O arsênio é um metaloide encontrado nas formas orgânica e inorgânica em estado de oxidação trivalente ou pentavalente. Na medicina veterinária a intoxicação por arsênio foi associada, no passado, ao contato acidental com pesticidas e ao uso indevido de medicamentos à base de arsênio inorgânico. Atualmente a intoxicação em bovinos tem sido relatada devido à exposição prolongada a ambientes contaminados. No Brasil, devido à proibição do uso de arsênio inorgânico na formulação de pesticidas, herbicidas a base de metanoarseniato ácido monossódico (MSMA), um arsenical orgânico pentavalente, considerado menos tóxico, têm sido utilizados em plantas infestantes em pós-emergência em culturas de algodão, café, cana-de-açúcar e citros. Em maio de 2014, em uma fazenda no município de Barra do Ribeiro, RS, foi realizada aplicação via aérea de um herbicida formulado com MSMA. Cerca de 200 vacas de corte e terneiros estavam sobre o local e apresentaram diarreia acentuada e severa desidratação após ingerir o pasto contaminado. Dezesseis animais morreram em até 20 dias, sendo seis submetidos ao exame de necropsia. As principais alterações macroscópicas consistiram de avermelhamento difuso da mucosa dos pré-estômagos, abomaso, e intestino, múltiplas úlceras e desprendimento multifocal da mucosa de pré-estômagos com acentuado edema de submucosa e hemorragia multifocal nas serosas. Microscopicamente, as principais alterações foram caracterizadas por necrose isquêmica multifocal associada à necrose fibrinoide de vasos e trombose na mucosa e submucosa. Com exceção de um bovino, os níveis de arsênio detectados estavam acima do limite de referência para a espécie, de 0,5 μg/g ou ppm. O exame anatomopatológico dos bovinos demonstrou que o MSMA promove lesões na mucosa de pré-estômagos por meio de necrose fibrinoide da parede de arteríolas e capilares. Apesar de ser classificado como pentavalente, durante sua metabolização, o MSMA pode gerar metabólitos intermediários trivalentes, que poderiam ter contribuído supostamente com as lesões observadas neste surto. As lesões observadas são similares às alterações promovidas pela forma inorgânica trivalente do arsênio em bovinos. A utilização de herbicidas que contém MSMA deve ser cautelosa, evitando-se o contato de animais em pastagens recém-pulverizadas. / Arsenic is a metalloid found in organic and inorganic forms in a state of trivalent or pentavalent oxidation. In veterinary medicine arsenic poisoning has been associated in the past to accidental contact with pesticides and misuse of medicinal products containing inorganic arsenic. Currently subclinical poisoning in cattle has been reported due to prolonged exposure to contaminated environments. In Brazil, due to the ban of of inorganic arsenic in pesticide formulation, herbicides methane arsenate monosodium acid (MSMA), an organic arsenical pentavalent, considered less toxic, has been used against weeds in post-emergent cotton, coffee, sugarcane and citrus. In May 2014, on a farm in the municipality of Barra do Ribeiro, Rio Grande do Sul, Brazil, air application was made on a Tifton cultivated paddock with a MSMA formulated herbicide. About 200 beef cows and calves were on the paddock and showed severe diarrhea and severe dehydration after consuming contaminated pasture. Sixteen animals died in 20 days, six of which were necropsied. The main gross lesions consisted of diffuse reddening of the mucosa of the fore stomachs, abomasum and intestines; multiple ulcers and multifocal detachment of the mucosa with severe edema of submucosa and multifocal hemorrhage in the serous membranes. Microscopically the main changes were characterized by multifocal ischemic necrosis associated with fibrinoid necrosis of vessels and thrombosis in the mucosa and submucosa. Except in one bovine, the levels of organic arsenic detected were above the reference level for the species (0,5 μg/g or ppm). The pathology found in the affected cattle showed that MSMA causes injuries in the mucosal pre-stomachs through fibrinoid necrosis the walls of arterioles and capillaries. Although it is classified as pentavalent, during their metabolism the MSMA can generate trivalent intermediate metabolites, supposedly responsible for the injuries observed in this outbreak. The lesions found in the outbreak of this repot are similar to those caused in cattle by inorganic trivalent form of arsenic. Herbicides containing MSMA must be used with caution, avoiding the contact of the animals with freshly sprayed pasture.

Pesquisas com células tronco têm demonstrado que essa alternativa terapêutica tem grande potencial em diversas patologias. Contudo, muito ainda precisa ser elucidado quanto aos mecanismos de ação, dose e melhores vias de aplicação, para que essa alternativa terapêutica seja efetivamente incorporada às outras. Neste contexto, a via de aplicação se torna crucial na efetividade do tratamento. O objetivo do presente estudo foi avaliar no modelo de necrose tubular aguda (NTA) induzido pelo glicerol o potencial de migração das células tronco mesenquimais derivadas de polpa dentária humana, utilizando as vias intraperitoneal e a via intravenosa. Os nossos resultados demonstraram que neste modelo, não há diferença na migração das células para o órgão alvo, o rim. Contudo, a via intravenosa proporcionou uma melhora da função renal mais significativa do que quando comparada a via intraperitoneal. / Stem cell research have demonstrated that this alternative therapy has great potential in various diseases. However, much remains to be elucidated about the mechanisms of action, dosage and best means of implementation, so that alternative therapy may be incorporated other. In this context, the route of application becomes crucial in the effectiveness of treatment. The aim of this study was to evaluate the model of acute tubular necrosis (NTA) induced by glycerol the potential for migration of mesenchymal stem cells derived from human dental pulp, using the intraperitoneal and intravenous route. Our results demonstrate that this model, there is no difference in cell migration to the target organ, the kidney. However, the intravenous route provided an improvement in renal function more significantly than when compared to the intraperitoneal route.

