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Caracterização da freqüência de heterozigose em genes ligados à precocidade sexual em novilhas de corte compostas / Heterozigosity frequency characterization in genes related to sexual precocity in composite beef heifers

Erica Perez Marson 24 June 2005 (has links)
Os genes dos receptores do hormônio luteinizante (LHR) e folículo estimulante (FSHR), conhecidos por sua influência na manifestação da puberdade, foram avaliados por análise PCR-RFLP em uma população de 370 novilhas de corte compostas, de diferentes composições raciais Europeu-Zebu. Os objetivos foram caracterizar geneticamente a população investigada, utilizando-se de freqüências genotípicas e alélicas e estimativas de variabilidade e diversidade gênica; avaliar o efeito dos marcadores sobre a precocidade sexual, caracterizada pela probabilidade de prenhez por ocasião da primeira estação de monta (PP), e estimar a proporção da variância genética total da variável PP atribuída aos marcadores investigados, bem como a herdabilidade da característica pelo método de Máxima Verossimilhança Restrita (REML) sob modelo animal e sob modelo touro. Contatou-se elevada freqüência de animais heterozigotos em quase todas as composições raciais investigadas, para ambos os genes, com um valor médio de heterozigosidade de 57%, resultados estes que refletem a elevada variabilidade genética desta população híbrida. As novilhas heterozigotas apresentaram maiores taxas de prenhez (67 e 66% respectivamente, para os genes do LHR e FSHR), entretanto não se constataram efeito dos polimorfismos RFLP LHR (P=0,9188) e FSHR (P=0,8831) sobre a manifestação deste evento. As estimativas de herdabilidade obtidas para a PP foram de 0,21 e 0,41, respectivamente sob modelo animal e sob modelo touro. A magnitude das estimativas dos componentes de (co)variância atribuídas aos efeitos dos marcadores se mostrou muito baixa, constatando-se a pequena contribuição destes marcadores na proporção da variância total da prenhez, indicando ser esta uma característica de herança poligênica. Os resultados aqui demonstrados indicam que a seleção de novilhas para a precocidade sexual, com base em sua informação genotípica para os marcadores RFLP LHR e FSHR, não se justifica em programas de melhoramento genético animal, sugerindo-se a investigação de outros genes igualmente importantes, envolvidos na manifestação deste evento. Contudo, os marcadores avaliados se mostraram informativos, sendo indicados em estudos de caracterização genética em outras populações bovinas. A elevada heterozigosidade verificada na população composta estudada viabiliza a exploração destes animais em cruzamentos / The luteinizing hormone receptor (LHR) and follicle-stimulating receptor (FSHR) genes, known for their influence on the onset of puberty were evaluated by PCR-RFLP analysis in a population of 370 European-Zebu composite beef heifers from different breed contributions. The objectives were to genetically characterize the investigated population using genotype and allelic frequencies values besides on variability and gene diversity estimates; to evaluate the effect of markers on sexual precocity, characterized as the probability of pregnancy during the first breeding season (PP); and to estimate the proportion of total genetic variance in the PP related to the investigated markers, as well as the heritability estimate for PP by the Restricted Maximum Likelihood (REML) method for animal and sire models. The high number of heterozygous animals observed in almost all breed compositions studied for both loci, with average heterozigosity values of 57%, showed the high genetic variability on this hybrid population. Higher pregnancy rates were observed in heterozygous heifers (67% and 66% for LHR and FSHR genes, respectively), however, no effect of RFLP polymorphism for LHR (P=0.9188) and FSHR (P=0.8831) on pregnancy rate was observed. The heritabily estimates for PP were 0.21 and 0.41, using the animal and sire model, respectively. The small magnitude of the (co)variance components estimates related to random effects of LHR and FSHR, showed their small contribution in the proportion of total variance of pregnancy, indicating a polygenic inheritance for this trait. The results found in this work indicate that selection of beef heifers in animal genetic breeding programs for sexual precocity based on the inclusion of genotype information on RFLP for LHR e FSHR markers is not recommended. The investigation of other important genes related to puberty onset in heifers is necessary. However, the evaluated markers were informative and may be indicated for genetic characterization studies in other bovine populations. The high heterozigosity observed on the studied composite population maximizes the exploration of these animals in crossbreeding
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Semiquantificação de RNAm para receptores de gonadotrofinas em folículos de novilhas Nelore (Bos taurus indicus) / Semiquantification of mRNA for gonadotropins receptors in follicles of Nelore heifers (Bos taurus indicus)

Fábio Varoni Pereira 06 February 2004 (has links)
A identificação de mecanismos moleculares é importante para entender os eventos fisiológicos que ocorrem durante o processo de maturação sexual. O objetivo deste trabalho foi semiquantificar o RNAm para os receptores de gonadotrofinas em células da granulosa de folículos dominantes em crescimento de novilhas Nelore pré-púberes, buscando associação com a fertilidade precoce. As novilhas foram separadas em Precoce (P, n=6) e Não Precoce (NP, n=16), de acordo com o diagnóstico positivo de gestação aos 15 meses de idade. Realizou-se exame ultra-sonográfico dos ovários durante 17 dias para a identificação da onda folicular, o folículo dominante com 8-9 mm foi aspirado via trans-vaginal. O RNA total foi extraído das amostras e convertido a DNA complementar que teve uma região amplificada para a expressão dos genes para os receptores de gonadotrofinas. A semiquantificação foi feita por análise digital onde levou-se em consideração a intensidade média das bandas (unidade arbitrária - UA) em gel de poliacrilamida (8%) corado com uma solução de TBE-brometo de etídio (0,02%). Foi utilizado o RNAm para o gene do GAPDH como controle interno para corrigir a expressão dos receptores de gonadotrofinas em função da quantidade de RNA em cada amostra. Não houve diferença entre P e NP na quantidade de RNAm para o receptor de FSH (FSHr, 1,14±0,07 e 1,19±0,04 UA) e de LH (LHr 0,79±0,12 e 0,78±0,05 UA, respectivamente). Foi detectada a presença de splicing alternativo do RNAm para o receptor de LH (LHrs), pelo aparecimento de banda com peso molecular diferente, em todos os animais do experimento, constatando-se através do sequenciamento que o material apresentava a deleção do exon 10. As novilhas P apresentaram maior percentagem de LHrs em relação ao LHr (LHrs/LHr) (83,66±4,26%) quando comparadas a NP (70,05±3,39%). A quantidade de RNAm para receptores de gonadotrofinas parece não estar relacionada com o aparecimento de fertilidade precoce, mas a maior percentagem de deleção do exon 10 no RNAm para o LHr pode estar envolvida com a fertilidade precoce em novilhas Nelore. / Identification of molecular mechanisms is important to understand the physiological events occurring during the process of sexual maturation. The objective of this work was to semiquantify the mRNA for gonadotropins receptors from granulosa cells of developing dominant follicles in pre-pubertal Nellore heifers and associate the results to precocious fertility. The heifers were sorted in Precocious (P, n=6) and Non Precocious (NP, n=16), according to positive pregnancy at 15 months of age. Ovarian ultrasound examination was performed through 17 days for follicular wave identification, the growing dominant follicle was aspirated at 8-9 mm. Total mRNA was extracted from the granulosa cells samples, converted to complementary DNA and had a region amplified for gene expression for gonadotropins receptors. The semiquantification was performed by digital analysis of intensity average for the bands (arbitrary unit - AU) in poliacrilamida gel (8%) stained with etidio TBE-bromide solution (0,02%). mRNA for GAPDH gene was used as internal control to correct the expression of gonadotropins receptors to the amount of mRNA in each sample. There was no difference between P and NP in the amount of mRNA for FSH receptors (FSHr, 1,14±0,07 and 1,19±0,04 AU) and LH receptors (LHr 0,79±0,12 and 0,78±0,05 AU, respectively). Heifers presented alternative splicing of mRNA for LH receptors (LHrs) evidenced through sequencing, as the absence of exon 10. P heifers presented greater percentage of LHrs in relation to LHr (LHrs/LHr) (83,66±4,26%) when compared the NP (70,05±3,39%). The amount of mRNA for gonadotropins receptors was not related with precocious fertility, but the greater percentage of exon 10 deletion from mRNA for LHr was associate the precocious fertility in Nelore heifers.
