O objetivo deste estudo clinico duplo-cego, randomizado, controlado foi avaliar a resposta pós-operatória de pacientes após cirurgia de extração de terceiros molares inclusos que receberam a irradiação com diferentes protocolos do terapia de fotobiomodulação. Sessenta pacientes foram recrutados de acordo com os critérios de inclusão e exclusão previamente estabelecidos e distribuídos nos 2 grupos experimentais (irradiados) e no grupo placebo (não-irradiado); n=20. Para o grupo 1: ? 660nm, 100mW, 36J/cm2, 1J por ponto, 10 segundos/por ponto (3 pontos intra-oral 6 extra oralmente). Para o grupo 2: ? 808nm, 100mW, 107 J/cm2, 3J por ponto, 30 segundos/por ponto (3 pontos intra-oral 6 extra oralmente). Para todos os grupos os pacientes foram irradiados imediatamente após o procedimento cirúrgico e às 48h. No grupo placebo foi utilizado um laser com o recobrimento da ponta, não permitindo a saída da luz no tecido alvo. Depois da cirurgia todos os participantes foram orientados quanto as recomendações pós-operatórias de rotina. Os pacientes foram instruídos a preencher um diário para avaliação da intensidade da dor pós-operatória em uma escala numérica de dor do máximo ao mínimo após o término do efeito do anestésico, nos períodos de 4, 6, 8, 24 e 48 horas. Para avaliar o processo inflamatório foram usados dois parâmetros: trismo (avaliado mediante a máxima abertura inter-incisiva) e edema (avaliada mediante três medições extra-orais, por meio de uma fita métrica flexível). Para avaliar a deiscência foi realizada uma escala analógica visual e com um medidor de ponta seca com 4 escores (não existe deiscência, leve 5 mm, moderada 10 mm e grave 20 mm ou mais). As variáveis de inflamação e deiscência foram avaliadas em tres momentos diferentes por um observador calibrado no: pré-operatório, às 48 horas e aos 7 dias. Os valores obtidos foram submetidos à análise estatística para determinação da homogeneidade e normalidade da amostra. A partir desta análise foi escolhido o teste estatístico mais adequado para a comparação entre os grupos experimentais realizados. Os resultados revelaram uma correlação positiva entre a irradiação com terapia de fotobiomodulação e as variáveis estudadas. O laser infravermelho apresentou melhores resultados em termos de dor, trismo, edema e deiscência em relação ao laser vermelho, embora os resultados não forneçam dados estatisticamente significativos quando comparados ao grupo placebo. No entanto, os efeitos do laser após a cirurgia de terceiros molares requer mais estudos devido à grande aplicabilidade na área. / The objective of this random controlled double-blind clinical study, is to assess the post-operatory response of patients after a surgery of extraction of included third molars; that received radiation with different protocols of Low Level Laser. Sixty patients were recruited according to the inclusion and exclusion criteria previously established and distributed into two experimental groups (radiated) and into a placebo group (not radiated); n=20. For group 1: ? 660nm, 100mW, 36J/cm2, 1J per point, 10 seconds/per point (3 points intra-oral 6 extra orally). For group 2: ? 808nm, 100mW, 107 J/cm2, 3J per point, 30 seconds/per point (3 points intra-oral 6 extra orally). For all the groups the patients were irradiated immediately after the surgical process and 48 hours after. In the control group a covered tip laser was used; not allowing the exit of the light towards the alveoli tissue. After the surgery all the participants were learnt about the current post operatory recommendations. Patients were instructed to complete a diary to evaluate postoperative pain intensity on a numerical scale of pain from the maximum to the lowest after the end of the anesthetic effect, in the periods of 4, 6, 8, 24 and 48 hours. To assess the inflamatory process, two parameters were used: Trismus (a measure of the maximum inter-incisor separation) and edema (assessed by three extra-oral measurements done with a flexible measuring tape). To assess the dehiscence, an analogue scale with 4 data fields was used (nonexistent dehiscence, slight 5 mm, moderate 10 mm and severe 20 mm or more). The variables of inflamation and dehiscence were assessed in three different moments by a qualified observer in: pre-operatory, after 48 hours and after 7 days. The values obtained were subjected to a statistic analysis for determination of homogeneity and normality of the sample. From this analysis, the most suitable statistic test was chosen for comparison between experimental groups. The outcome showed a positive correlation between photobiomodulation therapy and the studied variables. The infrared laser showed better results in terms of pain, trismus, edema and dehiscence in comparison to the red laser, although the results did not provide meaningful statistic data when comparing to the control group. Nevertheless, the effects of laser after a surgery of third molars require further studies due to the wide application in the area.

