Para estudo de diferentes períodos de protocolos de indução do estro e de um novo dispositivo de progesterona para pequenos ruminantes (DPR - Tecnopec, Brasil) foram realizados dois experimentos em ovelhas da raça Texel durante a contraestação reprodutiva. Experimento 1: com o objetivo de comparar a eficiência de protocolos de indução do estro em períodos de nove versus doze dias e com a utilização de dispositivos novos versus usados através das taxas de gestação e manifestação de estro, foram utilizados 160 ovelhas Texel. Os animais foram divididos aleatoriamente em 4 grupos: protocolo de 9 dias com a utilização de um dispositivo feito em silicone novo (G9N, n=91), protocolo de 9 dias com a utilização de dispositivo usado (G9U, n=25), protocolo de 12 dias com a utilização de dispositivo novo (G12N, n=26) e protocolo de 12 dias com a utilização de dispositivo usado (G12U, n=18). Os dispositivos foram colocados no dia zero (D0) e retirados no dia nove (D9) nos grupos G9N e G9U e doze dias após (D12) nos grupos G12N e G12U. Junto com a aplicação de 0,125mg de cloprostenol (Estron, Agener, Brasil) e 500UI de eCG (Folligon®, Intervet, Netherland). Experimento 2: com o objetivo de comparar o Dispositivo Pequenos Ruminantes (DPR - Tecnopec, Brasil) versus esponja impregnada com medroxiprogesterona Progespon® (MSD, Brasil) no protocolo de 9 dias foram utilizadas 152 ovelhas Texel. Os animais foram divididos aleatoriamente em 2 grupos: protocolo de 9 dias com a utilização da esponja Progespon® (GP, n=61) e protocolo de 9 dias com a utilização do Dispositivo Pequenos Ruminantes (GDPR, n=91). O protocolo utilizado foi semelhante ao G9N do experimento 1 exceto pelo tipo de dispositivo utilizado. No experimento 1 e 2 as variáveis analisadas foram: taxas de manifestação de estro, concepção e prenhez e dispersão no intervalo de cio. O exame de ultrassonografia para detecção de prenhez (Chisson, KYLUMAX) foi realizado com 30 e 60 dias da retirada do dispositivo. O delineamento utilizado foi inteiramente casualizado e os dados analisados através do programa SAS System for Windows (SAS, 2000). Como resultados observou-se que não houve diferenças entre os protocolos de 9 e 12 dias, assim como entre os dois tipos de dispositivos em relação a taxa de manifestação de estro, concepção e prenhez. Houve maior taxa de manifestação de estro (P<0,05)) do dispositivo novo se comparado com o usado. Foi observado menor (P<0,05) dispersão na ocorrência de estro no protocolo de 9 dias utilizando o dispositivo novo. Conclui-se que os protocolos de 9 e 12 dias e ambos dispositivos são semelhantes quanto a eficácia de indução do estro em ovelhas Texel durante a contraestação reprodutiva e que o dispositivo novo apresenta maior taxa na manifestação de estro em comparação com o dispositivo usado. / Two experiments were conducted to study different periods of estrus induction and study of a new progesterone device for small ruminants (DPR - Tecnopec, Brazil) protocols in Texel ewes during the non-breeding season. Experiment 1: 160 Texel ewes were used in order to compare the efficiency of estrus induction protocols with the nine versus twelve days periods and the use of new versus used devices through the rates of estrus manifestation and pregnancy. The animals were randomly divided into 4 groups: 9 days protocol with the use of the new device (G9N, n = 91) and 9 days protocol with the use of used devices (G9U, n = 25) 12 days protocol with the use of the new device (G12N, n = 26) and 12 days protocol with use of used device (G12U, n = 18). The devices were placed on day zero (D0) and removed on day nine (D9) in the G9N and G9U groups and twelve days after (D12) in the groups G12U and G12N, together with the use of 0.125 mg of cloprostenol (Estron, Agener, Brazil) and 500 IU of eCG (Folligon®, Intervet, Netherland). Experiment 2: 152 Texel ewes were used in order to compare the Small Ruminants Device (DPR - Tecnopec, Brazil) versus Sponge impregnated with medroxyprogesterone Progespon® (MSD, Brazil) in the 9 days protocol. The animals were randomly divided into 2 groups: 9 days protocol using sponge Progespon® (GP, n = 61) and 9 days protocol using Small Ruminants Device (GDPR, n = 91). The protocol used was similar to that G9N of experiment 1 except by the type of device used. 312 sheep were used in the period of September to November 2012. The considered methodologies in experiment 1 were: rates of estrus manifestation, conception and pregnancy and dispersion in the heat interval. The ultrasound examination for detection of pregnancy (Chisson, KYLUMAX) was performed at 30 and 60 days after D9 and D12. The experimental design was completely randomized and analyzed using the SAS System for Windows (SAS, 2000) program. As results it was shown no differences between the protocols 9 and 12 days, as well as between the two types of devices in relation to the estrus manifestation, conception and pregnancy rate. There was a higher estrus manifestation rate (P <0.05) of the new device compared with the used one. It was observed lower (P <0.05) dispersion in the occurrence of estrus in the 9 days protocol. We conclude that the protocols 9 and 12 days and both devices are similar in efficacy to induce estrus in Texel ewes during the non-breeding season and the new device has the highest rate of estrus manifestation compared to the used device.

