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Investigação de polimorfismos na região promotora do gene LEF 1 em individuos com agenesia dental / Investigation of promoter region polymorphisms in the LEF 1 gene in individuals with hypodontia

Silva, Elisangela Ribeiro da 04 November 2003 (has links)
Orientador: Sergio Roberto Peres Line / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-03T16:13:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_ElisangelaRibeiroda_M.pdf: 2040535 bytes, checksum: c4e379d698b612e9ab07bc35aa72d74b (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Numerosos termos têm sido usados para descrever a ausência congênita de dentes. A hipodontia denota a ausência congênita de um ou poucos dentes permanentes e/ou decíduos. A agenesia de numerosos dentes, comumente associada a síndromes específicas e/ou anormalidades sistêmicas, é classificada como oligodontia. A anodontia, uma expressão extrema da oligodontia, indica uma total ausência das estruturas dentais e tem sido reportada nas mais severas formas de displasias ectodermais. A hipodontia é uma das mais freqüentes alterações da dentição humana, que embora não represente um problema de saúde pública, pode causar disfunções mastigatórias e da fala, além de problemas estéticos. Trabalhos recentes mostraram que a deleção do gene Lef 1 em ratos proporciona a perda de dentes e outras estruturas originadas da interação epitélio-mesênquima. O objetivo deste trabalho foi investigar a presença de polimorfismos na região promotora do gene LEF 1 em indivíduos com formas não sindrômicas de agenesia dental. O DNA foi obtido de células epiteliais (em processo de descamação) da mucosa bucal de 38 indivíduos com agenesia nos segundos pré-molares, terceiros molares ou incisivos, e 39 indivíduos controle. A região promotora do gene LEF 1 foi amplificada pela técnica de PCR. Os produtos de PCR foram submetidos à análise pela técnica de SSCP e não revelaram alterações na região promotora do gene estudado. Este resultado indica que alterações nesta região do gene LEF 1 em humanos deve ter um efeito altamente seletivo na dentição, e outros genes devem estar envolvidos na etiologia da hipodontia / Abstract: Numerous tenns have been used to describe congenital missing teeth. Hypodontia denotes congenital absence of one or a few teeth in the primary and/or permanent dentition. Agenesis of numerous teeth, commonly associated with specific syndromes and/or severe systemic abnornalities is classified as oligodontia. Anodontia, an extreme expression of oligodontia indicates total absence of dental structures. The latter has been reported in the most severe fonns of ectodermal dysplasia. The hypodontia is one of the most frequent alterations of the human dentition. Although it does not represent a public health problem, it may cause both speech and masticatory dysfunction as well as aesthetic problems. Recent work in cats have shown that ablation of Lef 1 gene causes complete loss of teeth and interferes with the development of other structures formed by epithelial-mesenchymal interaction. The aim of this work was to investigate the presence of polymorphisms/mutations in the promoter region of the LEF 1 gene in individuals with tooth agenesis. DNA was obtained from epithelial cells of the buccal mucosa of 38 individuals with different patterns of hypodontia in seconds premolars, wisdom teeth or incisors, and 39 individuaIs control. The promoter region of the LEF 1 gene was amplified by PCR technique. The PCR products were submitted to SSCP technique and did not revel any alterations in that region of the gene studied. This result indicated that alterations in this region of the LEF 1 gene in humans must have a highly selective effect on dentition, and other regions of this gene as well as other genes may be involved in the aetiology of hypodontia in humans / Mestrado / Histologia e Embriologia / Mestre em Biologia Buco-Dental
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Aspectos fotomorfogenicos, bioquimicos e citoquimicos durante a germinação de esporos de cyatha delgadii Sternb

Randi, Aurea Maria 01 July 1987 (has links)
