Controlling pathogenic presence in broilers has become a priority in the poultry industry to prevent economic losses due to disease and infection, as well as the possible contamination of chicken products. The use of antibiotics reduces the incidence of infections; however, their removal from production initiated the search for suitable alternatives. Probiotic ineed supplements have been widely evaluated as alternatives. Probiotic use has improved broiler performance, reduced pathogenic loads, and stimulated the immune system at later life stages. However, there is still a gap in protection during the first weeks after the chick hatches. The in ovo supplementation of probiotics has the potential of promoting early health benefits and protect the chick against pathogens after hatch. In the present study, the in ovo inoculation of different probiotic species was evaluated. It was determined that the inoculation of higher concentrations of E. faecium (107 cfu/50µL) into the egg improves growth performance and intestinal morphology compared to lower doses (105 and 106 cfu/50µL). It was also determined that not all B. subtilis serotypes are safe for in ovo inoculation, even if recognized as safe for use in feed, due to a high reduction in hatchability. However, certain B. subtilis are safe for in ovo inoculation and regulate the gut microflora through modulations in coliforms and aerobic bacteria after hatch. Lastly, the in ovo inoculation of different Lactobacillus strains does not affect hatchability or growth performance. However, different Lactobacillus species stimulated cytokine production even during the first week of hatch. The bursa of Fabricius morphology was modulated through an increase in follicular area, which could possibly induce higher antibody production against incoming pathogenic challenges. These results indicate that the in ovo inoculation of probiotic bacteria can induce earlier benefits to broiler health through early changes in gut microflora, as well as early stimulation in the immune system. The early protection provided through the in ovo inoculation of probiotics combined with the protection obtained through the administration of probiotics in feed could potentially result in overall healthier broilers and therefore improved performance.

In Deutschland werden jährlich über 40 Millionen männliche Eintagsküken aus Legelinien aufgrund vorrangig wirtschaftlicher Interessen getötet. Dies stellt sowohl ein ethisches als auch ein tierschutzrechtliches Problem dar (ANON. 2006, IDEL 2007). Gerade vor dem Hintergrund aktueller politischer Entscheidungen (MUNLV NRW 2013, NI MELV 2014) besteht ein Bedarf an Alternativen zur Tötung männlicher Eintagsküken. Verschiedene Lösungsansätze wie z. B. das Zweinutzungshuhn (ICKEN et al. 2013) oder aber die Mast männlicher Geschwisterhühner (KAUFMANN und ANDERSSON 2013) sind derzeit aus ökonomischen und ökologischen Gründen nicht flächendeckend realisierbar. Eine weitere Möglichkeit bietet die In-ovo-Geschlechtsbestimmung. Hierbei wird das embryonale Geschlecht bereits vor dem Schlupf identifiziert; nachfolgend können die Eier mit männlichen Embryonen aussortiert werden. Um sowohl ethischen als auch tierschutzrechtlichen Aspekten Genüge zu tun, sollte die Geschlechtsidentifikation dabei vor Einsetzen des embryonalen Schmerzempfindens stattfinden (Tag 10 + 12 h der Bebrütung; CLOSE et al. 1997). Ziel der vorliegenden Arbeit war die Entwicklung einer verlässlichen Methode zur In-ovo-Geschlechtsbestimmung anhand geschlechtsspezifischer Differenzen im Hormongehalt der Allantoisflüssigkeit sieben bis zehn Tage alter Hühnerembryonen. Nachfolgend wurde der Einfluss der Geschlechtsbestimmung auf die embryonale Entwicklung, Schlupferfolg, Aufzucht sowie die Leistungsparameter der adulten Tiere analysiert. Im Rahmen der ersten Teilstudie erfolgte die Beprobung von n = 750 Eiern des Braunlegehybrids Lohmann Brown (LB, Lohmann Tierzucht GmbH, Deutschland). Der minimalinvasiven Entnahme von Allantoisflüssigkeit folgte die Untersuchung auf 17β-Östradiol (E2), Östronsulfat (E1S) und Testosteron mittels an das Haushuhn angepassten Enzymimmunoassays (ELISA). Es konnten sowohl für E2 als auch für E1S signifikante (p < 0,01) geschlechtsspezifische Differenzen in der Allantoisflüssigeit von neun und zehn Tage alten Embryonen nachgewiesen werden. Die Testosteronkonzentration hingegen zeigte an keinem der untersuchten Tage geschlechtsabhängige Unterschiede und erwies sich somit für die In-ovo-Geschlechtsbestimmung als ungeeignet. Die statistische Auswertung ergab, dass die Bestimmung von E1S eine frühere und genauere Geschlechtsidentifikation ermöglicht als die von E2. Der für E1S festgelegte Grenzwert erreicht bei neun Tage alten Embryonen eine 86%ige Sensitivität und 83%ige Spezifität. In der zweiten Teilstudie wurde die zuvor etablierte Technik der Geschlechtsbestimmung mittels E1S an 8 + 4 h (n = 2420) und 9 + 4 h (n = 2850) Tage alten Embryonen der Herkunft LB sowie an n = 150 9 + 4 h alten Embryonen des Weißlegehybrids Lohmann Selected Leghorn (LSL, Lohmann Tierzucht GmbH, Deutschland) überprüft. Das Geschlecht der 8 + 4 h Tage alten Embryonen konnte zu 84 % korrekt identifiziert werden. Dieser Wert stieg bei 9 + 4 h Tage alten Embryonen auf 98 % (LB) bzw. 100 % (LSL) an. Im Vergleich zu einer unbehandelten Kontrollgruppe (n = 5258) wurde die Schlupfrate durch die Entnahme von Allantoisflüssigkeit um 1,4 - 3,5 (LB) bzw. 12,7 Prozentpunkte (LSL) reduziert. Nachfolgend wurden 150 Tiere der Versuchsgruppe und 80 Tiere der Kontrollgruppe für eine Aufzuchtperiode von 17 Wochen eingestallt. Hierbei