Extrações de terceiros molares inferiores e colocações de implantes são cirurgias comuns na prática clínica Odontológica que podem proporcionar, mesmo com as devidas precauções, a parestesia. A terapia de fotobiomodulação com laser de baixa potência estimula a reparação tecidual a partir da absorção dessa luz pelo tecido irradiado. Essa terapia pode ser realizada com a aplicação do laser sobre trajetória do nervo comprometido (laserterapia) ou, sobre pontos de acupuntura da face (laseracupuntura). Este ensaio clínico randomizado, cego, controlado, em paralelo, avaliou o retorno sensitivo do nervo alveolar inferior quando utilizadas uma das duas técnicas de fotobiomodulação em pacientes com parestesia, pós-extração de terceiros molares inferiores ou cirurgia de implantes. Foram selecionados 60 participantes que tiveram a deficiência sensitiva, após o procedimento cirúrgico, acometendo o nervo alveolar inferior. Os participantes da pesquisa foram aleatoriamente divididos em três grupos (n=20): Grupo 1 - medicação sistêmica - composto de ribonucleotídeos pirimidínicos, uridina trifosfato trissódio, citidina monofosfato dissódio (ETNA®, 01 cápsula de 8/8 hrs, 30 dias); Grupo 2 - laserterapia - 808 nm, 100 mW, 40s/ponto, 4 J de energia/ponto, distância de 1 cm entre cada ponto de irradiação, intra e extra-oral, modo contínuo, diâmetro do feixe de 0,0434 cm2 no trajeto do laser alveolar inferior lado comprometido; Grupo 3 - laseracupuntura - irradiação nas mesmas condições que grupo 2, porém apenas na região extra-oral, nos pontos de acupuntura do lado comprometido: E-4 (dicang), M-CP-18 (Jiachengjiang), VC-24 (chengjiang), E-5 (daying), E-6 (jiache) e ponto A1 (YNSA). Em seguida, foram submetidos a um protocolo padronizado de avaliação, que consistiu em 6 testes de limiares de: percepção de parestesia; térmica ao quente/frio; percepção mecânica vibratória; discriminação de dois pontos; percepção de superfície de dor e tatil. A avaliação do grupo 1 foi realizada na primeira sessão clínica (pré-intervenção terapêutica), imediatamente após a finalização da intervenção da medicação sistêmica (após 4 semanas) e 1 mês após o término das intervenção (após 8 semanas da primeira avaliação). Os Grupo 2 e 3 foram avaliados na primeira sessão clínica (pré-intervenção terapêutica), após 10 sessões de tratamento (5 semanas) e após 20 sessões de tratamento (10 semanas da primeira avaliação). Os dados coletados nas avaliações foram transcritos para fichas específicas e considerados para análise estatística. O único limiar que apresentou efeito de interação entre grupo e tempo (primeira, segunda e terceira avaliação) foi o limiar de percepção de parestesia, p=0,002. A partir de Tukey foi constatada diferença estatistica significante entre os grupos nos testes de limiares de percepção: térmica ao frio (grupo 1=3; 1 ?2; 2=3), p=0,04; de superfície de dor na mucosa anterior (grupo 1=2=3), p=0,04; corpo mandibular posterior (grupo 1=2; 1?3,2=3), p=0,01; lábio (grupo 1=2;1?3; 2?3), p=0,04; e mento (grupo 1=2;1?3;2?3), p=0,05. Não foram encontradas outras diferenças significativas nos outros testes de comparação de grupo. Tais resultados apontam que ambas as terapias de fotobiomodulação foram benéficas no tratamento de parestesia. / Mandibular third molar extractions and implant surgeries are common in the dental clinical practice and can promote, even with precautions, paresthesia. Photobiomodulation Therapy (PBMT) using low power laser stimulates tissue repair due to the absorption of light. The PBMT can be performed with the laser application over the entire trajectory on the compromised nerve (laser therapy) or only in acupuncture\'s face points (laser acupuncture). This randomized, blinded, parallel, controlled trial study aimed to evaluate the sensitive return when one of the two PBM techniques were used in patients with paresthesia caused by mandibular third molar extraction or implant surgery. Sixty volunteers reporting sensory deficiency on the inferior alveolar nerve were selected. Volunteers were randomly divided into three groups (n=20): Group 1 - systemic medication: pyrimidine ribonucleotides, uridine triphosphate trisodium, dissodium cytidine monophosphate (ETNA®, 01 capsules, 8/8 hrs, 30 days); Group 2 - laser therapy: 808 nm, 100 mw, 40s /point, 4 J energy /point, 1 cm distance between each irradiation point, intra- and extra-oral, continuous mode, beam diameter of 0.0434 cm2, following the injured alveolar laser pathway; Group 3 - laseracupuncture: irradiated in the same conditions as group 2, but only at the extra-oral region, in acupuncture points of the compromised side: E-4 (dicang), M-CP-18 (Jiachengjiang), VC-24 (chengjiang), E-5 (daying), E-6 (jiache) e ponto A1 (YNSA). Then, volunteers underwent a standardized protocol of evaluation, which consisted of 6 tests: test of perception of paresthesia; thermal perception (hot/cold); mechanical vibration perception; two-point discrimination test; and threshold of pain and tatil surface perceptions. Group 1 was evaluated at the first clinical session (pre-intervention), immediately after the end of the intervention (after 4 weeks) and 1 month after the end of the intervention (after 8 weeks of the first evaluation). Groups 2 and 3 were evaluated at the first clinical session (pre-intervention), after 10 treatment sessions (5 weeks) and after 20 treatment sessions (10 weeks of the first evaluation). The data collected in the evaluations were transcribed for specific records and considered for statistical analysis. The only threshold that presented interaction effect between group and evaluation (first, second and third) was the perception threshold of paresthesia, p = 0.002. From Tukey statistically significant difference was found between the groups in the tests of perception thresholds : thermal to cold (group 1 = 3; 1 ? 2; 2 = 3), p = 0.04; of surface of anterior mucosal pain (group 1 = 2 = 3), p = 0.04; posterior mandibular body (group 1 = 2; 1 ? 3,2 = 3), p = 0.01; lip (group 1 = 2; 1 ? 3; 2 ? 3), p = 0.04; (group 1 = 2; 1 ? 3; 2 ? 3), p = 0.05. No other significant differences were found between the groups in other tests. These results indicate that both photobiomodulation therapies have been beneficial in the treatment of paresthesia.

