Orientadores: Mary Anne Heidi Dolder, Selma Candelaria Genari / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T18:31:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_NailaFrancisPaulode_M.pdf: 3107927 bytes, checksum: ddd1703cab1bc79c091cc502cc1e0f07 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Alguns fármacos apresentam potencial quimioterápico contra neoplasias, por inibirem a proliferação celular e induzirem a morte celular. Muitos desses agentes podem apresentar efeitos citotóxicos em tecidos normais como linfopenia, devido à indução de apoptose com diminuição das células T CD4, podendo levar a implicações na resposta imune. O tamoxifeno (T AM) é um agente não esteróide antiestrógeno utilizado como quimioterápico coadjuvante no tratamento de câncer de mama. Trabalhos recentes têm demonstrado que o T AM pode causar câncer endometrial em pacientes pós-menopausa, como sério efeito colateral. O presente trabalho objetivou investigar a capacidade do T AM de induzir apoptose em linfócitos humanos cultivados in vitro. Para tanto, amostras de sangue de voluntárias jovens (grupo A= 25 a 30 anos;n=3) e idosas (grupo B= 58 a 77 anos;n=3), foram centrifugadas em gradiente de densidade de Percoll (percoll-50%) para separação de linfócitos e monócitos. Os monócitos foram excluídos por cultura dependente de adesão por 2 horas. O sobrenadante contendo linfócitos controle foram cultivados em meio RPMI suplementado com 10% de soro fetal bovino por 24 e 48 horas, enquanto linfócitos, denominados tratados, receberam 20J.1M de T AM no meio de cultura. Após a cultura, as células foram: 1) contadas em hemocitômetro, sendo estipulado a porcentagem de células viáveis para o total de células analisadas, utilizando-se o método de exclusão pelo Azul Tripan; 2) incubadas com anexina-biotina, que possui alta afinidade pela fosfatidilserina, seguido de incubação com anti-biotina conjugada à fluoresceína, para marcação das células em apoptose e analisadas ao microscópio de fluorescência; 3) fixadas em formaldeído e coradas com Leishman para estudos em microscopia de luz (ML); 4) depositadas em lamínulas, fixadas em glutaraldeído seguido de pós-fixação com tetróxido de ósmio e analisadas ao microscópio eletrônico de varredura (MEV); 5) fixadas em solução de glutaraldeído, ácido pícrico e formaldeído seguido de pós-fixação com tetróxido de ósmio e analisadas ao microscópio eletrônico de transmissão (MET); 6) a análise estatística foi realizada a partir de análise de variância one-way ANOV A com p< 0,05. As culturas tratadas demonstraram menor viabilidade celular e maior índice apoptótico que seus controles. Ainda, culturas controle e tratadas de linfócitos de mulheres idosas apresentaram maior porcentagem de células em apoptose quando comparadas com linfócitos de mulheres jovens. Os estudos em ML e MET revelaram maior condensação cromatínica e redução do volume celular, e ainda, ao MET foram observados vacúolos autofágicos no citoplasma. A MEV revelou células com perda de microvilosidades e perda da morfologia arredondada após 48 horas de tratamento. Conclui-se, então que os linfócitos foram afetados pelo tratamento com o TAM em ambos os grupos, embora o grupo de mulheres idosas se mostrou mais susceptível a apoptose / Abstract: Some drugs have a chemotherapic potential against neoplasms, through inhibition of proliferation and cell death induction. Many of these agents can display cytotoxic effects in normal tissues such as lymphopeny due apoptosis induction with a consequent decrease of T CD4 cells and its implications in the immune response. Tamoxifen is a synthetic non steroidal antiestrogenic drug which is currently being widely employed in the treatment of female breast cancer. Recent studies have shown that TAM can cause endometrial cancer in postmenopausal patients, considered a serious side effect. The purpose of this work was to investigate the capacity of T AM to induce apoptosis in human lymphocytes cultivated in vitro. Samples of peripheral blood were obtained from young (group A= 25-30 years 0Id;n=3) and old (group B= 58-77 years 01d;n=3) women and centrifuged in a Percoll density gradient, to separate lymphocytes and monocytes (percoll-50%). Monocytes were excluded by culturing for 2 hours. The supernatant with control lymphocytes was cultivated in RPMI containing 10% fetal bovine serum, for 24 and 48 h as controls, whereas treated lymphocytes received TAM (20JlM) added to the culture medium. After the culture, the cells were: 1) counted in a hemocytometer, and the viable cell number for each sample was obtained through an exclusion test of intact cells by using 1 % Tripan Blue and establishing the percentage of unstained, alive cells for the total of