Wong Yuk-Ling. / Thesis (M.Phil.)--Chinese University of Hong Kong, 1992. / Includes bibliographical references (leaves 132-152). / abstract --- p.1 / ACKNOWLEDGEMENT --- p.4 / content --- p.6 / Chapter I. --- INTRODUCTION --- p.8 / Chapter II. --- literature reviews --- p.11 / Chapter 1. --- Menstrual cycle --- p.11 / Chapter 2. --- oestrogen receptor and progesterone receptor --- p.18 / Chapter 3. --- Monoclonal antibody assays for the study of oestrogen and progesterone receptors --- p.30 / Chapter III. --- materials and methods --- p.35 / Chapter 1. --- study population --- p.35 / Chapter 2. --- sample collection and analysis JO --- p.36 / Chapter 3. --- Histological dating of endometrial biopsies --- p.37 / Chapter 4. --- Determination of oestrogen and progesterone receptors using immunocytochemical assay --- p.38 / Chapter 5. --- Determination of oestrogen and progesterone receptors using enzyme immunoassay --- p.52 / Chapter 6. --- Determination of serum oestradiol and progesterone --- p.66 / Chapter 7. --- Data handling and statistical analysis --- p.76 / Chapter IV. --- results --- p.77 / Chapter 1. --- Study population --- p.77 / Chapter 2. --- Histological dating of endometrial biopsies --- p.77 / Chapter 3. --- oestrogen and progesterone receptors in frozen section of endometrium in menstrual cycle --- p.80 / Chapter 4. --- oestrogen and progesterone receptors in paraffin section of endometrium in menstrual cycle --- p.95 / Chapter 5. --- Oestrogen and progesterone receptors in endometrium in menstrual cycle determined by enzyme immunoassay --- p.113 / Chapter 6. --- Serum oestradiol and progesterone --- p.116 / Chapter V. --- DISCUSSIONS --- p.120 / Chapter 1. --- oestrogen and progesterone receptors in frozen section of endometrium in menstrual cycle --- p.121 / Chapter 2. --- Oestrogen and progesterone receptors in paraffin section of endometrium in menstrual cycle --- p.124 / Chapter 3. --- oestrogen and progesterone receptors in endometrium in menstrual cycle determined by enzyme immunoassay --- p.127 / Chapter 4. --- Potential application of oestrogen and progesterone receptors in endometrium in menstrual cycle --- p.129 / REFERENCE --- p.132

A gonadotrofina coriônica equina (eCG) tem sido utilizada em programas de sincronização para inseminação artificial em tempo fixo e normalmente promove o aumento do volume do corpo lúteo e a da produção de progesterona. Além disso, esta mesma gonadotrofina pode ser utilizada para superovulação. Desse modo, hipóteses relativas aos mecanismos pelos quais gonadotrofinas exógenas alteram as funções celulares nos corpos lúteos resultantes foram formuladas. Para testar tais hipóteses, 18 vacas (Bos indicus) foram divididas em grupos: controle (n=5), estimulado (n=6) e superovulado (n=7) e a ovulação das mesmas foi sincronizada usando um protocolo já estabelecido com dispositivo de progesterona. Os animais estimulados receberam 400 UI de eCG no dia de remoção do dispositivo de progesterona e os animais superovulados 4 dias antes. No dia 7 após injeção de GnRh, os animais foram abatidos para a coleta de CLL e sangue. Análises de peso e volume de CL, concentração de progesterona (P4), bem como da expressão gênica e proteica de fatores angiogênicos e de proteínas esteroidogênicas foram realizadas. Além disso, o transcriptoma foi analisado por microarranjo. Foi observado que o volume do CL foi maior nos animais do grupo estimulado (1177,37 ± 167,07 mm3) e ainda maior nos do superovulado (1495,18 ± 137,01 mm3) quando comparados ao grupo controle (830,33 ± 234,99 mm3; p = 0,03). A concentração média de progesterona por CL nos animais do grupo estimulado foi maior