CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Moringa oleifera Lam. à uma Ãrvore conhecida pelo seu valor medicinal, uma vez que extratos de todas as partes desta planta mostraram propriedades farmacolÃgicas reconhecidas pelo uso popular e corroboradas pela comunidade cientÃfica. Dentre as atividades farmacolÃgicas, destacam-se Ãquelas relacionadas a processos inflamatÃrios. Este trabalho teve como objetivo o isolamento e caracterizaÃÃo de uma proteÃna ligante à quitina de sementes de Moringa oleifera e avaliaÃÃo de suas atividades antinociceptiva e anti-inflamatÃria. As proteÃnas foram extraÃdas da farinha delipidada de sementes e o extrato total foi fracionado em albuminas e globulinas. A fraÃÃo albumÃnica foi submetida à cromatografia de afinidade em matriz de quitina. A fraÃÃo ligante à quitina eluÃda com N-acetil-D-glucosamina 0,1 M foi submetida à cromatografia de troca iÃnica acoplada a um sistema de FPLC, rendendo cinco picos protÃicos. O material eluÃdo com tampÃo acetato de sÃdio 0,5 M, pH 5,2, contendo NaCl 0,6 M, denominado Mo-CBP4 (Mo â Moringa oleifera; âCBP â âchitin binding proteinâ), teve um rendimento final de 0,54% e foi escolhido para dar continuidade ao trabalho. Mo-CBP4 apresentou-se como duas bandas protÃicas de massas moleculares aparentes de 27,5 e 16,5 kDa, em condiÃÃes nÃo-redutoras, e de 9,8 kDa em condiÃÃes redutoras. Eletroforese bidimensional desta proteÃna revelou a presenÃa de dois spots (18,7 e 13,4 kDa), com mesmo ponto isoelÃtrico (pI de 10,55). Trata-se de uma glicoproteÃna com 2,85% de carboidratos, nÃo apresentando atividade hemaglutinante. Mo-CBP4 mostrou-se tÃo eficiente quanto o sulfato de alumÃnio e potÃssio na capacidade de coagular material em suspensÃo na Ãgua. A proteÃna em questÃo foi resistente à proteÃlise no teste de digestibilidade in vitro utilizando pepsina, tripsina e quimotripsina. Para avaliar os efeitos antinociceptivo e anti-inflamatÃrio de Mo-CBP4, foi utilizado o modelo de contorÃÃes abdominais induzidas pela injeÃÃo de Ãcido acÃtico 0,8% (via i.p.) em camundongos. A proteÃna, nas doses de 1,0, 3,5 e 10 mg/kg, foi capaz de prevenir as contorÃÃes de maneira dose dependente, chegando a 98,9% de inibiÃÃo na dose de 10 mg/kg. Mo-CBP4 tambÃm apresentou atividade antinociceptiva por via oral (10 mg/kg), atingindo uma inibiÃÃo de 52,9% quando administrada 60 minutos antes da injeÃÃo de Ãcido acÃtico. Mo-CBP4 inibiu o aumento da permeabilidade vascular (89,1%) e a migraÃÃo leucocitÃria (60,9%) na dose de 10 mg/kg via i.p. A propriedade antinociceptiva parece ser independente do sÃtio de interaÃÃo ao carboidrato N-acetil-D-glucosamina, enquanto que a atividade anti-inflamatÃria mostrou um decrÃscimo quando a regiÃo de ligaÃÃo ao carboidrato foi bloqueada. Os resultados apresentados suportam cientificamente o uso popular da M. oleifera e mostram que uma proteÃna ligante à quitina, Mo-CBP4, està associada aos efeitos antinociceptivo e anti-inflamatÃrio das sementes / Moringa oleifera Lam. is a perennial multipurpose tree with a strong scientific evidence of its curative power and used in folk medicine to cure several inflammatory processes. This work aimed to isolate and characterize a chitin-binding protein from Moringa oleifera seeds, and evaluate its antinociceptive and anti-inflammatory effects. Chitin-binding proteins were obtained after application of albumin fraction from crude extract of M. oleifera seeds into a chitin column and the adsorbed fraction was applied in a Resource-S matrix attached to FPLC system. The fraction eluted with 50 mM sodium acetate buffer, pH 5.2, containing 0.6 M NaCl, named Mo-CBP4 was used for the experiment. Mo-CBP4 showed a single band on SDS-PAGE (molecular