Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2014. / Made available in DSpace on 2015-05-26T04:04:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 333653.pdf: 1434383 bytes, checksum: 9b83008c5fabddc4e42e0cd1da4f9b67 (MD5) Previous issue date: 2014 / Atualmente, a busca por métodos alternativos no controle de doenças de plantas vem aumentando. Neste contexto, a indução da resistência de plantas surge como uma alternativa amigável ao meio ambiente. Dentre os indutores de resistência, pode-se destacar a ulvana, um heteropolissacarídeo sulfatado extraído das paredes celulares de algas verdes do gênero Ulva spp. Este polissacarídeo tem potencial no controle de vários patógenos em culturas economicamente importantes, tais como macieira e feijão. Assim, o presente trabalho teve por objetivo avaliar a eficiência de ulvanas sulfatadas quimicamente e parcialmente depolimerizadas e estudar os mecanismos bioquímicos de defesa relacionados ao estresse oxidativo no controle de Alternaria brassicicola e Colletotrichum higginsianum em plantas de Arabidopsis thaliana. Para a avaliação do efeito da sulfatação química e da depolimerização parcial da ulvana, plantas de A. thaliana genótipo WT foram pulverizadas com ulvanas com teor de sulfato variando de 18,9 a 36,6%, com 8 frações com diferentes pesos moleculares ou ramnose e inoculadas com A. brassicicola ou C. higginsianum. A severidade das doenças foi quantificada 5 dias após a inoculação. Para a avaliação do estresse oxidativo, plantas dos genótipos WT, AtrbohF e AtrbohD foram tratadas com água (testemunha) ou ulvana (1 mg mL-1) e três dias depois inoculadas com A. brassicicola. A severidade da doença foi quantificada cinco dias após a inoculação. As atividades de peroxidases, NADPH oxidases, catalases, ascorbato peroxidases, glutationa redutases e superóxido dismutases foram determinadas às 6, 12, 24 e 48 horas após a inoculação (h.a.i). A perda de eletrólitos devido a danos na membrana celular foi determinada às 12 h.a.i, enquanto que o crescimento do fungo in planta e o acúmulo de peroxido de hidrogênio foram visualizados 72 h.a.i. A pulverização tanto de ulvana quanto dos seus derivados com diferentes teores de sulfato reduziu a severidade de A. brassicicola e C. higginsianum de forma semelhante. As frações DU1, DU3, DU5 e DU7 reduziram de forma mais eficiente a severidade de A. brassicicola quando comparadas com a ulvana. Por outro lado, as frações com baixo peso molecular DU6 e DU8 falharam em controlar o patógeno. Estes resultados sugerem que a eficiência em induzir respostas de defesa em A. thaliana pode estar mais relacionada com características estruturais do que o grau de polimerização da ulvana. A ramnose, o principal açúcarcomponente da ulvana, reduziu tanto a severidade de A. brassicicola quanto a de C. higgisanum de forma semelhante ao polissacarídeo. Foi possível observar que o tratamento com ulvana reduziu a colonização dos tecidos e, consequentemente, a severidade de A. brassicicola nos genótipos WT e AtrbohF e aumentou a atividade de NADPH oxidase e os níveis de peróxido de hidrogênio. Além disso, o polissacarídeo tendeu a incrementar a atividade de enzimas envolvidas com a remoção de espécies ativas de oxigênio, sugerindo um controle rígido do sistema antioxidante. A ulvana não protegeu o mutante AtrbohD e plantas WT previamente infiltradas com difenileno iodonio, ambas afetadas na atividade de NADPH oxidase e no acúmulo de peroxido de hidrogênio.<br> / Abstract : Nowadays, there is an increasing demand for alternative disease control methods in plants. In this context, the induction of plant resistance arises as an eco-friendly alternative. Among resistance inducers, ulvan, a sulfated heteropolysaccharide extracted from green seaweed belonging to Ulva spp., has potential to control several pathogens in economically important crops such as apple and beans. Thus, the present work aimed to evaluate the efficiency of chemically sulfated and partially depolymerized ulvans and to study the biochemical defense mechanisms related to oxidative stress in the control of Alternaria brassicicola and Colletotrichum higginsianum in Arabidopsis thaliana plants. In order to evaluate the effect of chemical sulfation and partial depolymerization of ulvan, WT A. thaliana plants were sprayed with ulvans (sulfate content varying from 18.9 to 36.6%), eight fractions with different molecular weight or rhamnose and inoculated with A. brassicicola or C. higginsianum. The severity of both diseases was quantified five days after inoculation. In order to evaluate the oxidative stress responses, A. thaliana plants ecotypes WT, AtrbohF and AtrbohD were sprayed with water (control) or ulvan (1 mg mL-1) and inoculated three days later with A. brassicicola. The disease severity was quantified five days after inoculation. The activities of peroxidases, NADPH oxidases, catalases, ascorbate peroxidases, glutathione reductases and superoxide dismutases were determined at 6, 12, 24 and 48 hours after inoculation (h.a.i). Electrolyte loss due to damage in cell membrane was quantified at 12 h.a.i, whereas the colonization of host tissues by the fungus and hydrogen peroxide accumulation were visualized at 72 h.a.i. The spraying of ulvan and its derivatives with different sulfate content reduced the severity of A. brassicicola and C. higginsianum at a similar extent. Fractions DU1, DU3, DU5 and DU7 reduced the disease more efficiently when compared to ulvan. On the other hand, low molecular weight fractions DU6 and DU8 failed to control the pathogen suggesting that the efficiency in inducing resistance in A. thaliana may be related to structural features than chain size itself. On the other hand, the main sugar component of ulvan namely rhamnose reduced the severity of both diseases at a similar extent as the polysaccharide did. It was possible to observe that ulvan reduced the colonization of host tissues and, consequently, the severity of A. brassicicola and increased the activity of NADPH oxidases as well ashydrogen peroxide levels in WT and AtrbohF plants. Ulvan did not protect the AtrbohD mutant and WT plants previously sprayed with diphenyleneiodonium both impaired in NADPH oxidases activity and hydrogen peroxide accumulation.