Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, 2008. / Submitted by Rosane Cossich Furtado (rosanecossich@gmail.com) on 2010-05-11T13:34:11Z No. of bitstreams: 1 2008_LuzirlaneSantosBarbosa.pdf: 1787338 bytes, checksum: c285de346c12fe20d14274cccecfc91d (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-05-12T04:40:18Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_LuzirlaneSantosBarbosa.pdf: 1787338 bytes, checksum: c285de346c12fe20d14274cccecfc91d (MD5) / Made available in DSpace on 2010-05-12T04:40:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_LuzirlaneSantosBarbosa.pdf: 1787338 bytes, checksum: c285de346c12fe20d14274cccecfc91d (MD5) Previous issue date: 2008-03-28 / A Magnetohipertermia (MHT) e a Terapia Fotodinâmica (TFD) são terapias promissoras para o tratamento do câncer pelas possibilidades de redução de efeitos colaterais em relação às terapias convencionais. Ambas podem ser abordadas de forma especial pela Nanotecnologia por meio da produção de materiais nanoestruturados. Dentre estes estão as nanopartículas magnéticas (NPM) que podem ser encapsuladas em lipossomas (L), constituindo os magnetolipossomas (ML). O comportamento magnético das NPM confere interesse especial na utilização do ML no diagnóstico e tratamento do câncer por MHT. Os ML podem conter agentes fotossensibilizantes e assim serem utilizados também na TFD. Buscando conhecer os efeitos biológicos e terapêuticos relacionados à utilização conjunta dessas duas técnicas no tratamento de neoplasias, foi desenvolvido um novo material que se baseia em lipossomas furtivos contendo o fotossensibilizador zinco-ftalocianina (ZnF) e NPM de ferrita de cobalto recobertas com ácido cítrico, o MLPEG-ZnF (4,8 × 1014 partículas/ mL). O trabalho foi desenvolvido em seis etapas. Na primeira foi determinado que o tempo de exposição ao campo magnético (AC,1 MHz,40 Oe) em animais tratados com FeCoML (amostra similar ao MLPEG-ZnF, mas sem o ZnF) deve ser de 3 minutos. Nas etapas 2 a 5 foi feita avaliação da biocompatibilidade de MLPEG-ZnF e seus sub-componentes (LPEG, MLPEG, LPEG-ZnF), em animais saudáveis, submetidos ou não ao campo magnético AC (MHT) e/ou laser (TFD). De maneira geral, os testes mostraram atividade inflamatória não severa e temporária (citometria do sangue e do peritônio) aumentada pelo campo magnético, pequena redução da viabilidade celular, ausência total de genotoxicidade (testes do micronúcleo) e processos inflamatórios sobretudo nos pulmões (morfologia do fígado, pulmóes e baço). E a sexta etapa visou verificar a possível remissão tumoral em animais portadores do Tumor Ascítico de Ehrlich (TAE) que receberam injeção da amostra MLPEG-ZnF e foram em seguida submetidos ao campo magnético ou ao laser. Foi constatado (testes AgNOR, viabilidade celular, volume e padrão hemorrágico do ascite, citometria, células claras/escuras, peso e sobrevida do animal) que, nas condições experimentais usadas, nenhum dos tratamentos causou remissão total do tumor, mas pode ser observada significativa atividade antiproliferativa, sobretudo quando após o tratamento com MLPEG-ZnF, os animais eram submetidos ao laser, evidenciando mais vantagens do sistema para realização da TFD do que para a MHT. Os resultados sugerem que com ajustes na amostra ou nas condições experimentais, o tratamento mediado por MHT e TFD é viável e poderá resultar em vantagens muito importantes na terapia do câncer. ____________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Magnetohyperthermia (MHT) and Photodynamic therapy (TFD) are promising therapies for the cancer treatment due to the possibilities of collateral effects reduction when compared to the conventional therapies. Both therapies may be focused in a special way using the nanostructured materials produced by the nanobiotechnology. Among these materials are the magnetic nanoparticles (NPM). NPM may be encapsulated in liposomes (L) to constitute the magnetoliposomes (ML). The NPM magnetic behavior gives special importance in the ML use for cancer diagnostic and MHT treatment. ML may contain photosensitizers to be used in TFD process. With the aim to better understand the biological and therapeutic effects related to the simultaneous use of both therapies in the treatment of tumors, was developed a new material based in furtive liposomes containing the photosensitizer zinc-phtalocianine (ZnF) and citrate coated cobalt-ferrite NPM, the MLPEG-ZnF (4,8 × 1014 particle/mL). This work was performed in 6 steps. In the first one, it was determined that the time of exposure to the magnetic field (AC,1 MHz,40 Oe) in animals with FeCoML (a sample similar to the MLPEG-ZnF, but without ZnF) has to be 3 minutes. In the steps 2 to 5 was done an evaluation of the MLPEG-ZnFsample and its sub-components (LPEG, MLPEG, LPEG-ZnF) biocompatibility in healthy animals submitted or not to the Ac magnetic field (MHT) and/or to the laser (TFD). As a rule, tests showed not severe and temporary inflammatory activity (blood and peritoneum cytometry) that was increased by the AC magnetic field, small reduction of cellular viability, absence of genotoxicity (micronucleus test) and inflammatory process in the lungs (morphology analysis of the liver, lungs and spleen). The sixth step had the aim of verifying the possible tumor remission in Erlich Ascitic Tumor(TAE) portable animals after injection of MLPEG-ZnF and subsequent AC field and/or laser submission. It was observed (by AgNOR tests, cellular viability, ascite volume and hemorrhagic pattern, cytometry, clear/dark cells, animal weight and survival) that in the used experimental conditions, no treatment caused the tumor total remission. Nevertheless, it was observed a significant antiproliferative activity, mainly after the MLPEG-ZnF treatment and subsequent laser exposure, evidencing that this system is more adequate to the TFD performance than to the MHT process. The results suggest that after the sample or experimental conditions adjustments, the treatment mediated through MHT and TFD is viable and vantageous to the cancer treatment.