Orientador : Gil Martins Felippe / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-16T23:16:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Randi_AureaMaria_D.pdf: 10867051 bytes, checksum: 82addb5c87143254204dfb5c093700f1 (MD5) Previous issue date: 1987 / Resumo: As pteridófitas representam um grupo que produz esporos potencialmente úteis para análises fisiológicas e bioquímicas da germinação. No Brasil, há poucos estudos sobre a germinação de esporos de samanbaias. Decidiu-se então realizar estudos dos aspectos da fotomorfogênese de esporos de Cyathea delgadii, cuja germinação dependente de luz. Estudou-se também aspectos da mobilização e síntese de metabólicos durante a germinação. Paralelamente, foram feitos estudos citoquímicos. A germinação foi realizada em meio de cultura líquida, em câmara de crescimento, com temperatura e luz controladas. Foi verificada a germinação sob luz branca constante para esporos coletados em diferentes épocas do ano. Efeito de tratamento luminosos curtos únicos ou intermitentes e de tratamentos luminosos longos foi verificado em esporos secos e em esporos pré-emvebidos em vapor de água, utilizando-se diferentes fontes luminosas. Foi obsevada a reversão do efeito da luz vermelha pelo vermelho extremo. Efeito de luz azul foi estudado. Esporos foram pré-embebidos em solução osmótica de polietilenoglicol e seu efeito na geminação sob luz branca foi estudado. Efeito de DCMU também foi estudado. Verificou-se o efeito de temperaturas constantes e temperaturas alternadas para esporos que receberam tratamento luminosos indutores de curta duração. Extrações e dosagens de lipídios, clorofila, proteínas, açucares solúveis totais, açucares redutores e amido foram realizadas para esporos secos e após 7 e 11 dias de embebição para germinação, sob luz branca contínua a '25GRAUS¿C. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Doutorado / Biologia Vegetal / Doutor em Ciências Biológicas
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Elucidação dos pontos de controle da morfogênese e otimização de protocolos regenerativos in vitro DE Musa sp. cv. Grand Naine

Sandóval-Yugar, Edgar Wilfredo January 2002 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Curso de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais / Made available in DSpace on 2012-10-19T14:55:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / O presente trabalho teve como objetivo a melhoria nos protocolos de micropropagação através da elucidação dos pontos de controle da morfogênese in vitro da cv. Grand Naine com ênfase: a) fatores determinantes da organogênese no sistema convencional e no sistema de imersão temporária; b) emprego de técnicas de encapsulamento de gemas para armazenamento, conservação e distribuição; e c) indução e controle da embriogênese somática. Assim, foi determinada a dinâmica de multiplicação da bananeira cv Grand Naine ao longo dos subcultivos no meio MS semi-sólido. Posteriormente foi testado o uso da imersão temporária associada ao uso do BAP e PBZ em diferentes concentrações, e comparado ao sistema convencional. Os microbrotos obtidos na organogênese foram encapsulados em diferentes matrizes de alginato de sódio, no sistema de recomposição de endosperma sintético em meio MS, suplementado com carvão ativado, Benlateâ e fitorreguladores. Também estudou-se a indução e desenvolvimento da rota de embriogênese somática avaliando-se fontes de explantes, composição do meio de cultura, tipos e níveis de fitorreguladores, carvão ativado e níveis de Glutamina. As culturas embriogenéticas obtidas foram multiplicadas e submetidas a vários tratamentos de maturação e conversão.
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Propagação ex vitro e in vitro de Heliconia angusta VELL.

Marangoni, Alessandra January 2001 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Curso de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais / Made available in DSpace on 2012-10-18T11:58:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2014-09-25T21:02:38Z : No. of bitstreams: 1 180090.pdf: 34351582 bytes, checksum: 9e6bf5aa46f9133963271d118a1a7e10 (MD5) / Considerando as limitações das técnicas convencionais de propagação vegetativa para esta espécie, o estabelecimento de metodologia para a propagação vegetativa é de fundamental importância para ampliar as áreas de cultivo e atender a demanda do mercado consumidor. Assim, no presente trabalho, objetivou-se realizar estudos visando otimizar as formas de propagação vegetativa desta espécie. Dois sistemas foram empregados para propagação vegetativa de Heliconia angusta. No primeiro, foi avaliado a propagação vegetativa através da divisão de rizomas onde foi avaliado as respostas destas estruturas frente a utilização de benzilaminopurina (BAP). No segundo sistema de produção, procurou-se estabelecer parâmetros para cultura in vitro desta espécie, em especial o controle da oxidação e da contaminação dos explantes.