mass 9.8 kDa) in presence of reducing agent, however in the absence of 2-mercaptoethanol two bands corresponding to 27.5 and 16.5 kDa were observed. Bidimensional electrophoresis of this protein revealed the presence of two spots (18.7 and 13.4 kDa), with the same isoeletric point value corresponding to 10.55. Mo-CBP4 is a glycoprotein containing 2.85% neutral sugar, which failed to agglutinate untreated or trypsin-treated erythrocytes from rabbit or human origin. This protein showed coagulant activity, similar to aluminum and potassium sulfate, the coagulant most widely used in water treatment. Mo-CBP4 was subjected to in vitro digestion with pepsin, trypsin, or chymotrypsin and appeared to be markedly resistant to digestion. Acetic acid-induced abdominal constrictions, increase in vascular permeability and leukocyte migration tests were used for the antinociceptive and anti-inflammatory activities assessment. Mo-CBP4 (1.0, 3.5 and 10 mg/kg) into mice potently and significantly reduced the occurrence of abdominal writhing in a dose dependent manner by 18.9, 44.6% and 98.9%, respectively. In addition, the oral administration of the protein (10 mg/kg) resulted in 18% and 52.9% reductions in abdominal writhing when given 30 and 60 min prior to acetic acid administration, respectively. Mo-CBP4 also caused a significant and dose-dependent inhibition of peritoneal capillary permeability induced by acid acetic and significantly inhibited leukocyte accumulation in the peritoneal cavity. The effect antinociceptive appeared to be independent on the carbohydrate recognition site. However the anti-inflammatory activity was partially reversed when Mo-CBP4 was pre-incubated with specific carbohydrate ligand, showing that this effect is dependent on the carbohydrate recognition site

Made available in DSpace on 2014-08-20T13:59:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_anelise_tessari_perboni.pdf: 3320042 bytes, checksum: 7a6c067308b205a4410c66d4f92e4b7c (MD5) Previous issue date: 2014-01-10 / The work aimed to evaluate the photosynthetic traits, growth and production of canola plants originated from seeds microbiolized with growth-promoting bacteria. Sequential tests were developed using different isolates of growth-promoting bacteria in association with canola hybrids. In the first test, 96 isolates were used for the mass selection of growth-promoting bacteria. JIP test parameters obtained from the chlorophyll fluorescence, leaf area and shoot dry weight of the Hyola 433 hybrid were evaluated at 55 days after sowing (DAS). The second test was conducted in two stages with isolates selected in the test I: in the stage I, chlorophyll fluorescence, gas exchange and shoot dry weight of Hyola 433 hybrid were evaluated through three measurements in different periods of the crop cycle; in the stage II, the seedlings emerged, chlorophyll fluorescence, leaf area, leaves, petioles and stems dry weight in plants of the Hyola 61 hybrid were evaluated at 41 DAS. In the third test, the isolated DFs 104, DFs 320, DFs 513 and DFs 628 were used, selected in previous experiments; the seedling emergence, performance indexes, leaf area, dry matter partitioning and chlorophyll index were evaluated during the plants growth. At the end of the experiment, the yield components per plant and grain composition of fatty acids were determined. The correlation between the JIP test parameters and growth variables allowed the determination of interest parameters (F0/FM, FV/F0, ABS/RC, TR0/RC, φPo, PIabs and PItotal) for selection of isolates with potential to promote plant growth. Generally, the JIP test parameters were able to detect changes in the operation of the electron