Made available in DSpace on 2014-06-12T23:03:17Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8756_1.pdf: 771984 bytes, checksum: b093f8e4876f7150d189bb6a8bba14da (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2005 / As doenças crônicas não transmissíveis são, atualmente, as responsáveis pela maior parcela de óbitos e de custos elevados com assistência hospitalar, no Brasil. São doenças de etiologia multifatorial das quais compartilham vários fatores de risco modificáveis, como o tabagismo, a inatividade física, a alimentação inadequada, a obesidade e a dislipidemia. O presente estudo objetivou estudar a prevalência do sobrepeso e obesidade e dos níveis de glicose, colesterol e triglicerídeos em maiores de dezoito anos, no Estado de Pernambuco. Para este fim, utilizou uma sub-amostra de 2.786 adultos do banco de dados da II Pesquisa Estadual de Saúde e Nutrição, 1997. O desenho do estudo foi do tipo transversal e a coleta de dados foi realizada através de questionário, medidas antropométricas (peso e altura) e exames bioquímicos. O estado nutricional foi avaliado pelo IMC (kg/m²). Para as dosagens de glicose foi utilizado o Glucometer 4 e as dosagens de colesterol e triglicerídeos foram analisadas pelos métodos de Huang modificado e Soloni modificado, respectivamente. Na análise estatística dos resultados utilizaram-se os testes do Qui-quadrado de Pearson e o Kruskal-Wallis H sendo considerado um nível crítico de 95% de confiança (p<0,05), para ambos. Os resultados mostraram uma prevalência de 39,6% de excesso de peso para o Estado como um todo, dos quais 28% corresponderam ao sobrepeso (IMC &#8805; 25- 29,9) e 11,6% a obesidade (IMC &#8805; 30). O excesso de peso foi mais freqüente nos adultos de 50 a 69 anos e no sexo feminino com associação estatisticamente significante (p<0,001). Entre as variáveis sócio-econômicas e demográficas, o excesso de peso mostrou associação significativa com o local de residência e a condição de trabalho sendo mais freqüente entre os adultos que residem em áreas urbanas e os que trabalham com estabilidade. Os níveis de glicose, colesterol e triglicerídeos nos adultos apresentaram-se elevados (4,4%, 26,7% e 11,6%, respectivamente), com associação estatisticamente significante em relação ao sobrepeso e à obesidade. Os resultados confirmam a elevada prevalência do sobrepeso e obesidade na população adulta e destaca a importância do fortalecimento e da aplicação de medidas globais de promoção e prevenção da saúde e nutrição, principalmente na população de risco

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:03:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8771_1.pdf: 1504241 bytes, checksum: 7d34974e8a239999338e6e42900ad47d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / UNIVERSIDADE FEDERAL DO RECONCAVO DA BAHIA / O sistema serotoninérgico apresenta-se como tema de interesse em estudos sobre o desenvolvimento pela extensão e diversidade de funções às quais está relacionado. A serotonina desempenha papel importante em vários tecidos, dentre eles os do trato digestório. O presente trabalho investigou, em ratos, o efeito do tratamento neonatal com inibidor seletivo de recaptação da serotonina sobre o desenvolvimento do intestino delgado. Para isso, ratos Wistar machos foram divididos em dois grupos segundo tratamento: Fluoxetina (F, n=16) e Controle (C, n=16). Do 1o ao 21o dia de vida, os animais foram tratados com fluoxetina 10mg/kg ou solução salina NaCl 0,9%, (1ml/100g, via sc.). Diariamente foram aferidos parâmetros murinométricos. Foi verificado: Peso corporal (PC), Eixo látero-lateral do crânio (ELLC), Eixo ântero-posterior do crânio (EAPC), Comprimento da cauda (CC) e Eixo longitudinal do corpo (EL). Dezesseis animais foram sacrificados aos 22 dias, e dezesseis aos 75 dias. Os animais foram submetidos a laparotomia, em seguida, foi coletado o intestino delgado, sendo mensurado o comprimento do mesmo. O intestino delgado de cada animal foi seccionado em dois segmentos: intestino delgado proximal (IDP) e intestino delgado distal (IDD). A região anterior de cada um dos dois segmentos intestinais, primeiros 5-8cm, foi fixada em Bouin e os outros dois segmentos em fixador Giemsa. Respectivamente, de acordo com os procedimentos histológicos, lâminas foram coradas: 1) com hematoxilina e eosina, a fim de avaliar a espessura da túnica muscular, e, 2) pelo método giemsa, a fim de evidenciar os neurônios mioentéricos. As lâminas foram analisadas sob microscópio óptico (aumento de 400X). Foi utilizado o teste t de Student (p<0,05). Os animais F apresentaram redução no PC (F<C), ELLC (F<C), EAPC (F<C), CC (F<C) e EL (F<C), quando comparados aos animais do grupo C. O crescimento longitudinal do intestino delgado foi reduzido aos 22 (F<C) e 75 dias (F<C) dos animais tratados. Não houve diferença quanto à espessura da túnica muscular. Nos animais tratados de 75 dias o número de neurônios foi reduzido, nos segmentos IDP (F<C) e IDD (F<C). As células nervosas mioentéricas do segmento IDD dos animais tratados apresentaram menor tamanho em relação às do grupo C apenas aos 75 dias (F<C). Estes resultados indicam que o sistema serotoninérgico participa do desenvolvimento de estruturas do intestino; em particular, do plexo mioentérico

