The photobiomodulation therapy (PBMT) has many demonstrated applications in the health area including anti-inflammatory and wound healing effects. The main objective of this work is to verify if the PBMT causes measurable changes in the mechanical properties of cells, specifically in red blood cells, epithelial cells and fibroblasts. In addition, to contribute to the knowledge of the action mechanisms of the PBMT, this study intends to support applications of the PBMT during invasive procedures, such as the direct photo-treatment of the blood in surgical procedures with cardiopulmonary bypass, regarding security of the cellular integrity. For this analysis, three experimental techniques were used: optical magnetic twisting cytometry (OMTC), defocusing microscopy and confocal laser-scanning microscopy. Human bronchial epithelial cells were evaluated with OMTC. The epithelial cell culture was either photo-treated or not, with red laser (lambda=660 nm), and fixed power and time (power density of 153 mW/cm2, time 300 s). It was not possible to observe significant differences between photo-treated and control epithelial cells, for the hysteresivity (ratio between the cell loss and elastic shear moduli). The defocusing microscopy, similar to a phase contrast microscopy, was used to study human red blood cells from fresh blood. The red blood cells were either photo-treated or not, with red laser (lambda=660 nm), and different powers and times (power densities from 0 to 510 mW/cm2, times from 0 to 180 s). Some morphological and mechanical characteristics of individual red blood cells were evaluated, such as volume, radial profile of cell thickness, lateral and vertical membrane fluctuations, for the photo-treated and control red blood cells. It was not possible to detect differences between the two groups, for any of the parameters analyzed. For both techniques, the absence of detectable differences might be due to several factors, such as the non-action of the PBMT, with the parameters used, in the epithelial cells and red blood cells or to the small sensitivity of each technique. Confocal laser-scanning microscopy was used to evaluate the actin filaments of mouse fibroblasts. The fibroblast cell culture was either photo-treated or not, with red (lambda=625 nm) or infrared (lambda=808 nm) light and fixed power and time (power density from 113 to 158 mW/cm2, time 300 s). The nucleus and cell areas increased slightly when comparing photo-treated and control cells. On the other hand, the total actin, total actin density and the number of filaments decreased. These changes were detected for a short time after treatment, however, after 24 h they are not anymore detectable. The total branch length does not seem to suffer any modifications. In summary, with the data acquired with the three techniques, it was found that the PBMT, in the red range, with the parameters used, could not cause noticeable changes in red blood cells and epithelial cells, in vitro. On the other hand, the PBMT in the red and near-infrared range, with the power and times used, cause changes in actin filaments of fibroblasts, in vitro, in particular the decrease of the total actin density. / A terapia por fotobiomodulação tem muitas aplicações na área de Saúde devido a sua ação anti-inflamatória e de reparação tecidual. O objetivo geral desse trabalho é verificar se a terapia por fotobiomodulação provoca mudanças nas propriedades mecânicas de células, em particular em hemácias, células epiteliais e fibroblastos. Além de contribuir com o conhecimento dos mecanismos de ação da terapia por fotobiomodulação, este estudo pretende subsidiar aplicações da terapia por fotobiomodulação durante procedimentos mais invasivos, como a iluminação direta do sangue em procedimentos cirúrgicos com circulação extracorpórea, sob o ponto de vista da segurança quanto à integridade celular. Para essa análise foram utilizadas três técnicas experimentais: citometria óptica magnética de oscilação (OMTC), microscopia de desfocalização e microscopia confocal. Com a técnica de OMTC foram avaliadas células epiteliais brônquicas humanas em cultura, foto-tratadas com laser