Orientador: Rosemary Adriana Chiérici Marcantonio / Banca: Juliano Milanezi de Almeida / Banca: Marinella Holzhausen Caldeira / Resumo:A Terapia Fotodinâmica (TFD) tem mostrado resultados satisfatórios quando associada ao tratamento mecânico de doenças periodontais. O objetivo deste trabalho foi avaliar se a TFD com o fotossensibilizador hipericina-glucamina, ativado por LED âmbar (34,10 J/cm2) e associada à raspagem e alisamento radicular (RAR), promove melhor reparo da doença periodontal induzida experimentalmente em ratos. Para indução da DP foram instaladas ligaduras no sulco de um dos segundos molares superiores, escolhido randomicamente. Após 15 dias as ligaduras foram removidas e os animais aleatoriamente distribuídos entre 4 grupos experimentais (n =5): Grupo IDP (Indução da Doença Periodontal); Grupo RAR; Grupo TFD; Grupo RAR+TFD. Após 7, 15 e 30 dias da aplicação do tratamento os animais foram eutanasiados. As hemimaxilas foram submetidas a Microtomografia digital e avaliações histométricas. Os dados foram avaliados pelo teste de normalidade de Shapiro-Wilk. Os grupos foram avaliados entre si e os dados paramétricos foram avaliados pelo teste ANOVA. Todos os testes foram aplicados com p<0,05. Não foram encontradas diferenças estatísticas entre os grupos avaliados. Concluímos que a TFD como adjunta à RAR ou isolada obteve resultados semelhantes à raspagem e alisamento radicular. / Abstract:The Photodynamic Therapy (TFD) has shown satisfactory results when coupled with mechanical treatment of periodontal diseases. The aim of this work was to evaluate whether PDT with the photosensitizer hypericin-glucamine, enabled by amber LED (34.10 J/cm2) and combined with scaling and root planning (RAR), promotes better repair of the periodontal disease induced experimentally in rats. The periodontal diseases was installed by randomly inserting ligatures in the grooves of the superior second molars. The bandages were removed after 15 days and the animals were randomized into 4 experimental groups (n = 5): IPD group (Induced Periodontal Disease); RAR group; TFD group; and RAR+TDF group. The animals were sacrificed after 7, 15 and 30 days of the performed treatment. Digital microtomography and histometric analyses were carried out on their hemimaxillas. Shapiro-Wilk normality test was applied to data. The groups were assessed among each other and parametric data were evaluated using ANOVA test. All tests were conducted with p<0.05. Statistical differences were not observed among the groups. Therefore, we concluded that TFD combined with RAR or isolated obtained similar results to scaling and root planning. / Mestre

Magíster en Bioquímica / Los neutrófilos polimorfonucleares (PMNs) son un tipo de leucocito que tiene participación en la primera etapa de la inmunidad innata. Constituyen la primera línea de defensa del hospedero frente a un agente patógeno, pero la liberación de sus componentes puede causar destrucción de tejido. Estas células al activarse secretan citoquinas inflamatorias, fagocitan a las bacterias y las destruyen a través de agentes microbicidas como intermediarios de oxígeno reactivo (ROS) y óxido nítrico (NO) y, también, a través de la secreción de metaloproteinasas (MMPs). Las MMPs son enzimas hidrolíticas con características neutras que degradan colágeno, gelatina, laminina y otros componentes de la matriz extracelular, secretándose desde neutrófilos la MMP-8 (colagenasa) y la MMP-9 (gelatinasa B). La periodontitis es una enfermedad que causa la destrucción del colágeno en el ligamento periodontal provocando inflamación. El proceso destructivo es el resultado de una compleja interacción entre estas bacterias, la inmunidad del hospedero y los sistemas inflamatorios.Las principales bacterias implicadas en la enfermedad periodontal son anaeróbicas y gram-negativaseincluyen Porphyromonas gingivalis (Pg) y Actinobacillus actinomycetemcomitans(Aa), entre otras. El reconocimiento de patrones moleculares asociados a patógenos (PAMP), por parte de los neutrófilos lo realiza una importante familia de receptores llamada receptores de tipo Toll (TLR). Los objetivos de esta tesis fueron: 1) estudiar la respuesta de los neutrófilos periféricos (circulantes) frente a periodontopatógenos como Pg y Aa y, además, de algunos de los PAMPs más conocidos como LPS de Escherichia coli (componente de la pared celular), Zymosan A (extracto de Saccharomyces cerevisiae) y la lectina fitohemaglutinina (PHA); y 