O ensaio de frequência de micronúcleos é uma técnica importante utilizada para avaliar danos genotóxicos de agentes químicos ou físicos (como radiação ionizante) em células, baseado na quantificação de células contendo micronúcleos, que são fragmentos derivados de DNA danificado com coloração semelhante ao dos núcleos principais, mas com 5 a 30% do seu tamanho. Tradicionalmente, este ensaio é realizado usando microscopia de coloração convencional de acordo com Giemsa, mas atualmente esta técnica está sendo atualizada para uma abordagem automatizada que se baseia na dissolução da membrana plasmática por detergentes levando em conta apenas núcleos e micronúcleos com seu DNA corados por corantes fluorescentes, que pode discriminar núcleos de células viáveis dos das células inviáveis e permite a contagem por citometria de fluxo. Este trabalho avaliou a extensão de dano genotóxico radioinduzido por radiação gama (60Co) em doses entre 0,5 e 16Gy, e o potencial genotóxico de três peptídeos utilizados em medicina nuclear (PSMA-617, PSMA-11 e Ubiquicidina 29-41). As membranas celulares foram lisadas na presença dos corantes SYTOX® Green e EMA, e núcleos marcados com os dois fluorocromos foram considerados provenientes de células inviáveis e, portanto, removidos da análise. As quantidades de micronúcleos (porcentagem de eventos) nas amostras, foram proporcionais às doses de radiação, e puderam ser ajustadas a um modelo linear-quadrático (R2 = 0,993). Somente doses mais altas (8 e 16 Gy) e controles positivos induziram aumentos relevantes nas quantidades de micronúcleos. Os radiofármacos foram testados com concentrações de 0,1x, x, 10x e 100x a concentração utilizada em adultos, e não induziram dano em concentrações praticáveis. / The micronucleus frequency assay is an important technique used to evaluate genotoxic damage of chemical or physical agents (such as ionizing radiation) in cells, based on the quantification of micronucleus-containing cells, which are fragments derived from damaged DNA with similar coloration to of the main nuclei, but with 5 to 30% of its size. Traditionally, this assay is performed using conventional staining microscopy according to Giemsa, but currently this technique is being updated to an automated approach that relies on the dissolution of the plasma membrane by detergents taking into account only nuclei and micronuclei with their DNA stained by dyes fluorescence, which can discriminate nuclei from unviable or living cells and allows counting by flow cytometry. The genotoxic potential of three peptides used in nuclear medicine (PSMA-617, PSMA-11 and Ubiquicidine 29-41) was evaluated by gamma radiation (60Co) at doses in the range among 0.5 and 16Gy. Cell membranes were lysed in the presence of the SYTOX® Green and EMA dyes, and cores labeled with the two fluorochromes were considered to be from non-viable cells and therefore removed from the analysis. The amount of micronucleus (percentage of events) in the samples was proportional to the radiation doses, and could be adjusted to a linear-quadratic model (R2 = 0.993). Only higher doses (8 and 16 Gy) and positive control induced significant increases in micronucleus amounts. Radiopharmaceuticals were tested at concentrations of 0.1x, 1x, 10x, and 100x the concentration used in adults, and did not induce damage at feasible concentrations.

Os girinos de rã-touro, Lithobates catesbeianus, podem ser bons bioindicadores de condições ambientais. O objetivo desse trabalho foi determinar o potencial de toxicidade para L. catesbeianus de alguns dos principais agrotóxicos utilizados no cultivo de arroz irrigado. Foram realizados testes de toxicidade aguda para a determinação da CL50-96h do bentazon, penoxsulam, óleo vegetal, permetrina e carbofuran, separadamente, e da mistura desses agrotóxicos. Com esses resultados foram estimados os índices de segurança dos produtos. Girinos em fase pré-metamorfose foram expostos aos agrotóxicos na própria lavoura de arroz e em laboratório por 21 dias, para avaliar os possíveis efeitos crônicos destas substâncias, separadamente e da mistura, sobre o quadro hematológico, metamorfose (regulada pelo eixo tiroideano), e também o possível potencial mutagênico através do teste do micronúcleo. A CL50-96h para girinos foi de 4530 mg/L para o bentazon; 7,52 mg/L para o penoxsulam + 145,66 mg/L do óleo vegetal; 81,57 mg/L para o óleo vegetal, 0,10 mg/L para a permetrina, 29,90 mg/L para o carbofuran (ingredientes ativos) e, 38,79 vezes a dose utilizada no campo para a mistura desses produtos. Foi determinado risco ambiental apenas para o inseticida permetrina. Nos testes in situ, as águas de irrigação não apresentaram toxicidade aguda para os girinos. A taxa de metamorfose não diferiu entre os tratamentos, demonstrando que os agrotóxicos utilizados nas doses indicadas não tem ação desreguladora do eixo tiroideano. As análises do micronúcleo mostraram aumento significativo de eritrócitos micronúcleoados para os testes in situ e, no laboratório, para o herbicida bentazon e para a mistura dos agrotóxicos. As análises hematológias mostraram diminuição da hemoglobina e número de eritrócitos no teste de campo, retornado aos padrões normais na semana seguinte. No laboratório houve queda na contagem de eritrócitos para o bentazon, aumento do VCM e HCM para o bentazon e penoxsulam; aumento do CHCM para o penoxsulam e para a mistura dos agrotóxicos. Para a série branca não houve diferenças no teste in situ, mas obtivemos aumento dos números