Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2009 / Made available in DSpace on 2012-10-24T12:03:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 266109.pdf: 1004980 bytes, checksum: 9b51fee0c166e06e13dcfd825cba87ea (MD5)

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:47:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007 / Objetivo: Estabelecer os principais sinais de acretismo placentário na ressonância magnética (RM) com contraste paramagnético dinâmico em gestantes com fatores de risco e avaliar a utilidade do método. Métodos: Estudo prospectivo em 15 gestantes com suspeita de acretismo placentário, avaliadas entre março de 2003 a fevereiro de 2006, com idade gestacional entre 20 a 31 semanas. Todas as pacientes realizaram RM com protocolo dirigido à avaliação da placenta tendo sido também previamente submetidas à ultra-sonografia (US). Os exames de RM foram realizados em equipamentos de alto campo, sendo adquiridas seqüências HASTE, TURBO FISP, nos planos axial, sagital e coronal e Gradiente echo (GE), pré e pós contraste dinâmico no melhor plano de avaliação placentária. A análise das imagens foi realizada por dois radiologistas em consenso. Os sinais avaliados pela RM foram: o hipersinal transmural, a descontinuidade da parede miometrial nas seqüências rápidas e a identificação dos vasos invadindo o miométrio nas seqüências dinâmicas. Todo material (placenta ou útero/placenta) foi encaminhado para estudo anátomo-patológico (AP) e correlacionados com os exames de RM. Resultados: Foram estudadas 7 placentas prévias centro-totais (47%), 6 placentas corporais anteriores (40%) e 2 placentas corporais posteriores (13%). A US indicou acretismo em 80% dos casos e a RM em 60%. No entanto, a US apresentou concordância fraca com estudo anátomo-patológico pelo teste kappa (0,11), e a RM teve concordância excelente com o AP (0,86). O US apresentou sensibilidade de 75%, especificidade de 14%, valor preditivo positivo (VPP) de 50% e valor preditivo negativo (VPN) de 33%. A RM obteve sensibilidade de 100%, especificidade de 86%, VPP de 89% e VPN de 100%. Conclusão: A RM contrastada é útil na identificação do acretismo placentário, sendo os seus principais indicadores: o hipersinal transmural, a descontinuidade da parede miometrial nas seqüências rápidas e a identificação dos vasos invadindo o miométrio nas seqüências dinâmicas. / Purpose: to establish main signs of placental accretism in MRI in patients with clinical suspicion and estimate the benefit of this method. Methods: prospective study with 15 patients suspected of placental accretism, referred by the Obstetrical Department, between march 2003 and February 2006, gestational age varied from 20 to 31 weeks. All patients underwent MRI to study the placenta and had previously done an ultrasonography. Material was sent to anatomic pathology for histological study. MRI was done on Magnetom Impact and Sonata Maestro Class Siemens®, with acquired sequences HASTE, TURBO SPIN in axial, sagittal, coronal planes and echo Gradient (GE®), pre and post dynamic contrast in the best plan for acquisition. Images were analyzed by a team of two radiologists. Results: Mean gestational age was 24,3 weeks, we studied 7 placenta previa (47%), 6 posterior placentas (40%) e 2 anterior placentas (13%). Ultrasonography was positive in 80% and MRI in 60%. However, echography had a low concordance with anatomic pathological studies by Kappa test (11%), revealing a 75% sensibility, 14% specificity, 50 % positive predictive value (PPV) and a 33% negative predictive value (NPV). MRI had an excellent concordance with anatomic pathological studies (0,86), showing 100% sensibility, 86% specificity , 89% PPV and 100% NPV. Conclusions: MRI is useful for placental accretism diagnosis. Principal findings are transmural hyper signal, the loss of continuity in myometrial wall in fast sequences and the identification of vessels invading myometrial layer in dynamic sequences / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Tesis para optar al Grado de Magíster en Ciencias Animales y Veterinarias mención en Patología Animal / El presente estudio se fundamenta en la hipótesis que la prevención del estrés oxidativo en gestaciones ovinas que cursan en un ambiente de altura, también previene la sobreexpresión de HIF-1 que induce la angiogénesis placentaria. Cuarenta ovejas criollas de segundo parto fueron separadas en cuatro grupos: originarias de baja altura que gestaron en su ambiente (BB), originarias de baja altura que gestaron en la altura (BA), originarias de la altura que gestaron a nivel del mar (AB), originarias de la altura que gestaron en su ambiente (AA). La mitad de cada grupo fue suplementado diariamente vía oral con 500 mg de vitamina C y 350 UI de vitamina E. A los 100 días de gestación se midieron gases sanguíneos y se extrajeron placentomas a fin de determinar la expresión y localización inmunohistoquímica del factor inducido por hipoxia (HIF-1 ). Los resultados indicaron la presencia de inmunoreactividad a HIF-1 en los grupos de animales tratados y no tratados con terapia antioxidante, con menor intensidad de expresión en el grupo tratado, sin modificar la localización de éste. Los controles negativos de la técnica no mostraron inmunoreactividad al factor. Los gases sanguíneos evidenciaron la presencia de un estado hipoxémico