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-09-29T04:06:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 334763.pdf: 1795571 bytes, checksum: fcecc09bb90667e21fac35932b9ce201 (MD5) Previous issue date: 2015 / O abuso de álcool durante a gravidez leva à deficiência intelectual e defeitos morfológicos após o nascimento. O objetivo deste estudo foi demonstrar que o consumo materno crônico de etanol durante os períodos de gestação e lactação provoca a síndrome alcoólica fetal (SAF), associada com alteração na transmissão glutamatérgica, déficit energético e estresse oxidativo no hipocampo da prole. A SAF foi induzida com doses crescentes de etanol (de 2% a 20%) em água potável a partir do 5º dia de gestação até o dia 21 da lactação. O consumo de água e etanol foi mensurado diariamente, bem como a ingestão de ração. A exposição materna ao etanol diminuiu o peso corporal da prole, demonstrando a toxicidade do mesmo aos filhotes. O hipocampo de filhotes de 21 dias de idade foi removido para determinar o influxo de glicose, glutamato e cálcio. Os resultados mostraram que o etanol induziu aumento no influxo de glutamato, diminuindo, consequentemente, a transmissão glutamatérgica e o influxo de cálcio. Além disso, a exposição materna ao etanol afetou o metabolismo energético e do glutamato através da diminuição do influxo de glicose, inibição da glutamina sintetase (GS), indução da lactato desidrogenase (LDH) e aspartato aminotransferase (AST), sem alterar a atividade da alanina aminotransferase (ALT). Também foi investigada a possível indução de estresse oxidativo pela exposição ao etanol através da determinação da concentração de GSH, TBARS e proteína carbonilada (PC), bem como a atividade das seguintes enzimas antioxidantes: glutationa-redutase enzimas (GR), glutationa-peroxidase (GPx), glutationa-S-transferase (GST), catalase (CAT) e ?-glutamil transferase (GGT). Os resultados mostraram que o consumo materno de etanol não altera as concentrações de GSH, TBARS e de PC, bem como não afeta a atividade da GPx e da GST no hipocampo de filhotes de 21 dias de idade. Por outro lado, a atividade de GR foi aumentada, ao passo que as atividades da CAT e da GGT foram inibidas pela exposição ao etanol. Estes resultados demonstram claramente modificações no sistema de defesa antioxidante enzimático associado com abuso de etanol durante a gravidez e lactação. Em conjunto, os resultados demonstram que a exposição materna ao etanol diminui a transmissão glutamatérgica, induz déficit energético e estresse oxidativo em hipocampo de ratos imaturos.<br> / Abstract : Alcohol abuse during pregnancy leads to intellectual disability and morphological defects after birth. The objective of this study was to demonstrate that chronic maternal ethanol consumption during gestational and lactational periods causes fetal alcohol syndrome (FAS), associated with changes in glutamatergic transmission, energy deficit and oxidative stress in the hippocampus of the offspring. The SAF was induced with increasing doses of ethanol (2% to 20%) in drinking water from the 5th day of gestation to lactation day 21. The ethanol and water consumption was measured daily, as well as the feed intake. The toxicity of maternal exposure to ethanol was demonstrated by decreased offspring body weight. The hippocampus of 21-day-old pups was removed to determine the uptake of glucose, glutamate and calcium. The results showed that ethanol induced increase in glutamate uptake, reducing therefore the glutamatergic transmission and calcium influx. Furthermore, maternal exposure to ethanol affected the metabolism of glutamate as demonstrated by decreased glucose uptake, inhibition of glutamine synthetase (GS), induction of lactate dehydrogenase (LDH) and aspartate aminotransferase (AST) activities, without altering the activity of alanine aminotransferase (ALT). We also observed the induction of oxidative stress due to ethanol exposure by measuring the levels of GSH, TBARS and protein carbonyl (PC), as well as the antioxidant activity of the following enzymes: glutathione reductase enzymes (GR), glutathione peroxidase (GPx), glutathione-S-transferase (GST), catalase (CAT) and gamma-glutamyl transferase (GGT). The results showed that maternal exposure to ethanol does not alter the GSH, TBARS and PC levels. Also, etanol exposure does not affect the activity of GPx and GST in the hippocampus of 21-day-old pups. On the other hand, the GR activity was increased, whereas the activities of CAT and GGT were inhibited by maternal ethanol exposure. These results clearly demonstrate that ethanol abuse during pregnancy and lactation might be associated with changes in the enzymatic antioxidant defense system. Taken together, the results demonstrate that maternal exposure to ethanol decreases the glutamatergic transmission, induces oxidative stress and energy deficit in immature rat hippocampus.