Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 2601933 bytes, checksum: 9774a77bdb4923c6922bc2f4f25f4a68 (MD5) Previous issue date: 2014-03-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Polyamines are aliphatic organic bases belonging to the group of bioactive amines that have important metabolic and physiological functions in animals, plants and microorganisms. Amongst the most important polyamines biologically are spermidine [N-(3-aminopropyl) -1,4-butane diamine or tetramethylene diamine-aminopropyl] (SPD) and spermine [N, N'-bis (3-aminopropyl) -1,4-butane diamine or diaminopropil-tetramethylethylenediamine] (SPM). Polyamines are intimately involved in the growth and replication of many cell types, and it has been demonstrated that they are found in high concentrations in rapid growing cells. It is possible that substances such as naphthoquinones, which can react with polyamines have the ability to block its function by depleting its concentration. The direct detection of polyamines by HPLC with UV detection is hampered because they lack structural groups with high molar absorptivity. Thus, the objective of this study was to develop and validate a chromatographic method using fluorescence detection that could be applied for quantifying the cellular levels of polyamines in cell cultures based on the following parameters: selectivity, linearity, precision and accuracy. The polyamines were derivatized pre-column with dansyl chloride and were detected by fluorescence (ex= 365 nm; em= 510 nm) using a chromatographic method using gradient elution with a mobile phase consisting of methanol: water (35-95 v/v), a reversed-phase C18 column (250 x 4.6 mm, 5μm) at a flow rate of 1.0 mL/min., in 35 minutes. The chromatographic method was validated according to Resolution 899 recommended by the National Sanitary Agency of Brazil (ANVISA), and was linear in the concentration range used for SPD (0.0097 to 0.97 pmol/mL) and SPM ( 0.074 to 0.74 pmol/mL), precise (≤ 15% for medium and high concentrations, ≤ 20% for the low concentration), exact for SPD (97-118%) and SPM (92-119%), It also showed selectivity (demonstrated by separation of polyamines and proteins present in cell culture medium). The developed method was also applied to the analysis of polyamines incubated with the naphtoquinones (lapachol and β-lapachone). The concentration of these polyamines was depleted when incubated for 17 hours at ambient temperature (decrease of 67% and 50% for SPD and SPM levels respectively when incubated with lapachol and a decrease of 44% and 37,5% for SPD eand SPM when incubated with β-lapachona). These results demonstrate that the developed method is adequate for the analysis of polyamines in cell culture and that a probable mechanism of antitumoral action for the naphtoquinones may involve the formation of adducts with polyamines / Poliaminas são bases orgânicas alifáticas pertencentes às aminas bioativas que desempenham importantes funções metabólicas e fisiológicas em animais, vegetais e microrganismos. As mais importantes biologicamente são a espermidina [N-(3-aminopropil)-1,4-butano diamina ou aminopropil-tetrametilenodiamina] (SPD) e a espermina [N,N -bis(3-aminopropil)-1,4-butano diamina ou diaminopropil-tetrametilenodiamina] (SPM). Estão intimamente envolvidas no crescimento e replicação de diversos tipos de células, e em especial encontra-se em altas concentrações em células exibindo crescimento rápido. É possível que substâncias tais como as naftoquinonas, que possam reagir com as poliaminas, tenham a capacidade de bloquear as suas funções pela depleção de sua concentração. A sua detecção direta é dificultada por não possuírem grupos que apresentam alta absortividade molar. Desse modo, o objetivo deste trabalho foi desenvolver e validar um método cromatográfico, utilizando detecção por fluorescência que possa ser aplicado a quantificação do nível celular de poliaminas em cultura de células tumorais com base nos seguintes parâmetros: seletividade, linearidade, precisão e exatidão e investigar a formação de adutos com naftoquinonas. Para tanto derivatizou-se as poliaminas fora do sistema cromatográfico (pré-coluna) com cloreto de dansila, formando derivados dansilados que foram detectados por fluorescência (ex= 365 nm; em= 510 nm). A separação se deu por eluição em modo gradiente, utilizando como fase móvel metanol:água (35-95 v/v), uma coluna de fase reversa C-18 (250 x 4,6 mm, 5μm) a um fluxo de 1,0 mL/min, em 35 minutos. O método cromatográfico desenvolvido foi validado segundo o preconizado na Resolução 899 da Agência Nacional de Vigilância Sanitária (ANVISA), e mostrou-se sensível, linear na faixa de concentração utilizada para SPD (97-970 pmol/mL) e para SPM (74-740 pmoL/mL), preciso (≤ 15% para as concentrações média e alta; ≤ 20% para a concentração baixa), exato para SPD (91-112%) e para SPM (92-119%), mostrando-se também seletivo (frente a separação das poliaminas e as proteínas presentes no meio de cultivo celular). O método desenvolvido foi ainda aplicado à análise das poliaminas incubadas com as naftoquinonas (lapachol e β-lapachona), e observou-se que a concentração dessas aminas foi depletada quando incubadas por 17 horas a temperatura ambiente com as naftoquinonas (diminuição de 67% e 50% dos níveis de SPD e SPM respectivamente quando incubadas com o lapachol; e diminuição de 44% e 37,5% de SPD e SPM quando incubadas com β-lapachona). Esses resultados mostram que o método desenvolvido é adequado para análise de poliaminas em cultura de células tumorais e que um provável mecanismo de ação antitumoral das naftoquinonas pode envolver a formação de adutos entre estas e as poliaminas.