en los grupos de gestación en altura. Cada variable analizada en forma individual (origen, altura de gestación y administración de vitaminas), mostró diferencias significativas entre los grupos tratados y no tratados, siendo la administración de antioxidantes la variable que mostró las diferencias más significativas (p 0,001). Los animales que presentaron la menor expresión del factor fueron los pertenecientes a los grupos con tratamiento antioxidante BAV y ABV, mientras que los grupos que presentaron la mayor expresión fueron animales sin tratamiento antioxidante BA y AB. En el grupo de corta exposición a la altura (BA) se observó el mayor efecto de la terapia antioxidante (BAV) en relación a la expresión de HIF-1 , mientras que el grupo originario de baja altura no mostró diferencias significativas entre los grupos tratados (BBV) y los no tratados (BB). En conclusión, la administración de vitaminas antioxidantes disminuye la expresión de HIF-1 , ayudando a contrarrestar los efectos del daño oxidativo producido por la exposición a hipoxia hipobárica de altura en gestaciones ovinas. / The present study evaluated the hypothesis that oxidative stress in ovine pregnancy at high altitudes can be prevented and also the overexpression of HIF-1 as inductor of placentary angiogenesis. Fourty creole ewes were divided in four groups according to the altitude in which gestation occured: low-native ewes maintained at low altitude (BB), low-native ewes maintained at high altitude (BA), high-native ewes maintained at low altitude (AB), high-native ewes maintained at high altitude (AA). Half of each group received daily oral supplements of vitamin C (500 mg) and E (350 UI). At 100 days of gestation blood gases were measured and plancentomes were recovered for immunohistochemical evaluation of hipoxia inducible factor HIF- 1 . Our results show positive immunoreactivity in all groups, with a lesser expression in the treated group and without changing the factor location. Controls were negative to the immunoreaction. Blood gases showed the presence of a hypoxemic state in the high altitude groups. The origin of the animals as well as the altitude in which gestation was carried out and the vitamin administration showed statistical differences in all groups, but the antioxidant therapy registered the most meaningful differences (p 0,001). The BAV and ABV groups exhibit the lesser expression of HIF-1 , whereas the respectively non treated groups (BA-AB) showed the mayor expression. In the new-coming altitude group (BA) we observed the mayor antioxidant therapy effect (BAV), whereas the low native group did not show any difference between the treated (BBV) and no treated animals (BB). In conclusion, antioxidant supplementation diminishes the HIF-1 expression helping to counteract the effects produced by oxidative damage in high altitude hypobaric hypoxia sheep pregnancy. / Financiamiento: Proyecto Fondecyt 1070405.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Biologia Celular e do Desenvolvimento / Made available in DSpace on 2012-10-26T10:14:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 310126.pdf: 1850967 bytes, checksum: 67fb92bdbc93e0e23a85bccd9bcc6cb5 (MD5) / A Célula-tronco (CT) é definida pela capacidade de autorrenovação e habilidade de se diferenciar em diversos fenótipos celulares. Nos últimos anos, vários estudos têm buscado a identificação e caracterização de CTs em tecidos adultos e extra-embrionários visando o desenvolvimento de alternativas para regeneração e reparo tecidual. Dentre as fontes de CTs adultas destaca-se a placenta, que além de desempenhar um papel crucial no desenvolvimento fetal, também é um importante reservatório de CTs mesenquimais (CTMs). A diferenciação de CTMs é um fenômeno ainda não totalmente esclarecido e influenciado pela atuação de diversas moléculas e pelo microambiente. Um grupo de proteínas de adesão conservadas evolutivamente que pode estar envolvido neste processo é o da família NEPH. Composta por NEPH1, NEPH2 e NEPH3, estas proteínas fazem parte da superfamília das imunoglobulinas (IgSF) e regulam a morfogênese de diferentes tecidos. Os ortólogos de NEPH têm sido amplamente caracterizados em vertebrados, onde atuam em diversos processos como no desenvolvimento neural, formação de sinapses e fusão de mioblastos. Além disso, vários estudos descrevem a expressão de NEPH1 e NEPH2 em diversos tecidos, o que apoia a hipótese de que tal expressão possa estar envolvida na diferenciação de CTs. Com isso, o enfoque deste trabalho foi comparar os níveis de expressão dos genes NEPH entre CTMs obtidas da placenta humana, no estado indiferenciado assim como após a indução à diferenciação adipogênica. As células da placenta utilizadas neste estudo apresentaram a expressão de marcadores de CTMs, a morfologia fibroblastóide esperada, bem como foram capazes de se diferenciar para o fenótipo adipogênico quando cultivadas em meio indutivo, caracterizando uma população de CTMs. Os resultados obtidos por RT-PCR em tempo real demonstraram que tanto as CTMs indiferenciadas quanto as induzidas para adipogênese apresentaram a expressão dos genes NEPH1 e NEPH2, sendo a expressão do gene NEPH1 75% mais alta nas CTMs induzidas à adipogênese do que nas células indiferenciadas. Com isso, sugerimos um papel do gene NEPH1 no processo de diferenciação das CTMs