Light and optical techniques have made a profound impact on modern medicine both in diagnostics and in therapy. Therapeutic action of light is based on photomechanical, photothermal, photochemical and photobiological interactions, depending on the wavelength, power density, exposure time and optical properties of tissue and cells. Last decade experienced a growing rise of commercial devices for management of hair growth, where all of them are based on low levels of light resulting into photobiological, non-thermal interaction of photons with cells, a process that recently has received an official term ‘photobiomodulation’. However, the design and analysis of the reported clinical studies are highly debated in a wider scientific community. The picture is further complicated by a virtual lack of proof about the exact molecular targets that mediate the physiological response of skin and hair follicles (HF) to low levels of light. The goal of this project was to investigate the expression of light-sensitive receptors in the human HF and to study the impact of UV-free blue light on hair growth ex vivo. The expression of Cryptochromes 1 and 2 (CRY1, 2), Opsin 2 and 3 (OPN2 and OPN3), but not other Opsins 1, 4 and 5 was detected in the distinct compartments of skin and anagen HF. Evaluation of the physiological role of detected light-sensitive receptors on hair growth was performed by the modulation of photoreceptors activity in HF ex vivo model. HFs treated with KL001, a stabilizer of CRY1 protein that lengthens the circadian period, delayed HF anagen-catagen transition; while silencing of CRY1 induced premature catagen development accompanied by reduced cell proliferation. Silencing of CRY1 in the HF outer root sheath (ORS) cells in vitro caused downregulation of ii genes involved in the control of proliferation; including the cyclin dependent kinase 6 (CDK6). OPN3 also had a positive effect on metabolic activity and proliferation of the ORS cells in vitro. OPN3 silencing resulted in the altered expression of genes involved in the control of proliferation and apoptosis. Investigated CRY1, OPN2 and 3 greatly absorb in the blue to green-region of the visible spectrum. This led us to investigate the effect of blue light on HF growth. Daily treatment with blue light (453 nm, 3.2 J/cm2, 16 nm full width half maximum) prolonged anagen phase in HF ex vivo that was associated with sustained proliferation. In addition, blue light (3.2 J/cm2) significantly stimulated proliferation of ORS cells in vitro. This effect was abrogated by silencing of OPN3. To summarize, CRY 1, OPN 2 and OPN 3 are expressed in the distinct compartments of the HF, including HF stem cells. Blue light (453 nm) at low radiant exposure exerts a positive effect on hair growth ex vivo, potentially via interaction with OPN3. The further research should be conducted to decipher interactions between blue light and the investigated receptors in the HFs. In addition, the beneficial effect of blue light at low radiant exposure on hair growth raises a possibility of increasing therapeutic efficacy when combined with topical chemistry used for management of hair growth.

This study aims to evaluate the effect of a drug in order to avoid the appearance of side effects of human pulp fibroblasts. The groups were divided into: CTR with culture medium with fibroblasts; CL, FTL only; AA, Aloe vera with distilled water; AL, Aloe vera with distilled water and FTL; HA, calcium hydroxide P.A. With distilled water; HL, calcium hydroxide P.A. With distilled water and FTL; HAA, calcium hydroxide P.A. With Aloe vera and distilled water; HAL, calcium hydroxide P.A. With Aloe vera, distilled water and FTL. Cytotoxicity evaluation was performed with the MTT reagent at 24, 48 and 72 h, for the evaluation of genotoxicity the micronucleus test was used in 24 h. At 24 h, the CL group presented a greater media of cellular viability, and the HA showed lower mean but stimulated greater number of cell division. At 48 h, the CL group presented a higher medium of cellular viability of high genotoxicity, and the HAL showed lower mean. The AL group showed a higher percentage of surviving cells in 72 h with statistic different from the HA and HL groups (p <0.05). (P <0.001) and to the AA group (p <0.01). The AL group exhibited high genotoxicity with significant results when the CTR group (p <0.001) and the AA group (p <0.01). It is concluded that Aloe vera allowed a greater cell viability in human pulp fibroblasts in the presence of calcium hydroxide, with the increase of the genotoxicity increase in this association. Calcium hydroxide and an FTL showed higher cytotoxicity. / Este estudo objetiva avaliar in vitro o efeito da Aloe vera associada a medicamento de uso endodôntico combinados ou não a FTL em fibroblastos pulpares humanos FP6. Os grupos foram divididos em: CTR com meio de cultura com fibroblastos; CL, apenas FTL; AA, Aloe vera com água destilada; AL, Aloe vera com água destilada e FTL; HA, hidróxido de cálcio P.A. com água destilada; HL, hidróxido de cálcio P.A. com água destilada e FTL; HAA, hidróxido de cálcio P.A. com Aloe vera e água destilada; HAL, hidróxido de cálcio P.A. com Aloe vera, água destilada e FTL. A avaliação da citotoxicidade sucedeu-se com o reagente MTT em 24, 48 e 72 h e, para avaliação da genotoxicidade utilizou-se o teste de micronúcleo em 24 h. Em 24 h, o grupo CL apresentou a maior média de viabilidade celular, e o HA mostrou menor média mas estimulou maior número de divisão celular. Em 48 h, o grupo CL apresentou a maior média de viabilidade celular apesar da elevada genotoxicidade, e o HAL mostrou menor média. O grupo AL demonstrou maior percentual de células sobreviventes em 72 h com diferença estatística dos grupos HA e HL (p<0,05). O grupo AL exibiu alta genotoxicidade tendo resultados significantes quando em comparação com o grupo CTR (p<0,001) e ao grupo AA (p<0,01). Conclui-se que a Aloe vera permitiu uma maior viabilidade celular em fibroblastos pulpares humanos na presença do hidróxido de cálcio, contudo houve aumento da genotoxicidade nessa associação. Já o hidróxido de cálcio e a FTL apresentaram maior citotoxicidade.