vermelho (lambda=660 nm), com potência e tempo fixos (densidade de potência de 153 mW/cm2, tempo 300 s). Não foi possível constatar diferenças significativas entre as células epiteliais foto-tratadas e as células controle, para a histerisividade (razão entre os módulos viscoso e elástico das células). Com a técnica de microscopia de desfocalização, semelhante a uma microscopia de contraste de fase, foram estudadas hemácias humanas de sangue recém coletado. As hemácias foram tratadas com laser vermelho (lambda=660 nm), com potências e tempos variados (densidade de potência de 0 a 510 mW/cm2, tempo de 0 a 180 s). Foram avaliadas algumas características morfológicas e mecânicas das hemácias individualmente, como o volume, perfil radial de espessura, flutuações lateral e vertical da membrana, tanto para hemácias foto-tratadas quanto para hemácias controle. Não foi possível detectar diferenças entre as hemácias foto-tratadas e controle para nenhum dos parâmetros avaliados. Para ambas as técnicas, a falta de mudanças observáveis poderia ser devida a diversos fatores, como a não ação da terapia por fotobiomodulação nas células epiteliais e nas hemácias, com os parâmetros aqui empregados, ou à falta de sensibilidade de cada uma das técnicas usadas. A microscopia confocal foi utilizada para avaliar os filamentos de actina de fibroblastos de camundongo em cultura, os quais foram foto-tratados com luz vermelha (lambda=625 nm) ou infravermelha (lambda=808 nm) e potência e tempo fixos (densidade de potência de 113 a 158 mW/cm2, tempo 300 s). Foi possível constatar ligeiro aumento nas áreas nuclear e celular das células foto-tratadas em relação aos fibroblastos controle. Também foi possível verificar a diminuição da quantidade total de actina, densidade de actina e do número de filamentos de actina nos fibroblastos foto-tratados. Essas mudanças são detectadas para tempos curtos após o tratamento, sendo que depois de 24 h elas desaparecem. O tamanho total dos filamentos parece não sofrer alterações. A partir dos dados coletados com as três técnicas, foi possível constatar que a terapia por fotobiomodulação, com os parâmetros utilizados, não consegue provocar mudanças perceptíveis em hemácias e em células epiteliais, in vitro. Porém, causa mudanças nos filamentos de actina de fibroblastos, in vitro, em particular a diminuição da densidade de actina total.

Purpose: To explore the difference between continuous and pulsed photobiomodulation (PBMT) versus a placebo treatment when using a red-blue light combination over multiple treatment sessions to decrease the symptoms of muscle damage in the quadriceps muscle after a bout of muscle damaging exercise. Methods: Thirty-six healthy, nonactive male and female participants were randomly assigned to one of three groups: continuous PBMT, pulsed PBMT, and placebo treatment. Participants were assessed for muscle damage with knee extension maximal isometric and isokinetic contractions, as well as Visual Analog Scale (VAS) and Lower Extremity Functional Scale (LEFS) scores. Blood creatine kinase (CK) was also analyzed. Participants were given treatment immediately prior to undergoing a bout of damaging eccentric exercise. Participants were treated with PBMT for the next 4 consecutive days for a total of 5 treatments. Results: The continuous treatment group lost significantly less isokinetic average peak torque than the placebo treatment when averaged across all time points postexercise. However, for isometric testing, the continuous group had more reduction in force compared to the placebo group. Between the treatment groups, the continuous treatment group had significantly more muscle soreness measured by the VAS and had significantly less function in daily tasks reported on the LEFS patient-oriented outcome scale. There was no significant difference in level of creatine kinase between the treatment groups. Conclusion: Pulsed photobiomodulation treatments had no significant effect when compared to the placebo group. Continuous photobiomodulation helped to reduce isokinetic force loss, yet exacerbated all other muscle damage markers following exercise relative to the placebo condition.