ressuspended cells; 2) incubated with annexin-biotin, which has high affinity for phosphatidilserine (PS), followed by incubation with FITC conjugated anti-biotin, to target apoptotic cells and examined by fluorescence microscopy; 3) fixed in formaldehyde and stained with Leishman and examined by light microscopy (LM); 4) placed on coverslips, where the cells were fixed, post fixed in osmium tetroxide and examined with the scanning electron microscope (SEM); 5) fixed in in glutaraldehyde, formaldehyde and picric acid, post fixed in osmium tetroxide, and examined in a transmission electron microscope (TEM); 6) statistical analysis was performed using one-way analysis of variance (ANOV A) with p< 0.05. The treated cultures showed less viable cells and more apoptotic cells than control cultures. Moreover, group B showed more apoptotic cells in comparison with group A, in both control and treated cultures. LM and TEM showed treated cells with more condensed chromatin and reduction of cell volume. In TEM some autophagic vacuoles in the cytoplasm were observed. SEM showed loss of microvilli and loss of spherical shape at 48 h, when compared with the controls. Thus, a response to TAM was observed in both groups, although group B was more susceptible to apoptosis / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientadores: Irani Quagio-Grassiotto, Claudio de Oliveira / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T20:33:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Spadella_MariaAngelica_M.pdf: 2390582 bytes, checksum: 10b9099ed47051441f185d0eef28ae5e (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O resumo poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: The abstract is available with the full electronic digital document / Mestrado / Biologia Celular / Mestre em Biologia Celular

Orientadores: Beatriz Appezzato-da-Gloria, Sandra Maria Carmello-Guerreiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T21:29:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vilhalva_DivinaAparecidaAnunciacao_M.pdf: 2469229 bytes, checksum: 4c2d74925c6e4c973558f98e50ca3a70 (MD5) Previous issue date: 2004 / Mestrado

Orientador: Luiza Sumiko Kinoshita, Volker Bittrich / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:35:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Spina_AndreaPozetti_D.pdf: 23471943 bytes, checksum: 8c5bd4007181cac9c633190a451bede0 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: No presente trabalho é proposta uma nova delimitação e circunscrição, para Himatanthus Willd. ex Schult., com base em estudos taxonômicos, micro-morfológicos e filo genéticos. Foram reconhecidas nove espécies nos Neotrópicos, entre elas, seis espécies na região Amazônica: H attenuatus (Benth.) Woodson, H phagedaenicus (Mart.) Woodson, H revolutus (Huber) Spina & Kinoshita, H semilunatus Markgr., H tarapotensis Schum. ex Markgr. e H articulatus (Vah1) Woodson; uma espécie em áreas de Cerrado do Brasil e da Bolívia: H obovatus (Mü11. Arg.) Woodson; e duas espécies exclusivas do Brasil: H drasticus (Mart.) Plumel e H bracteatus (A. DC.) Woodson. H drasticus (Mart.) Plumel é restrita a região nordeste, em vegetação de Cerrado, Caatinga e Carrasco e H bracteatus (A. De.) Woodson é distribuída ao longo da Floresta Atlântica. Não foram aceitas H attenuatus varo malongo, H attenuatus varo obtusifolius, H obovatus varo puberulus e H obovatus varo velutinus. H fallax foi considerada um sinônimo de H drasticus, H lancifolius e H speciosus de H bracteatus, H sucuuba de H articulatus e H stenophyllus de H revolutus. Por outro lado H bracteatus var. revolutus foi elevada ao nível específico como H revolutus (Huber) Spina & Kinoshita. Uma análise dos tipos de ambos H phagedaenicus e H bracteatus mostrou que estes nomes, como usualmente aplicados, são incorretos e que a espécie previamente conhecida como H phagedaenicus deveria ser denominada de H bracteatus e vice e versa. Os subgêneros Obovatae (=Himatanthus) e Lanceolatae não foram reconhecidos por não serem grupos monofiléticos e por terem sido baseados em caracteres morfológicos de pouca constância e consistência. Não foram aceitas a circunscrição das espécies e variedades de Himatanthus proposta por PlumeL devido estas terem sido baseadas, principalmente, em caracteres foliares os quais mostraram uma alta variação intraespecífica. Através da análise da micro- morfologia dos caracteres foliares foi observado que as as espécies de Himatanthus apresentam a forma do limbo variando de obovadas a elípticas, de glabras a velutinas, de broquidóodromas a broquidódromas-eucamptódromas, com estômatos somente na face abaxial, medindo de 16 à 42 _ e uma cutícula variando de lisa a rugosa, com ou sem ceras