da placenta humana para adipócito. / The stem cell (SC), by definition, is undifferentiated and has the ability of self-renewal. SCs are also able to differentiate into diverse cell lineages. In recent years, several studies have searching for the characterization of SCs in adult and extra-embryonic tissues that could guide to develop strategies for tissue regeneration and repair. Among these tissues the placenta is an important source of adult SCs, being a reservoir of mesenchymal SCs (MSCs). Several biological signals and the environment influence the differentiation of MSCs, although this phenomenon is not yet fully understood. The NEPH protein family, which includes NEPH1, NEPH2 and NEPH3, is a group of evolutionarily conserved adhesion molecules that may be involved in this MSCs differentiation. These proteins are part of the immunoglobulin superfamily (IgSF) and regulate the morphogenesis of different tissues. The role of NEPH orthologs have been extensively characterized in vertebrates, where they act in neural development, synapse formation and myoblasts fusion. Moreover, several studies have described the expression of NEPH1 and NEPH2 in several tissues, supporting the hypothesis that they might be involved in SCs differentiation. Thus, the objective of this study was to compare the expression of NEPH genes between undifferentiated and differentiated MSCs obtained from human placenta. The placental cells used is this study comprise a population of MSCs, being characterized by the typical fibroblastic morphology, expression of MSCs markers and ability to differentiate into adipocytes when cultured in an inductive medium. Real time RT-PCR analysis demonstrated that both undifferentiated MSCs and MSCs differentiated into adipocytes express NEPH1 and NEPH2 genes. However, the expression of NEPH1 gene was 75% higher in MSCs differentiated into adipocytes than in the undifferentiated cells. In summary, our results suggest that NEPH1 gene may play a role in the differentiation of MSCs into adipocytes.

Tese (doutorado)- Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Neurociências, Florianópolis, 2013. / Made available in DSpace on 2013-12-06T00:06:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 317837.pdf: 1961780 bytes, checksum: 885bb54ecd406938422355f7772f13f4 (MD5) Previous issue date: 2013 / As células-tronco (CTs) são células indiferenciadas com habilidade de se autorrenovar, e que em condições apropriadas podem gerar diversos tipos celulares maduros. As células da placenta possuem características morfológicas, imunofenotípicas e funcionais, similares as células tronco mesenquimais (CTMs) da medula óssea (MO), porém é improvável que estas células possuam o mesmo potencial de diferenciação e proliferação de CTs embrionárias. Estas células são ainda de origem fetal e podem ser superiores a CTs somáticas em muitos aspectos. Juntamente com o seu fácil acesso, ausência de problemas éticos e abundância celular, as CTMs da placenta podem ser uma alternativa atrativa de progenitores de CTs para pesquisa básica e aplicações clínicas. O Acidente Vascular Cerebral (AVC) é uma das principais causas de morte e incapacitação no Brasil, trazendo altos custos para o Sistema Único de Saúde (SUS), sendo então de grande importância estudos que permitam melhorar este quadro. Também é importante o estudo do microambiente, pois este e as CTs regulam-se de forma dinâmica e também, torna-se relevante o estudo de fatores de crescimento que podem estar envolvidos na diferenciação das CTMs onde são escassos os estudos. Nesta tese investigamos o potencial de diferenciação das CTMs de placenta humana, in vitro e in vivo, utilizando modelo de co-cultura e AVC respectivamente. Para alcançarmos nossos objetivos, foram realizadas culturas de CTMs de placenta humana, bem como cultura mistas de cerebelo e córtex de ratos neonatos. Foram realizados experimentos de co-cultura para verificação da importância do microambiente neural na diferenciação de CTMs, bem como injeção de CTMs em animais que sofreram lesão causada pelo AVC para possível regeneração da área lesionada. Também investigamos os fatores de crescimento expressos pelas culturas mistas que poderiam estar envolvidos no processo de diferenciação de CTMs para fenótipo neural. As análises dos experimentos se deram por RT-PCR e imunofluorescência, utilizando marcadores de células precursoras neurais, células gliais e neurônios. Nossos resultados demonstram que as CTMs quando em microambiente favorável, têm a potencialidade para diferenciar-se em fenótipos neurais, estes resultados são vistos quando as CTMs são co-cultivadas com culturas mistas de cerebelo e córtex de ratos neonatos, bem como quando injetadas no encéfalo de animais lesionados experimentalmente por AVC, demonstrando a potencialidade das CTMs da placenta humana na diferenciação neural. Além de apresentarem expressão gênica, estas células possuem a expressão protéica de Nestina, GFAP e B-Tubulina III e também as alterações morfológicas necessárias na diferenciação. Sugerimos a participação na diferenciação o fator de crescimento EGF e transcrição FOXD3 que deixam de ser expressos em culturas mistas de córtex após o co-cultivo com CTMs. Este trabalho demonstrou que CTMs de placenta humana possuem interação com o microambiente indutivo, podendo apresentar morfologia neural; e