A remodelação do processo alveolar após a exodontia é um fenômeno fisiológico que resulta em alterações das dimensões ósseas e que podem interferir na reabilitação protética. Para minimizar a perda óssea, estratégias de preservação do rebordo vêm sendo empregadas e a terapia por fotobiomodulação (TFBM) se destaca como uma opção de baixo custo e morbidade. Estudos prévios evidenciaram o impacto positivo da TFBM no reparo ósseo. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito TFBM no reparo alveolar. Vinte pacientes com indicação clínica de exodontia dos primeiros ou segundos molares bilateralmente foram selecionados e os lados direito e esquerdo de cada paciente distribuídos em um dos grupos experimentais: (1) TFBM, tratado com laser de baixa frequência, e (2) Controle, que recebeu o mesmo tratamento com o equipamento desligado; a aplicação foi realizada no pós-operatório imediato, 1, 2, 3, 4, 7 e 15 dias. Aos 45 dias pós-exodontia, espécimes de tecido do interior dos alvéolos foram coletados para análise microtomográfica e histológica. Os dados foram comparados utilizando o Teste-t pareado e o nível de significância foi de 5%. A análise morfométrica evidenciou diferenças estatisticamente significante entre os grupos para os seguintes parâmetros: superfície óssea (p=0,029), superfície óssea/volume total (p=0,028), número de trabéculas (p=0,025) e densidade de conectividade (p=0,029), maiores no grupo TFBM em relação ao Controle. O volume ósseo, volume ósseo/total, espessura e separação trabecular não apresentaram diferenças estatisticamente significantes (p=0,054; p=0,082; p=0,598 e p=0,109, respectivamente). Esses dados foram confirmados na análise histológica, onde foi identificado maior quantidade de tecido trabecular no grupo TFBM, enquanto no Controle fica evidente maior quantidade de tecido conjuntivo. Os resultados evidenciaram que a terapia de fotobiomodulação tem efeito positivo no reparo de alvéolos humanos. / The process of bone repair after tooth extraction is a physiological phenomenon which results in alterations of the bone dimensions and could interfere in prosthetic rehabilitation. To minimize bone loss, strategies for border preservation have been used and photobiomodulation therapy (TFBM) stands out as a low cost option and morbidity. Previous studies have shown the positive impact of TFBM on bone repair. The aim of this study was to evaluate the effect of TFBM on alveolar repair. Twenty patients with exodontia indication of the first or second molar bilaterally were chosen, right and left sides were distributed in one of the following experimental groups: (1) TFBM, treated with low frequency laser, and (2) Control group, who received the same treatment with the equipment off; besides, laser application was applied right after the post-operatory, after 1, 2, 3, 4, 7 and 15 days. After 45 days from the extraction, tissue samples from the alveoli were collected for micro-tomographic and histological analysis. Data were compared using the paired t-test and the accuracy level was 5%. A morphometric analysis showed statistically significant differences between the groups regarding the following parameters: bone surface (p = 0.029), bone surface / total volume (p = 0.028), trabeculae number (p = 0.025) and connectivity density (p = 0.029), higher in the TFBM group than in Control. The bone volume, bone / total volume, trabecular thickness and separation did not present statistically significant differences (p = 0.054, p = 0.082, p = 0.598 and p = 0.109, respectively). These data were confirmed in the histological analysis, where a greater amount of trabecular tissue was identified in the TFBM group, while in control group, a high amount of connective tissue was evident. The results showed that photobiomodulation therapy has a positive effect on the repair of human alveoli.

Purpose: To assess the role of photobiomodulation on bone healing around dental implants. Materials and Methods: 72 patients requiring 76 dental implants were included. All patients received dental implant(s.) Treatment group had also to apply LED to surgical sites. ISQ of implants was measured following implant placement and at 1, 2, 4, and 8 weeks postoperatively. Radiographs were taken after insertion and at 8 weeks postoperatively. Data were analyzed using SPSS and Stata. Results: Treatment group showed an increase in ISQ values over the follow-up period compared to control (p < 0.001). Primary effect of LED on ISQ values was seen over the first 2 weeks (p < 0.05). Treatment group showed less decrease in crestal bone height at 8 weeks (p = 0.05). Conclusions: Data suggest that photobiomodulation will allow for a continuous increase in ISQ value and may reduce crestal bone resorption following implant placement.

Purpose: To assess the role of photobiomodulation on bone healing around dental implants. Materials and Methods: 72 patients requiring 76 dental implants were included. All patients received dental implant(s.) Treatment group had also to apply LED to surgical sites. ISQ of implants was measured following implant placement and at 1, 2, 4, and 8 weeks postoperatively. Radiographs were taken after insertion and at 8 weeks postoperatively. Data were analyzed using SPSS and Stata. Results: Treatment group showed an increase in ISQ values over the follow-up period compared to control (p < 0.001). Primary effect of LED on ISQ values was seen over the first 2 weeks (p < 0.05). Treatment group showed less decrease in crestal bone height at 8 weeks (p = 0.05). Conclusions: Data suggest that photobiomodulation will allow for a continuous increase in ISQ value and may reduce crestal bone resorption following implant placement.