transport chain in plants of different treatments; however the responses were highly variable in each test. Some isolates caused an increase of the growth parameters especially DFs 320, DFs 513 and DFs 628 which also showed trends of increase of yield components. In addition, these isolates did not change the fatty acid composition of canola grains, i.e., the seed microbiolization can promote plant growth without causing changes in the quality of oil obtained. We conclude that chlorophyll fluorescence can be used in the evaluation of photosynthetic responses of plants from seeds microbiolized with bacterial isolates. The seeds microbiolization with bacterial isolates DFs 320 [unidentified], DFs 513 [Pseudomonas veronii] and DFs 628 [Bacillus sp.] promotes increase of Hyola 61 hybrid canola plants growth. / O trabalho teve como objetivo avaliar as características fotossintéticas, o crescimento e a produção de plantas de canola originadas de sementes microbiolizadas com bactérias promotoras de crescimento. Foram desenvolvidos ensaios sequenciais utilizando diferentes isolados de bactérias promotoras de crescimento em associação com híbridos de canola. No primeiro ensaio foram utilizados 96 isolados para a seleção massal de bactérias promotoras de crescimento. Foram avaliados os parâmetros do Teste JIP obtidos a partir da fluorescência da clorofila, a área foliar e a massa seca da parte aérea de plantas do híbrido Hyola 433 aos 55 dias após a semeadura (DAS). O segundo ensaio foi desenvolvido em duas etapas com isolados selecionados no ensaio I: na etapa I avaliaram-se a fluorescência da clorofila, trocas gasosas e a massa seca da parte aérea das plantas do híbrido Hyola 433 por meio de três medições em diferentes períodos do ciclo da cultura; na etapa II procedeu-se a contagem das plântulas emergidas, avaliação da fluorescência da clorofila, área foliar, massa seca das folhas e dos pecíolos e caules nas plantas do híbrido Hyola 61 aos 41 DAS. No terceiro ensaio foram utilizados os isolados DFs 104, DFs 320, DFs 513 e DFs 628, selecionados nos experimentos anteriores; avaliou-se a emergência de plântulas, os índices de performance, a área foliar, a partição de massa seca e o índice de clorofila durante o crescimento das plantas. Ao final do experimento foram determinados os componentes de produção por planta e a composição de ácidos graxos dos grãos. A correlação entre os parâmetros do Teste JIP e as variáveis de crescimento permitiu a determinação de parâmetros de interesse (F0/FM, FV/F0, ABS/RC, TR0/RC, φPo, PIabs e PItotal) para seleção de isolados com potencial para promoção de crescimento das plantas. De forma geral, os parâmetros do Teste JIP foram capazes de detectar modificações no funcionamento da cadeia de transporte de elétrons nas plantas dos diferentes tratamentos, contudo as respostas apresentaram-se bastante variáveis em cada ensaio. Alguns isolados promoveram aumento dos parâmetros de crescimento destacando-se DFs 320, DFs 513 e DFs 628, os quais também apresentaram tendências de incremento dos componentes de produção. Além disso, estes isolados não modificaram a composição de ácidos graxos dos grãos de canola, ou seja, a microbiolização das sementes pode promover o crescimento das plantas sem provocar alterações na qualidade do óleo obtido. Conclui-se que a fluorescência da clorofila a pode ser utilizada nas avaliações das respostas fotossintéticas das plantas provenientes de sementes microbiolizadas com isolados bacterianos. A microbiolização das sementes com os isolados bacterianos DFs 320 [não identificado], DFs 513 [Pseudomonas veronii] e DFs 628 [Bacilus sp.] promove aumento do crescimento das plantas de canola do híbrido Hyola 61.