Made available in DSpace on 2015-04-11T13:54:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MARIA PSBCF.pdf: 946422 bytes, checksum: 9a7615024f31d940b37aa13463521a8f (MD5) Previous issue date: 2013-11-05 / Introduction: The increase in fungal infections, adverse effects and resistance to antifungal agents currently used, stimulate new studies in search of better antifungal. In this context, the naphthoquinones are widely studied for possessing various biological activities, among them antifungal. The aim of this study was to evaluate the antifungal activity of new naphthoquinones semissintéticas against opportunistic fungi / dermatophytes and to evaluate the interference of a naphthoquinone selected in cell wall formation, membrane ergosterol and cell membrane strain of Candida albicans (ATCC 36232). Methods: The antifungal activity of four new naphthoquinones semi synthetic was evaluated against 89 cultures of microorganisms belonging to the collection of the National Institute for Amazonian Research (INPA), including opportunistic yeast, agents of dermatophytosis and opportunistic filamentous fungi. The test for determining the minimum inhibitory concentration (MIC) was performed as described by the CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) documents M27 - A2 and M38-A/CLSI, 2002. The substance showed better activity was assessed as the action in the cell wall (test sorbitol) and interference in the membrane -associated interaction with ergosterol , the osmotic balance ( K + efflux ) and an essay by leakage of substances that absorb at 260 nm. Results: All new naphthoquinones tested exhibited antifungal activity, and the IVS320 (1H - cyclopenta [ b ] naphtho [2,3 - d] furan- 5 , 10 (3Ah , 10BH) - dione) showed the lowest MICs front species tested. The MIC IV320 was particularly low for dermatophytes , with MIC averages ranging from 5-28 mg / mL and against isolates of the genus Cryptococcus spp . Mean MIC ranged from 5.3 mg / mL. So it was subjected to preliminary tests of mechanism of action. In these trials , the IVS320 caused no change in the fungal cell wall , but caused problems in cell membrane permeability ( efflux of K + and leakage of substances that absorb 260nm ) unrelated to the connection with the ergosterol membrane . / Introdução: O aumento das infecções fúngicas, os efeitos adversos e a resistência aos antifúngicos atualmente utilizados, estimulam novos estudos em busca de melhores agentes antifúngicos. Nesse contexto, as naftoquinonas são amplamente estudadas por possuir várias atividades biológicas, dentre elas antifúngica. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antifúngica de novas naftoquinonas semissintéticas frente a fungos oportunistas/dermatófitos e avaliar a interferência de uma naftoquinona selecionada na formação da parede celular, ergosterol de membrana e membrana celular de cepa de Candida albicans (ATCC 36232). Métodos: A atividade antifúngica de quatro novas naftoquinonas semissintéticas foi avaliada frente a 89 culturas pertencentes a coleção de microrganismos do Instituto Nacional de Pesquisa da Amazônia (INPA), incluindo leveduras oportunistas, agentes de dermatofitoses e fungos filamentosos oportunistas. O ensaio de determinação da Concentração inibitória mínima (CIM) foi realizado como descrito pela CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) nos documentos M27-A2 e M38-A/CLSI,2002. A substância que apresentou melhor atividade foi avaliada quanto à ação na parede celular (ensaio sorbitol) e a interferência na membrana associada à interação com ergosterol, ao equilíbrio osmótico (efluxo de K+) e a um ensaio de extravazamento de substâncias que absorvem a 260 nm. Resultados: Todas as novas naftoquinonas testadas exibiram atividade antifúngica, sendo que a IVS320 (1H-cyclopenta[b]naphtho[2,3-d]furan-5,10(3aH,10bH)-dione) apresentou as menores CIMs frente as espécies testadas. A CIM de IV320 foi particularmente baixas para dermatófitos, com médias de CIM variando de 5-28 μg/mL e frente aos isolados do gênero Cryptococcus spp. médias de CIM variaram de 3-5 μg/mL. Por isso, foi submetida a ensaios preliminares de mecanismo de ação. Nesses ensaios, a IVS320 não causou alteração na parede celular do fungo, mas causou problemas na permeabilidade da membrana celular (efluxo de K+ e extravasamento de substâncias que absorvem a 260nm), não relacionados à ligação com o ergosterol da membrana.