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2012-07-20T21:00:56Z No. of bitstreams: 1 Karla Kraziela Santana dos Anjos. Efeitos do Dietilditiocarbamato em Trofo.pdf: 3361074 bytes, checksum: e19c34444cdf9505da3479b6a62ee82a (MD5) / Made available in DSpace on 2012-07-20T21:00:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Karla Kraziela Santana dos Anjos. Efeitos do Dietilditiocarbamato em Trofo.pdf: 3361074 bytes, checksum: e19c34444cdf9505da3479b6a62ee82a (MD5) Previous issue date: 2008 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, Bahia, Brasil / O protozoário microaerófilo Giardia lamblia coloniza o trato intestinal de hospedeiros vertebrados, onde é exposto a diferentes concentrações de oxigênio. Apesar do metabolismo fermentativo, trofozoítos de Giardia consomem oxigênio e mecanismos de detoxificação são requeridos. Desprovido de glutationa, Giardia expressa altas concentrações de proteínas ricas em cisteína (CRP, também conhecidas como proteínas variantes de superfície ou VSP), como defesa antioxidante. Este mecanismo envolve ciclagem redox para a manutenção de um ambiente intracelular reduzido e proteção contra o estresse oxidativo. Neste contexto, substâncias que interfiram na resposta antioxidante deste protozoário podem compreender uma poderosa estratégia quimioterápica contra a giardíase. Neste estudo, nós analisamos os efeitos do dietilditiocarbamato (DETC), um inibidor de superóxido dismutase (SOD), na proliferação do parasito, expressão de tióis totais, lipoperoxidação, produção de radicais livres e arquitetura celular. DETC inibiu a proliferação celular em níveis semelhantes ao metronidazol e induziu a peroxidação de membranas neste parasito, possivelmente pelo aumento de espécies reativas. Alterações ultraestruturais também foram observadas neste protozoário. Células tratadas com DETC apresentaram alto grau de extração citoplasmática, além de estruturas indicativas de autofagia. As vesículas periféricas também se encontravam maiores, sugerindo confluência. Estes efeitos são independentes de SOD, já que Giardia não apresenta esta enzima. Detecção de grupos tiol com a sonda fluorescente o-phthaldialdeído (OPA) foram significantemente moduladas negativamente pelo DETC. Estes dados nos indicam que DETC aumenta o estresse oxidativo em trofozoítos de Gardia lamblia pela reação com grupos tiol. / The microaerophilic protozoan Giardia lamblia inhabits the upper small intestine mucosa of vertebrate hosts, where it is exposed to different concentrations of oxygen. Despite the fermentative metabolism, Giardia trophozoites consume O2 and produce oxygen free radicals and therefore mechanism for detoxification are required. Devoid of glutathione, Giardia express high concentrations of cystein-rich proteins (CRP, also known as variable surface protein or VSP), as an antioxidant defense. This mechanism involves redox cycling for maintenance of a reduced intracellular environment and protection from oxidative stress. In this regard, substances that interfere in the antioxidant response of this protozoan could comprise a powerful chemotherapeutic strategy for Giardia lamblia infection. Here, we analyzed the effects of DETC, a superoxide dismutase (SOD) inhibitor, on parasite proliferation, thiol expression, lipid peroxidation, free radicals detection and cell architecture. DETC inhibited parasite proliferation at levels similar to metronidazole and induced peroxidation of membrane, possibly by the increase of reactive species.Ultrastructural alteration were also observed. Since this protozoan is devoid of SOD, here present data indicate SOD-independ DETC effects. Thiol groups detection with the fluorescent probe o-phthaldialdehyde (OPA). Cells treated with DETC displayed washed out cytoplasm and structures indicative of autophagy. The peripheral vesicles also had an increased volume, presumably caused by homophilic fusion. Taken together these data indicate that DETC enhance the oxidative stress in Giardia trophozoites by reacting with thiol groups.

Submitted by Tatiana Silva (tsilva@icict.fiocruz.br) on 2013-02-08T12:56:24Z No. of bitstreams: 1 renata_c_c_c_miranda_ioc_bcm_0028_2010.pdf: 1671883 bytes, checksum: 48fd7f615ea2df9b45686da5870f0202 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-02-08T12:56:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 renata_c_c_c_miranda_ioc_bcm_0028_2010.pdf: 1671883 bytes, checksum: 48fd7f615ea2df9b45686da5870f0202 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz.Instituto Oswaldo Cruz. Rio de janeiro, RJ, Brasil / A sepse e síndrome de disfunção orgânica múltipla representam um problema clínico de alta relevância, principalmente devido a sua grande incidência em pacientes críticos e aos seus altos índices de mortalidade. Apesar de medidas terapêuticas terem sido capazes de diminuir a mortalidade, observamos que muitos sobreviventes a sepse não são capazes de retomar suas atividades usuais. Estudos experimentais em animais são uma ferramenta importante para o estudo da fisiopatologia e da terapêutica da sepse. A encefalopatia associada à sepse (EAS) é muitas vezes a primeira disfunção orgânica a se manifestar. Clinicamente pode se apresentar como sonolência, agitação, delirium e coma. A presença da EAS está associado a maior mortalidade e pior prognóstico. Muitos pacientes apresentam dano cognitivo a médio e longo prazo que pode ser irreversível. Neste trabalho, padronizamos o modelo de injeção de fezes intraperitoneal em camundongos Swiss para facilitar o estudo da EAS. No modelo utilizado podemos caracterizar o choque com queda da pressão arterial 6 e 24h após a indução da sepse, disfunção metabólica caracterizada pelo aumento de lactato, disfunção hepática e renal com aumento de uréia, creatinina, TGO e TGP em 24h. A resposta inflamatória foi caracterizada pelo aumento de citocinas plasmáticas e no líquido peritoneal. IL-6 e MIP-1α aumentaram em 6h e 24h tanto no plasma quanto no líquido peritoneal. IL-1β, citocina de liberação precoce, teve aumento no