O arsênio é um metaloide encontrado nas formas orgânica e inorgânica em estado de oxidação trivalente ou pentavalente. Na medicina veterinária a intoxicação por arsênio foi associada, no passado, ao contato acidental com pesticidas e ao uso indevido de medicamentos à base de arsênio inorgânico. Atualmente a intoxicação em bovinos tem sido relatada devido à exposição prolongada a ambientes contaminados. No Brasil, devido à proibição do uso de arsênio inorgânico na formulação de pesticidas, herbicidas a base de metanoarseniato ácido monossódico (MSMA), um arsenical orgânico pentavalente, considerado menos tóxico, têm sido utilizados em plantas infestantes em pós-emergência em culturas de algodão, café, cana-de-açúcar e citros. Em maio de 2014, em uma fazenda no município de Barra do Ribeiro, RS, foi realizada aplicação via aérea de um herbicida formulado com MSMA. Cerca de 200 vacas de corte e terneiros estavam sobre o local e apresentaram diarreia acentuada e severa desidratação após ingerir o pasto contaminado. Dezesseis animais morreram em até 20 dias, sendo seis submetidos ao exame de necropsia. As principais alterações macroscópicas consistiram de avermelhamento difuso da mucosa dos pré-estômagos, abomaso, e intestino, múltiplas úlceras e desprendimento multifocal da mucosa de pré-estômagos com acentuado edema de submucosa e hemorragia multifocal nas serosas. Microscopicamente, as principais alterações foram caracterizadas por necrose isquêmica multifocal associada à necrose fibrinoide de vasos e trombose na mucosa e submucosa. Com exceção de um bovino, os níveis de arsênio detectados estavam acima do limite de referência para a espécie, de 0,5 μg/g ou ppm. O exame anatomopatológico dos bovinos demonstrou que o MSMA promove lesões na mucosa de pré-estômagos por meio de necrose fibrinoide da parede de arteríolas e capilares. Apesar de ser classificado como pentavalente, durante sua metabolização, o MSMA pode gerar metabólitos intermediários trivalentes, que poderiam ter contribuído supostamente com as lesões observadas neste surto. As lesões observadas são similares às alterações promovidas pela forma inorgânica trivalente do arsênio em bovinos. A utilização de herbicidas que contém MSMA deve ser cautelosa, evitando-se o contato de animais em pastagens recém-pulverizadas. / Arsenic is a metalloid found in organic and inorganic forms in a state of trivalent or pentavalent oxidation. In veterinary medicine arsenic poisoning has been associated in the past to accidental contact with pesticides and misuse of medicinal products containing inorganic arsenic. Currently subclinical poisoning in cattle has been reported due to prolonged exposure to contaminated environments. In Brazil, due to the ban of of inorganic arsenic in pesticide formulation, herbicides methane arsenate monosodium acid (MSMA), an organic arsenical pentavalent, considered less toxic, has been used against weeds in post-emergent cotton, coffee, sugarcane and citrus. In May 2014, on a farm in the municipality of Barra do Ribeiro, Rio Grande do Sul, Brazil, air application was made on a Tifton cultivated paddock with a MSMA formulated herbicide. About 200 beef cows and calves were on the paddock and showed severe diarrhea and severe dehydration after consuming contaminated pasture. Sixteen animals died in 20 days, six of which were necropsied. The main gross lesions consisted of diffuse reddening of the mucosa of the fore stomachs, abomasum and intestines; multiple ulcers and multifocal detachment of the mucosa with severe edema of submucosa and multifocal hemorrhage in the serous membranes. Microscopically the main changes were characterized by multifocal ischemic necrosis associated with fibrinoid necrosis of vessels and thrombosis in the mucosa and submucosa. Except in one bovine, the levels of organic arsenic detected were above the reference level for the species (0,5 μg/g or ppm). The pathology found in the affected cattle showed that MSMA causes injuries in the mucosal pre-stomachs through fibrinoid necrosis the walls of arterioles and capillaries. Although it is classified as pentavalent, during their metabolism the MSMA can generate trivalent intermediate metabolites, supposedly responsible for the injuries observed in this outbreak. The lesions found in the outbreak of this repot are similar to those caused in cattle by inorganic trivalent form of arsenic. Herbicides containing MSMA must be used with caution, avoiding the contact of the animals with freshly sprayed pasture.