Submitted by Heitor Rapela Medeiros (heitor.rapela@ufpe.br) on 2015-03-04T12:18:57Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação versão final para entrega maio.docx: 1590486 bytes, checksum: 617f0e398177213821335fd627d3a8fe (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-04T12:18:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Dissertação versão final para entrega maio.docx: 1590486 bytes, checksum: 617f0e398177213821335fd627d3a8fe (MD5) Previous issue date: 2012 / Este estudo teve como objetivo avaliar a atividade antimicrobiana do lapachol, α-lapachona, β-lapachona e de cinco agentes antimicrobianos (ampicilina, amoxicilina/ácido clavulânico, cefoxitina, ciprofloxacina e meropenem), frente a 12 cepas de Staphylococcus aureus, cujo fenótipo de resistência fora previamente determinado pelo método de difusão em meio sólido. Cinco cepas de S. aureus (LFBM 16, LFBM 26, LFBM 28, LFBM 31, LFBM 33) apresentaram resistência a todos os agentes antimicrobianos testados e foram selecionados para a segunda etapa do trabalho: avaliação da interação entre β-lapachona e agentes antimicrobianos, que foi realizado pelo método do tabuleiro de xadrez (checkerboard). Os critérios utilizados para esta avaliação, foram definidos pelos valores do Índice de Concentração Inibitória Fracionada (FICI). Entre as naftoquinonas avaliadas, a β-lapachona foi a mais eficaz. A combinação de β-lapachona com os agentes antimicrobianos resultou em uma redução ≥ 5 vezes o valor da CIM destes últimos. Os valores do Índice de Concentração Inibitória Fracionada (FICI) para as associações variaram de 0,07 a 0,5 sugerindo uma atividade sinérgica. A cinética bactericida da associação de β-lapachona e meropenem foi avaliada frente as cepas LFBM 01 e LFBM 26 de S. aureus multirresistentes. As drogas foram testadas sozinhas e em combinações de ½ e ¼ MIC para a β-lapachona e para o meropenem respectivamente. A associação dos antimicrobianos foi capaz de reduzir o crescimento das cepas de S. aureus LFBM 01 e LFBM 26 em 3,5 log10 UFC/mL após 12h; e esterilizou estas culturas em 24h. Este estudo demonstrou que a β-lapachona combinada com antimicrobianos beta lactâmicos, fluoroquinolonas e carbapenêmicos, agem sinergicamente, inibindo cepas de S. aureus multiresistentes.

Este estudo avaliou in situ a ação do gel contendo euclea natalensis na redução da erosão associada ou não abrasão em esmalte e dentina humanos. O estudo foi realizado em duas fases cruzadas de cinco dias cada (SG - sem gel e CG - com gel) nas quais 10 voluntários utilizaram placas palatinas com 4 blocos de esmalte e 4 blocos de dentina, distribuídos em duas fileiras horizontais contendo 4 blocos, correspondendo aos subgrupos: erosão (Eros); erosão + abrasão (30min) (Eros + Abras). Em fases alternadas metade dos voluntários teve a aplicação do gel em todos espécimes do aparelho e na outra metade os espécimes não sofreram tratamento nenhum. O gel foi aplicado durante 5 minutos, sendo o mesmo removido após este tempo. Na etapa experimental os aparelhos foram imersos em refrigerante 4x ao dia, por 5 minutos. A seguir o aparelho foi colocado na boca por 30 minutos. Após este período os voluntários escovaram 4 espécimes da fileira Eros + Abras e recolocaram o aparelho. A outra fileira (Eros) não foi escovada. A análise da perda de estrutura dentária foi realizada por meio de teste de perfilometria e microdureza. Foi utilizada a análise de variância (ANOVA) a 2 critérios (presença ou ausência da aplicação do gel) de acordo com cada substrato e o teste TUCKEY (p<0,05). Não houve associação entre perda de dureza e condições ou grupos testados (p>0,05). O desgaste dentário médio nos blocos de esmalte para o grupo CG foi de 12,86µm eros e 12,13µm eros+abras e para os blocos de dentina foi de 5,95µm eros e 6,16µm eros+abras. A média de desgaste dentário para o grupo SG, em blocos de esmalte foi de 14,08µm eros e 16,29µm eros+abras e, nos blocos de dentina foi de 13,64µm eros e 12,63µm eros+abras. Houve diferença significativa entre os grupos (p<0,05). Concluiu-se que o gel contendo euclea natalensis é capaz de reduzir o desgaste associado ou não a abrasão, independente do tipo de substrato, esmalte ou dentina. / This study investigated the action of in situ gel containing euclea natalensis on reducing erosion associated or not with abrasion in the human enamel and dentin. The study was performed into two phases crossed in five days each (WOG-without gel and WG- with gel) in which ten volunteers used acrylic palatal appliances with four blocks of enamel and four dentin, distributed in two horizontal rows containing four blocks, corresponding to the subgroups: erosion (Eros); erosion + abrasion (30min) (Eros + Abras). In alternating phases half the volunteers had the applying the gel at all specimens. And the other half of the volunteers have not suffered any treatment. The gel was applied during 5 minutes, being removed after this time. In stage experimental, the blocks