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Possíveis efeitos da leptina e IGF-I plasmáticos sobre a puberdade e a precocidade sexual de novilhas Nelore (Bos taurus indicus) / Possible effects of plasmatic leptin and IGF-I on puberty and sexual precocity of Nelore heifers (Bos taurus indicus)

Maria Paula Beltran 28 January 2008 (has links)
Foram avaliadas as concentrações plasmáticas de leptina e IGF-I do 8° ao 16° mês de idade de 36 novilhas Nelore e comparadas com a idade à primeira ovulação e precocidade sexual. Para a quantificação da leptina, foi validado um radioimunoensaio (RIA) utilizando anticorpo produzido contra leptina recombinante eqüina após inoculação em coelho. A especificidade, estabilidade, taxa de recuperação e efeito matriz indicaram que o ensaio foi adequado para a quantificação de leptina plasmática bovina. O IGF-I foi quantificado por Kit comercial (DSL). As amostras de sangue foram colhidas em intervalos de 4 dias e avaliadas nos 60 dias retrospectivos à primeira ovulação e de amostras mensais do 8° ao 16° mês de idade. A maioria das novilhas (83,3%) ovulou até o final do experimento e foram divididas em prenhes até os 16 meses de idade (33,3%), formando o grupo precoce (P), e não prenhes (50%), formando o grupo Não Precoce (NP) 16,7% das novilhas não ovularam (chamadas de NO) até o final do experimento. Não houve diferença (P > 0,05) na idade à primeira ovulação entre os grupos P (439±27,9 dias) e NP (445±36,8 dias). O peso aumentou (P < 0,01) nos 3 grupos, não diferiu (P > 0,05) entre as novilhas P e NP durante o experimento, mas as NO apresentaram peso inferior aos outros grupos a partir do 12°mês (P < 0,01). Nos 60 dias que antecederam a primeira ovulação, a concentração de leptina plasmática aumentou (P < 0,01) no grupo P, mas não nos grupos NP e NO (P > 0,5), porém não houve diferença entre os grupos (P > 0,5). Houve correlação entre a concentração de leptina plasmática e o peso corporal nos grupos P (r=0,36; P < 0,01) e NP (r=0,4313; P < 0,01), mas não no grupo NO (r=0,095; P > 0,5). A concentração plasmática de IGF-I aumentou (P < 0,01) nos 3 grupos do 8° ao 16° mês de idade, mas foi maior no grupo P (P < 0,01) do que nos NP e NO, que não diferiram entre si. Antes da primeira ovulação, não foi verificado aumento (P > 0,1) na concentração de IGF-I em nenhum dos grupos, porém a concentração foi maior no grupo P (P < 0,05). Pode-se concluir que a concentração de leptina, junto com o peso corporal foram importantes na primeira ovulação, enquanto o IGF-I, na determinação da precocidade sexual. / Plasmatic leptin and IGF-I were quantified from 36 Nelore heifers, and compared to age at first ovulation and sexual precocity. For leptin quantification, a radioimmunoassay, using antibody against recombinant equine leptin inoculated in rabbit was validated. The specificity, stability, recuperation tax and matrix effect showed that the assay was able to quantify for plasmatic bovine leptin quantification. The IGF-I was quantified with a commercial Kit (DSL). Blood samples were taken every 4 days and analyzed retrospectively 60 days before first ovulation and from mensal samples from 8th to 16th month of age. Most of the heifers ovulated (83.3%) until the end of experiment, those were divided in heifers that became pregnant until the 16° month of age (33.3%), named Precocious group (P), 50% that did not became pregnant were the non precocious group (NP) 16% of the heifers did not ovulated and were named NO. There was no difference (P > 0.05) in the first ovulation age between P (439±27.9 days) and NP (445±36.8 days) groups. The weight of the 3 groups increased (P < 0.01), but did not differ (P > 0.05) between P and NP heifers but NO showed lower weight (P < 0.01) after the 12th month (P < 0.01). Sixty days before first ovulation, plasmatic leptin concentration increased (P < 0.01) in P group, but did not in NP or NO (P > 0.5), and there were no difference between groups. (P > 0.5). There was correlation between plasmatic leptin and body weight in P (r=0.36; P < 0.01) and NP (r=0.4313; P < 0.01), but did not in NO group (r=0.095; P > 0.5). Plasmatic IGF-I concentration increased (P < 0.01) in the 3 groups, from 8th to 16th month of age, but was higher in P (P < 0.01) than NP and NO, that did not differ among themselves. Before first ovulation there was, no increase (P > 0.1) in IGF-I in none of groups, but concentration was higher in P (P < 0.05) group. It could be concluded that leptin concentration as well as body weight were important in first ovulation, while IGF-I, in the sexual precocity determination.