zeigten sich hinsichtlich des Körpergewichtes signifikante (p < 0,05) Unterschiede zwischen Versuchs- und Kontrollgruppe in Woche 4 und 6, wobei die Zunahmen in der Versuchsgruppe geringer waren. Anschließend wurde die Leistung von 120 Tieren der Versuchsgruppe und 60 Tieren der Kontrollgruppe bis Lebenswoche 33 bezüglich Legeleistung, Eigewicht, Körpergewicht sowie Futterverbrauch analysiert. Bei keinem der untersuchten Parameter konnten signifikante Unterschiede zwischen den Gruppen festgestellt werden (p > 0,05). Die Resultate der vorliegenden Arbeit zeigen, dass eine verlässliche Geschlechtsbestimmung in ovo bei 9 + 4 h Tage alten Hühnerembryonen mithilfe einer Bestimmung der E1S-Konzentration in der Allantoisflüssigkeit möglich ist; zudem ist die beschriebene Methode bei verschiedenen Legelinien anwendbar. Die Entnahme von Allantoisflüssigkeit führt zwar zu einer minimalen Reduktion der Schlupfrate, bei adulten Legehennen kommt es jedoch zu keiner Beeinträchtigung der Produktionsleistung. Demnach erfüllt das etablierte Verfahren alle Grundvoraussetzungen für eine Anwendung in kommerziellen Brütereien. Da die Geschlechtsbestimmung vor Einsetzen des embryonalen Schmerzempfindens erfolgt, kann sie somit als Grundlage für eine ethisch vertretbare Alternative zum Töten männlicher Eintagsküken angesehen werden. / In Germany about 40 million day-old male chicks are culled each year predominantly because of economic reasons. From the animal welfare as well as the ethical point of view this is a problematic situation (ANON. 2006, IDEL 2007). Particularly with regard to current political decisions (MUNVL NRW, NI MELV 2014) alternatives to the culling of male day-old chicks are required. Different approaches such as a dual-purpose breed (ICKEN et al. 2013) or the fattening of male layer-hybrids (KAUFMANN and ANDERSSON 2013) are not ubiquitous marketable at present due to economic and ecological reasons. In ovo sexing represents another option; the embryonic gender is determined before hatch and the eggs containing male embryos can be eliminated subsequently. To comply with ethical and animal welfare aspects, the sexing should take place before the onset of embryonic pain perception (embryonic day 10 + 12 h; CLOSE et al. 1997). Aim of this thesis was the development of a reliable method for in ovo gender identification with the help of sex-specific differences in the hormone concentration of the allantoic fluid of seven to ten day old chick embryos. Subsequently, the influence of gender identification on embryonic development, hatching rate, rearing as well as production performance of the adult hens was analysed. Within the first study n = 750 eggs of the brown layer-hybrid Lohmann Brown (LB; Lohmann Tierzucht GmbH, Germany) were sampled for allantoic fluid. After the minimally invasive withdrawal the allantoic fluid was analysed via enzyme immunoassays (ELISA) adapted to domestic chicken for 17β-oestradiol (E2), oestrone sulphate (E1S) and testosterone. With regard to E2 and E1S, significant (P < 0.01) sex-specific differences were observed in the allantoic fluid of nine and ten day old embryos. Testosterone on the other hand displayed no gender-related variances on any of the analysed days. Therefore, it proved to be unsuitable for gender identification using the method applied in this study. Statistical analysis showed that the analysis of E1S allows an earlier and more accurate sexing than the E2-assay. The limit value determined for E1S has a sensitivity of 86 % and a specificity of 83 % for nine day old embryos. The previously established method for gender identification via E1S detection in the allantoic fluid was verified with a larger number of samples in the second study. The allantoic fluid of day 8 + 4 h (n = 2420) and day 9 + 4 h (n = 2850) old LB embryos as well as n = 150 day 9 + 4 h old embryos of the white layer-hybrid Lohmann Selected Leghorn (LSL; Lohmann Tierzucht GmbH, Germany) was analysed. For day 8 + 4 h old embryos the sex was correctly identified in 84 %. The accuracy of gender prediction increased for day 9 + 4 h old embryos up to 98 % (LB) and 100 % (LSL). Compared to an untreated control group (n = 5258) sampling of allantoic fluid reduced the hatching rate by 1.4 - 3.5 (LB) and 12.7 points of percentage (LSL). In the following, 150 animals of the experimental group and 80 animals of the control group were reared for a period of 17 weeks. With regard to the body weight significant differences (P < 0.05) were observed in weeks 4 and 6, with the animals of the experimental group having a lower body weight. Subsequently the production performance of 120 hens from the experimental and 60 hens from the control group was analysed up to an age of 33 weeks. With respect to egg production, egg weight, body weight and feed consumption no significant differences (P > 0.05) were observed between the groups. The results of this thesis demonstrate that a reliable in ovo sexing of day 9 + 4 h old chicken embryos is possible via the measurement of E1S in the allantoic fluid; additionally the method is not limited to a certain layer strain. The sampling of allantoic fluid reduces the hatching rate only marginally. The production performance of adult hens on the other hand is not affected. Therefore, the described technique fulfils all the basic requirements for an alternative method to the culling of day-old male layer chicks. Because gender identification takes place before the onset of embryonic pain perception it can serve as the basis for an ethical alternative to the culling of male day-old chicks from layer-hybrids.