were subjected to erosion by immersion of the appliances into soft drink for five minutes, 4 times a day. The appliance was then replaced into the mouth for 30 minutes. After this period the volunteers brushed row (eros+abrasion) and replaced into the mouth. The row (eros) was not brushed. The analysis of the dental structure were determined using profilometry and microhardness tests. ANOVA by two criteria (presence or absence of application of gel) in agreement with each the substrate and Tukey test were applied (p <0.05). Microhardness and conditions or groups tested were not found association (p> 0.05). The mean wear in enamel blocks was 12.86µm eros and 12.13µm eros + abras in the WG group and in dentin blocks was 5.95 µm eros and 6.16µm eros+ abras. The mean wear in enamel blocks was 14.08µm eros and 16.29µm eros+abras for the WOG group and in dentin blocks was 13.64µm eros and 12.63µm eros + abras. There was significant difference between groups (p <0.05). It concluded that the gel containing Euclea Natalensis can reduce erosion with or without abrasion, independently of the substrate type, enamel or dentin.

This study aimed to perform the collection of the intensities of diffracted X-ray beam, solving the crystal structures, refine the collected data to compare the molecular structures obtained, the proposals submitted by the group of the Pesquisa em Produtos Naturais (NPPN) da Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ) and to characterize the crystal packing identifying possible interactions of hydrogen. In Chapter I, has an introduction to organic compounds as potential pharmaceutical and distribution of Chagas disease in the world and in Brazil, highlighting data from the State of Alagoas. In Chapter II presents a theoretical foundation of X-rays as well as the concept of crystal, followed by Chapter III, using materials and methods and in Chapter IV, are the results and discussions. The compounds studied in this work were 4,5-dihydro-6 ,6-dimethyl-6H-2-(3'-methylphenyl)-furan [B-4,3] naphtha [1,2-D] Imidazole (NPPN3171) and 4,5-dihydro-6 ,6-dimethyl-6H-2 (phenyl)-piran [B-4, 3]-naphtha [1,2-D]-imidazole (NPPN3037). The single crystal samples were courtesy of NPPN/ UFRJ, in the person of Professor Antonio Ventura Pinto. The crystals were selected, glued on glass fibers and set the goniometric head. Data were collected using an automatic diffractometer Kappa CCD. The structures were solved using the software package contained in the WinGX v1.70.01. The compound NPPN3171crystallizes in monoclinic crystal system, space group P21/c with the following parameters a = 9.2587(2)Å, b = 9.8049(4)Å, c = 19.3851 (7) Å; &#946; = 101.365 (2) and Z = 4 molecules /cell. Were collected 3506 unique reflections with use of automatic KappaCCD diffractometer using the K&#945; radiation of molybdenum (&#61548; = 0.71073 Å) monochromatized by a graphite crystal.&#61472; Were considered 2382 observed reflections giving a final discrepancy index (Robs) of 0.0555. In the crystal packing observed the presence of classical intermolecular hydrogen bonds. To compound NPP3073 the linear parameters were obtained: a = 9.0547(2)Å, b = 10.5956(5)Å, c = 18.7071(10) Å; &#946; = 102.467º (3); crystal system monoclinic space group P21/c and Z = 4 molecules/unit cell. The 2381 observed reflections gave a Robs = 0.1502 reflecting the low quality of data as seen in Rint = 0.1179. Analyzing the molecular structure is observed the presence of a secondary intramolecular interaction (C - H... O) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Este trabalho teve como objetivos realizar a coleta das intensidades dos feixes de raios X difratados, resolver as estruturas cristalinas, refinar os dados coletados, comparar as estruturas moleculares obtidas, com as propostas fornecidas pelo grupo do Núcleo de Pesquisas de Produtos Naturais (NPPN), da Universidade Federal do Rio de Janeiro (UFRJ) e caracterizar o empacotamento cristalino identificando as possíveis interações de hidrogênio. No capítulo I, tem-se uma introdução sobre os compostos orgânicos como candidatos á fármacos e a distribuição da doença de Chagas no mundo e no Brasil, destacando dados do Estado de Alagoas. No capítulo II, apresenta-se uma fundamentação teórica sobre raios X bem como o conceito de cristal, seguido do capítulo III, com materiais e métodos e no capítulo IV, têm-se os resultados e as discussões dos mesmos. Os compostos estudados neste trabalho foram: 4,5-diidro-6,6-dimetil-6H-2-(3 -metilfenil)-furan[B-4,3] nafto[1,2-D] imidazol (NPPN3171) e 4,5-diidro-6,6-dimetil-6H-2 (fenil)-piran [B-4,3]-nafto[1,2-D]-imidazol (NPPN3037). As amostras monocristalinas foram gentilmente cedidas pelo NPPN da UFRJ, na pessoa do professor Antonio Ventura Pinto. Os cristais foram selecionados, colados em fibra de vidro e fixados na cabeça goniométrica. Os dados foram coletados usando-se um difratômetro automático Kappa CCD. As estruturas foram resolvidas utilizando-se