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:04:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8863_1.pdf: 1763640 bytes, checksum: 7b32db97a866891f8efc3a4388ffcf78 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / A deficiência de vitamina A (VAD) é um grave problema de saúde pública em países onde representa uma das maiores causas de cegueira evitável em crianças. Diversos marcadores bioquímicos são correntemente recomendados para definir a VAD como um problema de saúde pública: retinol sérico e hepático, resposta relativa a dose (RDR), resposta sérica de 30 dias (S30DR), MRDR entre outros. A VAD subclínica é detectada com o uso de marcadores envolvidos no metabolismo do retinol. Nosso objetivo foi comparar a prevalência de VAD subclínica em função de alguns marcadores bioquímicos para promover a intervalidação entre eles. Amostras de plasma de crianças com idade variando de 2 a 141 meses foi coletado com o objetivo de analisar a concentração de retinol sérico, RDR, S30DR. Fígado de crianças necropsiadas foi usado para analisar o retinol hepático. A prevalência de crianças na forma subclínica da deficiência foi obtida e seus valores analisados. Os resultados obtidos foram 39%, 34%, 39% e 53% para retinol sérico e hepático, RDR e S30DR, respectivamente. Os marcadores subclínicos foram intervalidados por revelarem os mesmos níveis de importância na definição da VAD a ser monitorado para avaliar os programas de intervenção, a fim de melhorar o status de vitamina A da população. Entre os marcadores analisados, o retinol sérico com ponto de corte <1.5 µmol/L é sugerido como eleito em função de ser metodologicamente mais viável

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:04:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8902_1.pdf: 302698 bytes, checksum: 0ea15261e20d25e054aeb4eceac38a3c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2004 / O escargot Achatina fulica apresenta-se como opção saudável, com baixos teores de lipídios, colesterol e calorias. Cerca de 40% do animal corresponde à massa visceral que é desperdiçada. Esta foi submetida às análises de proteínas, cinzas, umidade, extrato etéreo e ferro. Foram determinados o coeficiente de eficácia alimentar (CEA) e o coeficiente de eficácia protéica (CEP). Foi formulada uma sopa desidratada que foi submetida às análises de coliformes a 45°C, Salmonella sp, e Bacillus cereus e teve sua composição centesimal determinada. As características organoléticas foram estabelecidas através da Análise Descritiva Quantitativa. A massa visceral apresentou um teor de 79,44% de umidade, 18,70% de proteínas, 0,81% de lipídios, 0,94% de cinzas e 6,31mg% de ferro, semelhante a outras espécies de caracóis. No ensaio biológico houve diferença significativa entre o grupo de caseína e escargot, porém os valores do CEA (0,24) e do CEP (2,18) foram semelhantes aos de várias espécies de moluscos. A composição centesimal da sopa demonstrou que ela atende a 25,21% da IDR de proteínas para crianças de 7-10 anos. A sopa teve uma boa aceitação sensorial, a qualidade global alcançou uma média de 6,51. Os resultados levam a concluir que a massa visceral pode ser utilizada como matéria-prima para elaboração de produtos industrializados de baixo custo para consumo humano

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:04:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8928_1.pdf: 1174108 bytes, checksum: 49016c0fd370b1063dbec9935dd9c418 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2003 / Com o objetivo de investigar, no rato adulto, os possíveis efeitos da manipulação do tamanho da ninhada durante a lactação, associados ao exercício físico precoce e tardio, sobre as características da Depressão Alastrante (DA), ratos Wistar, machos, amamentados em ninhadas pequenas, médias e grandes (respectivamente 3, 8 e 12 filhotes por ninhada; grupos P, M e G), foram submetidos à natação precoce (dos 8 aos 22 dias de vida), ou tardia (dos 50 aos 120 dias) e comparados a