Um experimento foi realizado para avaliar o efeito da suplementação dietética de fontes orgânicas de micro minerais na produção e qualidade interna e externa de galinhas poedeiras. Foram utilizados 8 tratamentos: um tratamento com todos os minerais na forma inorgânica, um tratamento com todos os minerais na forma orgânica e mais 6 tratamentos com apenas um dos minerais na forma orgânica. Os minerais testados foram: zinco, manganês, iodo, selênio, cobre e ferro. As dietas experimentais foram à base de milho e farelo de soja, foram utilizadas 672 aves da linhagem babcock B 300, o período de experimentação foi de 48 a 60 semanas de idade. Foram avaliados os seguintes parâmetros de produção: Consumo de ração, Produção de ovos, Peso de Ovos, Massa de ovos, Conversão Alimentar. Também foram avaliados parâmetros que qualidade do ovo: Gravidade específica, unidade Haugh, porcentagem de casca. Os dados foram analisado em ciclo de postura de 28 dias. Os resultados para a primeira análise de qualidade dos ovos demonstraram uma piora na unidade haugh para o tratamento contendo ferro orgânico (p<0,05) e uma piora na porcentagem de casca para os tratamentos com o zinco e com o cobre orgânico (p<0,05), quando comparado com o tratamento totalmente inorgânico. Para as demais análises não foram observadas diferenças estatísticas. Os resultados para a produção de ovos não foram diferentes para os três períodos, com exceção da massa de ovos que foi menor para o tratamento com o ferro orgânico para o terceiro ciclo de postura (p<0,05). Os resultados do experimento sugerem que a suplementação com minerais orgânicos não alteram a qualidade e a produção de ovos de galinha entre 48 e 60 semanas de idade, quando comparado com a suplementação inorgânica dos mesmos. / A experiment was conducted to study the effect of organic trace mineral sources supplementation on egg production and quality for laying hens. It were used 8 treatments: one treatment with every trace minerals on inorganic form, one treatment with all minerals on organic form and 6 treatments where only one mineral were organic. The trace minerals were: zinc, manganese, iodine, selenium, copper and iron. Corn and soybean meal diets were used. 672 babcock B300 laying hens with 48 week were used. The production parameters analyzed were: Feed intake, egg production, egg weight, egg mass and feed conversion. The parameters of egg quality analyzed were: specific gravity, haugh unit and eggshell percent. Data were summarized for 3 periods of 28 days and analyzed by SAS. The results for first analyzes of egg quality showed a decrease in Haugh unit for the treatment with organic iron (p<0,05) and a decrease on eggshell percent for the chelates zinc and copper (p<0,05), when this results were compared with the inorganic mineral supplementation. For the other parameters weren’t showed statistic differences. The results for egg production weren’t different for the tree periods, except for egg mass that was decrease to organic iron treatment in the last period (p<0,05). The experiment results suggest that the supplementation with organic minerals didn’t improve the egg production and quality for laying between 48 – 60 weeks of age, when its were compared with inorganic mineral supplementation.

A preocupação do consumidor com a origem e a qualidade do produto final é vista com maior atenção, preocupação social e ambiental. Levando em conta esta demanda as informações sobre dietas e metabolismo das aves criadas em sistema orgânico são escassas. Sabendo que a idade da ave influencia no desempenho, qualidade dos ovos e no seu metabolismo. O presente estudo teve o objetivo de avaliar o efeito da idade sobre a qualidade de ovos de poedeiras e avaliar o efeito da enzima fitase sobre o metabolismo de nutrientes em sistema de produção de ovos orgânicos. Foram utilizadas poedeiras semi pesadas com diferentes idades (28, 65 e 110 semanas). Também se avaliou a inclusão da enzima fitase em 4 níveis(0,300, 750 e 1300 FTU/Kg) na dieta das aves. A qualidade externa dos ovos foi prejudicada com o avanço da idade das aves. As aves de 28 semanas produziram ovos mais leves que as aves com 65 e 110 semanas. A qualidade da casca diminui com o avançar da idade. Porém a qualidade interna do ovo não foi alterada com a idade das poedeiras. A inclusão de fitase não causou efeito no metabolismo dos nutrientes. A metabolizabilidade foi diferente entre as idades, as aves com 110 semanas apresentaram melhor eficiência, exceto nos minerais. Foi observado que a inclusão de 300FTU/Kg de fitase em aves com 110 semanas, estimulou um maior consumo de MS, Ca, P e N. O melhor balanço de cálcio foi observado nas aves com 28 semanas, que aproveitam 18% e 34% a mais do que as aves com 65 e 110 semanas. No monitoramento de desempenho as aves com 65 semanas tiveram 19% a mais de massa total de ovos. Observou-se que as aves com 28 semanas tem melhor conversão alimentar por dúzia de ovos do que as aves com 65 e 110 semanas. O peso do ovo foi afetado pela idade das aves, sendo maior em aves com 110 semanas. O consumo de forragem não diferiu entre as idades. A idade de postura afeta a qualidade externa de ovos orgânicos. Em sistema de produção orgânica, a metabolizabilidade dos minerais da dieta foi maior em aves jovens em relação às aves mais velhas, porém o aproveitamento de proteína e energia da dieta aumentou com a idade das aves. / The consumer's concern with the origin and quality of the food is seen with greater attention, social and environmental concern. Taking into account this demand the information on diets and metabolism