de neutrófilos dos girinos tratados com o bentazon. / American bullfrogs, Lithobates catesbeianus could be good environmental indicators. The aim of this study was evaluate the potential toxicity of some principal pesticides used in irrigated rice crops to L. catesbeianus tadpoles. The pesticides Bentazon, Penoxsulam, Vegetable oil, Permetrina, Carbofuran and the mixture of them were assessed. Pre-metamorphose tadpoles were exposed to all of these agrochemicals in the laboratory to determinate de LC50-96h and so estimate the index of security by each product. Animals in the same phase were exposed to these pesticides on the rice crops, in situ and in laboratory per 21 days to evaluate the possible chronic effects of the substances, separated and in the mixture of them. The hematological results, red and white series, the mutagenic potential (micronucleous test), and the metamorphose rate (regulated by thyroid axis) were evaluated. The LC50-96h to tadpoles was 4530 mg/L to Bentazon; 7.52 + 145.66 mg/L to Penoxsulam + vegetable oil; 81.57 mg/L to vegetable oil; 0.10 mg/L to Permetrina; 29.90 mg/L to Carbofuran (active ingredients) and 38.79 times to the dose used in the field to the mixture of the products. Only to Permetrina insecticide was observed environmental risk. The metamorphose rate showed no difference between the treatments suggesting that these pesticides, used on indicated doses did not promote deregulated action on the thyroid axis. In situ tests the irrigated waters showed low mortality to the animals. The red series showed in situ, a decrease in the haemoglobin tax and in the counting of erytrocyte\'s number however return to the normal values in the follow week. In laboratory tests showed a decrease in the counting of erytrocyte\'s number to the animals exposed to Bentazon, an increase in the MCV and MCH to the animals exposed to Bentazon and Penoxsulam, an increase in the MCHC to those exposed to Penoxsulam and to the \"mixture\". The white series showed no difference in situ test however an increase in the neutrophils number was observed to the animals exposed to Bentazon in laboratory. The micronucleous analyze showed significant increase in the erytrocyte\'s micronucleated number in situ and in laboratorial tests to animals exposed to Bentazon and to the \"mixture\".

Orientador: Edson Luis Maistro / Resumo: Cerca de 11% dos medicamentos considerados essenciais pela OMS são derivados de plantas medicinais, daí a importância do desenvolvimento de testes científicos sobre essas plantas, avaliando, além do seu real potencial farmacológico, a genotoxicidade, mutagenicidade, antigenotoxicidade, citotoxicidade, dentre outros, para esclarecer se o uso de tais plantas por seres humanos é seguro. Crataegus oxyacantha é uma planta originalmente encontrada na Europa e, devido à suas potencialidades medicinais, já há muito tempo foi introduzida no continente sulamericano. Pertencente à família Rosaceae, a árvore forma, na primavera, cachos grandes de flores brancas ou rosas de fragrância agradável, que no outono se transformam em pequenos frutos vermelhos. A importância da C. oxyacantha se dá pela presença comprovada de flavonóides, que são conhecidos por sua ação antioxidante. Devido a inexistência na literatura de estudos investigando a toxicidade genética de C. oxyacantha para os seres humanos, o presente estudo foi elaborado visando avaliar se o extrato de frutos desta planta apresenta efeitos citotóxico, genotóxico e clastogênico/aneugênico em leucócitos humanos e células HepG2 em cultura, e mutagênico em cepas de Salmonella typhimurium (teste de Ames). Os resultados da análise de genotoxicidade mostraram que o extrato não apresentou efeitos genotóxicos nas concentrações de 2,5 e 5,0 µg/ml em ambos os tipos celulares analisados, no entanto, em concentrações acima de 10 µg/ml verificou-s... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: About 11% of medicines considered essential by WHO are derived from medicinal plants, being important to develop scientific tests on these plants, evaluating several aspects as its pharmacological potential, genotoxicity, mutagenicity, antigenotoxicity, cytotoxicity, among others, to clarify if the use of such plants is safe for humans. Crataegus oxyacantha is a plant originally found in Europe and due to its medicinal potential, was at long time introduced in the South American continent. Belonging to the Rosaceae family, the tree form in the spring, large bunches of white flowers and pleasant fragrance of roses, which in autumn turn into small red fruits. The importance of C. oxyacantha is attributed to the presence of flavonoids as constituents, which are known for their antioxidant activity. Considering the absence in the literature of studies investigating the genetic toxicity of C. oxyacantha to humans, this study was designed to evaluate if the fruits extract of this plant present a cytotoxic, genotoxic and clastogenic/aneugenic effects in cultured human HepG2 and leukocytes cells, and mutagenicity in Salmonella typhimurium strains (Ames test). The results of genotoxicity analysis evidenced that the extract showed no genotoxic effects at 2.5 and 5.0 ug/ml concentrations, in both cell types tested, however, at concentrations above of 10 ug/ml significant DNA damage was observed. The micronucleus test results showed that the concentrations above of 10 ug/ml also produced... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-04-13T13:41:14Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Wanessa Botelho Cabral.pdf: 1347764 bytes, checksum: e922b207be73f5f6dd67b374c36e0e16 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-13T13:41:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Wanessa Botelho Cabral.pdf: 1347764 bytes, checksum: e922b207be73f5f6dd67b374c36e0e16 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014-01-22 / CAPES; CNPq / Os agrotóxicos são largamente utilizados no mundo para proteger as plantações contra pragas e doenças, e na saúde pública no controle de vetores que causam doenças ao homem. Contudo, a exposição a esses produtos pode representar graves riscos à saúde humana e ao meio ambiente. Relatos da literatura sobre ação genotóxica das formulações comerciais isoladas de agrotóxicos é bastante escaça, uma vez que a maioria das pesquisas se preocupa em estudar o efeito das misturas desses compostos. Desta forma, o presente trabalho realizou um biomonitoramento in vivo, utilizando camundongos Mus musculus, para avaliar a ação genotóxica aguda, através da ingestão isolada dos agrotóxicos Ciromazina (Trigard 700 WP) e Maconzeb (Dithame NT) em baixas doses. Foram realizados os testes do micronúcleo e do ensaio cometa, para avaliar respectivamente a mutagenicidade e a genotoxicidade desses pesticidas. Sendo utilizados 80 camundongos, divididos em oito grupos contendo 10 animais (cinco machos e cinco fêmeas). As administrações foram feitas por gavagem e cada animal recebeu 1 mL da solução, de acordo com o grupo a que pertencia: o grupo controle negativo recebeu apenas o veículo de diluição (água destilada); para a Ciromazina foram usados três grupos experimentais: C1 com a concentração de 2,5.10−4 mg/Kg, o C2 com a concentração de 5.10−4 mg/Kg, e C3 com a concentração de 5.10-3 mg/Kg; para o Mancozeb foram usados também três grupos experimentais: C1 com a concentração de 3,76.10−4 mg/Kg, C2 com a concentração de 7,52.10−4 mg/Kg, e C3 com a concentração de 7,52.10-3 mg/Kg; para o grupo controle positivo foi administrado via injeção intraperitonial 20 mg/kg p.c. de ciclofosfamida. Na análise estatística, foram realizados dois testes: uma ANOVA multifatorial (Análise de variância), para comparar a ação genotóxica entre os grupos experimentais; e o teste de Mann-Whitney para verificar a influência do sexo no aparecimento do dano genético dentro de um mesmo grupo tratado. O agrotóxico Ciromazina demonstrou ser mutagênico e altamente genotóxico na concentração do grupo C2, além de apresentar uma diferença significativa entre os sexos no grupo C1. Já o pesticida Mancozeb mostrou ser genotóxico na concentração do grupo C2, e foi constatado também que houve diferença significativa entre os sexos dos individuos do grupo C3. Através desta pesquisar evidenciamos que mesmo em baixas concentrações estes pesticidas oferecem grandes riscos à saúde humana e ao meio ambiente.

Submitted by Irene Nascimento (irene.kessia@ufpe.br) on 2016-07-11T18:08:29Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação- JOELMA PESSOA GONÇALVES.pdf: 1383537 bytes, checksum: 125450bea68880058f29778e9d89ead0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-11T18:08:29Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação- JOELMA PESSOA GONÇALVES.pdf: 1383537 bytes, checksum: 125450bea68880058f29778e9d89ead0 (MD5) Previous issue date: 2015-02-25 / Capes / Os metabólitos secundários dos liquens são responsáveis pela maioria das suas atividades biológicas. Muitos destes compostos apresentam relevante atividade antineoplásica. O objetivo deste trabalho foi verificar as atividades citotóxica e genotóxica in vitro dos extratos orgânicos e do ácido barbático (BAR) purificado de Cladonia salzmannii Nyl. Os extratos orgânicos foram obtidos a partir do talo liquênico (22 g) previamente limpo e seco, com os solventes éter dietílico, clorofórmio e acetona, através do método de esgotamento a quente em aparelho de Soxhlet. O ácido barbático foi purificado a partir do extrato etéreo (1,3 g). A análise química dos extratos orgânicos e do BAR purificado foi realizada através de Cromatografia em Camada Delgada (CCD). A pureza do BAR purificado foi observada através de Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). A atividade citotóxica dos extratos orgânicos e do BAR purificado foi determinada através do Método do MTT [brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio] e do IPBC (Índice de Proliferação com Bloqueio da Citocinese). O potencial genotóxico dos extratos orgânicos e do BAR purificado foram determinados através do teste do micronúcleo e do ensaio cometa. O dimetilsulfoxido (DMSO) foi utilizado como solvente de diluição das amostras em todos os testes de atividade biológica. Os resultados referentes a CI50 demonstraram relevante potencial citotóxico para o extrato etéreo (Ext E) (50 μg/mL) frente as linhagens celulares NCI-H292 (CI50: 29,91 μg/mL), HEp-2 (CI50: 26,75 μg/mL) e HL-60 (CI50: 3,59 μg/mL), e para o BAR purificado (25 μg/mL) contra as linhagens HEp-2 (CI50: 15,79 μg/mL) e MCF-7 (CI50: 18,28 μg/mL). Porém, a avaliação da citotoxicidade considerando o Índice de Proliferação com Bloqueio de Citocinese (IPBC) demonstrou atividade citotóxica para o BAR purificado em todas as concentrações testadas (5, 10, 20 e 40 μg/mL) e para todos os extratos orgânicos (50 μg/mL) frente as células do Carcinoma de Ehrlich. Entretanto, para o Sarcoma 180 apenas o BAR purificado na concentração de 40 μg/mL e os extratos etéreo e clorofórmico (50 μg/mL) foram considerados