2) comparar la respuesta de neutrófilos provenientes de pacientes con periodontitis con la de individuos sanos. La respuesta de los neutrófilos frente a agentes potencialmente estimuladores o activadores se estudió, tanto en sangre completa como en neutrófilos purificados, a través del análisis de la secreción de la enzima MMP-9 y la citoquina IL-8, intentándose además medir la liberación al medio de óxido nítrico (NO). La actividad de MMP-9 se determinó por zimografía en geles de poliacrilamida en presencia de gelatina (colágeno desnaturalizado) como sustrato, en condiciones desnaturantes, lo que permite evaluar las formas activa y latente de la gelatinasa. Los niveles de IL-8 se determinaron utilizando el método ELISA. Los intentos de demostrar un aumento de liberación de NO en respuesta a los estimuladores fueron infructuosos, no obstante se trataron de cuantificar los niveles de sus metabolitos estables (nitrito y nitrato) por el sensible método de electroforesis capilar. En sangre completa, al comparar la condición estimulada con la condición basal en ausencia de estimulador, PHA aumentó la liberación de MMP-9 en ambos grupos (sanos y pacientes). Por otra parte, LPS y Pg estimularon la secreción de IL-8 sólo en el grupo de pacientes. No se encontraron diferencias significativas entre el grupo de pacientes con enfermedad periodontal y el grupo control de los individuos sanos en cuanto la liberación de MMP-9 e IL-8. Al trabajar con neutrófilos purificados, en ambos grupos LPS y Pg aumentó significativamente la liberación de MMP-9 respecto a la condición basal, encontrándose además un aumento significativo en el grupo de pacientes comparado con el grupo sano. La secreción de IL-8 respecto a la condición basal aumentó sólo en pacientes por efecto de LPS y Zymosan A. La comparación entre los dos grupos mostró diferencias significativas en la liberación de IL-8 al incubar con LPS, Pg, Aa y Zymosan A, observándose una mayor activación en los neutrófilos de los pacientes. La secreción de IL-8 se encontró atenuada en pacientes, pero se observó una gran aumento en su secreción (activación) por todos los estimuladores estudiados (entre 3 y 7 veces), a diferencia del grupo control. Los resultados en neutrófilos purificados apoyan la hipótesis propuesta de que este tipo de leucocitos periféricos en pacientes con periodontitis son más reactivos (hiper-reactivos) que los de individuos sanos. La determinación de la respuesta de los neutrófilos periféricos podría ser una herramienta útil para el seguimiento de la eficacia del tratamiento en los pacientes con periodontitis. La baja proporción de neutrófilos en las muestras de sangre completa no permitió observar esta hiper-reactividad, ni tampoco la respuesta estimuladora en general / Polymorphonuclear neutrophils (PMN) are a kind of leukocyte involved in the early innate immune response. They constitute the first line of host defense against a pathogenic agent, but the release of their components may cause tissue destruction. When these cells are activated they release proinflammatory cytokines, they phagocyte bacteria and destroy them through microbicidal agents like oxygen intermediates (ROS), nitric oxide (NO) and, also, through the release of metalloproteinases (MMPs). MMPs are hydrolytic enzymes with neutral characteristics which are able to degradate collagen, gelatin, laminin and other extracellular matrix components, releasing from neutrophils MMP-8 (collagenase) and MMP-9 (gelatinase B). Periodontitis is a disease that destroys collagen in the periodontal ligament producing inflammation. The destructive process is the result of a complex interaction between these bacteria, the host immunity and the inflammatory systems. The main bacteria involved in the periodontal disease are anaerobic and gram-negative and they include Porphyromonas gingivalis (Pg) and Actinobacillus actinomycetemcomitans (Aa), among others. Recognition of pathogen-associated molecular patterns (PAMPs) by neutrophils is carried out by an important family of receptors called Toll like receptors (TLR). The objectives of this thesis were two: 1) to study the response of peripheric (circulating) neutrophils against periodontopathogens Pg and Aa and, also against some of well known PAMPs such like LPS from Escherichia coli (cell wall component), Zymosan A (Saccharomyces cerevisiae extract) and the lectin phytohemagglutinin (PHA); and 2) to compare the response of neutrophils from