of birds within the organic system are scarce. It is known that the age of the bird influences the performance, egg quality and metabolism, the present study aimed to evaluate the effect of age on the egg quality of laying hens and to evaluate the effect of the enzyme phytase on the metabolism of nutrients in organic egg production system. Were used laying hens semi heavy with different ages (28, 65 and 110 weeks). The was also evaluated inclusion of the phytase enzyme in 4 inclusion levels (0,300, 750 and 1300 FTU / kg) in the diet of the birds. The external quality of the eggs was impaired with the advancing age of the birds. Birds at 28 weeks had lower egg weight than birds at 65 and 110 weeks. The quality of the bark decreases with the advancing age. However the internal quality of the egg did not change with the age of laying hens. The inclusion of phytase had no effect on nutrient metabolism. The metabolism of nutrients was different between the ages, birds with 110 weeks presented better efficiency, except in minerals. It was observed that the inclusion of 300FTU / kg of phytase in birds with 110 weeks stimulated a higher consumption of DM, Ca, P and N. The best calcium balance was observed in birds at 28 weeks, which used 18% and 34% More than birds at 65 and 110 weeks. In the performance monitoring the birds 65 weeks of age old birds had 19% more total egg mass. Was observed that birds at 28 weeks had better feed conversion per dozen eggs than birds at 65 and 110 weeks. The weight of the egg was affected by the age of the birds, being greater in birds with 110 weeks. Feed intake of forage did not differ between ages. The age of laying affects the external quality of organic eggs. In organic production system, the metabolizability of dietary minerals was higher in young birds compared to older birds, but the protein and energy intake of the diet increased with the age of the birds.

Com o objetivo de desenvolver um novo modelo de ninho mecânico para a coleta de ovos em matrizes de frangos de corte foram realizados dois trabalhos. O primeiro visou adaptar o ninho manual modelo Holandês, cujo formato é bem aceito por matrizes de frangos de corte, a um modelo que permita fazer a coleta mecânica dos ovos. Esta adaptação foi avaliada em dois experimentos no mesmo galpão, das 25 às 35 semanas de idade. No primeiro experimento foram comparadas porcentagem semanal de ovos produzidos (%SOP) e de ovos de cama (%OC), e no segundo experimento, além dessas variáveis, foram observadas as percentagens de ovos trincados (%OT) e de ovos sujos de ninho (%OS). Também no experimento 2, visando reduzir os ovos postos na cama, observados no experimento 1, foi colocada maravalha sobre a forração desenvolvida, do alojamento até 26a semana. A %SOP foi semelhante nos dois tipos de ninhos, tanto no experimento 1 como no experimento 2. Em relação à %OC (experimento 1 e 2), %OS e %OT (experimento 2), o ninho mecânico teve pior desempenho (P<0,05). No experimento 2, a colocação de maravalha no ninho mecânico não contribuiu para a redução da %OC. A transformação do ninho manual em mecânico aumentou significativamente o número de ovos postos na cama, ovos trincados e sujos de ninho, demonstrando uma pior aceitação deste tipo de ninho pelas galinhas. O objetivo do segundo trabalho foi desenvolver um novo modelo de ninho mecânico e comparar seu desempenho com o ninho manual modelo Holandês. Numa granja com dois galpões foram alojados 7800 fêmeas e 800 machos em cada galpão e avaliada a % de ovos produzidos, sujos de ninho, de cama, trincados, eliminados, microtrincas, infertilidade, mortalidade embrionária, contaminação, pintos refugo e eclosão de ambos os tipos de ninho. Não houve diferença estatística na % de ovos produzidos, trincados e sujos de ninho, na maioria das semanas entre os ninhos, contudo na média das 28 semanas o galpão com ninho manual apresentou melhor desempenho. Em relação à % de ovos de cama, o galpão com ninho manual apresentou melhor resultado. Quanto à % de ovos eliminados e às respostas de incubatório, não houve diferença entre os sistemas de coleta. Os trabalhos demonstraram que a presença de maravalha nos ninhos exerce forte influência na sua aceitação e que o ninho mecânico desenvolvido é uma boa alternativa ao ninho manual modelo Holandês, porém precisa ser aperfeiçoado para atingir o mesmo desempenho, principalmente em relação à postura de ovos de cama. / Two experiments were carried out to design a new mechanical nest model for the collection of eggs from broiler breeders. The first one was an adaptation of the hand-operated Dutch nest, to a model that allows for mechanical egg collection. This adaptation was assessed in two experiments conducted in the same poultry house from the 25th to the 35th weeks of life. In the first experiment, the weekly rates of eggs produced (%WEP) and of floor eggs (%FE) were compared, whereas in the second experiment, in addition to these variables, the rates of cracked eggs (%CE) and of nest dirty eggs (%DE) were also assessed. In experiment 2, in order to reduce the number of floor eggs observed in experiment 1, wood shavings were placed on the designed bedding, from the time hens enter the poultry houses to the 26th week. %WEP was similar in both types of nests, in experiment 1 and experiment 2. With regard to %FE (experiment 1 and 2), %DE and %CE (experiment 2), the mechanical nest had the worst performance (P<0.05). In experiment 2, lining the mechanical nest with wood shavings did not contribute to reducing %FE. Changing the hand-operated nest into a mechanical one