Entre os meses de junho e agosto 2006 dois surtos de intoxicação pelas larvas de P. flavipes ocorreram, um em ovinos (surto 1) e outro em bovinos (surto 2). O surto nos ovinos ocorreu nos meses de junho e julho no município de Encruzilhada do Sul RS e morreram 25 ovinos de um rebanho de 175 ovinos e 11 bovinos. Os ovinos eram mantidos em uma área de 40 hectares de pasto nativo. O surto nos bovinos ocorreu no mês de agosto no município de Sombrio SC e morreram 17 animais que estavam num lote de 77 bovinos, o rebanho total da propriedade era de 280 animais. O lote de bovinos estava em uma área de 90 hectares onde dois animais morreram devido à ingestão das larvas de P. flavipes. O lote foi transferido para outra área onde morreram mais 15 animais em um período de 5 dias. Seis ovinos do surto 1 e seis bovinos do surto 2 foram necropsiados. Grande quantidade de agrupamentos de larvas de P. flavipes foram encontradas no campo e no rúmen dos animais de ambos os surtos. Larvas de P. flavipes foram coletadas em ambos os surtos e foram armazenadas congeladas a -20º. Larvas frescas e larvas congeladas foram administradas para 6 ovinos, por meio de uma seringa com a ponta cortada. A menor dose letal foi de 7,5 g/kg em administração única. Animais que receberam doses sub-letais de 5 g/kg e posteriormente doses letais de 10 g/kg e 15 g/kg em intervalos de 15 e 30 dias, mostraram menor sensibilidade à intoxicação, um animal não adoeceu e outro adoeceu apenas depois de receber uma dose de 15 g/kg. Os animais intoxicados experimentalmente mostraram sinais de doença cerca de 48 horas e morreram cerca de 54 horas após a intoxicação. O exame bioquímico realizado em intervalos de 12 horas revelou alterações apenas nos animais que adoeceram. Os níveis séricos de GGT apresentavam-se elevados depois de 24 horas da intoxicação e continuaram a se elevar até a morte, AST apresentou aumento significativo cerca de 30 horas após a dosificação e posteriormente decaindo até a morte, os níveis séricos de glicose sofreram queda próximo à morte dos animais. As lesões de necropsia observadas nos casos espontâneos e experimentais foram semelhantes e mais consistentes no fígado, que se apresentava com acentuação do padrão lobular e com áreas de coloração amarelada com petéquias subcapsulares. Foram observados também edemas cavitários, edema da parede da vesícula biliar, perirrenal e na região inicial do duodeno, pâncreas e abomaso. Além das hemorragias no fígado havia hemorragias no tecido subcutâneo, coração, e mucosas e serosas da cavidade abdominal. O principal achado histopatológico era caracterizado por necrose coagulativa centrolobular ou massiva associada à hemorragia e congestão centrolobular e degeneração e tumefação hepática na região periportal. Observou-se ainda, depleção e necrose linfóide nos centros germinativos de linfonodos, nas placas de Peyer e na polpa branca do baço. A microscopia eletrônica demonstrou lesão hepática com hepatócitos necróticos, e dilatação dos espaços de Disse e endotélio vascular. Foi observada também intensa proliferação de reticulo endoplasmático liso no animal que recebeu doses graduais das larvas. As larvas descongeladas e dessecadas a 100ºC por 24 horas foram administradas a um coelho e mostraram-se tóxicas. Outros dois coelhos receberam frações sólidas e liquidas das larvas respectivamente e apenas o coelho que recebeu a fração sólida morreu. / Between June and August 2006, two outbreaks of P. flavipes larvae poisoning were observed. In outbreak 1 occurred in a farm located at the county of Encruzilhada do Sul, Rio Grande do Sul State, Brazil, 25 out of 175 sheep were affected and died. Although there were 11 cattle in the same paddock, none of them was affected. Animals were kept in a 40 hectares paddock of native pastures. In outbreak 2, occurred in a farm located at county of Sombrio, Santa Catarina State, 11 out of 77 cattle were affected and died. In total, 6 sheep and 6 cattle from respective outbreaks were necropsied. High numbers of compact masses containing up to 150 larvae were scattered on the paddocks in which animals were grazing. Larvae were collected and frozen at –20ºC. Perreyia flavipes larval body fragments and heads were found in the forestomach contents of all necropsied animals. Fresh and thawed larvae were administered to six sheep by a tip-cut plastic syringe. The lower single lethal dosis was 7,5 g/kg. Animals which received an initial sublethal doses of 5 g/kg and subsequently were dosed with lethal 10 to 15 g/kg at 15 and 30 days intervals showed lower susceptibility to the intoxication. Animals that were experimentally poisoned showed signs of disease about 48 h after dosing and died in approximately 54 h. Biochemical tests performed at 12 h intervals showed changes only in diseased animals. Serum levels of GGT started being higher 24 h after intoxication and kept enhancement until death. AST serum levels were significatively enhanced about 30 h after dosing and then, decreased to death. Glucose serum levels decreased close to the death. Necropsy lesions were similar in both, spontaneous and experimental cases and were most prominent in the livers, which had enhanced lobular pattern and yellowish areas with subcapsular pinpoint hemorrhages. Edema in body cavities, gallbladder wall, perirenal tissues, initial portion of duodenum, pancreas, and abomasum was also seen. Hemorrhages were also present in subcutaneous tissues, heart, and in mucosal and serosal membranes of the abdominal cavity. The principal histological finding was centrolobular to massive coagulative necrosis associated with centrolobular hemorrhage and congestion and periportal degeneration and tumefaction. There also were lymphoid depletion and necrosis in the germinative centres of lymph nodes, Peyer’s patches, and white pulp of the spleen. Transmission electron microscopy showed necrotic hepatocytes and dilatation in the space of Disse and vascular endothelium. Severe proliferation of smooth endoplasmic reticulum was also seen in animal receiving more than one dosis of larvae. Thawed larvae were desiccated at 100ºC for 24 h and administered to one rabbit that also became ill. Additional two rabbit were dosed with solid or liquid fractions of larvae and only which received the solid fraction died.