patients with periodontitis to those from healthy individuals. The response of neutrophils against potentially stimulating agents or activators was studied in both whole blood and purified neutrophils, through the analysis of the release of the MMP-9 enzyme and the cytokine IL-8, trying to measure also the release of nitric oxide (NO) to the incubation medium. The activity of the MMP-9 was determinated by zymography on polyacrylamide gels, including gelatin (denaturalized collagen) as a substrate, in denaturating conditions, to evaluate both the active and latent forms of the gelatinase. The IL-8 levels were assayed using the ELISA method. Attempts to demonstrate an increase in the release of NO in response to the stimulators were unsuccessful, even though the nitrite and nitrate determination was used in an attempt to quantify the levels of its stable metabolites by the sensitive method of capillary electrophoresis. In whole blood, when comparing the stimulated condition with the basal condition in absence of a stimulator, PHA increased the release of MMP-9 in both groups (healthy and patients). On the other hand, LPS and Pg stimulated the release of IL-8 only in the patient group. Significant differences between the group of patients with periodontal disease and the control group of healthy individuals in terms of the release of MMP-9 and IL-8 were not found. When working with purified neutrophils, in both groups LPS and Pg significantly increased the release of MMP-9 with respect to the basal condition; a significant increase in the patients group compared to the healthy group was also found. The release of IL-8 with respect to the basal condition increased only in patients due to the effects of LPS and Zymosan A. The comparison between the two groups showed significant differences in the release of IL-8, during incubation with LPS, Pg, Aa and Zymosan, with a greater activation in the neutrophils from patients. The secretion of IL-8 was reduced in patients, but with all the stimulators studied a larger secretion (activation) between 3 and 7 fold was observed in patient neutrophils as compared to that of the healthy group. The results in purified neutrophils support the proposed hypothesis that this type of peripheric leucocyte in patients with periodontitis is more reactive (hyper-reactive) than in healthy individuals. Determination of peripheral neutrophil response can be an useful tool for monitoring the efficacy of the treatment in periodontitis-affected patients. The proportion of neutrophils in whole blood samples was too low to observe this hyper-reactivity, or the stimulating response in general

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: La Periodontitis Apical asintomática (PAa) es una enfermedad destructiva de los tejido perirradiculares del diente y de etiología infecciosa. Actualmente no está claro la patogénia de la PAa como tampoco lo está un método de estudio no invasivo que refleje el estado de destrucción y reparación de los tejidos periapicales de dientes post tratamiento endodóntico. El objetivo del presente estudio es comparar los niveles de piridinolina de Enlace Cruzado Carboxiterminal del Telopeptido de Colágeno tipo I (ICTP) obtenidos del fluido gingival crevicular (FGC) de dientes con PAa antes y después del tratamiento endodóntico y dientes sanos, para observar si existe asociación entre los niveles de este marcador y la patología en estudio, así como valorar el uso de FGC para el monitoreo de este tipo de enfermedad. Materiales y métodos: Se obtuvieron muestras de FGC de dientes con diagnóstico de PAa y de dientes sanos (N=19). Las muestras fueron recolectadas al momento del diagnóstico y después de 1 semana post tratamiento endodóntico. Se determinaron los niveles de ICTP mediante el inmuno ensayo enzimático de adsorción EIA y se realizó el análisis estadístico de los resultados por medio del software Stata versión 11.1. Resultados: El ICTP se genera en FGC en dientes sanos y con PAa. Si bien se observó que los niveles de ICTP fueron ligeramente mayores en FGC de dientes con PAa que en dientes sanos, y que hubo una tendencia a la disminución después del tratamiento endodóntico, las diferencias no fueron estadísticamente significativas. Conclusiones: Los niveles de ICTP en el FGC no reflejaron el estado de salud periapical, esto podría estar influenciado por estados inflamatorios gingivales subclínicos y/o por el N muestral bajo del presente trabajo.