plasma nas primeiras 6h. Leucócitos totais, mononucleares e neutrófilos diminuíram no plasma nas primeiras 6h com tendência a recuperação em 24h. No líquido peritoneal há um aumento na contagem de leucócitos, mononucleares e neutrófilos mais evidente em 24h. Dano cognitivo foi verificado em animais sobreviventes após 10 dias do insulto da sepse. Observamos aumento no consumo de oxigênio pelo córtex cerebral em 6h e seguido de queda em 24h. Houve aumento na captação de glicose pelo cérebro tanto em 6h e 24h. Aumento no dano oxidativo foi verificado a partir do aumento de TBARS em 6h nas regiões pré frontal, estriado, córtex e cerebelo. Concluímos que o modelo de injeção de fezes intraperitoneal é capaz de reproduzir a sepse clínica nos aspectos inflamatórios e de disfunção orgânica. O modelo também foi capaz de reproduzir a EAS com dano cognitivo, alterações no consumo de oxigênio pela mitocôndria, no metabolismo da glicose e de estresse oxidativo no cérebro. Mudanças no metabolismo energético, associado a aumento no consumo de glicose pelo córtex cerebral, além da resposta inflamatória propiciaram o estresse oxidativo. O conjunto de alterações observadas pode justificar o desenvolvimento de dano cognitivo persistente observado tanto neste modelo quanto na clínica. / Sepsis and multiple organ dysfunction syndrome represent a clinical problem of great importance, mainly due to its high incidence in critical patients and its high mortality. Although therapeutic measures have been able to reduce mortality, many sepsis survivors are not able to regain their usual activities. Experimental trials in animals are an important tool to study the pathophysiology and the treatment of sepsis. The sepsis associated encephalopathy is often the first organ dysfunction to arise. Clinically it may present as drowsiness, agitation, delirium and coma. The presence of sepsis associated encephalopathy is associated with increased mortality and worse prognosis. Many patients persist with cognitive impairment that may be irreversible. In this study, we established a model of abdominal sepsis in mice that facilitates the study of sepsis associated encephalopathy. From this model we detected cognitive impairment on the animals that survived sepsis, and acute changes related to sepsis associated encephalopathy as mitochondrial dysfunction, metabolic changes and oxidative damage. This model is characterized by the drop of blood pressure 6 and 24h after induction of sepsis, increased blood lactate and increased urea, creatinine, AST and ALT at 24 hours. Inflamation was characterized by increased inflammatory cytokines in plasma and peritoneal fluid. IL-6 and MIP-1α increased at 6h and 24h in both plasma and peritoneal fluid. IL-1β, an early release cytokine, was increased in plasma on the first 6h. Total leukocytes, mononuclear cells and neutrophils decreased in plasma during the first 6 hours with a tendency to recovery at 24 hours. Peritoneal fluid leukocytes, mononuclear cells and neutrophils increased markebly at 24h. We observed an increase in oxygen consumption by cerebral cortex in 6 h and then decreased at 24 hours. There was an increase in glucose uptake by the brain in both 6h and 24h. Oxidative damage was assessed by the increase of TBARS in 6h at the pre frontal regions, nucleus striatum, cortex and cerebellum. Cognitive impairment was observed in animals that survived 10 days after the insult of sepsis. We conclude that this model was able to reproduce inflammatory aspects and organ dysfunction observed in sepsis. The model was also able to reproduce sepsis associated encephalopathy and changes in cognitive damage, oxygen consumption, glucose metabolism and oxidative damage. Bioenergetic damage associated with high glucose uptake and inflammatory response leaded to oxidative damage. These acute changes may be responsible for the cognitive damage observed at this model and on clinical practice.

Made available in DSpace on 2016-05-02T13:01:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 102.pdf: 1594636 bytes, checksum: eff81e261fd2e8ff1bc32c8a736449df (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2015 / O carcinoma mamário é uma doença complexa que engloba diversas alterações genéticas e bioquímicas, além de mudanças no microambiente tumoral, tais como o estresse oxidativo,que pode ocasionar danos estruturais em lipídios, proteínas, bem como no DNA nuclear. O presente estudo teve por objetivo caracterizar o perfil oxidativo de neoplasias mamárias,comparando o perfil de expressão de produtos dos processos de peroxidação lipídica, nitração proteica e oxidação de DNA em função de parâmetros histopatológicos com valor prognóstico quanto à evolução clínica do câncer de mama. (...) Contudo, quando o tamanho tumoral foi analisado separadamente entre tumores Triplo-Negativos ou entre os demais subtipos (Luminal A/B eHER2-like), não se observou efeito significativo sobre a expressão de 8-OHdG. Em conclusão, os dados indicam que alguns tumores Triplo-Negativos são mais resistentes a danos oxidativos sobre DNA, independentemente de grau ou tamanho tumoral, o que pode contribuir para o perfil de maior agressividade deste subtipo tumoral. / Breast cancer is a complex disease that involves multiple genetic and biochemical alterationsand changes in the tumor microenvironment, such as oxidative stress, which can lead tostructural damages to lipids, proteins and nuclear DNA. The present work aimed tocharacterize the oxidative profile of mammary tumors, comparing the products of profileexpression of lipid peroxidation processes, protein nitration and DNA oxidation according tohistopathological parameters with prognostic value as to clinical evolution of breast cancer. (...) However, when the tumor size was analyzed separately from Triple-Negativetumors or among the other subtypes (luminal A / B and HER2-like), there was no significanteffect on the expression of 8-OHdG. In conclusion, the data indicate that some triple-negativetumors are more resistant to oxidative damage over the DNA, regardless of tumor grade orsize, which may contribute to the more aggressive subtype of the tumor. (AU)^ien