Orientador: Licio Augusto Velloso / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas. Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T15:36:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Romanatto_Talita_D.pdf: 1337280 bytes, checksum: 7ec7fd5e6f446c2f8f8a42019123e0d4 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: O aumento da prevalência de obesidade em várias regiões do planeta é um dos mais importantes fenômenos clínico-epidemiológicos da atualidade. Fatores como a mudança do hábito alimentar e o estilo de vida sedentário, aliados a determinantes genéticos ainda pouco conhecidos desempenham um papel relevante na patogênese dessa doença. Nos últimos quinze anos, desde o descobrimento do hormônio leptina, avanços consideráveis foram obtidos na caracterização dos mecanismos hipotalâmicos do controle da ingestão alimentar e da termogênese. Em um estudo recente demonstrou-se que o consumo de uma dieta rica, em gordura induz a expressão de várias citocinas pró-inflamatórias no hipotálamo e que a inibição da via de sinalização intracelular da serina quinase JNK é capaz de reverter parcialmente algumas das conseqüências clínicas do consumo dessa dieta (De Souza et al, 2005). No presente estudo avaliou-se a importância do receptor 1 de TNF-cc(TNFRI) na gênese do processo inflamatório desencadeado pela dieta rica em gordura. O TNFR1 é responsável pela maioria dos efeitos do TNF-ct, no entanto no contexto da obesidade induzida por dieta, a função desse receptor não está completamente esclarecida. Para tanto, camundongos knockout (KO) para o TNFR1 e seu respectivo background genético, C57BL6, foram tratados por 8 semanas com dieta hiperlipídica e observamos que o TNFR1 KO está protegido da obesidade induzida por dieta por meio de aumento na termogênese. Em ambas as dietas, padrão e hiperlipídica (HF), TNFR1 KO ganha menos peso apesar de aumento na ingestão alimentar. Adiposidade e diâmetro dos adipócitos estão reduzidos, assim como as concentrações sanguíneas de insulina e leptina. TNFR1 KO estão protegidos de resistência hipotalâmica à via da leptina por meio de preservação da sinalização da leptina através de JAK2, STAT3 e FOX01. TNFR1 KO apresentam aumento de termogênese, pelo aumento do consumo de 02, aumento da expressão de UCP-1 e UCP-3, no tecido adiposo marrom e músculo esquelético, respectivamente, e aumento do consumo de O2 de mitocôndrias isoladas de músculo. Isso demonstra que a via de sinalização do TNF-a pelo TNFR1 representa um importante mecanismo envolvido na termogênese deficiente associada à obesidade. / Abstract: In diet-induced obesity, hypothalamic and systemic inflammatory factors trigger intracellular mechanisms that lead to resistance to the main adipostatic hormones, leptin and insulin. Tumor necrosis factor-alpha (TNF-a) is one of the main inflammatory factors produced during this process and its mechanistic role as an inducer of leptin and insulin resistance has been widely investigated. Most of TNF-a inflammatory signals are delivered by TNFR1; however, the role played by this receptor in the context of obesity-associated inflammation is not completely known. Here, we show that TNFR1 knockout (TNFR1 KO) mice are protected from diet-induced obesity due to increased thermogenesis. Under standard rodent chow or ligh-fat diet, TNFR1 KO gain significantly less body mass in spite of increased caloric intake. Visceral adiposity and mean adipocyte diameter are reduced and Dlood concentrations of insulin and leptin are lower. Protection from hypothalamic eptin resistance is evidenced by increased leptin-induced suppression of food ntake and preserved activation of leptin signal transduction through JAK2, STAT3 jnd FOX01. Under high fat diet, TNFR1 KO mice present a significantly increased expression of the thermogenesis-related neurotransmitter, TRH. Further evidence if increased thermogenesis includes the increased 02 consumption and C02 traduction in respirometry measurements, increased expressions of UCP1 and JCP3 in brown adipose tissue and skeletal muscle, respectively, and increased 02 onsumption by isolated skeletal muscle fiber mitochondria. This demonstrates that 'NF-ct signaling through TNFR1 is an important mechanism involved in obesity-ssociated defective thermogenesis. / Doutorado / Medicina Experimental / Doutor em Fisiopatologia Medica