quando enxertadas em animais que sofreram lesão isquêmica, podem migrar para o local da lesão e diferenciar em células neurais in situ, podendo assim ter utilização terapêutica na medicina regenerativa. <br> / Abstract : Stem cells (SCs) are undifferentiated cells with the ability to self-renew and under appropriate conditions may generate various differentiated cell types. Placental cells have morphological, functional and immunophenotypic similar to mesenchymal stem cells (MSCs) from bone marrow (BM), but it is unlikely that these cells have the same potential for differentiation and proliferation of embryonic SCs. These cells are also of fetal origin and may be superior to somatic SCs in many ways. Along with its easy access, lack of ethical problems and cell abundance, MSCs from the placenta can be an attractive alternative for parents of SCs for basic research and clinical applications. The Cerebral Vascular Accident (CVA) is a major cause of death and disability in Brazil, bringing high costs to the National Health System (SUS), which is of great importance studies to improve this situation. Also important is the study of microenvironment, as this and SCs are regulated dynamically and also becomes relevant to the study of growth factors that may be involved in the differentiation of MSCs where there are few studies. We investigated the differentiation of human placenta MSCs in vitro and in vivo using co-culture model and experimental stroke in mice respectively. We performed cultures of MSCs from human placenta and carried out co-cultures on rat cerebellum or cortex cells from newborn rats. In co-culture assays the importance of the microenvironment was checked as an inducer for neural differentiation of MSCs. Alternatively the graft of MSCs in mice with moderate brain injury in experimental stroke to test for possible regeneration of damaged area. We also investigated growth factors expressed by mixed cultures that could be involved in the differentiation of MSCs to neural phenotype. We analyzed the expression or neural markers in MSCs by RT-PCR and immunohistochemistry. Our results demonstrated that MSCs in contact to brain microenvironment have the potential to differentiate to neural phenotypes. MSCs expressed nestin, GFAP and Tubulin III-B. These results were observed when MSCs were co-cultured with mixed cultures of cerebellum and cortex from newborn rats or when they were injected into the brain of animals injured by experimental stroke. This seemed to be under control of EGF and the transcription factor FoxD3 that failed to be expressed in mixed cultures of cortex after co-culture with MSCs. This work demonstrated that MSCs from human placenta have inductive interaction with the microenvironment may present neural morphology, and when grafted into animals undergoing ischemic injury, can migrate to the site of injury and differentiate into neural cells in situ and may thereby have therapeutic use in regenerative medicine.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-04-18Bitstream added on 2014-06-13T20:50:59Z : No. of bitstreams: 1 toma_hs_me_botfmvz.pdf: 290503 bytes, checksum: 7c6b31998398e78479d7c7d4cd037e5f (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação para o Desenvolvimento da UNESP (FUNDUNESP) / Objetivou-se avaliar a passagem transplacentária e colostral de cobre e seus principais antagonistas (Zn, S, Fe e Mo) por meio de dosagem sérica e no colostro, em cordeiros e ovelhas da raça Bergamácia. Foram utilizados 20 cordeiros provenientes de parto simples e suas respectivas mães da raça Bergamácia mantidas confinadas a partir de 15 dias antes do parto, alimentadas com silagem de sorgo, ração, feno, sal mineral e água ad libitum. Foram realizadas colheitas de sangue das mães, por venopunção jugular, para extração do soro no momento do parto e do colostro através de ordenha manual (30 mL) nos tempos 0, 24, 48 e 72 horas após o parto. Nos cordeiros foi colhido o sangue para obtenção do soro 0, 24, 48 e 72 horas após o nascimento. Também foram avaliados o peso, temperatura retal, volume globular (VG) e proteína plasmática total (PPT) dos cordeiros recém nascidos até 72 horas.Análises dos níveis de molibdênio, zinco, ferro, enxofre e cobre da silagem de sorgo, feno, sal mineral, ração, soro sanguíneo e colostro foram realizadas por espectofotômetro de absorção atômica. Concluiu-se que os cordeiros apresentaram ao nascimento concentrações séricas de Cu, Zn, S, Fe e Mo semelhante aos das ovelhas, evidenciando a existência de passagem transplacentária de minerais. Houve aumento nas concentrações séricas dos minerais (Cu, Zn, Fe, S e Mo) nos cordeiros após a ingestão do colostro. A concentração sérica de zinco e, sérica e colostral de cobre das mães apresentaram correlação positiva significativa com a concentração de cobre sérica dos cordeiros. O valor médio do índice de massa corporal (IMC) das mães 24 horas após o parto foi 118,55 ± 24,21 e dos cordeiros 24 horas após o nascimento foi 39,48 ± 7,67 / The objective was to assess the transplacental and colostral copper and its main antagonists (Zn, S, Fe and Mo) by means of serum and colostrum, in lambs and ewes Bergamácia. We used 20 lambs from simple birth and their mothers Bergamasca kept confined from 15 days before calving, fed sorghum silage, feed, hay, mineral and water ad libitum. Blood