citotóxicos. O teste do micronúcleo (MN) demonstrou que o BAR purificado na concentração de 5 μg/mL não apresentou potencial genotóxico em ambas as linhagens celulares tumorais. Além disso, o extrato clorofórmico e BAR purificado na concentração de 10 μg/mL não foram considerados genotóxicos para o Sarcoma 180. No ensaio cometa, todos os compostos testados induziram danos ao DNA em ambas as linhagens tumorais. Com base nos resultados, considera-se que os extratos orgânicos e o BAR purificado de C. salzmannii (Nyl). apresentam atividade citotóxica e genotóxica frente as linhagens celulares tumorais testadas. / The secondary metabolites of lichens are responsible for most of their biological activities. Many of these compounds exhibit significant antineoplastic activity. The objective of this study was to evaluate the in vitro cytotoxic and genotoxic activities of organic extracts and purified barbatic acid from Cladonia salzmannii Nyl. The organic extracts were obtained from liquenic thallus (22 g) previously cleaned and dried with the solvents diethyl ether, chloroform and acetone, through hot exhausted method in a Soxhlet apparatus. The barbatic acid was purified from the ether extract (1.3 g). Chemical analysis of the organic extracts and purified BAR was performed by Thin Layer Chromatography (TLC). The purity of purified BAR was observed by High Performance Liquid Chromatography (HPLC). The cytotoxic activity of the organic extracts and purified BAR was determined by the MTT method [3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolium Bromide] and IPBC (Cytokinesis-Block Proliferation Index). The genotoxic potential of the organic extracts and purified BAR was determined by the micronucleus test and comet assay. Dimethyl sulfoxide (DMSO) was used as diluting solvent of the samples in all biological tests. The results for IC50 demonstrated significant cytotoxic potential to the ether extract (Ext E) (50 μg/mL) against the cell lines NCI-H292 (IC50: 29,91 μg/mL), HEp-2 (IC50: 26,75 μg/mL) and HL-60 (IC50: 3,59 μg/mL) and to the purified BAR (25 μg/mL) against the cell lines HEp-2 (IC50: 15,79 μg/mL) and MCF-7 (IC50: 18,28 μg/mL). However, the assessment of cytotoxicity considering the Cytokinesis-Block Proliferation Index (IPBC) showed cytotoxic activity for purified BAR at all concentrations tested (5, 10, 20 and 40 μg/mL) and for all organic extracts (50 μg/mL) against Ehrlich carcinoma cells. However, for Sarcoma 180 only BAR purified at a concentration of 40 μg/mL and ether and chloroform extracts (50 μg/mL) were considered cytotoxic. The micronucleus test (MN) showed that the purified BAR at a concentration of 5 μg/mL showed no genotoxic potential in both tumor cell lines. Furthermore, the chloroform extract and purified BAR at a concentration of 10 μg/mL were not considered genotoxic for Sarcoma 180. In the comet assay, all compounds tested induced DNA damage in both tumor lines. Based on the results, it is considered that the organic extracts and the BAR purified from C. salzmannii (Nyl). exhibit cytotoxic and genotoxic activity front of the tested tumor cell lines.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-08-08T19:43:20Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Carolina Barbosa Cabral.pdf: 930966 bytes, checksum: 096287bf2e7cc7676b00e9b36cb6b73f (MD5) / Rejected by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br), reason: on 2018-08-13T21:22:26Z (GMT) / Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-08-13T21:33:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Carolina Barbosa Cabral.pdf: 930966 bytes, checksum: 096287bf2e7cc7676b00e9b36cb6b73f (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-17T19:18:48Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Carolina Barbosa Cabral.pdf: 930966 bytes, checksum: 096287bf2e7cc7676b00e9b36cb6b73f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-17T19:18:48Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Carolina Barbosa Cabral.pdf: 930966 bytes, checksum: 096287bf2e7cc7676b00e9b36cb6b73f (MD5) Previous issue date: 2017-04-24 / CNPq / Os hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HPAs) são compostos orgânicos prioritários em estudos ambientais devido a sua toxicidade para os sistemas biológicos. Estes são conhecidos precursores de efeitos carcinogênicos e mutagênicos para animais e humanos. O estuário do Rio Potengi/Jundiaí é o mais importante do Rio Grande do Norte e, além de sevir como berçário para diversos organismos, este abriga o Porto de Natal, terminal pesqueiro, indústrias, etc., cujas atividades podem estar ameaçando a saúde deste ecossistema. Visando investigar danos genômicos em caranguejo e associar a contaminação do sedimento por HPAs no estuário do Rio Potengi - Natal (RN), foram coletados caranguejos-uçá (Ucides cordatus) e sedimentos da sua loca em 4 diferentes estações ao longo do estuário. A contaminação dos sedimentos por HPA foi avaliada em paralelo aos efeitos genotóxicos nestes caranguejos. As concentrações de HPAs foram determinadas através do método de cromatografia gasosa acoplado a um espectrômetro de massas, e as alterações genéticas foram avaliadas pelo teste de micronúcleo (macrolesões) e ensaio cometa (microlesões). As concentrações dos HPAs totais variaram de 3,25 ng g⁻¹ a 1065 ng g⁻¹, sendo uma estação classificada como pouco contaminada, e as demais como moderadamente contaminadas. Alguns compostos apresentaram concentrações acima do nível limiar de efeito adotado pela