding and characterization of the problem, until reaching the modeling of the weighted matrix providing a numerical index of the criterion evaluation, validated through the action research, in a company of the Polo of Two Wheels, with the purpose of assisting in the process of revaluation of the system of maintenance of logistic equipment, whose purpose is to eliminate line stops due to the unavailability of logistic handling equipment. Regarding the results, it was identified that the expectation of the system could be met with 86% satisfaction of the criteria, as opposed to the one reached by the current operator with 44% attendance. In the first stage of the criterial evaluation, the most compromised proposal with the expected results was alternative C, with capacity to meet 66% of expectations. However, this service capacity is below the target of 86%. In the second stage, with the implementation of several actions to develop the supplier, the best alternative was presented by supplier A (the current operator) with 81%. The research demonstrated that the maximum reach is in the evaluation of the alternatives through Multicriteria Analysis, changing the course of the decision, previously taken with intuitive basis, where the decision maker realized that its limiting was the market, and, in developing the market , made it possible to double the capacity of the current operator / A pesquisa intitulada “Aplicação de método multicritério na tomada de decisões gerenciais: um estudo na manutenção de equipamentos logísticos” constitui-se em estudo que propõe uma matriz para tomada de decisão, considerando-se todos os critérios de importância, elegendo dentre as alternativas, a mais favorável à necessidade em curso. Seu objetivo geral é a propositura de um modelo de análise multicritério, como alternativa para suporte na tomada de decisões gerenciais, alcançado pelos seguintes objetivos específicos: Definir as variáveis quali-quantitativas do processo; Expressar a importância das variáveis do sistema; Propor a melhor alternativa que atenda às necessidades do sistema; Demonstrar as margens de tolerância/flexibilidade do sistema e Validar o modelo de análise multicritério. A sustentação teórica da pesquisa baseou-se na pesquisa bibliográfica, na análise documental e no instrumento Focus group, partindo-se do entendimento e caracterização do problema, até atingir a modelagem da matriz ponderada fornecedora de um índice numérico da avaliação criterial, validada através da pesquisa-ação, em empresa do Polo de Duas Rodas, com o objetivo de auxiliar no processo de reavaliação do sistema de manutenção de equipamentos logísticos, cuja finalidade é eliminar as paradas de linha por indisponibilidade de equipamento de movimentação logístico. No que tange aos resultados, identificou-se que a expectativa do sistema poderia ser atendida com 86% de satisfação dos critérios, contrapondo-se ao atingido pelo operador atual com atendimento de 44%. Na primeira etapa da avaliação criterial, a proposta mais comprometida com os resultados esperados era a alternativa C, com capacidade de atendimento de 66% das expectativas. Porém, essa capacidade de atendimento está abaixo da meta que é de 86%. Na segunda Etapa, com a implantação de diversas ações para desenvolver o fornecedor, a melhor alternativa foi apresentada pelo fornecedor A (o atual operador) com 81%. A pesquisa demonstrou como conclusão que o alcance máximo está na avaliação das alternativas através de Análise Multicritério, mudando-se o curso da decisão, antes tomada com base intuitiva, onde o decisor percebeu que seu limitante era o mercado, e, ao desenvolver o mercado, possibilitou dobrar a capacidade do operador atual.