Na Ficha Catalogr?fica consta o t?tulo: "Efeito da terapia por fotobiomodula??o (LED630nm) no equil?brio redox e nos aspectos hist?logicos da osteoartrite de joelho induzida por monoiodoacetato de s?dio em ratos". / Submitted by Jos? Henrique Henrique (jose.neves@ufvjm.edu.br) on 2018-08-30T15:08:00Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) lorena_pacheco_oliveira_martins.pdf: 1327754 bytes, checksum: e69932636c7878e52b2b3d058f72ea94 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Martins Cruz (rodrigo.cruz@ufvjm.edu.br) on 2018-10-01T17:08:53Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) lorena_pacheco_oliveira_martins.pdf: 1327754 bytes, checksum: e69932636c7878e52b2b3d058f72ea94 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-01T17:08:53Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) lorena_pacheco_oliveira_martins.pdf: 1327754 bytes, checksum: e69932636c7878e52b2b3d058f72ea94 (MD5) Previous issue date: 2018 / A osteoartrite (OA) tem potencial cr?nico-degenerativo e car?ter inflamat?rio. Al?m do papel inflamat?rio, outros fatores, como o desequil?brio redox, parecem contribuir para altera??es na cartilagem articular, a principal estrutura articular afetada. A fotobiomodula??o (FBM) utilizando LED tem sido proposta para o tratamento da OA por atuar sobre os processos degenerativos da cartilagem, favorecer defesas antioxidantes e modular marcadores do estresse oxidativo. Diante disso, o objetivo foi avaliar o efeito da terapia por FBM utilizando LED (630 nm) sobre os aspectos histomorfom?tricos da cartilagem articular e no equil?brio redox na OA de joelho induzida por monoiodoacetato de s?dio em ratos. Foram utilizados 27 ratos Wistar, separados entre os grupos: Controle; osteoartrite (OA) e osteoartrite + LED (OALED). No grupo OALED foi aplicado o LED (630 nm; 300mW; 9 J/cm2; 0,3 W/cm2; 30 s; iniciando 24h ap?s indu??o; 3 vezes/semana; 8 semanas). A eutan?sia dos animais ocorreu 56 dias ap?s a indu??o da OA, o sangue foi coletado para an?lise do dano oxidativo (TBARS), da capacidade antioxidante enzim?tica (atividade da SOD e CAT) e o estado antioxidante total do plasma atrav?s (FRAP). O joelho direito foi utilizado para a morfometria da cartilagem atrav?s da medida da espessura e contagem de condr?citos. O grupo OALED apresentou maior espessura m?dia da cartilagem e m?dia dos condr?citos semelhante ao grupo Controle. Foi observado ainda maior atividade enzim?tica antioxidante (SOD e CAT) e menor concentra??o de TBARS (P<0,05) no grupo OALED comparado ao grupo OA. A terapia por FBM demonstrou ser efetiva sobre o equilibro redox e sobre a preserva??o da cartilagem articular em um modelo de OA induzida. / Disserta??o (Mestrado) ? Programa de P?s-Gradua??o em Reabilita??o e Desempenho Funcional, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2018. / Osteoarthritis (OA) has chronic-degenerative potential and inflammatory character. In addition to the inflammatory role, other factors, such as redox imbalance, appear to contribute to changes in the articular cartilage, the main articular structure affected. Photobiomodulation (PBM) using LED has been proposed for the treatment of OA by acting on degenerative cartilage processes, favoring antioxidant defenses and modulating oxidative stress markers. The aim of this study was to evaluate the effect of PBM therapy using LED (630 nm) on the histomorphometric aspects of articular cartilage and redox balance in knee OA induced by sodium monoiodoacetate in rats. Wistar rats were used, separated between the groups: Control; osteoarthritis (OA) and osteoarthritis + LED (OALED). In the OALED group, the LED (630 nm, 300 mW, 9 J / cm2, 0.3 W / cm2, 30 s, starting 24 h after induction, 3 times / week, 8 weeks) was applied. The euthanasia of the animals occurred 56 days after induction of OA, blood was collected for analysis of oxidative damage (TBARS), enzymatic antioxidant capacity (SOD and CAT activity) and the total antioxidant status of plasma through (FRAP). The right knee was used for the morphometry of cartilage by measuring the thickness and counting of chondrocytes. The OALED group had a higher average cartilage thickness and mean chondrocytes similar to the control group. It was also observed higher antioxidant enzymatic activity (SOD and CAT) and lower level of TBARS (P <0.05) in the OALED group compared to the OA group. PBM therapy has been shown to be effective on redox balance and preservation of articular cartilage in an induced OA model.