animais que não nadaram ( controle ). Dos 90 aos 245 dias; medianas entre 119 e 177 dias, nos diferentes grupos (P mediana entre 119 e 142; M mediana entre 120,5 e 145; G mediana entre 146 e 177), foi registrada a DA no córtex cerebral. Os pesos corporais do grupo P diferiram daqueles dos grupos M e G. Nos controles, as velocidades de propagação da DA foram maiores no grupo G e menores no grupo P, quando comparadas às do grupo M. A natação reduziu essas velocidades nos grupos G e M, mas não no grupo P. Os pesos encefálicos úmidos diferiram entre os grupos G e P. Nos pesos encefálicos secos, só houve diferenças entre os grupo M e G que nadaram no aleitamento. Esses dados: indicam que as condições de lactação podem alterar pesos corporais e encefálicos, e a susceptibilidade cerebral à DA; demonstram a persistência das alterações eletrofisiológicas, associadas às manipulações do aleitamento, mesmo após recuperação nutricional, sugerindo que o tamanho da ninhada pode influenciar o desenvolvimento do sistema nervoso, no rato; mostram a eficácia da natação em alterar as características da DA, sendo esse efeito atenuado pelas condições favoráveis de lactação (grupo P), sugerindo que os efeitos da natação sobre a DA podem ser influenciados pelo estado nutricional no início da vida

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:04:15Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8929_1.pdf: 615655 bytes, checksum: ae9992606a0c081acb93e225c72191df (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2003 / O Consumo de bebidas alcoólicas por lactantes vem despertando a atenção dos profissionais de saúde, com muitas perguntas ainda sem respostas, tanto na nutrição como no metabolismo.Objetivou-se estudar os efeitos nutricionais do consumo de etanol, na forma de bebida destilada e fermentada, associado a uma dieta constituída por alimentos habituais do Nordeste brasileiro. Foram utilizadas 30 ratas Wistar, lactantes, e 240 filhotes divididas em 05 grupos, com suas respectivas ninhadas, sendo feita uma padronização (08 filhotes) no segundo dia de vida. Os animais receberam uma única dieta equilibrada, à base de feijão carioquinha, arroz polido, frango, farinha de mandioca e óleo de soja, com um teor protéico de 18%. À ração, foram adicionados diferentes líquidos, conforme o esquema experimental: G1-água destilada;G2-solução hidroalcoólica á 5%;G3- Solução de maltodextrina, substituindo as calorias do álcool ;G4- cerveja com etanol á 5%;G5- Solução de maltodextrina, substituindo as calorias da cerveja. Durante 12 dias analisou-se o consumo alimentar e calórico, a ingestão líquida e etílica, e o percentual de mortos por devoramento e por outras causas. No final do período procedeu-se a retirada do leite materno, para análise (PTN, CH, Lipídeos, sódio, potássio) e do sangue das mães e RNs (Glicose, Colesterol, HDL-C, LDL-C, TG, PTN, Albumina, Vitamina A). Foi determinado o peso relativo do fígado / rim das mães e fígado/ rim / cérebro / coração dos RNs e, em todos os grupos, analisou-se a gordura da carcaça. Foram utilizados os testes de Mann-Whitney, Locrank e o teste de duas proporções, para análise estatística. Os resultados indicam que, no Grupo Alcool, ocorreu, nas mães, perda de peso, a partir do 12º dia, reduzida ingestão hídrica, maior consumo alimentar, no 4º dia, elevação do potássio no leite materno e no peso do rim e redução dos teores de vitamina A circulante. No grupo cerveja foi constatado, nas mães, maior peso durante os 12 dias, aumento acentuado da ingestão hídrica e alcoólica, maior alcoolemia, no 12º dia, elevação nos teores de lactose do leite materno, da proteína do plasma e da gordura da carcaça, além de redução de vitamina A circulante. Nos RNs, as bebidas alcoólicas provocaram: tendência a maior ganho em peso e gordura corporal, com cerveja, além de redução no tempo de aparecimento de pêlos e de abertura dos olhos, da glicose e do LDL-C. O Grupo Alcool apresentou curva ponderal semelhante ao controle, aumento do peso do rim e cérebro, atraso na abertura dos olhos, maior percentual de mortos/devorados, redução de glicose e LDL-C. Conclui-se que as bebidas alcoólicas com teores reduzidos de etanol, durante a lactação, podem ocasionar graves alterações no comportamento, nutrição e metabolismo das mães, comprometendo o desenvolvimento normal dos RNs, além de elevar a morbi-mortalidade

