Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O lÃtex da planta medicinal Calotropis procera (Apocynaceae) possui molÃculas com diferentes atividades farmacolÃgicas, dentre estas, prÃ- e antiinflamatÃria. Neste trabalho, o efeito imunomodulatÃrio da fraÃÃo de proteÃnas solÃveis do lÃtex (PL) foi investigado em modelos experimentais de sepse induzida por CLP e por inoculaÃÃo de S. Typhimurium. Aspectos bioquÃmicos das proteÃnas do lÃtex foram investigados e parÃmetros bioquÃmicos, hematolÃgicos e histopatolÃgicos foram determinados em animais experimentais. PL exibiu um significativo efeito protetor nos animais. Uma dose de 30 mg/Kg levou à sobrevivÃncia de atà 100%, comparada com 100% de mortalidade no grupo de animais infectados e nÃo tratados (grupo Salmonella). Este efeito foi somente observado quando PL foi administrado 24 horas antes da induÃÃo da sepse. PL nÃo apresentou atividade antibacteriana in vitro sugerindo um mecanismo de aÃÃo indireto, possivelmente intervindo nos processos imunes. A populaÃÃo microbiana no fÃgado, baÃo e fluido peritoneal - local do foco infeccioso - estava similar entre todos os grupos, 4 e 24 horas apÃs inoculaÃÃo bacteriana. No sangue, entretanto, a quantidade de bactÃrias viÃveis estava reduzida apenas nos animais tratados com proteÃnas do lÃtex. O efeito protetor de PL foi revisto atravÃs de suas trÃs sub-fraÃÃes protÃicas, denominadas de PI, PII e PIII, obtidas atravÃs de fracionamento por cromatografia de troca iÃnica em coluna de CM-Sepharose a pH 5,0. As trÃs sub-fraÃÃes protÃicas apresentaram efeito protetor e de forma similar. Nem o tratamento tÃrmico de PL (100 ÂC, 30 min.) ou inibiÃÃo de suas proteases endÃgenas com iodoacetamida alterou o efeito protetor observado. O Ãxido nÃtrico (NO), um importante sinalizador molecular, estava aumentado no soro de animais do grupo Salmonella enquanto que animais protegidos com doses de PL e PI apresentaram nÃveis similares ao controle apÃs 24 horas da infecÃÃo. Este resultado corroborou com a observaÃÃo de que animais com sepse letal apresentaram falÃncia na migraÃÃo de neutrÃfilos para o foco infeccioso enquanto que, de forma evidente, animais tratados com PL ou PI favoreceram o influxo de cÃlulas para a cavidade peritoneal. AlÃm disto, nestes animais, o nÃvel de NO estava aumentado no foco infeccioso, uma provÃvel atividade dos neutrÃfilos presentes como parte de sua atividade microbicida. A atividade da adenosina desaminase (ADA) mensurada no foco infeccioso, apÃs 4 e 24 horas de infecÃÃo, estava aumentada apenas nos animais tratados com PL ou PI, e inalterada em animais do grupo Salmonella. Plaquetopenia foi observada em animais com sepse, mas nÃo em animais protegidos com PL ou PI. Neutrofilia e linfopenia ocorreram em animais do grupo Salmonella. Neutrofilia seria concordante com o elevado teor de NO, um inibidor da migraÃÃo de neutrÃfilos, enquanto que a linfopenia à parte da imunossupressÃo estabelecida na sepse. Em animais tratados com PL ou PI foi observada neutrofilia sete dias apÃs a infecÃÃo, sugerindo um estÃmulo na hematopoiese. Linfopenia, observada no inÃcio da sepse (24 h), sà ocorreu aos sete dias nos animais tratados com PL ou PI. Atividade de transaminase glutÃmico oxalacÃtica estava aumentada em todos os grupos. Transaminase glutÃmico pirÃvica nÃo teve atividade alterada. A atividade da lactato desidrogenase estava aumentada em todos os grupos. AnÃlises histopatolÃgicas do fÃgado e baÃo mostraram que os danos teciduais causados pela sepse foram retardados nos animais tratados com PL, como observado apÃs sete dias. A anÃlise integrada de todos os resultados sugere que as proteÃnas do lÃtex modulam a resposta imunoinflamatÃria por mecanismo indireto, revertendo à falÃncia da migraÃÃo de neutrÃfilos causada pela sepse letal e, desta forma, induzem uma resposta imunolÃgica ainda nÃo esclarecida, que permite a sobrevivÃncia dos animais, mesmo sob infecÃÃo. Os resultados sugerem que a modulaÃÃo de NO estaria diretamente envolvida no efeito protetor final observado. As propriedades farmacolÃgicas de PL previamente descritas em modelos clÃssicos de inflamaÃÃo sÃo agora confirmadas em um modelo de resposta inflamatÃria sistÃmica resultante de um processo infeccioso previamente estabelecido. / Latex of the medicinal plant Calotropis procera (Apocynaceae) possesses molecules displaying different pharmacological activities, including pro- and anti-inflammatory. In this study immune inflammatory modulation of the soluble protein fraction (LP) recovered from the latex was investigated in experimental models of sepsis induced by CLP and inoculation of the S. Typhimurium. Biochemical aspects of laticifers proteins were investigated and biochemical, pharmacological and histopathological parameters were evaluated in experimental animals. LP protected animals and a unique dose (30 mg/Kg; i.p.) lead to 100% survival while non-treated infected animals (Salmonella group) reached 100% mortality within 24 h. Protection was only observed when LP was given 24 earlier of infection. LP did not exhibit in vitro bactericide activity suggesting indirect mechanism of action, probably by immune modulation. After 4 and 24 h of infection bacteria was similarly disseminated in liver, spleen and peritoneal fluid, local of bacteria inoculum. However, in blood viable bacteria was reduced only in animals given laticifers proteins. The protective effect of LP was also observed in its three sub-fraction, denominated of PI, PII and PIII, obtained after protein fractionation by ion exchange chromatography on a CM-Sepharose performed at pH 5.0. Neither, heat-treatment (100 C, 30 min) nor inhibition of its endogenous proteolytic enzymes, by iodoacetamide, eliminated the protective effect of LP. Nitric oxide (NO) an important signaling molecule was augmented in serum of non-treated animals whereas it was unaltered in control and LP/PI-treated animals 24 h after infection. Increasing of NO in serum is known to directly contribute to inhibit neutrophil migration in septic animals. Accordingly, failure of neutrophil migration to the infectious focus in septic animals was confirmed. Conversely, in animals given LP and PI, influx of neutrophils was evident. In addition, NO was also elevated in the infectious focus of LP/PI treated animals, probably due neutrophil activity as part of their microbicidal activity. Activity of adenosine deaminase (ADA) was measured locally after 4 and 24 h of infection was initiated. ADA was augmented in LP/PI treated animals and unaltered in non treated animals. Thrombocytopenia was observed in non treated animals but not in LP/PI protected animals. Neutrophilia and lymphopenia were documented in non-treated animals. Neutrophilia would result of high NO content in serum, which inhibits neutrophil migration and lymphopenia is part of immune suppression caused by sepsis. Neutrophilia was observed 7 days after infection in animals given LP/PI, suggesting a hematopoiesis stimulus. Lymphopenia first observed (24 h) in septic animals was only detected after 7 days in PL/PI treated animals. Activity of oxalacetic-glutamic transaminase was altered in all groups while glutamic-pyruvic transaminase not. Lactate dehydrogenase was augmented in all groups. Histopathological examination of liver and spleen revealed tissue damage caused by sepsis, but these alterations appeared later (7 days) in PL/PI-treated animals. Results reported in this study suggest that PL modulates immune inflammatory activity in septic animals by an indirect mechanism that remains to be investigated. Activity of LP leads to animal survival, even under infection. It is proposed that LP modulates NO synthesis, reducing NO levels in serum of infected animals and abolishing the failure of neutrophil migration. The pharmacological properties of LP previously described in classical models of inflammation, is now confirmed in a model of systemic inflammatory response elicited by microbial infection.