The thesis presents a rational path for the optimization of the selection of optical treatment parameters in photobiomodulation of human skin fibroblasts. The project begins with an extensive analysis of 90 bibliographic reports in photobiomodulation published between 1985 and 2015, and revealed major inconsistencies in optical parameters selected for clinical applications. Seeking greater clarity for optimal parameter choice, a systematic approach to disentangle the multiple factors underpinning the response of human dermal fibroblasts in vitro to visible and near-infra red (NIR) light was employed. Light-based devices were constructed to specifically and systematically screen the optical parameter window (i.e. wavelength, irradiance and dose) observed in literature. Additionally, critical culture and treatment conditions that have dramatic impact on the outcome of specific light treatment of these human skin dermal cells were identified. In particular, environmental oxygen concentration, cell confluency and serum concentration were all found to have a great effect on the response of dermal fibroblasts to light. In parallel, the induction of reactive oxygen species (ROS) by short visible wavelengths on two dermal fibroblast sub-populations or lineage, reticular and papillary, was monitored by live-cell imaging. The ROS species were found to be created in or close to mitochondria. Lastly, gene expression studies revealed a strong impact of short visible wavelengths, as compared to long and NIR wavelengths on both subpopulations of human dermal fibroblasts. In particular, blue light (450 nm) specifically down-regulated proliferation, metabolism and protein synthesis molecular pathways. At the protein level, 450-nm light inhibited the production of procollagen I in human reticular and papillary fibroblasts in a dose-dependent manner. Gene expression results were in agreement i.e., the same light parameter down-regulated collagen fiber genes, integrins and up-regulated collagenase MMP1. This thesis concludes with a chapter presenting a characterization of the accuracy of a potential translation tool for the prediction of optical photon density inside human skin.

Submitted by Suelen Reis (suziy.ellen@gmail.com) on 2013-04-23T17:39:54Z No. of bitstreams: 1 Tese - Gilberth Acioli.pdf: 3536665 bytes, checksum: a37b496b111b3eb77680d5e81b8fac30 (MD5) / Approved for entry into archive by Rodrigo Meirelles(rodrigomei@ufba.br) on 2013-05-08T12:01:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Gilberth Acioli.pdf: 3536665 bytes, checksum: a37b496b111b3eb77680d5e81b8fac30 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-08T12:01:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese - Gilberth Acioli.pdf: 3536665 bytes, checksum: a37b496b111b3eb77680d5e81b8fac30 (MD5) Previous issue date: 2010 / O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da fotobiomodulação laser (780nm, 50mW, 4x4J/cm2 = 16J/cm2, ϕ 0,5cm2, CW) associada ou não a implante de Enxerto Ósseo Cerâmico Bifásico e Reparação Óssea Guiada através da técnica de histologia, histomorfometria, espectroscopia Raman e Fluorescência laser no reparo de fraturas cirúrgicas fixadas com o sistema de fixação rígida (miniplacas) ou semi-rígida (fio de aço) em tíbias de coelhos. Foram utilizados 27 coelhos Oryctolagus que foram divididos em nove grupos e mantidos em gaiolas individuais em temperatura média de 22°C, ambientação dia/noite, alimentação sólida e água ad libidum. As fraturas foram produzidas sob anestesia geral (Ketamina 0,4ml/Kg IP e Xilazina 0,2ml/Kg IP). No período pós operatório os mesmos receberam em dose única, como terapia antimicrobiana (Pentabiótico 0,2ml/Kg IM) e como terapia antiinflamatória e analgésica (Banamine 0,1ml/Kg IM). Nos grupos II, III, IV e V foram realizadas as fraturas e os cotos ósseos fixados com sistema rígido (FIR). Nos grupos VI, VII, VIII e IX a fratura foi realizada e logo depois fixada com sistema semi-rígido (FISR). Em seguida, foi feita a colocação do enxerto e da membrana nos grupos III, V, VII e IX. Os animais dos grupos IV, V, VIII e IX foram irradiados durante 14 (catorze) dias, a