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:04:18Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo8934_1.pdf: 1057784 bytes, checksum: 713ac58a79d99a40d3e158b0b1682a0c (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2003 / Para avaliar efeitos dos tratamentos hidrotérmicos sobre a formação de amido resistente no feijão macassar verde e seco, as amostras in natura foram caracterizadas quanto a composição centesimal, amido resistente, amilose/amilopectina, difração de raio-X e microscopia e posteriormente submetida a tratamentos hidrotérmicos com e sem pressão seguido do congelamento por 15 e 30 dias. As respostas fisiológicas foram obtidas por fermentação in vitro seguida da contagem de lactobacilos e ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) por cromatografia gasosa e o índice glicêmico (IG) foi calculado a partir da hidrólise enzimática do amido. Segundo os resultados o feijão verde diferiu do seco quanto ao superior teor de açúcares , fibras solúveis e reduzido percentual de amido total; e ao padrão de cristalinidade;dos tratamentos hidrotérmicos a maior formação de AR foi evidenciada no feijão seco após cocção sem pressão e armazenamento por 30 dias sob congelação; a fermentação do amido dos feijões verde e seco propiciou maior crescimento bacteriano e maior produção de AGCC, respectivamente e ambos apresentaram elevados IG. Conclui-se que: as características dos grânulos de amido exceto o aspecto morfológico são influenciadas pelo estádio de maturação; o teor de AR é modificado pelo tipo de processo térmico, tempo e temperatura de armazenamento; AR exerce efeitos prebióticos que beneficiam o metabolismo intestinal

Orientador: William Jose da Silva / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-15T18:05:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Medina_AngelaMarozzi_M.pdf: 2703494 bytes, checksum: f0a94bb42ebc7fce534036734f280655 (MD5) Previous issue date: 1981 / Resumo: O presente trabalho tem o objetivo de sugerir novas alternativas para estudo de nutrição animal através da análise das respostas de Drosophila melanogaster e Drosophila simulans a alguns mutantes de endosperma de milho, que conferem melhor qualidade ao produto. Para tanto, efetuaram-se 6 ciclos de seleção para moscas precoces ('1 GRAUS¿ e '2 GRAUS¿ dias de emergência de adultos) e tardias ('6 GRAUS¿ dia de eclosão de adultos em diante) em D. simulans, em meio com farinha de milho sugary opaque-2. O efeito de seleção foi analisado em um experimento com delineamento do tipo inteiramente casualizado, com seis repetições, envolvendo as populações Precoce, Tardia e Original (sem seleção), nos meios normal, sugary, opaque-2, sugary opaque-2 e completo. A avaliação foi feita através da contagem diária de adultos emergidos em cada meio e através da contagem diária de adultos emergidos em cada meio e através do peso seco de 250 adultos. Os resultados obtidos com o número de adultos revelaram consideráveis diferenças entre os vários meios de cultura testados. Para a população Original, o meio completo foi cerca de 6,2 vezes superior ao meio normal; 2,4 vezes superior ao meio opaque-2; 2,1 vezes maior que o meio sugary e 1,8 vezes maior que o meio sugary opaque-2... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: This work is na attempt to suggest new alternatives for the study of animal nutrition through the response of Drosophila to maize endosperm mutants that present better nutritional value. Six selection cicles were performed for early emerging flies ('1 POT. st¿ and '2 POT. nd¿ days of hatching) and late emerging flies ('6 POT. th¿ day on) in D. simulans, in a rearing medium with sugary opaque-2 corn flour. The effect of the selection was analysed with six replicates, involving the Early, Late and the Original (without selection) populations, in normal, sugary, opaque-2, sugary opaque-2 and complete media. Daily counts on adults born in each medium and dry weight of 250 adult individuals were performed. Data on number of adults indicated significant differences among the five culture media. For the Original population complete medium was 6.2 times superior to normal corn medium; 2.4 times superior to opaque-2; 2.1 times greater than sugary and 1.8 times greater than the sugary opaque-2 medium. The Early population when compared to the Original revealed no significant differences for the normal medium, opaque-2 or sugary opaque-2. However, in the complete medium there was a reduction of 33,7% in the number of insects and an increase of 21,8% in the number of flies at the sugary medium indicating that early flies responded more to water soluble polissacarids, coded by the sugary gene, than to the protein fraction controlled by the opaque-2 gene... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador : Maria Antonia Martins Galeazzi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-16T01:30:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Netto_FlaviaMaria_D.pdf: 5329383 bytes, checksum: e0640bc0d27acb014da351dfa42fa6a9 (MD5) Previous issue date: 1992 / Resumo: A presente pesquisa teve como objetivo estudar a hidrólise de isolado proteico de soja (IPS) com pancreática para a produção de hidrolisado de baixo peso molecular, bem como a caracterização bioquímica e nutricional dos produtos obtidos. O processo de hidrólise escolhido foi em sistema descontinuo, à 37° C, em água deionizada e sem controle de pH, de modo a minimizar o problema de excesso de eletrólitos no produto final. A reação era interrompida por tratamento térmico, 72° C por 5 minutos, e a separação do material solúvel do insolúvel era feita por centrifugação ã 700º g. Após a centrifugação o material obtido era liofilizado, sendo o material solúvel constituído pelo hidrolisado de baixa PM (HI) e o insolúvel , pela hidrolisado de alto PM (Ppt). Foram realizados experimentos com diferentes concentrações de substrato (S) e de relação enzima/substrato (E/S) tendo em vista a obtenção de hidrólise extensa do isolado proteico de soja. As condições de hidrólise escolhidas para a produção do hidrolisada foram 5,57. de substrato, relação E/S de 1/35, 37°C, em água deionizada por 8 horas. Sob estas condições , o grau de hidrólise (GH) foi 14,47, a solubilidade de nitrogênio em TCA 107. em relação ao N total foi de 40,37. e de 73,27. em relação ao N presente no sobrenadante. O pH do sistema, que era 7,1 no tempo zero foi para 6,4, após 8 horas de reação. 0 hidrolisado Hl apresentou 217. de GH e comprimento médio dos peptídeos (sem correção para aminoácidos livres) de 5 resíduos de aminoácidos. Estas características foram consideradas satisfatórias para o objetivo proposto. O IPS e as hidroilisadas obtidos. Hl e Ppt, mostraram diferenças em sua composição. Houve decréscimo dos aminoácidos de caráter ácido no Ppt e dos aminoácidos aromáticos, fenilalanina a tirosina no HX, em relação ao IPS. Os inibidores de tripsina (IT) diminuíram nos hidrolisados em relação ao IPS, apresentando valores de 72,17, 1,18 e 12,14 UTI/mg de proteína para o IPS, Ppt e Hl, respectivamente. O hidrolisado Hl apresentou 30,74 mg de fitato/g de proteína, estando em menor quantidade na fração Ppt, com 4,95 mg de fitato/g de proteína. 0 perfil de peso molecular do hidrolisado Hl, obtido por cromatografia em gel de Sephadex S-25, reação com TNBS e analise de aminoácidos livres ÍAAL) e totais (AAT) mostrou as seguintes características: 23 , 77í de peptídeos com 18 resíduos, 25,6% de leptídeos com 12 resíduos, 307. de peptídeos com 5 resíduos, 87. com 3 e O,03% com 2 resíduas de aminoácidos. Os aminoácidos livres foram compostos principalmente por aminoácidos aromáticos e ramificados. A avaliação nutricional foi realizada através de três ensaios biológicos com ratos Wistar. No Ensaio Biológico I, realizado com animais recém desmamados, o hidrolisado Hl obteve índices de qualidade (PER, NPU e Valor Biológico) menores que IPS e caseína, com exceção da digestibilidade que foi igual para todas as dietas. Nos Ensaios Biológicos II e III, realizados com animais submetidos à 15 dias de dieta aprotéica, observou-se respostas diferentes ás dietas experimentais. No Ensaio Biológico II, com relação ao ganho de peso dos animais, o hidrolisado Hl apresentou desempenho semelhante às dietas com caseína e IPS nos dois primeiros dias de recuperação. No Ensaio Biológico III, a suplementação do hidrolisado Hl com leucina (0,8"/.), valina (1,4X) e metionina (37.), feita para suprir as aminoácidos limitantes, resultou em desempenho superior ao da caseina suplementada com metionina (27.5 nos primeiras cinco dias de recuperação. Considerou-se, a partir do exposto acima, que o hidrolisado Hl apresentou características de perfil de peso molecular e valor nutricional que indicam sua possível utlizaçâo em situações clinicas que requeiram a utilização de fonte proteica modificada, devendo ainda passar por testes clínicos preliminares / Abstract: This work dealt with the pancreatic hydrolysis of soy protein isolates (SPI) for the production of a low molecular weight hydrolysis, as well as the biochemical and nutritional characterization of the product. The selected process was a discontinuous one at 37° C in deionized water and without pH adjustment in order to minimize concentration of inorganic ions in the final product. Hydrolysis was terminated by heat treatment, 72° C for 5 minute, and separation of the soluble from insoluble material was by centrifugation at 7000g. Bath, the soluble, low molecular weight hydrolysate (HI) and the