que nos animais do grupo controle (5,95 ± 0,17 vs 3,69 ± 0,72 ng/ml; p = 0,03) e que nos superovulados (4,11 ± 0.73; p = 0,01). Além disso, os tratamentos com eCG aumentaram a expressão do FGFR2 e também da STAR nos animais estimulados e superovulados (p < 0,05). Quanto aos resultados do microarranjo, no total 242 transcritos foram aumentados e 111 foram diminuídos nos animais estimulados e 111 foram aumentados e 113 diminuídos nos animais superovulados em relação aos animais controle (~1,5 vezes, p 0.05). Entre os genes diferencialmente expressos, muitos estavam envolvidos na síntese de lipídios e na produção de progesterona, tais como: PPARG, HMGCR, STAR, receptores de prolactina e folistatina. Estes achados demonstraram que os tratamentos com eCG modularam a expressão gênica diferencialmente, dependendo do tratamento, e que nossos dados contribuem para entender as vias relacionadas ao aumento do volume do CL e da produção de progesterona observada após os tratamentos. Em um segundo experimento, foi realizado análises da influência do FSH na expressão de VEGF no cultivo de células da granulosa. Neste experimento foi possível observar que o FSH aumentou a expressão gênica e proteica do VEGF, colaborando com a ideia de que as gonadotrofinas têm propriedades angiogênicas. / Equine chorionic gonadotropin (eCG) has been widely used in synchronization protocol to artificial insemination program and usually promote corpus luteum (CL) volume increases and stimulates progesterone production. Furthermore the same gonadotropin can be used to superovulation protocols. Thus, hypotheses concerning the mechanisms by which exogenous gonadotropins alter cellular functions in resulting corpora lutea were formulated. To test that hypothesis, 18 (Bos indicus) cows were divided into control (n=5), stimulated (n=6) and superovulated groups (n=7). Ovulation was synchronized using a progesterone device-based protocol. Stimulated animals received 400 IU of eCG of device removal and superovulated animals received 2000 IU of eCG 4 days prior. Corpora lutea (CLL) and blood samples were collected seven days after GnRH administration. Analyses of CL weight and volume, progesterone (P4) concentration, as well as the gene and protein expression of angiogenic and steroidogenic proteins were performed. Furthermore, the transcriptome was evaluated by microarray. The CL volume was higher in superovulated (1495.18 ± 137.01) than in stimulated (1177.37 ± 167.07) cows and higher in stimulated than in the control (830.33 ± 234.99) cows, and the P4 concentration per CL was higher in stimulated (5.95 ± 0.17 ng/ml) animals than in the control (3.69 ± 0.72 ng/ml) and superovulated (4.11 ± 0.73 ng/ml; P = 0.01) animals. Overall, 242 transcripts were up-regulated and 111 transcripts were downregulated in stimulated cows (P 0.05) and 111 were up-regulated and 113 down-regulated in superovulated cows in relation to the control (1.5 fold, P 0.05). Among the differentially expressed genes, many were involved in lipid biosynthesis and progesterone production, as PPARG, HMGCR, STAR, prolactin receptors and follistatin. In conclusion, eCG modulates gene expression differently depending on the treatment. Our data contribute to the understanding of the pathways involved in increased CL volume and progesterone levels observed after eCG treatment. In a second experiment, analyzes were performed about the influence of FSH on the expression of VEGF in the culture of granulosa cells. In this experiment it was observed that FSH increases the expression of the VEGF gene and protein, these finding collaborate with the idea that gonadotrophins have angiogenic properties.

