Made available in DSpace on 2016-01-26T18:55:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sandra Genaro[1].pdf: 442067 bytes, checksum: 0fb723780900ccacd365c11bf7c5f2c9 (MD5) Previous issue date: 2012-03-09 / This study evaluated the effect of probiotics supplementation with or without Zinc (Zn), added to the mineral mixture, in humoral immune response in sheep vaccinated with a single dose of rabies vaccines. Forty-five malecrossbred rams Santa Inês, aged 6 months were randomly divided into 3 groups (15 animals / group): Control group (CG) received 10 grams of mineral / animal / day, the probiotics group (GP) received 10 grams of mineral added 4 grams of probiotics / animal / day and Probiotics and Zinc group (GPZn) received 10 grams of mineral added 4 grams of probiótics and 14.4 mg of zinc sulfate per animal per day added to the probiotics. The individual titles of neutralizing antibodies were determined using the technique of neutralization-based Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test (RFFIT) and Fluorescent Inhibition Microtest (FIMT). There were no statistically significant differences between the mean serum concentrations between groups. It was concluded that the probiotics administration with or without zinc did not improve the immune humoral response of antibody rabies. / Esse estudo avaliou o efeito da suplementação do probiótico com ou sem zinco (Zn), adicionado à mistura mineral, na produção de anticorpos séricos contra o vírus rábico em ovinos vacinados com uma única dose de vacina. Quarenta e cinco ovinos machos, mestiços Santa Inês, com idade de 6 meses foram divididos aleatoriamente em 3 grupos (15 ovinos/grupo): Grupo controle (GC) recebeu 10 gramas de suplemento mineral/animal/dia, grupo probiótico (GP) recebeu 10 gramas de suplemento mineral adicionado 4 gramas de probiótico/animal/dia e grupo Probiótico e Zinco (GPZn) recebeu 10 gramas de suplemento mineral adicionado 4 gramas de probiótico e 14,4 mg de sulfato de zinco/animal/dia adicionado ao probiótico. Os títulos individuais de anticorpos foram determinados por meio da técnica de soroneutralização baseado no RapidFluorescent Focus Inhibition Test (RFFIT) e no FluorescentInhibitionMicrotest (FIMT). Não houve diferenças estatísticas significativas entre as médias de concentrações séricas entre os grupos. Conclui-se que a administração de probióticos com ou sem zinco não melhora a resposta imune humoral antirrábica.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao.pdf: 163253 bytes, checksum: 0e35acc009cfd69c73f2502bda6e246f (MD5) Previous issue date: 2010-08-30 / The complex toxocariasis/larva migrans has been considered as one of the most important helminthosis wideworld. Human beings acquire the infection especially by ingestion of Toxocara spp. eggs present in contaminated soil. However, it is stated that human may become infected by ingesting raw or undercooked meat of paratenic hosts. The purpose of this study was to evaluate the frequency of anti-Toxocara antibodies in ovine from Presidente Prudente. Serum samples were obtained from 365 sheep of diverse breed and different ages. The collection of samples was done in a slaughter house as well as in some farms from Presidente Prudente, São Paulo. Three groups were evaluated. Group I: animals up to six months old; Group II: animals aging seven up to 10 months; Group III: animals aging more than 11 months. ELISA test was performed in order to detect antibodies (IgG) anti-Toxocara by using excretory-secretory antigens of T. canis (TES). One-hundred-three out of 365 animals (50.14%) showed antibodies anti-¬Toxocara. It was observed a significant difference among the analyzed groups, regarding age of animals. This finding suggests a proportional relationship between infection rate and aging. It is possible to assume that the high frequency of soropositive animals make possible the infection of human beings who consume ovine meat. It is also possible to consider the relevance of these animals in the epizootiology of Toxocara spp. / O complexo toxocaríase/larva migrans é considerado como uma das principais helmintoses. Embora seja considerada como uma geohelmintose, a zoonose pode ser adquirida por ingestão de carne crua ou mal cozida de hospedeiros paratênicos. Com objetivo de avaliar a freqüência de anticorpos anti-Toxocara, foram obtidas amostras de soro de 365 ovinos de diferentes raças, em um frigorífico e propriedades de ovinos da região de Presidente Prudente, São Paulo. Foram avaliados três grupos. Grupo I: animais até seis meses; Grupo II: animais de sete a 10 meses; Grupo III: ovinos acima de 11 meses de idade. Anticorpos (IgG) foram detectados pelo método de ELISA, utilizando-se antígenos excretórios-secretórios de T. canis (TES). Dos animais estudados, 50,14% (183/365) foram sororeagentes para anticorpos anti-¬Toxocara. Observou-se diferença significativa entre os grupos analisados sugerindo uma relação proporcional da taxa de infecção com o avanço da idade em ovinos. A alta frequência de ovinos sororegantes mostra a possibilidade de infecção de seres humanos que consomem carne destes animais e também a participação dos mesmos na cadeia epizootiológica de Toxocara spp.