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Morfogenese em acetabularia calyculus (Quoy e Gaimard) : fatores relacionados com a diferenciaçãodo chapeu

Yano, Dirce Mithico Yamaoka 04 December 1990 (has links)
Orientador : Avelino Rodrigues de Oliveira / Tese (doutorado) - Universidade Estadualde Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-13T22:55:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Yano_DirceMithicoYamaoka_D.pdf: 10184831 bytes, checksum: 698c93baaf6a494eda62da5a1b388f67 (MD5) Previous issue date: 1990 / Resumo: Variações morfológicas do núcleo da alga marinha Acetabularia calyculus (Quoy e Gaimard) foram analisadas com emprego do marcador fluoresoente DAPI em células de diferentes estágios de crescimento dentro de uma cultura sincronizada. Os resultados indicaram que o aumento do volume nuclear correspondia à um grande desenvolvimento dos nucléolos durante o crescimento celular. No estádio que antecede a formação de chapéu (12 mm de comprimento) os nucléolos chegavam a ocupar quase que 80% do núcleo, apresentando estruturas típicas conhecidas como "sausage-like shapes" ; indicando que neste estádio está ocorrendo a síntese de precursores de rRNA em grande escala. Paralelamente, os cromossomos apresentavam-se mais soltos, descondensados, assemelhando-se a cromossomos plumosos, sendo que neste estádio observou-se aIta taxa de síntese de mRNA. Esses resultados foram confirmados com as observações ultraestruturais de células com ápices em crescimento e ápices com início de diferenciação do chapéu. Foram observadas formações de ribossomos ligados às membranas do retículo endoplasmático, ribossomos livres, aparelho de Golgi, vesículas secretoras, cloroplastos e mitocôndrias, indicando grande metabolismo celular resultando na intensa síntese de proteínas. A diferenciação do chapéu está relacionada com a formação de novas paredes celulares. Para tanto há uma necessidade de produção maciça de substâncias precursoras da parede celular. As observações ultraestruturais de ápices de células com início de formação de chapéu evidenciaram a presença de vesiculas secretoras voltadas em direção aos locais de síntese de novas paredes celulares. Essas substâncias precursoras necessárias para síntese de novas paredes celulares, sintetizadas no retículo endoplasmático e no Golgi, são provavelmente transportadas via vesiculas secretoras. A análise dos RNAs sintetizados no núcleo e posterior transporte ao longo de célula, com emprego do isótopo radioativo [3H-uridina, apresentou resultados que corroboram com os demais resultados obtidos nas observações ultraestruturais / Abstract: Morphological variations in the nucleus of the marine algae Acetabularla calyculus (Quoy e Gaimard) were analysed by the use of the fluorescent dye DAPI in cella from different atages of growth in a synchronized culture. The results indicated that the increase in the nuclear volume correaponded to a great development of nucleoli during the cell growth. In the stage before to cap formation (12 mm length) the nucleoli occupied almost 80% of the nucleus, presenting characteriatic structures known as "sausage-like shapes" ; indicating that there is abundant synthesis of rRNA precursors in this stage. At the same time, the chromosomes were unpacked, uncondensed, similar to lampbrush chromosomes, as we observed a high mRNA synthesis in this fase. These results were confirmed by the ultrastructural observations of growing cell tips and cell tipe in the beginning of cap differentiation. Endoplasmatic reticulum membrane-attached ribosomes structures, free ribosomea, Golgi apparatus, secretion vesicles, chloroplasts and mitochondria were visualized at this stage indiçating a high cellular methabolism, resulting in the intense protein synthesis. The cap differentiation is related to the formation of new cellular walls. For that to happen there is a need for an intense production of precursor substances of the cell wall. The ultrastructural observations of cell tips at the beginning of cap differentiation showed the presence of secretion vesicles at the sites of formation of new cell wall. These precursor substances for new cell wall synthesis, produced in the endoplasmatic reticulum and Golgi apparatus, were probably being transported by means of secretion vesicles. The analysis of the radioactive [3H]-uridine RNA¿s synthetised in the nucleus and transported along the cell body presented further support for the ultrastructural observations / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas
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Aspectos fotomorfogênicos, bioquimicos e citoquímicos durante a germinação de cyathea delgadii sternb.