Os objetivos deste trabalho foram: a quantificação da microinfiltração e desadaptação antes e após cimentação de coroas totais cerâmicas, com quatro tipos de sistemas de infra-estrutura e a correlação entre desadaptação e microinfiltração. Após aprovação pelo Comitê de Ética da FOUSP, 40 terceiros molares humanos receberam coroais totais cerâmicas, sendo: 2 cerâmicas infiltradas por vidro (In-Ceram alumina Slip-Cast (S) e o bIoco In-Ceram Alumina CA-12 (CA)) e 2 cerâmicas de alumina policristalina (Procera/Nobel Biocare (P) e o bloco In-Ceram Al-20, CEREC In-Lab (CE)), (n=10). O espaço entre coroa e dente foi medido antes e depois da cimentação das coroas. Foram submetidos à ciclagem mecânica (100.000 ciclos, 8 Kgf, 4 Hz), térmica (700 ciclos, 5/55ºC por minuto), submersos em azul de metileno 0,5% por 4 horas e seccionados nos sentidos mésio/distal e vestíbulo/lingual. As imagens foram obtidas em estereomicroscópio (20X) e os dados de desadaptação foram submetidos à ANOVA (e Tukey). Os escores da microinfiltração foram submetidos à análise da concordância dos avaliadores e Kruskal-Wallis. Não houve diferenças significantes entre os sistemas cerâmicos (S= 38, P= 49, CA= 48 e CE= 39?m). O fator \"região\" da linha de cimentação apresentou diferenças estatísticas. A desadaptação foi maior na parede pulpar (60 ?m), seguida dos ângulos axio-pulpar e gengivo-axial (57 e 48 ?m, respectivamente). As paredes axiais e margens foram os locais de menor desadaptação (27 e 26 ?m, respectivamente). Houve diferença estatística entre as duas técnicas de medida, antes e após a cimentação (46 e 41?m, respectivamente). Houve diferença estatisticamente significante entre os quatro tipos de sistemas cerâmicos avaliados quanto à microinfiltração, onde S e CE apresentaram maiores níveis de infiltração, seguidos de P e CA. Não houve correlação entre microinfiltração e desadaptação. Concluiu-se que os quatro sistemas cerâmicos avaliados produziram coroas totais com linha de cimentação dentro dos limites clinicamente aceitáveis. / The objectives of this study were to quantify the microleakage and the loss of marginal adaptation before and after cementation of all-ceramic crowns, with four types of infrastructure systems, and to compare these parameters. After approval by the Committee on Ethics in Research of Dental School of University of São Paulo, 40 human third molars received all-ceramic crowns, 2 glass-infiltrated ceramics (In-Ceram alumina Slip-Cast (S) and the block In-Ceram Alumina CA-12 (CA) ) and 2 polycrystalline alumina ceramics (Procera / Nobel Biocare (P) and the block Ceram In-Al-20, CEREC In-Lab (EC) (n = 10). The gap between ceramic dental prosthesis and tooth was measured before and after cementation of the crowns. They were subjected to mechanical load cycling (100,000 cycles, 8 Kgf, 4 Hz), thermocycling (700 cycles, 5 / 55 ° C per minute), immersed in 0.5% methylene blue dye for 4 hours and then sectioned in the mesial / distal and buccal / lingual aspects. The images were obtained in stereomicroscope (20X) and the marginal fit data were evaluated by ANOVA (and Tukey test). The microleakage values were analyzed by the correlation analysis of examiners and the Kruskal-Wallis test. There were no significant differences between the ceramic systems (S = 38, P = 49, CA = 50 and CE = 39 ? m). The factor \"region\" of the cementation line has presented statistical differences. The loss of adaptation was higher on the pulpal wall (61 ? m), followed by gingival-axial (49 ? m) and axial-pulpal (58 ? m) angles. The axial walls and margins were the sites of the smallest displacement (27 and 26 ?m, respectively). There was statistical difference between the two techniques of measurement, before and after cementation (47 and 41 ?m, respectively). Statistically significant difference among the four types of ceramic systems was detected for microleakage, whereas S and CE showed higher levels of infiltration, followed by P and CA. However, no correlation was found between microleakage and loss of marginal adaptation. It was concluded that the four systems produced all-ceramic crowns with the line of cementation within clinically acceptable limits.