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Animal, 2006. / Submitted by Jaqueline Ferreira de Souza (jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-04-16T20:52:34Z No. of bitstreams: 4 2006_RenataMirandaParca_PrimeiraParte.pdf: 428556 bytes, checksum: 960963256263d8f5f1459b76af465dae (MD5) 2006_RenataMirandaParca_SegundaParte.pdf: 7428415 bytes, checksum: de0ab6bdd6c4fae9b9dbeada79f6d099 (MD5) 2006_RenataMirandaParca_TerceiraParte.pdf: 9069933 bytes, checksum: 1f91bce0dd5b52b047647e725b91e544 (MD5) 2006_RenataMirandaParca_QuartaParte.pdf: 303236 bytes, checksum: d9343d756fa1f2cac90edc3e64f67cfd (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-04-16T20:54:44Z (GMT) No. of bitstreams: 4 2006_RenataMirandaParca_PrimeiraParte.pdf: 428556 bytes, checksum: 960963256263d8f5f1459b76af465dae (MD5) 2006_RenataMirandaParca_SegundaParte.pdf: 7428415 bytes, checksum: de0ab6bdd6c4fae9b9dbeada79f6d099 (MD5) 2006_RenataMirandaParca_TerceiraParte.pdf: 9069933 bytes, checksum: 1f91bce0dd5b52b047647e725b91e544 (MD5) 2006_RenataMirandaParca_QuartaParte.pdf: 303236 bytes, checksum: d9343d756fa1f2cac90edc3e64f67cfd (MD5) / Made available in DSpace on 2011-04-16T20:54:44Z (GMT). No. of bitstreams: 4 2006_RenataMirandaParca_PrimeiraParte.pdf: 428556 bytes, checksum: 960963256263d8f5f1459b76af465dae (MD5) 2006_RenataMirandaParca_SegundaParte.pdf: 7428415 bytes, checksum: de0ab6bdd6c4fae9b9dbeada79f6d099 (MD5) 2006_RenataMirandaParca_TerceiraParte.pdf: 9069933 bytes, checksum: 1f91bce0dd5b52b047647e725b91e544 (MD5) 2006_RenataMirandaParca_QuartaParte.pdf: 303236 bytes, checksum: d9343d756fa1f2cac90edc3e64f67cfd (MD5) / Fluidos magnéticos (FMs) são suspensões coloidais estáveis contendo nanopartículas magnéticas (NPMs), com diâmetro usualmente variando entre 5 e 15 nm, recobertas por uma camada estabilizante de natureza orgânica ou inorgânica e dispersas em líquidos carreadores. As partículas magnéticas mais frequentemente usadas são ferritas cubicas, incluindo magnetita (Fe3O4) e magnetita (Fe2O3). Nos últimos anos, os FMs têm sido considerados materiais promissores visando a novas aplicações na área biomédica. Com a finalidade de compreender melhor os efeitos in vivo dos FMs, o presente estudo reporta testes de biocompatibilidade em fígado de camundongos com uma amostra de FM Ã base de NPMs de magnetita recobertas com ácido meso-2,3- dimercaptosuccínico (DMSA). Os testes foram realizados entre um e cento e vinte dias após a injeção de 100 μl de amostra contendo 4,3 x 1016 partículas/cm3. Para as análises de biocompatibilidade, foram realizados estudos em microscopia de luz e microscopia eletrônica de transmissão. Os resultados de microscopia de luz revelam que a partícula, em fígado, foi considerada biocompatível, pois apesar de ter causado leve reação inflamatória no órgão, este não sofreu alterações morfológicas. As nanopartículas, a partir de um dia de tratamento, eram fagocitadas por células de kupffer e em quinze dias de exposição ao FM-DMSA foram detectadas dentro de céulas endoteliais. As análises de microscopia eletrônica confirmam esses dois dados. Ainda com quinze dias foram encontradas NPMs entre dois hepatícitos, o que sugere sua eliminação via canalículos biliares como compostos integrantes da bile. Aos trinta dias de tratamento com FM-DMSA houve um aumento do número de NPMs no fígado, observado visualmente em análises de microscopia de luz. Essa observação foi corroborada por dados da literatura, o que indica que o fígado tem papel central no metabolismo e eliminação das NPMs. Aos sessenta, noventa e cento e vinte de tratamento, NPMs foram encontradas, principalmente, em espaços-porta dentro de ductos biliares e em seu conjuntivo intersticial. A análise de contagem da média de focos inflamatórios no parênquima do fígado nos animais experimentais revelou que o FM-DMSA gera uma leve reação inflamatória que regride com o tempo, assemelhando-se ao grupo controle. Portanto, o FM-DMSA pode vir a ser utilizado, no futuro, como uma ferramenta na escala manométrica para estudos de aplicações biomédicas no fígado. _______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Magnetic fluids (FMs) are stable colloidal suspensions containing magnetic nanoparticles (MNPs), with diameter usually ranging from 5 to 15 nm, surfacecoated by an organic or inorganic stabilizer and dispersed in liquid carriers. Most frequently used magnetic nanoparticles are iron oxide, including magnetite (Fe3O4) and maguemite (Fe2O3). MFs have emerged as a promising material basis for new possibilities in the biomedical field. In order to better understand the in vivo effects of MFs, the present study reports the biocompatibility in mice liver of a magnetite nanoparticle surface-coated with meso-2,3- dimercaptosuccinic acid (DMSA). The test was performed from one to 120 days after intravenous injection of 100 μl sample containing about 4,3 x 1016 particles/cm3. Biocompatibility was investigated through light microscopy and electron transmission microscopy. Light microscopy results revealed that FMDMSA is a biocompatible nanoparticle, because the liver did not show morphological alterations. The MNPs, at 1 day of treatment, were phagocited by kupffer cells and at 15 th days, they were detected into endothelial cells. Electron microscopy results confirmed both data. In addition, at 15th days, the NPMs were also found between two hepatocytes, suggesting the elimination by the billiar canaliculi as a bile component. At 30 th day of treatment with FM-DMSA the number of MNPs in the liver increased, as visually observed by light microscopy. It is confirmed by the literature, what indicates the liver central role in the metabolism and elimination of the MNPs. At 60 th, 90 th and 120 th day, the MNPs were mainly detected in liver portal space inside the bile ducts and in the intersticial connective. Inflammatory focuses counting reveled that FM-DMSA induced a small inflammatory reaction that reduces with time, became similar with the control group.The results above suggest that FM-DMSA could be a nanotool for specific biomedical studies and therapies in liver.