O trabalho teve como objetivo avaliar a concentração sérica de estrógeno e progesterona em cadelas durante o ciclo estral por imunoensaio multianalito (Luminex® xMAP®), visando avaliar a aplicabilidade fisiológica e comparar os resultados obtidos com os valores já estabelecidos na literatura pelo método de radioimunoensaio (RIE). Foram utilizadas 7 cadelas da raça Border Collie, residentes do Canil Espaço Ducão (Valinhos/SP) de diferentes idades e ao primeiro sinal de sangramento vulvar (proestro/estro) foram coletadas amostras a cada 48 hs e ao seu termino (diestro), foi realizado coletas semanalmente (intervalo de 7 dias) durante aproximadamente 3 semanas. Houve correlação positiva apenas entre os valores de progesterona na fase de proestro/estro (p=0,001). Apesar de não ter ocorrido correlação entre as outras fases, as medias dos valores séricos de estradiol e progesterona foram estatisticamente significantes, em ambas as fases, sendo os valores obtidos pelo Luminex® maiores que os obtidos pelo RIE. Os valores de progesterona confirmaram os dados fisiológicos esperados em ambas as metodologias, porém os valores de estradiol não foram compatíveis com o esperado fisiologicamente, exceto quando analisados a partir das medias globais em ambas as fases. Novos estudos de validação laboratorial serão necessários para confirmar a validação fisiológica, principalmente no perfil da progesterona. Podemos concluir ainda que os valores de referência para o Luminex® devem ser diferentes dos valores já estabelecidos pelo RIE para ambos os hormônios testados / The study aimed to evaluate the serum concentration of estrogen and progesterone in female dogs during the estrous cycle by multiplex immunoassay (Luminex® xMAP®), to evaluate the physiological applicability and compare the results with the values established in the literature by radioimmunoassay (RIA). We used seven Border Collie bitches, residents in Kennel Espaço Ducão (Valinhos/SP), of different ages and for the first sign of vulvar bleeding (proestrus/estrus) samples were collected every 48 hours and its end (diestrus) were collected weekly (every 7 days) for about three weeks. There was a positive correlation only between progesterone values in the proestrus/estrus phase (p = 0.001). Despite having not occurred correlation between the other phases, the median of serum estradiol and progesterone values were statistically significant in both phases, the values obtained by Luminex® is higher than by RIA. Progesterone values confirmed the expected physiological data in both methods, however estradiol values were not physiologically compatible with the expected, except when analyzed from the global mean in both phases. A laboratory validation studies will be needed to confirm the physiological validation, especially in progesterone profile, and we can conclude that the reference values for the Luminex® should be different from the values established by RIE for both hormones tested

Orientador: Claudia Herrera Tambeli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-09-19T14:06:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fischer_Luana_D.pdf: 1122094 bytes, checksum: 8b6c9b3ab833b6c7931a0c3408f48170 (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a influência dos hormônios sexuais na nocicepção da articulação temporomandibular (ATM) de ratos e os possíveis mecanismos envolvidos. A injeção de formalina na ATM em uma concentração (0,5%) que não induziu nocicepção em machos intactos, induziu em machos gonadectomizados e em fêmeas intactas, o que sugere que os níveis fisiológicos de testosterona diminuem o risco de machos desenvolverem nocicepção da ATM. A resposta nociceptiva induzida pela injeção de uma alta concentração de formalina (1,5%) na ATM de machos é significativamente menor que àquela induzida na ATM de fêmeas em diestro, fase do ciclo estral com baixos níveis de estrógeno, mas semelhante àquela induzida na ATM de fêmeas em proestro, faze do ciclo estral com altos níveis de estrógeno. Esse resultado sugere que a nocicepção da ATM, em fêmeas, é exacerbada durante a fase do ciclo estral em que os níveis de estrógeno estão baixos. A administração sistêmica de estrógeno ou progesterona em fêmeas gonadectomizadas e de testosterona em machos gonadectomizados reduz a resposta nociceptiva induzida pela injeção de formalina na ATM. A influência do sexo e dos hormônios ovarianos na nocicepção induzida pela injeção de formalina ou de glutamato na ATM foi exatamente a mesma, o que demonstra que o efeito antinociceptivo dos hormônios ovarianos na ATM não é estritamente relacionado a nocicepção induzida pela formalina. A semelhança entre estudos clínicos e os resultados obtidos utilizando estes dois agentes nociceptivos sugere que o modelo comportamental de nocicepção da ATM pode ser útil e confiável para estudar os mecanismos envolvidos no efeito antinociceptivo dos hormônios sexuais na ATM de ratos. A administração de drogas no líquido cefalorraquidiano da região de complexo sensorial trigeminal também é útil para o estudo desses mecanismos, mas o procedimento cirúrgico realizado para a implantação do cateter usado para a injeção pode afetar a expressão dos comportamentos relacionados a nocicepção orofacial. Portanto, a técnica que permite a injeção direta de drogas nessa região, sem a necessidade de procedimentos cirúrgicos contribui para o estudo dos mecanismos envolvidos no efeito antinociceptivo dos hormônios sexuais na ATM de ratos. A administração, por meio dessa técnica, do antagonista de receptores opióides naloxona no espaço subaracnóide da região do complexo sensorial trigeminal bloqueou o efeito antinociceptivo induzido pelos níveis fisiológicos de estrógeno em fêmeas em proestro e pela administração