SILVA, Rayanne Farias da. Análise histológica de tecidos cultivados in vitro de plantas laticíferas, perfil de proteínas solúveis e ação contra fitopatógenos. 2015. 121 f. Dissertação (Mestrado em bioquímica)- Universidade Federal do Ceará, Fortaleza-CE, 2015. / Submitted by Elineudson Ribeiro (elineudsonr@gmail.com) on 2016-09-01T21:33:34Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_rfsilva.pdf: 3566752 bytes, checksum: 60c280c36514d085ed22317cb38b6cb5 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2016-09-02T21:01:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_rfsilva.pdf: 3566752 bytes, checksum: 60c280c36514d085ed22317cb38b6cb5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-02T21:01:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_rfsilva.pdf: 3566752 bytes, checksum: 60c280c36514d085ed22317cb38b6cb5 (MD5) Previous issue date: 2015 / Laticifers plants have been studied by presenting a wide range of proteins related to plant defense in its latex. The aim of this study was to investigate, in tissue cultured in vitro, proteins and activities described for latex laticíferas two species. Tissue callus and roots of Cryptostegia grandiflora were obtained by in vitro tissues culture protocols and subjected to histological analysis for laticifers characterization. Cultured tissue of Calotropis procera were used as comparative reference in the analysis. There wasn’t any laticifer structure in callus or roots of C. grandiflora while in C. procera laticifers are formed in the roots. Soluble proteins were extracted from the cultured tissue and characterized using enzymatic assays, biochemical, immunological techniques and mass spectrometry. The presence of activity against phytopathogenic fungi was investigated and all data obtained were compared with the previously one determined for the plants studied latex. Callus and roots proteins of C. procera showed antifungal activity against pathogenic fungi. The percentage inhibition of the vegetative hyphae growth in the presence of callus and roots C. procera protein respectively were 75.5% and 82.6% for Fusarium solani, 76.7% and 57.1% for Rhizoctonia solani, 88.8% and 79.8% for Fusarium oxysporum, 93.7% and 90.2% for Colletotrichum lindemuthianum and 80.2% and 79.7% for Colletotrichum gloesporioides, however, showed no effect on Mucor sp. Callus and roots proteins of C. grandiflora showed no inhibitory effect on the hyphae growth or spores germination of assayed fungi. Through assays using fluorescent markers, it was demonstrated that proteins extracted from in vitro culture of C. procera interact with the membrane of C. gloesporioides causing leakage of cytoplasmic contents, possibly suggesting that its mechanism of action against fungi is related to the change in plasma membrane permeability. Also oxidative stress was observed in C. gloesporioides spores treated with callus and roots protein C. procera by hydrogen peroxide production. Protease inhibitors, chitinases, osmotins and proteases were detected in the C. procera callus and roots samples, however, osmotins and proteases were not observed in C. grandiflora callus and roots. The activity of antioxidant enzymes APX, G-POD and catalase were observed in tissue cultured in vitro of C. grandiflora. Considering that C. grandiflora laticifers proteases were demonstrated exert action against fungi, the results observed in this study suggest that the absence of antifungal activity in C. grandiflora cultured tissue is due to the absence of proteases in these tissues as well exclude chitinases and proteases inhibitors as antifungal proteins. The study concludes that the use of cultured tissues that do not differentiate laticifers is an interesting model to study activities associated to proteins founded in latex. Antifungal proteases present in C. grandiflora latex were not found in the tissues without laticifer formation. / Plantas laticíferas têm sido estudadas por apresentarem uma grande diversidade de proteínas relacionadas à defesa vegetal em seu látex. O objetivo deste trabalho foi pesquisar em tecidos cultivados in vitro, proteínas e atividades descritas para o látex de duas espécies laticíferas. Tecidos de calos e raízes de Cryptostegia grandiflora foram obtidos através de protocolos de cultura in vitro de tecidos e submetidos à análise histológica para caracterização de laticíferos. Tecidos cultivados de Calotropis procera foram utilizados como referencial comparativo nas análises. Não foi detectada qualquer estrutura laticífera em calos ou raízes de C. grandiflora enquanto que em C. procera laticíferos se formam nas raízes. Proteínas solúveis foram extraídas dos tecidos cultivados e caracterizadas por meio de ensaios enzimáticos, técnicas bioquímicas, imunológicas e espectrometria de massas. A presença de atividade contra fungos fitopatogênicos foi investigada e todos os dados obtidos foram comparados com dados previamente determinados para os látex das espécies estudadas. Proteínas dos calos e raízes de C. procera, apresentaram atividade antifúngica sobre fungos fitopatogênicos. Os percentuais de inibição do crescimento vegetativo de hifas na presença de proteínas de calos e raízes de C. procera, respectivamente, foram: 75,5% e 82,6% para Fusarium solani, 76,7% e 57,1% para Rhizoctonia solani, 88,8% e 79,8% para Fusarium oxysporum, 93,7% e 90,2% para Colletotrichum lindemuthianum e 80,2% e 79,7% para Colletotrichum gloesporioides, no entanto, não demonstraram nenhum efeito sobre Mucor sp. As proteínas de calos e raízes de C. grandiflora não apresentaram qualquer efeito inibitório sobre o crescimento de hifas ou germinação de esporos dos fungos avaliados. Por meio de ensaios com marcadores de fluorescência, foi possível demonstrar que as proteínas extraídas da cultura in vitro de C. procera interagem com a membrana de C. gloesporioides causando extravasamento do conteúdo citoplasmático, sugerindo que possivelmente seu mecanismo de ação contra fungos esteja relacionado à alteração na permeabilidade da membrana plasmática. Também foi observado estresse oxidativo em esporos de C. gloesporioides tratados com proteínas de calos e raízes de C. procera através da produção de peróxido de hidrogênio. Inibidores de proteases, quitinases, osmotinas e proteases foram detectados nas amostras de calos e raízes de C. procera, porém, osmotinas e proteases não foram observadas em calos e raízes de C. grandiflora. A atividade das enzimas antioxidantes APX, G-POD e catalase foram observadas nos tecidos cultivados in vitro de C. grandiflora. Considerando que proteases laticíferas de C. grandiflora foram demonstradas exercer ação contra fungos, os resultados observados nesta pesquisa sugerem que a ausência de atividade antifúngica em tecidos cultivados de C. grandiflora deve-se a ausência de proteases nestes tecidos e ainda excluem quitinases e inibidores de proteases presentes como proteínas antifúngicas. Em calos e raízes de C. procera, além de proteases, outras proteínas tais como, quitinases, inibidores de proteases e osmotinas detectadas podem estar envolvidas na atividade antifúngica observada, e/ou agir sinergicamente na defesa contra fungos. O estudo conclui que o uso de tecidos cultivados que não diferenciam laticíferos é um interessante modelo para estudar atividades associadas às proteínas encontradas no látex. Proteases antifúngicas presentes no látex de C. grandiflora não foram encontradas nos tecidos sem formação laticífera.