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Biologia, 2011. / Submitted by wiliam de oliveira aguiar (wiliam@bce.unb.br) on 2011-07-07T20:20:16Z No. of bitstreams: 1 2011_JulianaMachadoBraz.pdf: 662383 bytes, checksum: e5417a9c8dbdce370c727caca2610533 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Ferreira de Souza(jaquefs.braz@gmail.com) on 2011-07-13T21:15:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_JulianaMachadoBraz.pdf: 662383 bytes, checksum: e5417a9c8dbdce370c727caca2610533 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-07-13T21:15:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_JulianaMachadoBraz.pdf: 662383 bytes, checksum: e5417a9c8dbdce370c727caca2610533 (MD5) / Nanopartículas de maguemita recobertas com ácido 2,3-dimercarptosuccínico (FM-DMSA) apresentam distribuição preferencial para o pulmão sendo internalizadas por macrófagos; processo que pode ocorrer pela opsonização por proteínas plasmáticas. A fim de determinar a estabilidade das nanopartículas, em diferentes meios de dispersão, o diâmetro hidrodinâmico foi obtido por espalhamento dinâmico de luz, em diferentes concentrações de albumina sérica bovina (BSA) e soro de camundongo (SC). Essas concentrações foram utilizadas para ensaios de sedimentação em espectrofotômetro, por 180 minutos. Nos ensaios de internalização, macrófagos alveolares e peritoneais foram tratados com 0,03 ou 0,06 mgFe/mL FM-DMSA na presença de 4,5% de SC ou 1,5% e 2,5% de BSA em meio de cultura, por 2h à temperatura ambiente (TA). Foi utilizado como controle positivo poli-L-lisina em meio de cultura e apenas meio de cultura como controle negativo. Na determinação intracelular de ferro utilizou-se o kit de Ferrozine da Labtest, com modificações. A produção das citocinas IL-10, IL-6, IL-1ß, TNF-a e TGF-ß foi analisada por ELISA. A avaliação da citotoxicidade foi verificada pelo ensaio com MTT, após 2h30 a TA ou 2h30 e 12h a 37°C e 5% de CO2 atmosférico. Observou-se diâmetros hidrodinâmicos equivalentes e ausência de sedimentação para as concentrações de 4,5% para o SC nas duas concentrações de ferro testadas e de 1,5% e 2,5% para o BSA nas concentrações de 0,03 mgFe/mL e 0,06 mgFe/mL, respectivamente. A internalização de ferro foi significativamente menor para os grupos com FM-DMSA e SC em relação aos grupos incubados com FM-DMSA e BSA e em relação ao controle positivo, não havendo diferença em relação ao controle negativo. A baixa internalização observada para o FM-DMSA na presença de SC demonstra que a opsonização pode não ser a principal via de internalização. Mesmo com aumento da internalização para alguns grupos experimentais, não houve citotoxicidade do FM-DMSA. A dosagem das citocinas demonstrou que os macrófagos alveolares e peritoneais incubados com o FM-DMSA produzem IL-1ß e TNF-a em níveis basais, indicando a baixa atividade pró-inflamatória. Por outro lado, houve maior produção de TGF-ß, IL-10 e IL-6 pelos macrófagos peritoneais que indica a ocorrência de uma resposta antiinflamatória para os macrófagos peritoneais. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Maghemite nanoparticles coated with 2,3-dimercarptosuccinic acid (MNP-DMSA) showed preferential distribution to lungs, where they are uptaken by resident macrophages. Internalization can occur due to opsonization by serum proteins. This study evaluated the effects of MNP-DMSA on the viability, phagocyte activity, and cytokine production by murine macrophages. The hydrodynamic diameter of nanoparticles was obtained by dynamic light scattering in RPMI-1640 with bovine serum albumin (BSA) or mouse serum (MS) to determine the concentration of BSA and MS that have equivalent nanoparticle diameters. These concentrations were used for sedimentation assays in spectrophotometer for 180 minutes. For internalization analysis, peritoneal and pulmonary macrophages obtained from mice were treated with MNP-DMSA at concentrations of 0.03 and 0.06 mgFe/mL with 4.5% of MS or 1.5 % and 2.5% BSA in RPMI-1640 for 2 hours at room temperature (RT). Treatment with poly-L-lysine was used as positive control and medium without MNP-DMSA as negative control. For determination of intracellular iron, ferrozine kits from Labtest were used, with modifications. Production of IL-10, IL-6, IL-1 , TNF- and TGF- were analyzed by ELISA. Cytotoxicity with MTT assays was analyzed for 2h30 at RT or 2h30 and 12h at 37 °C and atmosphere with CO2 at 5%. MS and BSA concentrations showed equivalent nanoparticle hydrodynamic diameter and no sedimentation for MS at 4.5%, in both iron concentrations used, and for BSA at 1.5% (for 0.03 mgFe/mL) and 2.5% (for 0.06 mgFe/mL). The internalization of iron was significantly lower for groups with MNP-DMSA incubated with MS than for those incubated with BSA and positive controls. There was no significant difference between the negative control group and the macrophages incubated with MNP-DMSA in MS. The low internalization of MNP-DMSA in the presence of MS demonstrates that opsonization of serum proteins may not be the main route of internalization. Cytokine levels showed that the pulmonary and peritoneal macrophages incubated with MNP-DMSA produced IL-1 and TNF-a at baseline levels, indicating a low pro-inflammatory activity. On the other hand, there was an increase in TGF- , IL-10 and IL-6 by peritoneal macrophages, indicating that peritoneal macrophages have an anti-inflammatory activity.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-graduação em Biologia Animal, 2013. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2014-02-10T14:20:34Z No. of bitstreams: 1 2013_RenataCarvalhoSilva.pdf: 4451431 bytes, checksum: 1ab1cd7ef589f2e5dc5061124ef5ae6b (MD5) / Approved for entry into archive by Guimaraes Jacqueline(jacqueline.guimaraes@bce.unb.br) on 2014-02-10T14:29:26Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_RenataCarvalhoSilva.pdf: 4451431 bytes, checksum: 1ab1cd7ef589f2e5dc5061124ef5ae6b (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-10T14:29:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_RenataCarvalhoSilva.pdf: 4451431 bytes, checksum: 1ab1cd7ef589f2e5dc5061124ef5ae6b (MD5) / A terapia fotodinâmica (TFD) é uma terapia alternativa a cura de diversas doenças, entre elas o câncer. Um novo conjunto de fármacos fotossensibilizantes (FS) de origem natural oriunda de extratos e óleos vegetais tem sido testado na terapia contra o câncer. Porém, a maioria desses fármacos FS apresentam alguns entraves para uso clínico e nesse contexto, as nanoemulsões poliméricas, sistemas cineticamente