o pacote de programas contido no WinGX v1.70.01. O composto NPPN3171 cristaliza no sistema cristalino monoclínico, grupo espacial P21/c com os seguintes parâmetros a = 9,2587(2)Å, b = 9,8049(4)Å, c = 19,3851(7)Å; &#946; = 101,365o(2) e Z = 4 moléculas/cela. Foram coletadas 3506 reflexões únicas com uso do Difratômetro automático KappaCCD e utilizando a radiação K&#945; do molibidênio (&#61548;&#61472;&#61501;&#61472;0,71073Å) monocromatizada por um cristal de grafite. Foram consideradas 2382 reflexões observadas fornecendo um índice de discordância final, (Robs) de 0,0555. No empacotamento cristalino verificou-se a presença de ligações de hidrogênio intermoleculares clássicas. Para o composto NPP3073 os parâmetros lineares obtidos foram: a = 9,0547(2)Å, b = 10,5956(5)Å, c = 18,7071(10)Å; &#946; = 102,467o(3); sistema cristalino monoclínico com grupo espacial P21/c e Z = 4 moléculas/cela unitária. As 2381 reflexões observadas forneceram um Robs = 0,1502 refletindo a baixa qualidade dos dados como verificado no Rint = 0,1179. Analisando a estrutura molecular observa-se a presença de uma interação intramolecular secundária (C H...O)

Este estudo avaliou in situ a ação do gel contendo euclea natalensis na redução da erosão associada ou não abrasão em esmalte e dentina humanos. O estudo foi realizado em duas fases cruzadas de cinco dias cada (SG - sem gel e CG - com gel) nas quais 10 voluntários utilizaram placas palatinas com 4 blocos de esmalte e 4 blocos de dentina, distribuídos em duas fileiras horizontais contendo 4 blocos, correspondendo aos subgrupos: erosão (Eros); erosão + abrasão (30min) (Eros + Abras). Em fases alternadas metade dos voluntários teve a aplicação do gel em todos espécimes do aparelho e na outra metade os espécimes não sofreram tratamento nenhum. O gel foi aplicado durante 5 minutos, sendo o mesmo removido após este tempo. Na etapa experimental os aparelhos foram imersos em refrigerante 4x ao dia, por 5 minutos. A seguir o aparelho foi colocado na boca por 30 minutos. Após este período os voluntários escovaram 4 espécimes da fileira Eros + Abras e recolocaram o aparelho. A outra fileira (Eros) não foi escovada. A análise da perda de estrutura dentária foi realizada por meio de teste de perfilometria e microdureza. Foi utilizada a análise de variância (ANOVA) a 2 critérios (presença ou ausência da aplicação do gel) de acordo com cada substrato e o teste TUCKEY (p<0,05). Não houve associação entre perda de dureza e condições ou grupos testados (p>0,05). O desgaste dentário médio nos blocos de esmalte para o grupo CG foi de 12,86µm eros e 12,13µm eros+abras e para os blocos de dentina foi de 5,95µm eros e 6,16µm eros+abras. A média de desgaste dentário para o grupo SG, em blocos de esmalte foi de 14,08µm eros e 16,29µm eros+abras e, nos blocos de dentina foi de 13,64µm eros e 12,63µm eros+abras. Houve diferença significativa entre os grupos (p<0,05). Concluiu-se que o gel contendo euclea natalensis é capaz de reduzir o desgaste associado ou não a abrasão, independente do tipo de substrato, esmalte ou dentina. / This study investigated the action of in situ gel containing euclea natalensis on reducing erosion associated or not with abrasion in the human enamel and dentin. The study was performed into two phases crossed in five days each (WOG-without gel and WG- with gel) in which ten volunteers used acrylic palatal appliances with four blocks of enamel and four dentin, distributed in two horizontal rows containing four blocks, corresponding to the subgroups: erosion (Eros); erosion + abrasion (30min) (Eros + Abras). In alternating phases half the volunteers had the applying the gel at all specimens. And the other half of the volunteers have not suffered any treatment. The gel was applied during 5 minutes, being removed after this time. In stage experimental, the blocks were subjected to erosion by immersion of the appliances into soft drink for five minutes, 4 times a day. The appliance was then replaced into the mouth for 30 minutes. After this period the volunteers brushed row (eros+abrasion) and replaced into the mouth. The row (eros) was not brushed. The analysis of the dental structure were determined using profilometry and microhardness tests. ANOVA by two criteria (presence or absence of application of gel) in agreement with each the substrate and Tukey test were applied (p <0.05). Microhardness and conditions or groups tested were not found association (p> 0.05). The mean wear in enamel blocks was 12.86µm eros and 12.13µm eros + abras in the WG group and in dentin blocks was 5.95 µm eros and 6.16µm eros+ abras. The mean wear in enamel blocks was 14.08µm eros and 16.29µm eros+abras for the WOG group and in dentin blocks was 13.64µm eros and 12.63µm eros + abras. There was significant difference between groups (p <0.05). It concluded that the gel containing Euclea Natalensis can reduce erosion with or without abrasion, independently of the substrate type, enamel or dentin.