Submitted by Daniella Sodre (daniella.sodre@ufpe.br) on 2015-03-17T13:22:51Z No. of bitstreams: 2 Dissertação Tatianne Leite Nascimento.pdf: 1005313 bytes, checksum: 9919a36f2460b9b63effcddf792fb8bd (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-17T13:22:51Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação Tatianne Leite Nascimento.pdf: 1005313 bytes, checksum: 9919a36f2460b9b63effcddf792fb8bd (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2010-02-11 / CAPES e FINEP / Fungos endofíticos são micro-organismos que colonizam assintomaticamente, intra e/ou intercelularmente, tecidos sadios de plantas em algum período do seu ciclo de vida. Estes despertaram grande interesse biotecnológico em virtude da aplicabilidade de seus metabólitos secundários na medicina, indústria e agricultura. Calotropis procera (Ait.) R. Br. (Apocynaceae) é uma planta medicinal muito utilizada nas regiões de origem (Ásia e África) com comprovado potencial farmacológico, sendo de ocorrência subespontânea no Nordeste do Brasil. Com o objetivo geral de analisar alguns aspectos ecológicos e o potencial antimicrobiano dos fungos endofíticos de C. procera, no presente estudo, foram realizadas duas coletas de material vegetal: uma no canteiro experimental do Centro de Ciências Biológicas, UFPE (Área 1), para avaliar a influência da idade foliar na comunidade de fungos endofíticos; e nas margens da BR-232, no início da Serra das Russas-PE (Área 2), para estudar a influência do tipo de tecido vegetal na comunidade de fungos endofíticos associados a folhas e pedúnculos florais. Os endofíticos foram caracterizados quanto à produção de substâncias antimicrobianas contra micro-organismos testes, patogênicos ao homem e vegetais, através de seleção em meio sólido e líquido. Na Área 1, um total de 156 isolados fúngicos distribuídos em 19 táxons, foram obtidos a partir dos 468 fragmentos foliares analisados. Verificou-se que o aumento da idade foliar exerceu uma forte influência no aumento da taxa de colonização e da riqueza de táxons dos fungos endofíticos isolados. Ocorreu pouca variação entre os índices de diversidade de Shannon calculados para as diferentes categorias etárias. A espécie dominante foi Phaeoramularia calotropidis, seguida por Guignardia bidwellii. Seis fungos endofíticos mostraram atividade contra pelo menos um micro-organismo teste. A capacidade antagônica foi verificada apenas contra bactérias Gram-positivas e os fungos patogênicos Epidermophyton floccosum e Colletotrichum dematium. Na Área 2, dos 400 fragmentos vegetais analisados foram isolados 214 fungos endofíticos distribuídos em 30 táxons, incluindo 11 morfoespécies. A taxa de colonização dos fungos endofíticos foi bem superior nos fragmentos de pedúnculos florais (61%) que nos foliares (22,5 %). Nos pedúnculos florais as leveduras predominaram, enquanto que nas folhas os fungos filamentosos foram o grupo prevalente. Dentre as espécies de fungos filamentosos isolados de pedúnculo floral, destaca-se a espécie Monodisma fragilis de primeira ocorrência na América Latina. Dos 51 fungos endofíticos submetidos a seleção primária em meio sólido, 47% mostraram atividade contra pelo menos um micro-organismo teste, principalmente contra bactérias Gram-positivas. Dos fungos selecionados em ensaio em meio sólido, apenas quatro apresentaram resultados positivos nas condições de cultivo aplicadas no ensaio em meio líquido, com destaque para o isolado do pedúnculo floral Xylaria sp., com atividade contra Streptococcus pyogenes, Enterococcus faecalis, Escherichia coli e Salmonella typhi.

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Laticifers plants have been studied by presenting a wide range of proteins related to plant defense in its latex. The aim of this study was to investigate, in tissue cultured in vitro, proteins and activities described for latex laticÃferas two species. Tissue callus and roots of Cryptostegia grandiflora were obtained by in vitro tissues culture protocols and subjected to histological analysis for laticifers characterization. Cultured tissue of Calotropis procera were used as comparative reference in the analysis. There wasnât any laticifer structure in callus or roots of C. grandiflora while in C. procera laticifers are formed in the roots. Soluble proteins were extracted from the cultured tissue and characterized using enzymatic assays, biochemical, immunological techniques and mass spectrometry. The presence of activity against phytopathogenic fungi was investigated and all data obtained were compared with the previously one determined for the plants studied latex. Callus and roots proteins of C. procera showed antifungal activity against pathogenic fungi. The percentage inhibition of the vegetative hyphae growth in the presence of callus and roots C. procera protein respectively were 75.5% and 82.6% for Fusarium solani, 76.7% and 57.1% for Rhizoctonia solani, 88.8% and 79.8% for Fusarium oxysporum, 93.7% and 90.2% for Colletotrichum lindemuthianum and 80.2% and 79.7% for Colletotrichum gloesporioides, however, showed no effect on Mucor sp. Callus and roots proteins of C. grandiflora showed no inhibitory effect on the hyphae growth or spores germination of assayed fungi. Through assays using fluorescent markers, it was demonstrated that proteins extracted from in vitro culture of C. procera interact with the membrane of C. gloesporioides causing leakage of cytoplasmic contents, possibly suggesting that its mechanism of action against fungi is related to the change in plasma membrane permeability. Also oxidative stress was observed in C. gloesporioides spores treated with callus and roots protein C. procera by hydrogen peroxide production. Protease inhibitors, chitinases, osmotins and proteases were detected in the C. procera callus and roots samples, however, osmotins and proteases were not observed in C. grandiflora callus and roots. The activity of antioxidant enzymes APX, G-POD and catalase were observed in tissue cultured in vitro of C. grandiflora. Considering that C. grandiflora laticifers proteases were demonstrated exert action against fungi, the results observed in this study suggest that the absence of antifungal activity in C. grandiflora cultured tissue is due to the absence of proteases in these tissues as well exclude chitinases and proteases inhibitors as antifungal proteins. The study concludes that the use of cultured tissues that do not differentiate laticifers is an interesting model to study activities associated to proteins founded in latex. Antifungal proteases present in C. grandiflora latex were not found in the tissues without laticifer formation. / Plantas laticÃferas tÃm sido estudadas por apresentarem uma grande diversidade de proteÃnas relacionadas à defesa vegetal em seu lÃtex. O objetivo deste trabalho foi pesquisar em tecidos cultivados in vitro, proteÃnas e atividades descritas para o lÃtex de duas espÃcies laticÃferas. Tecidos de