estáveis, apresentam diversas potencialidades como sistemas carreadores de fármacos. O objetivo do presente estudo foi identificar e avaliar as possíveis propriedades fotoquímicas e fotofísicas do extrato clorofórmico de partes aéreas de crajiru (Arrabidaea chica) livre (ECr) e incorporado em nanoemulsão polimérica (NanoECr) e testar os efeitos da nanoemulsão na TFD contra células de adenocarcinoma mamário murino (4T1) in vitro. Por análises no espectrofotômetro, tanto o ECr quanto a NanoECr apresentaram absorbância em comprimento de onda de 670 nm e fluorescência em 690 nm e apresentaram produção de espécies reativas de oxigênio pelo teste de decaimento da absorbância do benzofurano, características fundamentais para serem considerados fármacos úteis em TFD. Pela técnica de espalhamento dinâmico da luz, a NanoECr apresentou diâmetro hidrodinâmico médio de 370,5 ± 264,31 nm, PdI de 0,133 ± 0,01 e carga de superfície de – 36,1 ± 0,15 mV, características que predizem que a formulação é estável. Nas microscopias eletrônicas de transmissão (MET) e varredura (MEV), as NanoECr apresentaram morfologia esférica e superfície rugosa com diâmetros médios de 374 ± 117 nm (MET) e 367 ± 69 nm (MEV antes da metalização) e 488 ± 70 nm (após metalização), sendo a MEV sem metalização o protocolo adequado para caracterização morfométrica dessas nanoestruturas. Após incubação da linhagem celular 4T1 com a NanoECr em várias concentrações na ausência de irradiação, foi determinada, por MTT, a concentração não tóxica (54 µg/mL) e em seguida, por espectrofotômetro e microscopia confocal o tempo máximo de interação da NanoECr com a linhagem 4T1 (15 minutos). Associando 54 µg/mL de NanoECr, por 15 min com irradiação com laser de comprimento de onda de 670 nm, morte celular ocorreu quando as células foram 2 2irradiadas com doses de energia variando entre 8,57 J/cm a 85,7 J/cm, e apenas na 2dose de energia de 85,7 J/cm (maior dose de energia utilizada no experimento) ocorreu 100% de morte celular. Na avaliação do tipo de morte celular, as células 2irradiadas em doses de energia de 25,7 J/cm apresentaram morte por apoptose, visualizada em microscopia confocal pela intensa marcação em laranja de corpos apoptóticos (laranja de acridina) e pela visualização de blebs e danos a mitocôndrias e 2retículo endoplasmático observados em MET. Já na dose de 85,7 J/cm, a necrose foi o tipo de celular ocorrido, observado pela intensa marcação do citoplasma das células em vermelho (brometo de etídeo) em microscopia confocal e por danos a membrana plasmática com extravasamento de conteúdo celular e presença de vacúolos no interior das células observadas em MET. Concluiu-se que o extrato clorofórmico de partes aéreas do crajiru incorporado em nanoemulsões poliméricas de PVM/MA é uma potencial formulação fotossensibilizante para uso em TFD. Além disso, as características desta preparação oferecem a perspectiva de que esta possa ser utilizada como um fotossensibilizante de 3ª geração na TFD. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Photodynamic therapy (PDT) is an alternative therapy to cure a lot of diseases, including cancer. A new set of photosensitizing (PS) drugs arising from natural plants, as vegetable oils and extracts have been tested in cancer therapy. However, most of these PS drugs present some difficulties for clinical use and in this context, polymeric nanoemulsions, kinetically stable systems, have several potential as drug carrier systems. The aim of this study was to identify and evaluate possible photochemical and photophysical properties of the chloroform extract of aerial parts of crajiru (Arrabidaea chica) free (ECR ) and incorporated in polymeric nanoemulsion (NanoECr) and test the effects of this nanoemulsion in PDT against murine mammary adenocarcinoma cells ( 4T1 ) in vitro. By spectrophotometer analysis in both the ECr and NanoECr showed absorbance at a wavelength of 670 nm and fluorescence at 690 nm and production of reactive oxygen species by the decay of the absorbance of the test benzofuran, key features to be considered useful drugs in PDT. At the technique of dynamic light scattering, the NanoECr had an average hydrodynamic diameter of 370.5 ± 264.31 nm , PdI of 0.133 ± 0.01 and surface charge of - 36.1 ± 0.15 mV , characteristics that predict the formulation is stable. At transmission electron microscopy (TEM) and scanning electron microscopy (SEM), the NanoECr showed spherical morphology and a rough surface with an average diameter of 374 ± 117 nm (TEM), 367 ± 69 nm (SEM before etallization) and 488 ± 70 nm (SEM after metallization). The SEM without metallization was the most suitable protocol for morphometric characterization of these nanostructures. After incubation of 4T1 cell line with various NanoECr concentrations in the absence of irradiation, non-toxic concentration (54 µg/mL) was determined by MTT and then by confocal microscopy and spectrophotometer the maximum time of interaction between NanoECr and 4T1 line (15 minutes) was also determined. Associating 54 µg/mL of NanoECr for 15 min and irradiating the cells with a laser of 670 nm wavelength, cell death occurred when 2 2the cells were irradiated with energy ranging from 8.57 J/cm to 85.7 J/cm and only on 2the energy dose of 85.7 J/cm (higher dose of energy used in the experiment) occurred 100 % of cell death. Evaluating the type of cell death, cells irradiated at a energy dose 2of 25.7 J/cm had death by apoptosis, visualized by intense cytoplasmic stainning of the apoptotic bodies with acridine orange in confocal microscopy and a visualization of blebs and mitochondria and endoplasmic reticulum damage observed in TEM. At a 2,energy dose of 85.7 J/cm necrosis was the type of cellular occurred noted by intense staining of cells cytoplasm in red (ethidium bromide) in confocal microscopy and cell membrane damage with leakage of cellular contents and presence of vacuoles inside the cells observed in TEM. We can conclude that the chloroform extract of the aerial parts of crajiru incorporated in polymeric nanoemulsions is a potential photosensitizer formulation for use in PDT. Furthermore, the characteristics of this formulation offer the prospect that it can be used as a 3rd generation photosensitizer in PDT.