Agência Ambiental do Canadá, sugerindo que ocasionalmente podem causar efeitos tóxicos aos organismos locais. A frequência de micronúcleos nos Caranguejos-Uçá foi significativamente maior que no controle (U. cordatus coletados na Estação Ecológica da Juréia), e correlacionaram positivamente com os HPAs, sugerindo que estes sejam potenciais agentes causadores desta genotoxicidade. Os resultados do ensaio cometa não apresentaram correlação com os HPAs e nem com a frequência de micronúcleos, sugerindo que outras variáveis ambientais e/ou compostos lançados no ambiente sejam os principais responsáveis pelas microlesões observadas. Este estudo mostra que a poluição crônica por HPAs no estuário do Rio Potengi/Jundiaí está contribuindo com danos genômicos nos U. cordatus, podendo ameaçar a conservação destes organismos, que já estão na lista de espécies sobreexplotadas ou ameçadas de sobreexplotação. A abordagem utilizada neste trabalho foi eficaz na avaliação da saúde do caranguejo-Uçá, porém estudos complementares utilizando outras classes de contaminantes e outros tipos de medidas biológicas são necessárias. / Polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) are priority organic compounds in environmental studies due to their toxic potential to biological systems. They are known carcinogenic and mutagenic precursors to animals and humans. The Potengi/Jundiaí is the most important estuary in Rio Grande do Norte and, besides serving as a nursery for various organisms, it houses the Port of Natal, fishing terminals, industries, etc., that may be threatening the health of this ecosystem. This study aimed to investigate genomic damages on crabs and test the correlation with PAH contamination in sediments from Potengi estuary, in Natal (RN). Uçá-crabs (Ucides cordatus) and sediments from their burrow were collected in 4 different stations along of estuary. PAHs concentrations were determined by gas chromatograph coupled to a mass spectrometer, and the genetic alterations were evaluated by micronucleus test (macrolesions) and comet assay (microlesions). Total PAHs ranged from 3.25 ng g⁻¹ to 1065 ng g⁻¹. One station was classified as low contaminated, and the others as moderately contaminated. Some compounds showed concentrations above threshold effects level, proposed by Environment Agency of Canada, suggesting that occasionally they may cause toxic effects to local organisms. Micronuclei frequency in Uçá crabs was significantly higher than the control site (U. cordatus collected at Juréia – Itatins Ecological Station), and a positive correlation with PAHs was observed, pointing out these compounds as important stressors to the genotoxic effects observed. There was no correlation between comet assay and PAH or micronuclei frequency, indicating that some other environmental variables and/or compounds are the major responsible for the observed microlesions. This study showed that PAHs chronically introduced in the Potengi/Jundiaí estuary may threaten the conservation of U. cordatus, which is already listed as an overexploited species or under threat of overexploitation. The methodology used was efficient in the evaluation of these crabs' health, but complementary studies investigating other classes of contaminants and others biological measures are necessary.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-03-06T13:57:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Marcilio J. F. Monteiro.pdf: 1346787 bytes, checksum: 18f0db8d001f3314007c72b618603662 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-03-06T13:57:12Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Marcilio J. F. Monteiro.pdf: 1346787 bytes, checksum: 18f0db8d001f3314007c72b618603662 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-06T13:57:12Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Marcilio J. F. Monteiro.pdf: 1346787 bytes, checksum: 18f0db8d001f3314007c72b618603662 (MD5) Previous issue date: 2017-02-20 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / At-home bleaching modality has been widely used in the last decades because it is considered safer for the dental element and has proven clinical efficacy. The aim of this study was to evaluate the genotoxic potential of 10% hydrogen peroxide (PH) in patients submitted at-home bleaching using a tray and two types of bleaching strips. The volunteers included in the study were randomly divided into: TOB Group - Oral B whitening strips; TUD Group - Ultradent whitening strips; And MPH Group - trays. The sample size was 20 participants per group for a study with 80% power and 5% alpha. The evaluation was done through the Micronucleus test, in three periods: before the bleaching procedure (D0), immediately after the end of treatment (D14) and 30 days after the end of treatment (D30), from the count of 1000 Cells. Data were submitted to the Shapiro-Wilk normality test and the Kruskal-Wallis-Dunn test that showed that there was no significant difference between the groups and between the periods analyzed (p = 0.0109). It was concluded that there was no genotoxicity of hydrogen peroxide (PH) to 10% in patients submitted to home bleaching in the different forms of application tested and in the periods evaluated. / A modalidade de clareamento caseiro vem sendo bastante empregada nas últimas décadas por ser considerada mais segura para o elemento dental e apresentar comprovada eficácia clínica. O objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial genotóxico do peróxido