Thesis (M.S.)--University of Southern California, 1999. / eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

Thesis (M.S.)--University of Southern California, 1999. / Includes bibliographical references.

Thesis (Ph. D.)--University of Nebraska Medical Center, 1999. / eContent provider-neutral record in process. Description based on print version record. Includes bibliographical references.

Magister Chirurgiae Dentium - MChD / This mini-thesis assessed whether a diode laser with a wavelength of 810 ± 10nm can be utilized as an adjunct to conventional management (i.e. scaling, root planing and polishing) of chronic periodontitis during initial phase therapy. Ethical approval and study registration (Reg no: 14/9/6) was finalized prior to commencement of the study. A split mouth randomised control trial was performed on 25 participants (who presented at the Oral Medicine and Periodontology Department of the University of the Western Cape) diagnosed with active, chronic periodontitis. In order to standardise the split mouth design the quadrants 1 & 4 were assessed together as a set and quadrants 2 & 3 were assessed as a set. A set of these quadrants were randomly assigned to either the test or control quadrants after conventional management was performed in all four quadrants. The base line bacterial colony collection (Micro-IDent®-11, Hain Lifescience GmbH, Nehren, Germany) and the clinical parameters were assessed prior to the commencement of conventional management and were reassessed at the 6 week re-evaluation visit. The set of test quadrants were treated with the diode laser as an adjunct to the preceding conventional management. The control quadrant only received the conventional management. Evaluation of the results demonstrated that the diode laser produced no statistical decrease in the bacterial parameters in the periodontal pockets and resulted in a statistical increase of C. showae (Cs) and T. denticola (Td). The clinical parameters resulted in no statistical difference for any clinical parameter, with the exception of the reduction in BOP that was statistically significant (p< 0,05) with the laser as an adjunct. It is the recommendation that within the limitations of this study, that the utilization of the diode laser (810 ± 10nm) as an adjunct at the initial visit had no statistical effect in the reduction of the bacterial parameters nor resulted in an overall improvement of the clinical parameters.