insoluble, high molecular weight hydrolysate (Ppt), were lyophilized. various substrates concentrations (S) and enzyme/substrate ratios (E/S) were tested in order to attain extensive hydrolysis of the SPI. Reaction conditions were: 5.5% substrate, E/S= 1/35 (w/w), deionized water, initial pH-7.1, final pH= b37° C, duration 8 hours. Under such conditions, the degree of hydrolysis (DH) was 14.4%, nitrogen solubility in 10% TCA was 40.3% and 73.2% with respect to total N and supernatant N, respectivaly. The HI hydrolysate exhibited 21% DH and mean peptide lenght of 5 residues (incorrected for free aminoacids), wich were considered satisfactory far the apllication intended. Compositional differences were established between the SPI and its hydrolysis products. There was a decrease of acidic amino acids in the Ppt and of the aromatic aminoacids, phenilalanina and tyrosine in the HI hydrolysates, with respect to the SPI. Trypsin inhibitor activities were 72.17, 1.18 and 12.14 TILf/ mg of protein for SPI, Ppt and HI, respectivaly. Phytate leve 1s were considerable higher in the HI, 30.74 than in Ppt, 4.95 mg/ g of proteins. Evaluation of molecular weight profile of the HI hydrolysate, obtained by gel permeation in Sephadex S-25, reaction with trinitrobenzenosulfonic acid (TNBS) and free (AAL) and total (AAT) aminoacid determinations, revealed a content of 23.77. of peptides with 18 residues, 25.67. with 12 residues, 30X with 5 residues, 37. with 3 and 0.03% with 2 residues of amino acids. Free aminoacids were mainly aromatic and branched-chain amino acids. A nutritional evaluation were carried out using three biolog!cals assays with Wistar rats. Biological assay I showed that for wealing rats, the HI hydrolysate exhibited lower quality indices (PER, NPU and BV) than SPI and casein, with exception of digestibility, which was the same for all diets. Biological assays 11 and 11 were carried out with groups of wealing rats previously submitted to a 15-days non-protein diet. The HI hydrolysate showed a performance similar to that of casein and SPI during the inicial phase of assay II. In assay III, it was shown that supplementation of the HI hidrolysate with 0-B7. leucine, 1.147. valine and 37. methionine improved its efficiency above that of casein when supplemented with 27. of methionine, during the initial five days of recovery. On the basis of the above considerations, i t was concluded that the low molecular weight hydrolysate HI, showed molecular weight characteristics and nutritional evaluation result which indicated the possibility of it being used in clinical situations requiring a modified source of protein / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Tese (livre-docencia) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Acompanha memorial / Made available in DSpace on 2018-07-16T03:08:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sgarbieri_ValdemiroCarlos_LD.pdf: 5940804 bytes, checksum: afe644d89cfcbe43c8c75862d135637d (MD5) Previous issue date: 1979 / Resumo: O presente trabalho teve como principais objetivos o isolamento, o estudo da composição e do valor nutricional das principais frações protéicas do feijão (Phaseolus vulgaris, L) var. Rosinha G2, além da purificação e do estudo das propriedades dos inibidores da tripsina e da quimotripsina, presentes na fração albumina (F1). A extratibilidade das proteínas foi estudada em função do pH e da concentração salina ou força iônica do meio solvente. Em soluções ácidas (pH < 3) ou alcalinas (pH > 8) conseguiu-se extrair entre 85 e 9S% do nitrogênio total da farinha integral. A faixa de pH de menor extratibilidade foi entre 3,5 e 5,0. Duas extrações sucessivas da mesma amostra, a primeira com água destilada e a segunda com solução 0,5M de NaCl, extraia pelo menos 80% do nitrogênio da farinha integral. Extração fracionada da mesma farinha com vários solventes revelou que 481% do nitrogênio total era extraído com água destilada, 25,6% com solução 0,5M de NaCl, 19,3% com tampão borato de sódio pH 10,0, côn tendo 0,5% de mercaptoetanol e 0,5% de lauril sulfato de sódio, perfazendo a extração de 92,8% do nitrogênio total. Tratamento dos grãos a 97°C por vários intervalos de tempo mostrou que a solubilidade das proteínas em água diminuía de, praticamente 50%, após 5 min de aquecimento, tornando-se essencialmente insolúvel depois de 60 min de aquecimento. O aquecimento dos grãos por 4 min a 97 ºC inativou, completamente, os inibidores de tripsina e de quimotripsina. A diálise de um extrato salino permitiu a separação das proteínas em duas frações: solúveis em água (301) e insolúveis (701). Cerca de 70 - 75% do nitrogênio do extrato bruto era recuperado após 72h de diálise. A maior atividade inibidora de tripsina e de quimotrisina era encontrada nas proteínas solúveis em água (albuminas). Aquecimento das albuminas (IS min, 9 7 ºC) coagulava 65 - 70% das proteínas. Os inibidores de tripsina e de quimotripsina permaneciam em solução na fração não coagulável, sem sofrer nenhuma inativação. 