epicuticulares e com dobras cuticulares ao redor dos estômatos. Esses resultados quando comparados com os obtidos para algumas espécies dos gêneros Plumeria L., Mortoniella Woodson e Allamanda L indicaram que Himatanthus apresenta um padrão típico que pode ser usado como diagnóstico. No estudo filogenético, foi investigado o monofiletismo de Himatanthus, através da análise de dados morfológicos e das seqüências do DNA nuclear ribossomal. Foram também analisadas as relações filo genéticas entre Himatanthus, Plumeria e Mortoniella bem como os caracteres morfológicos destes grupos. As filogenias resultantes dos dados morfológicos e moleculares foram analisadas separadamente devido ao teste de homogeneidade ter indicado que elas eram incongruentes. Os resultados indicam que Himatanthus é um grupo monofilético fortemente sustentado pelos valores de "bootstrap" (89% para a filogenia baseada em dados morfológicos e 91% para a filogenia baseada em dados moleculares); que Mortoniella é o grupo irmão de Himatanthus, e que Plumeria é grupo irmão do clado Mortoniella+Himatanthus. Estes três gêneros são distintos, como proposto por Woodson no tratamento taxonômico tradicional / Abstract: A new circunscription and delimitation of Himatanthus Willd. ex Schult. based on taxonomic, micro-morphological and phylogenetic studies are proposed here. Nine species distributed in the Neotropics were recognized, among them, six species in the Amazonian region: H attenuatus (Benth.) Woodson, H phagedaenicus (Mart.) Woodson, H revolutus (Huber) Spina & Kinoshita, H semilunatus Markgr., H tarapotensis Schum. ex Markgr. and H articulatus; one species in the Cerrado area of Brazil and Bolivia: H obovatus (Mü11. Arg.) Woodson; and two species exclusively Brazilian: H drasticus (Mart.) Plumel and H bracteatus (A. DC.) Woodson. H drasticus (Mart.) Plumel is restricted to the Northeastem region in Cerrado, Caatinga and Carrasco vegetation and H bracteatus (A. DC.) W oodson is distributed along the Atlantic forest. H attenuatus varo malongo and H attenuatus varo obtusifolius and H obovatus varo puberulus and H obovatus varo velutinus were not accepted. H [allax was considered a synonym of H drasticus; H lancifolius and H speciosus of H bracteatus; H sucuuba of H articulatus; and H stenophyllus was synonymized under H revolutus. On the other hand H bracteatus var. revolutus was e1evated to species leveI as H revolutus (Huber) Spina & Kinoshita. An examination of the types of both H phagedaenicus and H bracteatus showed that these names, as currently applied, are incorrect and that the species previously known as H phagedaenicus should be called H bracteatus and vice versa. The subgenera Obovatae (Himatanthus) and Lanceolatae were not recognized because they are not monophyletic groups, but are based on morphological characters with little consistency and constancy. The species and variety circumscriptions proposed by Plumel are not accepted here because they were mainly based on leaf characters wich show a high intraspecific variation. Through analysis of foliar micromorphological characters it was observed that Himatanthus species showed leaf shape varying from obovate to elliptic, glabrous to ve1utinous indument, brochidodromous to brochidodromouseucamptodromous venation, stomata restricted to the abaxial face, ranging from 16 to 42 film, a thick cuticle varying from smooth to wrinkled, with or without epicuticular waxes, and folded around the stomata. Compared with some species of Plumeria L., Mortoniella Woodson, Allamanda L., the foliar characters in Himatanthus have a distinct and typical pattern In the phylogenetic study, the monophyly of Himatanthus was investigated based on the analysis of morphology and ribosomal nuclear DNA sequence data. The phylogenetic relationships amongst Himatanthus, Plumeria and Mortoniella Woodson and the morphological characters were also analyzed. The phylogenies based on morphological and molecular data were analyzed separately because a partition homogeneity test pointed out that they are incongruent. The results showed that Himatanthus is a monophyletic group, strongly supported by "bootstrap" analysis (89% in phylogeny based on morphological data and 91 % on molecular data); that Mortoniella is sister group of Himatanthus; and that Plumeria is the sister group of the Mortoniella+ Himatanthus clade. The three genera are distinct, as proposed by Woodson in the traditional taxonomic treatments / Doutorado / Doutor em Biologia Vegetal