cada 48 horas com uma dose de 16J/cm2, de forma pontual em 4 (quatro) regiões adjacentes a área da fratura óssea (4 x 4J/cm2). Os animais foram sacrificados no 30° dia pós-operatório através de overdose de anestesia geral (Ketamina e Xilazina IP) e administração de Cloreto de Potássio (5ml/Kg, IV). Em seguida os espécimes foram removidos, sendo metade encaminhado para análises histológica e histomorfométrica e a outra metade para análise por espectroscopia Raman. Antes da cirurgia e da morte animal a fluorescência laser foi medida. Histologicamente, observou-se um preenchimento das fraturas por um trabeculado ósseo maduro nos grupos onde houve o uso da associação laser, HATCP e ROG nos grupos tratados com FIR e FISR. Histomorfometricamente verificou-se maior neoformação óssea e maior deposição de colágeno, menor quantidade reabsorção óssea e de infiltrado inflamatório nos grupos nos quais o laser foi associado a HATCP. As análises por fluorescência laser (DIAGNOdent®) e por espectroscopia Raman, observaram-se diferenças significantes entre os grupos (p<0.001) entre os grupos tratados com FIR e FISR. A correlação de Pearson evidenciou uma correlação negativa entre as medidas de fluorescência e deslocamento Raman. Concluiu-se que a fotobiomodulação Laser infravermelho acelerou o reparo de fraturas ósseas e que quando o laser foi associado a HATCP e ROG esta causou aumento da deposição da HAC. Adicionalmente, o uso do DIAGNOdent® como instrumento de biópsia óptica pode ser útil. / Salvador

Submitted by Onia Arantes Albuquerque (onia.ufg@gmail.com) on 2018-10-19T15:16:25Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Silênio Souza Reis - 2018.pdf: 3761275 bytes, checksum: a116ca60c456d780cfa9ea5e3dc8363c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-10-22T11:16:35Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Silênio Souza Reis - 2018.pdf: 3761275 bytes, checksum: a116ca60c456d780cfa9ea5e3dc8363c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-10-22T11:16:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Silênio Souza Reis - 2018.pdf: 3761275 bytes, checksum: a116ca60c456d780cfa9ea5e3dc8363c (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-09-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The low-power LASER is a technology used in the area of ​​health as adjuvant therapy for various diseases. The use of conservative therapies as adjuncts to drug therapy, aim to potentiate therapeutic responses. There are currently some contraindications for the use of LASER in treatments of human patients with open wounds, tumor region and gravid uterus. Thus, zebrafish (D. rerio) is a consolidated organism as an experimental model in the biological, biomedical and environmental areas. The objective of the present work is to evaluate the development of embryos and larvae of zebrafish (D. rerio) exposed to low-power LASER. The LASER III flash with transverse beam output 0,028 cm2, power 100 mW, creep 35, 70 and 140 J / cm2, total energy of 1, 2 and 4 J (Joules), InGaAlP active medium, was used. The data were evaluated according to the normality behavior of Lilliefors using Fisher's exact test, t-test, Mann-Whitney, Kruskal-Wallis (post hoc-Dunn) and Linear Regression by the ORIGIN 7.0 program. The cumulative mortality rate and hatching in embryos (D. rerio) exposed to the LASER in the red spectrum 660 nm and infrared 830 nm 1, 2 and 4 J from 24 - 24 h to 96 hpf was not statistically significant in relation to the wavelength in energy doses in Joules (p ˃ 0,05), infrared laser 830 nm 4J, did not interfere in the development of embryos and larvae (D. rerio), when exposed from 24 - 24 h for a period of 216 hpf. The cumulative mortality rate in the control group was 23 % higher than in the LASER group and the hatching rate in the LASER group was statistically significant (p ˂ 0,05). The cumulative mortality rate in embryos and larvae (D. rerio) when exposed intensively to LASER was statistically significant, as was the hatching rate (p ˂ 0,05) for 96 hpf. There were no statistically significant differences for larval length between the control group compared to the LASER group 