O presente trabalho trata da semissíntese de análogos de importantes compostos líderes (afidicolina, lausona, lapachol e CAPE) utilizando técnicas de química medicinal como bioisosterismo, adição de grupamento funcional e simplificação molecular. Dessa forma foi possível obter uma biblioteca de análogos racionais, visando a manipulação de parâmetros físico-químicos e estruturais, para fins de bioprospecção. Foram desenvolvidos derivados de afidicolina mais lipofílicos, por meio da acilação das hidroxilas presentes na estrutura química deste terpeno. Tentativas de formação de bioisósteros, sais e de ésteres fosfato das hidroxinaftoquinonas naturais - lapachol e lausona, foram realizadas visando avaliar a influência do pKa sobre a atividade deste tipo de moléculas, bem como aumentar hidrossolubilidade. Neste caso, foram observadas reações paralelas, como um rearranjo molecular para a formação de aminonaftoquinonas, no estudo da cicloadição de azida de sódio com grupos cianos. Ademais, foi estudado o efeito da simplificação molecular de CAPE (fenetil éster do ácido cafeico), visando entender os requisitos estruturais de atividade antitumoral desta classe de compostos. Neste trabalho, foram obtidas 14 moléculas e testadas para diferentes atividades biológicas. Derivados naftoquinoidais se mostraram ativos frente à inibição de DHODH em ensaio sobre a enzima e também em ensaio celular. Adicionalmente, análogos simplificados do CAPE apresentaram alta atividade antitumoral, com segurança, em comparação ao controle 5-fluorouracila. / The present study aimed the semi-synthesis of analogues from important lead compounds (aphidicolin, lausone, lapachol and CAPE) by using medicinal chemistry strategies, such as bioisosterism, addition of functional groups and molecular simplification. Thus, we obtained a library of rational analogues, aiming the manipulation of physicochemical and structural parameters with bioprospecting purposes. We developed more lipophilic aphidicolin derivatives by acylation of the hydroxyl groups present in the structure of this terpene. Attempts towards the development of phosphate salts bioisosters from the hydroxinaftoquinones lapachol and lausone in order to evaluate the influence the pKa in the biological activity of these class compounds as well as to increase the water solubility. In this last case, we observed parallel reactions, as a molecular rearrangement for the formation of the aminonaftoquinones during the study of cycloaddition with cyanides and azides. In addition, we studied the effects of molecular simplification of CAPE (caffeic acid phenethyl ester), to better understand the structural requirements for antitumoral activity of this class of compounds. In the present work we obtained 14 molecules which were also tested for different biological activities. Naftoquinoidais derivatives showed inhibition activity on enzymatic essay on DHODH and on cellular essay. Moreover, simplified molecules from CAPE showed high antitumoral activity and safety in comparison to the control 5- fluorouracil.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2017-02-15T15:25:59Z No. of bitstreams: 1 Valentina Nascimento e Melo.pdf: 1846879 bytes, checksum: 0f435fbf6eac1935724bc84cb61e7e68 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-15T15:25:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Valentina Nascimento e Melo.pdf: 1846879 bytes, checksum: 0f435fbf6eac1935724bc84cb61e7e68 (MD5) Previous issue date: 2015-03-16 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Two strategies were considered for the synthesis of 2,3-unsaturated O-glucosyl-1,2,3-triazoles. The reaction between tri-O-acetyl-D-glucal and triazole alcohols gave no stereoselectivity. In fact, β-isomer formation was increased. A second strategy furnished 2,3-unsaturated O-glucosides from tri-O-acetyl-D-glucal and alkynols via Ferrier rearrangement; this methodology employing montmorillonite K-10 doped with FeCl3∙6H2O affords new glycosides in good to excellent yields, short time and high α-stereoselectivity in dichloromethane. Subsequently, the glucosides were coupled with 2-azido-1,4-naphthoquinone to give a new series of 1,2,3-1H-triazolyl O-glucoside derivatives based on click reaction. / Duas estratégias foram consideradas para a síntese de 1,2,3-triazóis O-glicosídeos2,3-insaturados. A reação entre o tri-O-acetil-D-glucal e os alcoóis triazólicos não mostrou seletividade. De fato, a formação do isômero β foi aumentada. Uma segunda estratégia forneceu O-glicosídeos 2,3-insaturados a partir do tri-O-acetil-D-glucal e alquinóis via rearranjo de Ferrier; esta metodologia formou novos glicosídeos, empregando montmorilonite K-10 dopado com FeCl3∙6H2O em diclorometano, em rendimentos de bons à excelentes, baixo tempo reacional e alta α-estereosseletividade. Subsequentemente, os glicosídeos foram acoplados com 2-azido-1,4-naftoquinona formando uma nova série de derivados 1,2,3-1H-triazolil O-glicosídeos através da reação Click.