calos e raÃzes de Cryptostegia grandiflora foram obtidos atravÃs de protocolos de cultura in vitro de tecidos e submetidos à anÃlise histolÃgica para caracterizaÃÃo de laticÃferos. Tecidos cultivados de Calotropis procera foram utilizados como referencial comparativo nas anÃlises. NÃo foi detectada qualquer estrutura laticÃfera em calos ou raÃzes de C. grandiflora enquanto que em C. procera laticÃferos se formam nas raÃzes. ProteÃnas solÃveis foram extraÃdas dos tecidos cultivados e caracterizadas por meio de ensaios enzimÃticos, tÃcnicas bioquÃmicas, imunolÃgicas e espectrometria de massas. A presenÃa de atividade contra fungos fitopatogÃnicos foi investigada e todos os dados obtidos foram comparados com dados previamente determinados para os lÃtex das espÃcies estudadas. ProteÃnas dos calos e raÃzes de C. procera, apresentaram atividade antifÃngica sobre fungos fitopatogÃnicos. Os percentuais de inibiÃÃo do crescimento vegetativo de hifas na presenÃa de proteÃnas de calos e raÃzes de C. procera, respectivamente, foram: 75,5% e 82,6% para Fusarium solani, 76,7% e 57,1% para Rhizoctonia solani, 88,8% e 79,8% para Fusarium oxysporum, 93,7% e 90,2% para Colletotrichum lindemuthianum e 80,2% e 79,7% para Colletotrichum gloesporioides, no entanto, nÃo demonstraram nenhum efeito sobre Mucor sp. As proteÃnas de calos e raÃzes de C. grandiflora nÃo apresentaram qualquer efeito inibitÃrio sobre o crescimento de hifas ou germinaÃÃo de esporos dos fungos avaliados. Por meio de ensaios com marcadores de fluorescÃncia, foi possÃvel demonstrar que as proteÃnas extraÃdas da cultura in vitro de C. procera interagem com a membrana de C. gloesporioides causando extravasamento do conteÃdo citoplasmÃtico, sugerindo que possivelmente seu mecanismo de aÃÃo contra fungos esteja relacionado à alteraÃÃo na permeabilidade da membrana plasmÃtica. TambÃm foi observado estresse oxidativo em esporos de C. gloesporioides tratados com proteÃnas de calos e raÃzes de C. procera atravÃs da produÃÃo de perÃxido de hidrogÃnio. Inibidores de proteases, quitinases, osmotinas e proteases foram detectados nas amostras de calos e raÃzes de C. procera, porÃm, osmotinas e proteases nÃo foram observadas em calos e raÃzes de C. grandiflora. A atividade das enzimas antioxidantes APX, G-POD e catalase foram observadas nos tecidos cultivados in vitro de C. grandiflora. Considerando que proteases laticÃferas de C. grandiflora foram demonstradas exercer aÃÃo contra fungos, os resultados observados nesta pesquisa sugerem que a ausÃncia de atividade antifÃngica em tecidos cultivados de C. grandiflora deve-se a ausÃncia de proteases nestes tecidos e ainda excluem quitinases e inibidores de proteases presentes como proteÃnas antifÃngicas. Em calos e raÃzes de C. procera, alÃm de proteases, outras proteÃnas tais como, quitinases, inibidores de proteases e osmotinas detectadas podem estar envolvidas na atividade antifÃngica observada, e/ou agir sinergicamente na defesa contra fungos. O estudo conclui que o uso de tecidos cultivados que nÃo diferenciam laticÃferos à um interessante modelo para estudar atividades associadas Ãs proteÃnas encontradas no lÃtex. Proteases antifÃngicas presentes no lÃtex de C. grandiflora nÃo foram encontradas nos tecidos sem formaÃÃo laticÃfera.

Made available in DSpace on 2016-08-12T19:15:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FlavianaAV_DISSERT.pdf: 775573 bytes, checksum: f0fb79ca644e2f981adf3e69a6c727f9 (MD5) Previous issue date: 2014-09-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Cowpea-vegetable (Vigna unguiculata (L.) Walp) is a grain legume, used in the human food, largely grown in semi-arid areas of the Brazilian Northeast. Green manure is an economical form and alternative for the low-income farmers to fertilize their crops. However, there is no information about the use of this green manure using roostertree. In view of this, this study aimed to determine the dose of agroeconomic efficiency maximum of roostertree in the green grain yield of cowpea-vegetable and its production components in function of different amounts of roostertree incorporated into the soil in sole crop. The experiment was conducted at the Experimental Farm Rafael Fernandes, from August to November 2013. The experimental design was a randomized complete block design with 5 replications. The treatments consisted of the following amounts of roostertree biomass incorporated into the soil: 20, 35, 50 and 65 t ha-1 on a dry basis. Each experimental plot had a total area of 3.6 m2 (3.00 m x 1.20 m), with a harvest area of 2.00 m2, containing 40 plants of cowpea-vegetable spaced of 0.50 m between rows with 10 plants per linear meter. The cultivar of cowpea-vegetable planted was BRS Itaim. It was incorporated 30% of the roostertree on August 22, 2013 in all plots, 20 days before planting. During the time of decomposition were performed daily irrigations in two shifts, one in the morning and one in the evening. After 20 days of sowing was made the incorporation of the 70% remaining of the material between the lines of the plots. The characteristics evaluated were: number of green pods per square meter, number of green grains per pod, yield of green pods, weight of 100 green grains and dry mass of grains and green pods. The economic indicators determined were: gross income (GI), net income (NI), production cost (PC), rate of return (RR) and profit margin (PM). The doses for maximum agronomic and economic efficiency of cowpea-vegetable were obtained with the incorporation into the soil of the quantities of roostertree of 59.4 and 54 t ha-1, respectively, with the yield of green grains of 3.25 t ha-1 and net income of R $ 9,624.74 / O caupi-hortaliça (Vigna unguiculata (L.) Walp), é uma leguminosa granífera, utilizada na alimentação humana, bastante cultivada nas áreas semi-áridas do Nordeste brasileiro. A adubação verde é uma forma econômica e alternativa dos produtores rurais de baixa renda para fertilizar suas plantações. Contudo, não há informações sobre o uso dessa adubação verde utilizando flor-de-seda. Diante disto, este trabalho teve como objetivo determinar a dose de máxima eficiência agroeconômica de flor-de-seda na produtividade de grãos verdes de caupi-hortaliça e de seus componentes de produção em função de diferentes quantidades de flor-de-seda incorporadas ao solo em cultivo solteiro. O experimento foi conduzido na Fazenda Experimental Rafael Fernandes, no período de agosto a novembro de 2013. O delineamento experimental utilizado foi em blocos completos casualizados com 5 repetições. Os tratamentos consistiram das seguintes quantidades de biomassa de flor-de-seda incorporadas ao solo: 20, 35, 50 e 65 t ha-1 em base seca. Cada parcela experimental teve uma área total de 3,6 m2 (3,00 m x 1,20 m), com uma área útil de 2,00 m2 contendo 40 plantas de caupi-hortaliça no espaçamento 0,50 m entre fileiras com 10 plantas por metro linear. A cultivar de caupi-hortaliça plantada foi a BRS Itaim. Foram incorporadas 30% da flor-de-seda no dia 22 de agosto de 2013 em todas as parcelas, 20 dias antes do plantio. Durante o tempo de decomposição foram realizadas irrigações diárias em dois turnos, uma pela manhã e a outra pela tarde. Após 20 dias da semeadura foi feita a incorporação dos 70% restante do material nas entre linhas das parcelas. As características avaliadas foram: número de vagens verdes por metro quadrado, número de grãos verdes por vagem, produtividade de vagens verdes, peso de 100 grãos verdes e massa seca de grãos e de vagens verdes. Os Indicadores econômicos determinados foram: renda bruta (RB), renda líquida (RL), custo de produção (CT), taxa de retorno (TR) e índice de lucratividade (IL). As doses de máxima eficiência agronômica e econômica de caupi-hortaliça foram obtidas com a incorporação ao solo das quantidades de flor-de-seda de 59,4 e 54 t ha-1, respectivamente, com a produtividade de grãos verdes de 3,25 t ha-1 e renda líquida de R$ 9.624,74