Made available in DSpace on 2016-07-18T17:53:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Sandra Genaro[1].pdf: 442067 bytes, checksum: 0fb723780900ccacd365c11bf7c5f2c9 (MD5) Previous issue date: 2012-03-09 / This study evaluated the effect of probiotics supplementation with or without Zinc (Zn), added to the mineral mixture, in humoral immune response in sheep vaccinated with a single dose of rabies vaccines. Forty-five malecrossbred rams Santa Inês, aged 6 months were randomly divided into 3 groups (15 animals / group): Control group (CG) received 10 grams of mineral / animal / day, the probiotics group (GP) received 10 grams of mineral added 4 grams of probiotics / animal / day and Probiotics and Zinc group (GPZn) received 10 grams of mineral added 4 grams of probiótics and 14.4 mg of zinc sulfate per animal per day added to the probiotics. The individual titles of neutralizing antibodies were determined using the technique of neutralization-based Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test (RFFIT) and Fluorescent Inhibition Microtest (FIMT). There were no statistically significant differences between the mean serum concentrations between groups. It was concluded that the probiotics administration with or without zinc did not improve the immune humoral response of antibody rabies. / Esse estudo avaliou o efeito da suplementação do probiótico com ou sem zinco (Zn), adicionado à mistura mineral, na produção de anticorpos séricos contra o vírus rábico em ovinos vacinados com uma única dose de vacina. Quarenta e cinco ovinos machos, mestiços Santa Inês, com idade de 6 meses foram divididos aleatoriamente em 3 grupos (15 ovinos/grupo): Grupo controle (GC) recebeu 10 gramas de suplemento mineral/animal/dia, grupo probiótico (GP) recebeu 10 gramas de suplemento mineral adicionado 4 gramas de probiótico/animal/dia e grupo Probiótico e Zinco (GPZn) recebeu 10 gramas de suplemento mineral adicionado 4 gramas de probiótico e 14,4 mg de sulfato de zinco/animal/dia adicionado ao probiótico. Os títulos individuais de anticorpos foram determinados por meio da técnica de soroneutralização baseado no RapidFluorescent Focus Inhibition Test (RFFIT) e no FluorescentInhibitionMicrotest (FIMT). Não houve diferenças estatísticas significativas entre as médias de concentrações séricas entre os grupos. Conclui-se que a administração de probióticos com ou sem zinco não melhora a resposta imune humoral antirrábica.

Três experimentos foram conduzidos com o objetivo de avaliar os efeitos do fornecimento de baixos teores de óleo de peixe em substituição parcial ao óleo de soja, sobre o consumo de matéria seca (CMS), produção e perfil de ácidos graxos do leite de ovelhas, ganho médio diário de peso corporal (GMD), características da carcaça e composição de ácidos graxos da carne de cordeiros, digestibilidade dos nutrientes, características de fermentação ruminal e metabolismo ruminal dos ácidos graxos. Os tratamentos consistiram de uma dieta controle (CONT), sem adição de óleo; e 4 dietas adicionadas com 4,0% de óleo, consistindo de 0,0% (0P); 0,25% (25P); 0,50% (50P) e 0,75% de óleo de peixe (75P), com o óleo de soja completando o teor de 4,0% de óleo adicionado (% MS). No Experimento I a dieta controle foi composta por 70% de concentrado e 30% de volumoso, nos Experimentos II e III a dieta controle foi composta por 90% de concentrado e 10% de volumoso. Experimento I: Foram utilizadas 50 ovelhas, distribuídas em delineamento experimental de blocos completos casualizados. Verificouse aumento linear na produção de leite das ovelhas e no GMD das crias com a inclusão de óleo de peixe nas dietas. As concentrações de ácido vacênico, CLA C18:2 trans-10, cis-12, ácido eicosapentaenóico (EPA) e ácido docosahexaenóico (DHA) também aumentaram linearmente com os teores crescentes de inclusão de óleo de peixe. Experimento II: Foram utilizados 50 cordeiros, distribuídos em delineamento experimental de blocos completos casualizados. O CMS expresso em % do peso corporal (PC) e em g/kg de PC0,75 aumentou linearmente com os teores crescentes de inclusão de óleo de peixe, o que resultou em aumento linear no GMD dos cordeiros. A concentração de ácido esteárico reduziu com os teores crescentes de substituição do óleo de soja pelo óleo de peixe. Verificou-se aumento linear na concentração de ácido vacênico à medida que o óleo de peixe foi adicionado à dieta. Em comparação ao tratamento controle, os animais alimentados com as dietas contendo óleo de peixe apresentaram maior concentração de CLA C18:2 cis-9, trans-11 na carne. Experimento III: Foram utilizados cinco borregos, canulados no rúmen e no duodeno, distribuídos em delineamento experimental quadrado latino 5 x 5. A suplementação com as fontes de óleo reduziu a digestibilidade da PB. A concentração de acetato, butirato e dos ácidos graxos de cadeia curta (AGCC) totais foi maior no conteúdo ruminal dos animais alimentados com a dieta controle em relação aos das dietas contendo óleo, como conseqüência, o pH ruminal destes animais foi inferior. O fluxo duodenal de C18:1 trans-11 e CLA C18:2 cis-9, trans-11 foi superior para os animais que receberam gordura suplementar. Observou-se aumento linear no fluxo duodenal de ácido C18:1 trans-11 em resposta a inclusão de óleo de peixe nas dietas. A inclusão de 0,75% de óleo de peixe na dieta misturado à 3,25% de óleo de soja mostrou-se como a melhor alternativa avaliada. / Three trials were conducted to evaluate the effects of small amounts of fish oil supply in partial replacement of soybean oil on dry matter intake (DMI), lactation performance and milk fatty acid composition of ewes, growth, carcass characteristics, and on meat fatty acid composition of feedlot lambs, some rumen constituents, and ruminal fatty acid metabolism. Treatments consisted of a control diet (CONT), and 4 diets with 4% added fat consisting of 0.0% (0FO), 0.25% (25FO), 0.50% (50FO) and 0.75% (75FO) fish oil with soybean oil providing the balance of 4% added fat. In trial I the control treatment consisted of 30:70 ratio of forage to concentrate (DM basis). In trials II and III the control treatment consisted of 10:90 ratio of forage to concentrate (DM basis). Trial I: Fifty Santa Inês ewes were penned individually and used in a randomized complete block design. Milk production and preweaning