significantly increased the number of floor eggs, of cracked eggs and of nest dirty eggs, with poorer acceptance of the mechanical nest by the hens. The aim of the second experiment was to design a new mechanical nest model and to compare its performance with that of the hand-operated Dutch nest. A total of 7,800 hens and 800 males were housed in each poultry house, and assessed the percentages of eggs produced, nest dirty, floor, cracked, discarded, microcracks, infertility, embryonic mortality, contamination, stunting syndrome and hatching from both types of nest. No statistical difference was observed in the rate of eggs produced, cracked eggs and nest dirty eggs between the nest models in most of the weeks assessed. However, the average obtained for the 28 weeks shows that the poultry house with the hand-operated nest had a better performance. With respect to the rate of floor eggs, the poultry house with the hand-operated nest yielded better results. There was no difference between the collection system in terms of the rates of discarded eggs and parameters analyzed and the hatch. The experiments have demonstrated that wood shavings in the nest influence strongly breeders acceptance and breeders; also the mechanical nest model developed it’s a good alternative to the conventional model. Nevertheless, it still has to be improved to have the same performance as that of the hand-operated nest.

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Apenas uma pequena proporção do número total de espécies descritas para Pentatomidae possui seus ovos ou ninfas conhecidos (cerca de 3,5%). O gênero Chinavia conta com mais de 80 espécies, das quais apenas nove tiveram seus imaturos descritos previamente. O presente trabalho contemplou a descrição e discussão de diversos aspectos da morfologia externa e da biologia dos estágios imaturos de três espécies ainda não estudadas: Chinavia pengue, Chinavia longicorialis e Chinavia musiva. No estágio imaturo, C. pengue compartilha com outras espécies de Chinavia características diagnósticas em nível genérico. A espécie pode ser identificada, no 1o instar, pela coloração laranja-avermelhada da mancha na cabeça e tórax e pelas manchas abdominais brancas. No 2o ao 5o ínstares, uma característica exclusiva de C. pengue é a coloração laranja-avermelhada das manchas do tórax e das placas abdominais laterais. Vagens de feijão mostraram-se um alimento adequado para a criação da espécie em laboratório; a fase imatura dura cerca de 46 dias. A espécie C. longicorialis também compartilha com as demais espécies neotropicais do gênero várias características morfológicas nos estágios de ovo e ninfa. O reconhecimento específico pode ser feito pela presença de manchas alaranjadas na margem lateral dos segmentos torácicos no 1o instar e pela presença de manchas abdominais brancas divididas pelas pseudo-suturas do abdome a partir do 3o instar. Como já observado em outras espécies de Chinavia e outros gêneros de pentatomídeos, ocorrem formas claras e escuras nos ínstares finais (3o ao 5o). Pelas características do estágio ninfal, sugere-se que a espécie seja próxima a C. abnormis e C. herbida. O estágio imaturo dura, em média, 39 dias; vagens de feijão não constituem um alimento adequado para as ninfas dessa espécie. A espécie C. musiva apresenta características morfológicas únicas em todos os estágios do desenvolvimento; infere-se que o padrão de coloração possivelmente críptico possa estar relacionado ao hábitat da espécie em ninhos de pássaros. Os ovos não se enquadram no padrão identificado para as demais espécies de Chinavia. As ninfas, em todos os ínstares, podem ser facilmente reconhecidas pelo padrão de coloração variegado do abdome e pelas aberturas das segunda e terceira glândulas abdominais em tubérculos. O estágio adulto é alcançado em cerca de 52 dias; para o desenvolvimento da espécie, hospedeiras silvestres parecem ter papel essencial no desenvolvimento. Quando investigados em microscopia eletrônica de varredura, os ovos de C. pengue, C. longicorialis, C. erythrocnemis e C. obstinata confirmaram o padrão já descrito para o gênero; apenas C. musiva apresenta ovos com padrão de esculturação do cório, forma e número de processos aero-micropilares diferentes. O estudo complementar dos ovos de Edessa meditabunda, Euschistus convergens, E. hansi, E. picticornis, Grazia tincta, Loxa deducta, Odmalea basalis, Pallantia macunaima e Thyanta humilis em MEV permitiu identificar caracteres conservados em nível genérico, comparando-se os resultados obtidos com a literatura disponível. Os ovos das espécies de Edessinae compartilham caracteres diagnósticos; as espécies de Pentatominae não apresentam possíveis características compartilhadas em nível de subfamília ou tribo. / Just a small proportion of the total number of described species of Pentatomidae has the eggs or nymphs known (about 3,5%). The genus Chinavia includes more than 80 species, of which only nine have the immatures described. This work describes and discusses several aspects of the external morphology and biology of Chinavia pengue, Chinavia longicorialis and Chinavia musiva immature stages. The immatures of C. pengue share, with other Chinavia species, diagnostic characters at the genus level. The species 1st instar can be identified by the orange-red macula in the head and thorax, and the white abdominal maculae. From 2nd to 5th instars, an exclusive feature of C. pengue is the orange-red maculae in thorax and lateral plates of abdomen. Green bean pods were a suitable food source for the laboratory rearing of this species; the