samples were collected from mothers by venipuncture jugular extraction of serum at delivery and colostrum by milking (30 mL) at 0, 24, 48 and 72 hours after delivery. In lambs the blood was collected to obtain serum 0, 24, 48 and 72 hours after birth. Were also assessed weight, rectal temperature, packed cell volume (PCV) and total plasma protein (TPP) of newborn lambs within 72 hours. Analysis of levels of molybdenum, zinc, iron, sulfur and copper from sorghum silage, hay, mineral salt diet, blood serum and colostrum were performed by atomic absorption spectrophotometer. It was concluded that the lambs at birth had serum concentrations of Cu, Zn, S, Fe and Mo similar to those of sheep, showing the existence of placental transfer of minerals. There was an increase in serum concentrations of minerals (Cu, Zn, Fe, S and Mo) in the lambs after colostrum ingestion. Serum zinc and copper serum and colostrum of mothers had a significant positive correlation with the copper concentration in serum of lambs. The mean body mass index (BMI) of mothers 24 hours after delivery was 118.55 ± 24.21 and lambs 24 hours after birth was 39.48 ± 7.67

A placenta humana é um órgão temporário, mas indispensável ao desenvolvimento embrionário e fetal de cada indivíduo, desempenhando como principal função as trocas materno-fetais. Seus principais componentes são as placas corial e basal, com a árvore vilositária e a lacuna sangue-maternal interposta entre elas. Na árvore vilositária, encontramos o fibrinóide, material acelular, que pode ser do tipo-fibrina, quando derivado de um coágulo materno e do tipo-matriz, quando derivado das células trofoblásticas extravilosas. O fibrinóide é encontrado em placentas de gestações normais, porém, em grande quantidade em placentas de gestações com pré-eclâmpsia. O objetivo deste trabalho foi estudar comparativamente, a anatomia microscópica do fibrinóide e estruturas relacionadas, em placentas de gestações normais e de gestações com pré-eclâmpsia. Foi realizado estudo histológico comparativo em vinte placentas humanas sendo, dez placentas de gestações normais e dez placentas de gestações com pré-eclâmpsia. Destas, foram retirados quatro fragmentos de cada, da região paracentral, colhidos da placa basal até a placa corial, e fixados por imersão em formalina Ringer-lactato 1/6 molar a 4%. As lâminas preparadas foram submetidas às seguintes colorações: Hematoxilina-eosina, PAS e Mallory para análise em microscopia de campo claro. Após análise comparativa, observou-se que as placentas de gestações com pré-eclâmpsia apresentavam características morfológicas distintas das normais como: aumento do fibrinóide tipo-fibrina e do fibrinóide tipo-matriz em volume e quantidade, espessamento da membrana basal trofoblástica, aumento dos aglomerados nucleares (brotos sinciciais), aumento dos capilares sinusóides, caracterizando congestão vascular e, aumento em área de superfície das placas epiteliais. Acreditamos que os resultados encontrados são conseqüentes das alterações vasculares próprias da pré-eclâmpsia como alteração do fluxo sanguíneo, adaptação das arteríolas espiraladas, espasmo arteriolar generalizado, hiperplasia da camada muscular das arteríolas nos troncos vilosos entre outros. / Human placenta is a temporary organ, but indispensable to the fetal and embryonic development of each individual; its main function consists in the fetal-maternal exchanges. Its principal components are the basal and chorionical plates, with the villous tree and the maternal-bood gap interposed between them. In the villous tree, we find the fibrin, acellular material, wich may be of the fibrinous-type, when derived from a maternal clot and of the matrix-type when derived from extravillous trophoblastic cells. The fibrin is found in placentas of normal gestations, but in great quantity in placentas of pre-eclamptic gestations. The purpose of this experiment has been to study, comparatively, the microscopic anatomy of the fibrin and related structures in placentas of normal gestations and in pre-eclamptic gestations. A comparative histological study has been performed in twenty human placentas of which ten placentas were of normal gestation and ten placentas were of pre-eclamptic gestations. Of these, four fragments have been taken from each of the paracentral region, collected from the basal plate up to the chorionical plate, and fixed by immersion in 1/6 molar Ringer-lactate formalin at 4%. Slides wich have been prepared have been submitted to the following colourations: Eosine-hematoxiline, PAS and Mallory for the analysis of clear field microscopy. After a comparative analysis, it has been observed that placentas of pre-eclamptic gestations showed morphological characteristics different from the normal ones, such as: increase of fibrin fibrinous-type and the matrix-type fibrin in quantity and volume, thickening of the trophoblastic basal membrane, increase of sprouts, increase of sinusoid capillaries, characterizing vascular congestion and increase in the surface area of the epithelial plates. We believe that these results are a consequence of the vascular alterations proper to pre-eclampsia, such as blood flow alteration, adaptation of the spiral arterioles, generalized arteriolar spasm, hyperplasia of the muscular layer of the arterioles in the villous trunks, among others.