Tesis presentada para optar al Grado de Doctor en Farmacología / La periodontitis es una enfermedad infecciosa con un componente inflamatorio crónico que se produce como resultado del desbalance entre los microorganismos que conforman la biopelícula subgingival y la respuesta inmune del hospedero. La colonización de microorganismos patógenos y la respuesta inmunológica desencadenada que conducen a la destrucción de los tejidos de inserción de los dientes, como son el hueso alveolar, el ligamento periodontal y el cemento radicular, resultan finalmente en la pérdida de dientes. La presencia de bacterias anaerobias Gram-negativo específicas en la biopelícula subgingival es relevante en la etiología y progresión de la periodontitis. Dentro de ellas Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis) es considerada un patógeno “clave” en el inicio de la enfermedad periodontal. A pesar de presentarse en una baja abundancia en sitios enfermos comparado con la microbiota oral total, esta bacteria es capaz de inducir cambios en el microbioma oral y causar disbiosis, conduciendo al desarrollo de la periodontitis. P. gingivalis además, es la bacteria más frecuentemente aislada en pacientes con periodontitis crónica (P. crónica) y ha sido relacionada con la progresión de esta enfermedad. No obstante, no está claro por qué su presencia en individuos sanos no se asocia con la enfermedad y los mecanismos que utiliza para el desarrollo y/o progresión de la periodontitis tampoco han sido totalmente dilucidados. Entre los factores de virulencia de P. gingivalis, el LPS destaca por su variabilidad estructural la cual le otorga la capacidad de dirigir e incluso evadir la respuesta inmunológica del hospedero, así como la actividad antimicrobiana de los péptidos endógenos, como es el caso de las defensinas (hBDs). P. gingivalis es capaz de reducir su interacción electrostática con péptidos catiónicos como Polimixina B (PMB), incrementando su resistencia por una de-fosforilación mediada por una fosfatasa en la posición 4´ del lípido A (gen PGN_0524). Junto con modificar su lípido A, P. gingivalis sintetiza dos tipos de LPS (A-LPS y O-LPS) que difieren en la región del Antígeno O polimérico (APS y AgO, respectivamente). Varios estudios sugieren que el lípido A es relevante en la resistencia a PMB, sin embargo su relación con la resistencia a otros péptidos catiónicos presentes en la cavidad oral (hBDs) no ha sido estudiada, así como tampoco se conoce el rol que pudieran tener otras estructuras del LPS, como el APS y AgO en dicha resistencia. Por lo anteriormente expuesto, en el presente trabajo se propuso determinar la susceptibilidad de aislados clínicos de P. gingivalis, provenientes de individuos clínicamente diagnosticados con periodontitis crónica (P. crónica) e individuos periodontalmente sanos, en presencia de PMB y evaluar la participación de la fosfatasa 4´ del lípido A de P. gingivalis en la resistencia a PMB y las hBDs-1 a -4. Además, se evaluó el rol de otras regiones del LPS como el AgO y/o APS en la resistencia a péptidos catiónicos, utilizando como modelo la PMB. Nuestros resultados muestran que aislados de P. gingivalis de pacientes con P. crónica presentan mayor resistencia a PMB respecto a aquellos obtenidos de individuos sanos. Además, aislados de individuos sanos son significativamente menos susceptibles a PMB respecto de la cepa de referencia ATCC 33277. Si bien una mutante que carece del gen de la fosfatasa en la posición 4´ del lípido A es totalmente susceptible a PMB, la presencia de este gen en los aislados no se correlaciona con la resistencia diferencial observada, ya que todos los aislados presentaban el gen. Más aún, en el análisis estructural del lípido A de los aislados se demostró la presencia de estructuras fosforiladas en la posición 4´, tanto en aislados susceptibles como resistentes a PMB, indicando que la composición del lípido A de P. gingivalis no es el único factor determinante en la resistencia de los aislados clínicos a PMB, y muy probablemente frente a otros péptidos catiónicos, puesto que la mutante fue capaz de crecer incluso a las concentraciones más altas de las hBDs-1 a -4. Aislados de individuos sanos carecen de moléculas de AgO de alto peso molecular y APS, sugiriendo que P. gingivalis presente en individuos periodontalmente sanos no produce A-LPS o lo pierde. Finalmente, aislados de pacientes con P. crónica carecen de moléculas de APS de bajo peso molecular, sugiriendo que moléculas de AgO y APS de alto peso molecular son relevantes en la resistencia diferencial de P. gingivalis a los péptidos catiónicos PMB y hBDs-1 a -4. / Periodontitis is an infectious disease with a chronic inflammatory component that occurs as result from imbalance between microorganisms forming biofilm and subgingival host immune response. Pathogenic microorganisms colonization and the immune response elicited lead to destruction of teeth insertion tissue such as: alveolar bone, periodontal ligament and cementum, finally resulting in tooth loss. The presence of specific Gram-negative anaerobic bacteria in subgingival biofilm is relevant for the etiology and progression of periodontitis. Among them, Porphyromonas gingivalis (P. gingivalis) is a "key" pathogen for the onset of periodontal disease. Although present in diseased sites in low abundance compared to the total oral microbiota, this bacterium is able to induce changes in the oral microbiome and cause dysbiosis, leading to development of periodontitis. P. gingivalis is the bacteria most frequently isolated in patients with chronic periodontitis and has been linked to progression of disease. However, it is unclear how their presence in healthy individuals is not associated with disease and the mechanisms for the development and/or progression of periodontitis have not been completely understood. Among P. gingivalis virulence factors the LPS noted for its structural changes conferring the ability to orchestrate and subvert the host immune response, and to resist endogenous peptides antimicrobial activity, such as defensins (hBDs). P. gingivalis reduces its electrostatic interaction with cationic peptides as Polymyxin B (PMB) and increases resistance by phosphatase lipid A 4´dephosphorylation (PGN_0524 gene). Besides modify their lipid A, P. gingivalis synthesizes two different types of LPS (A-LPS and O-LPS) differing at region of polymeric O antigen (OAg and APS, respectively). Several studies suggest that relevance for lipid A in PMB resistance, but its relationship with other cationic peptides resistance, relevant in the oral cavity (hBDs) has not been studied, and the possible role for the other known structures in LPS, such as APS and OAg in resistance. By the above, the present work proposed to determine the susceptibility of P. gingivalis clinical isolates, from chronic periodontitis (P. chronic) patients and periodontally healthy individuals to PMB and evaluate participation of lipid A 4' phosphatase in resistance to PMB and hBDs-1 to -4. In addition, the role of other regions of LPS as OAg and/or APS in resistance to cationic peptides was evaluated using as a model the PMB. Our results showed that isolates of P. gingivalis from P. chronic patients are more resistant to PMB respect from healthy individuals. Furthermore, healthy isolates are less resistant to PMB respect to the reference strain ATCC 33277. While, a mutant lacking phosphatase gene in the lipid A 4' position is totally susceptible to PMB, the presence of this gene in isolates does not correlate with the differential resistant observed since all isolates had the gene. Moreover, the lipid A structural analysis of the isolates shown 4' phosphorylated structures in both, susceptible and resistant PMB isolates, suggesting that P. gingivalis lipid A composition is not the only determining factor in clinical isolates PMB resistance, and probably to other cationic peptides, since the mutant was able to grow even to highest hBDs-1 to -4 concentrations. In healthy subject isolates lacked high molecular weight OAg and APS molecules, suggesting that P. gingivalis in healthy individuals do not produce or lose A-LPS. Finally, P. chronic isolates lacked APS molecules, suggesting that OAg and APS molecules are relevant in P. gingivalis resistance to cationic peptides PMB and hBDs -1 to -4 / Fondecyt