0 isolamento e a purificação desses inibidores foram conseguidos, a partir da fração albumina não coagulável, pela precipitação com sulfato de amónio 0,65 de saturação, ultrafiltração em gel de Sephadex G-50, cromatografia em colunas de DEAE-celulose e eletroforese em gel de poliacrilamida. O grau de purificação alcançado foi de 31 vezes em relação ao extrato bruto, Todas as frações proteicas isoladas continham carboidrato em várias proporções. Os monossacarídeos identificados no hidrolisado ácido da fração albumina foram glicose, manose, ara binose, galactose e xilose. A preparação purificada (IG-50) côn tinha 3,751 de carboidrato total, que no hidrolisado aparecia como manose e xilose, além da glicosamina que ficava retida na coluna de troca catiônica. Quanto aos aminoácidos, a característica comum a todas as proteínas dessa variedade de feijão foi o teor bastante baixo de metionina, sendo que a fração albumina apresentou um teor mais elevado que as proteínas insolúveis em água. Os inibidores isolados da fração albumina apresentaram concentrações elevadas dos aminoácidos cistina, serina, treonina e prolina, além dos aminoácidos aspartico e glutimico. Apresentaram, porém, concentrações muito baixas de metionina, valina, leucina, tirosina e fenilalanina. O triptofãnio e a cisteína estavam totalmente ausentes das moléculas dos inibidores. Foram determinados para os inibidores isolados em colu na de Sephadex G-50 os seguintes parâmetros moleculares: pesomolecular 20.000, volume específico parcial 0,69, raio molecular 20A, coeficiente de difusão 10,7 x 10-7 e um quociente friccional de 1,14. A isoeletrofocalizaçao indicou a presença de dois componentes proteicos ativos na preparação obtida em colunas de Sephadex ou de DEAE-celulose, um a pH 5,1 e outro a pH 6,0, indicando que essa preparação não era totalmente homogenea, o que foi também verificado na eletroforese em gel de póliacrilamida. Testes de incubação, primeiro com tripsina e depois com quimotripsina, ou vice-versa, sugeriram que os inibidores possuem em suas moléculas centros de ligação separados e inde pendentes para inibição da tripsina e da quimotripsina. A inibição em presença da caseína como substrato foi do tipo não competitivo para as duas enzimas. A inibição da trípsina em presença de benzoil-DL-arginina p-nitroanilida (BAPNA) foi do tipo misto. A preparação (16-50) foi 3,6 vezes mais ativa sobre tripsina humana que sobre a tripsina bovina. Quando em solução aquosa, os inibidores exibiam uma resistência térmica muito grande, sendo porem, inativados pelo aquecimento em pH alcalino ou em presença de agentes redutores das ligações dissulfídicas. A oxidação com ácido performico produziu, também, a completa destruição do poder inibidor. O valor nutricional de todas as frações protéicas isso ladas dessa variedade de feijão foi bastante baixo, verificando- se uma melhoria surpreendente dos índices nutricionais, com a adição às dietas, dos aminoácidos sulfurados metionina e eisteína, em concentrações suficientes para atender às necessidades do rato em crescimento. Os valores de PER que foram inferiores a 1,0, em todas as frações proteicas isoladas, elevaram-se para valores igual ou superior a 4,0, com a adição as dietas de 0,31 de DL-metionina e 0,21 de L-cisteína. A adição de igual porcentagem de cistefna e metionina ã dieta, contendo farinha integral com fonte de proteína, elevou o PER de 1,17 a 2,47 apenas. A principal causa do reduzido valor nutricional das proteínas do feijão Rosinha G2, além da deficiência em aminoácidos sulfurados, parece ser a baixa disponibilidade biológica da metionina que foi de 46% na farinha integral, 51% na fração globulina, 34% no isolado protéico total, 5,81 na fração albumina e 4,6% na proteína do resíduo insolúvel após extração da proteína. A adição dos inibidores isolados em dietas com 5 e 101 de caseína nas proporções de 0,6 e 1% da dieta, não alterou os índices de utilização da caseína, bem como, não produziu nenhum atraso no crescimento dos ratos. A adição a uma dieta com 101 de caseína de uma hemaglutinina isolada da fração albumina, produziu uma diminuição de 1% na digestibilidade e 12% no valor biológico da caseína, além de ter reduzido o crescimento a 2/3 em relação ao dos