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Efeito da administração de somatotropina pré-parto em novilhas da raça Holandês com elevada condição corporal sobre parâmetros metabólicos, reprodutivos e produção leiteira / Effect of prepartum somatotropin injection in late pregnant Holstein heifers with high body condition score on metabolic, reproductive parameters and milk production

Acosta, Diego Andres Velasco 28 February 2012 (has links)
Made available in DSpace on 2014-08-20T14:38:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_diego_andres_velasco_acosta.pdf: 554045 bytes, checksum: 4c51ec170f50997dc62e7caef5c6f9d2 (MD5) Previous issue date: 2012-02-28 / Negative energy balance (NEB) has been associated with changes in hormones that support follicular development in early lactation. Prepartum recombinant bovine somatotropin (rbST) injection led to reduced non-esterified fatty acids (NEFA) and β-hydroxybutyrate (BHBA) in the early postpartum period. Therefore, prepartum administration of somatotropin may result in metabolic changes that benefit the energetic balance of the postpartum dairy cows. The aim of this study was to determine the effect of prepartum injections of somatotropin in dairy heifers with high BCS on the markers of NEB, resumption of ovarian activity and milk production. Holstein heifers (n=20) with high body condition score (scale 1-5; BCS>3.5) were randomly divided into two groups: somatotropin group (n=10) that received two doses of 500 mg of rbST at -28 and -14 days from calving; and control group (n=10) that received applications of placebo in a similar manner to somatotropin group. Blood samples were collected weekly from 28 to 42 d after calving to evaluate BHBA and NEFA concentrations. Follicular development was also monitored via ultrasound examinations starting at days 10 postpartum and every 3 days until ovulation. Prepartum somatotropin administration did not affect (P =0.28) the moment of the first postpartum ovulation. The proportion of cows ovulating the first follicular wave postpartum was not different between groups (P=0.49). There was no effect (P>0.05) of prepartum treatment on the diameter of the first postpartum dominant follicle. There was a interaction days by group for plasma NEFA concentrations during the prepartum period (P= 0.03) and a tendency for the day (P=0.07) but no effect on the group (P=0.35). There was only an effect of the week (P<0.001) for postpartum NEFA concentrations. Postpartum NEFA concentration was higher at days 0, 7 and 14 than at 21, 28, 35 and 42 (P<0.05). For pre and postpartum BHBA there was not effect of days (P>0.05), group (P>0.05) or days by group (P=0.05). In conclusion, prepartum somatotropin treatment in dairy heifers with high body condition did not improve parameters that indicate that these heifers had a less severe NEB during the early postpartum period,had not affect development of the first follicular wave in the postpartum period and milk production. / O balanço energético negativo (BEN) tem sido associado com alterações nos hormônios que auxiliam o desenvolvimento folicular no início da lactação. A aplicação pré-parto de somatotropina recombinante bovina (rbST) pode levar a uma redução sérica dos ácidos graxos não esterificados (AGNE) e β-hidroxibutirato (BHBA) no período pós-parto. Portanto, a administração pré-parto de somatotropina pode resultar em alterações metabólicas que beneficiam o equilíbrio energético da vaca leiteira após o parto. O objetivo deste estudo foi determinar o efeito da administração pré-parto de somatotropina em novilhas leiteiras com elevado escore de condição corporal (ECC) sobre marcadores BEN, a retomada da atividade ovariana e produção de leite. Foram utilizadas novilhas da raça Holandês (n = 20) com ECC elevada (Escala 1-5; ECC > 3,5), foram divididos aleatoriamente em dois grupos: grupo somatotropina (n = 10) que recebeu duas aplicações de 500 mg de rbST nos dias -28 e -14 referente ao parto e grupo controle (n = 10) que recebeu aplicações de placebo no mesmo local e forma do grupo somatotropina. Amostras de sangue foram coletadas entre os dias -28 a 42 relativos ao parto para a avaliação das concentrações de BHBA e AGNE. O desenvolvimento folicular também foi monitorado através de exames de ultrassom a partir do dia 10 pós-parto, e cada 3 dias até o momento da primeira ovulação. A administração pré-parto de somatotropina não afetou (P = 0,28) o momento da primeira ovulação pós-parto. A proporção de vacas que ovularam na primeira onda folicular pós-parto não foi diferente entre os grupos (P = 0,49). Não houve efeito (P> 0,05) do tratamento pré-parto de somatotropina sobre o diâmetro do folículo dominante da primeira onda folicular pós-parto. Houve interação entre o dia e grupo para as concentrações plasmáticas de AGNE durante o período pré-parto (P = 0,03) e uma tendência para o dia (P = 0,07), mas nenhum efeito sobre o grupo (P = 0,35). Houve apenas um efeito da semana (P <0,001) para as concentrações de AGNE no pós-parto. As concentrações de AGNE pós-parto foram maiores nos dias 0, 7 e 14 do que em 21, 28, 35 e 42 (P <0,05). Para BHBA pré e pós-parto não houve efeito de dias (P> 0,05), grupo (P > 0,05) ou dias por grupo (P>0,05). Em conclusão, o tratamento pré-parto de somatotropina em novilhas leiteiras com condição corporal elevada não melhorou os parâmetros que indicam que estas novilhas tiveram um BEN menos grave durante o período pós-parto, não teve efeito sobre o desenvolvimento da primeira onda folicular pós-parto e produção leiteira.
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Avaliação da influência do sombreamento artificial no desenvolvimento de novilhas leiteiras em pastagens / Evaluation of the influence of artificial shade on dairy heifer development in pasture

Conceição, Maristela Neves da 03 November 2008 (has links)
Este estudo teve como objetivo avaliar e quantificar o efeito do sombreamento artificial proporcionado por diferentes tipos de materiais de cobertura sobre a fisiologia, o comportamento e o desenvolvimento de novilhas leiteiras, em ambiente de pastagens. A pesquisa foi realizada no período de 08/01/2007 à 30/04/2007. A área experimental foi dividida em 16 parcelas adjacentes e iguais com 84 m² cada. Foram comparados a testemunha (sem sombra) com três tipos de cobertura: telhas de fibrocimento sem cimento amianto, telhas galvanizadas e tela de polipropileno 80% As dimensões dos abrigos foram 2m x 4m e 4m de altura (4m² de sombra.animal-1), sem paredes laterais. Foram utilizadas 16 novilhas Holandesas e 16 Hol x Jersey com idade e peso iniciais de 17,2 ± 5,6 meses e 265,3 ± 66,9kg, respectivamente, pareadas em função da uniformidade de peso e idade. As novilhas permaneciam em piquetes de capim elefante (Penissetum purpureum) durante a noite e após as 9:00h eram conduzidas para as parcelas. A tgn foi registrada por minidatalogger conectado a globo negro para cálculo de CTR e ITGU em cada parcela. As variáveis meteorológicas foram obtidas no posto agrometeorológico da ESALQ/USP. Semanalmente foram registradas FR, TR e TP. As observações comportamentais foram realizadas em dias não consecutivos por 24 horas pelo método focal. As pesagens dos animais foram realizadas mensalmente. As condições ambientais durante o período da pesquisa foram caracterizadas como estressantes para novilhas. A análise física dos materiais (tgn, CTR e ITGU) indicou diferença entre os materiais de cobertura (P<0,05) sendo a telhas de fibrocimento sem amianto a mais confortável termicamente, seguida da telha galvanizada e da tela. Os valores de FR foram menores sob as telhas de fibrocimento (P<0,05) e semelhantes entre telha galvanizada e tela (P>0,05), os valores de TR não apresentaram diferença entre tratamentos somente entre horários e para a TP houve diferença (P<0,05) entre o tratamento fibrocimento e a testemunha, porém não houve entre os demais (P>0,05). A FR apresentou as respostas mais imediatas às alterações ambientais. Houve correlação da TR com a FR e a TP. Não foram observadas alterações comportamentais entre os tratamentos, os animais ficaram sob as sombras nas horas mais quentes do dia, preferencialmente em pé, o comportamento diário seguiu os padrões conhecidos para bovinos. O ganho de peso não foi alterado pelos tratamentos. A análise de custo indicou a cobertura de fibrocimento como a mais indicada para a construção de abrigos considerando-se os resultados encontrados. A pesquisa indicou haver melhora no bem estar térmico das novilhas, porém, não conseguiu determinar ganhos efetivos na utilização da sombra. / The objective of the present study was to evaluate and quantify the effect of artificial shade given by different types of roofing materials on the physiology, behavior and development of dairy heifers in a pasture environment. The present study took place from January 8, 2007 to April 30, 2007. The experimental area was divided into 16 equal, adjacent plots with 84 m2. Three roofing treatments (fiber-cement roofing tiles without amianthus, galvanized roofing tiles and 80% polypropylene screen) were compared to a control (no shade). Shelter structures had no lateral walls and measured 2m x 4m x 4m height (4m² shaded per animal). Animals consisted of 16 Holstein heifers and 16 Holstein x Jersey heifers with initial age and weight being 17.2 ± 5.6 months and 265.3 ± 66.9 kg, respectively. Animals were equally distributed among the treatments according to weight and age. At night, heifers were kept in fields with Pennisetum purpureum, also known as elephant grass. After 9:00 am, animals were taken to the experimental plots. Black globe thermometer temperature (tbg) was measured using a mini-datalogger connected to a black globe. Values were then used to calculate Radiant Thermic Load (RTL) and Black Globe Humidity Index (BGHI) of each plot. Meteorological variables were obtained from the agricultural-meteorological post at the ESALQ/USP. Respiration rate (RR), rectal temperature (RT) and skin temperature (ST) were registered weekly. Behavioral observations were recorded every other day using the focal method. Animals were weighed monthly. Environmental conditions during the research period were characterized as stressful for the heifers. Physical analysis of the material (tbg, RTL and BGHI) indicated the roofing treatments to be significantly different (P<0.05), with the fiber-cement roofing tiles without amianthus to be the most comfortable regarding temperature, followed by the galvanized roofing tiles and the 80% polypropylene screens. Respiration rate was lower under the fiber-cement roofing tiles (P<0.05) and similar under the galvanized tiles and polypropylene screen (P>0.05). RR values were lower under the fiber-cement tiles (P<0.05) and similar under the galvanized roofing tiles and polypropylene screen (P>0.05). There were no significant differences in RT values among treatments; however, a difference was found among data collection times. Concerning ST, fiber-cement tiles were significantly different from the control (P<0.05). On the other hand, there were no significant differences regarding ST among the other treatments (P>0.05). RR presented the most immediate response to environmental alterations. RT presented correlation with RR and ST. No behavioral alterations were observed among the treatments. Daily behavior followed known bovine patterns. Weight gain was not altered by the treatments. A cost analysis indicated fibercement roofing tiles to be better for shelter construction. The present study also indicated improved heifer thermal well-being; however, no effective gains could be determined from shade use.