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published_or_final_version / abstract / Dentistry / Master / Master of Dental Surgery

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Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto completo de su documento / Introducción: La periodontitis crónica es una infección de naturaleza episódica y sitio específica, en donde distintos modelos de progresión en la pérdida de inserción se han descrito para explicar la ocurrencia de la enfermedad. La importancia de determinar el momento exacto en que la destrucción ocurre e identificar los componentes asociados con la progresión, es sin duda la meta de muchos investigadores. El objetivo de este estudio es identificar y cuantificar Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis y Tannerella forsythia en pacientes con actividad en la pérdida de inserción (sitios activos e inactivos) en periodontitis crónica. Material y métodos: Fueron seleccionados 37 pacientes con periodontitis crónica progresiva. La progresión de la periodontitis fue determinada mediante el método de la tolerancia. Los pacientes fueron monitoreados a intervalos de 2 meses hasta que al menos 2 sitios exhibieran ≥ 2mm de pérdida de inserción. En aquellos sitios que demostraban progresión se tomó una muestra microbiológica con cono de papel (sitio activo). Se seleccionó como control un sitio con las mismas características clínicas que las que presenta el sitio activo, pero que no evidencia pérdida de inserción en los meses de seguimiento (sitio inactivo). Mediante cultivo y PCR, se determinaron los niveles y presencia de A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis y T. forsythia respectivamente, en sitios activos e inactivos de cada sujeto. El análisis estadístico fue realizado usando el programa computacional STATA versión 10. Resultados: No hubo diferencias significativas en la distribución de presencia entre sitios activos y controles para ninguno de estos tres patógenos (p  0.05). Sin embargo, la frecuencia de P. gingivalis en asociación principalmente con T. forsythia, aumenta en sitios activos en comparación con sitios inactivos (p  0.05), en donde predomina P. gingivalis sola. Por otro lado, altos niveles de P. gingivalis fueron encontrados en sitios activos (p  0.05) versus sitios inactivos. La diferencia en los niveles de T. forsythia y A. actinomycetemcomitans entre sitios activos e inactivos no fue significativa (p  0.05). Conclusiones: La detección de estas bacterias periodontopatógenas en sitios activos e inactivos y sus distintas asociaciones, podrían contribuir a explicar parcialmente el mecanismo mediante el cual se produce la destrucción tisular.