Made available in DSpace on 2016-08-12T19:15:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ShamyraGAS_Dissert.pdf: 1345668 bytes, checksum: 408f47b3e8a408dc7702858d04d13fc8 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Silk Flower [Calotropis procera (Aiton) W.T. Aiton] is a plant that has been highlighted by the case of a species that has several features such as animal feed, traditional medicine, agriculture, environment, cosmetics and textile industry, and may also act to combat pests, fungi and viruses through mechanisms defense associated with your latex. This study aimed to evaluate latex fluid from Silk Flower in inhibiting the development of pathogenic fungi of Macrophomina phaseolina, Rhizoctonia solani, Colletotrichum musae and Monosporascus cannonballus and study the genetic diversity from Silk Flower genotypes using the RAPD and ISSR molecular markers. Twenty samples of species of leaves were collected in the Grossos/RN and Mossoró/RN cities (ten plants from each city). The plants latex were tested on four different types of phytopathogenic fungi, Macrophomina phaseolina, Rhizoctonia solani, Colletotrichum musae and Monosporascus cannonballus with two different methods (adding latex to the culture medium before and after polymerization middle), and with two different concentration level (neat and diluted 1:1). For molecular analysis, DNA of each plant was extracted with 11 RAPD primers and 10 ISSR primers. For latex analyzes, it was observed that there was no inhibitory effect for any of Macrophomina phaseolina, Rhizoctonia solani, Colletotrichum musae and Monosporascus cannonballus isolates in any of the concentrations tested under the conditions studied. Molecular results showed a good standard for both amplification of DNA markers, showing the formation of different groups, and the presence of genetic variability has been detected. For the analysis with molecular markers there was the formation of the four distinct groups, and in the ISSR marker was observed the formation of six groups. When it was analyzed the two markers in a corresponding manner it was possible to detect the formation of seven distinct groups showing the existence of variability. The difference in the results of both markers can be explained by the case of two markers that covered different regions of the genome / Flor de Seda [Calotropis procera (Aiton) W.T. Aiton] é uma planta que tem recebido destaque por se tratar de uma espécie que possui diversas funcionalidades como alimentação animal, medicina tradicional, agricultura, meio ambiente, indústria cosmética e têxtil, podendo também atuar no combate à pragas, fungos e vírus através de mecanismos de defesa associados ao seu látex. Objetivou-se nesse estudo avaliar fluidos laticíferos da Flor de Seda na inibição do desenvolvimento de fungos fitopatogênicos de Macrophomina phaseolina, Rhizoctonia solani, Colletotrichum musae e Monosporascus cannonballus e estudar a divergência genética de genótipos de Flor de Seda por meio de marcadores moleculares RAPD e ISSR. Vinte amostras de folhas da espécie foram coletadas na cidade de Grossos/RN e na cidade de Mossoró/RN no Campus Leste da UFERSA (dez plantas para cada local de coleta). O látex das plantas foram testados em quatro diferentes tipos de fungos fitopatogênicos, Macrophomina phaseolina, Rhizoctonia solani, Colletotrichum musae e Monosporascus cannonballus com duas diferentes metodologias (adicionando o látex ao meio de cultura antes e após a polimerização do meio) e com dois níveis diferentes de concentração (puro e diluído 1:1). Para as análises moleculares, o DNA de cada uma das plantas foi extraído com 11 primers RAPD e 10 primers ISSR. Para as análises do látex, foi observado que não houve efeito inibitório para nenhum dos isolados de Macrophomina phaseolina, Rhizoctonia solani, Colletotrichum musae e Monosporascus cannonballus em nenhuma das concentrações testadas nas condições estudadas. Os resultados moleculares obtidos revelaram um bom padrão de amplificação para ambos os marcadores de DNA, mostrando à formação de grupos distintos, tendo sido detectada a presença de variabilidade genética. Para as análises com os marcadores RAPD houve a formação de quatro grupos distintos, e para o marcador ISSR foi possível observar a formação de seis grupos. Quando se analisou os dois marcadores de forma correlacionada foi possível detectar a formação de sete grupos distintos demonstrando a existência de variabilidade. A diferença encontrada nos resultados de ambos marcadores pode ser explicada por se tratar de dois marcadores que cobriram diferentes regiões do genoma

Made available in DSpace on 2016-08-12T19:18:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SilviaRSOB_TESE.pdf: 1977114 bytes, checksum: 15684c05d277f3242f1e1144261bdd86 (MD5) Previous issue date: 2012-03-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The experiments were carried out in laboratory and greenhouse in the Universidade Federal Rural do Semiárido-UFERSA, to obtain information about the biometrics of fruits and seeds, germination and storage performance of silk flower seeds. In the first experiment there were evaluated length, width, thickness and weight of fruits and seeds in a 100 fruits size sample; the number of seeds per fruit was also quantified, moisture content and weight of 1000 seeds were obtained. Following traits were evaluated: germination and the germination average time. Experimental design was completely randomized with a 6x3x2 factorial, using combinations of six temperatures (20, 25, 30, 35, 20-30 e 25-30 ºC), three substrates (sand, towel paper and blotting paper) and two light conditions (presence and absence), with six replications of 50 seeds. In the second experiment seeds were used having moisture contents 30, 24, 18, 12 e 7%, packed in paper bags, plastic bags and plastic bottles, stored in cold chamber (16 °C a 18 °C) and laboratory (27 °C a 30 °C), both with 50-55%UR during 180 days.There were carried out periodic evaluations of moisture content, germination, seedling emergence, speed of emergence, seedling length and weight of seedling dry matter. The experimental design was completely randomized with a 6x5x3x2 factorial, using combinations of six storage periods, five moisture contents, three package types and two environmental conditions with four replications of 50 seeds. Data were analyzed by analysis of variance using test F. To comparisons between storage periods there were adjusted regression equations. The average weight of fruits was 23,53 g with average dimensions of 11,60 cm lenght, 7,41 cm width and 6,79 cm thickness; 54,6% of fruits showed from 401 to 500 seeds. The average dimensions of seeds were 0.75 cm length, 0,55 cm width and 0,10 cm thickness, while thousand seed weight was 8.54 g. It was concluded that there is variability for traits related to fruit size and weight of silk-flower, the number of seeds per fruit is high, favoring the specie spreading, widely distributed in the semiarid region; it is recommended that the initial and final counting of germination test are performed at 5 and 10 days after sowing, respectively; the constant temperature of 30 ° C, alternating 25-30 ° C and the substrates sand and towel paper were the most appropriate conditions for germination; silk flower seeds are indifferent to light, having orthodox physiological behaviour; seeds viability decreased with storage time of 180 days; seeds can be preserved with efficiency in paper bags, in a controlled environment, with moisture content of 7% for 90 days / Os experimentos foram conduzidos em laboratório e casa de vegetação da Universidade Federal Rural do Semiárido-UFERSA, com os objetivos de obter informações sobre a biometria de frutos e sementes, a germinação e o armazenamento de sementes de flor-de-seda. No primeiro experimento foi utilizada amostra de 100 frutos para avaliar comprimento, largura, espessura e peso de frutos e sementes; sendo quantificados o número de sementes por fruto, teor de água e peso de mil sementes. Foram avaliadas as variáveis germinação e tempo médio de germinação. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado, num arranjo fatorial 6x3x2, constituído pelas combinações de seis temperaturas (20, 25, 30, 35, 20-30 e 25-30 ºC), três substratos (areia, papel toalha e mata-borrão) e duas condições de luminosidade (presença e ausência de luz), com seis repetições de 50 sementes. No segundo experimento foram utilizadas sementes com teores de água de 30, 24, 18, 12 e 7%, que foram acondicionadas em sacos de papel, sacos plásticos e garrafas plásticas, armazenadas em laboratório (27 °C a 30 °C) e ambiente controlado (16 °C a 18 °C), ambos com 50-55% UR durante 180 dias e submetidas a avaliações mensais do teor de água, da germinação, emergência de plântula, do índice de velocidade de emergência, comprimento da plântula e da massa de matéria seca da plântula. O delineamento experimental foi o inteiramente casualizado, em arranjo fatorial 6x5x3x2, constituído pelas combinações de seis períodos de armazenamento, cinco teores de água, três embalagens e dois ambientes, utilizando-se quatro repetições de 50 sementes. Os dados foram submetidos à análise de variância sendo utilizado o teste F. Para comparações entre os períodos de armazenamento foram ajustadas equações de regressão. O peso médio dos frutos foi de 23,53 g com dimensões médias de 11,60 cm de comprimento, 7,41 cm de largura e 6,79 cm de espessura, sendo que 54,6% dos frutos apresentaram de 401 a 500 sementes. As dimensões médias das sementes foram 0,75 cm de comprimento, 0,55 cm de largura e 0,10 cm de espessura, enquanto o peso de mil sementes foi de 8,54 g. Concluiu-se que há variabilidade para os caracteres relacionados às dimensões e pesos de frutos de flor-de-seda; o número de sementes por fruto é elevado, favorecendo a disseminação da espécie, amplamente distribuída na região semiárida; recomenda-se que as contagens inicial e final do teste de germinação sejam realizadas aos 5 e 10 dias da semeadura, respectivamente; a temperatura constante de 30 ºC, alternada de 25-30 ºC e os substratos areia e papel toalha foram as condições mais adequadas para a germinação; as sementes são indiferentes à luminosidade, apresentando comportamento fisiológico ortodoxo; a viabilidade decresceu em função do tempo de armazenamento durante 180 dias; as sementes são conservadas com eficiência em embalagens de saco de papel, em ambiente controlado, com teor de água a 7% por 90 dias

Made available in DSpace on 2016-08-12T19:18:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FlavianaAV_DISSERT.pdf: 775573 bytes, checksum: f0fb79ca644e2f981adf3e69a6c727f9 (MD5) Previous issue date: 2014-09-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Cowpea-vegetable (Vigna unguiculata (L.) Walp) is a grain legume, used in the human food, largely grown in semi-arid areas of the Brazilian Northeast. Green manure is an economical form and alternative for the low-income farmers to fertilize their crops. However, there is no information about the use of this green manure using roostertree. In view of this, this study aimed to determine the dose of agroeconomic efficiency maximum of roostertree in the green grain yield of cowpea-vegetable and its production components in function of different amounts of roostertree incorporated into the soil in sole crop. The experiment was conducted at the Experimental Farm Rafael Fernandes, from August to November 2013. The experimental design was a randomized complete block design with 5 replications. The treatments consisted of the following amounts of roostertree biomass incorporated into the soil: 20, 35, 50 and 65 t ha-1 on a dry basis. Each experimental plot had a total area of 3.6 m2 (3.00 m x 1.20 m), with a harvest area of 2.00 m2, containing 40 plants of cowpea-vegetable spaced of 0.50 m between rows with 10 plants per linear meter. The cultivar of cowpea-vegetable planted was BRS Itaim. It was incorporated 30% of the roostertree on August 22, 2013 in all plots, 20 days before planting. During the time of decomposition were performed daily irrigations in two shifts, one in the morning and one in the evening. After 20 days of sowing was made the incorporation of the 70% remaining of the material between the lines of the plots. The characteristics evaluated were: number of green pods per square meter, number of green grains per pod, yield of green pods, weight of 100 green grains and dry mass of grains and green pods. The economic indicators determined were: gross income (GI), net income (NI), production cost (PC), rate of return (RR) and profit margin (PM). The doses for maximum agronomic and economic efficiency of cowpea-vegetable were obtained with the incorporation into the soil of the quantities of roostertree of 59.4 and 54 t ha-1, respectively, with the yield of green grains of 