Orientador: Francisco Eduardo Martinez / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T22:35:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pinheiro_PatriciaFernandaFelipe_D.pdf: 10070687 bytes, checksum: b0deaf0b7d82ac3683959e13f1181dbe (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: O uso excessivo de etanol causa alterações significativas no aparelho stema urogenital, porém trabalhos relacionando o consumo crônico dessa substância à morfologia uretral são inéditos. O presente trabalho tem como objetivo descrever a histologia, a histoquímica, a imunohistoquímica e a ultra-estrutura do epitélio uretral de ratos albinos UChA e UChB de consumo voluntário de etanol a 10%. Foram utilizados 74 ratos machos adultos dos seguintes grupos: (1) UChA de baixo consumo voluntário de etanol a 10% (água + etanol = 5,86g/Kg/dia), (2) UChB de alto consumo voluntário de etanol a 10% (água + etanol = 7,16g/Kg/dia) e (3) Wistar de consumo voluntário de água. Técnicas convencionais de microscopia de luz, de eletrônica de transmissão e morfométricas foram utilizadas. O epitélio da uretra pélvica apresentou três tipos celulares: I, II e neuroendócrino (NE). O tipo I apresentou matriz citoplasmática rica em polirribossomos livres e retículo endoplasmático rugoso. O tipo II com características similares às descritas para o tipo I, acrescido de complexo de Golgi e ápice celular com microvilos. As células I e II apresentaram gotas de lipídio próximas ao núcleo. As células NE apresentaram-se argirófilas e positivas para serotonina. A uretra peniana apresentou quatro tipos celulares: basal, intermediário, superficial e neuroendócrino. Núcleo e matriz citoplasmática elétrondensos e presença de filamentos citoplasmáticos intermediários caracterizaram a célula basal. A intermediária apresentou matriz citoplasmática clara, complexo de Golgi e retículo endoplasmático rugoso lamelar. A célula superficial apresentou gotas de lipídio e ápice celular com microvilos curtos. Nas amostras observadas da uretra peniana, não houve marcação positiva na imunohistoquímica com prata e serotonina. Ultra-estruturalmente, a célula NE apresentou matriz citoplasmática rica em grânulos. Na lamina própria do epitélio uretral pélvico e peniano, observou-se fibras nervosas mielínicas e amielínicas. Conclui-se que o consumo crônico de etanol induz alterações morfológicas e fisiológicas no epitélio da uretra de ratos UCh, as células NE uretrais dos ratos controle e UCh são similares, quanto a imunohistoquímica e a ultra-estrutura, aos outros tipos celulares do sistema APUD, a associação estrutural existente entre o epitélio uretral e as fibras nervosas aferentes influencia as células NE e os outros tipos celulares do epitélio uretral através de ação parácrina e os ratos UCh apresentam adaptações à ingestão crônica de etanol / Abstract: The extreme use of ethanol causes significant alterations in the urogenital tract, however papers relating the ethanol chronic consumption to the urethral morphology are unknown. The objective of the present paper was to describe the histology, histochemistry, immunohistochemistry and ultrastructure of the urethral epithelium in an ethanol-drinking rat strain (UChA and UChB). Seventy-four adult male rats of the following groups were used: (1) UChA rats of low voluntary consumption of ethanol 10% (water + ethanol = 5.86g/Kg/day), (2) UChB rats of high voluntary consumption of ethanol 10% (water + ethanol = 7.16g/Kg/day) and (3) Wistar of voluntary water consumption. Conventional techniques of light, transmission electron microscopy and morphometrics were utilized. The pelvic urethral epithelium presented three cellular types: I, II and neuroendocrine (NE). The type I presented rich cytoplasmic matrix in free ribosomes, rough endoplasmic reticulum and mitochondria. The type II with similar characteristics to the described to the type I, increased of Golgi complex and cellular apex with microvilli. The I and II cells presented lipid drops near to the nucleus. The NE cells presented argyrophil and serotoninpositive. The penile urethra presented four cellular types: basal, intermediate, superficial and NE. The basal cell was characterized by nucleus and cytoplasmic matrix electron dense and presence of intermediate cytoplasmic filaments. The intermediate cell presented clear cytoplasmic matrix, Golgi complex and rough endoplasmic reticulum in concentric whorls. The superficial cell presented lipid drops and cellular apex with short microvilli. In the samples observed of the penile urethra, there isn¿t positive reaction for histochemistry with silver or for immunohistochemistry with serotonin. Ultrastructurally, NE presented rich cytoplasmic matrix in granules. The propria lamina of the pelvic and penile epithelium, it observed myelinated and nonmyelinated nerve fibers. It concludes that the ethanol chronic consumption induces morphological and physiological alterations in the UCh rats urethral