Orientador: Izildinha Maestá / Banca: Izildinha Maestá / Banca: Sue Yazaki-sun / Banca: José Carlos Peraçoli / Resumo: Objetivo: avaliar a utilidade da curva de regressão normal da gonadotrofina coriônica humana no diagnóstico de neoplasia trofoblástica pós molar (NTG). Metodologia: Foi construída curva de regressão normal considerando-se a média e o limite superior de confiança a 95% dos valores quinzenais de -hCG sérico de 80 pacientes com mola hidatiforme completa (MHC) e remissão espontânea. Nesta curva de regressão normal foram identificados o primeiro valor de -hCG acima do limite superior de confiança a 95% das 25 pacientes com MHC e evolução para NTG. Curvas individuais das 105 pacientes foram estabelecidas e analisadas sobre a curva de regressão normal, verificando-se o comportamento destas curvas. Os valores de 3-hCG que excederam o limite superior da curva normal foram considerados anormais. Resultados: As 25 pacientes que desenvolveram NTG pós-molar tiveram desvio da curva de regressão normal de 3-hCG em 3,84 l 2,57 semanas, enquanto platô ou ascensão ocorreu em 8,40 l 2,94 semanas, pós-esvaziamento uterino, com diferença significativa (p< 0,001). Do total de 25 pacientes com MHC e evolução para NTG, 20 (80%) apresentaram valores de -hCG acima do limite superior da curva de regressão normal dentro de quatro semanas, pós-esvaziamento uterino, enquanto nenhuma apresentou platô ou ascensão. Em seis semanas pós esvaziamento uterino, 23 pacientes com NTG (92%) apresentaram valores anormais, acima do limite superior da curva de regressão normal, enquanto somente 11 (44%) mostraram evolução com platô ou ascensão. Houve diferença no comportamento das curvas individuais dos dois grupos quando analisadas sobre a curva de regressão normal. Conclusões: A identificação de pacientes com MHC e evolução para NTG é mais rápida através da curva de regressão normal de 3-hCG, comparada ao platô ou ascensão. A curva de regressão normal de -hCG é útil no diagnóstico precoce de NTG pós molar. / Abstract: To evaluate the usefulness of the normal 3-human chorionic gonadotrophin (p-hCG) regression curve in the diagnosis of post-molar trophoblastic neoplasia (PMTN). Methods: The normal regression curve was constructed by taking into account the mean and the 95% confidence limit of the bi-weekly values of serum 3-hCG from 80 patients with uneventful complete hydatidiform mole. In this normal regression curve, the first í3-hCG value over the 95% confidence upper limit of the 25 patients with complete hidatidiform mole (CHM) and the development to PMTN were identified. Individual curves of the 105 patients were established and analyzed over the normal regression curve, and the behavior of such curves was analyzed. The 3-hCG values exceeding the upper limit of the normal curve were regarded as abnormal. Results: The 25 patients who developed PMTN showed a devíance in the -hCG normal regression curve in 3.84 l 2.57 weeks while the plateau or increase occurred in 8.40 l 2.94 weeks after evacuation with a significant difference (p< 0.001). Of the total of 25 patients with CHM and development to PMTN, 20 (80%) showed -hCG values over the normal regression curve upper limit within four weeks postevacuation while none showed a plateau or increase. In six weeks post-uterine emptying, 23 patients with PMTN (92%) showed abnormal values over the normal regression curve upper limit while only 11(44%) showed development with a plateau or increase. A difference was noted in the behavior of indívidual curves in the two groups when they were analyzed over the normal regression curve. Conclusions: The identification of patients with CHM and development to PMTN is quicker when using the -hCG normal regression curve as compared to the plateau or increase. The -hCG normal regression curve is useful in the early diagnosis of post-molar NTG. / Mestre