Orientador: Enilson Antonio Sallum / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-16T14:54:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Diniz_ClaudiaKellydeOliveira_M.pdf: 2319655 bytes, checksum: 50260486802400f51cdb98b6fd32a3c0 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar a influência do diabetes mellitus (DM) sobre a reabsorção óssea alveolar ocorrida no trauma oclusal (TO) na presença e ausência da periodontite experimental (PE) em ratos. Para tanto, 32 ratos Wistar (Rattus Novergicus) adultos foram aleatoriamente distribuídos em 4 grupos: Grupo 1 (n=08): DM+TO+PE; Grupo 2 (n=08): DM+TO; Grupo 3 (n=08): não-diabético+TO+PE; Grupo 4 (n=08): não diabético+TO. O DM foi induzido nos animais do G1 e G2 pela injeção intraperitoneal de 60 mg/kg de estreptozotocina (STZ). Dez dias após a indução do DM, os animais do G1 foram induzidos à PE pela colocação da ligadura de fio de seda no sulco dos primeiros molares inferiores do lado esquerdo (lado teste); o mesmo foi feito nos animais não diabéticos (G3). O molar contralateral (direito) de todos os animais dos 4 grupos serviu como controle. O início da indução do TO, pela cimentação do fio ortodôntico na oclusal dos molares já submetidos à PE, se deu 15 dias após a colocação da ligadura (G1 e G3). No mesmo dia o TO também foi induzido nos grupos sem ligadura (G2 e G4) permanecendo por 10 dias até a data do sacrifício. A avaliação intra-grupo mostrou haver diferença estatística significante de perda óssea alveolar quando comparado os dentes do lado teste (TO) ao lado controle (p<0,0001) em todos os grupos (G1, G2, G3 e G4). A avaliação intergrupo mostrou diferenças estatísticas significantes (p<0,05) entre G1 e G2 e entre G3 e G4, com reabsorção óssea mais severa para os grupos com TO+PE quando comparados aos grupos com TO. A média de reabsorção óssea do G1 (DM+ TO+PE) foi significantemente maior (p<0,05) do que a do G3 (TO+PE). Não foram detectadas diferenças estatísticas significantes (p>0,05) entre G2 (DM+TO) e G4 (TO). Dentro dos limites deste estudo pôde-se concluir que o diabetes mellitus agrava a perda óssea alveolar nos animais com trauma oclusal quando associado à periodontite experimental. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the diabetes mellitus (DM) effects on alveolar bone resorption induced by occlusal trauma (OT) with or without experimental periodontites (EP) in rats. Thirty-two adult male rats (Rattus Novergicus) were randomly assigned to one of four groups: Group1 (n=08): DM+OT+EP; Group 2 (n=08): DM+OT: Group 3 (n=08): OT+EP: Group 4 (n=08): OT. Experimental DM was created by intraperitoneal injection of 60 mg/kg body weight streptozotocin (STZ) in G1 and G2. Ten days after diabetes induction, the animals in G1 received a silk ligature in the sulcular area of their mandible left first molar (test side (OT) to induce EP; the same was performed with the non-diabetics animals (G3). The contralateral molar (right side) was left as a control in all of the groups. G1 and G3 were submitted to OT induction (by orthodontic wire bonding in the occlusal molar surface) after fifteen days period. At the same day, the OT was also inducted in the groups (02 and 04) without ligature. The animals were sacrificed 10 days later. The intragroup analysis revealed significant difference between teeth in the test side (OT) and control side (p<0.05) among the 4 groups (G1. G2. G3. G4). The test side (OT) showed higher levels of bone resorption. The histometrics results showed significant difference (p< 0.05) between G1 and 02 and between 03 and G4, with more severe resorption for the groups with OT+EP compared do OT. For the histological analysis, 01 (DM+OT +EP) showed more bone loss when compared to G3 (OT +EP) (p<0.05). No difference was observed (p<0.05) between G2 (DM+OT) and G4 (OT). Within the limit of the study, it was concluded that diabetes mellitus enhances the alveolar bone loss in animals with occlusal trauma associate to experimental periodontitis. / Mestrado / Periodontia / Mestre em Clínica Odontológica