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Efeito do fornecimento de silagens de milho com alta ou baixa digestibilidade da fibra sobre o ganho de peso e consumo de novilhas em crescimento / Effect of feeding growing heifers with corn silages with high or low fiber digestibility on intake, body gain

Marques, Bárbara Santos 25 January 2013 (has links)
Objetivou-se avaliar o efeito da digestibilidade da fibra do milho sobre o consumo, ganho de peso e composição da carcaça de novilhas Nelore em crescimento, de modo a validar este índice como indicador da qualidade nutricional de híbridos de milho em programas de melhoramento genético e de seleção de híbridos para silagem. Foram plantados quatro híbridos de milho com diferente digestibilidade da fibra, IAC 8390, 30F90Y, 30S40Y e DKB 390Y, sendo a digestibilidade da FDN da dieta determinada após incubação de 30 horas. Os milhos foram colhidos aos 62, 82 e 104 dias crescimento, para determinar principalmente a digestibilidade da folha e do colmo dos híbridos, para determinar quais híbridos fariam parte da dieta experimental. Foram utilizadas quarenta e oito novilhas da raça Nelore com aproximadamente 250 kg, confinadas por 63 dias, em delineamento de bloco casualizados, em grupo de 3 novilhas por baia, de acordo com o peso vivo inicial. A cada 21 dias, os animais eram pesados, sendo a avaliação da carcaça feita no início do período A dieta experimental foi constituída de quatro rações, com relação volumoso/concentrado de 20:80 e 40:60, com volumoso de duas silagens de milho, 30F90Y, de alta digestibilidade da FDN e, 30S40Y, de baixa digestibilidade da FDN. Foi analisado o tamanho de partícula de amostras da dieta e das sobras/baia pela peneira Penn State Forage Particle. Houve diferença na digestibilidade da FDN dos híbridos na fração colmo, entre os dias de coleta, sendo que a digestibilidade in vitro da matéria seca (DIVMS) reduziu após o período de florescimento dos híbridos e houve uma variação entre os híbridos, em cada coleta. A digestibilidade in vitro da fibra em detergente neutro (DIVFDN), também reduziu com a maturidade da planta, porém houve uma diferença entre os híbridos apenas na coleta aos 82 dias de crescimento. O híbrido 30F90Y foi superior aos demais ao analisar a DIVMS e DIVFDN. Houve diferença entre o tamanho de partículas da dieta oferecida e o tamanho de partícula que restou na sobras, sendo que houve efeito de seleção apenas para a dieta com 40% de concetrado. Houve interação milho*dieta tanto para consumo de matéria seca (CMS) quanto para consumo da fibra em detergente neutro (CFDN), sendo que o híbrido 30F90Y, de maior digestibilidade, teve consumo maior, inclusive na dieta com 20% de concentrado. Para desempenho, foi observado efeito da dieta no ganho médio diário (GMD), sendo maior o ganho de peso (GP) na dieta com a silagem do híbrido 30F90Y Já a conversão alimentar e a composição de carcaça não tiveram efeito de dieta, híbrido de milho ou interação dieta*milho. A utilização de híbridos com melhor digestibilidade da fibra, é uma indicador de híbr do destinado a nutrição animal, pois alterou o consumo, o ganho de peso, porém não alterou a conversão alimentar e composição de carcaça. / The objective of this study was to evaluate the effect of fiber digestibility on intake, weight gain and carcass of growing Nellore heifers, aiming to validate this rate as an indicator of nutritional quality on corn hybrids in programs of genetical improvement and selection of hybrids for silage. Four corn hybrids on different fiber digestibility were raised, IAC 8390, 30F90Y, 30S40Y and DKB 390Y, being the FDN digestibility determined on the diet after a 30-hour-incubation period. The harvest was at the 62, 82 and 104 growing days to mainly determine the leaf and stem digestibility in hybrids to identify which ones would be part of the experimental diet. Forty-eight Nellore heifers of approximately 250 kg BW were housed for 63 days, in randomized blocks, in groups of three heifers per pen, according to its initial body weight. Each 21 days the animals were weighed and the carcass evaluation was done in the beginning of the period. The experimental diet was composed of four rations at 20:80 and 40:60 of roughage/concentrate respectively, in which the corn silage was used the 30F90Y, the one with high digestibility in FDN, and the 30S40Y, of low digestibility in FDN. The particle size of samples collected from the diets and ortis of each pens were analyzed by the Penn State Forage Particle sieve. There was difference in the FDN digestibility for hybrids in the stem fraction among the collection days, being the dry matter digestibility in vitro (DIVMS) reduced after the hybrid blossom and there was a variancy among the hybrids, in each collection. The digestibility in vitro of fiber detergente neuter (DIVFDN), was also reduced according to tha plant maturity, however there was a difference among the hybrids only in the collection at the 82 day of growth. The hybrid 30F90Y was superior to the other when analyzed the DIVMS and DIVFDN. There was difference between the particle size on the diets and the particle size on the ortis, with a selection affect only for the diet at 40% concentrate. There was interaction on the corn*diet for the dry matter intake (CMS) and for the fiber detergent neuter intake (CFDN), beingt the hybrid 30F90Y of higher digestibility, intake, and also on the diet with 20% concentrate. For performance was observed the diet effect on the average in daily weight gain (GMD), in which the highest weight gain (GP) was obtained on the silage of the hybrid 30F90Y. The feed conversion and carcass had no diet effect, neither corn hybrid nor interaction diet*corn. The hybrids with higher fiber digestibility is an indicator for its usage in animal nutrition once they altered the intake and the weight gain, although it hasn\'t altered the feed conversion and the carcas.