hidrogênio (PH) a 10% em pacientes submetidos ao clareamento caseiro, utilizando moldeira e dois tipos de tiras clareadoras. Os voluntários incluídos na pesquisa foram aleatoriamente divididos em: Grupo TOB - tiras clareadoras da Oral B; Grupo TUD - tiras clareadoras da Ultradent; e Grupo MPH – moldeiras. O tamanho amostral foi de 20 participantes por grupo para um estudo com poder de 80% e alfa de 5%. A avaliação foi feita através do teste de Micronúcleos, em três tempos: antes do procedimento de clareamento (D0), imediatamente após o fim do tratamento (D14) e 30 dias após o final do tratamento (D30), a partir da contagem de 1000 células. Os dados foram submetidos ao teste de normalidade Shapiro-Wilk e ao teste de Kruskal-Wallis-Dunn que expôs que não houve diferença significante entre os grupos e entre os tempos analisados (p= 0.0109). Concluiu-se que não houve genotoxicidade do peróxido hidrogênio (PH) a 10% em pacientes submetidos ao clareamento caseiro nas diferentes formas de aplicação testadas e nem nos tempos avaliados.

Os girinos de rã-touro, Lithobates catesbeianus, podem ser bons bioindicadores de condições ambientais. O objetivo desse trabalho foi determinar o potencial de toxicidade para L. catesbeianus de alguns dos principais agrotóxicos utilizados no cultivo de arroz irrigado. Foram realizados testes de toxicidade aguda para a determinação da CL50-96h do bentazon, penoxsulam, óleo vegetal, permetrina e carbofuran, separadamente, e da mistura desses agrotóxicos. Com esses resultados foram estimados os índices de segurança dos produtos. Girinos em fase pré-metamorfose foram expostos aos agrotóxicos na própria lavoura de arroz e em laboratório por 21 dias, para avaliar os possíveis efeitos crônicos destas substâncias, separadamente e da mistura, sobre o quadro hematológico, metamorfose (regulada pelo eixo tiroideano), e também o possível potencial mutagênico através do teste do micronúcleo. A CL50-96h para girinos foi de 4530 mg/L para o bentazon; 7,52 mg/L para o penoxsulam + 145,66 mg/L do óleo vegetal; 81,57 mg/L para o óleo vegetal, 0,10 mg/L para a permetrina, 29,90 mg/L para o carbofuran (ingredientes ativos) e, 38,79 vezes a dose utilizada no campo para a mistura desses produtos. Foi determinado risco ambiental apenas para o inseticida permetrina. Nos testes in situ, as águas de irrigação não apresentaram toxicidade aguda para os girinos. A taxa de metamorfose não diferiu entre os tratamentos, demonstrando que os agrotóxicos utilizados nas doses indicadas não tem ação desreguladora do eixo tiroideano. As análises do micronúcleo mostraram aumento significativo de eritrócitos micronúcleoados para os testes in situ e, no laboratório, para o herbicida bentazon e para a mistura dos agrotóxicos. As análises hematológias mostraram diminuição da hemoglobina e número de eritrócitos no teste de campo, retornado aos padrões normais na semana seguinte. No laboratório houve queda na contagem de eritrócitos para o bentazon, aumento do VCM e HCM para o bentazon e penoxsulam; aumento do CHCM para o penoxsulam e para a mistura dos agrotóxicos. Para a série branca não houve diferenças no teste in situ, mas obtivemos aumento dos números de neutrófilos dos girinos tratados com o bentazon. / American bullfrogs, Lithobates catesbeianus could be good environmental indicators. The aim of this study was evaluate the potential toxicity of some principal pesticides used in irrigated rice crops to L. catesbeianus tadpoles. The pesticides Bentazon, Penoxsulam, Vegetable oil, Permetrina, Carbofuran and the mixture of them were assessed. Pre-metamorphose tadpoles were exposed to all of these agrochemicals in the laboratory to determinate de LC50-96h and so estimate the index of security by each product. Animals in the same phase were exposed to these pesticides on the rice crops, in situ and in laboratory per 21 days to evaluate the possible chronic effects of the substances, separated and in the mixture of them. The hematological results, red and white series, the mutagenic potential (micronucleous test), and the metamorphose rate (regulated by thyroid axis) were evaluated. The LC50-96h to tadpoles was 4530 mg/L to Bentazon; 7.52 + 145.66 mg/L to Penoxsulam + vegetable oil; 81.57 mg/L to vegetable oil; 0.10 mg/L to Permetrina; 29.90 mg/L to Carbofuran (active ingredients) and 38.79 times to the dose used in the field to the mixture of the products. Only to Permetrina insecticide was observed environmental risk. The metamorphose rate showed no difference between the treatments suggesting that these pesticides, used on indicated doses did not promote deregulated action on the thyroid axis. In situ tests the irrigated waters showed low mortality to the animals. The red series showed in situ, a decrease in the haemoglobin tax and in the counting of erytrocyte\'s number however return to the normal values in the follow week. In laboratory tests showed a decrease in the counting of erytrocyte\'s number to the animals exposed to Bentazon, an increase in the MCV and MCH to the animals exposed to Bentazon and Penoxsulam, an increase in the MCHC to those exposed to Penoxsulam and to the \"mixture\". The white series showed no difference in situ test however an increase in the neutrophils number was observed to the animals exposed to Bentazon in laboratory. The micronucleous analyze showed significant increase in the erytrocyte\'s micronucleated number in situ and in laboratorial tests to animals exposed to Bentazon and to the \"mixture\".