sistêmica de estrógeno ou progesterona em fêmeas gonadectomizadas e de testosterona em machos o gonadectomizados. No entanto, a co-administração de naloxona e formalina na ATM bloqueou o efeito antinociceptivo da progesterona e da testosterona, mas não do estrógeno. Esses dados sugerem que mecanismos opióides centrais medeiam o efeito antinociceptivo do estrógeno, da progesterona e da testosterona, enquanto mecanismos opióides periféricos também medeiam o efeito antinociceptivo da progesterona e da testosterona. A administração local de estrógeno, conjugado ou não com a albumina plasmática, na ATM de fêmeas reduziu significativamente a nocicepção induzida pela formalina. Como o estrógeno conjugado com a albumina tem ação restrita a receptores de membrana, esse dado sugere que o estrógeno reduz a nocicepção através de uma ação periférica não genômica. O efeito antinociceptivo do estrógeno foi bloqueado pelo antagonista de receptores estrogênicos ICI 182 780 e pelos inibidores da óxido nítrico sintase, L-NNA, e da guanilato ciclase, ODQ, mas não pelo antagonista de receptores opióides, naloxona. Esse dado sugere que o efeito antinociceptivo periférico do estrógeno é mediado pela ativação da via do óxido nítrico/GMP cíclico. Juntos, os resultados desse estudo demonstram que os níveis fisiológicos de testosterona diminuem o risco de ratos desenvolverem nocicepção da ATM e os de estrógeno diminuem a nocicepção da ATM em ratas. Além disso, a nocicepção da ATM também é diminuída pela administração sistêmica de estrógeno ou progesterona em ratas e de testosterona em ratos. O efeito antinociceptivo dos hormônios sexuais é mediado por mecanismos opióides centrais, enquanto mecanismos opióides periféricos medeiam o efeito da progesterona e da testosterona, mas não do estrógeno. De fato, a administração de estrógeno na ATM reduz a nocicepção através de um mecanismo periférico não genômico, mediado pela ativação da via do óxido nítrico-GMPc, mas não pela ativação do sistema opióide periférico / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effect of sex hormones on temporomandibular joint (TMJ) nociception in rats and the possible mechanisms underlying their effect. The TMJ injection of 0.5% formalin induced nociception in intact females and gonadectomized males, but not in intact males, suggesting that the physiological level of testosterone protect males by decreasing their probability to develop TMJ pain. A higher dose of formalin (1.5%) induced a nociceptive behavior response significantly higher in female rats during diestrus phase of the estrous cycle than in those during proestrus phase and male rats. Since estradiol serum level was higher in proestrus than in diestrus females, this finding suggests that during low estradiol level of the estrous cycle the TMJ nociception is increased in female rats. Systemic administration of estradiol or progesterone in gonadectomized females and of testosterone in gonadectomized males significantly decreased 1.5% formalin-induced TMJ nociception. The role of sex and ovarian hormones in formalin and glutamate-induced TMJ nociception was virtually the same, showing that the antinociceptive effect of ovarian hormones was not exclusively related to the nociception induced by formalin. The similarity between clinical studies and the present results, obtained by using two different nociceptive agents, suggests that the TMJ behavior model may be useful and reliable to study the mechanisms underling the antinociceptive effect of sex hormones in the TMJ. Drug delivery to the medullary cerebrospinal fluid is also useful to study these mechanisms, however, the surgical procedure for implantation of the catheter used for drug delivery may affect the expression of the nociceptive behaviors related to orofacial nociception. Therefore, the technique for direct drug delivery to the medullary cerebrospinal fluid, without catheter implantation, will contribute for the study of the mechanisms underling the antinociceptive effect of sex hormones in the TMJ. The administration, though this technique, of the opioid receptor antagonist naloxone in the medullary region blocked the antinociceptive effect of estradiol, progesterone and testosterone. However, the co-administration of naloxone with formalin into the TMJ blocked the antinociceptive effect of progesterone and testosterone, but not of estradiol. These findings suggest that central opioid mechanisms mediate the antinociceptive effect of estradiol, progesterone and testosterone, while peripheral opioid mechanisms also mediated the antinociceptive effect of progesterone and testosterone. The local administration of estradiol, conjugated or not with the bovine serum albumin, significantly decreased formalin-induced TMJ nociception in female rats. Given that estradiol conjugated with bovine serum albumin is a membrane impermeable compound, these findings suggest that estradiol decreases TMJ nociception by a peripheral nongenomic mechanism. The antinociceptive effect of estradiol was blocked by an estrogen receptor antagonist and by a nitric oxide synthase and a guanilato cyclase inhibitors, but not by a opioid receptor antagonist. These findings suggest that estradiol decreases TMJ nociception in female rats through a peripheral activation of NO-cGMP signaling pathway. Taken together, the findings of this study suggest that the high physiological level of testosterone decreases the risk of male rats develop TMJ pain and that of estradiol decreases TMJ nociception in female rats. Furthermore, TMJ nociception was also decreased by systemic administration of estradiol or progesterone in female and of testosterone in male rats. The antinociceptive effect of sex hormones is mediated by central opioid mechanisms, while peripheral opioid mechanisms mediate the antinociceptive effect of progesterone and testosterone, but not of estradiol. In fact, the administration of estradiol in the TMJ decreases nociception by a peripheral non-genomic mechanism mediated by activation of the nitric oxide-cGMP signaling pathway, but not by opioid receptors / Doutorado / Fisiologia Oral / Doutor em Odontologia