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Avaliação de estratégias para aumentar a fertilidade de fêmeas nelore submetidas a protocolos de sincronização / Evaluation of strategies to increase fertility of Nellore females submited to synchronization protocols

Biehl, Marcos Vinicius 06 December 2012 (has links)
Três experimentos foram desenvolvidos para avaliar protocolos hormonais de sincronização de estro e ovulação em fêmeas Nelore, extratificadas nas três principais categorias de fêmeas (vacas secas, novilhas e vacas paridas) comumente encontradas nas propriedades. Os experimentos possuíam objetivos de comparar a performance reprodutiva das categorias supra citadas, sobre a taxa de detecção do estro, taxa de prenhez na IA (exp. I e II) e/ou IATF (exp III) e no repasse, de fêmeas submetidas a protocolos de sincronização do estro e ovulação. EXP I: Foram utilizadas vacas Nelore não lactantes (n=286), blocadas em um esquema fatorial 2x3, e receberam no D0 o CIDR e 2mg de benzoato de estradiol (BE). O CIDR permaneceu por 5 dias (D5) ou 7 dias (D7), no dia da remoção do CIDR, as vacas receberam PGF2&alpha; (12,5mg, 25mg ou 50mg), formando os tratamentos: 5d12,5mg, 5d25mg, 5d50mg, 7d12,5mg, 7d25mg e 7d50mg. O estro foi detectado em 83.2% (238/286) das vacas, onde D7 (88,0%) foi superior (P<0,05) ao D5 (78,7%). Não houve diferença no tempo médio para detecção do estro que foi de 70,1 ±17,2 h. A taxa de concepção não diferiu entre os tratamentos. A taxa de prenhez à IA foi maior (P<0,05) para o D7 (54,2%) quando comparado ao D5 (39,6%). A taxa de prenhez no repasse e na prenhez total não diferiram entre os tratamentos. EXP II: Utilizou-se 407 novilhas Nelore pré-puberes, blocadas em um esquema fatorial 4x2, as novilhas receberam no D0 o CIDR e 2 mg de BE, o CIDR permaneceu por 5, 7, 9 ou 11 dias. No dia da remoção do CIDR, as novilhas receberam 25mg de PGF2&alpha; e 300 UI eCG. Além disso metade das novilhas receberam 1 mg de BE 48 horas após a retirada do CIDR. A detecção do estro foi maior (P<0,05) para as novilhas que receberam BE (87,3%) quando comparado aos s/BE (54,6%). O tempo médio para detecção do estro foi de 68,1 ±17,3 h. A taxa de concepção não foi influênciada pelos tratamentos, porém a taxa de prenhez da inseminação da sincronização foi maior para o grupo BE (18,8%) quando comparado ao s/BE (12,4%). A taxa de prenhez final não diferiu entre os tratamentos e foi de 62,3%. EXP III: Foram utilizadas vacas Nelore lactantes (n=191), divididas em dois tratamentos: 1xPGF-5d (as vacas permaneceram com o CIDR por 7 dias, sendo que 25mg de PGF2&alpha; foi aplicada no D5); 2xPGF-0/7d (as vacas permaneceram com o CIDR por 7 dias, sendo realizadas duas aplicações de 12,5mg de PGF2&alpha;, no D0 e D7). O CIDR foi retirado no D7, e aplicou-se 0,3 ml de ECP e 300 UI de eCG. Após 50 horas todas as vacas foram submetidas à IATF. No momento da inserção do CIDR 24% das vacas estavam ciclícas. O estro foi detectado em 54,45% (104/191) das vacas, sendo similar entre os tratamentos. O tempo médio para detecção do estro foi de 36,4 ± 8,7 h. Não houve diferença na concepção à IATF, que foi de 59,5 e 59,6% para os tratamentos 1xPGF-5d e 2xPGF- 0/7d, respectivamente. A taxa de prenhez ao final da estação de monta não diferiu e foi de 82,9% para 1xPGF-5d e 86,6% para 2xPGF-0/7d. Em todos os experimentos foi realizada a detecção do estro, com o auxilio de rufiões por até 5 dias após a remoção do CIDR, sendo novamente detectado 10 dias após por um periodo de até 10 dias. Os animais dos exp. I e II foram inseminadas de acordo com o protocolo AM/PM. O diagnóstico de gestação foi realizado de acordo com a caracteristica de cada experimento, mas sempre com o objetivo de identificar e quantificar a origem da prenhez (IA ou repasse). Em vacas Nelore não lactantes, a utilização de protocolos de 7 dias, possui uma performance reprodutiva melhor do que 5 dias de permanência do CIDR. Em novilhas pré-puberes a utilização de BE 48 horas após a remoção do CIDR, aumentou a taxa de detecção de estro, impactanto diretamente no incremento da taxa de prenhez à IA. A utilização do protocolo 7d BE+CIDR, apresenta bons resultados reprodutivos, sendo que podemos reduzir o número de manejos sem o comprometimento da performance reprodutiva, realizando a aplicação de 12,5mg na inserção e na retirada do CIDR. / Three experiments were designed to evaluate estrus synchronization protocols in Nellore females of three different class (dry cows, heifers and lactating cows) commonly found in properties. The experiments had aim to compare a reproductive performance of the categories mentioned above, at the estrus detection, pregnancy rate at AI (exp. I and II) or TAI (exp. III), pregnancy rate at rebreeding, of females submited to estrus synchronization program and ovulation. EXP I: Nonlactating Nellore cows (n=286), were randomized in a 2x3 fatorial arrangement. All animals received the CIDR and 2 mg of EB at D0, the CIDR remained for 5 days (D5) or 7 days (D7). At day of CIDR removal, cows received PGF2&alpha; treatments (12.5mg, 25mg and 50mg), the treatments followed: 5d12.5mg, 5d25mg, 5d50mg, 7d12.5mg, 7d25mg and 7d50mg. Estrus was detected in 83.2% (238/286) of cows, where D7 (88.0%) was higher (P<0.05) than D5 (78.7%). The onset of estrus did not differ among groups and was 70.1 ± 17.2 hours. Conception rate did not differ among treatments. The pregnancy rate at AI was greater (P<0.05) for D7 (54.2%) compared to D5 (39.6%). The pregnancy rate at rebreeding and overall pregnancy did not differ among treatments. EXP II: Prepubertal Nellore heifers (n=407), randomized in a 4x2 factorial arrangement. Heifers received CIDR and 2 mg EB at D0, CIDR remained for 5, 7, 9 or 11 days. On day of CIDR removal, heifers received 25mg of PGF2&alpha; and 300 IU of eCG. Half of the heifers received 1 mg of EB 48 hours after CIDR removal. Estrus detection was greater in EB (87.3%) when compared to NoEB (54.6%). The onset of estrus did not differ among treatments and was 68.1 ± 17.3 hours after CIDR removal. Conception rate was similar among treatments. The pregnancy rate at AI of synchronization was higher for EB (18.8%) compared with NoEB (12.4%). The final pregnancy rate did not differ among treatments. EXP III: Lactating Nellore cows (n=191) were randomized in two groups, 1xPGF-5d (cows received CIDR for 7 days, and 25 mg of PGF was applied on D5); 2xPGF-0/7d (cows received CIDR for 7 days, and two injections of 12.5mg of PGF, on D0 an D7). CIDR was removed on D7, and was associate with injections of 0.3 ml ECP and 300 IU of eCG. TAI was performed 50 h after CIDR removal. Estrus was detected in 54.45% (104/191), and did not differ between groups. The onset of estrus did not differ, and was 36.4 ± 8.7 hours after CIDR removal. The conception rate at TAI did not differ and was 59.5 and 59.6% for 1xPGF-5d and 2xPGF-0/7d, respectively. The final pregnancy rate at the end of breeding season did not differ and was 82.9% for 1xPGF-5d and 86.6% for 2xPGF- 0/7d. All experiments were performed estrus detection with teasers for 5 days after CIDR removal, and was detected again after 10 days, and performed for 10 days. All animals of exp. I and II were inseminated according AM/PM protocol. The pregnancy diagnosis was performed according to caracteristic of each experiment, but always with the goal of identifying and quantifying the origin of pregnancy (AI or rebreeding). Data were analyzed using the statistical program SAS 9.9, for binominal variables we used GLIMMIX procedure and MIXED procedure for continuous variables. In nonlactating Nellore cows, the use of protocols for 7 days, has a better reproductive performance than 5 days of CIDR. In prepubertal heifers using BE 48 hours after CIDR removal, allows for greater estrus detections and increased number of inseminations, and increasing the pregnancy rate at AI. The use of 7d EB+CIDR program yields good reproductive results, and we can reduce a number of handlings without reduce a reproductive performance.