No trato digestório a colite ulcerativa apresenta necrose no intestino como processos patofisiológicos. Este projeto visou estudar neurônios com códigos químicos do sistema nervoso entérico (SNE) e a morfologia estrutural do intestino grosso de animais com colite ulcerativa. Grupos: a) Colite: injetados com TNBS, b) PBS: injetados com PBS e c) controle. Os tecidos foram preparados por métodos imunohistoquímicos de duplas marcações do receptor P2X7 com NOS, ChAT, Calb, Calr, anti-HuC/D (pan-neuronal) e S100 (células glias). No grupo Colite, no plexo mioentérico, o receptor P2X7 estava diminuído. No tecido lesado apresentou aumento de neutrófilos e da lâmina própria, alteração de colágeno e destruição do epitélio e células caliciformes. Reduziram colocalizações de neurônios com receptor no plexo mioentérico e aumento no plexo submucoso. Houve reduções nas densidades e áreas dos neurônios no SNE. Conclui-se que a colite afetou os neurônios entéricos e células gliais, causou alterações morfológicas, sendo assim, pode afetar motilidade intestinal. / In the digestive tract ulcerative colitis have a bowel necrosis as pathophysiological processes. This project aimed to study neurons with their respective chemicals codes the enteric nervous system (ENS) as well as structural morphology of the distal colon of animals with ulcerative colitis. Groups: a) colitis: TNBS injected, b) PBS: PBS injected and c) control. The tissues were prepared by immunohistochemical methods for double marking with P2X7 receptor, ChAT, Calb, Calr, anti-HUC / D (pan-neuronal) and S100 (glial cells). In the colitis group, the myenteric plexus, the P2X7 receptor decreased. In the injured tissue showed increased neutrophils, alteration and destruction of collagen and epithelial goblet cells. There were reduced colocalizations of neurons with receptor in myenteric plexus and increase in submucosal plexus. There were reductions in the densities and areas neurons of ENS. Concluded that colitis affected enteric neurons and glial cells, causing morphological changes and could be affect intestinal motility.

A anóxia neonatal, considerada problema clínico mundial, é importante causa de lesão encefálica em neonatos que pode apresentar consequências graves e permanentes, como déficits cognitivos e comportamentais. O objetivo deste estudo foi analisar longitudinalmente possíveis alterações na morte, proliferação e diferenciação neuronais no hipocampo de ratos submetidos à anóxia neonatal. Para tanto, utilizamos modelo adaptado e validado em nosso laboratório. Os resultados mostraram que a anóxia neonatal causa morte neural em CA1 e CA2-3, detectadas pela maior quantidade de células TUNEL+ em CA1 e CA2-3 e FJB+ em CA2-3, além de diferentes tipos de morte neuronal em CA1 e GD, 24 horas após a anóxia,observadas por microscopia eletrônica. Houve aumento do volume de CA1 em P14 no grupo anóxia, porém o padrão de proliferação na zona subgranular não foi alterado. Enfim, a anóxia neonatal promoveu diminuição da neurogênese em animais adultos, o que poderia estar associado aos déficits de memória espacial e aprendizagem descritos em literatura para modelos similares. / Neonatal anoxia, considered a worldwide clinical problem, is a major cause of brain injury in neonates and may present serious and permanent consequences such as cognitive and behavioral deficits. The aim of this study was to analyze possible changes longitudinally in neural death, proliferation and neuronal differentiation in the hippocampus of rats submitted to neonatal anoxia. We used an adapted model validated in our laboratory. The results showed that neonatal anoxia cause neural death in CA1 and CA2-3 detected by the TUNEL+ cells in CA1 and CA2-3 and FJB+ in CA2-3, and different types of neuronal death in CA1 and GD 24 hours of anoxia, observed by electron microscopy. There was an increase in the volume of CA1 in the P14 anoxia group but the pattern of proliferation in the subgranular zone was not changed. Anyway, neonatal anoxia caused decrease in neurogenesis in adult animals, which could be associated with deficits in spatial memory and learning described in the literature in similar models.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A dor neuropÃtica possui mecanismos de difÃcil compreensÃo que se modificam com a sua evoluÃÃo dificultando a terapÃutica. O modelo por constriÃÃo crÃnica do nervo ciÃtico (CCNC) simula esta condiÃÃo. A gabapentina (GBP) à um anticonvulsivo muito utilizado como analgÃsico na dor neuropÃtica e existem poucos relatos sobre seus efeitos na atividade inflamatÃria e regenerativa do nervo. As citocinas TNF-&#945; e IL-1&#946; estÃo relacionadas à dor, inflamaÃÃo e regeneraÃÃo neural. à objetivo deste estudo avaliar os efeitos antinociceptivos, inflamatÃrios e regenerativos do tratamento preventivo e contÃnuo (80 min antes da CCNC e depois ao longo de 5 dias de 12 em 12h) com a GBP (30, 60, 120 mg/kg, via oral) atravÃs da observaÃÃo (antes, no 3 dia e no 5 dia apÃs a CCNC) dos seguintes comportamentos: (1) espontÃneos sugestivos de dor crÃnica: Scrathing (coÃar-se) e Biting(morder-se) (2) relacionados à motriciadade e exploraÃÃo: Climbing(escalar), Rearing(empinar-se), Walking(andando) (3) de dor induzida: alodÃnia mecÃnica (von Frey eletrÃnico) e alodÃnia ao frio (10Â) em ratos machos Wistar (250-300g) com CCNC. Animais com CCNC tratados com salina e animais pseudo-operados foram utilizados como controles. Para avaliar os efeitos anti ou prÃ-inflamatÃrios da GBP (60, 120mg/kg, via oral) utilizou-se o modelo de edema de pata induzido por carragenina em animais sem CCNC e a dosagem de mieloperoxidase no nervo sob constriÃÃo crÃnica. Os efeitos neuro-regenerativos da GBP foram avaliados indiretamente atravÃs da expressÃo de TNF-&#945;, IL-1&#946;, IL-10, e da proteÃna bÃsica de mielina (PBM) no mesmo protocolo, sendo