O sistema de tratamento do aço tem sido utilizado com o objetivo de aumentar a resistência à corrosão e melhorar a adesão da tinta sobre o substrato. Porém, a fosfatização convencional traz danos ao meio ambiente. Com o intuito de realizar o desenvolvimento sustentável, novos processos de tratamentos têm sido desenvolvidos a fim de substituir o processo de fosfatização, reduzir o impacto ambiental e promover o progresso nos tratamentos. Neste trabalho foi realizada uma avaliação comparativa entre dois tratamentos superficiais para aço de baixo carbono isentos de metais pesados (nanocerâmico e silano) e a fosfatização. Para este estudo foram utilizadas chapas de aço carbono 1020 laminado a frio como substrato. Com o objetivo de verificar a resistência anticorrosiva dos tratamentos sem pintura foram realizados ensaios de exposição à umidade, imersão em água, imersão em soluções aquosas de pH 2 e pH 10 e curvas de polarização anódicas e catódicas e em soluções de NaCl, NaOH e H2SO4. As amostras pintadas com tinta a pó microtexturizada foram submetidas aos ensaios de exposição à névoa salina neutra, dióxido de enxofre e umidade, além dos ensaios mecânicos de aderência, flexibilidade e impacto. Os resultados de resistência mecânica demonstraram um bom desempenho de todos os tratamentos. Quanto à resistência anticorrosiva pode-se verificar, a partir das curvas de polarização anódicas e catódicas,, que os tratamentos testados se comportam de maneira peculiar nos diferentes meios, mostrando uma ligeira superioridade com relação ao fosfato de zinco. Os resultados quanto a resistência à corrosão, para as amostras cujos tratamentos foram conjugados com pintura a pó, mostraram que todos os sistemas obtiveram comportamento semelhante e satisfatório. / The steel treatment system had been using with purpose of increase the corrosion resistance and to improve the paint adhesion on substratum. However, the conventional phosphatetion causes damage the environment. With purpose to permit a sustainable development, new treatment process has been developing in order to replace the phosphatetion process, to minimize the environmental impact and to promote the progress in the treatments. In this work has been carried out an assessment comparative between two different steel treatment area of low carbon, free of heavy metals (nanoceramic and silane) and the phosphatetion. During the study have been used as substratum, steel carbon plate 1020 which was laminated by cold. Having in mind to check the anticorrosive resistance treatments without painting, have been carried test out of exposure to humidity, water immersion besides immersion in water solution of pH 2 and pH 10 and variations of polarization anodic and cathodic besides solutions of NaCI, NaOH and H2SO4. The samples have painted with microtexturizada ink dust have been subjected test of exposition at the neutral saline mist, dioxide of sulfur and humidity, besides mechanical assays of tack, flexibility and impact. The resistance results mechanics had demonstrated a good performance of all the treatments. Regarding anticorrosive resistance, can been verified that from the anodic and cathodic curves of polarization, the tested treatments have had a peculiar performance in each different situations, showing a small superiority considering the phosphating of zinc. However the results of resistance corrosion, for the samples whose treatments had been conjugated with painting the dust, have been shown us that all the systems had gotten similar and satisfactory behavior.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:51:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo5266_1.pdf: 2109038 bytes, checksum: 48e5684a206159971ddb959e1a47fd1f (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2006 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Foram desenvolvidos três sistemas nanoestruturados contendo nanopartículas (NP) de prata cuja resposta óptica não linear foi engrandecida devido à excitação de plasmons superficiais nas NP. O primeiro material foi formado de NP de dióxido de titânio (TiO2), NP de prata, e corante-laser rodamina 610 em matriz de PVA. Sabe-se que materiais contendo dióxido de titânio e rodamina quando bombeados pelo segundo harmônico de um laser de Nd:YAG podem emitir laser devido ao corante e devido ao espalhamento múltiplo da emissão fluorescente no interior da amostra. Nós adicionamos NP de prata a este sistema para investigar a possibilidade de se obter um material com melhor eficiência devido à influência de plasmons superficiais das nanopartículas de prata. A suspensão coloidal de prata utilizada no primeiro experimento foi caracterizada antes e depois do tratamento a laser por espectroscopia de absorção óptica e microscopia eletronica de transmissão de para se evidenciar as mudanças estruturais das partículas. As NP de prata obtidas pela metodologia de ablação apresentaram uma dispersividade estreita o suficiente para os experimentos, porém nenhuma diminuição significativa no limiar do laser de corante no meio espalhador foi observada utilizando-se o compósito corante/ partículas de TiO2/ PVA/ NP de prata. O segundo material foi produzido para possíveis aplicações em áreas biomédicas. Este material foi constituído de uma estrutura formada por NP de sílica (caroços), para serem recobertas por nanocascas metálicas de ouro. Variando a espessura da casca metálica é possível ajustar a freqüência dos plasmons superficiais numa larga faixa espectral, desde o visível até o infravermelho próximo. Para o melhor conhecimento da composição química das partículas de sílica foi utilizada a técnica de mapeamento elementar por microscopia eletrônica de transmissão. Esta técnica possibilita a determinação dos elementos químicos existentes em uma quantidade pequena de partículas, permitindo a obtenção de informações sobre, os grupos orgânicos que podem ter ficado presos no interior das partículas ou em sua superfície. Estas informações foram importantes para as etapas subseqüentes. A funcionalização das partículas de sílica constitui uma etapa intermediária indispensável na formação das nanocascas que dependem de como se encontram as superfícies das partículas de sílica. Foi então utilizada a espectroscopia de transmitância na região do infravermelho para corroborar as análises de microscopia eletrônica. Após a formação da casca foram feitas análises de campo claro e campo escuro para caracterizar os resultados. Conseguimos dominar a técnica de síntese de formação das partículas de sílica no que diz respeito às dimensões e dispersividade, fatores importantes para a obtenção controlada de nanocascas metálicas. Em adição a isto, conseguimos controlar os processos de funcionalização e formação de nanoilhas na superfície dos caroços de sílica. O estágio final que consiste na coalescência das nanoilhas e a conseqüente formação da nanocasca ainda não foi completado. O terceiro material teve sua produção motivada pelas aplicações em estudos de ótica não linear. Após a produção deste material, formado por um polímero (matriz hospedeira) e NP de prata, foi possível medir o índice de refração não linear e o coeficiente de absorção não linear das amostras em questão. Este material foi obtido com uma metodologia muito simples onde o controle do crescimento das partículas foi conseguido utilizando-se radiação eletromagnética ou por meio de aquecimento. Na caracterização do polímero utilizado como hospedeiro para o crescimento de NP de prata foram utilizadas as técnicas de análise termogravimétrica, análise térmica diferencial e ressonância magnética nuclear. Para a identificação das partículas crescidas no interior da matriz polimérica foram utilizados espectros de absorção óptica e microscopia eletrônica de transmissão na região de campo claro. O polímero escolhido (poliéster ortoftálico) apresenta excelentes propriedades ópticas na região do visível. Demonstramos neste trabalho que é possível crescer nanopartículas metálicas em uma matriz de poliéster com pequena a moderada dispersividade. Em uma medida preliminar observou-se que este material nanoestruturado apresenta uma alta resposta não linear sendo promissor para estudos de óptica não linear