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Estudo temporal da dinâmica folicular e parâmetros endócrinos de novilhas taurinas, zebuínas e bubalinas, mantidas sob o mesmo manejo nutricional / Temporal study of follicular dynamics and endocrine patterns of taurine, zebu and bubaline heifers, maintained in the same nutritional status

Baldrighi, Julia Maria 29 April 2013 (has links)
Sabendo do impacto que nutrição e ambiente podem ter sobre a reprodução é de fundamental importância para aplicação nas biotecnologias da reprodução analisar o ciclo reprodutivo de novilhas bovinas (taurinas e zebuínas) e bubalinas, temporalmente, sob as mesmas condições nutricionais e de manejo. Assim, este estudo teve como objetivo analisar temporalmente a dinâmica folicular de novilhas Holandesas, Gir e Búfalas, mantidas sob as mesmas condições de manejo. As fêmeas foram alocadas no Departamento de Reprodução Animal (CBRA/FMVZ/USP), Campus Pirassununga. No Experimento 1 as fêmeas foram pré-sincronizadas com duas doses de prostaglandina F2&alpha; (PGF; Dcloprostenol, 150 &micro;g IM, Prolise&reg;), com 14 dias de intervalo. O dia da primeira ovulação, após segunda dose de PGF, foi considerado como o dia 0 do ciclo. A partir do D0 foram realizadas avaliações diárias da dinâmica folicular (folículos > 3 mm) por ultrassonografia (Aloka SSD500, 7,5MHz), até à detecção da ovulação subsequente. O Experimento 2 foi realizado após a segunda ovulação, avaliando-se a dinâmica folicular a cada 12h para detectar o momento do desvio da primeira onda folicular. As variáveis resposta foram analisadas pelo PROC GLIMMIX do SAS. Não foi encontrada diferença entre os intervalos inter-ovulatórios (22,3±0,65; 22,1±0,95; 23,8±0,63 dias; Holandesas, Gir e Búfalas, respectivamente). No entanto, em relação às características a seguir, foram encontradas diferenças significativas (P<0,05) em pelo menos um dos grupos genéticos, Holandesas, Gir e Búfalas, respectivamente, para o número de ondas foliculares em um ciclo estral (2,6±0,17a, 3,4±0,24b, 2,8±0,11a ondas), número de folículos recrutados após primeira onda (26,1±1,7a, 66,2±15,9b, 22,7±1,91a folículos), e segunda ovulação (30,2±3,08a, 74,2±18,8b, 27,1±2,8a folículos), diâmetro do FD da primeira onda (15,8±0,66a, 12,3±0,32b, 12,1±0,03b mm), diâmetro do FD da segunda onda (11,8±0,73a, 9,4±0,52b, 10,6±0,31ab mm), diâmetro do folículo ovulatório (15±0,33a, 13,7±0,74ab, 13,5±0,46b mm), diâmetro máximo do CL (26,8±0,54a, 22,3±0,98b, 19,5±0,32c mm), concentração máxima de P4 no ciclo (7,7±0,33a, 8,0±0,85a, 5,3±0,28b ng/ml) e duração da dominância do FD da primeira onda (8,0±0,49a, 5,2±1,07b, 8,1±0,44a dias). Ainda com relação aos esteroides, a análise de testosterona plasmática nos 13 primeiros dias do ciclo foi semelhante entre as bovinas e menor para as bubalinas. Insulina e IGF plasmático também foram mensuradas. Novilhas taurinas e bubalinas (4,1±0,67 mUI/ml, 6,0±0,52 mUI/ml, respectivamente) apresentaram menores concentrações de insulina do que as zebuínas (9,0±2,15 mUI/ml), sendo que estas concentrações foram maiores durante a fase luteínica do que na fase folicular. Em relação ao desvio folicular no Experimento 2, não foram encontradas diferenças entre as raças para o momento do desvio (1,8±0,15; 2,1±0,21; 1,8±0,18 dias), entretanto, novilhas Holandesas apresentaram neste momento maior diâmetro de FD e FS (FD: 7,9±0,33; FS: 7,0±0,27 mm; P<0,05) quando comparadas às Gir (FD: 7,0±0,32; FS: 6,2±0,28mm) e às Búfalas (FD: 6,8±0,19; FS: 6,3±0,29mm). Não foram encontradas diferenças para concentrações de IGF-I total no fluído folicular e no plasma das taurinas e das zebuínas, porém as concentrações nas bubalinas foram superiores a das bovinas. Com esses resultados, conclui-se que novilhas de grupos genéticos diferentes (Bos taurus, Bos indicus e Bubalus bubalis) apresentam características de crescimento folicular e luteínico específicos para a raça, quando avaliadas temporalmente e nas mesmas condições de manejo ambiental e nutricional. / Considering the impact that nutrition and environment have over reproduction, it is essential for the reproductive biotechnologies to analyze the reproductive cycle of bovine (taurine and zebu) and bubaline heifers at the same time and under the same nutritional management. Therefore, the objective of this work was to study the follicular dynamic of Holstein (n=15), Gir (n=11) and Buffalo (n=15) heifers kept under the same conditions. All heifers were housed at the Department of Animal Reproduciton, (CBRA/FMVZ/USP), Pirassununga Campus. Animals were pre-synchronized with two doses of prostaglandin F2&alpha; (PGF; Dcloprostenol, 150&micro;g, IM), fourteen days apart (D0 = day of first ovulation). From D0, it was performed daily ultrasound scan of the ovaries to track follicular dynamics (follicles &#8805; 3mm) until the occurrence of the second ovulation. After the second ovulation, the follicular dynamic was performed twice daily to detect the time of deviation of the first follicular wave. The response variables were analyzed by PROC GLIMMIX, SAS. No difference was found among the inter-ovulatory interval (22.3±0.65; 22.1±0.95; 23.8±0.63 days) for Holstein, Gir and Buffalo, respectively. Differences were present (P<0.05) in at least one of the genetic groups, Holstein, Gir and Buffalo, respectively, for number of follicular waves (2.6±0,17a, 3.4±0,24b, 2.8±0,11a waves), number of follicles recruited after first (26.1±1.7a, 66.2±15.9b, 22.7±1.91a follicles), and second ovulation (30.2±3.08a, 74.2±18.8b, 27.1±2.8a follicles), diameter of first wave DF (15.8±0.66a, 12.3±0.32b, 12.1±0.03b mm), diameter of second wave DF (11.8±0.73a, 9.4±0.52b, 10.6±0.31ab mm), diameter of ovulatory follicle (15±0.33a, 13.7±0.74ab, 13.5±0.46b mm), maximum diameter of CL (26.8±0,54a, 22.3±0.98b, 19.5±0.32c mm), maximum concentration of P4 during ovulatory cycle (7.7±0.33a, 8.0±0.85a, 5.3±0.28b ng/ml) and length (8.0±0.49a, 5.2±1.07b, 8.1±0.44a days) of first wave dominant follicle dominance. No differences were found among the breeds for the moment of deviation (1.8±0.15; 2.1±0.21; 1.8±0.18 days). However, Holstein heifers presented larger DF and SF diameter (FD: 7.9±0.33; FS: 7.0±0.27mm; P<0.05) at deviation when compared with Gir (DF: 7.0±0.32; SF: 6.2±0.28mm) and Buffalo (DF: 6.8±0.19; SF: 6.3±0.29mm). Analyzing other steroids, concentration of blood testosterone during the first 13 days of the cycle was similar for the bovine heifers and lower for the bubaline heifers. Blood insulin and IGF-I were also measured. Holstein and bubaline heifers shown smaller concentrations of insulin (4.1±0.67 mUI/ml, 6.0±0.52 mUI/ml, respectively) than Gir heifers (9.0±2.15 mUI/ml), and also, when grouping the data collected from luteal phase and follicular phase, the result shows that during the period of high P4, insulin concentrations are lower than during the period of high E2. No differences were found among bovine breeds for the IGF-I concentration in follicular fluid, but they were lower than the concentrations presented in the bubaline follicular fluid. The results herein presented show that heifers from different genetic groups (Bos taurus, Bos indicus and Bubalus bubalis), maintained at the same nutritional and environmental status, have different folliculogenesis and luteal growth, which are specific to its breed.