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:13:59Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo2675_1.pdf: 5125867 bytes, checksum: 3af3a0a0031b7c44221c8e7af794b638 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / As radiações ionizantes podem induzir mutações gênicas, aberrações cromossômicas e morte celular. Recentemente, começou a haver grande empenho no desenvolvimento de técnicas que auxiliem na compreensão desses possíveis danos biológicos surgidos após exposições dos organismos a certas doses de radiação ionizante. Dentre estas técnicas, o teste do micronúcleo tem se mostrado um ótimo biomarcador de efeitos de genotoxicidade do dano ao DNA. Esta técnica também pode ser utilizada para detecção de genotoxicidade ambiental, na biomonitoração. O molusco Biomphalaria glabrata, devido às suas características biológicas e ambientais, tem se apresentado como um ótimo modelo experimental, possibilitando a avaliação de efeitos produzidos por agentes físicos e químicos. Diante disso, o presente trabalho visou detectar os efeitos genotóxicos da radiação gama de 60Co em hemócitos de Biomphalaria glabrata, por meio do teste do micronúcleo, bem como estabelecer este ensaio como um novo biomarcador ambiental. Os moluscos foram divididos em grupos e submetidos a dose de 0 (controle), 25, 35, 45 e 55 Gy de radiação gama. Após 48 horas da irradiação, a hemolinfa dos moluscos foi coletada e analisada em microscópios óptico e de fluorescência. As lâminas foram coradas com Giemsa e hoechst 33258, posteriormente foram analisadas quanto ao número de hemócitos, alterações nucleares e frequência de micronúcleos. A análise estatística foi realizada por meio do Teste do c2, ANOVA e teste de Tukey, com p<0,05. Os resultados obtidos demonstram que moluscos adultos de B. glabrata se mostraram sensíveis aos efeitos da radiação gama de 60Co. Na dose 35 Gy apresentaram um número menor de hemócitos, enquanto que os expostos a 55 Gy uma maior quantidade de hemócitos. Os hemócitos dos moluscos irradiados apresentaram alterações morfológicas e aterações celulares nas doses de 35, 45 e 55 Gy, sendo a dose de 55 Gy a mais radiotóxica. A freqüência de micronúcleos não foi dose-dependente, porém apresentou diferença significativa entre o grupo controle e os grupos irradiados. Pode-se concluir que a análise morfológica e a frequência de micronúcleo de hemócitos de Biomphalaria glabrata são parâmetro

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:16:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Jose de Souza Filho.pdf: 2614709 bytes, checksum: 05f4c3c1c352f60a58f2b188da4c4e90 (MD5) Previous issue date: 2011-01-31 / The effects of toxic, mutagenic and genotoxic on target organs and the fish genome has been the subject of many studies, especially those that seek to establish these bodies and responses of genes to environmental stimuli. Histopathological studies, mutagenic, genotoxic and Poecilia reticulata (Guppy) were motivated by the scarcity of data in the literature concerning the effects of the formulation of the herbicide Roundup Transorb®. With everything, we sought to ascertain the effects produced by this formulation that is widely used in the Midwest of the country. This study aimed to evaluate the toxicity and mutagenic and genotoxic herbicide R. Transorb® in liver, gill and erythrocytes of the guppy, calculating and applying the LC50 test micronucleus (MN) and Comet assay (AC). The toxicity bioassays were performed to calculate the LC50;12-96h, to evaluate the effects of sublethal concentrations of herbicide subjected to acute treatment. We used 36 adult fish, weighing on average 0.496 g ± 0.28 g to calculate the LC50 and 75 adult fish also carry the MN and AC. During exposure to the herbicide was observed fish behavior at all concentrations and controlled chemical and physical changes of water. The erythrocytes were obtained by centrifugation of the gills being added to precipitate fetal calf serum, and then dripped on the slides to make the smear and electrophoresis. For the analysis of plates, 75.000 cells were counted and stipulate the frequency of occurrence of Nuclear Morphological Changes (AMNs) and AC were analyzed for 100 cells per specimen. The LC50; 12, 24, 48, 72 e 96h of R. Transorb® were 11:24, 8:55, 6.5, 6.10 and 5.65&#956;l/L, respectively, indicating that this species is very sensitive to the herbicide studied in relation to other tropical species analyzed. These factors may be related to different formulations of herbicides and their respective surfactants. It was found that the mortality rate of fish poisoned by the herbicide increased as exposure concentrations increased. The values of LC50,12-96h show a downward trend over time, suggesting that during periods of reduced exposure will require