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-04-12T19:18:34Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Alessandra Flávia Dias Ramalho.pdf: 1964416 bytes, checksum: 46b0a0b9f331954d5d780f313d054ae5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-12T19:18:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Alessandra Flávia Dias Ramalho.pdf: 1964416 bytes, checksum: 46b0a0b9f331954d5d780f313d054ae5 (MD5) Previous issue date: 2017-02-13 / O gálio é um metal do grupo III A, número atómico 31 da tabela periódica, descoberto pela primeira vez em 1875 por Paul-Émile Lecoq de Boisbaudran, na França. Por sua baixa temperatura de fusão de 28,7 °C; é um dos poucos metais que é quase líquido à temperatura ambiente e pode derreter quando segurado na mão. Algumas das características do gálio lhes permitem interagir com processos celulares e proteínas biologicamente importantes, especialmente aquelas do metabolismo do ferro. Isso levou ao desenvolvimento de certos compostos de gálio como agentes de diagnóstico e terapêutica em medicina, inclusive para doenças infecciosas. Neste estudo, foi sintetizado um óxido à base de gálio, de composição não estequiométrica, por pirólise à combustão espontânea de Trietil Gálio e, posteriormente, oxidado a três temperaturas distintas, pelo sistema CVD (Chemical Vapor Deposition). As amostras do pó de óxido de gálio amorfo (a-GaxOy), obtidas, foram caracterizadas por Difração de Raios X (DRX), comprovando a existência de fase amorfa e início de cristalinidade; Espectroscopia por Dispersão em Energia (EDS), determinando o percentual atômico de gálio, oxigênio e carbono; Microscopia eletrônica de varredura (MEV), com avaliação morfológica estrutural externa das amostras, e Espectroscopia Raman. Visando, em estudos posteriores, o uso do referido óxido na composição de materiais odontológicos diversos, com finalidade antimicrobiana, o objetivo desta dissertação foi avaliar, inicialmente, sua citotoxidade, in vitro, pelo método do MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio), utilizando dois tipos de linhagem celular (RAW 264.7 e VERO). Posteriormente, foi avaliada sua atividade antimicrobiana, através da determinação da Concentração Inibitória Mínima (CIM) e da Concentração Bactericida Miníma (CBM), pela técnica da microdiluição, na presença de cepa bacteriana de Streptococcus mutans (S. mutans) AU 159, potentes bactérias iniciadoras da doença cárie dentária. Das amostras avaliadas, a que teve melhor resultado, quanto à citotoxidade, foi a amostra de a-GaxOy oxidada a 500 °C, com indícios de proliferação celular, sugestivo de biocompatibilidade, enquanto pelo ensaio de atividade antimicrobiana, verificou-se que a amostra de a-GaxOy, oxidada à temperatura de 300 ºC foi a que teve melhor resultado para inibição da multiplicação (bacteriostática) e crescimento bacteriano (bactericida). / Gallium, atomic number 31, is a metal that belongs to the group III A. It was discovered in 1875 by Paul-Emile Lecoq from Boisbaudran, in France. Due to its low melting temperature of 28.7 °C, it is one of the few metals that is almost liquid at room temperature and can melt if held by hand. A few of Gallium’s characteristics allow it to interact with cellular processes and biologically important proteins, especially those of iron’s metabolism. It led to the development of specific Gallium compounds as medical diagnostic and therapeutic agents, including infectious diseases. In this study a Gallium-based oxide of a non-stethymometric composition was synthetized by pyrolysis of spontaneous combustion of Triethyl gallium and then oxidized at three different temperatures by the system CVD (Chemical Vapor Deposition). The samples of amorphous gallium oxide powder were characterized by X Ray Diffraction, proving the existence of an amorphous phase and a crystallinity initiation; spectroscopy by dispersion in energy, determining Gallium, Oxygen and Carbon atomic percentage; Scanning electron microscopy with sample structural external morphology evaluation and Raman spectroscopy. Looking forward to studying in the future the usage of the above mentioned oxide in different odonatological material composition with an antimicrobial goal, this thesis’ goal is to initially evaluate its cytotoxicity in vitro by MTT method (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio), utilizing two types of cell line (RAW 264.7 and VERO). Posteriorly its antimicrobial activity was evaluated by determining its Minimal Inhibitory Concentration and its Minimum Bactericidal Concentration using the microdilution technique in the presence of Streptococcus mutans (S. mutans) bacterial strain AU 159, potent bacteria that initiates dental cavity disease. Among all evaluated samples, the one that had best cytotoxicity results was the a-GaxOy oxidized at 500 °C with signs of cell proliferation, suggesting biocompatibility. Through antimicrobial activity assay it was possible to verify that the a-GaxOy sample oxidized at 300 °C was the one with best result for inhibition of multiplication (bacteriostatic) and bacterial growth (bactericidal).

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-06-01T19:49:04Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Kaline Sandrelli Amorim Ferreira.pdf: 1526807 bytes, checksum: ab0a7e500a7c3f5cda1ad7a0aec8e656 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-01T19:49:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Kaline Sandrelli Amorim Ferreira.pdf: 1526807 bytes, checksum: ab0a7e500a7c3f5cda1ad7a0aec8e656 (MD5) Previous issue date: 2016-12-28 / O objetivo foi estudar o perfil de liberação do moxifloxacino encapsulado em lipossomas, no humor aquoso, como um sistema de liberação controlada para aplicação intracameral. Lipossomas contendo moxifloxacino (MFLX-Lipo) foram obtidos através do método de hidratação do filme lipídico e foram caracterizados de acordo com o tamanho das partículas e sua eficiência de encapsulação. Quinze coelhas foram utilizadas para o estudo do perfil de liberação in vivo. MFLX-Lipo foi injetado na câmara anterior do olho direito de cada animal. As coelhas foram divididas em 5 grupos e uma amostra de humor aquoso (HA) foi coletada após 2, 4, 8, 24 e 48 horas após a administração de MFLX-Lipo. As concentrações de moxifloxacino (MFLX) no HA foram analisadas por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC). MFLX-Lipo exibiu um tamanho médio de 60.5 ± 0.72 nm e uma distribuição do tamanho da partícula de 0.307. A eficiência de encapsulação do MFLX nos lipossomas foi de 92.24 ± 0.24%. No estudo de liberação in vivo do MFLX-Lipo, a concentração máxima de MFLX foi alcançada nas primeiras 2 horas após administração (4.16 ± 2.07 μg/mL) e foi seguida por um decréscimo na concentração intracameral, atingingo a concentração de 0.34 ± 0.05 μg/mL após 48 horas.A formulação lipossomal obtida exibe propriedades que a tornam adequada para a administração intraocular e oferece estabilidade e elevada eficiência de encapsulação. No estudo in vivo, MFLX-Lipo exibiu um perfil de liberação satisfatório no humor aquoso, o que sugere que se trata de uma opção para a profilaxia de patógenos frequentemente envolvidos na endoftalmite. / The purpose wasto study the release profile of moxifloxacin encapsulated in liposomes in the aqueous humor as a controlled release system for intracameral application. Liposomes containing moxifloxacin (MFLX-Lipo) were obtained using the lipid film hydration method and were characterized by particle size and encapsulation efficiency. Female rabbits were used for the in vivo profile release study. MFLX-Lipo was injected into the anterior chamber of each animal’s right eye. The rabbits were divided into 5 subgroups, and a sample of aqueous humor (AH) was collected 2, 4, 8, 24, and 48 hours after MFLX-Lipo administration. Moxifloxacin (MFLX) concentrations in the AH were analyzed using high performance liquid chromatography. MFLX-Lipo exhibited an average size of 60.5 ± 0.72 nm and a particle size distribution of 0.307. The encapsulation efficiency of MFLX in liposomes was 92.24 ± 0.24%. In the in vivo release study of MFLX-Lipo, the maximum concentration of MFLX was achieved within the first 2 hours after administration (4.16 ± 2.07 μg/mL) and was followed by a decrease in intracameral concentration (0.34 ± 0.05 μg/mL) until the 48-hour mark.The liposomal formulation obtained exhibits properties that make it suitable for intraocular administration and offers stability and high encapsulation efficiency. In the in vivo study, MFLX-Lipo exhibited a satisfactory aqueous humor release profile, which suggests that it is an option for the prophylaxis of frequent endophthalmitis pathogens.