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Expressão gênica semi-quantitativa de receptores de gonadotrofinas em folículos dominantes de novilhas pré-púberes e adultas das raças Nelore (Bos primigenius indicus) e Marchigiana (Bos primigenius taurus) / Semi-quantitative gene expression of gonadotrophin receptors in dominant follicles of Nelore (Bos primigenius indicus) and Marchigiana (Bos primigenius taurus) prepubertal heifers and cows

Zanon, José Eduardo de Oliveira 23 March 2006 (has links)
Com o objetivo de semi-quantificar a expressão gênica para receptores de gonadotrofinas nas células de folículos dominantes em animais pré-púberes (bezerras) das raças Nelore e Marchigiana e novilhas púberes da raça Nelore, buscando diferenças que possibilitem a procura de respostas para a deficiência da competência de desenvolvimento dos oócitos de animais pré-púberes que permitam a utilização destes em programas de melhoramento genético animal, foram utilizados 8 animais, sendo três bezerras Nelore, três bezerras Marchigiana, com 7 meses de idade, e duas novilhas Nelore, com 25 meses de idade. Foi realizado acompanhamento da onda folicular através de ultra-sonografia por dois meses, e os animais foram abatidos no momento que o folículo dominante apresentava diâmetro máximo (8, 10 e 14 mm, respectivamente). Folículos dominantes foram dissecados e isolados, e foi feita extração de RNA total. Foram feitas quatro reações de síntese de cDNA a partir de cada amostra. Para análise da expressão gênica semi-quantitativa, foram realizadas reações de Duplex-PCR, utilizando-se dois oligonucleotídeos iniciadores em cada reação, um para gene controle, o gapdh, e outro para o gene alvo, receptor do hormônio folículo estimulante ou receptor do hormônio luteinizante. Estas reações foram realizadas em triplicata a partir de cada fonte de cDNA de cada amostra, e os produtos foram aplicados em gel de poliacrilamida, e fotografados. Os resultados foram obtidos a partir da razão entre a intensidade da banda do gene alvo e a intensidade da banda do gene controle, e os valores médios foram analisados estatisticamente. Foi encontrada menor expressão relativa do gene do receptor de LH em bezerras da raça Nelore quando comparadas com as novilhas da raça Nelore e as bezerras da raça Marchigiana. Foi detectada a presença de um splicing alternativo para o gene do LHr, que apresentou comportamento semelhante ao gene padrão. Não foi encontrada diferença significativa na expressão do gene do FSHr entre os grupos estudados. Os resultados sugerem uma maior importância do LH nos estágios finais de desenvolvimento folicular, demonstrado aqui pela menor expressão relativa de lhr nos folículos dominantes de bezerras Nelore em relação às novilhas púberes, que pode ser um dos motivos para o baixo potencial de desenvolvimento dos oócitos destes animais após a fertilização in vitro / With the objective to semiquantify the gene expression for gonadotrophins receptors in dominant follicles in Nelore and Marchigiana prepubertal heifers and Nelore adult cows, being searched differences that make possible the search of answers for the low developmental potential of oocytes from prepubertal heifers that allow the use of these in programs of animal genetic improvement, had been used 8 animals, being three Nelore heifers, three Marchigiana heifers, with 7 months of age, and two Nelore heifers, with 25 months of age. Accompaniment of the follicular wave was carried through daily ultrasonografic exams for two months, and the animals had been slaughtered at the moment that dominant follicle presented maximum diameter (8, 10 and 14 mm, respectively). Dominant follicles had been dissected and isolated, and extraction of total RNA was performed. Four reactions of synthesis of cDNA from each sample had been made. For analysis of the semi-quantitative gene expression, reactions of Duplex-PCR had been carried through, using themselves two initiating oligonucleotídeos in each reaction, one for housekeeping gene, gapdh, and another one for the target gene, fshr and lhr. These reactions had been carried through in third copy from each source of cDNA of each sample, and the products had been applied in poliacrilamida gel electrophoresis, and photographed. The results had been gotten from the reason enter the intensity of the band of the target gene and the intensity of the band of the housekeeping gene, and the average values had been analyzed in a statistical software. Lower relative expression of lhr in Nelore heifers was found when compared with the Nelore adult cows and the Marchigiana heifers. An alternative splicing for lhr was detected, that presented similar behavior to the gene standard. Significant difference in the expression of the gene of the FSHr between the studied groups was not found. The results suggest a importance of the LH in the final periods of follicular development, demonstrated for the lower relative expression of lhr in the dominant follicles of Nelore heifers in relation to the adult cows in this study, that can after be the one of the reasons for the low developmental capacity of oocytes of these animals after in vitro fertilization
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Estudo temporal da dinâmica folicular e parâmetros endócrinos de novilhas taurinas, zebuínas e bubalinas, mantidas sob o mesmo manejo nutricional / Temporal study of follicular dynamics and endocrine patterns of taurine, zebu and bubaline heifers, maintained in the same nutritional status

Julia Maria Baldrighi 29 April 2013 (has links)