Les allèles en ségrégation des deux génomes Elaeis ont été tracés dans un pseudo backcross interspécifique Elaeis (E. oleifera x E. guineensis) x E. guineensis. Dix-neuf QTL de proportion d'acides gras de l'huile de palme par rapport à 16 QTL des mêmes caractères d'un croisement intraspécifique E. guineensis ont mis en évidence des QTL communs ou spécifiques aux deux espèces. Aucune corrélation n'existe entre proportions d'acides gras et le rendement en huile de palme. Le déterminisme génétique et les principaux gènes associés aux acides gras du mésocarpe ont été étudiés, à l'aide de banques d'ADNc pleine longueur et des extraits d'ARNm de mésocarpe de fruits en développement des espèces Elaeis chacune représentée par quatre fonds génétiques. L'expression de 113 gènes Elaeis clés ou de facteurs putatifs de régulation des voies de synthèse de novo des acides gras et des triacylglycérols fut caractérisée au niveau de l'espèce par analyse in silico de profils de transcription et par analyse Real Time RT-qPCR. Les gènes ont été cartographiés sur le pseudo backcross avec 180 marqueurs SNP intra-géniques. Quarante-huit gènes étaient exprimés différemment entre espèces dont 94% plus exprimés chez E. guineensis. Le facteur de transcription EgAP2-2 (WRI1-like) influence le début de la synthèsede novo des acide gras par action principale sur les gènes MAT et KAS III, parait indépendant de l'expression d'autres gènes et non différentiel entre espèces. Les variations en C16:0 et C18:0 entre espèces s'expliquent par niveau d'expression allélique et l'activité enzymatique relative des isoformes présentes dans le génome de FATB (2), KAS II (1) et SAD (3). / An Elaeis interspecific pseudo-backcross of first generation (E. oleifera x E. guineensis) x E. guineensis allowed tracing segregating alleles from both Elaeis genomes. Nineteen quantitative trait loci (QTLs) associated to palm oil fatty acid proportions compared to 16 QTLs of same traits in an intra-specific oil palm cross evidenced common or specific QTLs in E. guineensis and E. oleifera. No correlation was found in oil palm between mesocarp fatty acid proportions and yieldtraits. The genetic determinism of main fatty acid proportions was confirmed. Genes related to palm oil fatty acids were investigated using full-length cDNA libraries and mRNA extracts from the mesocarp of developing fruits in each Elaeis species represented by four genetic pools. Expression of 113 key Elaeis genes or putative regulation factors of de novo fatty acid and triacylglycerol pathways were characterized at species level by in silico transcript profiling and Real Time RT-qPCR analysis. Genes were mapped on the pseudo-backcross using 180 intra-gene SNP markers. Forty-eight genes were differentially expressed between Elaeis species, with 94% over expressed in E. guineensis. The EgAP2-2 (WRI1-like) transcription factor might influence the start of the de novo fatty acid pathway by main action only on the MAT and KAS III genes, as independent in expression from other genes and not differential between species. Between species variations in C16:0 and C18:0 can be deciphered by relative expression levels and enzyme activities of the isoforms in the genome of FATB (2), KAS II (1) and SAD (3). An oil palm producing more oleic acid in proportion than pure E. oleifera is feasible.

Orientador: Edésio Luiz Simionatto. / Coorientador: Martinho Rau. / Dissertação (Mestrado em Química) - Programa de Pós-Graduação em Química, Centro de Ciências Exatas e Naturais, Universidade Regional de Blumenau, Blumenau.

The importance of knowing the root system of a crop in detail is related to the scientific techniques, both for technical reference areas (for example, management), as well as for a contribution without stock and nutrient cycling in the soil. The present study evaluated a biomass below the soil in a hybrid commercial palm oil plant (Elaeis oleifera cortés x Elaeis guineensis jacq.), Cultivar BRS Manicoré, in the municipality of Moju, northeast of the state of Pará. The interespecific palm hybrid oil has been cultivated in some regions with other cultivars due to fatal yellowing anomaly. Rock samples were collected by means of 4 meters long, 50 cm wide and 60 cm deep. Monoliths were collected in layers 0-15 (layer A), 15-30 (layer B) and 30-60 cm (layer C). In each layer, 8 monoliths were collected. In the laboratory, the roots were classified according to their diameter in primary (≥5.0 mm), secondary (1 - 4.9 mm) and tertiary (0.5 - 0.9 mm). Images of subsamples of each day class were analyzed for the use of SAFIRA V.1.1 software. The dry drought was forced to dry in a forced oven at 65 ° C for 96 hours. At the depth of 0-60 cm the mass density was 62.77% of the primary roots, 24.28% and 3.78% tertiary. A 15-30 cm layer concentrates 57.65% of this root density. Springs 0-15 and 30-60 cm, are concentrated, respectively, 32.5 and 13.2% of the total biomass of roots. As tertiary roots, they are mainly found in the 0-15 cm layer. In relation to