Submitted by Pedro Barros (pedro.silvabarros@ufpe.br) on 2018-07-31T22:04:36Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Maíra de Vasconcelos Lima.pdf: 1560671 bytes, checksum: dcade0e37de4455cf684dc79c6f22009 (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-02T17:20:34Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Maíra de Vasconcelos Lima.pdf: 1560671 bytes, checksum: dcade0e37de4455cf684dc79c6f22009 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-02T17:20:34Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Maíra de Vasconcelos Lima.pdf: 1560671 bytes, checksum: dcade0e37de4455cf684dc79c6f22009 (MD5) Previous issue date: 2017-02-03 / CAPES / A utilização de nanopartículas, de diferentes tipos e finalidades, vêm crescendo a cada ano. Provocando uma inevitável exposição ao meio ambiente e à saúde humana, o que tem motivado a realização de estudos direcionados aos impactos desses nanomateriais. Entre essas nanopartículas, estão os nanocristais fluorescentes de semicondutores, os pontos quânticos (PQs), que vêm sendo bastante aplicados nas áreas biomédica e eletrônica. Dentro deste contexto, estudos com bioindicadores ambientais sensíveis, tais como os moluscos Biomphalaria glabrata, se faz relevante. Este trabalho teve por objetivo avaliar o potencial impacto de suspensões de PQs de CdTe no meio aquático, através do molusco Biomphalaria glabrata. Foram utilizadas suspensões de PQs de CdTe, estabilizados com ácido mercaptossuccínico (AMS) - 3 nm de diâmetro e pH 7,0. Para os bioensaios, primeiramente retirou-se o excesso de precursores da síntese, utilizando-se colunas de ultrafiltração, 10 kDa. Para os estudos de toxicidade aguda, foram utilizados embriões na fase de blástula e caramujos adultos pigmentados. Os embriões foram expostos às concentrações de 1,2; 2,5; 5; 10 e 20 nM e os animais adultos à 50; 100; 200 e 400 nM de PQs de CdTe, ambos por 24 h. Com a finalidade de verificar a fonte dos efeitos tóxicos, os animais foram submetidos ao AMS (50%) e ao sobrenadante da suspensão (SBS), em volumes de 2,5; 5; 10; 20 e 40 μL para embriões e 200; 400 e 800 μL para adultos. O grupo controle negativo continha água filtrada e declorada e o grupo controle positivo, niclosamida (Bayluscide-Bayer) à 3 μM, submetidos às mesmas condições dos grupos testes. Os embriões foram observados por 8 dias consecutivos através de microscópio estereoscópico. Os parâmetros observados foram viabilidade (eclosão) e inviabilidade (mortos e malformados). Os moluscos adultos foram avaliados quanto a sobrevivência e a mortalidade. Os indivíduos que sobreviveram à exposição foram submetidos a análise mutagênica, por meio do ensaio do micronúcleo. Em cada grupo foram analisadas 1000 células, em triplicata. Os PQs apresentaram aproximadamente 60 e 80% de mortalidade de embriões, para as concentrações de 1,2 e 2,5 nM respectivamente, e 100% de letalidade para as demais concentrações. A mortalidade teve um comportamento dose-dependência, aproximadamente 20; 56 e 68% para as concentrações de 50; 100 e 200 nM respectivamente, e 100% para 400 nM. Testes com AMS e o SBS não apresentaram mortalidade dos moluscos adultos e nem diferença significativa nos embriões. O controle negativo apresentou 100% de sobrevivência, o controle positivo 100% de mortalidade em relação aos embriões e aos moluscos adultos. Os hemócitos dos moluscos adultos sobreviventes às exposições apresentaram micronúcleos (MN), binucleações (BN) e apoptose celular (AP), e a AP apresentou diferença significativa quando comparada ao grupo controle negativo e demais grupos testes. Portanto, os resultados demonstraram que quanto maior a concentração de PQ de CdTe maior a toxicidade aos moluscos B. glabrata. Sugere-se que estes eventos estejam relacionados ao tempo de exposição à suspensão e à concentração de Cd²⁺. Assim o B. glabrata mostrou ser um bioindicador sensível para avaliar a toxicidade de PQs de CdTe em ambientes aquáticos. / The use of nanoparticles, of different types and purposes, has been growing every year. It causes an unavoidable exposure to the environment and to human health, which has motivated the realization of studies directed to the impacts of these nanomaterials. Among these nanoparticles are semiconductor fluorescent nanocrystals, quantum dots (QDs), which have been widely applied in biomedical and electronic areas. Within this context, studies with sensitive environmental bioindicators, such as the mollusks Biomphalaria glabrata, become relevant. The objective of this work was to evaluate the potential impact of suspensions of CdTe QDs on the aquatic environment, through the mollusks Biomphalaria glabrata. CdTe QDs suspensions, stabilized with mercaptosuccinic acid (MSA) - 3 nm in diameter and pH 7.0, were used. For bioassays, first the excess precursors came from the synthesis were removed using 10 kDa ultrafiltration columns. For the acute toxicity studies, it was used embryos in the blastula phase and adult pigmented snails. Embryos were exposed to CdTe QDs concentrations of 1.2; 2.5; 5; 10 and 20 nM and the adult animals at 50; 100; 200 and 400 nM, both for 24 h. In order to verify the source of the toxic effects, animals were also submitted to MSA (50%) and to the supernatant of the suspension (SBS), in volumes of 2.5; 5; 10; 20 and 40 μL for embryos and 200; 400 and 800 μL for adults. The negative control group contained filtered and dechlorinated water and the positive control group, niclosamida (Bayluscide-Bayer) at 3 μM, submitted to the same conditions as the test groups. Embryos were observed for 8 consecutive days using a stereomicroscope. The parameters observed were viability (embryos that hatch) and non-viability (dead and malformed). Adult mollusks were evaluated for survival and mortality. The individuals who survived the exposure were submitted to mutagenic analysis, by means of the micronucleus assay. In each group, 1000 cells were analyzed in triplicate. The QDs presented approximately 60 and 80% of embryo mortality, for the concentrations of 1.2 and 2.5 nM respectively, and 100% of lethality for the other concentrations. Mortality had a dose-dependence behavior, approximately 20; 56 and 68% for the concentrations of 50; 100 and 200 nM respectively, and 100% for 400 nM. Tests with AMS and SBS showed no adult mollusks mortality and no significant difference in embryos. The negative control presented 100% survival, the positive control 100% mortality in relation to the adult embryos and mollusks. The hemocytes of adult mollusks which survive the exposures presented micronuclei (MN), binucleations (BN) and cellular apoptosis (AP), and AP presented a significant difference when compared to the negative control group and other test groups. Therefore, results demonstrated that the higher the CdTe QDs concentration, the greater the toxicity to B. glabrata mollusks. It is suggested that these events are related to the time of exposure to the suspension and the concentration of Cd²⁺. Thus, B. glabrata showed to be a sensitive bioindicator to evaluate the CdTe QDs toxicity on aquatic environments.