que no 5 dia de tratamento apÃs CCNC, foram feitas coletas dos nervos para dosagem destas citocinas atravÃs de ELISA e imunohistoquÃmica, e no 5 e 15 dia para expressÃo de PBM atravÃs de Western Blot e imunohistoquÃmica. Resultados: No 5 dia, as doses de GBP 30, 60 e 120mg provocaram reduÃÃo de 86,76%*; 83,82%*; 80,09%* (*p < 0,01) no tempo de Scratching da pata ipslateral e uma inibiÃÃo de 56,27%; 90,53%*; 65,06% (*p < 0,01) no tempo do Biting lado direito em relaÃÃo ao grupo salina. Aliviaram a alodÃnia mecÃnica provocando aumentos do limiar de retirada da pata de 225,42%*, 246,01%*, 309,20%* (*p <0,001) e provocaram reduÃÃo do escore de dor na alodÃnia ao frio em 18,19%; 21,29%; 42,26%* (*p < 0,01) em relaÃÃo ao grupo salina. As doses de GBP 60 e 120mg provocaram aumentos significativos na motricidade espontÃnea de animais com CCNC e intactos sugerindo efeitos estimulantes e nÃo sedativos. A GBP 60mg/kg tambÃm provocou efeitos relevantes (p<0,001) na migraÃÃo de cÃlulas visto pelo aumento de 982,16% na expressÃo da mieloperoxidase no nervo e pelo aumento de 53% no edema de pata em relaÃÃo ao controle salina. Quanto à expressÃo do TNF-&#945; no nervo as doses de 60 e 120mg provocaram aumentos de 120,95 % e de 91,99% em relaÃÃo ao grupo salina (P< 0,01). Na expressÃo de IL-1&#946; a dose de 60mg/kg provocou aumento de 59,26% em relaÃÃo ao grupo salina (P< 0,05). No Western Blot ocorreu um aumento significativo de 158,06% da expressÃo de PBM (0,298 + 0,069 PBM/Act.) no nervo no 15 dia de tratamento com GBP em relaÃÃo ao grupo salina (0,116 + 0,034 PBM/Act). ConclusÃes: O tratamento com GBP ao longo de cinco dias, apesar de seus efeitos prÃ-inflamatÃrios, demonstrou no 5 dia efeitos analgÃsicos significativos ao reduzir comportamentos espontÃneos de dor crÃnica e aliviar a alodÃnia mecÃnica e tÃrmica em estÃgio precoce da neuropatia. Considerando-se os efeitos relevantes da GBP no 5 dia de neuropatia no aumento da migraÃÃo de cÃlulas para o local da lesÃo, no aumento da expressÃo de TNF e IL-1&#946; no nervo, o que levaria a maior ativaÃÃo das cÃlulas de Schwann, macrÃfagos, e maior liberaÃÃo de fator de crescimento do nervo, e no aumento da expressÃo de PBM indicando uma ativa fragmentaÃÃo da mielina, sugere-se que a GBP pode acelerar o processo de remoÃÃo dos fragmentos de mielina e axÃnios contribuindo assim para o posterior alongamento dos axÃnios e remielinizaÃÃo. / Neurophatic pain conveys mechanisms of difficult understanding, which changes with the disease progress, jeopardizing the therapeutics. The chronic constriction of the sciatic nerve (CCSN) model mimics this condition. Gabapentin (GBP) is an anti-convulsive drug often used as analgesics to control neurophatic pain. Few reports exist on their effects in the inflammatory and regenerative activity of the nerve. TNF-&#945; and IL-1&#946; cytokines, although related to pain and inflammation, are also associated with early myelin and axonal fragmentos removal after nerve injury and thus contribute to nerve regeneration. This study aimed at evaluating the analgesics early treatment (80 min prior to CCSN and along 5-day treatment, 12h/12h) effects of GBP (30, 60, 120 mg/kg, given orally) by monitoring (before surgery, on the 3rd day and 5th day of post-surgery treatment, 12h to12h) the following behaviors (1) spontaneous behavior, suggestive of chronic pain: Scratching and Biting (2) motor and exploratory-related behaviors: Climbing, Rearing, and Walking, (3) induced-pain behaviors: mechanical allodynia (electronic von Frey) and cold allodynia (10ÂC) in Wistar male rats (250-300g) with CCSN. CCSN animals treated with saline and pseudo-operated were used as controls. Another aim of this study was to evaluate the pro and anti-inflammatory effects of GBP (60 and 120mg/kg, given orally) by carragenin-induced paw edema in CCSN-free animals and yet nerve myeloperoxidase measurements under chronic constriction. The neural regenerative effects of GBP were indirectly evaluated by measuring TNF-&#945;, IL-1&#946;, IL-10, and myelin basic protein (PBM) expressions in the same protocol, as follows: 5th day of treatment following CCSN to draw nerves in order to quantify cytokines by ELISA and immunohistochemistry, and for MPB expression detected by Western blot and immunohistochemistry on the 5th and 15th. Results: On the 5th day, GBP, at doses of 30, 60 and 120mg, reduced the scratching time in the ipslateral paw of 86.76%*; 83.82%*; 80.09%* (*p<0.01) and an inhibition of the biting time of 56.27%; 90.53%*; 65.06% (*p<0.01) in the right side in comparison with the saline group. In addition, GBP alleviated mechanical allodynia causing increase paw retrieval thresholds of 225.42%*, 246.01%*, 309.20%* (*p <0.001) and the reduction of the pain scores for cold allodynia in the range of 18.19%; 21.29%; 42.26%* (*p < 0.01) in comparison with the saline group. GBP, at doses of 60 and 120mg, significantly increased spontaneous motricity in CCSN animals and controls suggesting excitatory effects rather than sedation. GBP (60 mg/kg) also caused relevant effects (p<0.001) in peritoneal