Randi, Áurea Maria January 1987 (has links)
Dissertacão (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologia. Programa de Pós-Graduação de Ciências Biologicas / Made available in DSpace on 2012-10-16T00:47:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2013-07-16T17:09:23Z : No. of bitstreams: 1 264782.pdf: 4740486 bytes, checksum: fdda9cf55fbe989717731fe2b009df86 (MD5)
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Aspectos da germinação de embriões zigóticos e calogênese in vitro do butiazeiro (Butia eriospatha (Martius ex Drude) Beccari) - ARECACEAE)

Claumann, Alan David January 2009 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2009 / Made available in DSpace on 2013-07-16T03:47:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0Bitstream added on 2013-07-16T20:27:57Z : No. of bitstreams: 1 315068.pdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / O Brasil e um dos paises detentores da maior biodiversidade do planeta. A Floresta Ombrofila Mista, componente do Bioma Mata Atlantica, e um importante centro de diversidade biologica, mas encontra-se uito degradada pela acao antropica. Dentre os componentes vegetais dessa floresta, o butiazeiro (Butia eriospatha) e uma Arecaceae para a qual sao relatadas diversas oportunidades de uso economico, mas que ainda e subutilizada e encontra-se ameacada de extincao. Um dos principais problemas para sua exploracao comercial e a producao de mudas, pois as sementes demoram cerca de um ano para germinar e as plantulas crescem e desenvolvem-se lentamente. Tecnicas da cultura de tecidos mostram-se importantes para conservacao de especies de Arecaceae e podem ser integradas a programas de melhoramento e propagacao em larga escala. O objetivo desse trabalho foi avaliar a influencia do carvao ativado e do fitorregulador GA3 sobre a germinacao de embrioes zigoticos e o crescimento das plantulas in vitro do butiazeiro. Embrioes zigoticos maduros foram isolados e inoculados in vitro, em meio de cultura MS, suplementado com o fitorregulador GA3 nas concentracoes de 0, 2, 4, 8 e 16 ÊM, em interacao com a presenca ou ausencia de carvao ativado a 1,5 g.L-1 . No meio de cultura que combinou 4 ÊM de GA3 e carvao ativado foram obtidas as maiores medias de porcentagem de germinacao (92%), comprimento da parte aerea (5,3 cm) e da raiz (5,9 cm) e concentracoes de clorofilas nas folhas. Os meios de cultura que nao foram suplementados com carvao levaram a formacao de plantulas pouco vigorosas, provavelmente devido a excessiva oxidacao. Na ausencia de carvao ativado e presenca de GA3 o eofilo nao foi emitido, nem sequer a raiz primaria.
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Analise morfoepigenetica de linhagens selvagens e mutantes de Metarhizium anisopliae var. anisopliae

Schneider, Dilaine Rose Silva 01 August 2018 (has links)
Orientador : Claudio Luiz Messias / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-01T05:59:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Schneider_DilaineRoseSilva_M.pdf: 13354900 bytes, checksum: b3ff442c4f5b05930145b19e0e6aa7d3 (MD5) Previous issue date: 2002 / Mestrado
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Estabelecimento do protocolo de micropropagação da especie nativa Baccharis tridentata (Asteraceae) : estudos fisiologicos, anatomicos e histoquimicos in vitro

Kajiki, Fatima Odahara 19 April 2004 (has links)
Orientador: Simone Liliane Kirszenzaft Shepherd / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:35:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Kajiki_FatimaOdahara_D.pdf: 9625534 bytes, checksum: b759904477dc5eb6981456b7e7a086a2 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Várias espécies do gênero Baccharis têm sido usadas na medicina popular. Efeitos farmacológicos de muitas delas já foram comprovados, e, nos últimos anos, os compostos químicos de mais de 60 espécies foram identificados. No entanto, são raros os estudos biotecnológicos em espécies deste gênero. B. tridentata e B. dracunculifolia são plantas nativas, aromáticas e produzem óleo essencial, no qual os sesquiterpenos em maior concentração são: nerolidol, espatulenol e b-cadineno. Recentemente, foi comprovado o efeito inibitório do nerolidol no crescimento de Plasmodium falciparum, o mais perigoso agente causador da malária. Devido a alta mortalidade causada por esta doença e ao fato deste parasita estar se tomando resistente aos medicamentos convencionais, pesquisas com plantas que apresentam potencial terapêutico são importantes. Com a finalidade de obter rapidamente um grande número de plantas com as mesmas características da planta mãe, foram desenvolvidos protocolos de micropropagação para as duas espécies. A micropropagação de B. tridentata foi estabelecida através de ápices caulinares de uma única planta, permitindo a formação