Para estudo de diferentes períodos de protocolos de indução do estro e de um novo dispositivo de progesterona para pequenos ruminantes (DPR - Tecnopec, Brasil) foram realizados dois experimentos em ovelhas da raça Texel durante a contraestação reprodutiva. Experimento 1: com o objetivo de comparar a eficiência de protocolos de indução do estro em períodos de nove versus doze dias e com a utilização de dispositivos novos versus usados através das taxas de gestação e manifestação de estro, foram utilizados 160 ovelhas Texel. Os animais foram divididos aleatoriamente em 4 grupos: protocolo de 9 dias com a utilização de um dispositivo feito em silicone novo (G9N, n=91), protocolo de 9 dias com a utilização de dispositivo usado (G9U, n=25), protocolo de 12 dias com a utilização de dispositivo novo (G12N, n=26) e protocolo de 12 dias com a utilização de dispositivo usado (G12U, n=18). Os dispositivos foram colocados no dia zero (D0) e retirados no dia nove (D9) nos grupos G9N e G9U e doze dias após (D12) nos grupos G12N e G12U. Junto com a aplicação de 0,125mg de cloprostenol (Estron, Agener, Brasil) e 500UI de eCG (Folligon®, Intervet, Netherland). Experimento 2: com o objetivo de comparar o Dispositivo Pequenos Ruminantes (DPR - Tecnopec, Brasil) versus esponja impregnada com medroxiprogesterona Progespon® (MSD, Brasil) no protocolo de 9 dias foram utilizadas 152 ovelhas Texel. Os animais foram divididos aleatoriamente em 2 grupos: protocolo de 9 dias com a utilização da esponja Progespon® (GP, n=61) e protocolo de 9 dias com a utilização do Dispositivo Pequenos Ruminantes (GDPR, n=91). O protocolo utilizado foi semelhante ao G9N do experimento 1 exceto pelo tipo de dispositivo utilizado. No experimento 1 e 2 as variáveis analisadas foram: taxas de manifestação de estro, concepção e prenhez e dispersão no intervalo de cio. O exame de ultrassonografia para detecção de prenhez (Chisson, KYLUMAX) foi realizado com 30 e 60 dias da retirada do dispositivo. O delineamento utilizado foi inteiramente casualizado e os dados analisados através do programa SAS System for Windows (SAS, 2000). Como resultados observou-se que não houve diferenças entre os protocolos de 9 e 12 dias, assim como entre os dois tipos de dispositivos em relação a taxa de manifestação de estro, concepção e prenhez. Houve maior taxa de manifestação de estro (P<0,05)) do dispositivo novo se comparado com o usado. Foi observado menor (P<0,05) dispersão na ocorrência de estro no protocolo de 9 dias utilizando o dispositivo novo. Conclui-se que os protocolos de 9 e 12 dias e ambos dispositivos são semelhantes quanto a eficácia de indução do estro em ovelhas Texel durante a contraestação reprodutiva e que o dispositivo novo apresenta maior taxa na manifestação de estro em comparação com o dispositivo usado. / Two experiments were conducted to study different periods of estrus induction and study of a new progesterone device for small ruminants (DPR - Tecnopec, Brazil) protocols in Texel ewes during the non-breeding season. Experiment 1: 160 Texel ewes were used in order to compare the efficiency of estrus induction protocols with the nine versus twelve days periods and the use of new versus used devices through the rates of estrus manifestation and pregnancy. The animals were randomly divided into 4 groups: 9 days protocol with the use of the new device (G9N, n = 91) and 9 days protocol with the use of used devices (G9U, n = 25) 12 days protocol with the use of the new device (G12N, n = 26) and 12 days protocol with use of used device (G12U, n = 18). The devices were placed on day zero (D0) and removed on day nine (D9) in the G9N and G9U groups and twelve days after (D12) in the groups G12U and G12N, together with the use of 0.125 mg of cloprostenol (Estron, Agener, Brazil) and 500 IU of eCG (Folligon®, Intervet, Netherland). Experiment 2: 152 Texel ewes were used in order to compare the Small Ruminants Device (DPR - Tecnopec, Brazil) versus Sponge impregnated with medroxyprogesterone Progespon® (MSD, Brazil) in the 9 days protocol. The animals were randomly divided into 2 groups: 9 days protocol using sponge Progespon® (GP, n = 61) and 9 days protocol using Small Ruminants Device (GDPR, n = 91). The protocol used was similar to that G9N of experiment 1 except by the type of device used. 312 sheep were used in the period of September to November 2012. The considered methodologies in experiment 1 were: rates of estrus manifestation, conception and pregnancy and dispersion in the heat interval. The ultrasound examination for detection of pregnancy (Chisson, KYLUMAX) was performed at 30 and 60 days after D9 and D12. The experimental design was completely randomized and analyzed using the SAS System for Windows (SAS, 2000) program. As results it was shown no differences between the protocols 9 and 12 days, as well as between the two types of devices in relation to the estrus manifestation, conception and pregnancy rate. There was a higher estrus manifestation rate (P <0.05) of the new device compared with the used one. It was observed lower (P <0.05) dispersion in the occurrence of estrus in the 9 days protocol. We conclude that the protocols 9 and 12 days and both devices are similar in efficacy to induce estrus in Texel ewes during the non-breeding season and the new device has the highest rate of estrus manifestation compared to the used device.