immature stage lasts about 46 days. Eggs and nymphs of C. longicorialis also share morphological characters with other neotropical species of the genus. The species recognition can be made, in the 1st instar, by the orange maculae in the lateral margin of thoracic segments, and from the 3rd instar on, by the white abdominal maculae divided by the pseudosutures. As already observed to other Chinavia species and pentatomid taxa, there are light and dark morphs in the last instars (from 3rd to 5th). The immature stage lasts 39 days on average; green bean pods are an unsuitable food source for the nymphs. Considering nymphal characters, it is suggested that C. longicorialis is related to C. abnormis and C. herbida. On the other hand, C. musiva presents unique morphological features in all life stages; the likely cryptic color pattern is possibly related to the bird nest habitat of this species. The egg do not share the pattern found for other species of Chinavia. The nymphs can be easily recognized by the variegated color pattern of the abdomen, and by the openings of the second and third abdominal glands in tubercles. In this species, the adult stage is reached in about 52 days; wild hosts seem to play a crucial role in nymphal development. When investigated under scanning electron microscopy (SEM), C. pengue, C. longicorialis, C. erythrocnemis and C. obstinata eggs showed the same pattern described for the genus; only C. musiva presents a different pattern of chorion sculpture and aero-micropylar process number and shape. The complementary study of the eggs of Edessa meditabunda, Euschistus convergens, E. hansi, E. picticornis, Grazia tincta, Loxa deducta, Odmalea basalis, Pallantia macunaima and Thyanta humilis in SEM allowed the identification of conserved characters at the genus level, when compared with those available in the literature. Eggs of the Edessinae share diagnostic characters; shared characters at subfamily or tribe level could not be found for the eggs of the Pentatominae.

O presente trabalho objetivou descrever o comportamento da cepa Salmonella Enteritidis (S. Enteritidis) PT4, frente ao tratamento térmico a 60,0º C por três minutos e meio, em ovo integral pasteurizado desidratado reconstituído, interrelacionando a termorresistência com temperatura prévia de incubação e concentração de microrganismos. Foram realizadas 150 análises, das quais 75 foram trabalhadas com cepa previamente incubada à 35ºC e 75 com cepa incubada à 43ºC. Cada um destes grupos foi subdividido em três subgrupos, inoculado-se as concentrações de 10³, 105 e 108 unidades formadoras de colônia (UFC)/mL de caldo BHI. Após inoculação, foi simulada pasteurização do ovo, a 60,0ºC por 3,5 minutos, em banho-maria, e, posteriormente, realizadas contagem em placa (UFC) e Número Mais Provável (NMP), para verificação da concentração de S. Enteritidis sobrevivente. O tempo de redução decimal (valor D) foi de 2,54 e 2,57 minutos para S. Enteritidis previamente incubada à 35ºC e inoculada nas concentrações de 105 e 108 UFC/mL de caldo BHI, respectivamente. Para S. Enteritidis previamente incubada à 43ºC e inoculada nas concentrações de 105 e 108 UFC/mL de caldo BHI, o valor D foi de 2,58 e 2,40 minutos, respectivamente. Não foi possível o cálculo do valor D para a concentração 10³ UFC/mL de caldo BHI, visto que não houve população sobrevivente. Não houve diferença significativa entre os resultados de contagem e NMP, comparando-se as duas temperaturas de incubação, entretanto, os resultados de contagem e NMP das três concentrações inoculadas foram diferentes entre si. Concluiu-se que a cepa pré incubada a 43ºC não apresentou maior resistência ao calor, em relação à cepa incubada a 35ºC; e não houve maior resistência ao calor, comparando-se as diferentes concentrações. / The purpose of this study was to describe the behavior of Salmonella Enteritidis (S. Enteritidis) PT4 undergoing thermal treatment at 60ºC for 3 ½ minutes in reconstituted dried-whole egg, correlating the heat resistance with a previous temperature of incubation and microrganism concentration. 150 analyses were conducted, 75 with S. Enteritidis PT4 previously incubated at 35ºC and 75 with S. Enteritidis PT4 previously incubated at 43ºC. Each of these two groups was subdivided in 3 sub-groups, adding the inoculum at concentrations of 10³, 105, 108 CFU/mL of BHI broth. After the inoculation, pasteurization of the egg was simulated at 60ºC for 3,5 minutes in a water bath. Then colony count and Most Probable Number (MPN) were carried out to check the concentration of surviving S. Enteritidis. The decimal reduction time (D-value) was 2.54 and 2.57 minutes for S. Enteritidis previously incubated at 35ºC and inoculated in the concentration of 105 and 108 CFU/mL of BHI broth, respectively. Concerning the S. Enteritidis previously incubated at 43ºC and inoculated in concentrations of 105 and 108 CFU/mL of BHI broth, the D-value was 2.58 and 2.40 minutes, respectively. It was not possible to calculate the D-Value for the 10³ CFU/mL concentration of BHI broth, because there was no surviving population. There was no significant difference between the results of colony count and MPN, comparing the two incubation temperatures, however the results of colony count and MPN of the three inoculated concentrations were different from each other. It was possible to conclude that the S. Enteritidis PT4 previously incubated at 43ºC hadn´t shown more heat resistance if compared with the S. Enteritidis PT4 incubated at 35ºC; and there wasn’t more heat resistance, comparing the different concentrations.