24 - 24 h and intensive LASER (p ˃ 0,05). The rate of heart rate in the LASER group 24 - 24 h was statistically significant in relation to the control group and the intensive LASER group (p ˂ 0,05). The rate of spontaneous movements was statistically significant when compared to the control group and the intensive LASER group (p ˂ 0,05). The rate of edema in the control group was statistically significant in relation to the LASER group 24 - 24 h for 96 hpf (p ˂ 0,05). The rate of edema in the intensive LASER group was not statistically significant; however, as in the LASER group 24 - 24 h, the edema in the control group was higher than in the LASER group. The scarcity of theoretical reference on this theme reinforces the pioneering of this work carried out in vivo. The results of this study highlight the importance of the use of embryos and larvae (D. rerio) as a model system in biological, environmental and biomedical research. Data analysis suggests that contraindications for low-power LASER irradiation in patients during the gestational period should be reviewed. / O LASER de baixa potência é uma tecnologia utilizada na área da saúde como terapia coadjuvante a diversas doenças. A utilização de terapias conservadoras como coadjuvantes a terapia medicamentosa, visam potencializar as repostas terapêuticas. Atualmente há algumas contraindicações para utilização do LASER em tratamentos de pacientes humanos com feridas abertas, região tumoral e útero gravídico. Sendo assim, o zebrafish é um organismo consolidado como modelo experimental nas áreas biológica, biomédica e ambiental. O objetivo do presente trabalho é avaliar o desenvolvimento de embriões e larvas do zebrafish (D. rerio) expostos ao LASER de baixa potência. Utilizou-se o flash LASERIII com saída transversa do feixe 0,028 cm2, potência 100 mW, fluência 35, 70 e 140 J/cm2, energia total de 1, 2 e 4 J(Joules), meio ativo InGaAlP. Os dados foram avaliados segundo o comportamento de normalidade Lilliefors através dos testes Exato de Fisher, teste t, Mann-Whitney, Kruskal-Wallis (post hoc-Dunn) e Regressão Linear pelo programa ORIGIN 7.0. A taxa de mortalidade acumulativa e eclosão em embriões (D. rerio) expostos ao LASER no espectro vermelho 660 nm e infravermelho 830 nm 1, 2 e 4 J de 24 - 24 h para 96 hpf não foi estatisticamente significativas em relação ao comprimento de onda em doses de energia em Joules (p ˃ 0,05), O LASER infravermelho 830 nm 4J, não interferiu no desenvolvimento de embriões e larvas (D. rerio), quando expostos de 24 - 24 h por um período de 216 hpf. A taxa de mortalidade acumulativa no grupo controle foi 23 % maior que no grupo LASER e a taxa de eclosão no grupo LASER foi estatisticamente significativa (p ˂ 0,05). A taxa de mortalidade acumulativa em embriões e larvas (D. rerio) quando expostos de forma intensiva ao LASER, foi estatisticamente significativa, assim como a taxa de eclosão (p ˂ 0,05) para 96 hpf. Não houve diferenças estatisticamente significativas para comprimento larval entre o grupo controle em relação ao grupo LASER 24 - 24 h e LASER intensivo (p ˃ 0,05). A taxa de batimentos cardíacos no grupo LASER 24 - 24 h foi estatisticamente significativo em relação ao grupo controle e ao grupo LASER intensivo (p ˂ 0,05). A taxa de movimentos espontâneos foi estatisticamente significativa, quando comparada ao grupo controle e ao grupo LASER intensivo (p ˂ 0,05). A taxa de edema no grupo controle foi estatisticamente significativa em relação ao grupo LASER 24 - 24 h para 96 hpf (p ˂ 0,05). A taxa de edema no grupo LASER intensivo não foi estatisticamente significativa, no entanto, assim como no grupo LASER 24 - 24 h, o edema no grupo controle foi maior que no grupo LASER. A escassez de referencial teórico sobre essa temática reforça o pioneirismo desse trabalho realizado in vivo. Os resultados desse estudo ressaltam a importância da utilização de embriões e larvas (D. rerio) como Sistema - modelo em pesquisas biológicas, ambientais e biomédicas. As análises dos dados sugerem que as contraindicações para irradiação com o LASER de baixa potência em pacientes durante o período gestacional sejam revistas.