stone length density 53.82% of the total length are in the depth of 0-15 cm, with 78.95% of this total of consecutive roots, followed by 16.58% of secondary and 4.47% of primary . A biomass below the soil to a depth of 0-60 cm, considering 3 classes of substrate output (substrates and tertiary) was 8.28 Mg / ha, and assuming 50% of the carbon equivalence for this biomass we will have 4 14 Mg / ha of C. / A importância de se conhecer detalhadamente o sistema radicular de uma cultura está relacionada com estratégias técnico-cientificas, tanto para tomadas de decisões técnicas relativas (por exemplo, manejo) como também para estimar a contribuição no estoque e ciclagem de nutrientes no solo. O presente trabalho avaliou a biomassa abaixo do solo em um plantio comercial de híbrido interespecífico de palma de óleo (Elaeis oleifera cortés x Elaeis guineensis jacq.), cultivar BRS Manicoré, no município de Moju, nordeste do estado do Pará. O híbrido interespecífico de palma de óleo tem sido plantado em regiões com limitação para outras cultivares devido à ocorrência da anomalia amarelecimento fatal. Amostras de raízes foram obtidas por meio de coleta de monólitos em trincheiras com 4 metros de comprimento, 50 cm de largura e 60 cm de profundidade. Foram coletados monólitos nas camadas 0-15 (camada A), 15-30 (camada B) e 30-60 cm (camada C). Em cada camada, foram coletados 8 monólitos. Em laboratório, as raízes foram classificadas de acordo com seu diâmetro em primárias (≥5,0 mm), secundárias (1– 4,9 mm) e terciárias (0,5 – 0,9 mm). Imagens de subamostras de cada classe de diâmetro foram analisadas para estimativa do comprimento usando o software SAFIRA V.1.1. A massa seca das raízes foi determinada após secagem em estufa de circulação forçada de ar a 65 °C por 96 horas. Na profundidade de 0-60 cm a densidade de massa de raízes encontradas foram 62,77% de raízes primárias, 24,28% secundárias e 3,78% terciárias. A camada 15-30 cm concentra 57,65% desta densidade de raízes. Nas camadas 0-15 e 30-60 cm, estão concentrados, respectivamente, 32,5 e 13,2% da biomassa total de raízes. As raízes terciarias, se encontram-se principalmente na camada de 0-15 cm. Em relação a densidade de comprimento de raiz 53,82% do comprimento total estão na profundidade de 0-15 cm, sendo 78,95% deste total de raízes terciárias, seguido de 16,58% de secundárias e 4,47% de primárias. A biomassa abaixo do solo a uma profundidade de 0-60 cm, considerando 3 classes de diâmetro de raízes (primárias, secundárias e terciárias) foi de 8,28 Mg/ha, e assumindo 50% da equivalência de carbono para esta biomassa teremos 4,14 Mg/ha de C.

The Oil palm (Elaeis guineensis Jacq.) it is a plant originated from Africa. The genus Elaeis has distribution in the African continent and tropical America, comprehend for two species defined taxonomically: Elaeis guineensis Jacq - known as oil palm truth, and the Elaeis oleifera (H.B.K) Cortés - known as caiaué or oil palm of the Amazônia. Currently, there is a disease that is becoming more harmful, the "Yellowish Fatal", that it has as main symptom an almost imperceptible Yellowish of the basal of the leaves youngest taking the death of the plant. Amongst the alternatives of genetic improvement, the attainment of interespecifics hybrids (E. guineensis x E. oleifera), although the present oil production be 20% minor that the oil palm, will become the only form to make possible the oil production of palm in those areas affected for diseases as the yellowish fatal. The work was constituted of stages of oxidation control, asepsis, rescue of zygotic embryos and plantlets formations. The present work had as objective to establish a viable protocol for regeneration of zygotic embryos derived of the interspecifics hybrids (E.guineensis x E.oleifera) to be used in programs of genetic improvement. For asepsis, hybrids seeds of oil palm of SJ 165 variety that were disinfected with 1% of NaOCl getting the best results. The concentration of charcoal actived of 0,25% was more efficient against oxidation process. Also was observed the genotype x environment effect, being the variability CI- 2061 that had best responses in all traits realized , not being observed an influence of growth regulators ANA e BAP(0,5mg.L-1) at conversation of embryos in plantlets. The insertion of 0,17 g.L-1 de NaH2PO4 was fundamental in development of normal plantlets in acclimatization. It was possible getting plants in vitro in 4 months of subculture. / O dendezeiro (Elaeis guineensis, Jacq.) é uma planta originaria da África. O gênero Elaeis tem distribuição no continente africano e na América tropical, compreendendo duas espécies taxonomicamente bem definidas: o Elaeis guineensis jacq -conhecido como dendê verdadeiro, e o Elaeis oleifera (H.B.K) Cortés - conhecido como caiaué ou dendê da Amazônia. Atualmente, a doença que vem se tornando mais nociva é o “Amarelecimento fatal” que tem como principal sintoma um amarelecimento quase imperceptível dos folíolos basais das folhas mais jovens levando a