ADG of lambs increased linearly when fish oil replaced soybean oil. Vaccenic acid, CLA trans-10, cis-12, eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoic acid (DHA) increased linearly with fish oil inclusion. Trial II: Fifty Santa Inês ram lambs were penned individually and used in a randomized complete block design. DMI (% of BW and g/kg of BW0,75) increased linearly when fish oil replaced soybean oil, as consequence ADG also increased. Stearic acid concentration decreased and vaccenic acid increased with fish oil inclusion. CLA C18:2 cis-9, trans-11 showed higher concentration in meat of animals fed diets containing fish oil compared to the control diet. Trial III: Five ram lambs cannulated in the rumen and proximal duodenum were assigned in a 5 x 5 Latin Square design. Soybean oil and fish oil supplementations decreased CP digestibility. Ruminal concentrations of acetate, butyrate and total SCFA were higher for animals fed the control diet. Ruminal pH was lower for animals fed the control diet compared to diets with oils. Duodenal flow of C18:1 trans-11 and CLA C18:2 cis-9, trans-11 was greater for diets containing supplemented oils. C18:1 trans-11 flow to the duodenum increased linearly with fish oil inclusion.The inclusion of 0.75% of fish oil in the diet mixed with 3.25% soybean oil was the best alternative evaluated.

As ações conjuntas vêm sendo adotadas por vários segmentos produtivos visando desempenho e competitividade dos empreendimentos para garantir a presença em mercados mundiais. O agronegócio tem importância no processo de desenvolvimento econômico do Brasil como um todo e do Estado do Rio Grande do Sul pela sua capacidade de geração de riquezas, criação de empregos, transferência e circulação de renda, desenvolvimento de novas tecnologias, pesquisas e desenvolvimento da ciência em geral. Estudos também avaliam o potencial das parcerias rurais, enfocando cinco capitais como categorias de ativos que interferem na formação de parcerias, pois é de grande importância a compreensão dos produtores rurais sobre a estreita relação entre a expansão dos bens de capital e a capacitação organizacional. O problema verificado na presente pesquisa refere-se ao processo de formação de estratégias conjuntas no processo de criação de ovinos em escala local, originando a questão-problema que conduziu a pesquisa: Quais os principais fatores de produção (capitais) que contribuem e que limitam o processo de formação de estratégias conjuntas visando à ampliação da capacidade de produção e a competitividade? O estudo teve por objetivo analisar estes fatores. Para isso, foi utilizado o método de investigação de natureza qualitativa e descritiva, a fim de apreender as características do fenômeno e projetar possíveis melhorias no processo proporcionando uma nova visão do problema. A investigação teve início a partir da literatura originária dos diversos autores com estudos relacionados à formação de estratégias conjuntas. Foram definidas categorias de análise baseadas na avaliação de fatores de produção, denominados de capitais humano, financeiro, natural, social e físico. A região selecionada para o desenvolvimento do estudo abrange as cidades de Santa Maria, São Pedro do Sul, Dilermando de Aguiar e São Martinho da Serra, no Estado do Rio Grande do Sul, com uma população-alvo constituída de produtores de pequeno porte na produção de ovinos de lã e de corte. Foram aplicadas entrevistas semi-estruturadas como instrumento de coleta de dados. Os resultados encontrados evidenciaram que os produtores apresentam potencial capacidade de desenvolver estratégias conjuntas, com estrutura suficiente para obter eficiência, sendo os fatores de convivência, os quais estão relacionados ao capital social, considerados como os indutores do processo. O estudo evidenciou ainda falta de entendimento e compreensão dos pesquisados com as questões relativas às preocupações ambientais. / Joint actions are being taken by many productive segments targeting performance and competitiveness of projects to ensure its presence in world markets. Agribusiness has importance economic development process in Brazil\'s as a whole and the State of Rio Grande do Sul for its ability to generate wealth, create jobs, transference and circulation of income, development of new technologies, research and development of science in general. Studies also evaluate the potential of rural partners, focusing on five capitals as asset categories that interfere in the formation of partners, it is very important to understand the rural farmers about the close relationship between the expansion of capital assets and organizational skills. The problem encountered in this study refers to the formation of joint strategies in the process of sheep farming on a local scale causing the problem-question who led the research : What are the main factors of production (capital) which contribute and which limit the process of formation of joint strategies aimed at expanding of production capacity and competitiveness? The study aimed to analyze these factors. For this, we used the method of investigation of qualitative and descriptive in nature, a view to apprehend the characteristics of the phenomenon and projecting possible improvements in the process by providing a new view of the problem. The investigation began from the literature of the different authors with studies associated to the formation of joint strategies . were defined categories of analysis based on the evaluation of factors of production, called human capital, financial, natural, social and physical . The region selected for the development of the study includes the cities of Santa Maria, São Pedro do Sul, Dilermando de Aguiar and São Martinho da Serra in the state of Rio Grande do Sul, with a target population consists of small producers in the production of sheep wool and cutting. Semi-structured interviews were applied as a tool for data collection. The findings results indicated that producers have the potential capacity to develop joint strategies, with structure large enough to achieve efficiency, and the cohabitation factors, which are related to the social capital, considered as inducers of process. The study also revealed a lack of understanding and comprehension of respondents with issues related to environmental concerns.