epithelium; the immunohistochemistry and ultrastructure of the control rat urethral NE cells and UChA and UChB groups are similar to the other APUD system cellular types; the structural association between the urethral epithelium and afferent nervous fibers influences the NE cells and the other urethral epithelium cells types through paracrine action and the UCh rats presented adaptations to the ethanol chronic ingestion / Doutorado / Anatomia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Orientador : Konradin Metze / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T23:37:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bedin_Valcinir_M.pdf: 8279448 bytes, checksum: dbf1e3527e10bcc81b0e5571fdf045b0 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Vários estudos sobre os aspectos histológicos do carcinoma basocelular (CBC) foram realizados tentando correlacioná-Ios à agressividade loc~ porém são técnicas trabalhosas, de dificil execução e custosas. O presente trabalho teve como objetivo estabelecer diferenças entre a textura nuclear de tumores recidivantes (CBCR) e não recidivantes (CBCNR). Para tanto utilizamos um programa de computador desenvolvido pelo Instituto de Computação da Unicamp, com a assessoria do Departamento de Anatomia Patológica da mesma Universidade, para correlacionar esses achados ao comportamento biológico do tumor. Foram feitos, em 98 casos de carcinoma basocelular com acompanhamento mínimo de 5 anos, a avaliação da textura de cromatina do núcleo (no mínimo 100 por caso) através da transformada de Fourier, e a sua correlação com recidiva. Numa análise multivariada cox testamos relevância prognóstica de variáveis derivadas da transformada de Fourier junto com fatores preditivos conhecidos tais como tipo histológico e distância a margem cirúrgica. Obtivemos um modelo prognóstico onde variáveis derivadas da tranformada de Fourier entraram como fatores prognósticos independentes além dos fatores prognósticos já conhecidos. Portanto a análise computadorizada da cromatina em lâminas histológicas de rotina de ca basocelulares permite diferenciar diferentes graus de agressividade independentemente do grau histológico ou da distância até a margem cirúrgica .0 resultado nos mostrou que, através da utilização de um programa de computador de fácil utilização podemos acrescentar mais um instrumento ao arsenal disponível ao patologista / Abstract: Basal cell carcinomas (BCCs) usually follow a rather benign clinical course. A part of them however recurs after treatment causing a local tissue destruction. Therefore, morphological parameters that could help to distinguish between recurrent and non recurrent BCCs would be interesting. The aim of our study was to investigate whether morphometric variables of the nuclei in routinely stained histological sections and the chromatin texture could be helpful to identify patients with high risk for recurrence. We used a computer program , special developed by the Computer lnstitute of the UNICAMP (State University of Campinas-SP-Brazil) in association of the Pathology Department of the same university. We studied 98 BCC cases (52 non recurrent and 46 recurrent) with at least 60 months follow-up. In all cases we performed FFT (Fast Fourier Transform) in,-at least, 100 nuclei of each case. Then we correlated the FFT results with others predictive factors as histological types and surgical margin distance. We obtained a prognosis model where the Fast Fourier Transform results play an independent role besides the already known predictive factors. As a result we can assure that the computerized chromatin analysis performed in histological routine slides is able to di:fferentiatedi:fferentaggressiveness degrees in BCCs independent from the histological type or from the surgical margin distance. Our aim is to show that we can use a friendly user computer program as a novel instrument to the pathologist arsenal / Mestrado / Anatomia Patologica / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Maria Lucia Furlan Wada / Tese (doutorado) - Universidade estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T14:42:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Genari_SelmaCandelaria_D.pdf: 7860909 bytes, checksum: c06aff4e50ce3da83aae6bebb70ad6c6 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Condições não fisiológicas de tratamento por estresse nutricional e diminuição do pH, têm sido associadas a indução de efeitos genotóxicos e transformação em cultura de células de mamíferos. As linhagens celulares Vero, estabelecida a partir de células fibroblásticas renais de macaco verde da África (Cercopithecus aethiops) e MDCK (Madin-Darby canine kidney) a partir de células epiteliais renais, assim