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-07-16T20:01:20Z No. of bitstreams: 1 Beatriz Guimarães Ribeiro.pdf: 1467862 bytes, checksum: d166e20babcfe778cdc4c7cf5708fc53 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-16T20:01:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Beatriz Guimarães Ribeiro.pdf: 1467862 bytes, checksum: d166e20babcfe778cdc4c7cf5708fc53 (MD5) Previous issue date: 2017-02-23 / The low level laser therapy (LLLT) is a resource capable of modulating in a positive way the different stages of the muscle repair process. However, little has been described about its effects when applied prior to injury, associated or not with post-injury treatment. The general objective of the present study was to evaluate the effect of LLLT applied prior to the muscle injury associated or not to the post-injury application on the rat skeletal muscle repair process. The aim of article 1 was to evaluate the effect of infrared LLLT applied prior to cryoinjury on the expression of IL-6, MyoD and myogenin. The aim of article 2 was to evaluate the effect of red and infrared LLLT prior to cryoinjury associated or not with post-injury application on oxidative stress. The aim of article 3 was to evaluate the effect of infrared LLLT applied prior to injury with or without post-injury application on the gene expression and protein synthesis of inflammatory cytokines TNF-α and IL-6, and muscle morphology. For the three studies, 205 Wistar rats were divided into the following experimental groups: Control; Injury; LLLT 660 nm prior to injury; LLLT 780 nm prior to injury; LLLT 660 nm pre- and post-injury; and LLLT 780 nm pre- and post-injury. The cryoinjury consisted of two applications of cane cooled in liquid nitrogen in the anterior tibial muscle (TA). The injured groups were evaluated at 1, 3, 7 and 14 days after injury (only for oxidative stress analysis, evaluation occurred at 1, 3, and 7 days). LLLT irradiation was performed with the AsGaAl laser (780 nm) at the parameters of 10 J/cm²; 40 mW; 10 seconds per point; 8 points; 3.2 J. At the end of the protocol, TA muscles were carefully removed for analysis of oxidative stress by lipid peroxidation (LPO) by chemiluminescence initiated by t-BOOH, protein oxidation through the carbonyl damage assay, and analysis of antioxidant enzymes: catalase (CAT), superoxide dismutase (SOD) and glutathione peroxidase (GPx). TNF-α and IL-6 cytokines were analyzed by quantitative real-time PCR for the detection of gene expression. In addition, a morphological analysis was performed by staining with hematoxylin and eosin. TNF-α and IL-6 cytokines were analyzed by ELISA for protein expression. Data were expressed as mean and standard error of the mean because they were parametric and the comparison between the groups was performed by ANOVA/Tukey (p<0.05). The results of article 1 demonstrate a reduction in the levels of IL-6 mRNA in the group irradiated prior to the injury, concluding that the LBP applied prior to injury was able to modulate positively this inflammatory cytokine, but had no effect on the myogenic regulatory factors MyoD and myogenin in the evaluated parameters. The results of article 2 containing the oxidative stress analysis showed that the irradiated groups presented reduction of the lipoperoxidation and positive modulation of the antioxidant enzymes during the muscle repair process, concluding the red and infrared laser were able to modulate positively the oxidative stress, being the most effective infrared laser in the modulation of antioxidant enzymes. The results of article 3 demonstrated a reduction in the gene expression of TNF-α in the group irradiated prior to injury. In the pre-and post-injury irradiated group, IL-6 and TNF-α mRNA levels increased during the skeletal muscle repair process, concluding that the infrared laser was able to positive modulation these inflammatory cytokines in the two forms of application. Therefore, it is concluded that the LLLT irradiated prior to injury associated or not with the post-injury application has a beneficial effect on inflammatory cytokines and oxidative stress during the repair of the skeletal muscle of rats. / O laser de baixa potência (LBP) é um recurso capaz de modular de forma positiva as diferentes etapas do processo de reparo muscular. Contudo, pouco há descrito sobre seus efeitos quando aplicado previamente a uma lesão, associado ou não a um tratamento pós-lesão. O objetivo geral do presente estudo foi avaliar o efeito do LBP aplicado previamente à lesão muscular associado ou não a aplicação pós-lesão sobre o processo de reparo musculo esquelético de rato. O objetivo do artigo 1 foi avaliar o efeito do LBP infravermelho aplicado previamente à criolesão sobre a expressão de IL-6, MyoD e miogenina. O objetivo do artigo 2 foi avaliar o efeito do LBP vermelho e infravermelho previamente a criolesão associado ou não a aplicação pós-lesão sobre o estresse oxidativo. O objetivo do artigo 3 foi avaliar o efeito do LBP infravermelho aplicado previamente à criolesão associado ou não a aplicação pós-lesão sobre a expressão gênica e síntese proteica das citocinas inflamatórias TNF-α e IL-6, e morfologia muscular. Para a realização dos três estudos, foram utilizados 205 ratos Wistar, divididos nos seguintes grupos experimentais: Controle; Somente lesão; LBP 660 nm previamente à lesão; LBP 780 nm previamente à lesão; LBP 660 nm pré e pós-lesão; e LBP 780 nm pré e pós-lesão. A criolesão consistiu de duas aplicações de bastão resfriado em nitrogênio líquido no músculo tibial anterior (TA). Os grupos lesionados foram avaliados em 1, 3, 7 e 14 dias após a lesão (somente para análise de estresse oxidativo, a avaliação ocorreu em 1, 3, e 7 dias). A irradiação com LBP foi realizada com o laser AsGaAl (780 nm) nos parâmetros de 10 J/cm²; 40 mW; 10 segundos por ponto; 8 pontos; 3.2 J. Ao término do protocolo, os músculos TA foram retirados cuidadosamente para análise de estresse oxidativo pela lipoperoxidação (LPO) por quimiluminescência iniciada por t-BOOH, pela oxidação proteica através do ensaio de dano as carbonilas, e pela análise das enzimas antioxidantes: catalase (CAT), superóxido dismutase (SOD) e glutationa peroxidase (GPx). Também foram analisadas as citocinas TNF-α e IL-6 por PCR em tempo real quantitativo para detecção da expressão gênica. Além disso, foi realizada análise morfológica por coloração com hematoxilina e eosina. As citocinas TNF-α e IL-6 também foram analisadas por ELISA para detecção da expressão proteica. Os dados foram expressos em média e erro-padrão da média por se apresentarem paramétricos e a comparação entre os grupos foi realizada pelo ANOVA/ Tukey (p<0,05). Os resultados do artigo 1 demonstram redução nos níveis de mRNA IL-6 no grupo irradiado previamente à lesão, concluindo que o LBP aplicado previamente à lesão foi capaz de modular positivamente essa citocina inflamatória, mas não teve efeito sobre os fatores regulatórios miogênicos MyoD e miogenina nos parâmetros avaliados. Os resultados do artigo 2 contendo a análise de estresse oxidativo demonstram que os grupos irradiados apresentaram redução da lipoperoxidação e modulação positiva das enzimas antioxidantes durante o processo de reparo muscular, concluindo que tanto o laser vermelho como infravermelho foram capazes de modular positivamente o estresse oxidativo sendo o laser infravermelho mais eficaz na modulação de enzimas antioxidantes. Os resultados do artigo 3 demonstram uma redução na expressão gênica de TNF-α no grupo irradiado previamente a lesão. Já no grupo irradiado pré e pós-lesão, houve aumento dos níveis de mRNA IL-6 e TNF-α durante o processo de reparo musculo esquelético, concluindo que o laser infravermelho foi capaz de modular de forma positiva essas citocinas inflamatórias nas duas formas de aplicação. Portanto, conclui-se de forma geral que o LBP utilizado previamente à lesão associado ou não a aplicação pós-lesão tem efeito benéfico sobre a modulação de citocinas inflamatórias e do estresse oxidativo durante o reparo do músculo esquelético de ratos.