morte da planta. Dentre as alternativas de melhoramento genético, a obtenção de híbridos interespecíficos (E. guineensis x E. oleifera), apesar de apresentar produção de óleo cerca de 20% menor que o dendezeiro, poderá se tornar a única forma de viabilizar a produção de óleo de palma naquelas áreas afetadas por doenças como o amarelecimento fatal. O trabalho constituiu-se das etapas de controle da oxidação, assepsia, resgate de embriões zigóticos e formação de plântulas. O presente trabalho teve como objetivo estabelecer um protocolo viável para resgate de embriões zigóticos oriundos dos híbridos interespecíficos (E.guineensis x E.oleifera). Os experimentos realizados foram inteiramente casualizados. Para assepsia, as sementes hibridas de dendê da variedade SJ 165 que foram desinfestadas com 1% NaClO a 20 minutos obtiveram os melhores resultados. A concentração de 0,25% de carvão ativado foi a mais eficiente contra a oxidação in vitro em sementes hibridas de dendezeiro da variedade SJ 165. Foi observado também o efeito genótipo x ambiente, pois as variedades testadas ( CI-2061,Cj-2141,Cj-502 e Cj-492) responderam de maneira diferentes aos meios de cultura utilizados, sendo a variedade CI-2061 que obteve as melhores respostas em todos os tratamentos realizados, não sendo também verificado a influência dos reguladores ANA e BAP (0,5 mg.L-1 ) na conversão de embriões zigóticos em plântulas. A inserção de 0,17g.L-1 de NaH2PO4 se mostrou fundamental no desenvolvimento de plântulas normais no processo aclimatização.Foi possível obter mudas de dendê in vitro em apenas quatro meses de subcultivo.

Objetivo: Evaluar el efecto antibacteriano del extracto metanólico de Moringa oleifera (Moringa) combinado con Hidróxido de calcio sobre cepas de Enterococcus faecalis (ATCC29212). Materiales y métodos: Se preparó extractos metanólicos de tallos, hojas y tallos más hojas de Moringa oleifera, los cuales fueron combinados con Hidróxido de calcio en igual proporción. Posteriormente se procedió a evaluar el efecto antibacteriano de los extractos en presencia y ausencia del Hidróxido de calcio contra la cepa bacteriana de Enterococcus faecalis utilizando el método de Kirby-Bauer y el recuento de Unidades Formadoras de Colonias (UFC). Resultados: Se observó que al comparar el Hidróxido de calcio con los extractos metanólicos de Moringa oleifera en presencia y ausencia del Hidróxido de calcio se demuestra que, el Hidróxido de calcio por si solo tiene alto efecto antibacteriano a diferencia de las diversas combinaciones. Conclusiones: La importancia de este estudio fue evaluar si el extracto metanólico de Moringa oleifera repotencia el efecto antibacteriano del Hidróxido de calcio. Los resultados muestran que los diferentes extractos metanólicos de Moringa oleifera no tienen la capacidad de repotenciar al Hidróxido de calcio. / Objective: Evaluate the antibacterial effect of the methanolic extract of Moringa oleifera (Moringa) combined with calcium hydroxide on strains of Enterococcus faecalis (ATCC29212). Materials and methods: Methanolic extracts of stems, leaves and stems plus Moringa oleifera leaves were prepared, which were combined with calcium hydroxide in equal proportion. Subsequently, the antibacterial effect of the extracts in the presence and absence of calcium hydroxide against the bacterial strain of Enterococcus faecalis was evaluated using the Kirby-Bauer method and the count of Colony Forming Units (CFU). Results: It was observed that when comparing calcium hydroxide with the methanolic extracts of Moringa oleifera in the presence and absence of calcium hydroxide, it is shown that calcium hydroxide alone has a high antibacterial effect unlike the various combinations. Conclusions: The importance of this study was to evaluate if the methanolic extract of Moringa oleifera enhances the antibacterial effect of calcium hydroxide. The results show that different methanolic extracts of Moringa oleifera do not have the capacity to repower the calcium hydroxide. / Tesis

Solar water disinfection (SODIS) is the process of treating microbiologically contaminated water in clear plastic bottles through exposure to sunlight. One of the major limiting factors of this treatment is source water quality. This work investigates the impact of organic matter and turbidity on SODIS efficiency. Organic matter was found to decrease bacterial inactivation to a much greater extent than the presence of inorganic particles. The ability of moringa oleifera seed emulsion to clarify source waters was investigated as a coagulation pretreatment. This coagulant is most effective in highly turbid, high humic content waters, and achieves up to 1-log bacterial removal. The combined moringa oleifera coagulation-SODIS treatment sequence was tested in highly coloured natural source water and was found to reduce the sunlight exposure time required by up to 2 hours. Treated water should be consumed immediately following the individual or combined treatments due to the potential for bacterial regrowth.