como células de cultura primária de líquido amniótico humano foram submetidas ao estresse nutricional, com o objetivo de se investigar o efeito desse sobre vários caracteres celulares. As células estressadas assim como seus respectivos controles foram analisadas com relação a aspectos morfológicos e de crescimento em cultura, características citogenéticas e alterações no citoesqueleto e elementos de matriz extracelular. As linhagens estabelecidas Vero e MDCK assim como as células de cultura primária de líquido amniótico, apresentam inibição por contato e crescimento em monocamadas. Após serem submetidas ao estresse nutricional essas populações passaram a crescer em múltiplas camadas com formação de agregados celulares, perdendo portanto a inibição por contato. A linhagem Vero estressada mostrou alterações morfológicas na superficie celular, com aumento em estruturas vesiculares e microvilosidades, pouco observadas na população controle, que exibia superficie regular. As células presentes nos agregados ou grumos da população Vero estressada apresentaram ainda um certo grau de diferenciação, com células achatadas na superficie do grumo e células arredondadas no interior do mesmo e presença de material extracelular, simulando a formação de pequenas colônias tumorais. Nas monocamadas celulares da população MDCK estressada houve a formação de estruturas denominadas domes, evidenciando a ocorrência de transporte transepitelial. Após a confluência e crescimento em múltiplas camadas, as células MDCK estressadas organizaram-se formando estruturas tubulares. As células Vero controle apresentaram codistribuição de fibronectina e actina, as quais concentraram-se principalmente nas fibras de estresse e se acumularam nas regiões de contato entre as células da monocamada. Nas células Vero estressadas houve redução da resposta imunocitoquímica para fibronectina sem codistribuição com a actina, bem como a redução da coloração para vimentina. A diminuição de fibronectina nas células Vero estressadas provavelmente encontra-se associada à desorganização no padrão de crescimento, levando à formação de múltiplas camadas e diminuição nos índices de adesão, enquanto a presença da fibronectina entre as células da monocamada manteria a adesão ao substrato e o crescimento em monocamadas. As células MDCK controle e estressadas exibiram codistribuição de fibronectina e actina especialmente nas regiões de contato entre as células estressadas, enquanto a vimentina apresentou-se mais intensamente corada nas células MDCK estressadas. A codistribuição de fibronectina e actina nas regiões de contato entre células adjacentes da população MDCK estressada, assim como o aumento da evidenciação de vimentina encontram-se associados à formação de estruturas tubulares por estas células. Células Vero, MDCK e de líquido amniótico apresentaram número modal de cromos somos diferentes de suas populações celulares controle, assim como elevados índices de poliploidia, indicando que o estresse nutricional associado ao abaixamento do pH é responsável não somente por alterações morfológicas, mas também genéticas nos tipos celulares estudados. Pelo presente trabalho pudemos concluir que condições não fisiológicas de tratamento por estresse nutricional associado à redução do pH do meio, foram responsáveis pela indução da transformação em todos os tipos celulares estudados, levando a alterações em vários dos aspectos celulares analisados / Abstract: Non-physiological treatment conditions by nutritional stress and lowered pH have been associated with genotoxic effect and cellular transformation in mammalian culture cells. Vero cell tine, obtained ITom fibloblastic kidney cells of African green monkey (Cercopithecus aethiops), and MDCK (Madin-Darby canine kidney) epithelial cells as well as a primary culture of amniotic human cells were submitted to nutritional stress conditions, o investigate the effect of this treatment, in several cellular characteristics in these cell types. The cellular morphological, growth, cytogenetical, cytoskeleton and extracellular characteristics of cells submitted to stress conditions and their respective controls were analyzed. Vero and MDCK cell lines as well as the primary culture of amniotic cells presented contact inhibition and monolayer growth. After submitted to nutritional stress conditions all these cell types presented multilayered growth with formation of cellular aggregates, losing the contact inhibition property. Vero stressed cells presented morphological alterations at the cellular surface, with enhanced of vesicular and microvilli structures, not often observed in controí cells. At the periphery of Vero cell aggregates, flattened cells were observed, while in the