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-07-19T19:06:04Z No. of bitstreams: 1 Fernanda Cordeiro da Silva.pdf: 1381976 bytes, checksum: fbe6ec859374d855f93a0382db62b771 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-19T19:06:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernanda Cordeiro da Silva.pdf: 1381976 bytes, checksum: fbe6ec859374d855f93a0382db62b771 (MD5) Previous issue date: 2017-11-30 / Background: Spinal injury is a devastating condition with physical, emotional, psychological, social and financial repercussions for affected individuals and their families. This type of injury impedes the performance of functional activities due to the partial or complete interruption of ascending sensory and descending motor pathways. Photobiomodulation is a noninvasive treatment that has been widely used in neurotrauma and neurodegenerative diseases. In the present study, low-level laser therapy was administered in cases of spinal cord injury to investigate the sensory responses and perceptions of patients. The aim of the present study was to investigate the sensory and motor response and perception of the patients with spinal cord injuries submitted to photobiomodulation therapy. Methods/Design: The 25 volunteers were randomly allocated in the control group-placebo more physical therapy or group photobiomodulation more physical therapy. Photobiomodulation was performed three times per week for a total of 12 sessions. A wavelength of 810 nm was used, 5 points being 25 J per point, exactly on the region of the cord where it was injured, radiant power, 120 mW, 208 seconds per point and Radiant Exposure 983 J/cm2. All individuals were evaluated using the ASIA scale, a sensory perception questionnaire and electromyography to assess the motor response before, immediately after and 30 days after photobiomodulation. The control group-placebo was subjected to photobiomodulation simulated, that is, without emission of radiation. The data were analyzed statistically, with α < 0.05 considered indicative of statistical significance. Results: Thirteen types of sensorimotor changes were reported, with a significant difference between groups in relation to "trait contractions." In the intragroup analysis of the photobiomodulation group, statistically significant differences were found between the pre-intervention and immediate post-sensory sensory evaluations, as well as between sensory evaluations after immediate intervention and 30 days after photobiomodulation. No significant differences were found in the control group between any of the evaluation times. In the intra-group analysis of the laser group, median frequency values of the brachial biceps and femoral quadriceps muscles were higher at rest and during isotonic contraction 30 days after photobiomodulation. Conclusion: In the present study, phototherapy was effective in promoting a motor and sensory response in individuals with spinal cord injuries, so the results suggest that photobiomodulation may be a promising approach for the treatment of sensorimotor changes in patients with lesions of the spinal cord. / Introdução: A lesão medular é uma condição devastadora com repercussões físicas, emocionais, psicológicas, sociais e financeiras para os indivíduos afetados e suas famílias. Este tipo de lesão impede o desempenho de atividades funcionais devido à interrupção parcial ou total das vias motoras sensoriais e descendentes e ascendentes. A fotobiomodulação é um tratamento não invasivo amplamente utilizado em neurotrauma e doenças neurodegenerativas. No presente estudo, a fotobiomodulação foi administrada na medula espinhal lesada com objetivo de investigar as respostas sensório-motoras e as percepções dos pacientes após o tratamento. Métodos: Os 25 voluntários foram alocados aleatoriamente no grupo controle-placebo mais fisioterapia ou grupo fotobiomodulação mais fisioterapia. A fotobiomodulação foi realizada três vezes por semana com um total de 12 sessões. Foi utilizado o comprimento de onda de 810 nm, 5 pontos sendo 25 J por ponto, exatamente sobre a região da medula onde foi lesada, potencia radiante 120 mW, 208 segundos por ponto, exposição radiante 983 J/cm². Todos os indivíduos foram avaliados utilizando a escala ASIA, a entrevista de percepção sensorial e eletromiografia para avaliar a resposta motora antes, imediatamente após e 30 dias após a fotobiomodulação. O grupo controle-placebo foi submetido à fotobiomodulação simulada, ou seja, sem emissão da radiação. Os dados foram analisados estatisticamente, com um α <0,05 considerado indicativo de significância estatística. Resultados: Foram relatados 13 tipos de alterações sensório-motoras, com uma diferença significativa entre os grupos em relação aos esboços de contrações. Na análise intragrupo, no grupo fotobiomodulação, foram encontradas diferenças estatisticamente significantes entre as avaliações sensoriais pré-intervenção e pós imediata, bem como, entre avaliações sensoriais após intervenção imediata e 30 dias após a fotobiomodulação. Não foram encontradas diferenças significativas no grupo controle em quaisquer uns dos tempos avaliados. Na análise intragrupo, no grupo fotobiomodulação, os valores de freqüência mediana do bíceps braquial e do quadríceps femoral foram maiores em repouso e durante a contração isotônica 30 dias após a fotobiomodulação. Conclusão: No presente estudo, a fototerapia foi efetiva na promoção de uma resposta motora e sensorial em indivíduos com lesões da medula espinhal, sendo assim, os resultados sugerem que a fotobiomodulação pode ser uma abordagem promissora para o tratamento de alterações sensório-motoras em pacientes com lesões da medula espinhal.