Experimento I: Foram utilizadas 60 borregas da raça Santa Inês com o objetivo de avaliar os efeitos de três taxas de crescimento até os 7 meses de idade. Os tratamentos foram delineados visando obter alta taxa de crescimento (ATC), moderada taxa de crescimento (MTC) e baixa taxa de crescimento (BTC). Foram avaliados o consumo de matéria seca, o ganho de peso corporal e as concentrações séricas de progesterona para a detecção da idade à puberdade. Foram verificados efeitos lineares (p<0,01) para o peso corporal e metabólico, sendo os maiores valores encontrados para os animais do tratamento ATC. Efeito linear (p<0,01) foi verificado para o ganho médio diário (GMD) sendo de 0,182; 0,156 e 0,136 kg/dia para os tratamentos ATC, MTC e BTC respectivamente. Borregas pertencentes ao tratamento ATC apresentaram maior conversão alimentar sendo os valores para o tratamento ATC de 6,1; MTC de 7,1 e BTC de 9,2 kg MS/ kg de ganho de peso. Verificou-se diferença (p<0,01) quanto a porcentagem de animais que atingiram a puberdade sendo o tratamento MTC com o maior número de borregas púberes até os 7 meses de idade (60%), seguida dos tratamentos ATC (45%) e BTC (15%)com peso médio de 39,3 kg de peso corporal, sendo 70% do peso adulto. Experimento II: As borregas utilizadas no experimento 1 com 37 Kg de PC entraram em estação de monta e após o parto receberam uma única dieta, sendo blocadas de acordo com o peso e dias de lactação. Observou-se efeito quadrático (p<0,01) na produção de leite em 3h (137,9; 150,1 e 104,4 g), efeito quadrático (p<0,05) para LCG (167,2; 178,9 e 129,4) e efeito quadrático (p<0,03) LCGP (216,5; 140,5 e 162,7). Os teores de gordura (9,8; 8,9 e 8,3%) e de proteína (4,2; 4,2 e 4,6 apresentaram efeitos lineares sendo (p=0,01) para gordura e (p<0,01) para proteína. Experimento III: Os objetivos deste experimento foram avaliar o efeito da inclusão de bagaço de cana-de-açúcar in natura (BIN) sobre o consumo e a digestibilidade aparente dos nutrientes, balanço de nitrogênio e os parâmetros ruminais de cordeiros Santa Inês. Quatro cordeiros providos de cânula ruminal com peso corporal (PC) médio inicial de 30kg foram alojados individualmente em gaiolas para ensaios de metabolismo. O tratamento controle positivo (CONT) consistia de uma ração de alto concentrado contendo de 10% de feno de coastcross (Cynodon sp.) na MS, sendo os demais tratamentos níveis crescentes de BIN em 10, 20 e 30% da MS, constituindo os tratamentos 10BC, 20BC e 30BC. As rações experimentais foram isonitrogenadas (13,75±0,25% PB). Não verificou-se efeito de tratamento (p>0,05) sobre o consumo de MS, MO, e PB em kg/dia e g/kg de PC 0,75; apenas sobre consumo de FDN com efeito linear (p< 0,01). O balanço de nitrogênio, assim como a concentração de acetato, propionato, butirato, concentração total de AGCC, amônia no fluido ruminal e a de digestibilidade aparente da MS, MO, PB e FDN não foram afetados pelos tratamentos. / Trial I: Sixty Santa Ines ewe lambs were used to evaluate the effects of three growing rates until 7 months of age. Treatments were defined to achieve high (HGR), moderate (MGR) and low (LGR) growing rates. The dry matter intake and average daily gain (ADG) were evaluated, well as serum levels of progesterone in order to detect the age of puberty. Linear effects (P<0.01) to body weight (BW) with values being 59.5, 61.4, and 58.0 to HGR, MGR and LGR, respectively. Linear effects (P<0.01) was also observed for average daily gain with values being 0.182, 0.156, and 0.136 kg/day, for HGR, MGR and LGR, respectively. The feed:gain ratio showed a linear effects (p<0.02) according to raw sugarcane bagasse inclusion in diet with values being 6.1, 7.1 (M) and 9.2 kgDM/kg BW for HGR, MGR and LGR, respectively. Linear effects (p<0.01) was observed for the percentage of animals of ewe lambs the reached puberty at 7 months of age, showing highest values for MGR (60%), followed by HGR (45%) and LGR (15%) treatment. Trial II: The same ewe lambs of Experiment 1 were bred at 37 kg of BW and after lambing they received a unique diet. The ewe lambs were blocked according to body weight and days in milking. According to the energy density increase in the diet, quadratic effects (p<0.01) was observed on milk production recorded in a 3-hour interval (137.9; 150.1 and 104.4 g), fat corrected milk (167.2, 178.9 and 129.4 g) and fat and protein corrected milk (216.5, 140.5, 162.7g). Fat (9.77, 8.92 and 8.35%) and protein (4.2, 4.2, and 4.6%) showed linear effects (P=0.01) for fat and (P<0.01) for protein. Trial III: The aim of this study was to evaluate the inclusion of raw sugarcane bagasse (RSB) on dry matter intake and apparent digestibility of nutrients, nitrogen balance and ruminal parameters of Santa Ines ram lambs. Four ruminally fistulated ram lambs averaging 30 kg of BW were placed in metabolism crates. The control treatment (CONT) consisted of a high concentrate diet with 10% of coastcross (Cynodon sp.) hay in the dietary DM and the others treatments consisted of 10, 20 and, 30% of RBS in the dietary DM. The diets were formulated to provide similar concentration of crude protein (13.75±0.25%). No effects were observed for DMI, OM, and CP in kg/day and g/kg of BW0.75. Linear effects (p<0.02) was observed for NDF intake according RBS inclusion. Variables, as well as total SCFA, acetate, propionate, and butyrate concentrations. Ruminal ammonia and apparent nutrient digestibility also did not differ among treatments.