de um banco de plantas homogêneas (done) que foram utilizadas como fonte de explantes para os experimentos posteriores. Foi desenvolvido o protocolo de aclimatação para esta espécie, com 80% de sobrevivência das plantas deste done no ambiente ex-vitro. Já para B. dracunculifolia, devido a intensa oxidação dos explantes, a micropropagação foi possível somente através da germinação de sementes. A forte recalcitrância ao cultivo in vitro dificultou o prosseguimento dos experimentos com esta espécie. A espécie B. tridentata cresce em pequenas cavidades nas superficies rochosas do Planalto do ltatiaia. A peculiaridade deste habitat levou-nos a realizar alguns estudos fisiológicos in vitro, visando contribuir para a compreensão de alguns mecanismos de adaptação desta espécie, além de permitir o aperfeiçoamento do protocolo de micropropagação. Foram avaliados os efeitos da variação do pH inicial, da fonte preferencial de nitrogênio e da concentração de alguns macronutrientes no crescimento. Após 31 dias de cultivo, o crescimento das plantas resultou em acidificação do meio, com pH final de 3,5. Este clone apresentou maior crescimento (altura e massa de matéria seca) com fonte de nitrogênio constituída de mistura de NO3-+NH/, quando comparado com NO3- ou NH/ fornecidos isoladamente. O aumento do peso seco das raízes foi favorecido pela diminuição da concentração de magnésio no meio. Estudos recentes têm demonstrado que as culturas de partes aéreas podem constituir fonte viável de compostos secundários úteis, principalmente aqueles produzidos em estruturas altamente diferenciadas, como os tricomas glandulares (TG). Entretanto, plantas cultivadas in vitro apresentam, em geral, menor produção destes compostos, quando comparadas com aquelas cultivadas em campo. Esta baixa produção do cultivo in vitro tem sido relacionada com o menor grau de diferenciação. Este presente trabalho investigou os efeitos de alguns fatores microambientais, nutricionais e fitohormonais na diferenciação de algumas estruturas foliares, especialmente os TG, de um clone de B. tridentata cultivado in vitro. As plantas cultivadas in vitro apresentaram TG morfologicamente semelhantes aos da planta da casa de vegetação e do clone aclimatado. A utilização do tampão de algodão no frasco de cultura (em substituição ao PVC utilizado comumente como vedação) resultou em maior diferenciação das células paliçádicas do mesofilo. Neste tratamento, foi observado espaço subcuticular formado pela distensão da cutícula dos TG, sugerindo a secreção de material. O uso da vedação de algodão alterou o microambiente do frasco de cultura (diminuição da umidade e alteração das trocas gasosas) e provavelmente, favoreceu a diferenciação destas estruturas foliares. Outra alternativa para aumentar a produção de compostos acumulados nos TG é através do aumento da densidade destas estruturas (número de TG/mm2). Desta forma, investigamos o efeito dos mesmos fatores microambientais, nutricionais e fitohormonais, acima mencionados na densidade dos tricomas, em folhas adultas do clone de B. tridentata cultivado in vitro. Plantas cultivadas em casa de vegetação e clone aclimatado apresentaram maior densidade de TG do que o clone cultivado in vitro. Nos três casos a densidade dos TG foi maior na epiderme superior. Entre os tratamentos aplicados às plantas cultivadas in vitro, foi constatada interação altamente significativa da concentração de sacarose e fotoperiodo. A maior densidade foi favorecida pela luz contínua e 3% de sacarose. Embora o número de TG/mm2 (otimizado) obtido in vitro tenha sido menor do que o apresentado pelas plantas cultivadas em casa de vegetação e pelo done adimatado, ele foi significativo, principalmente se considerarmos o curto tempo de cultivo (31 dias). Portanto, há possibilidade de melhorar estes resultados, aumentando o tempo de exposição aos tratamentos / Abstract: Several species of the genus Baccharis have been used in folk medicine. Pharmacological effects of many of them were confirmed, and, in the last years more than 60 species have been investigated chemically. However, biotechnological studies are rare. B. tridentata Vahl. and B. dracunculifolia De. are native, aromatic plants and they produce essential oil, in which nerolidol, sphatulenol and b-cadinene are major sesquiterpenes. Recently, was demonstrated the inhibitory effect of nerolidol on the growth of Plasmodium falciparum, the most dangerous species that causes malaria. Due the high mortality caused by this disease and the fact of this parasite is becoming resistant to conventional drugs, researches with plants that present therapeutic potential are very important. With the purpose of obtaining a great number of plants with the same characteristics of parents plants, and quicky, micropropagation protocols were developed. The