cell migration, and a 982.16% increase in nerve myeloperoxidase expression and 53% increase in paw edema, as opposed to the saline control. Regarding nerve TNF-&#945; expression, doses of 60 and 120mg caused significant increase of 120.95 % and 91.99% in comparison with the saline group (p<0.01). A dose of 60mg/kg caused 59.26% increase in IL-1&#946; expression compared with the saline group (p<0.05). We found a 158% significant increase in PBM expression by western blots (0.298  0.069 PBM/Act) on the 15th treatment-day with GPB in comparison with the saline control (0.116  0.034 PBM/Act). Conclusions: 5-day GBP treatment, although with pro-inflammatory effects, was found to have significant pain killing effects by reducing chronic spontaneous pain behaviors and by alleviating mechanical and thermal allodynia in the early neuropathy course. By taking our relevant findings of increasing migration cell rates to the nerve injury site on the 5th day of the neuropathy and the nerve TNF and IL-1&#946; expression with more macrophage and Schwann cell activation and supposedly more nerve growth factor release, along with higher PBM expression, altogether suggest that GBP may hasten the myelin and axonal fragmentos withdrawn, therefore contributing to axonal outgrowth and ultimately remyelinization.

Tem-se como objetivo desta dissertaÃÃo estudar o hipoclorito de sÃdio e a clorexidina como soluÃÃes irrigadoras, atravÃs de uma revisÃo de literatura, e avaliar e quantificar, por meio de cultura bacteriana, o efeito antibacteriano do preparo biomecÃnico e de pasta à base de hidrÃxido de cÃlcio associada ou nÃo a clorexidina 1 % sobre bactÃrias presentes em canais radiculares de dentes permanentes necrosados apÃs trauma, bem como verificar a presenÃa dos microorganismos Fusobacterium nucleatum e bacilo pigmentado negro (BPN) nestes dentes. A amostra consistiu de 13 dentes, totalizando 11 pacientes. As amostras microbiolÃgicas foram coletadas apÃs a abertura coronÃria (A1), depois do preparo biomecÃnico (A2), seguido da utilizaÃÃo do curativo de demora (A3) e 72h de procedida à remoÃÃo da medicaÃÃo intracanal (A4). As amostras foram coletadas introduzindo-se sequencialmente trÃs cones de papel absorvente estÃril no interior do canal radicular por um minuto. Em A1, 100% das amostras foram positivas para presenÃa de bactÃrias, sendo a mÃdia de Unidades Formadoras de ColÃnias (UFC) de 7.7 x 104. Na segunda coleta (A2), apenas 5/13 amostras foram positivas, com mÃdia de UFCs de 1.7 x 103. ApÃs o uso da medicaÃÃo intracanal (A3), 4/13 amostras foram positivas, com mÃdia de 3.3 x 103 UFCs. Em A4, 6/13 amostras foram positivas, com mÃdia de 1 x 104 UFCs. Entre A1 x A2, A1 x A3 e A1 x A4, observou-se uma reduÃÃo de UFCs estatisticamente significante (p<0.001). NÃo se pÃde observar diferenÃa estatisticamente significante (p>0.05) entre as demais amostras. Conclui-se que o preparo quÃmico-mecÃnico desempenha sua funÃÃo antibacteriana ao reduzir significativamente o nÃmero de micro-organismos do canal principal, porÃm o hidrÃxido de cÃlcio e sua associaÃÃo com clorexidina 1% nÃo tiveram diferenÃa estatÃstica significante, possuindo um efeito antibacteriano limitado, nÃo sendo capazes de prevenir o crescimento de bactÃrias apÃs seu uso como medicaÃÃo intracanal. / The goals of this dissertation are study of sodium hypochlorite and chlorhexidine as irrigants, through a literature review, evaluate and quantify, by means of bacterial culture, the antibacterial effect of biomechanical preparation and pulp-based hydroxide calcium with or without 1% chlorhexidine on bacteria in root canals of permanent teeth after necrotic injury, as well as verifying the presence of microorganisms Fusobacterium nucleatum and Black Pigmented Bacillus in these teeth. The sample consisted of 13 teeth, totaling 11 patients. Microbiological samples were taken after the coronal opening (A1), after root canal preparation (A2), followed by the use of intracanal dressing (A3) and 72 hours of the removal of the medication (A4). The samples were collected sequentially introducing three sterile absorbent paper cones inside the root canal for one minute. In A1, 100% of samples were positive, and the average colony forming units (CFU) of 7.7 x 104. In the second collection (A2), 5 / 13 samples were positive, with an average of 1.7 x 103 CFUs. After use of the medication (A3), 4 / 13 samples were positive, averaging 3.3 x 103 CFUs. A4, 6 / 13 samples were positive, with an average of 1 x 104 CFUs. Between A1 x A2, A3 and A1 x A1 x A4, we observed a reduction of CFUs was statistically significant (p <0.001). We were unable to observe a statistically significant difference (p> 0.05) among the other samples. We conclude that chemo-mechanical performs its antibacterial function by significantly reducing the number of micro-organisms from the main channel, but calcium hydroxide and its association with chlorhexidine 1% had no statistically significant difference, having an antibacterial effect limited not being able to prevent bacterial growth after its use as an intracanal medication.