Solar water disinfection (SODIS) is the process of treating microbiologically contaminated water in clear plastic bottles through exposure to sunlight. One of the major limiting factors of this treatment is source water quality. This work investigates the impact of organic matter and turbidity on SODIS efficiency. Organic matter was found to decrease bacterial inactivation to a much greater extent than the presence of inorganic particles. The ability of moringa oleifera seed emulsion to clarify source waters was investigated as a coagulation pretreatment. This coagulant is most effective in highly turbid, high humic content waters, and achieves up to 1-log bacterial removal. The combined moringa oleifera coagulation-SODIS treatment sequence was tested in highly coloured natural source water and was found to reduce the sunlight exposure time required by up to 2 hours. Treated water should be consumed immediately following the individual or combined treatments due to the potential for bacterial regrowth.

GIFONI, Juliana Menezes. Propriedades Bioquímicas e Funcionais de uma Proteína Ligante à Quitina Purificada de Sementes de Moringa oleifera Lamarck. 2009. 140 f. Tese (Doutorado em bioquímica)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2009. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-07-20T16:03:34Z No. of bitstreams: 1 2009_tese_jmgifoni.pdf: 8760660 bytes, checksum: 354beec73eaacf40d4940af6fcbd173a (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa (jairo@ufc.br) on 2016-08-02T18:20:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_tese_jmgifoni.pdf: 8760660 bytes, checksum: 354beec73eaacf40d4940af6fcbd173a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-02T18:20:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_tese_jmgifoni.pdf: 8760660 bytes, checksum: 354beec73eaacf40d4940af6fcbd173a (MD5) Previous issue date: 2009 / Moringa oleifera Lam. is native from Northwest India, well adapted to tropical regions. From its seeds it was isolated a new chitin binding protein, Mo-CBP3, which has coagulant properties and antifungal activity against the phytopathogen Fusarium solani. Proteins were extracted from defatted seeds flour by 0.05 M Tris-HCl buffer, pH 8.0, containing 0.15 M NaCl. The average protein content of the flour was 216.44 mgP/gF. The crude extract was fractionated in albumins and globulins by dialysis and centrifugation. Albumins were concentrated by 90% ammonium sulfate saturation. This fraction was applied into a chitin column, previously equilibrated with the same buffer. An unadsorbed and two adsorbed peaks were obtained. The first adsorbed peak was eluted with 0.1 M N-acetyl-D-glucosamine (PNAG), and the second one, with 0.05 M acetic acid, pH 3.0 (PAC). PNAG was applied into a cation exchange column, Resource S, equilibrated with 0.05 M sodium acetate buffer, pH 5.2. The third peak corresponded to Mo-CBP3 – eluted with 0.5 M NaCl in equilibrium buffer. The protein content of Mo- CBP3 was 1.17 mgP/gF. It represents a final yield of 0.54% of crude extract proteins. Apparent molecular mass by SDS-PAGE was 18.0 kDa in the absence of β-ME, and 9.0 kDa, in its presence. Results suggest that Mo-CBP3 is a dimeric protein, made of identical subunits, linked by disulfide bonds. By molecular exclusion chromatography, calculated molecular mass was 14.34 kDa, pI 10.8. Mo-CBP3 is a glycoprotein with 2.5% of carbohydrates, which has not hemagglutinating or chitinase activities. Its NH2- terminal sequence was CPAIQRCCQQLRNIQPPCRCCQ, with 22 amino acids, conffirming