micropropagation of B. tridentata was stablished through shoot apex of a single plant, allowing the formation of homogeneous plant bank (done), with served as explant sources for later experiments. The acc1imatization of micropropagated plants was successful with 80 % of survival in the ex-vitro environrnent. For B. dracunculifolia, due to intense oxidation of explants, the micropropagation was only possible through the germination of seeds. The strong recalcitrant behaviour to the in vitro culture hindered to following the experiments ofthis species. Plants of B. tridentata grow in small cavities on the rocky surfaces of the Itatiaia Plateau. The peculiarity of this habitat took us to accomplish some in vitro physiological studies, seeking understanding adaptation mechanisms of this species, besides allowing the improvement of the micropropagation protocol. We verified the effects of the initial pH variation, the preferential nitrogen source and the concentration of some macronutrients on the growth. After 31 days of in vitro culture, the growth of done resulted in media acidification, with final pH as 3,5. The clone presented larger growth (heigth and dry matter) with NO3 +NH/ mixture, when compared with NO3- or NH4 -r supplied separately. The decrease of magnesium concentration in the culture media favoured the increment of dry matter by roots. Recent studies have demonstrated that shoot cultures can be a viable source of useful secondary compounds, mainly those produced in highly differentiated structures, as glandular trichomes (TG). However, in vUro cultured plants present, in general, smaller production compared with greenhouse grown plants. The lower production feature of in vitro cultured plants has been related with little differentiation degree. This present work investigated some microenvironrnentals, nutritional and phytohormonals factors in the differentiation of clone leaf structures, especially glandular trichomes. TG of tissue cultured plants were morphologically similar to that of greenhouse grown plants and acc1imated clone. The use of cotton lid in the culture vessel (in substitution to pvc closure) resulted in larger differentiation of palisade mesophyll cells. In this treatment, a subcuticular space formed by the detachment of cuticle were observed on the glandular trichomes, suggesting the production of secretory material. The use of cotton lid changes the vessel microenvironrnent (decrease of the humidity and increase of gaseous exchange) and probably, enhanced the leaf structures differentiation. Another altemative to increase the production of TG produced compounds is through the increase of the density of these structures (number of TG/mm2). This way, we investigated the effect of the same microenvironrnentaI, nutritional and phytohormonals factors, in the density of trichomes, in adult leaves of tissue cultured clone. Greenhouse grown plants and acc1imated clone presented larger density of TG than in vitro cultured plants. The density of TG was always larger in adaxial epidermis. Among the treatments applied to the in vitro cultured clone, there was highly significant interation of the sucrose concentration and photoperiod on the trichomes number. The largest density was favoured by the continuous light and 3% of sucrose. Although the best results of TG density obtained in the tissue cultured plants has been smaller than greenhouse grown plants and acclimated clone, the in vitro results were significant, mainly, if consider the short time of culture (31 days). Thus, there is possibility to improve these results increasing the time of exposure to the treatment / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal
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Biometria, conservação de germoplasma e multiplicação in vitro de jequitibás-rosa do Sul de Minas Gerais

SANTOS, Pedro Miguel Domingues dos 16 December 2016 (has links)
O jequitibá-rosa (Cariniana legalis (Mart.) O. Kuntze), de 30 a 50m de altura é uma das maiores árvores nativas do Brasil. Esta espécie sofre com a fragmentação do habitat e está incluída na lista de espécies em extinção, na categoria vulnerável. Ocorre em um número limitado de habitats naturais, com uma densidade populacional de < 1 árvore/hectare nos fragmentos remanescentes. O objetivo deste estudo foi multiplicar in vitro jequitibás-rosa do sul de Minas Gerais, assim como conservar o germoplasma, fazer o estabelecimento in vitro, aclimatização e a biometria destes. Foi utilizada a técnica de escalada em árvores para a coleta de explantes, sementes e realizar a biometria. Para a multiplicação in vitro, os segmentos nodais foram inoculados em meio WPM com diferentes concentrações de ANA e BAP. Para a germinação as sementes após desinfestação foram imersas em água destilada diferentes tempos. Após