Orientador: Joaquim Mansano Garcia / Banca: Maria Angélica Miglino / Banca: Paula de Carvalho Papa / Banca: César Roberto Esper / Banca: Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima / Resumo: Devido às elevadas perdas gestacionais verificadas nas fases embrionária e fetal, principalmente em animais produzidos in vitro (TN e/ou FIV), o presente trabalho avaliou, por RIE, a participação dos produtos secretados pelas BNCs na síntese in vitro de PGF2alfa pelas células BEND e constatou que o meio condicionado, na presença de PDBu, determinou o aumento da produção de PGF2alfa (de 435,84a para 1323,94b pg/mL; p<0,05), mas não na ausência de PDBu (19,01a; 15,08a; 16,83a e 23,10a pg/mL; respectivamente para MCSS; 1:25; 1:50 e 1:100; p<0,05), indicando a participação destes produtos na modulação da síntese de PGF2alfa, provavelmente na etapa da enzima PKC. A expressão gênica relativa de LP e VEGF foi avaliada pela técnica de PCR em tempo real, em placentas de animais TN e FIV, comparados a animais MN e, embora haja uma tendência de .down-regulation. para o VEGF (-1,41a e .0,72a; respectivamente para TN e FIV, p<0,05) não se verificou diferença na expressão entre os grupos. Quanto ao LP, também não foi verificada diferença na sua expressão, embora haja uma tendência numérica de .up-regulation. em TN (+0,11) e .down-regulation. em FIV (-3,18). Estes dados confirmam a capacidade de modulação de síntese de PGF2alfa pela BNC, bem como a não diferença na expressão gênica relativa de VEGF e LP em placentas de animais TN e FIV, quando comparados à MN. / Abstract: Due to the high pregnancy failures during foetal and embryo stages, mainly in in vitro produced-animals (by NT and/or IVF), this work evaluated the BNCs products on in vitro PGF2alpha synthesis, by RIA, from BEND cells and showed that the conditioned medium, with PDBu, increased the PGF2alpha synthesis (from 435.84a to 1323.94bpg/mL, p<0.05), but not without PDBu (19.01a; 15.08a; 16.83a and 23.10a pg/mL; respectively to MCSS; 1:25; 1:50 and 1:100; p<0.05), showing the function of these cellular products on PGF2alpha synthesis modulation, probably at PKC level. The PL and VEGF relative gene expression were evaluated, by Real Time PCR, in NT and IVF placentas, compared to AI placentas and, although there was a tendency for VEGF to be down-regulated (-1,41a and .0,72a; respectively to TN and IVF, p<0,05), no differences between groups were observed. In relation to LP gene expression, although there was a tendency for upregulation in NT group (+0.11) and down-regulation in IVF (-3.18), no statistical differences were shown also. These data shown the modulation capacity on PGF2alpha synthesis by BNC, as well the no differences on relative gene expression of VEGF and PL in NT and FIV placentas, when compared to IA placentas. / Doutor

Made available in DSpace on 2013-08-07T19:06:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 000422341-Texto+Completo-0.pdf: 583577 bytes, checksum: 4e87e5f7b70c7e7c04ae9c1673b68e2a (MD5) Previous issue date: 2009 / Introduction: Evidence of nicotine’s toxicity in fetal development are widely documented in countless publications. One of the mechanisms involved in nicotine toxicity results from the compromised nature of placental vascularization. Studies generally quantify tobacco smoke in relation to the number of cigarettes smoked, as indicated by the patients, information which is not always accurate. The biochemical measurements most used in validating self-declaration are concentrations of carbon monoxide in the exhaled air (COex) and concentration of salivary, plasmatic or urinary cotinine. Doppler Velocimetry is a method which enhances maternal and fetal hemodynamic study, using the flow estimate in the uterine, umbilical and middle cerebral fetal arteries through ultrasonography, using the relationship between systolic and diastolic flow velocity. The objective of this study is to research the effects of tobacco smoking on maternal-fetal circulation through the measurement of flows in the uterine, middle cerebral and umbilical arteries, as well as fetal birth weight, relating the values obtained with the COex and urinary cotinine measurements. Method: Prospective study design. 30 pregnant smokers and 34 pregnant non-smokers in their third trimester were recruited by the researcher, after having signed a free and clarified consent form, from the Obstetric Services Low Risk Prenatal Care Center at the PUCRS Hospital Sao Lucas. Ultrasonography was employed to evaluate the resistance index of the uterine, umbilical and middle cerebral arteries; measure of CO exhaled and urinary cotinine. These patients were assessed during childbirth in order to evaluate the fetal birth weight. The smokers were divided into groups with increasing values of COex and urinary cotinine in order to evaluate the increasing effects on the vascular resistance indexes. Results: Upon comparing the groups, without stratifying for tobacco exposure, a significant increase was observed in the resistance indexes in the right and left uterine and umbilical arteries. The resistance index of the middle cerebral artery showed a tendency to decrease. Upon classifying according