Apesar de inúmeros estudos desenvolvidos no Brasil e no mundo, a utilização das biotecnologias de superovulação (SOV) e transferência de embriões (TE) em bubalinos ainda apresenta resultados inconsistentes, associados à principalmente à baixa taxa de recuperação de embriões. Dessa forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito da utilização de dispositivo de P4 (para promover diminuição da contratilidade do trato genital, Capitulo 1) ou da administração de PGF2&#945; (para promover aumento da atividade da fímbria e da frequência do batimento ciliar, Capítulo 2) durante o período periovulatório na captação dos oócitos pelas fímbrias e no aumento da produção de embriões em búfalas superovuladas. No Experimento 1 (Capítulo 1), doadoras bubalinas foram homogeneamente divididas em dois grupos: controle (G-C; n=8) e tratamento com progesterona (P4) durante o período periovulatório (G-P4; n=8). A emergência da onda de crescimento folicular foi sincronizada com um dispositivo intravaginal de P4 e a administração de 2 mg i.m. de benzoato de em dia aleatório do ciclo estral (Dia 0; D0). A partir do D4, todas as búfalas receberam 200 mg i.m. de FSH duas vezes ao dia, em 8 doses decrescentes. Foram administrados 530&micro;g i.m. de PGF2&#945; no D6 e no D7. A P4 foi removida do G-C no D7 e do G-P4 no D10. No D8, todas as búfalas receberam 25 mg i.m. de pLH. As inseminações foram realizadas 12 e 24 h após o tratamento com pLH. Foram realizadas colheitas de sangue a cada 12h do D7 ao D11 para posterior dosagem de progesterona. As estruturas embrionárias (oócitos/embriões) foram coletadas pelo método não cirúrgico de lavagem uterina seis dias após a segunda IA (D14). Avaliações ultrassonográficas dos ovários foram realizadas no D8 e no D14 para aferir respectivamente as respostas superestimulatória e superovulatória. As variáveis foram analisadas pelo procedimento GLIMMIX do SAS®. As búfalas do G-P4 apresentaram menor taxa de ovulação (13,5±4,9 vs. 71,5±16,1%; P=0,002) e, consequentemente, maior taxa de folículos &ge; 8 mm (87,8±10,6 vs. 34,3±9,8 %; P=0,06) e menor número de CLs no D14 (1,1±0,3 vs. 8,0±2,8; P=0,04) que as búfalas do G-C. O número de estruturas embrionárias (1,9±0,7 vs. 0,0±0,0; P=0,03), de embriões transferíveis (1,6±0,7 vs. 0,0±0,0; P=0,04) e congeláveis (1,6±0,7 vs. 0,0±0,0; P=0,04) foram inferiores para o G-P4. A concentração sérica de progesterona foi maior nos animais do G-P4 (1,87±0,13) que nos do G-C (0,48±0,10; P<0,0001). No Experimento 1 (Capítulo 2), as doadoras foram divididas aleatoriamente em 2 grupos: controle (G-C; n=22) e tratamento com prostaglandina F2&#945; durante o período periovulatório (G-PGF; n=22). Os animais do G-C foram submetidos ao protocolo de superovulação descrito no capítulo 1. No G-PGF todas as búfalas receberam protocolo de superovulação semelhante ao G-C e, adicionalmente, receberam quatro doses de PGF2&#945; (0,53 mg i.m. de cloprostenol sódico) do D8 ao D10 com intervalo de 12h. Foi verificado maior número de estruturas embrionárias recuperadas em búfalas superovuladas tratadas com PGF2&#945; durante o período periovulatório (G-PGF=3,5±0,6) comparado ao grupo controle (G-C=2,3±0,5; P=0,02). Além disso, houve aumento no número de embriões transferíveis (G-PGF=2,7±0,6 vs. G-C=1,8±0,5; P=0,05). No Experimento 2 (Capítulo 2), os animais foram divididos aleatoriamente em três grupos experimentais: Grupo Controle (GC; n=22), Grupo PGF injetável (G-PGF-INJ; n=22) e Grupo PGF Bomba Osmótica (G-PGF-BO; n=22). Os animais pertencentes aos grupos: G-C e G-PGF-INJ foram submetidos aos mesmos protocolos descritos para seus grupos correspondentes no Experimento 1 (Capítulo 2). No GPGF- BO, todas as búfalas receberam protocolo de superovulação semelhante ao G-C e, adicionalmente, receberam a partir do D8 a inserção subcutânea de uma mini-bomba osmótica, contendo PGF2&#945; (2,12 mg de