Os animais contribuem para o aumento da concentração de metano na atmosfera através da fermentação de tanques de esterco e da fermentação do trato digestivo (fermentação entérica). A fermentação entérica dos ruminantes, pseudo-ruminantes (cavalos, asno, mulas) e não ruminantes produzem em média 80 Tg/ano de metano e representam 28 % do metano antropogênico global emitido, dos quais 95 % provêm dos ruminantes. Os objetivos destes trabalhos foram (i) rastrear novos materiais com potencial forrageiro que contenham tanino e que promovam redução de metano entérico; (ii) estudar a influência dessas plantas sobre a produção de metano e parâmetros fermentativos in vitro; e (iii) estudar a influência dessas plantas sobre a população de Fibrobacter succinogenes e a comunidade metanogênica no meio de fermentação. Os resultados são apresentados na forma de capítulos, sendo o primeiro objetivo descrito no Capítulo 3, no qual é descrita a caracterização das leguminosas taniníferas Styzolobium aterrimum (STA), Styzolobium deeringianum (STD), Leucaena leucocephala(LEU), Mimosa caesalpiniaefolia Benth (MIC). Estas plantas foram avaliadas pela composição química e quantificação de compostos fenólicos e bioensaio até 96 h de incubação in vitro; tendo Cynodon x cynodon (CYN) como controle para avaliar a produção de gás potencial (A), a fase lag (L), a taxa fraccional de fermentação (\'mü\') e o incremento de gás devido à adição de PEG após 8, 24 e 48 h de incubação nas cinco plantas. As leguminosas tiveram melhor desempenho fermentativo que a gramínea, com exceção de MIC. Entretanto, a fermentação de todas leguminosas foi limitada diferentemente pela presença de tanino, da fibra indigestível ou pela ação aditiva de ambos. Entre todas as plantas, LEU mostrou ser uma forragem de boa qualidade para suplementação protéica em dietas de ovinos, assim como STA e STD, contanto que para estas haja um melhor manejo de produção para evitar o alto conteúdo de fibras, especialmente de FDA. MIC poderia ser incluído na dieta de ovinos em baixa concentração, não com a finalidade principal de suplementação protéica, mas explorando esta leguminosa como aditivo para mitigação de metano. No Capítulo 4 são apresentados os resultados de outro ensaio in vitro (segundo objetivo). A técnica in vitro de produção de gás foi utilizada para avaliar as quatro leguminosas taniníferas (STA, STD, LEU e MIC) e o CYN como controle em dois horários, no t1/2 (tempo para obtenção da metade da GP) e após 24 h de incubação, medindo a produção total de gás, metano, amônia, ácidos graxos de cadeia curta (AGCC), massa microbiana (MM) e a degradabilidade verdadeira da matéria seca (VDMS). A produção de metano em t1/2 foi reduzida (P < 0,05) com adição das leguminosas em 17% e quando relacionado à VDMS, esta redução alcançou em média 50% com LEU e STA e 37% com MIC e STD. LEU e STA causaram aumento significante na MM seguida por STD, MIC e CYN. A relação MM/SCFA em t1/2 foram maiores para LEU (14,7) e STA (14,1) seguida por STD (6,1), MIC (5,6) e CYN (4,6). A maior MM para LEU e STA sugere uma produção de ATP maior, porém, as diferentes proporções de AGCC demonstraram diferentes rotas de aquisição de ATP. O Capítulo 5 se refere à quantificação de linhagens de bactéria ruminal, a qual foi realizada utilizando primers específicos para detecção de seqüências de gene 16S rDNA para metanogênicas e para a bactéria celulolítica Fibrobacter succinogenes através da reação em cadeia da polimerase em tempo real (qPCR). Foi também investigado a influência das leguminosas na comunidade metanogênica através da eletroforese em gel com gradiente denaturante (DGGE) de seqüências de gene 16S rDNA. As metanogênicas em t1/2 foram 2,0 e 0,9 vezes menores que com STA e LEU comparadas com o controle, mas foram 2,5 e 0,5 vezes maiores com MIC e STD. A população de F.succinogenes foi 2,3 e 1,8 vezes menores do que o controle quando LEU e STA foram incubadas. A análise de DGGE para metanogênicas resultou em diferente distribuição de bandas com os tratamentos. CYN apresentou algumas bandas mais fortes, as quais se tornaram fracas com as leguminosas, exceto em STA. Algumas bandas tanto desapareceram, como em LEU, STA e MIC, ou se tornaram mais fracas, especialmente em STA. MIC apresentou ligeiro aumento no número de bandas fracas. É confirmado que as plantas taniníferas estudadas foram capazes de reduzir a emissão de metano com diferentes proporções dos produtos finais de fermentação, afetando negativamente a população de F. succinogenes e causando alterações na estrutura da comunidade metanogênicas / Animals contribute to increasing the methane concentration in the atmosphere through the fermentation of livestock manure and the fermentation in the digestive tract, e.g, enteric fermentation. The enteric fermentation of ruminants, pseudoruminants (horses, donkeys, mules) and non-ruminants produce an average of 80 Tg/year of methane and comprise 28 % of global anthropogenic methane emission, from which 95% arise from ruminants. The aims of this study were (i) to scan new potential forage containing tannin, which may reduce enteric methane emission; (ii) to study the influence of those plants on methane production and fermentative parameters in vitro; (iii) to study the influence of those plants on the population of Fibrobacter succinogenes and the methanogen community in the fermentation fluid. The results are presented in the form of chapters, being the first objective studied described in the Chapter 3, in which refers to the characterization of the tannin-rich legumes Styzolobium aterrimum (STA), Styzolobium deeringianum (STD), Leucaena leucocephala(LEU), Mimosa caesalpiniaefolia Benth (MIC). They were appraised for the chemical composition, quantification of phenolic compounds and bioassay up to 96 h in vitro incubation using Cynondon x cynodon (CYN) as control, to evaluate the potential gas production, (A), lag phase (L), fractional rate of gas production (\'mü\') and the gas increment due to PEG addition after 8, 24 and 48 h incubation of the five plants. Legumes showed better fermentative performance (except MIC) than the grass. However, each legumes fermentation was limited diferently by the presence of condensed tannin or the indigestible fiber or by the additive action of both. Among the plants, LEU showed good quality forage for protein supplementation in sheep diets as well as STA and STD as long there is an agriculture management to reduce indigestible fiber, specially ADF. MIC could be included in a sheep diet in low concentration, aiming not the protein supplementation, but exploiting it as an additive to methane mitigation. In Chapter 4 the second object is discussed describing an in vitro gas test to evaluate the four tannin-rich legumes (STA, STD, LEU and MIC), and CYN as control at two main time points: t1/2 (time of half maximal gas production) and 24 h, measuring total gas production , methane, ammonia, short chain fatty acids (SCFA), microbial mass growth (MM) and true substrate degradability (TSD). Methane production at t1/2 was reduced (P < 0.05) with addition of legumes by 17 % but when related to TSD this reduction reached on average 50 % with LEU and STA and 37% with MIC and STD. LEU and STA caused a significant increase in MM followed by STD, MIC, and CYN. Additionally, high MM/SCFA ratios in t1/2 were found in LEU (14.7) and STA (14.1) and followed by STD (6.1), MIC (5.6) and CYN (4.6). The higher MM in LEU and STA suggested higher ATP production; however, the different proportion of the SCFA demonstrated different routes of ATP acquisition. Chapter 5 refers to the quantification of specific strains of rumen bacteria, which was performed using designed primers for detecting 16S rDNA gene sequences for methanogens and the cellulolytic bacteria Fibrobacter succinogenes by real-time polymerase chain reaction (qPCR). Also, the influence of those four legumes on the methanogenic community was investigated using denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) of 16S rDNA gene. Methanogens at t1/2 were 2.0 fold and 0.9 fold lower with STA and LEU compared to the control, but they were 2.5 fold and 0.5 fold higher with MIC and STD. F. succinogenes population was 2.3 and 1.8 fold lower than the control when LEU and STA was applied. DGGE analysis of the methanogenic population resulted in different band patterns with treatments. CYN presented some strong bands, which became weaker with the legumes, except in STA. Some bands either disappeared, as in LEU, STA and MIC, or became weaker, especially in STA. MIC increased slightly the number of weak bands. It is confirmed that the studied taninniferous plants were able to reduce enteric methane with different fermentation products proportions, as well negatively affected F. succinogenes population and caused changes in the methanogenic community structure

O saco vitelino é o único anexo embrionário presente em todas as espécies dos embriões vertebrados, répteis, aves e mamíferos. Em mamíferos domésticos o saco vitelino é inicialmente grande, pois nestas espécies ele é transitório. Após a implantação, surge no mesênquima lateral à notocorda agrupamentos de células, denominados ilhotas sanguíneas, que representam os progenitores dos sistemas vascular e hematopoético: os hemangioblastos. Os hemangioblastos centrais das ilhas sanguíneas formam as primeiras células-tronco hematopoéticas, enquanto os hemangioblastos periféricos se diferenciam em angioblastos, os precursores dos vasos sanguíneos. O desenvolvimento inicial da atividade hematopoética no saco vitelino conduz a hipótese de que esse tecido é o local primário de desenvolvimento hematopoético e que as células-tronco derivadas dele semeiam os outros sítios intraembriônicos. Foi possível observar nas análises microscópicas que realmente existe uma relação entre ambas linhagens. Nas análises de expressão gênica, alguns genes expressos pelo hemangioblasto apresentaram alta expressão nas análises D+0 e outros genes também específicos do hemangioblasto, porém em estágios secundários de diferenciação