a imersão, estas foram inoculadas em meio MS acrescido com diferentes concentrações de GA3. As plantas obtidas foram aclimatizadas em vasos de 550 cm³ contendo os diferentes substratos: vermiculita e solo de floresta; sendo posteriormente cobertas com uma garrafa tipo pet para evitar a desidratação. Para a indução de calos, segmentos caulinares e os cotiledonares foram inoculados em meio WPM, em diferentes concentrações de ANA e BAP. Durante a coleta dos explantes, foram registradas duas serpentes no jequitibá-rosa, sendo realizadas fotografias e biometria das mesmas. Nos experimentos realizados não ocorreram brotações em segmentos nodais de Cariniana legalis, aos 90 dias de cultivo. O melhor tratamento para a germinação foi aquele em que as sementes ficaram imersas em água 48h combinado com 14,45 μM GA3, obtendo-se 70% das sementes germinadas. As plantas aclimatizadas em substrato solo de floresta aos 120 dias apresentaram a maior percentagem de aumento da parte aérea 103,08%; número de folhas 282,36% e diâmetro 93,76% que as aclimatizadas em vermiculita. A indução de calos (70%) e o aumento da massa fresca (122%) foi mais eficiente em meio WPM contendo 0.54 ANA + 6.66 μM BAP. Foi descrito um encontro agonístico entre dois indivíduos de Spilotes pullatus a 31m de altura na copa do jequitibá-rosa, sendo este um registro inédito. Os jequitibás-rosa têm de biometria: DAP entre 1,51 m e 2,80 m; altura total entre 35,70 m e 50,00 m; idades entre 330 e 611 anos. Para indução de calos em Cariniana legalis recomenda-se usar explantes cotiledonares cultivados em meio WPM, acrescido de 30 g L-¹ de sacarose e acrescidos com 0.54 μM ANA + 6.66 μM BAP. Desta forma foi possível realizar o estabelecimento in vitro do Jequitibá-rosa, a conservação de seu germoplasma na forma de calos, a produção de mudas após a aclimatização, e além do registro inédito das serpentes caninanas em maior altura. / The jequitibá-rosa (Cariniana legalis (Mart.) O. Kuntze), 30 to 50m high is one of the largest native trees in Brazil. This species suffers from habitat fragmentation and is included in the list of endangered species in the vulnerable category. Occurs in a limited number of natural habitats, with a population density of <1 tree / hectare in the remaining fragments. The objective of this study was to micropropagate in vitro jequitibás-rosa of the south of Minas Gerais, as well as to conserve the germplasm, to make the establishment in vitro, acclimatization and the biometry of these. The tree climbing technique was used to collect explants, seeds and perform biometrics. For the in vitro micropropagation, the nodal segments were inoculated in WPM medium with different concentrations of ANA and BAP. For germination the seeds after disinfestation were immersed in distilled water at different times. After immersion, these were inoculated in MS medium supplemented with different concentrations of GA3. The plants obtained were acclimatized in pots of 550 cm3 containing the different substrates: vermiculite and forest soil; being later covered with a pet-type bottle to avoid dehydration. For callus induction, stem segments and cotyledons were inoculated in WPM medium at different concentrations of ANA and BAP. During the collection of the explants, two snakes were recorded in the jequitibá-rosa, being carried out photographs and biometrics of the same. In the experiments carried out there were no shoots in nodal segments of Cariniana legalis, at 90 days of cultivation. The best treatment for germination was the one in which the seeds were immersed in water 48h combined with 14.45 μM GA3, obtaining 70% of the seeds germinated. The acclimatized plants on substrate forest soil at 120 days presented the highest percentage of aerial part increase 103.08%; Number of leaves 282.36% and diameter 93.76% than those acclimatized in vermiculite. Callus induction (70%) and fresh mass increase (122%) were more efficient in WPM medium containing 0.54 ANA + 6.66 μM BAP. It was described an agonistic encounter between two individuals of Spilotes pullatus at 31m height in the crown of the jequitibá-rosa, this being the first record. The jequitibás-rosa have biometrics: DAP between 1.51 m and 2.80 m; Total height between 35,70 m and 50,00 m; ages between 330 and 611 years. For callogenesis induction in Cariniana legalis it is recommended to use cotyledonary explants cultivated in WPM medium, plus 30 g L-1 sucrose and added with 0.54 μM ANA + 6.66 μM BAP. In this way it was possible to establish in vitro the Jequitibá-rosa, the conservation of its germplasm in the form of callus, the production of plants after acclimatization, and besides the first report of the caninana snakes in greater height. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES

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