to the COex values, a significant increase was observed in the resistance indexes of the right and left uterine and umbilical arteries together with a decrease in the middle cerebral artery. A significant decrease was detected in the fetal birth weight percentile, relative to the increase in COex. When the smoker group was separated according to the increasing values of urinary cotinine, the results were similar, except in the right uterine artery. The middle cerebral artery showed a trend of significant decrease of the resistance indexes, relative to the increase in cotinine on linear regression, but this statistical significance was not maintained after having made corrections of possible confusion factors. A proportional decrease was also verified in the fetal birth weight percentile with the increase of the urinary cotinine values, with statistical significance. Conclusion: In this study, using Doppler velocimetry in uterine, umbilical and middle cerebral arteries, changes were detected corresponding to chronic hypoxia relating to possible fetal compensation mechanisms to maintain its homeostasis, and a decrease in fetal birth weight, with an increase in relation to the measurements of COex and urinary cotinine. / Introdução: Evidências de toxicidade da nicotina sobre o desenvolvimento fetal são amplamente documentadas na literatura. Um dos mecanismos envolvidos na toxicidade resulta do comprometimento da vascularização placentária. Os trabalhos, geralmente, quantificam o tabagismo em relação ao número de cigarros fumados referidos pelas pacientes, informações nem sempre verdadeiras. As medidas bioquímicas mais utilizadas para validar a auto-declaração são as concentrações de monóxido de carbono no ar exalado (COex) e a da cotinina salivar, plasmática ou urinária. A dopplervelocimetria é um método que propicia o estudo hemodinâmico materno e fetal através da estimativa de fluxo nas artérias uterinas, umbilicais e cerebrais médias fetais, utilizando as relações entre as velocidades de fluxo sistólico e diastólico. O objetivo deste trabalho é estudar os efeitos do tabagismo sobre a circulação materno-fetal através da medida dos fluxos nas artérias uterinas, cerebral média e umbilical e peso fetal ao nascer, relacionando os valores encontrados com as medidas de COex e cotinina urinária. Método: Estudo coorte prospectiva. Foram recrutadas pelo pesquisador, após assinatura de termo de consentimento livre e esclarecido, 30 gestantes tabagistas e 34 não tabagistas, no terceiro trimestre da gestação, do Ambulatório de Assistência Pré-natal de baixo risco do Serviço de Obstetrícia do HSL-PUCRS. Foi realizada ecografia para avaliar o índice de resistência das artérias uterinas, umbilical e cerebral média; medida de CO exalado e cotinina urinária. Essas pacientes foram acompanhadas até o parto, para avaliar o peso fetal ao nascer. As pacientes tabagistas foram divididas em grupos com valores crescentes de COex e cotinina urinária para avaliar os efeitos sobre os índices de resistência vascular. Resultados: Ao comparar os grupos, sem estratificar a carga tabágica, observou-se aumento significativo dos índices de resistência nas artérias uterinas direita, esquerda e na umbilical. O índice de resistência da artéria cerebral média mostrou tendência à diminuição. Ao classificar conforme os valores do COex, foi observado aumento significativo nos índices de resistência nas artérias uterinas direita, esquerda e na umbilical associado à diminuição na artéria cerebral média. Detectou-se diminuição significativa no percentil do peso fetal ao nascimento, associado ao aumento do COex. Quando o grupo tabagista foi separado quanto aos valores crescentes de cotinina urinária, os resultados foram similares, exceto na artéria uterina direita. A artéria cerebral média evidenciou tendência à diminuição significativa dos índices de resistência associado ao aumento da cotinina na regressão linear, porém não manteve a significância quando foi corrigido para os possíveis fatores de confusão. Verificouse também uma diminuição proporcional do percentil do peso fetal ao nascimento com o aumento dos valores da cotinina urinária, estatisticamente significativo. Conclusão: Neste estudo, detectou-se, por dopplervelocimetria das artérias uterinas, umbilical e cerebral média, alterações compatíveis com hipóxia crônica associada a possíveis mecanismos de compensação fetal para manter sua homeostase e consequente diminuição do peso fetal ao nascer, crescentes em relação às medidas de COex e cotinina urinária.