3.25 t ha-1 and net income of R $ 9,624.74 / O caupi-hortaliça (Vigna unguiculata (L.) Walp), é uma leguminosa granífera, utilizada na alimentação humana, bastante cultivada nas áreas semi-áridas do Nordeste brasileiro. A adubação verde é uma forma econômica e alternativa dos produtores rurais de baixa renda para fertilizar suas plantações. Contudo, não há informações sobre o uso dessa adubação verde utilizando flor-de-seda. Diante disto, este trabalho teve como objetivo determinar a dose de máxima eficiência agroeconômica de flor-de-seda na produtividade de grãos verdes de caupi-hortaliça e de seus componentes de produção em função de diferentes quantidades de flor-de-seda incorporadas ao solo em cultivo solteiro. O experimento foi conduzido na Fazenda Experimental Rafael Fernandes, no período de agosto a novembro de 2013. O delineamento experimental utilizado foi em blocos completos casualizados com 5 repetições. Os tratamentos consistiram das seguintes quantidades de biomassa de flor-de-seda incorporadas ao solo: 20, 35, 50 e 65 t ha-1 em base seca. Cada parcela experimental teve uma área total de 3,6 m2 (3,00 m x 1,20 m), com uma área útil de 2,00 m2 contendo 40 plantas de caupi-hortaliça no espaçamento 0,50 m entre fileiras com 10 plantas por metro linear. A cultivar de caupi-hortaliça plantada foi a BRS Itaim. Foram incorporadas 30% da flor-de-seda no dia 22 de agosto de 2013 em todas as parcelas, 20 dias antes do plantio. Durante o tempo de decomposição foram realizadas irrigações diárias em dois turnos, uma pela manhã e a outra pela tarde. Após 20 dias da semeadura foi feita a incorporação dos 70% restante do material nas entre linhas das parcelas. As características avaliadas foram: número de vagens verdes por metro quadrado, número de grãos verdes por vagem, produtividade de vagens verdes, peso de 100 grãos verdes e massa seca de grãos e de vagens verdes. Os Indicadores econômicos determinados foram: renda bruta (RB), renda líquida (RL), custo de produção (CT), taxa de retorno (TR) e índice de lucratividade (IL). As doses de máxima eficiência agronômica e econômica de caupi-hortaliça foram obtidas com a incorporação ao solo das quantidades de flor-de-seda de 59,4 e 54 t ha-1, respectivamente, com a produtividade de grãos verdes de 3,25 t ha-1 e renda líquida de R$ 9.624,74

Made available in DSpace on 2016-08-12T19:18:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ShamyraGAS_Dissert.pdf: 1345668 bytes, checksum: 408f47b3e8a408dc7702858d04d13fc8 (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Silk Flower [Calotropis procera (Aiton) W.T. Aiton] is a plant that has been highlighted by the case of a species that has several features such as animal feed, traditional medicine, agriculture, environment, cosmetics and textile industry, and may also act to combat pests, fungi and viruses through mechanisms defense associated with your latex. This study aimed to evaluate latex fluid from Silk Flower in inhibiting the development of pathogenic fungi of Macrophomina phaseolina, Rhizoctonia solani, Colletotrichum musae and Monosporascus cannonballus and study the genetic diversity from Silk Flower genotypes using the RAPD and ISSR molecular markers. Twenty samples of species of leaves were collected in the Grossos/RN and Mossoró/RN cities (ten plants from each city). The plants latex were tested on four different types of phytopathogenic fungi, Macrophomina phaseolina, Rhizoctonia solani, Colletotrichum musae and Monosporascus cannonballus with two different methods (adding latex to the culture medium before and after polymerization middle), and with two different concentration level (neat and diluted 1:1). For molecular analysis, DNA of each plant was extracted with 11 RAPD primers and 10 ISSR primers. For latex analyzes, it was observed that there was no inhibitory effect for any of Macrophomina phaseolina, Rhizoctonia solani, Colletotrichum musae and Monosporascus cannonballus isolates in any of the concentrations tested under the conditions studied. Molecular results showed a good standard for both amplification of DNA markers, showing the formation of different groups, and the presence of genetic variability has been detected. For the analysis with molecular markers there was the formation of the four distinct groups, and in the ISSR marker was observed the formation of six groups. When it was analyzed the two markers in a corresponding manner it was possible to detect the formation of seven distinct groups showing the existence of variability. The difference in the results of both markers can be explained by the case of two markers that covered different regions of the genome / Flor de Seda [Calotropis procera (Aiton) W.T. Aiton] é uma planta que tem recebido destaque por se tratar de uma espécie que possui diversas funcionalidades como alimentação animal, medicina tradicional, agricultura, meio ambiente, indústria cosmética e têxtil, podendo também atuar no combate à pragas, fungos e vírus através de mecanismos de defesa associados ao seu látex. Objetivou-se nesse estudo avaliar fluidos laticíferos da Flor de Seda na inibição do desenvolvimento de fungos fitopatogênicos de Macrophomina phaseolina, Rhizoctonia solani, Colletotrichum musae e Monosporascus cannonballus e estudar a divergência genética de genótipos de Flor de Seda por meio de marcadores moleculares RAPD e ISSR. Vinte amostras de folhas da espécie foram coletadas na cidade de Grossos/RN e na cidade de Mossoró/RN no Campus Leste da UFERSA (dez plantas para cada local de coleta). O látex das plantas foram testados em quatro diferentes tipos de fungos fitopatogênicos, Macrophomina phaseolina, Rhizoctonia solani, Colletotrichum musae e Monosporascus cannonballus com duas diferentes metodologias (adicionando o látex ao meio de cultura antes e após a polimerização do meio) e com dois níveis diferentes de concentração (puro e diluído 1:1). Para as análises moleculares, o DNA de cada uma das plantas foi extraído com 11 primers RAPD e 10 primers ISSR. Para as análises do látex, foi observado que não houve efeito inibitório para nenhum dos isolados de Macrophomina phaseolina, Rhizoctonia solani, Colletotrichum musae e Monosporascus cannonballus em nenhuma das concentrações testadas nas condições estudadas. Os resultados moleculares obtidos revelaram um bom padrão de amplificação para ambos os marcadores de DNA, mostrando à formação de grupos distintos, tendo sido detectada a presença de variabilidade genética. Para as análises com os marcadores RAPD houve a formação de quatro grupos distintos, e para o marcador ISSR foi possível observar a formação de seis grupos. Quando se analisou os dois marcadores de forma correlacionada foi possível detectar a formação de sete grupos distintos demonstrando a existência de variabilidade. A diferença encontrada nos resultados de ambos marcadores pode ser explicada por se tratar de dois marcadores que cobriram diferentes regiões do genoma