ALMADA, C. N. Atividades antioxidante e hepatoprotetora da polpa de caju (Anacardium occidentale L.) e ácidos anacárdicos em resposta ao estresse induzido por paracetamol. 2013. 78 f. Dissertação (Mestrado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-11-10T18:14:35Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_cndealmada.pdf: 1447854 bytes, checksum: 3d4e62cc7d30878d95ba956d850f97b6 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-01-20T16:35:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_cndealmada.pdf: 1447854 bytes, checksum: 3d4e62cc7d30878d95ba956d850f97b6 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-20T16:35:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_cndealmada.pdf: 1447854 bytes, checksum: 3d4e62cc7d30878d95ba956d850f97b6 (MD5) Previous issue date: 2013 / Many substances have been tested for their ability to protect against paracetamol toxicity and those that possess antioxidant properties have been the ones of major interest. The cashew tree is a tropical plant known for its biological properties related to its antioxidant potential. This work aims to evaluate the hepatoprotective effect of cashew apple pulp and anacardic acids in response to stress induced by paracetamol. Thus, were determined in the cashew apple pulp the levels of vitamin C, anthocyanins, flavonoids yellow, carotenoids, total polyphenols and total antioxidant activity. The anacardic acids were extracted from cashew nut shell liquid (CNSL) and antioxidant activity was determined by ABTS and DPPH methods. The evaluation of hepatoprotective effect consisted on intragastric feeding (i.g.) of different groups of Swiss mice for 15 consecutive days with cashew apple pulp and anacardic acids. On 15th day of treatment, one hour after the last dose, animals received or not acute dose of paracetamol. Blood samples were collected for dosages of enzyme activities, alanine aminotransferase (ALT), aspartate aminotransferase (AST) and alkaline phosphatase (ALP) in serum. In the liver, lipid peroxidation, non-protein sulfhydryl groups (NP-SH) and the activity of superoxide dismutase (SOD) were evaluated. The phytochemical profile of cashew apple pulp revealed the presence of vitamin C (115.62 ± 2.058 mg/100g), anthocyanins (3.40 ± 0.6777 mg/100 g), yellow flavonoids (10.19 ± 1.3046 mg/100 g), carotenoids (0.71 ± 0.0036 mg/100g) and polyphenols (626.5 ± 3.536 mg/100g). The total antioxidant activity of cashew apple pulp was 14.495 ± 0.2475 µM Trolox/g sample and 6131.909 ± 46.444 g sample/g DPPH and of the anacardic acids was 2113.72 ± 141.8456 µM Trolox/g sample and ± 1073.28 11.7217 g sample/g DPPH. Pretreatment with cashew apple pulp and anacardic acids reduced the activity of the enzymes ALT, AST and ALP in response to stress induced by paracetamol. The cashew apple pulp and anacardic acids reduced lipid peroxidation, inhibited the depletion of NP-SH and SOD activity. The hepatoprotective action of the anacardic acids was more efficient than the cashew apple pulp. / Muitas substâncias vêm sendo testadas quanto à capacidade de proteger contra a toxicidade do paracetamol e aquelas que possuem propriedades antioxidantes têm sido as de maior interesse. O cajueiro é uma planta tropical conhecida pelas propriedades biológicas relacionadas ao seu potencial antioxidante. Esse trabalho tem como objetivo avaliar o efeito hepatoprotetor da polpa de caju e de ácidos anarcádicos em resposta ao estresse induzido por paracetamol. Para tanto, foram determinadas na polpa de caju os teores de vitamina C, antocianinas, flavonoides amarelos, carotenoides, polifenois totais e atividade antioxidante total. Os ácidos anacárdicos foram extraídos do líquido da casca da castanha (LCC) de caju e a atividade antioxidante foi determinada pelos métodos de ABTS e DPPH. A avaliação do efeito hepatoprotetor consistiu na alimentação intragástrica (i.g.) de diferentes grupos de camundongos Swiss por 15 dias consecutivos com polpa de caju e ácidos anacárdicos. No 15º dia de tratamento, uma hora após a última dose, os animais receberam ou não dose aguda de paracetamol. Amostras de sangue foram coletadas para as dosagens das atividades das enzimas, alanina aminotransferase (ALT), aspartato aminotransferase (AST) e fosfatase alcalina (ALP) no soro. No fígado, foram avaliados a peroxidação lipídica, os grupos sulfidrilas não proteicos (NP-SH) e a atividade da superóxido dismutase (SOD). O perfil fitoquímico da polpa de caju revelou a presença de vitamina C (115,62 ± 2,058 mg/100g), antocianinas (3,40 ± 0,6777 mg/100g), flavonoides amarelos (10,19 ± 1,3046 mg/100g), carotenoides (0,71 ± 0,0036 mg/100g) e polifenois (626,5 ± 3,536 mg/100g). A atividade antioxidante total da polpa de caju foi de 14,495 ± 0,2475 µM Trolox/g de amostra e 6.131,909 ± 46,444 g de amostra/g DPPH e dos ácidos anacárdicos foi de 2.113,72 ± 141,8456 µM Trolox/g de amostra e 1.073,28 ± 11,7217 g de amostra/g DPPH. O pré-tratamento com polpa de caju e ácidos anacárdicos reduziu a atividade das enzimas ALT, AST e ALP em resposta ao estresse induzido por paracetamol. A polpa de caju e os ácidos anacárdicos reduziram a peroxidação lipídica, inibiram a depleção de NP-SH e a atividade da SOD. A ação hepatoprotetora dos ácidos anarcádicos foi mais eficiente que a polpa de caju.