aggregate, the inner cells presented a rounded shape with extracellular material, indicating an ability to stimulate miniature tumoral colony formation. On the monolayer of stressed MDCK cells specific structures called domes were observed, which indicate that transepithelial transport has been performed. After confluence an multilayered growth of stressed MDCK cells were organized in tubular structures. ContraI Vero cells presented fibronectin and actin codistribution at stress fibers and between adjacent cells in the monolayer. Stressed Vera cells showed reduced immunocytochemical response to fibronectin and vimentin without actin codistribution. The reduction of. fibronectin response in Vero stressed cells probably is associated to the growth pattem disorganization, with multilayer growth and a reduced adhesion index, while fibronectin between adjacent cells is responsible forthe substrate adhesion and monolayer growth. Control and stressed MDCK celIs presented fibronectin and actin codistribution at the cell-cell contact regions, while the vimentin immunocytochemical response was enhanced in stressed cells. These characteristics in stressed MDCK celIs probably are associated with the formation of the tubular structures observed. Vero and MDCK lines as well as amniotic human celIs presented altered modal chromosome number and enhanced polyploidy index when compared at their controls, showing that nutritional stress conditions and lowered pH are associated, not only to morphological, but also to genetical alteration in the analyzed celI types. In the present research we can conclude that non physiological conditions by nutritional stress associated with lowered medium pH were responsible by transformation induction in alI the cellular types studied. / Doutorado / Biologia Celular / Doutor em Ciências

Orientador: João Semir / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T21:39:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Stehmann_JoaoRenato_D.pdf: 19699605 bytes, checksum: 7d73538ccfc5b80d79e6d21478e5bb54 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: Os limites e a circunscrição dos gêneros Calibrachoa La Llave & Lex. e Petunia Juss. (Nicotianeae, Solanaceae) foram revisados com base na análise de caracteres morfológicos, citológicos e paleológicos. Calibrachoa é morfológica e citologicamente distinto de Petunia. As espécies de Calibrachoa possuem corola com prefloração conduplicada e números cromossômicos n =9 ou n =18, enquanto que as espécie de Petunia possuem corola com prefloração imbricada e número cromossômico n =7. O exame da testa de sementes através de microscópio eletrônico de varredura mostrou que as espécies de Calibrachoa possuem células com paredes anticlinais retas, enquanto que as de Petunia, células com paredes anticlinais onduladas. A morfologia polínica analisada sob microscopia óptica é relativamente uniforme e não permitiu separar os gêneros. O tratamento taxonômico de Petunia reconheceu onze espécies e dois centros de diversidade na região sul do Brasil. A metade das espécies do gênero é endêmica de regiões muito restritas. A relação do tamanho entre o androceu e o gineceu mostrouse um importante caráter diagnóstico interespecífico. A revisão das Calibrachoa brasileiras reconheceu 20 espécies e dois centros de diversidade na região sul do Brasil. Descrições, chaves para identificação e ilustrações das espécies dos dois gêneros são apresentadas. Um novo gênero monotípico para a tribo Nicotianeae, Petuniopsis, é proposto. Petuniopsis pygmaea possui prefloração imbricada, número cromossômico n=9 e células da testa da semente com paredes anticlinais retas. As relações filogenéticas entre Petunia, Calibrachoa e Petuniopsis permanecem desconhecidas. Petuniopsis parece ser estreitamente relacionado com Calibrachoa. Sugere-se que a semelhança morfológica entre as flores das espécies melitófilas de Petunia e Calibrachoa, especialmente a forma da corola e a coloração purpúrea, seja produto de um processo de coevolução difusa ocorrido com grupos de abelhas solitárias. Padrões de distribuição geográfica, sistemas reprodutivos e mecanismos de isolamento e especiação são discutidos para cada gênero / Abstract: The limits and circumscription of genera Calibrachoa La Llave & Lex. e Petunia Juss. (Nicotianeae, Solanaceae) were revised based on morphological, cytological and palynological analyses. Calibrachoa is morphologically and cytologically distinct from Petunia. Calibrachoa species have the corolla with conduplicate aestivation and chromosome number (n) of 9 or 18, while Petunia species have the corolla with imbricate aestivation and chromosome number of 7. Examination of seed coats by SEM showed that Calibrachoa species