La osteoporosis es una de las enfermedades crónicas más prevalentes en la edad adulta, siendo responsable de una alta tasa de morbilidad y mortalidad. La aparición de la osteoporosis en mujeres posmenopáusicas debido principalmente a la disminución de los niveles séricos de estrógeno ha sido propuesta como un factor de riesgo de la enfermedad periodontal, sin embargo, la relación entre estas dos enfermedades no está del todo clara. El objetivo del presente estudio fue el de comparar el grado de periodontitis entre mujeres posmenopáusicas con osteoporosis y mujeres posmenopáusicas sin osteoporosis que acudieron al Servicio de Reumatología del Hospital Nacional Edgardo Rebagliati Martins durante diciembre del año 2003. La población estudiada incluyó 40 mujeres posmenopáusicas con osteoporosis y 40 mujeres posmenopáusicas sin osteoporosis, con edades entre los 50 y 55 años (edad promedio: grupo con osteoporosis: 52.40 ± 1.22 años, grupo sin osteoporosis: 52.25 ± 1.13 años). La condición de osteoporosis fue determinada por la medición de la Densidad Mineral Ósea (DMO) mediante Absorciometría de Energía Dual de Rayos X (DEXA) en la región de la columna lumbar. La severidad de la periodontitis fue representada por el Índice de Enfermedad Periodontal de Ramfjord (PDI) y la Pérdida de Adherencia Clínica (PAC). Otras mediciones periodontales incluyeron la cuantificación de placa y cálculo expresados a través del Índice de Higiene Oral Simplificado de Green y Vermillon (IHO-S). Los exámenes periodontales y de DEXA fueron realizados por examinadores calibrados. Se utilizó la prueba t-student para comprobar la relación entre el grado de periodontitis y la osteoporosis. El presente estudio encontró una diferencia estadísticamente significativa del índice de enfermedad periodontal entre mujeres posmenopáusicas con y sin osteoporosis (p<0.05). De otro lado, al caracterizar la asociación entre el índice de enfermedad periodontal y la pérdida de adherencia clínica con los niveles clínicos de higiene oral para ambos grupos de mujeres, se encontraron diferencias estadísticamente significativas en el grupo de mujeres posmenopáusicas con osteoporosis (p<0.05), a diferencia del grupo de mujeres posmenopáusicas sin osteoporosis (p>0.05). Estos hallazgos sugieren que existe una relación directa entre la osteoporosis y la gravedad de la periodontitis en mujeres posmenopáusicas, es decir que la condición de osteoporosis en este grupo de mujeres está asociada a un mayor grado de severidad de la periodontitis, luego de haber controlado factores como la edad, edad posmenopáusica, raza e higiene oral. Así mismo, en presencia de niveles clínicos deficientes de higiene oral, las mujeres posmenopáusicas con osteoporosis presentan significativamente un mayor grado de periodontitis en comparación con aquellas con mejores niveles clínicos de higiene oral. Palabras clave: Densidad mineral ósea, pérdida de adherencia clínica, índice de enfermedad periodontal, índice de higiene oral simplificado, osteoporosis, posmenopausia, periodontitis, enfermedad periodontal. / Osteoporosis is one of the more prevalent chronic disease in the adult age, being responsible for a high rate of morbility and mortality. The appearing of the osteoporosis in postmenopausal women owed mainly to the diminution of blood estrogen levels has been propose like a risk factor of the periodontal disease, however, the relation between these two diseases is not absolutely clear. The objective of the present study was to compare the degree of periodontitis between postmenopausal women with osteoporosis and postmenopausal women without osteoporosis who went to the Service of Rheumatology of the Edgardo Rebagliati Martins National Hospital during December 2003. The studied population included 40 postmenopausal women with osteoporosis and 40 postmenopausal women without osteoporosis, with ages between 50 and 55 years old (average age: group with osteoporosis: 52.40 ± 1,22 years old, group without osteoporosis: 52.25 ± 1,13 years old). The condition of osteoporosis was determined by the measurement of the Bone Mineral Density (DMO) by means of Dual Energy X Ray Absorciometry (DEXA) in the region of the lumbar column. The severity of the periodontitis was represented by the Ramfjord´s Periodontal Disease Index (PDI) and the Loss of Clinical Attachment (PAC). Other periodontal measurements included the quantification of plaque and tartar through the Green and Vermillion’s Oral Hygiene Simplified Index (IHO-S). Periodontal and DEXA examinations were made by calibrated examiners. The t-student test was used to verify the relation between the degree of periodontitis and the osteoporosis. The present study found a statistically significant difference of the Index of Periodontal Disease between postmenopausal women with and without osteoporosis (p<0.05). In addition, when the association between the Index of Periodontal Disease and the Loss of Clinical Attachment with Clinical Levels of Oral Hygiene for both groups of women was assessed, statistically significant differences were found in the group of postmenopausal women with osteoporosis (p<0.05), but no differences were found in the group of postmenopausal women without osteoporosis (p>0.05). These findings suggest that exists a direct relation between the osteoporosis and the severity of the periodontitis in postmenopausal women, it means that the condition of osteoporosis in this group of women is associated to a higher degree of periodontitis, after the control of factors like age, postmenopausal age, race and oral hygiene. Additionally, in presence of deficient clinical levels of oral hygiene, postmenopausal women with osteoporosis present a higher degree of periodontitis in comparison with those with better clinical levels of oral hygiene. Key words: Bone mineral density, loss of clinical attachment, index of periodontal disease, simplified index of oral hygiene, osteoporosis, postmenopausal, periodontitis, periodontal disease.