Submitted by Cássio da Cruz Nogueira (cassionogueirakk@gmail.com) on 2017-01-31T12:07:49Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EstudosCitotoxidadeGenotoxicidade.pdf: 1733760 bytes, checksum: 0cca3fb160419636f3ea55387b97b442 (MD5) / Approved for entry into archive by Edisangela Bastos (edisangela@ufpa.br) on 2017-02-01T12:16:39Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EstudosCitotoxidadeGenotoxicidade.pdf: 1733760 bytes, checksum: 0cca3fb160419636f3ea55387b97b442 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-02-01T12:16:39Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertacao_EstudosCitotoxidadeGenotoxicidade.pdf: 1733760 bytes, checksum: 0cca3fb160419636f3ea55387b97b442 (MD5) Previous issue date: 2014-09-30 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O objetivo do presente trabalho foi realizar estudos fitoquímicos de E. plicata, bem como avaliar a citotoxicidade, o papel do estresse oxidativo e a genotoxicidade. O pó dos bulbos de E. plicata foi submetido à maceração com etanol, a solução concentrada até resíduo em rotaevaporador. O extrato etanólico foi submetido ao fracionamento em coluna cromatográfica aberta de sílica gel, sendo utilizado como fase móvel solventes de polaridade crescente. A fração diclorometano foi submetida ao refracionamento em cromatografia em camada preparativa, utilizando como fase móvel o diclorometano, sendo obtidas 3 subfrações. O extrato etanólico, suas frações e subfrações foram submetidos a análises cromatográficas e espectrofotométricas. Todas as amostras foram submetidas aos ensaios: viabilidade celular (MTT), da capacidade antioxidante (DPPH), cometa e micronúcleo. A partir do extrato etanólico obteve-se uma fração rica em naftoquinona (Fração diclorometano). O fracionamento desta levou ao isolamento da isoeleuterina (fração S2 e majoritária), sendo a fração S3 minoritária (não identificada e não testadas). Estudos cromatográficos e espectrofotométricos permitiram a identificação de S2 (isoeleuterina). O fracionamento contribuiu positivamente para citotoxicidade em células VERO, sendo a amostra mais citotóxica a S1. Para células HepG2, a citotoxicidade foi concentração dependente, sendo que o fracionamento não contribuiu positivamente para esta. Também, em relação ao tempo, quanto maior o tempo de exposição, menor foi a citotoxicidade para as células HepG2. A capacidade antioxidante máxima foi observada para subfração S1, sendo que esta possuiu baixa genotoxicidade em ambos os métodos e foi a mais citotóxica. A fração diclorometano possui uma capacidade antioxidante intermediaria, porém apresentou uma elevada genotoxicidade no ensaio do micronúcleo. A isoeleuterina (S2) mostrou-se menor capacidade antioxidante, menor citotoxicidade e resultados conflitantes na genotoxicidade. O extrato etanólico possuiu a menor capacidade antioxidante, genotoxicidade moderada e menor citotoxicidade. Ao se analisar os resultados verifica-se que: a subfração S1 é a mais promissora como candidato a 9 fármaco antimalárico, visto possuir taxas de citotoxicidade e genotoxicidade em níveis aceitáveis. A isoeleuterina necessita de investigações complementares sobre a genotoxicidade. Em relação à fração diclorometano desaconselha-se seu uso para o desenvolvimento do medicamento antimalárico, visto ser a mais genotóxica. / The purpose of this study was phytochemical studies of E. plicata, and to evaluate the cytotoxicity, the role of oxidative stress and genotoxicity. The powder of E. plicata bulbs underwent maceration with ethanol, the solution concentrated to residue in rotaevaporator. The ethanol extract was subjected to fractionation by open column chromatography over silica gel, being used as the mobile phase solvents of increasing polarity. The dichloromethane fraction was subjected to fractionation by preparative layer chromatography using dichloromethane as mobile phase, and 3 subfractions obtained. The ethanol extract, fractions and subfractions were subjected to chromatographic and spectrophotometric analysis. All samples were subjected to the tests: cellular viability (MTT), the antioxidant capacity (DPPH), comet and micronucleus assays. From the ethanol extract obtained a rich fraction naphthoquinone (dichloromethane fraction). Fractionation of this led to the isolation of: S1, S2 (major fraction), and fraction of minority S3 (unidentified, not tested). Chromatographic studies and spectrophotometric allowed the identification of S2 (isoeleuterin). Fractionation contributed positively to cytotoxicity on VERO cells, the sample being more cytotoxic to S1. The cytotoxicity in HepG2 cells was concentration dependent, being the fractionation did not contribute positively to this. Also, over time, the longer the exposure time, the lower the cytotoxicity to HepG2 cells. The maximum antioxidant activity was observed for subfraction S1, and this low genotoxicity possessed by both methods and it was the most cytotoxic. The dichloromethane fraction has an intermediate antioxidant capacity, but had a high genotoxicity in micronucleus assay. The isoeleuterin (S2) was lower antioxidant capacity, lower cytotoxicity and genotoxicity conflicting results. The ethanol extract possessed the lowest antioxidant capacity, moderate genotoxicity and lower cytotoxicity. When analyzing the results occur that: a subfraction S1 is the most promising candidate as the antimalarial drug, as have cytotoxicity and genotoxicity rates at acceptable levels. The isoeleuterin needs additional research on 11 genotoxicity. Regarding the dichloromethane fraction was not advisable to use for the development of an antimalarial drug, since it is more genotoxic.

O presente trabalho trata da semissíntese de análogos de importantes compostos líderes (afidicolina, lausona, lapachol e CAPE) utilizando técnicas de química medicinal como bioisosterismo, adição de grupamento funcional e simplificação molecular. Dessa forma foi possível obter uma biblioteca de análogos racionais, visando a manipulação de parâmetros físico-químicos e estruturais, para fins de bioprospecção. Foram desenvolvidos derivados de afidicolina mais lipofílicos, por meio da acilação das hidroxilas presentes na estrutura química deste terpeno. Tentativas de formação de bioisósteros, sais e de ésteres fosfato das hidroxinaftoquinonas naturais - lapachol e lausona, foram realizadas visando avaliar a influência do pKa sobre a atividade deste tipo de moléculas, bem como aumentar hidrossolubilidade. Neste caso, foram observadas reações paralelas, como um rearranjo molecular para a formação de aminonaftoquinonas, no estudo da cicloadição de azida de sódio com grupos cianos. Ademais, foi estudado o efeito da simplificação molecular de CAPE (fenetil éster do ácido cafeico), visando entender os requisitos estruturais de atividade antitumoral desta classe de compostos. Neste trabalho, foram obtidas 14 moléculas e testadas para diferentes atividades biológicas. Derivados naftoquinoidais se mostraram ativos frente à inibição de DHODH em ensaio sobre a enzima e também em ensaio celular. Adicionalmente, análogos simplificados do CAPE apresentaram alta atividade antitumoral, com segurança, em comparação ao controle 5-fluorouracila. / The present study aimed the semi-synthesis of analogues from important lead compounds (aphidicolin, lausone, lapachol and CAPE) by using medicinal chemistry strategies, such as bioisosterism, addition of functional groups and molecular simplification. Thus, we obtained a library of rational analogues, aiming the manipulation of physicochemical and structural parameters with bioprospecting purposes. We developed more lipophilic aphidicolin derivatives by acylation of the hydroxyl groups present in the structure of this terpene. Attempts towards the development of phosphate salts bioisosters from the hydroxinaftoquinones lapachol and lausone in order to evaluate the influence the pKa in the biological activity of these class compounds as well as to increase the water solubility. In this last case, we observed parallel reactions, as a molecular rearrangement for the formation of the aminonaftoquinones during the study of cycloaddition with cyanides and azides. In addition, we studied the effects of molecular simplification of CAPE (caffeic acid phenethyl ester), to better understand the structural requirements for antitumoral activity of this class of compounds. In the present work we obtained 14 molecules which were also tested for different biological activities. Naftoquinoidais derivatives showed inhibition activity on enzymatic essay on DHODH and on cellular essay. Moreover, simplified molecules from CAPE showed high antitumoral activity and safety in comparison to the control 5- fluorouracil.