greater amounts of herbicide to cause mortality of 50% of the population of animals. Animals exposed to the herbicide showed behavioral changes varied, such as aggressiveness, irritability, loss of the escape reflex, darkening of the body surface and banging against the wall of the aquarium. In addition, R. Transorb® hitológicas induced liver changes appreciably impairing the normal functioning of this organ. In MN and EC was possible to detect significant genotoxic and mutagenic effects in erythrocytes and gill cells, occurring gradual increase in the number of cells with AMNs and ADN damage under higher concentrations,indicating concentration-dependent effect. This herbicide has acute toxicity to guppy, promoting behavioral changes, possibly acting in a manner damaging to the liver but also in the nervous system and gill. These results also suggest that the formulation of this herbicide has genotoxic and mutagenic in erythrocytes and gill cells detected by the MN and AC. Therefore, it confirms the high risk of herbicide to the environment, its contamination may present a strong threat to populations of fish and other organisms both vertebrates and invertebrates and human health. / Os efeitos de substâncias tóxicas, mutagênicas e genotóxica sobre órgãos-alvos e o genoma de peixes tem sido objeto de muitos estudos, sobretudo daqueles que buscam estabelecer respostas destes órgãos e dos genes aos estímulos ambientais. Estudos histopatológicos, mutagênicos, genotóxicos e em Poecilia reticulata (Guppy) foram motivados pela escassez de dados na literatura referente aos efeitos provocados pela formulação do herbicida Roundup Transorb®. Com tudo, pretendeu-se conhecer os efeitos produzidos por essa formulação que é bastante utilizada no Centro-Oeste do país. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a ação tóxica, mutagênica e genotóxica do herbicida R. Transorb® em fígado, brânquia e eritrócito do guppy, calculando a CL50 e aplicando Teste de Micronúcleo (MN) e Ensaio Cometa (EC). Os bioensaios de toxicidade foram realizados para calcular a CL50,12-96h, avaliar os efeitos das concentrações subletais do herbicida submetido a tratamento agudo. Utilizou-se 36 peixes adultos, pesando em média 0,496g ± 0,28g para cálculo da CL50 e 75 peixes também adultos para realizar o MN e EC. Durante a exposição ao herbicida observou-se o comportamento dos peixes em todas as concentrações e controlada as variações químicas e físicas da água. Os eritrócitos foram obtidos pela centrifugação das brânquias sendo adicionado soro fetal bovino ao precipitado, e posteriormente gotejado sobre as lâminas para realizar o esfregaço e eletroforese. Para a análise das lâminas, foram contadas 75.000 células e estipulada a frequência de ocorrência de Alterações Morfológicas Nucleares (AMNs), e para EC foram analisadas 100 células por espécime. A CL50; 12, 24, 48, 72 e 96 h do R. Transorb® foram de 11.24; 8.55; 6.5; 6.10 e 5.65&#956;l/L, respectivamente, indicando que esta espécie é bastante sensível ao herbicida estudado em relação às demais espécies tropicais analisadas. Esses fatores podem estar relacionados às diferentes formulações dos herbicidas e seus respectivos surfactantes. Verificou-se que a porcentagem de mortalidade dos peixes intoxicados pelo herbicida aumentou à medida que as concentrações de exposição aumentaram. Os valores da CL50; 12- 96 h apresentam tendência de queda ao longo do tempo, sugerindo que em períodos de menor exposição serão necessárias quantidades maiores de herbicida para causar a mortalidade de 50% da população de animais. Os animais expostos ao herbicida apresentaram alterações comportamentais variadas, tais como: agressividade; irritabilidade; perda do reflexo de fuga; escurecimento da superfície corporal e choque contra a parede do aquário. Além disso, o R. Transorb® induziu alterações hitológicas hepáticas prejudicando de forma sensível o funcionamento normal deste órgão. No MN e EC foi possível detectar efeitos mutagênicos e genotóxicos significativos nos eritrócitos e células da brânquia, ocorrendo aumento gradual no número de células com AMNs e com danos ao DNA de acordo com aumento das concentrações, indicando efeito concentração-dependente. Este herbicida apresenta toxidade aguda para guppy, promovendo alterações comportamentais, agindo possivelmente de forma danosa não só no fígado, mas também no sistema nervoso e branquial. Tais resultados sugerem também que a formulação deste herbicida possui ação genotóxica e mutagênica em eritrócitos e células branquiais detectados através dos MN e EC. Por tanto, se confirma o alto risco deste herbicida ao meio ambiente, sua contaminação pode apresentar forte ameaça para as populações de peixes e outros organismos tanto vertebrados como invertebrados e saúde do homem.