Light and optical techniques have made a profound impact on modern medicine both in diagnostics and in therapy. Therapeutic action of light is based on photomechanical, photothermal, photochemical and photobiological interactions, depending on the wavelength, power density, exposure time and optical properties of tissue and cells. Last decade experienced a growing rise of commercial devices for management of hair growth, where all of them are based on low levels of light resulting into photobiological, non-thermal interaction of photons with cells, a process that recently has received an official term ‘photobiomodulation’. However, the design and analysis of the reported clinical studies are highly debated in a wider scientific community. The picture is further complicated by a virtual lack of proof about the exact molecular targets that mediate the physiological response of skin and hair follicles (HF) to low levels of light. The goal of this project was to investigate the expression of light-sensitive receptors in the human HF and to study the impact of UV-free blue light on hair growth ex vivo. The expression of Cryptochromes 1 and 2 (CRY1, 2), Opsin 2 and 3 (OPN2 and OPN3), but not other Opsins 1, 4 and 5 was detected in the distinct compartments of skin and anagen HF. Evaluation of the physiological role of detected light-sensitive receptors on hair growth was performed by the modulation of photoreceptors activity in HF ex vivo model. HFs treated with KL001, a stabilizer of CRY1 protein that lengthens the circadian period, delayed HF anagen-catagen transition; while silencing of CRY1 induced premature catagen development accompanied by reduced cell proliferation. Silencing of CRY1 in the HF outer root sheath (ORS) cells in vitro caused downregulation of ii genes involved in the control of proliferation; including the cyclin dependent kinase 6 (CDK6). OPN3 also had a positive effect on metabolic activity and proliferation of the ORS cells in vitro. OPN3 silencing resulted in the altered expression of genes involved in the control of proliferation and apoptosis. Investigated CRY1, OPN2 and 3 greatly absorb in the blue to green-region of the visible spectrum. This led us to investigate the effect of blue light on HF growth. Daily treatment with blue light (453 nm, 3.2 J/cm2, 16 nm full width half maximum) prolonged anagen phase in HF ex vivo that was associated with sustained proliferation. In addition, blue light (3.2 J/cm2) significantly stimulated proliferation of ORS cells in vitro. This effect was abrogated by silencing of OPN3. To summarize, CRY 1, OPN 2 and OPN 3 are expressed in the distinct compartments of the HF, including HF stem cells. Blue light (453 nm) at low radiant exposure exerts a positive effect on hair growth ex vivo, potentially via interaction with OPN3. The further research should be conducted to decipher interactions between blue light and the investigated receptors in the HFs. In addition, the beneficial effect of blue light at low radiant exposure on hair growth raises a possibility of increasing therapeutic efficacy when combined with topical chemistry used for management of hair growth.

A terapia de fotobiomodulação (PBMT do inglês photobiomodulation therapy) exerce efeitos benéficos em processos relevantes para a regeneração tecidual. A técnica de membranas celulares (CSs; cell sheets) pode gerar grande quantidade de células organizadas em uma matriz extracelular (MEC) produzida por essas células. A constituição de MEC das CSs pode ser de importância para a regeneração de tecidos. O colágeno tipo I, a fibronectina e a tenascina são proteínas da MEC já detectadas em CSs de células-tronco da polpa dentária humana. O objetivo deste estudo foi investigar os efeitos de diferentes parâmetros de PBMT sobre a arquitetura (histologia), composição proteica (Western blotting e imunoistoquímica) e ultraestrutura (MEV e MET) da MEC de CSs de células-tronco da polpa dental humana. As células-tronco foram descongeladas e recaracterizadas através da análise de seu perfil imunofenotípico avaliado pela expressão de moléculas de superfície utilizando citometria de fluxo para marcadores associados a células-tronco mesenquimais (MSC do inglês mesenchymal stem cells; CD105, CD146 e CD44) e não associados (CD45, CD34 e CD14). As CSs foram formadas em placas de cultivo celular após 15 dias em cultura em meio clonogênico suplementado com vitamina C (20 ?g/ml). As culturas celulares foram alocadas em 3 grupos experimentais diferentes, como segue: Controle: nenhum tratamento adicional; PBMT1 e PBMT2. A PBMT foi realizada com um laser diodo vermelho contínuo, aplicando-se os seguintes parâmetros gerais: 660nm, 20mW, 0,028cm2 e 0,71W/cm2. Os parâmetros do PBMT1 foram: 4s, 3J/cm2 e 0,08J por ponto, e o PBMT2: 7s, 5J/cm2 e 0,14J por ponto. As irradiações foram realizadas em dias alternados durante todo o período do experimento, em modo pontual (5 pontos / poço ou 13 por placas de 100 mm de diâmetro) em contato com a base da placa. Após a formação das CSs, 15 dias após o plaqueamento, estas foram submetidas a análises histológica, imunoistoquímica, Western blotting, microscopia eletrônica de transmissão e de varredura. Comparações estatísticas foram realizadas (p <0,05). As células apresentaram perfil imunofenotípico clássico de MSCs, mostrando a expressão de marcadores associados a MSCs, enquanto a expressão dos marcadores não associados a MSCs estavam ausentes. O colágeno tipo I, colágeno tipo III e fibronectina estavam presentes no MEC das CSs. Western blotting revelou maior síntese de fibronectina nas CSs submetidas ao PBMT1. A ultraestrutura geral dos CSs foi diversa nos 3 grupos experimentais. As CSs do grupo PBMT1 apresentaram aspecto epitelióide, enquanto no grupo PBMT2 as CSs apresentaram células isoladas e fusiformes dispostas em feixes unidirecionais. MET identificou uma MEC mais madura e sinais de apoptose nos grupos submetidos à PBMT. A PBMT influenciou a composição e ultraestrutura da MEC de CSs de células-tronco da polpa dentária. Assim, a PBMT pode ser importante na determinação da qualidade mecânica das CSs, o que pode favorecer a terapia celular, facilitando o transplante das células-tronco. / Photobiomodulation therapy (PBMT) improves processes relevant to tissue regeneration. The technique of cell sheets (CSs) can generate large amount of cells organized in an extracellular matrix (ECM) produced by these cells. The constitution of the ECM of CSs could be of importance