Submitted by Fernanda Rodrigues de Lima (fernanda.rlima@ufpe.br) on 2018-08-07T19:47:17Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Ana Lygia dos Santos.pdf: 2337591 bytes, checksum: b38012def1bbf5adf52bdbd4060eed5b (MD5) / Approved for entry into archive by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-08-15T21:25:08Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Ana Lygia dos Santos.pdf: 2337591 bytes, checksum: b38012def1bbf5adf52bdbd4060eed5b (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-15T21:25:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 811 bytes, checksum: e39d27027a6cc9cb039ad269a5db8e34 (MD5) DISSERTAÇÃO Ana Lygia dos Santos.pdf: 2337591 bytes, checksum: b38012def1bbf5adf52bdbd4060eed5b (MD5) Previous issue date: 2013-02-27 / FACEPE / A solasodina, alcalóide esteroidal obtido principalmente de plantas do gênero Solanum, pertencente à família Solanaceae, que apresenta duas formas glicosiladas: solamargina e solasonina. A potente ação antitumoral da solasodina frente tumores malignos e benignos de pele, é decorrente da presença de uma mistura de glicosídeos presentes na molécula e já vem sendo comercializado como Curadem®. A porção glicosídica, portanto, viabiliza o reconhecimento de receptores de membrana induzindo sua internalização e viabilizando sua ação biológica. As limitações de rendimento na extração dos glicosídeos da solasodina permite a extração da aglicona em maior rendimento. Assim sendo, este trabalho visa o desenvolvimento de um nanosistema mais efetivo na entrega da solasodina e avaliação da ação antiproliferativa frente a diferentes linhagens celulares. Nanocápsulas furtivas contendo solasodina (SSD-NC) foram obtidas pelo método de precipitação de um polímero pré-formado e caracterizadas através da avaliação da morfologia por microscopia eletrônica de varredura, determinação do pH, tamanho médio, índice de polidispersão e carga de superfície de partículas. A atividade antiproliferativa da solasodina nanoencapsulada foi avaliada frente às linhagens celulares NIH 3T3 (fibroblastos normais), 4T1 (câncer de glândula mamária de murino) e MCF- 7 (câncer de tumor de mama). A citotoxidade das SSD-NCS foi determinada pelo método MTT após tratamento de 48 horas, utilizando concentrações de 100 a 0,78 μg/mL de SSD-NC. O mecanismo de morte celular avaliado através da marcação com anexina V e iodeto de propídio, a determinação do potencial de membrana mitocondrial e a fragmentação de DNA das células tratadas com SSD-NC (3,125 e 6,25 μg/mL) foram realizados por citometria de fluxo. As células 4T1 e MCF-7 apresentaram uma redução significativa dose e tempo-dependente na viabilidade, enquanto que as células NIH 3T3 apresentaram citoxidade reduzida até concentrações ≥ 25 μg/mL. Os valores de IC50 de SSD-NC nas linhagens 4T1 e MCF-7 foram de 5,31 e 4,14 μg/mL, respectivamente. Aumento na fragmentação do DNA das células 4T1 e na MCF-7 foi observado em função do aumento da concentração de SSD-NC. As células foram marcadas apenas pelo iodeto de propídio, demonstrando perda da permeabilidade da membrana celular, sugerindo necrose como mecanismo de morte celular. A análise do potencial de membrana mitocondrial revelou que o tratamento com SSD-NC induziu alterações na membrana dessas organelas, confirmando os resultados obtidos através do método MTT, onde as células apresentaram alteração em sua viabilidade. Estes achados sugerem que o tratamento das células 4T1 e MCF-7 com SSD-NC induz o processo de necrose associado a severas alterações morfológicas nas células. A encapsulação da solasodina apresentou um potencial efeito antiproliferativo, viabilizando futuros estudo in vivo da ação antitumoral. / Solasodine, a steroidal alkaloid obtained mainly from plants of the genus Solanum and Solanaceae family, is presented in two glycosylated forms: solamargine and solasonine. The potent antitumor action of solasodine against benign and malignant skin tumors is due to the presence of a mixture of glycosides present in its molecular structure, alredy being marketed as Curaderm®. A glycoside moiety, therefore, enables the recognition of membrane receptors and induces the cellular internalization allowing the biological activity. The extraction yield of solasodine glycosides is limited, but the extraction of aglycone occurs in higher yield. Thus, this study aims to develop and characterize more effective delivery nanosystems of solasodine and evaluate its antiproliferative activity against different cell lines. Stealth nanocapsules containing solasodine (SSD-NC) were obtained by the method of interfacial precipitation of a preformed polymer and characterized trough the morphology using scanning electron microscopy, and measurements of pH, particle size, polydispersity and surface charge. The antiproliferative activity of SSD-NC was evaluated against the cell lines NIH 3T3 (normal fibroblasts), 4T1 (murine breast cancer) and MCF-7 (human breast cancer) at concentrations ranging from 25.0 to 0.78μg/ml. The cytotoxicity of SSD-NC was determined by MTT assay after treatment of cells with concentrations varying from 25 to 0.78 μg/mL for 48 hours. The mechanism of cell death was evaluated by annexin V or propidium iodide staining, the mitochondrial membrane potential and DNA fragmentation of cells using flow cytometry at the concentrations of 3.125 and 6.25 μg/mL. A significant reduction in the viability of 4T1 and MCF-7 cells was verified in a dose and time-dependent manner, whereas the normal cells NIH 3T3 showed a lower cytotoxicity up to concentrations ≥ 25 μg/mL. IC50 values of solasodine encapsulated against 4T1 and MCF-7 cells were 5.31 and 4.14 μg/mL, respectively. A slight increase in DNA fragmentation of 4T1 and MCF-7 cells was found with the increase in SSDNC concentrations. Cells were labeled only with propidium iodide, indicating loss of cell membrane permeability and suggesting necrosis as the death mechanism. Analysis of mitochondrial membrane potential showed that the treatment with SSD-NC induces changes in the organelle membranes, confirming the results of the MTT assay, where the cells presented alterations in viability. These findings suggest that treatment of 4T1 and MCF-7 cells with SSDNC induces necrosis process associated with severe morphological changes. Encapsulation of solasodine presented a potential antiproliferative effect, allowing future in vivo study of antitumor action.