Orientador: Ana Paula de Souza Pardo / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-13T02:34:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Damm_GilcyRaymundo_M.pdf: 2996803 bytes, checksum: a82f498f599c7c610b4ff7cee3b534a6 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Nosso objetivo neste estudo foi investigar o padrão de metilação na posição CpG -686 do promotor da MMP-3 em células epiteliais da mucosa bucal e células do tecido gengival. Os voluntários foram divididos em três grupos: indivíduos com periodonto saudável não fumantes e indivíduos com periodontite crônica fumantes e não-fumantes. Também foi nosso objetivo analisar os níveis de expressão de RNAm da MMP-3 nestes indivíduos. Para isto, DNA foi purificado de células epiteliais bucais obtidas após bochecho com dextrose 3%. DNA e RNA foram purificados de células gengivais obtidas de biópsias de tecido gengival. O padrão de metilação na posição -686 do promotor do gene da MMP-3 foi investigado utilizando a enzima de restrição sensível à metilação HpaII, em seguida foi realizada a PCR e eletroforese. Amostras metiladas apresentaram amplificação positiva e amostras não-metiladas não apresentaram amplificação pela PCR. A análise estatística entre o padrão de metilação encontrado nas amostras dos diferentes grupos foi realizada pelo teste de c2 ao nível de 5%. A expressão relativa da MMP-3 foi analisada em aparelho real time PCR e a análise estatística foi realizada pelo teste de Kruskal-Wallis ao nível de 5%. Não foi observado diferença no padrão de metilação encontrado nas células analisadas dos diferentes grupos. A freqüência de padrão de não-metilação encontrada nas células epiteliais de mucosa bucal foi 18,3% no grupo controle, 12,5% em periodontite fumante e 9,7% em periodontite não fumante, já a taxa de nãometilação nas células do tecido gengival foi maior em todos os grupos 28% no grupo controle, 38% no grupo periodontite fumantes e 27% no grupo periodontite não-fumantes.Também não foi observada diferença na expressão genética da MMP-3 entre estes grupos. Concluímos que não há associação entre o padrão de metilação encontrado na posição -686 e a periodontite crônica em fumantes ou não-fumantes / Abstract: The objective in this study was to investigate the methylation status of CpG site at position -686 of MMP-3 gene promoter in epithelial cells from oral mucosa and gingival tissue cells. Subjects were divided into three groups: nonsmokers healthy subjects and non-smokers and smokers subjects with chronic periodontitis. Another objective was also to examine the levels of mRNA expression of MMP-3 in these individuals. For this, DNA was purified from buccal epithelial cells, that were obtained after oral rinse with 3% dextrose and DNA and RNA were purified from gingival cells that were obtained from biopsies of gingival tissue. The methylation status at position -686 of MMP-3 gene promoter was investigated using the restriction enzyme sensitive to methylation HpaII, subsequently the PCR and electrophoresis was performed. Methylated samples showed positive bands after PCR and non-methylated samples showed no bands after PCR. The statistical analysis between the methylation status found in this samples in each groups was performed by c 2 test at 5% level. The relative expression of MMP-3 was examined by real time PCR and statistical analysis was performed by Kruskal-Wallis test at 5 % level. There was not difference in the methylation status found in the cells from each different group. The frequency of the unmethylated status found in the epithelial oral cells was 18,3% in healthy subjects non-smokers, 12,5 % subjects with chronic periodontitis smokers and 9,7% non-smokers. And the unmethylated status of gingival tissue cells was higher in all groups: 28% in healthy subjects non-smokers, 38% in smokers subjects with chronic periodontitis and 27% in non-smokers subjects with chronic periodontitis. Also, there was not difference in genetic expression of MMP-3 among these groups. We conclude that there is not association between the methylation status observed at position -686 of MMP3 gene promoter and chronic periodontitis in smokers and non-smokers. in all groups: 28% in healthy subjects non-smokers, 38% in smokers subjects with chronic periodontitis and 27% in non-smokers subjects with chronic periodontitis. Also, there was not difference in genetic expression of MMP-3 among these groups. We conclude that there is not association between the methylation status observed at position -686 of MMP3 gene promoter and chronic periodontitis in smokers and non-smokers / Mestrado / Histologia e Embriologia / Mestre em Biologia Buco-Dental