animais tomados como controle / Abstract: The main objectives of the work presented here were to isolate and study the composition and some physicochemical and nutritional properties of bean (Phaseolus vulgaris, L) protein from the variety "Rosinha G2". In the same study, the isolation, purification and partial characterization of the bean trypsin and chymotrypsin inhibitors were attempted. The extractability of the proteins was studied as a function of pH and ionic strength of the extracting media. Under acidic (pH < 3) or alkaline (pH > 8) conditions, 85 to 95% of the total integral flour nitrogen was extracted, Minimum extractability occured in the range of pH between 3.5 and 5.0. Two sequential extractions of the flour, first with distil led water , then with 0.5M NaCl solution, extracted around 80% of the total nitrogen.Sequential extractions of the same flour with various solvents revealed that 48! of the total nitrogen was extracted with distilled water, 25.6% with 0.5M NaCl solution. 19.31 with a sodium borate buffer (pH 10) containing 0.51 2-mercaptoetanol and O.SI lauryl sodium sulfate. Total extraction accounted for 9 2.81 of total nitrogen of the bean flour. Heating the soaked beans in boiling water (97 ºC) for various times indicated that 5 min of heating decreased the extractability of the proteins 50%, while 4 min of heating completely inactivated the trypsin and chymotrypsin inhibitors. Dialysis of a salt extract against distilled water caused the separation of the proteins into two fractions: solu ble in water (30%) and insoluble (70%). About 70-75¨% of the total nitrogen of the crude extract was recovered after dialvsis for 72 hours. Most of the trypsin and chymotrypsin inhibiting acti_ vities were associated with the water soluble (albumin)proteins. Heating the albumin solutions for 15 min at 97 ºC coagulated 65-70% of the proteins whereas the trypsin and chymotrypsin inhibitors remained in solution with full activity. The isolation and purification of the inhibitors from the non-coagulated fraction (97 ºC, 15 min) were accomplished by ammonium sulfate precipita tion (0.65 saturation), Sephadex G-50 ultrafiltration, cromato graphy on DEAE-cellulose and polyacrylamide gel electrophoresis. Final purification was 31 fold by comparison with the crude extract, All the isolated protein fractions contained carbohydrate in different proportions. A hydrolysate of he albumin fraction contained glucose, mannose, arabinose, galactose and xylose. The purified inhibitors contained 3.751. total carbohy- drate , represented by mannose, xylose and glucosamine. As to the amino acid composition, a common feature of the bean pro tein fractions was the very low methionine content. The albumin fraction showed a higher methionine content than the water inso luble protein fractions. The trypsin and chymotrypsin inhib^ tors isolate from the albumin fraction revealed high concentrations of cystine, serine, threonine and proline, in addition to aspartic and glutamic acids, On the other hand the concentrations of methionine, valine, leucine, tirosine and phenylalani ne were very low. Tryptophan and cysteine were totally absent from the inhibitors molecules. The combined ultracentrifugation and gel-filtration data permitted the calculation of the following parameters for the isolated inhibitors: molecular weight, 20,000; partial specific volume, 0.69; Stokes molecular radius, 20 A, diffusioncoefficient, 10.7 x 10-7 , and a frictional ratio of 1,14, Isoelectric focusing in polyacrylamide gel indicated the presence in the purified preparation of two protein compo nents with trypsin and chymotrypsin inhibiting power having iso electric points at pH's 5.1 and 6.0. Incubation of the inhibitors , first with trypsin and then with chymotrypsin or vice versa, suggested the existence in the inhibitor molecules of separate and independent binding sites for trypsin and for chymotrypsin. The inhibition of trypsin and of chymotrypsin in the presence of casein as subs trate was of the non-competitive type. The inhibition of tryp_ sin in the presence of benzoyl-DL-arginine p-nitroanilide (BAPNA) was of a mixed type. Human trypsin was inhibited by the isolated bean inhibitors 5.6 times more effectively than bovine trypsin. The inhibitors were very resistant to heat in water or in mildly acidic solutions; they were, however quickly inacti_ a 10% casein diet, decreased the casein digestibility by 71, the apparent biological value by 12%, and reduced the rat growth by 33%, as compared with the casein control diet / Tese (livre-docencia) - Univer / Livre-Docente em Engenharia de Alimentos