Um dos desafios atuais da engenharia de tecidos é o desenvolvimento de biomateriais substitutos e/ou equivalentes que mimetizem o tecido normal. Os estudos empregando cultura celular em monocamada encontram limitações no que concerne às interações bidimensionais entre as células e experimentos utilizando animais, devido à elevada variabilidade, não conseguem predizer os resultados em humanos, comprometendo a sua relevância clínica. À vista disso, a cultura tridimensional de células (3D) utilizando um biomaterial fabricado para promover a proliferação e diferenciação celular tem sido utilizada para recriar a complexidade de um tecido normal, permitindo uma maior e complexa interação celular. Visando mimetizar o ambiente encontrado in vivo, este trabalho investiu no desenvolvimento de uma derme reconstituída (equivalente dérmico) in vitro utilizando como matriz biológica o colágeno, componente mais abundante da derme como suporte para os fibroblastos humanos, assim como na avaliação da fotobiomodulação com luz em 630 nm. Foi preparada uma esponja a partir do colágeno de serosa porcina 1,1% hidrolisado por 96 h. A caracterização do biomaterial foi realizada pela determinação da porosidade, do diâmetro dos poros, da absorção de fluidos e por ensaios de biocompatibilidade, uma vez que estes parâmetros são importantes para a proliferação e diferenciação celular na consequente formação do tecido in vitro. O biomaterial exibiu porosidade de 95,2%, com poros medianos de 44 &#956m estimados por porosimetria de injeção de mercúrio, além de canais com distância média entre as paredes de 78+/-14 &#956m estimado por MEV. Esses valores são considerados como ideais para um biosuporte de crescimento de fibroblastos. A absorção de água e meio de cultura foi de 95% e a esponja não apresentou citotoxicidade para a linhagem celular Vero. Adicionalmente, foi investigado o efeito de irradiação na cultura 3D com luz vermelha (dose 30 J/cm2), que mostrou fotobiomodulação na dose de 30 J/cm2 para cultura de células em monocamada e no início da fase de crescimento celular em cultura tridimensional. Por microscopia confocal, verificou-se que as células cultivadas na presença da esponja (cultura 3D), apresentaram diferenciação e secreção de matriz extracelular. Portanto, os resultados apresentados mostraram que a esponja de colágeno utilizada como biomaterial para suporte celular é eficiente para a produção de uma derme reconstituída (equivalente) in vitro e que a fotobiomodulação em 630 nm na dose de 30 J/cm2 de fato acelera o crescimento celular na matriz. / The development of biomaterials substitutes and/or equivalents to mimic normal tissue is a currently challenge in tissue engineering. Studies using cell monolayer culture presents limitations with respect to two-dimensional interactions between the cells, and experiments using animals cannot predict results in humans, due to the high viability, thus compromising their clinical relevance. In consequence, three-dimensional cell culture (3D) using a biomaterial designed to promote cell proliferation and differentiation has been used to recreate the complexity of a normal tissue, allowing a larger and complex cellular interaction. Aiming to mimic the in vivo environment, the present work refers to create a reconstituted dermis (dermal equivalent) in vitro using collagen, the most abundant component of the dermis, as biological matrix, as support for human fibroblasts, as well evaluate the photobiomodulation with light at 630 nm. First, a sponge was prepared from serous 1.1% porcine collagen hydrolyzed for 96 h. The biomaterial was characterized by determination of its porosity, pore diameter, the fluid absorption and the biocompatibility assays, since these parameters are important to the cell proliferation and differentiation resulting in the in vitro tissue formation. The biomaterial showed porosity of 95.2%, with a median pore of 44 &#956M estimated by mercury porosimetry injection, and channels with an average distance between the walls of 78+/-14 &#956M estimated by SEM. These values are considered as ideal for a biosupport fibroblast growth. The absorption of water and growth medium was 95%, and the sponge showed no cytotoxicity for the Vero cell line. Additionally, it was investigated the effect of irradiation in 3D culture with red light (dose 30 J/cm2), that showed photobiomodulation on the dose 30 J/cm2, for culturing cells in monolayer and in the early-stage of the cell growth in three-dimensional culture. By confocal microscopy, it was verified that the cells cultured in the presence of the sponge (3D culture), allows differentiation and extracellular matrix secretion. Therefore, the results showed that the collagen sponge used as a biomaterial for cell support and the photobiomodulation at 630 nm and dose of 30 J/cm2 are efficient for the production of a reconstructed dermis (equivalent) in vitro.