for tissue regeneration. Type I collagen, fibronectin and tenascin are ECM proteins already detected in CSs of human dental pulp stem cells. The aim of this study was to investigate the effects of different PBMT parameters on the architecture (histology), protein composition (Western blotting and immunohistochemistry) and ultrastructure (SEM and MET) of the MEC of CSs of human dental pulp stem cells. Dental pulp stem cells were thawed and recharacterized by the expression profile of the surface molecules using flow cytometry for mesenchymal stem cells (MSC) -associated (CD105, CD146 and CD44,) and non associated (CD45, CD34 and CD14) markers. The CSs were formed in cell culture plates after 15 days in culture in clonogenic medium supplemented with vitamin C (20 ?g/ml). The cell cultures were allocated in 3 different experimental groups, as follows: Control: no further treatment; PBMT1 and PBMT2. PBMT was performed with CW red diode laser applying the following general parameters: 660nm, 20mW, 0.028cm2 spot size and 0.71W/cm2. The PBMT1 parameters were: 4s, 3J/cm2 and 0.08J per point, and the PBMT2: 7s, 5J/cm2, and 0.14J per point. The irradiations were done on alternate days throughout the experimental time, in a punctual mode (5 points/well or 13 points/100mm-diameter dishes) in contact at the base of the plate. After the CSs formation, 15 days after plating, they were submitted to histology, immunohistochemistry, Western blotting, transmission electron microscopy and scanning electron microscopy analyses. Statistical comparisons were performed (p<0.05). The cells presented the classical immunoprofile of MSCs showing the expression of MSCs-associated markers, whereas the expression of the MSCs non-associated markers were absent. The type I collagen, type III collagen and fibronectin were present in the MEC of the CSs. Western blotting revealed a higher amount of fibronectin in the CSs submitted to PBMT1. The overall ultrastructure of the CSs was diverse in the 3 experimental groups. PBMT1 leads to epithelial-like CS, whereas the PBMT2 leads to a CSs with isolated fusiform cells arranged in unidirectional bundles. MET identified a more mature ECM and signs of apoptosis in the PBMT groups. PBMT may influence the composition and ultrastructure of the ECM of CSs of dental pulp stem cells. Thus, PBMT could be of importance in the determination of the mechanical quality of CSs, which may favor cell therapy by improving the CS transplantation approach.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:18:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 4679.pdf: 2464914 bytes, checksum: 8f9d532c21a42e4e96fa57b50de9721e (MD5) Previous issue date: 2012-03-02 / Financiadora de Estudos e Projetos / Muscle regeneration is a complex phenomenon, involving coordinated activation of several cellular responses. During this process, oxidative stress, and consequent tissue damage occur with a severity that may depend on the intensity and duration of the inflammatory response. Among the therapeutic approaches to attenuate inflammation and increase tissue repair, low-level laser therapy (LLLT) may be a safe and effective clinical procedure. The aim of this study was to evaluate the effects of LLLT on oxidative/nitrative stress and inflammatory mediators produced during a cryolesion of the tibialis anterior (TA) muscle in rats. Sixty Wistar rats were randomly divided into three groups (n=20): control (BC), injured TA muscle without LLLT (IC), injured TA muscle submitted to LLLT (IRI). The injured region was irradiated daily for 4 consecutive days, starting immediately after the lesion using an AlGaAs laser (continuous wave, 808nm, tip area of 0.00785 cm2, power 30 mW, application time 47 s, fluence 180 J/cm2; total energy 1.4J; irradiance 3.8 mW/cm2). The animals were sacrificed on the fourth day after injury. LLLT reduced oxidative and nitrative stress in injured muscle, decreased lipid peroxidation, nitrotyrosine formation and NO production, probably due to reduction in iNOS protein expression. Moreover, LLLT increased SOD gene expression, and decreased the inflammatory response as measured by gene expression of NF-k&#946; and COX-2 and by TNF-&#945; and IL-1&#946; concentration. These results suggest that LLLT could be an effective therapeutic approach to modulate oxidative and nitrative stress and to reduce inflammation in injured muscle and could therefore help muscle regeneration. / A regeneração muscular é uma adaptação que ocorre em resposta ao traumatismo e envolve ações integradas entre células, matriz e mensageiros químicos, visando restaurar o equilíbrio biológico e a integridade funcional e estrutural do tecido. Durante o período de reabilitação, existe uma crescente preocupação em modular estes processos a fim de prevenir complicações indesejáveis e favorecer a recuperação funcional do músculo lesado. A constatação terapêutica das aplicações do laser de baixa intensidade (LLLT- Low Level Laser Therapy) no tratamento clínico de afecções que acometem o tecido músculo esquelético é atualmente bastante conhecida, contudo as vias de sinalização acionadas pela LLLT permanecem incertas. O objetivo desta tese foi avaliar os efeitos da terapia laser de baixa intensidade sobre a resposta inflamatória e regenerativa/cicatricial após criolesão do músculo tibial anterior em ratos. Foi utilizado um laser AsGaAl (contínuo; &#955; =808 nm; P=30 mW; área do feixe = 0.00785 cm2; t=47 s; D=180 J/cm2; E=1.4 J; irradiância=3.8 mW/cm2) em um único ponto, durante 4 dias consecutivos. Técnicas de histoquímica foram usadas para averiguar a morfologia e a morfometria dos músculos lesados e submetidos ao tratamento com laserterapia. Além disso, foram realizadas análises de peroxidação lipídica (TBARS), formação de nitrotirosina (Dot blot), produção de NO tecidual (Reação de Griess), citocinas inflamatórias (ELISA), expressão protéica de iNOS e colágeno I (western blot) e expressão gênica de myoD, miogenina, VEGF, NF-&#954;&#946;, TGF-&#946;, VEGF, COX-2 e SOD (qRT-PCR). A LLLT, nos parâmetros utilizados, foi capaz de reduzir a resposta inflamatória e o estresse oxidativo/nitrativo, favorecer a regeneração muscular e prevenir a fibrose muscular em modelo de criolesão. Os resultados desta tese trouxeram significativa contribuição para o entendimento dos mecanismos de ação acionados pela LLLT durante o processo de regeneração muscular, otimizando assim, sua utilização na reabilitação de desordens músculo-esqueléticas.