LIMA, C. S. Atividade fotoquímica e proteção oxidativa em mudas de cajueiro expostas a seca e luminosidade elevada. 2013. 146 f. Tese (Doutorado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2013. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2014-11-24T23:26:54Z No. of bitstreams: 1 2013_tese_cslima.pdf: 2244556 bytes, checksum: fd3cedfffd8774bb2e958f29d69a07e0 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-01-15T20:36:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_tese_cslima.pdf: 2244556 bytes, checksum: fd3cedfffd8774bb2e958f29d69a07e0 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-15T20:36:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_tese_cslima.pdf: 2244556 bytes, checksum: fd3cedfffd8774bb2e958f29d69a07e0 (MD5) Previous issue date: 2013 / In this study were characterized biochemical and physiological mechanisms arising from photoinhibition that act in the modulation of photochemical activity and oxidative protection, helping to reduce photo oxidative damage in response to drought and high light stresses in cashew plants. The seedlings were obtained from seeds and grown in substrates by mixing sand and vermiculite (ratio 1:1) in plastic bags, with a volume of 2 liters. Drought stress was imposed by withholding the water supply to the plants (± 20 days) in greenhouse conditions. For exposure to light treatments and recovery to the light effect, the plants were placed in a chamber with controlled conditions of relative humidity (60% ±5) and temperature (30°C ±2). The plants subjected to drought stress showed a marked decrease in photosynthesis when exposed to excess light (combination of drought with high luminosity), compared with those irrigated. This higher sensitivity of CO2 fixation to excess light on plants under drought was associated with a higher intensity of damage to the photochemical apparatus, as indicated by measures of effective quantum efficiency and apparent electron transport rate. The data show that the reduction of photosynthetic activity in response to excess light, has been attributed in part to process photoinhibition occurred under these conditions as shown by a drastic reduction in potential maximum quantum efficiency of PSII (given by Fv/Fm ratio). The results also suggest that the intense photoinhibition, triggered by excess light, may have assisted in photoprotection, because under these conditions there was no oxidative damage, as indicated by the absence of changes in H2O2 content and lipid peroxidation (TBARS content). This photochemistry protection, assigned to photoinhibition in this study, is enhanced due to non-occurrence of dissipation of excess energy through non-photochemical quenching (NPQ), because this mechanism did not show significant changes after long periods of exposure to excessive light. However, the energy dissipation through NPQ in response to short time of exposure to excessive light, observed here indicates that when the PSII activity is normal this mechanism is essential to the protection photochemistry. The role of photoinhibition for photo oxidative protection can be attributed to the effect of this process on reducing the activity of PSII and consequent lower photochemical activity, resulting in lower electron transfer. This suggestion is also reiterated in this study based on the reduction of the content of D1 protein, a major component of structural and functional PSII, and plastocyanin (PC), another major carrier of electrons. The modulation these proteins content may have contributed to restrict the formation of ROS and consequent oxidative damage under conditions inducing photo oxidatives stress such as drought associated with high luminosities, in this species. / No presente estudo foram caracterizados mecanismos bioquímicos e fisiológicos decorrentes da fotoinibição e que atuam na modulação da atividade fotoquímica e da proteção oxidativa, auxiliando na redução de danos fotoxidativos, em reposta aos estresses de seca e luminosidade elevada em cajueiro. As mudas foram obtidas a partir de sementes e cultivadas em substrato composto pela mistura de areia e vermiculita (proporção 1:1) em sacos plásticos, com volume de 2 L. O estresse hídrico foi aplicado pela suspenção da rega (±20 dias) em condições de casa de vegetação. Para a exposição aos tratamentos de luminosidade e de recuperação ao efeito da luz, as plantas foram acondicionadas em câmara com condições controladas de umidade relativa (60% ±5) e temperatura (30°C ±2). As plantas submetidas ao estresse hídrico apresentaram uma intensa redução da fotossíntese quando expostas ao excesso de luz (combinação de seca com luminosidade elevada), se comparadas com aquelas irrigadas. Essa maior sensibilidade da fixação de CO2 ao excesso de luz nas plantas sob seca foi relacionada com uma maior intensidade de danos no aparato fotoquímico, conforme indicado pelas medidas de eficiência quântica efetiva e taxa aparente de transporte de elétrons. A redução da atividade fotossintética, em resposta ao excesso de luz, foi atribuída em parte ao processo de fotoinibição ocorrido nessas condições, conforme demonstrado pela drástica redução da eficiência quântica potencial máxima do PSII (dada pela relação Fv/Fm). Os resultados sugerem também que a intensa fotoinibição, desencadeada pelo excesso de luz, pode ter auxiliado na fotoproteção, pois nessas condições não ocorreu danos oxidativos, conforme indicado pela ausência de mudanças no conteúdo de H2O2 e na peroxidação lipídica (conteúdo de TBARS). Essa proteção fotoquímica, atribuída a fotoinibição nesse estudo, é reforçada devido a não ocorrência de dissipação do excesso de energia por meio do quenching não fotoquímico (NPQ), pois esse mecanismo não apresentou mudanças significativas após longos períodos de exposição ao excesso de luz. No entanto, a dissipação de energia por meio do NPQ em respostas a curtos períodos de exposição ao excesso de luz, aqui observado, indica que quando a atividade do PSII está normal esse mecanismo é essencial para a proteção fotoquímica. O papel da fotoinibição para a proteção fotoxidativa pode ser atribuido ao efeito desse processo na redução da atividade dos PSII e consequente menor atividade fotoquímica, o que resultaria na menor transferência de elétrons. Essa sugestão é ainda reinterada no presente estudo com base na redução do conteúdo da proteina D1, um dos principais componentes estrutural e funcional do PSII, e da plastocianina (PC), outro importante carreador de elétrons. A modulação do conteúdo dessas proteínas pode ter contribuído para restringir a formação de EROs e consequente danos oxidativos sob condições indutoras de estresse fotoxidativos, como a seca associada com luminosidades elevadas, nessa espécie.