como os encontrados na região aórtica, a nível de endotélio hemogênico apresentaram altos níveis de expressão após 3 dias em cultivo. Concluímos portanto, que o saco vitelino por ser o local primário de formação das células sanguíneas e endoteliais nos estágios iniciais da embriogênese, por serem primitivas e, portanto não expressarem marcadores de células maduras na sua superfície, tornam estas células uma importante fonte de células-tronco relevante para a Terapia Celular para hemofilia e muitas outras doenças humanas. / The yolk sac is the single attachment embryo present in all species of vertebrate embryos, reptiles, birds and mammals. In domestic mammals the yolk sac is initially large, since these species it is transient. After implantation, appears in the lateral mesenchyme to the notochord cell clusters, called \"blood islands\" that represent the progenitors of vascular and hematopoietic systems: the hemangioblasts. The central islands hemangioblasts form the first blood hematopoietic stem cells, while peripheral hemangioblasts, the angioblastic differentiate into the precursors of blood vessels. The initial development of the yolk sac hematopoietic activity leads to the hypothesis that this tissue is the primary site of development and that hematopoietic stem cells derived from them sow other intraembryos sites. It was observed in the microscopic analysis that there is indeed a relationship between the two lineages. In the analysis of gene expression, some genes expressed by hemangioblasts showed high expression in D+0 and other specific genes also hemangioblasts, but in secondary stages of differentiation as found in the aortic region, the level of hemogenic endothelium showed high levels of expression after 3 days in culture. We therefore conclude that the yolk sac to be the primary site of formation of blood and endothelial cells in the early stages of embryogenesis, for its cells be primitive and therefore do not express markers of mature cells on the surface, these cells become an important source of cells relevant to stem cell therapy for hemophilia and many other human diseases.

A terapia celular com células-tronco (CT) surgiu nos últimos anos como uma esperança para o tratamento de doenças, sem tratamento efetivo, como a osteoartrite (OA) em joelho. Nesse trabalho utilizamos células-tronco imaturas de polpa dentária humana (CTPD) cultivadas ou não em associação com biomateriais para o tratamento de lesões osteoarticulares em joelhos de ovinos. As CTPD humanas foram transduzidas com o gene repórter, EGFP, facilitando o monitoramento das mesmas in vitro e in vivo, após o implante na articulação femorotibiopatelar de ovinos. A capacidade de adesão e acomodação das células de polpa dentária no biomaterial foi observada in vitro 24 horas e um mês após sua aplicação no mesmo, sendo a viabilidade celular semelhante em ambos os períodos, porém com uma maior dispersão celular no período mais longo, segundo as análises realizadas por técnicas de microscopia eletrônica de varredura e histologia. Ainda para a realização das análises histológicas, foram realizadas técnicas para padronizar os métodos de descalcificação e inclusão do tecido ósseo-articular, prévio aos cortes. Exames radiográficos, ultrassonográficos e artroscópicos foram feitos para acompanhar a evolução dos tratamentos. Os resultados revelaram que as CTPD humanas aderem bem ao biomaterial e que em associação possuem uma excelente capacidade aparente de reconstituição do tecido lesado. Com a realização deste trabalho, concluímos que o protocolo de terapia utilizado é um bom modelo para o estudo de OA e serve para futuras aplicações clínicas. / Cell therapy with stem cells (CT) has emerged in recent years as a hope for the treatment of diseases without effective treatment, such as osteoarthritis (OA) in knee. In this work we use stem cells from immature human dental pulp (hSCIDP) in association or not with biomaterials for the treatment of osteoarticular lesions in sheep´s kneef. The human hSCIDP were transduced with the reporter gene EGFP, thus making easier monitoring these in vitro and in vivo after implantation in sheep´s femorotibiopatelar joint. The capacity of adhesion and accommodation of dental pulp cells in the biomaterial in vitro was observed 24 h and one month after its application, resulting in similar cell viability in both periods, but with a greater cell dispersion in the longer, period, according to analysis performed by scanning electron microscopy and histology. Moreover, some histological techiniques were performed to standardize the methods for inclusion and decalcification of bone tissue joints. Radiographic, ultrasonographic and arthroscopic analyses were made to monitor the progress of treatment. The results revealed that the human hSCIDP adhere well to the biomaterial and have an excellent apparent reconstitution of damaged tissue. With this work, we conclude that the therapy protocol used is a good model for studying OA and useful for future clinical applications.