Introdução: Pacientes com tumores de cabeça e pescoço (CP) podem apresentar algumas complicações orais decorrentes do tratamento radioterápico. A osteorradionecrose (ORN) pode ser um dos efeitos colaterais tardios desse tipo de tratamento. Na literatura, análises retrospectivas em que foram coletados dados sobre a ocorrência da ORN são vistas com maior frequência. Entretanto, ainda não foram realizados estudos que correlacionem dados como o tipo de irradiação, a dose utilizada para tratamento do tumor, as características clínicas e o tratamento da ORN em pacientes que foram irradiados em região de CP e que fizeram uso de bisfosfonatos (BF). Objetivo: O objetivo deste estudo foi descrever a prevalência da ORN dos maxilares, assim como avaliar suas características clínicas, radiográficas, fatores causadores, utilização de medicações e tratamentos realizados. Materiais e Métodos: Foi realizado o levantamento de dados de todos os pacientes que foram irradiados em região de CP e que desenvolveram ORN atendidos no A.C. Camargo Cancer Center, São Paulo, Brasil, em um período de 10 anos. 98 pacientes com ORN foram alocados em 2 grupos: Grupo I (pacientes com ORN e que não fizeram uso do BF, n=83) e Grupo II (pacientes com ORN e que fizeram uso do BF, n=15). Resultados: A análise comparativa entre os grupos sugere menor tempo para a ocorrência da ORN no Grupo II. A região posterior da mandíbula foi a mais acometida pela ORN e a maioria dos casos foi classificada clinicamente como Estágio II (52,6%). A apresentação radiográfica mais frequente foi de uma área osteolítica irregular. Procedimentos cirúrgicos realizados após a RT foram os principais fatores relacionados da ocorrência da ORN e em relação à resolução da necrose, a maioria dos pacientes do Grupo I (52,2%) teve a ORN resolvida, enquanto que no Grupo II 46,7% estavam livres da necrose. Conclusões: Devido ao nosso estudo englobar pacientes que realizaram radioterapia (RT) e utilizaram BF, não se pode afirmar qual a etiologia da necrose neste Grupo e tampouco se a necrose foi causada isoladamente pelo dano da RT ou pelo uso do BF. Nosso estudo concluiu que pacientes que realizaram RT em região de CP e utilizaram BF apresentaram menor tempo para desenvolver a ORN e tiveram mais dificuldade para a resolução da mesma. / Introduction: Patients with head and neck tumor (HN) may present some oral complications due to radiotherapy (RT). The osteoradionecrosis (ORN) may be one of the latest side effects of such treatment. In literature, retrospective analyzes in wich data were collected, the occurrence of ORN are seen more often. However, no further studies relating data such as type of irradiation and used dose for tumor treatment and the clinical features and treatment of ORN in patients who were irradiated in the HN region, whom used of bisphosphonates (BP). Objective: The objective of this study was to describe jaws prevalence of ORN and to evaluate its clinical and radiographic features, causative factors, used medications and performed treatments. Materials and Methods: We performed a survey of data from all patients who were irradiated in HN area and developed ORN treated at A.C. Camargo Cancer Center, São Paulo, Brazil, in 10 years. 98 patients with ORN were divided into 2 groups: Group I (patients with ORN and who did not use the BP, n = 83) and Group II (patients with ORN and used BP, n = 15). Results: The comparative analysis between the groups suggests less time for the occurrence of ORN in Group II. Posterior of the mandible was the most affected area by the ORN, the majority of cases were classified as Stage II (52.6%) and radiographic presentation most common was an irregular osteolytic area. Surgical procedures performed after RT were the main factors related to the development of ORN and about the resolution of necrosis, most of Group I patients had ORN resolved (52,2%), whereas in Group II 46.7% are free from necrosis. Conclusions: Due to our study include patients who underwent RT and used BP we can not state the etiology of necrosis in this Group or if the necrosis was caused solely by the damage of the RT or the use of BP. Our study found that patients who underwent RT in HN area and used BP had less time to develop ORN and had more difficulty for the resolution of it.