SOUSA, F. Y. M. Caracterização de dois cultivares de Vigna unguiculata em reposta a seca combinada ou não com ozônio: regulação de proteínas membranares (AOX, pUCP E PTOX). 2012. 120 f. Tese (Doutorado em Bioquímica) - Centro de Ciências, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2012. / Submitted by Francisco Lacerda (lacerda@ufc.br) on 2015-01-23T21:38:14Z No. of bitstreams: 1 2012_tese_fymsousa.pdf: 4401146 bytes, checksum: 69db062aa663a064d5bb540d19463762 (MD5) / Approved for entry into archive by José Jairo Viana de Sousa(jairo@ufc.br) on 2015-02-27T19:28:24Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_tese_fymsousa.pdf: 4401146 bytes, checksum: 69db062aa663a064d5bb540d19463762 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-27T19:28:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_tese_fymsousa.pdf: 4401146 bytes, checksum: 69db062aa663a064d5bb540d19463762 (MD5) Previous issue date: 2012 / Possible interactions between chloroplast and mitochondria remain poorly known, particularly in response to stress conditions. Under these conditions, it is suggested that the electron transfer pathways linked to AOX or pUCP (mitochondrial uncoupling proteins) and PTOX (plastidial uncoupling protein) could limit the formation of ROS to reduce oxidative damage in cellular organelles. In our work, we selected two cultivars of Vigna unguiculata, cv 1183 and cv EPACE. Under our experimental conditions, both cultivars showed no real differences in sensitivity to drought. However cv EPACE was more tolerant to O3 based on the development of necrosis and several physiological parameters (Fv/Fm, ϕPSII) and biochemical (glutathione content). For the expression profiles of genes encoding AOX, PUCP and PTOX two responses were clearly identified in the cultivar EPACE. On a shortterm, expression of these proteins is generally stimulated. On a longer term (14 days), the answer differs depending on the treatment. Under O3, the strongest expression of mitochondrial proteins is maintained while the gene encoding the PTOX is own-regulated. Under drought only the plastid protein (PTOX) is upregulated. Under conditions of stress combination, drought has little effect on the influx of O3 in the leaves, and the VuPTOX and VuUCP1b genes are up-regulated after 3 and 7 days of stress. This ver-regulation, already observed in response to drought alone could play a role in preventing the formation of ROS in both mitochondria and chloroplasts. / A Fotossíntese e a respiração são bem conhecidos como sendo responsáveis pela produção de energia no interior das células de plantas. Acoplados à estes processos bioenergéticos, a transferência de elétrons que ocorre nas membranas do cloroplasto e mitocôndria, também são considerados com tendo potencial de produção de ROS. Possíveis interações no funcionamento dessas organelas permanecem pouco conhecidas, especialmente em resposta a condições de estresse. Sob estas condições, sugere-se que as vias de transferência de elétrons ligadas à AOX, à pUCP ou à PTOX poderia limitar a formação de ROS reduzindo assim danos oxidativos às organelas celulares. Em nosso trabalho, foram selecionadas duas cultivares de Vigna unguiculata, inicialmente caracterizados como sensível (cv 1183) ou tolerante (cv EPACE1) à seca. Sob condições experimentais, as duas cultivares não apresentaram diferenças significativas na sensibilidade à seca. Entretanto o cultivar EAPCE1 foi mais tolerante ao ozônio com base no desenvolvimento de necrose e de vários parâmetros fisiológicos (ϕPSII) e bioquímicos (teor de glutationa). Para os perfis de expressão de genes que codificam AOX, PUCP e PTOX duas respostas foram claramente identificadas no cultivar EPACE1. Em um tempo curto, a expressão destas proteínas é geralmente estimulada. Em um período mais longo (14 dias), a resposta é diferente, dependendo da tipo de estresse. Sob o ozônio, um aumento da expressão das proteínas mitocondriais é mantida enquanto o gene que codifica para a PTOX é sub-regulada. Sob seca a proteína desacopladora do plastídio (PTOX) é superexpressa. Sob condições de combinação stress, seca combinada com ozônio, o efeito da seca sobre o fluxo de ozônio nas folhas não foi alterado, e os genes VuPTOX e VuUCP1b são super-expressos depois de 3 e 7 dias de stress. Este aumento da expressão, já observado em resposta à seca por aplicada separadamente poderia desempenhar um papel na prevenção da formação de ROS tanto em mitocôndrias e cloroplastos prevenindo assim os danos causados pelo ozônio.

MARINHO FILHO, José Delano Barreto. Contribuição das espécies reativas de oxigênio na atividade anti-leucêmica da cordiaquinona J. 2009. 110 f. Dissertação (Mestrado em Farmacologia) - Universidade Federal do ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2009. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2012-04-11T15:48:27Z No. of bitstreams: 1 2009_disjdbmfilho.pdf: 6698247 bytes, checksum: 498178884054e9fdc1e85785288c6b4f (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-04-11T16:12:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2009_disjdbmfilho.pdf: 6698247 bytes, checksum: 498178884054e9fdc1e85785288c6b4f (MD5) / Made available in DSpace on 2012-04-11T16:12:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009_disjdbmfilho.pdf: 6698247 bytes, checksum: 498178884054e9fdc1e85785288c6b4f (MD5) Previous issue date: 2009 / Cordiaquinone J is a 1,4-naphthoquinone isolated from the roots of C. leucocephala, with antifungal and larvicidal activities. Nonetheless the cytotoxic effects of cordiaquinone J have never being explored. In the present study, it was investigated the effect of cordiaquinone J on tumor cells viability, showing IC50 values in the range of 2.7 to 6.6 μM in HL-60 and SF-295, respectively. Studies performed in HL-60 leukemia cells indicated that cordiaquinone J (1.5 and 3 μM) reduced cell viability and BrdU incorporation after 24 hours of incubation. Cordiaquinone J showed rapid induction of apoptosis, as indicated by phosphatidylserine externalization, caspase activation, DNA fragmentation and morphologic changes and, rapid induction of necrosis, as indicated by the loss of membrane integrity and morphologic changes. Cordiaquinone J altered the redox potential of tumor cells by inducing generation of reactive oxygen species (ROS) and loss of mitochondrial membrane potential as initial events. The pretreatment of the cells with N-acetyl-L-cysteine (NAC) abolished most of the observed effects related to cordiaquinone J treatment, including those related to apoptosis and necrosis induction. Thus, present results highlight the antitumor