Sabendo do impacto que nutrição e ambiente podem ter sobre a reprodução é de fundamental importância para aplicação nas biotecnologias da reprodução analisar o ciclo reprodutivo de novilhas bovinas (taurinas e zebuínas) e bubalinas, temporalmente, sob as mesmas condições nutricionais e de manejo. Assim, este estudo teve como objetivo analisar temporalmente a dinâmica folicular de novilhas Holandesas, Gir e Búfalas, mantidas sob as mesmas condições de manejo. As fêmeas foram alocadas no Departamento de Reprodução Animal (CBRA/FMVZ/USP), Campus Pirassununga. No Experimento 1 as fêmeas foram pré-sincronizadas com duas doses de prostaglandina F2&alpha; (PGF; Dcloprostenol, 150 &micro;g IM, Prolise&reg;), com 14 dias de intervalo. O dia da primeira ovulação, após segunda dose de PGF, foi considerado como o dia 0 do ciclo. A partir do D0 foram realizadas avaliações diárias da dinâmica folicular (folículos > 3 mm) por ultrassonografia (Aloka SSD500, 7,5MHz), até à detecção da ovulação subsequente. O Experimento 2 foi realizado após a segunda ovulação, avaliando-se a dinâmica folicular a cada 12h para detectar o momento do desvio da primeira onda folicular. As variáveis resposta foram analisadas pelo PROC GLIMMIX do SAS. Não foi encontrada diferença entre os intervalos inter-ovulatórios (22,3±0,65; 22,1±0,95; 23,8±0,63 dias; Holandesas, Gir e Búfalas, respectivamente). No entanto, em relação às características a seguir, foram encontradas diferenças significativas (P<0,05) em pelo menos um dos grupos genéticos, Holandesas, Gir e Búfalas, respectivamente, para o número de ondas foliculares em um ciclo estral (2,6±0,17a, 3,4±0,24b, 2,8±0,11a ondas), número de folículos recrutados após primeira onda (26,1±1,7a, 66,2±15,9b, 22,7±1,91a folículos), e segunda ovulação (30,2±3,08a, 74,2±18,8b, 27,1±2,8a folículos), diâmetro do FD da primeira onda (15,8±0,66a, 12,3±0,32b, 12,1±0,03b mm), diâmetro do FD da segunda onda (11,8±0,73a, 9,4±0,52b, 10,6±0,31ab mm), diâmetro do folículo ovulatório (15±0,33a, 13,7±0,74ab, 13,5±0,46b mm), diâmetro máximo do CL (26,8±0,54a, 22,3±0,98b, 19,5±0,32c mm), concentração máxima de P4 no ciclo (7,7±0,33a, 8,0±0,85a, 5,3±0,28b ng/ml) e duração da dominância do FD da primeira onda (8,0±0,49a, 5,2±1,07b, 8,1±0,44a dias). Ainda com relação aos esteroides, a análise de testosterona plasmática nos 13 primeiros dias do ciclo foi semelhante entre as bovinas e menor para as bubalinas. Insulina e IGF plasmático também foram mensuradas. Novilhas taurinas e bubalinas (4,1±0,67 mUI/ml, 6,0±0,52 mUI/ml, respectivamente) apresentaram menores concentrações de insulina do que as zebuínas (9,0±2,15 mUI/ml), sendo que estas concentrações foram maiores durante a fase luteínica do que na fase folicular. Em relação ao desvio folicular no Experimento 2, não foram encontradas diferenças entre as raças para o momento do desvio (1,8±0,15; 2,1±0,21; 1,8±0,18 dias), entretanto, novilhas Holandesas apresentaram neste momento maior diâmetro de FD e FS (FD: 7,9±0,33; FS: 7,0±0,27 mm; P<0,05) quando comparadas às Gir (FD: 7,0±0,32; FS: 6,2±0,28mm) e às Búfalas (FD: 6,8±0,19; FS: 6,3±0,29mm). Não foram encontradas diferenças para concentrações de IGF-I total no fluído folicular e no plasma das taurinas e das zebuínas, porém as concentrações nas bubalinas foram superiores a das bovinas. Com esses resultados, conclui-se que novilhas de grupos genéticos diferentes (Bos taurus, Bos indicus e Bubalus bubalis) apresentam características de crescimento folicular e luteínico específicos para a raça, quando avaliadas temporalmente e nas mesmas condições de manejo ambiental e nutricional. / Considering the impact that nutrition and environment have over reproduction, it is essential for the reproductive biotechnologies to analyze the reproductive cycle of bovine (taurine and zebu) and bubaline heifers at the same time and under the same nutritional management. Therefore, the objective of this work was to study the follicular dynamic of Holstein (n=15), Gir (n=11) and Buffalo (n=15) heifers kept under the same conditions. All heifers were housed at the Department of Animal Reproduciton, (CBRA/FMVZ/USP), Pirassununga Campus. Animals were pre-synchronized with two doses of prostaglandin F2&alpha; (PGF; Dcloprostenol, 150&micro;g, IM), fourteen days apart (D0 = day of first ovulation). From D0, it was performed daily ultrasound scan of the ovaries to track follicular dynamics (follicles &#8805; 3mm) until the occurrence of the second ovulation. After the second ovulation, the follicular dynamic was performed twice daily to detect the time of deviation of the first follicular wave. The response variables were analyzed by PROC GLIMMIX, SAS. No difference was found among the inter-ovulatory interval (22.3±0.65; 22.1±0.95; 23.8±0.63 days) for Holstein, Gir and Buffalo, respectively. Differences were present (P<0.05) in at least one of the genetic groups, Holstein, Gir and Buffalo, respectively, for number of follicular waves (2.6±0,17a, 3.4±0,24b, 2.8±0,11a waves), number of follicles recruited after first (26.1±1.7a, 66.2±15.9b, 22.7±1.91a follicles), and second ovulation (30.2±3.08a, 74.2±18.8b, 27.1±2.8a follicles), diameter of first wave DF (15.8±0.66a, 12.3±0.32b, 12.1±0.03b mm), diameter of second wave DF (11.8±0.73a, 9.4±0.52b, 10.6±0.31ab mm), diameter of ovulatory follicle (15±0.33a, 13.7±0.74ab, 13.5±0.46b mm), maximum diameter of CL (26.8±0,54a, 22.3±0.98b, 19.5±0.32c mm), maximum concentration of P4 during ovulatory cycle (7.7±0.33a, 8.0±0.85a, 5.3±0.28b ng/ml) and length (8.0±0.49a, 5.2±1.07b, 8.1±0.44a days) of first wave dominant follicle dominance. No differences were found among the breeds for the moment of deviation (1.8±0.15; 2.1±0.21; 1.8±0.18 days). However, Holstein heifers presented larger DF and SF diameter (FD: 7.9±0.33; FS: 7.0±0.27mm; P<0.05) at deviation when compared with Gir (DF: 7.0±0.32; SF: 6.2±0.28mm) and Buffalo (DF: 6.8±0.19; SF: 6.3±0.29mm). Analyzing other steroids, concentration of blood testosterone during the first 13 days of the cycle was similar for the bovine heifers and lower for the bubaline heifers. Blood insulin and IGF-I were also measured. Holstein and bubaline heifers shown smaller concentrations of insulin (4.1±0.67 mUI/ml, 6.0±0.52 mUI/ml, respectively) than Gir heifers (9.0±2.15 mUI/ml), and also, when grouping the data collected from luteal phase and follicular phase, the result shows that during the period of high P4, insulin concentrations are lower than during the period of high E2. No differences were found among bovine breeds for the IGF-I concentration in follicular fluid, but they were lower than the concentrations presented in the bubaline follicular fluid. The results herein presented show that heifers from different genetic groups (Bos taurus, Bos indicus and Bubalus bubalis), maintained at the same nutritional and environmental status, have different folliculogenesis and luteal growth, which are specific to its breed.

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