A membrana corioalantóica (MCA) é uma das membranas extraembrionárias do embrião da galinha, cuja característica principal é ser muito vascularizada e permeável a trocas iônicas e gasosas. O ambiente onde está inserida permite o desenvolvimento de vários modelos experimentais, incluindo estudos de angiogênese, toxicologia e biocompatibilidade, bem como análise do processo de reparo e de carcinogênese de inúmeros tecidos. O objetivo deste trabalho foi verificar as alterações histomorfológicas de fragmentos de gengiva enxertados na MCA, com o intuito de verificar a viabilidade da utilização desse modelo em estudos envolvendo a mucosa oral. Fragmentos de gengiva foram coletados de pacientes submetidos a cirurgia de exodontia e enxertados na MCA de ovos fecundados de galinha após 9 dias de desenvolvimento embrionário. A coleta das gengivas foi feita após 1, 3 e 5 dias de inserção na MCA. As alterações morfológicas microscópicas foram anallisadas no decorrer do tempo no epitélio e na lâmina própria da gengiva e na MCA. Análise de TUNEL foi realizada para se comprovar a presença ou não de apoptose nos tecidos da gengivais. Foram realizadas também análises imuno-histoquímicas e quantificação da expressão de queratinas 10 (K10) e 14 (K14), para verificar as alterações de diferenciação epitelial, e CD34, para mensuração da vascularização. Do total de 25 ovos embrionados utilizados, 10 ovos receberam as gengivas para o experimento; o restante não mostrou viabilidade embrionária e foi descartado. Após 1 dia de inoculação, a interface MCA-gengiva exibiu intenso infiltrado inflamatório, o qual invadiu a lâmina própria. Após 5 dias, essa reação inflamatória ficou restrita à interface MCA-gengiva. As principais modificações morfológicas na gengiva foram observadas nos períodos de 3 e 5 dias de inoculação, em que houve perda da arquitetura do epitélio, mantendo-se somente a camada basal viável, e redução da celularidade na lâmina própria. Observou-se aumento da vascularização no período de 5 dias, atestada pela quantificação de vasos CD34 positivos. O epitélio remanescente exibiu ausência de estratificação e de expressão de K10, intensa marcação de K14 e células TUNEL negativas, sugerindo a presença de células epiteliais viáveis e pouco diferenciadas. Concluiu-se que a gengiva foi incorporada à MCA, com redução paulatina da reação inflamatória e revascularização, bem como manteve-se viável nesse ambiente em um período de 5 dias; contudo, sofreu processos de adaptação que incluíram a perda da estratificação epitelial e a redução da celularidade na lâmina própria. / Chorioallantoic membrane (CAM) is one of the chicken embryo extra embryonic membrane, whose main characteristic is being very vascularized and permeable for ionic and gaseous exchanges. The environment where it is inserted allows the development of many experimental model, including studies about angiogenesis, toxicology and biocompatibility, as well as analysis of the repair process and carcinogenesis of many tissues. The objective of this study was to verify the histomorphological changes of gingival fragments grafted on CAM, with the intent to check the viability of this model in studies involving oral mucosa. Fragments of gingiva were collected from patients undergoing dental extraction and grafted on CAM of fertilized chicken egg after 9 days of embryonic development. The collect of gingiva were made after 1, 3 and 5 days of insertion on CAM. The morphological alterations were analyzed over the time in the epithelium and lamina propria of gingiva and CAM. TUNEL analysis were made to evaluate the presence or not of apoptosis in the gingival tissue. Imunohistochemistry and quantification of the expression of keratin 10 (K10) and 14 (K14) were also made to check any alteration of epithelial differentiation, and CD34, for measurement of vascularization. Total of 25 fertilized egg were used, 10 eggs received gingiva for experiments; remaining egg didn\'t show embrionary viability and were discarded. After 1 day of inoculation, the CAM-gingiva interface exhibited a intense inflammatory infiltrate, which invaded the lamina propria. After 5 days, this inflammatory reaction were restricted to the CAM-gingiva interface. The main morphological changes in the gingiva were observed between 3 to 5 days of inoculation, in which there was loss of epithelial architecture, only the basal layer were viable, and a reduction of cellularity in lamina propria. Were observed a increase of vascularization in period of 5 days, attested by the quantification of positive CD34 vessel. The remaining epithelia showed the absence of stratification and expression of K10, intense marking of K14 and TUNEL cell negative, suggesting the presence of viable epithelial cells and less differentiated. It was concluded that the gingiva was incorporated by CAM, with gradual reduction of inflammatory reaction and revascularization, as well remained viable in this environment in a period of 5 days; however, it underwent processes of adaptation that included the loss of epithelial stratification and the reduction of cellularity in the lamina propria.