Tesis Magister en Ciencias Odontológicas con Mención en Periodontologia / INTRODUCCIÓN: La periodontitis es una enfermedad inflamatoria crónica, iniciada por la presencia de biofilm subgingival, y asociada a un desbalance de la respuesta inmune a los periodontopatógenos. Existe evidencia que el uso de probióticos en conjunto con el pulido y alisado radicular tiene mayores efectos benéficos en los resultados de dicho tratamiento. OBJETIVO: Evaluar el efecto de la administración de Lactobacillus rhamnosus SP1 en pacientes con periodontitis crónica tratados con terapia periodontal no quirúrgica en los parámetros clínicos periodontales asociados a la detección y cuantificación de periodontopatógenos (Porphyromonas. gingivalis, Aggregatibacter. actinomycetemcomitans y Tannerella forsythia) en placa subgingival en comparación con un placebo. METODOLOGÍA: Se realizó un ensayo clínico de diseño paralelo, aleatorizado, enmascarado, con control mediante placebo. Se reclutaron por conveniencia a pacientes con diagnóstico de periodontitis crónica que asistieron a la Facultad de Odontología de la Universidad de Chile. Cada uno fue asignado aleatoriamente al grupo experimental o control. El grupo experimental (n=19) recibió tratamiento periodontal no quirúrgico en conjunto con la administración del probiótico Lactobacillus rhamnosus SP1 en polvo de disolución oral, 1 diario por 3 meses, mientras que al grupo control (n=18), se le administró un placebo con las mismas características que el del grupo experimental, pero sin el probiótico. Se consignaron los parámetros clínicos y se tomaron muestras de biofilm subgingival, para determinar la prevalencia y proporción de P. gingivalis, T. forsythia y A. actinomycetemcomitans. Los parámetros clínicos y microbiológicos fueron consignados en el tiempo basal, al finalizar la intervención con el probiótico/ placebo, a los 3 y 6 meses de seguimiento. El análisis de datos se realizó   según intención de tratar y se aplicaron pruebas estadísticas según la naturaleza de la variable. RESULTADOS: En el grupo probiótico y placebo se observó una mejoría significativa en los parámetros clínicos. En el grupo probiótico, a los 6 meses de seguimiento, la pérdida de inserción clínica en los sitios con profundidad al sondaje (PS) inicial ≤ 3mm es significativamente menor que en el grupo placebo (2.5 ± 0.5 versus 3.1 ± 1.0, p = 0.0265). Además, solamente en el grupo probiótico disminuyó significativamente el porcentaje de dientes con PS ≥ 7mm. En relación a los parámetros microbiológicos, en ambos grupos disminuyó significativamente la cuantificación y prevalencia de P. gingivalis, así como la prevalencia de T. forsythia. En el grupo probiótico, disminuyó significativamente la microbiota total cultivable en los sitios con PS < 5mm. Sin embargo, no se reportaron diferencias significativas microbiológicas entre los grupos en los diferentes tiempos de análisis. CONCLUSIONES: La administración oral de L. rhamnosus SP1 en conjunto con el pulido y alisado radicular y terapia de soporte periodontal cada 3 meses, genera resultados clínicos y microbiológicos similares al tratamiento periodontal por sí solo. Sin embargo, los sitios periodontales leves se benefician con la administración del probiótico. / Financiamiento Proyecto FONDECYT 1130570 $$a y CONICYT.PCHA/Magister Nacional/2013-22130172.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Autor no autoriza el acceso a texto complete de su tesis en el programa de tesis Electrónicas / Objetivo: El embarazo es un factor modificante del inicio, progresión, severidad y respuesta al tratamiento de las periodontitis. Durante el embarazo, la composición del biofilm subgingival se caracteriza por el incremento de bacterias anaerobias Gram negativas y como resultado de la terapia periodontal se ha observado una reducción de la cantidad total de bacterias periodontales, asociada a la disminución en los parámetros clínicos de la enfermedad; sin embargo, estos cambios microbiológicos no han sido completamente descritos. En objetivo de este trabajo de investigación es determinar la frecuencia de detección de A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, P. intermedia, T. forsythia