have cells with straight anticlinal walls, and those of Petunia have wavy anticlinal walls. Pollen morphology, analyzed with a light mocroscope, is fairly uniform and did not allow separation of the genera. The taxonomic treatment of Petunia recognized 11 species and two centers of diversity in southem Brazil Half of the species are endemic and only found in very restricted areas. The size relation of androecium and gynoecium proved to be an important interspecific diagnostic character. The revision of Brazilian Calibrachoa species recognized 20 species and two centers of diversity in southem BraziL Descriptions, identification keys and illustrations of the species of both genera are presented. A new monotypic genus for tribe Nicotianeae, Petuniopsis, is proposed. Petuniopsis pygmaea has imbricate aestivation, chromosome number of 9 and seed coat cells with straight anticlinal walls. The phylogenetic relationships between Petunia, Calibrachoa, and Petuniopsis remain unknown. Petuniopsis appears to be closely related to Calibrachoa. 1t is suggested that the morphological similarity among the flowers of the melittophilous species of Petunia and Calibrachoa, particularly the shape of the corolla and the purple coloration, is the product of a diffuse co evolutionary process among groups of solitary bees. Patterns of geographic distribution, reproductive systems, as well as isolation and speciation mechanisms are discussed for each genus / Doutorado / Biologia Vegetal / Doutor em Ciências

Orientador : Graziela Maciel Barroso / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-14T03:19:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Barros_Fabiode_M.pdf: 15559508 bytes, checksum: 3716839fd7e01f40311a604ea17a7fea (MD5) Previous issue date: 1988 / Resumo: Pleurothallis R.Br. de acordo com a delimitação hoje aceita, é o maior gênero de orquídeas das Américas, com mais de 1000 espécies, e um dos mais complexos taxonomicamente. Todos os sistemas propostos para sua organização têm sido repetidamente reconhecidos como artificiais. Embora a morfologia da coluna tenha sido reconhecida como uma ferramenta importante na taxonomia da subtribo Pleurothallidinae, desde a publicação do trabalho de Ames (1933), pouca ou nenhuma pesquisa tem sido desenvolvida nesta área. Provavelmente isso se deva ao pequeno tamanho das flores aliado à impossibilidade de se efetuar tais estudos com base em material de herbário. No presente trabalho procedeu-se a um levantamento das características morfológicas da coluna das espécies brasileiras do gênero Pleurothallis R.Br., com base no estudo de material vivo. Os resultados obtidos evidenciaram. Três pontos importantes: a)o gênero Pleurothallis R.Br. exibe uma vasta amplitude de expressão dos caracteres morfológicos da coluna; b) as características morfológicas da coluna, quando tratadas em conjunto com outras características morfológicas gerais, permitem a delimitação de grupos bem determinados de espécies aparentadas, muitos dos quais podem ser tratados taxonomicamente como umidades definidas. ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Pleurothallis, R.Br., as presently concieved, is the largest New World orchid genus, with more than 1000 species and taxonomically a very difficult one. All schemes so far created to systematize this genus are recognized as unatural. Although column morphology has been pointed out as an important tool for the taxonomy of the subtribe Pleurothallidinae since the publication of Ames¿ work of 1933, little or no research has been done on this subject. This is probably due to the small size of the flowers and the impossibility of doing these studies on the basis of dried matherial. Morphological characteristics of the column of Brazilian species of the genus Pleurothallis R.Br. were collected from living matherial. These data make evident three important points: a) the genus Pleurothallis R.Br. shows a surprisingly thgh degree of variation in the column morphology. b) the morphological characteristics of the column, taken into account together with other morphological data, make it possible to circunscribe groups of related species, most of which can be treated as taxonomic units. ...Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Biologia Vegetal / Mestre em Ciências Biológicas

Orientadora: Tereza de Lourdes Scarpari Barrichello / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-14T15:28:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_SelmodeAvila_M.pdf: 2698257 bytes, checksum: 83869449f8e17e26059973b922a02475 (MD5) Previous issue date: 1981 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed. / Mestrado / Histologia e Embriologia / Mestre em Biologia e Patologia Buco-Dental