Submitted by Nadir Basilio (nadirsb@uninove.br) on 2018-07-20T20:03:38Z No. of bitstreams: 1 Ediléa Monteiro de Oliveira.pdf: 896757 bytes, checksum: 8bbece5b716734756bc80dba68d50aa2 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-20T20:03:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ediléa Monteiro de Oliveira.pdf: 896757 bytes, checksum: 8bbece5b716734756bc80dba68d50aa2 (MD5) Previous issue date: 2018-03-09 / OBJECTIVE: To evaluate the effects of Photobiomodulation Therapy (PBMT) applied immediately before resistance training in type 2 diabetic women. METHODS: Study 1 consisted of a systematic review registered in PROSPERO (CRD42017060857), with controlled and randomized studies based on PRISMA, in which databases such as LILACS, IBECS, Pubmed / MEDLINE, Cochrane Library, SciELO, PEDro, ScienceDirect and Bireme were consulted, combining the descriptors diabetes mellitus type 2 (T2DM), resistance training, aerobic exercise and oxidative stress in Portuguese, English and Spanish. The methodological quality of the articles was evaluated by the PEDro scale. Data were read, analyzed, extracted and synthesized. Study 2 consisted of a clinical, controlled, randomized, double-blind trial. 32 volunteers were selected between 60 and 75 years old, with a diagnosis of T2DM, following the pre-established inclusion / exclusion criteria. The quadriceps muscle strength was verified by the test of 10 maximal repetitions, the distance walked on the 6MWT and the oxidative metabolism through TBARs and TEAC. The volunteers were randomized into LED group (LTG) and placebo group (TG). The final sample consisted of 26 volunteers, being LTG (n = 13) and TG (n = 13). The intervention consisted of the 30 J PMBT and irradiation of 3 min and 48 s per area in the quadriceps of the dominant lower limb, immediately before the resistance training, for 8 weeks, 2 times a week, on non-consecutive days. The exercises were performed in 2 sets of 8 to 12 repetitions, with 1 to 2 minutes of interval between sets and exercises. All variables were collected pre and post resistance training. The data were analyzed by the GraphPad Prism 5 software and considered statistically significant p <0.05. RESULTS: In study 1 of a total of 746 articles, only 4 met the inclusion criteria. The synthesis of the four selected articles was done, which consisted of randomized controlled clinical trials, that were classified as having a high methodological quality according to an evaluation performed by PEDro Scale, as they obtained a score 6, in a scale from 0 to 10. It was submitted to the Brazilian Journal of Sports Medicine. In the study 2 for muscle strength in the pre and post-intervention LED group (26 ± 9.66 kg, 42.50 ± 7.90 kg, p <0.0001), for the pro-oxidant activity (TBARs) in the pre-LED group and post-intervention (3.76 ± 0.85 mg / ml, 2.52 ± 0.76 mg / ml, p <0.0001) and for antioxidant activity (TEAC) in the pre and post intervention LED group (1, 66 ± 0.13 μmol / L, 2.17 ± 0.23 μmol / L, p <0.0001) there was a statistically significant difference. Only the distance covered in the 6MWT did not present a statistically significant difference. CONCLUSION: For study 1, aerobic physical training seems to be the most effective in reducing glycemic levels and oxidative stress in sedentary individuals with T2DM. For study 2 there was improvement of muscle strength and oxidative metabolism of the group of elderly diabetic type 2 who underwent photobiomodulation therapy applied immediately before the resistance training. / OBJETIVO: Avaliar os efeitos da terapia por fotobiomodulação (TFBM) aplicado imediatamente antes do treinamento resistido em idosas diabéticas do tipo 2. MÉTODOS: O estudo 1 consistiu em uma revisão sistemática registrada no PROSPERO (CRD42017060857), com estudos controlados e randomizados, baseado no PRISMA, no qual foram utilizadas as bases de dados LILACS, IBECS, Pubmed/MEDLINE, Cochrane Library, SciELO, PEDro, ScienceDirect e Bireme sendo pesquisadas pela combinação dos descritores diabetes mellitus tipo 2 (DM2), treinamento de resistência, exercício aeróbio e estresse oxidativo em português, inglês e espanhol. A qualidade metodológica dos artigos foi avaliada pela escala PEDro. Procedeu-se a leitura, análise, extração e síntese dos dados. O estudo 2 consistiu em um ensaio clínico, controlado, randomizado e duplo-cego. 32 voluntárias foram selecionadas entre 60 e 75 anos, com diagnóstico de diabetes mellitus tipo 2, seguindo os critérios de inclusão/exclusão pré-estabelecidos. Foram verificadas a força muscular de quadríceps pelo teste de 10 repetições máximas, a distância percorrida por meio do TC6 e o metabolismo oxidativo por meio do TBARs e TEAC. As voluntárias foram aleatorizadas em grupo LED (GLT) e grupo placebo (GT). A casuística final consistiu em 26 voluntárias, sendo GLT (n=13) e GT (n=13). A intervenção consistiu na TFBM com a dose de 30 J e irradiação de 3 min e 48 s por área, no quadríceps do membro inferior dominante, imediatamente antes do treinamento resistido, durante 8 semanas, 2 vezes por semana, em dias não consecutivos. Os exercícios foram realizados em 2 séries de 8 a 12 repetições, com 1 a 2 minutos de intervalo entre séries e exercícios. Todas variáveis foram coletadas em situação de pré e pós treinamento resistido. Os dados foram analisadas pelo software GraphPad Prism 5 e considerado estisticamente significante p <0,05. RESULTADOS: No estudo 1 de um total de 746 artigos, apenas 4 atenderam aos critérios de inclusão. Foi realizada a síntese dos 4 artigos selecionados, que consistem em ensaios clínicos controlados e randomizados que foram classificados como de alta qualidade metodológica de acordo com avaliação realizada pela Escala PEDro, pois obtiveram como resultado a nota 6, em uma graduação de 0 a 10. Foi submetido à Brazilian Journal of Sports Medicine. No estudo 2 para a força muscular no grupo LED pré e pós-intervenção (26±9,66 Kg; 42,50±7,90 Kg; p<0.0001), para a atividade pró-oxidante (TBARs) no grupo LED pré e pós-intervenção (3,76±0,85 mg/ml; 2,52±0,76 mg/ml; p<0.0001) e para a atividade antioxidante (TEAC) no grupo LED pré e pós-intervenção (1,66±0,13 µmol/L; 2,17±0,23 µmol/L; p<0.0001) houve diferença estatisticamente significante. Somente a distância percorrida no TC6 não apresentou diferença estatisticamente significante. CONCLUSÃO: Para o estudo 1 o treinamento físico aeróbio parece ser o mais eficaz na diminuição dos níveis glicêmicos e do estresse oxidativo nos indivíduos sedentários com DM2. Para o estudo 2 houve melhora da força muscular e do metabolismo oxidativo do grupo de idosas diabéticas tipo 2 que foi submetida à terapia por fotobiomodulação aplicado imediatamente antes do treinamento resistido.