y T. denticola en mujeres embarazadas afectadas de periodontitis crónica antes y después de la terapia periodontal. Método: En 20 mujeres embarazadas y 5 mujeres no embarazadas, todas afectadas de periodontitis crónica moderada o severa, se analizó la presencia de las bacterias periodontopatógenas A. actinomycetemcomitans, P. gingivalis, P. intermedia, T. forsythia y T. denticola mediante la técnica de PCR, antes y después de la terapia periodontal no quirúrgica. Resultados: Luego de la terapia periodontal convencional, se observó la eliminación total de P. gingivalis, P. intermedia y T. forsythia; sin embargo, sólo se observó una disminución en la frecuencia de detección de A. actinomycetemcomitans y T. denticola, a pesar de la mejoría en la higiene oral de las pacientes y la disminución significativa del índice gingival y del número de sitios periodontales con profundidad de sondaje >3mm. Conclusión: En mujeres embarazadas afectadas de periodontitis crónica moderada o severa se observó una persistencia de A. actinomycetemcomitans y T. denticola en los sitios periodontales luego de la terapia periodontal. La persistencia de estos microorganismos podría asociarse a un incremento en el riesgo de re-infección periodontal post-terapia.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: La periodontitis apical asintomática (PAA) es una respuesta inmunoinflamatoria local a la invasión microbiana del sistema de canales radiculares (SCR) que resulta en la destrucción de los tejidos periapicales y se caracteriza por no presentar sintomatología clínica. El absceso apical agudo (AAA) corresponde a la inflamación de los tejidos perirradiculares, asociada a la formación de exudado dentro de la lesión, con presencia de sintomatología clínica severa. La Mieloperoxidasa (MPO) es una enzima que cataliza la formación de ácido hipocloroso (HClO), potente oxidante con rol defensivo contra los agentes infecciosos y que paralelamente provoca daño a los tejidos adyacentes. A la fecha su presencia no se ha asociado a estas patologías periapicales. Objetivo: Determinar los niveles de MPO en exudado periapical de dientes con diagnóstico de AAA y PAA para poder comparar y asociar la concentración de esta enzima con la presencia de sintomatología en el tejido periapical. Materiales y Métodos: Se seleccionaron pacientes con diagnóstico de PAA (n=20) y AAA (n=13) e indicación de endodoncia, y se obtuvieron muestras de exudado periapical. Las muestras fueron eluídas y se les realizó cuantificación de proteínas totales. Para determinar los niveles de MPO se realizó test de ELISA. Los resultados se analizaron con el programa GraphPad PRISM 5.0. Resultados: La concentración de proteínas totales (CPT) en exudado periapical de dientes con AAA es significativamente mayor que en dientes con PAA. La MPO se expresa en exudado periapical tanto de dientes con PAA como con AAA. Si bien los niveles de MPO son mayores en exudado periapical de dientes con AAA que con PAA, la diferencia no es estadísticamente significativa. Conclusiones: En el presente estudio existe una asociación entre la CPT y la presencia de sintomatología, sin embargo no se logró demostrar una asociación entre los niveles de MPO y la presencia de sintomatología.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: Las periodontitis son un conjunto de enfermedades infecciosas, caracterizadas por la destrucción de los tejidos de inserción de los dientes, cuya causa es el biofilm subgingival. Porphyromonas gingivalisy Aggregatibacter actinomycetemcomitansson bacterias periodonto-patógenas del biofilm subgingival que han sido ampliamente asociadas al inicio, progresión y severidad de la enfermedad.Sobre la base de la cápsula extracelular de P. gingivalis y del Opolisacárido del LPS de A. actinomycetemcomitans se han descrito distintos serotipos bacterianos, denominados K1-K6 y a-f, respectivamente. En distintas poblaciones afectadas de periodontitis, se ha establecido que los serotipos bacterianos más frecuentemente detectados son los serotipos K5 y K6de P. gingivalisy b-cde A. actinomycetemcomitans. En Chile no existen estudios que hayan analizado la frecuencia de detección de estos serotipos bacterianos. Objetivos: Cuantificar la frecuencia de detección de los distintos serotipos de P. gingivalis