Apenas uma pequena proporção do número total de espécies descritas para Pentatomidae possui seus ovos ou ninfas conhecidos (cerca de 3,5%). O gênero Chinavia conta com mais de 80 espécies, das quais apenas nove tiveram seus imaturos descritos previamente. O presente trabalho contemplou a descrição e discussão de diversos aspectos da morfologia externa e da biologia dos estágios imaturos de três espécies ainda não estudadas: Chinavia pengue, Chinavia longicorialis e Chinavia musiva. No estágio imaturo, C. pengue compartilha com outras espécies de Chinavia características diagnósticas em nível genérico. A espécie pode ser identificada, no 1o instar, pela coloração laranja-avermelhada da mancha na cabeça e tórax e pelas manchas abdominais brancas. No 2o ao 5o ínstares, uma característica exclusiva de C. pengue é a coloração laranja-avermelhada das manchas do tórax e das placas abdominais laterais. Vagens de feijão mostraram-se um alimento adequado para a criação da espécie em laboratório; a fase imatura dura cerca de 46 dias. A espécie C. longicorialis também compartilha com as demais espécies neotropicais do gênero várias características morfológicas nos estágios de ovo e ninfa. O reconhecimento específico pode ser feito pela presença de manchas alaranjadas na margem lateral dos segmentos torácicos no 1o instar e pela presença de manchas abdominais brancas divididas pelas pseudo-suturas do abdome a partir do 3o instar. Como já observado em outras espécies de Chinavia e outros gêneros de pentatomídeos, ocorrem formas claras e escuras nos ínstares finais (3o ao 5o). Pelas características do estágio ninfal, sugere-se que a espécie seja próxima a C. abnormis e C. herbida. O estágio imaturo dura, em média, 39 dias; vagens de feijão não constituem um alimento adequado para as ninfas dessa espécie. A espécie C. musiva apresenta características morfológicas únicas em todos os estágios do desenvolvimento; infere-se que o padrão de coloração possivelmente críptico possa estar relacionado ao hábitat da espécie em ninhos de pássaros. Os ovos não se enquadram no padrão identificado para as demais espécies de Chinavia. As ninfas, em todos os ínstares, podem ser facilmente reconhecidas pelo padrão de coloração variegado do abdome e pelas aberturas das segunda e terceira glândulas abdominais em tubérculos. O estágio adulto é alcançado em cerca de 52 dias; para o desenvolvimento da espécie, hospedeiras silvestres parecem ter papel essencial no desenvolvimento. Quando investigados em microscopia eletrônica de varredura, os ovos de C. pengue, C. longicorialis, C. erythrocnemis e C. obstinata confirmaram o padrão já descrito para o gênero; apenas C. musiva apresenta ovos com padrão de esculturação do cório, forma e número de processos aero-micropilares diferentes. O estudo complementar dos ovos de Edessa meditabunda, Euschistus convergens, E. hansi, E. picticornis, Grazia tincta, Loxa deducta, Odmalea basalis, Pallantia macunaima e Thyanta humilis em MEV permitiu identificar caracteres conservados em nível genérico, comparando-se os resultados obtidos com a literatura disponível. Os ovos das espécies de Edessinae compartilham caracteres diagnósticos; as espécies de Pentatominae não apresentam possíveis características compartilhadas em nível de subfamília ou tribo. / Just a small proportion of the total number of described species of Pentatomidae has the eggs or nymphs known (about 3,5%). The genus Chinavia includes more than 80 species, of which only nine have the immatures described. This work describes and discusses several aspects of the external morphology and biology of Chinavia pengue, Chinavia longicorialis and Chinavia musiva immature stages. The immatures of C. pengue share, with other Chinavia species, diagnostic characters at the genus level. The species 1st instar can be identified by the orange-red macula in the head and thorax, and the white abdominal maculae. From 2nd to 5th instars, an exclusive feature of C. pengue is the orange-red maculae in thorax and lateral plates of abdomen. Green bean pods were a suitable food source for the laboratory rearing of this species; the immature stage lasts about 46 days. Eggs and nymphs of C. longicorialis also share morphological characters with other neotropical species of the genus. The species recognition can be made, in the 1st instar, by the orange maculae in the lateral margin of thoracic segments, and from the 3rd instar on, by the white abdominal maculae divided by the pseudosutures. As already observed to other Chinavia species and pentatomid taxa, there are light and dark morphs in the last instars (from 3rd to 5th). The immature stage lasts 39 days on average; green bean pods are an unsuitable food source for the nymphs. Considering nymphal characters, it is suggested that C. longicorialis is related to C. abnormis and C. herbida. On the other hand, C. musiva presents unique morphological features in all life stages; the likely cryptic color pattern is possibly related to the bird nest habitat of this species. The egg do not share the pattern found for other species of Chinavia. The nymphs can be easily recognized by the variegated color pattern of the abdomen, and by the openings of the second and third abdominal glands in tubercles. In this species, the adult stage is reached in about 52 days; wild hosts seem to play a crucial role in nymphal development. When investigated under scanning electron microscopy (SEM), C. pengue, C. longicorialis, C. erythrocnemis and C. obstinata eggs showed the same pattern described for the genus; only C. musiva presents a different pattern of chorion sculpture and aero-micropylar process number and shape. The complementary study of the eggs of Edessa meditabunda, Euschistus convergens, E. hansi, E. picticornis, Grazia tincta, Loxa deducta, Odmalea basalis, Pallantia macunaima and Thyanta humilis in SEM allowed the identification of conserved characters at the genus level, when compared with those available in the literature. Eggs of the Edessinae share diagnostic characters; shared characters at subfamily or tribe level could not be found for the eggs of the Pentatominae.