O objetivo desta dissertação de mestrado foi avaliar a eficácia de uma vacina autógena no controle do footrot (FR) dos ovinos, para tanto foram desenvolvidos dois experimentos em duas propriedades rurais distintas, no Estado do Rio Grande do Sul (RS). O primeiro experimento foi conduzido em uma propriedade rural do município de Santiago, com um extenso histórico de surtos de footrot no rebanho ovino. Inicialmente foi colhido material infeccioso presente no rebanho para a produção de uma vacina autógena, posteriormente 347 ovelhas foram vacinadas (grupo V) com duas doses da vacina com 30 dias de intervalo, a dose foi 2 ml por via subcutânea. Desse grupo, 150 animais receberam a vacina na região axilar (grupo Va) e 197 animais receberam a vacina na região inguinal (grupo Vb). Um grupo de 75 ovelhas formou o grupo controle (grupo C) sem vacinação. Os dados mostraram que a prevalência do FR no grupo V que inicialmente era de 4%, sofreu uma redução para 2% na semana 23, chegando à zero na semana 30. No grupo C a prevalência de animais infectados foi de 6,7% no início do experimento, teve uma redução para 5,3% na semana 23 e ao final estava em 3,7%. Observou-se uma redução gradativa no número de ovinos infectados nos dois grupos, entretanto a eliminação seletiva ocorrida no grupo controle prejudicou a análise estatística dos dados. Amostras de sangue foram colhidas da jugular dos animais para verificar títulos de anticorpos aglutinantes contra o antígeno presente na propriedade em cinco ocasiões durante o experimento. Os resultados mostraram diferenças significativas (p<0,001) entre os títulos de anticorpos aglutinantes contra Dichelobacter nodosus no soro de ovinos vacinados e não vacinados durante o experimento. A análise das reações vacinais locais apontou a região inguinal como o melhor local para a aplicação da vacina com adjuvante oleoso por via subcutânea e também demonstrou uma relação direta entre a idade dos ovinos e o percentual de reações vacinais locais e a severidade dessas reações. Os resultados sugerem que a vacina autógena com adjuvante oleoso obteve sucesso no controle da doença. O segundo experimento foi conduzido em uma propriedade rural do município de Glorinha, com o objetivo de avaliar a resposta imunológica provocada por uma vacina monovalente e por uma vacina polivalente (7 sorogrupos) contra o FR. Trinta fêmeas ovinas, com idades variadas, foram divididas aleatoriamente em 3 grupos de 10 animais: grupo controle (C) que não foi vacinado, grupo vacinado com vacina monovalente (Vm) e grupo vacinado com vacina polivalente (Vp). Os ovinos vacinados receberam duas doses com quatro semanas de intervalo, a dose foi de 2 ml por via subcutânea na região inguinal. Amostras de sangue foram colhidas da jugular dos animais para verificar títulos de anticorpos aglutinantes contra o D. nodosus em quatro ocasiões durante o experimento. Os resultados mostraram diferenças significativas (p<0,001) entre os títulos médios geométricos (GMT) de anticorpos aglutinantes contra D. nodosus no soro de ovinos dos grupos Vm, Vp e C na quarta, sétima e 12ª semanas do experimento. Em relação aos títulos médios geométricos (GMT) entre os grupos Vm e Vp houve diferenças estatisticamente significativas na quarta e sétima semanas. A vacina monovalente induziu títulos de aglutininas superiores contra o D.nodosus em comparação com a vacina polivalente. / The objective of this work was to evaluate the efficacy of an autogenous vaccine in the control of footrot (FR) in sheep. Two field experimental works were carried on two different farms located in the State of Rio Grande do Sul (RS), Brazil. The first experiment was conducted on a farm in the municipality of Santiago, with a long history of FR outbreaks in their sheep flock. At beginning of the trail samples from FR infected sheep were collected for the production of an autogenous vaccine. Following 347 sheep were vaccinated (group V) with two doses of 2 ml subcutaneously vaccine 30 days apart. Of this group, 150 animals received the vaccine in the axillary region (group Va) and 197 animals received the vaccine in the inguinal region (group Vb). A group of 75 sheep formed the control group (group C) without vaccination. The data showed that the prevalence of FR in the group V initially 4%, was reduced to 2% at 23 weeks, reaching to zero at week 30. In the group C the prevalence of infected animals of 6.7% at the beginning of the experiment, was reduced to 5.3% at week 23, decreasing to 3.7%, at the end. There was a gradual reduction in the number of infected sheep in both groups, however the selective elimination occurred in the group C affected the statistical analysis. Blood samples were collected from the jugular vein of the animals to see evidence of agglutinating antibodies against the antigen present on the property on five occasions during the experiment. The results showed significant differences (p<0,001) between antibody titers against Dichelobacter nodosus in the serum of sheep vaccinated and not vaccinated during the experiment. The analysis of local vaccine reactions showed the inguinal region as the best place for the application subcutaneously oil-adjuvant vaccine and also demonstrated a direct relationship between the age of the sheep and the percentage of local vaccine reactions and the severity of these reactions. The results suggest that autogenous oil-adjuvant vaccine succeeded in controlling the disease. The second experiment was conducted on a farm in the municipality of Glorinha, in order to evaluate the immune response elicited by a monovalent and a polyvalent vaccine against FR, containing seven serogroups. Thirty ewes, of various ages were randomly divided into 3 groups of 10 animals each: control group (C) was not vaccinated, group vaccinated with monovalent vaccine (Vm) and the group vaccinated with polyvalent vaccine (Vp). The sheep were vaccinated with two doses of 2 ml subcutaneously in the inguinal region, four weeks apart. Blood samples were collected from the jugular vein of the animals to determine agglutination titers against D. nodosus in the beginning of the experiment (day zero) and in other three occasions, weeks 4, 7 and 12. The results showed significant differences (p<0,001) between the geometric mean titers (GMT) of antibodies against D. nodosus in the serum of sheep of groups Vm, Vp and group C in the fourth, seventh and 12th weeks of the experiment. For the geometric mean titers (GMT) between the groups Vm and Vp there was statistically significant differences in the fourth and the seventh weeks. The monovalent vaccine induced titers of higher against D. nodosus compared with the polyvalent vaccine.