y A.actinomycetemcomitans en pacientes afectados de periodontitis crónica o periodontitis agresiva. Metodología:Muestras microbiológicas del biofilm subgingival fueron obtenidas de 25 sitios periodontales distintos en pacientes con periodontitis crónica o agresiva. La presencia de P. gingivaliso A. actinomycetemcomitans se estableció identificando las características de las colonias microbianas en cultivo en agar sangre hemina/menadiona o agar TSVB,pruebas bioquímicas de metanol o catalasay por identificación mediante PCR de la subunidad 16Sdel RNA ribosomal (rRNA). Purificados bacterianos fueron aislados y la caracterización del serotipo de P. gingivalis y de A. actinomycetemcomitans se realizó mediante PCR utilizando partidores específicos. Resultados:P. gingivalisfue identificado en el 40% de los pacientes afectados de periodontitis, tanto crónica como agresiva, y A. actinomycetemcomitans en un 16%. Cuando P. gingivalis fue detectado, el 60% fue serotipo K3 y el 50% K2 o K5. En el caso deA. actinomycetemcomitans, el 75% fue serotipo b y el 25% c. 6 Conclusión:En los pacientes con periodontitis existe una frecuencia variable de detección de los distintos serotipos bacterianos. En P. gingivalis los serotipos más frecuentemente detectados fueron el serotipo K3, K2y K5 y en A. actinomycetemcomitans el serotipo b.

Abstract Diabetes mellitus has been linked with an increased risk for oral diseases, especially periodontal diseases (Oliver &amp; Tervonen 1994, Yalda et al. 1994). Further investigations have, however, shown that this risk is not equal in all patients with diabetes. These studies explored the relationship between the diabetic status and periodontal diseases, dental caries and salivary factors. In a group of the diabetic adolescents aged 12 to 18 years, dental caries and gingivitis were shown to associate with poor metabolic control of diabetes. An increase of caries prevalence and the severity of gingivitis was evident in alarmingly poorly controlled patients with glycosylated haemoglobin (HbA1) values of 13% or higher. The hyperglycaemia-associated increase of gingivitis was confirmed in a group of newly diagnosed diabetic children and adolescents, whose gingival inflammation decreased during a follow-up after the correction of hyperglycaemia by initiation of insulin treatment. Decreased salivary flow rates and elevated salivary glucose levels were observed during the hyperglycaemic state of children and adolescents with newly diagnosed diabetes. Higher salivary microbial counts, especially yeast counts, were related to the lower salivary flow rates and higher salivary glucose levels. In adult patients with type 1 diabetes, the complex diabetic status was assessed by means of the level of metabolic control and/or the presence and severity of diabetic complications. Adult diabetic patients with poor metabolic control and/or complications exhibited more deepened pockets and clinical attachment loss, and after periodontal treatment, the recurrence of deepened pockets was faster in these patients compared to the other diabetic patients or the controls. The high-risk subjects among adults with type 1 diabetes were categorised as follows: subjects with long-term HbA1 values over 10%, independently of whether the patient has diabetic complications or not; subjects with advanced diabetic complications, such as preproliferative or proliferative retinopathy, nephropathy, limb amputations or recurrent infections; and subjects with multiple diabetic complications, irrespective of the level of metabolic control. In conclusion, dental professionals should be aware of the level of glycaemic control in their patients with type 1 diabetes, and the prevention and intensified treatment should be focused on those with a poor metabolic control (HbA1c values around or over 10%). In the case of adult patients, more comprehensive knowledge about the diabetic status of the patients is needed in order to be able to identify the subjects at high risk for periodontitis and in need of regular maintenance care at least twice a year. The medical and nursing personnel should also be aware of periodontitis as a complication of diabetes, and especially in the case of adult diabetic patients, they should refer their patients to dental treatment when necessary.