potential of cordiaquinona J. / Cordiaquinona J é uma 1,4-naftoquinona isolada das raízes de Cordia leucocephala, que apresenta atividade antifúngica e larvicida. No entanto, não há relatos quanto a sua atividade citotóxica. No presente estudo, foi investigado os efeitos citotóxicos da cordiaquinona J sobre a viabilidade de células tumorais, cujo valores de CI50 variaram de 2,7 a 6,6 μM em células de HL-60 e SF-295 respectivamente. Estudos realizados em células leucêmicas de HL-60 indicaram que a cordiaquinona J (1,5 e 3,0 μM) reduziu a viabilidade celular e a incorporação do BrdU após 24 horas de incubação. Além disso, a cordiaquinona J mostrou rápida indução de apoptose, como indicado pela externalização da fosfatidilserina, ativação de caspases, fragmentação do DNA e mudanças morfológicas, além de uma rápida indução de necrose, como indicado pela perda da integridade de membrana e mudanças morfológicas. Cordiaquinona J altera o potencial redox de células tumorais por induzir geração de espécies reativas de oxigênio e perda do potencial da membrana mitocondrial como eventos iniciais. Além disso, o pré-tratamento das células com N-acetil-L-cisteína (NAC) aboliu a maioria dos efeitos observados relacionados ao tratamento com a cordiaquinona J, incluindo os efeitos relacionados a indução de apoptose e de necrose, sugerindo que a citotoxidade dessa molécula está relacionada a geração de EROs. Assim, o presente estudo ressalta o potencial antitumoral da Cordiaquinona J.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2017. / Made available in DSpace on 2017-12-05T03:13:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 349068.pdf: 966394 bytes, checksum: 34f5ea315d357af9e33e783ed502c434 (MD5) Previous issue date: 2017 / Agrotóxicos ou pesticidas são produtos químicos utilizados na prática agrícola em todo o mundo, embora representem um risco potencial aos agricultores e ao ambiente. Os efeitos da exposição crônica aos agrotóxicos podem levar ao desenvolvimento de diversas doenças, incluindo diferentes tipos de câncer, já que se observam a capacidade genotóxica e mutagênica dessas substâncias. O presente estudo objetiva investigar a relação entre a exposição ocupacional aos pesticidas e a presença de danos ao DNA e de estresse oxidativo. Foram avaliadas amostras de sangue periférico de 50 agricultores com exposição ocupacional a agrotóxicos, residentes no município de Antônio Carlos (SC), além de 46 controles residentes na mesma localidade, mas sem exposição, e 29 controles residentes no município de Florianópolis (SC). Para avaliação de danos genéticos foram realizados o ensaio Cometa e a técnica de Micronúcleos com Bloqueio da Citocinese Celular (CBMN). O estresse oxidativo foi avaliado pela dosagem de substâncias reativas ao ácido tiobarbitúrico (TBARS) e pela atividade da Catalase (CAT). Além desses testes, foram avaliadas as atividades da acetilcolinesterase (AChE) e da butirilcolinesterase (BChE) dos grupos exposto e controle residente em Antônio Carlos. Diferenças significativas foram encontradas nos danos ao DNA entre os trabalhadores expostos a agrotóxicos e controles. O ensaio Cometa realizado em linfócitos do sangue periférico apresentou índice de dano ao DNA significativamente maior no grupo exposto quando comparado aos grupos controles (p < 0,0001). Também foram significativamente maiores as frequências de Micronúcleos (p < 0,001), Buds (p < 0,005) e Pontes Nucleoplasmáticas (p < 0,0001) nos indivíduos expostos. Os valores de TBARS foram significativamente maiores para o grupo exposto quando comparados com o grupo controle morador de Florianópolis (p < 0,0001). A CAT não apresentou variação significativa entre os grupos. O sexo feminino parece mais suscetível aos efeitos deletérios dos pesticidas, assim como os indivíduos com idade mais avançada. Fatores como o tempo de exposição a pesticidas, o uso de EPI, tabagismo e etilismo não apresentaram influência significativa sobre os resultados. Assim, conclui-se que os indivíduos expostos, participantes deste estudo, estão mais sujeitos a sofrer danos genéticos e, consequentemente, mais susceptíveis a doenças decorrentes desses danos. A evidência de risco genético relacionado à exposição resultante do uso de pesticidas na população avaliada enfatiza a necessidade de programas educacionais para trabalhadores agrícolas para reduzir o uso de produtos químicos na agricultura. / Abstract : Pesticides are products used in agricultural practice around the world, despite of its potential risk to farmers and the environment. The effects of chronic exposure to pesticides can lead to the development of several diseases, including different types of cancer, since the genotoxic and mutagenic capacity of these substances can be observed. The objective of this study is to investigate the relation between the occupational exposure to various pesticides and the presence of DNA damage and oxidative stress. Blood samples from 50 rural workers exposed to pesticides, living in Antônio Carlos city (SC), 46 controls from the same city and 29 controls from the city of Florianopolis (SC) were evaluated using the Comet Assay and the Cytokinesis-block Micronucleus Technique (CBMN) for genetic damage, and the test of thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) and Catalase (CAT) activity for the oxidative stress. Significant differences were found in DNA damage among exposed workers and controls. The Comet Assay performed on peripheral blood lymphocytes of these individuals had a significantly higher DNA damage index in the exposed group comparing to controls (p < 0,0001). Micronucleus (p < 0,001), Buds (p < 0,005) and Nucleoplasmic Bridges (p < 0,0001) were also found to be significantly higher in the exposed group. The TBARS values were significantly higher comparing to the Florianopolis control group (p < 0,0001). Even though CAT values were higher than controls, there was no statistical difference. The women seem to be more susceptible to these deleterious effects, as well as the older individuals. Factors such as exposure extension to pesticides, the use of individual protection equipment, smoking and alcoholism did not have a significant influence on the results. Thus, it is concluded that the exposed individuals, participants of this study, are more subject to suffer genetic damage and, consequently, more susceptible to diseases resulting from such damages. Evidence of DNA damage related to the exposure to pesticides in the population evaluated emphasizes the need for an educational system for agricultural workers in order to reduce the use of chemicals in agriculture.