its basic character. Mo-CBP3 was as efficient as AlK(SO4)2 in the capacity of coagulating suspended material in water. Mo-CBP3 (0.1 mg/mL) was fungicide to Fusarium solani spores. Heat treatment of the protein at 98 °C, du ring 1 h, and pre incubation with N-acetyl-D-glucosamine, did not reverse its action. Mo-CBP3 was able to retard the mycelial growth of the fungus even at the lowest tested dose of 0.05 mg/mL. Mo-CBP3 was inactive against the oomycete Pythium oligandrum, which has cellulose in spite of chitin in cell wall. Protein was also able to inhibit about 80% of medium acidification, induced by glucose, by F. solani spores, that suggests the influence of Mo-CBP3 over the proton pumps (H+ATPases) present in cellular membranes of F. solani spores. / Moringa oleifera Lam. é uma planta originária do Noroeste da Índia, bem adaptada às regiões tropicais. De suas sementes foi isolada uma nova proteína ligante à quitina, a Mo-CBP3, com propriedades coagulantes e atividade antifúngica contra o fitopatógeno Fusarium solani. As proteínas foram extraídas da farinha delipidada de sementes com o tampão Tris-HCl 0,05 M, pH 8,0, contendo NaCl 0,15 M. O teor médio de proteína da farinha correspondeu a 216,44 mgP/gF. O extrato total foi fracionado em albuminas e globulinas por diálise contra água seguida de centrifugação. As albuminas foram concentradas com sulfato de amônio a 90% de saturação. A F0-90% foi submetida à cromatografia de afinidade em coluna de quitina, previamente equilibrada com o tampão de extração. Foram obtidos um pico não retido e dois picos retidos, correspondentes às proteínas ligantes à quitina (CBP). O primeiro destes foi eluído com solução de N-acetil-D-glucosamina 0,1 M (PNAG), e o segundo, com ácido acético 0,05 M, pH 3,0 (PAC). PNAG foi aplicado em coluna de troca catiônica, Resource S, acoplada a um sistema de FPLC, equilibrada com tampão acetato de sódio 0,05 M, pH 5,2. Dos picos obtidos, o terceiro correspondeu à proteína Mo-CBP3 - eluída com 0,5 M de NaCl no tampão de equilíbrio. O teor protéico médio calculado para a proteína purificada Mo-CBP3 foi de 1,17 mgP/gF, representando um rendimento final de 0,54% das proteínas do extrato total. A massa molecular aparente por SDS-PAGE foi de 18,0 kDa sem o agente redutor e, de 9,0 kDa, na presença deste. O resultado sugere que Mo-CBP3 seja uma proteína dimérica formada de subunidades idênticas, unidas por pontes dissulfeto. A massa molecular de Mo-CBP3, por cromatografia de exclusão molecular, foi de 14,34 kDa, e o pI de 10,8. Trata-se de uma glicoproteína com 2,5% de carboidratos, que não apresenta atividade hemaglutinante ou quitinásica. Sua seqüência NH2-Terminal obtida foi CPAIQRCCQQLRNIQPPCRCCQ, com 22 aminoácidos, confirmando sua característica básica. Mo-CBP3 mostrou-se tão eficiente quanto o AlK(SO4)2 na capacidade de coagular matéria em suspensão na água. Mo-CBP3 foi fungicida para esporos de Fusarium solani a 0,1 mg/mL. O aquecimento da proteína a 98 °C, por 1 h, e a pré-incubação com o açúcar N-acetil-D-glucosamina, não reverteram sua ação. Mo-CBP3 mostrou-se capaz de retardar o crescimento micelial do fungo ainda na menor dose testada, 0,05 mg/mL. Mo-CBP3 é inativa contra o oomiceto Pythium oligandrum, que apresenta celulose no lugar da quitina na parede celular. A proteína foi, ainda, capaz de inibir cerca de 80% da acidificação do meio, por esporos de F. solani, induzida por glicose, o que sugere a influência de Mo-CBP3 sobre as bombas de prótons (H+ATPases) presentes na membrana celular dos esporos deste fungo.