Cloprostenol sódico). A bomba osmótica retirada no D10. Não foram verificadas diferenças no número de estruturas totais recuperadas nas búfalas tratadas com PGF&#945; durante o período periovulatório (G-C=2,1±0,8 vs. G-PGF-INJ=2,1±0,6 vs. GPGF- BO=1,4±0,4; P=0,58). Os tratamentos no período periovulatório com dispositivo intravaginal de P4 (Capítulo 1) e com PGF2&#945; (Capítulo 2) não foram eficientes em aumentar a recuperação de estruturas embrionárias de búfalas superovuladas. / Despite numerous studies conducted in Brazil and world-wide, the use of superovulation (SOV) and embryo transfer (ET) biotechnologies in buffaloes still shows inconsistent results, particularly in terms of low embryos recovery rate. Thus, the aim of this study was to evaluate the use of a P4 device (to decrease contractility of the genital tract, Chapter 1) or PGF2&alpha; administration (to increase activity of the fimbriae and ciliary beat frequency, Chapter 2) during the periovulatory period in the uptake of oocytes by fimbriae and in the increase of embryo production in superovulated buffaloes. In Experiment 1 (Chapter 1), buffalo donors were homogeneously assigned into 2 groups: Control (C-G; n=8) and progesterone (P4) treatment during the periovulatory period (P4-G; n=8). Follicular growth wave emergence was synchronized with an intravaginal P4 device and the injection of 2 mg i.m. of estradiol benzoate at random stage of the estrous cycle (Day 0; D0). From D4 on, all buffaloes received 200 mg i.m. of FSH twice-daily, in 8 decreasing doses. A dose of PGF2&alpha; was given on D6 PM and on D7. The P4 was removed from the C-G on D7 and from the P4-G on D10. On D8, all buffaloes received 25 mg i.m. of pLH. Inseminations were done 12 and 24 h after the pLH treatment. Blood samples were collected every 12h from D7 to D11 for further progesterone assay. The embryonic structures (ova/embryos) were collected by nonsurgical uterine flush 6 days after the second timed AI (D14). Ovarian ultrasound examinations were performed on D8 and on D14 to verify respectively the superestimulation and the superovulatory response. Variables were analyzed by GLIMMIX procedure of SAS®. Buffaloes from P4-G showed lower ovulation rate (13.5±4.9 vs. 71.5±16.1%; P=0.002) and, consequently, higher follicles &ge; 8 mm rate (87.8±10.6 vs. 34.3±9.8 %; P=0.06) and lower number of CLs on D14 (1.1±0.3 vs. 8.0±2.8; P=0.04) than buffaloes from C-G. The total number of embryonic structures (1.9±0.7 vs. 0.0±0.0; P=0.03), transferable (1.6±0.7 vs. 0.0±0.0; P=0.04) and freezable embryos (1.6±0.7 vs. 0.0±0.0; P=0.04) were lower for P4-G. The serum progesterone concentration was greater for animals in P4-G (1.87±0.13) than in the C-G (0.48±0.10; P<0.0001). In Experiment 1 (Chapter 2), donors were randomly assigned into two groups: control (C-G; n=22) and prostaglandin F2&alpha; treatment during the periovulatory period (G-PGF; n=22). Animals from C-G were subjected to the superovulation protocol described on chapter 1. In G-PGF all buffaloes received similar superovulation protocol from the C-G and, additionally, received four doses of PGF2&alpha; (0.53 mg i.m. of sodic cloprostenol) from D8 to D10, 12h apart. A greater number of embryonic structures were recovered from superovulated buffaloes treated with PGF2&alpha; during the periovulatory period (PGF-G=3.5±0.6) compared to control group (C-G=2.3±0.5; P=0.02). Furthermore, increased number of transferable embryos were found in treated animals (PGF-G=2.7±0.6 vs. C-G=1.8±0.5; P=0.05). In Experiment 2 (Chapter 2), animals were randomly assigned into three experimental groups: Control group (CG; n=22), Injectable PGF group (INJ-PGF-G; n=22) and Osmotic pump PGF group (BO-PGF-G; n=22). The animals from C-G and INJ-PGF-G group were subjected to the same protocols described for their correspondent groups in Experiment 1 (Chapter 2). In BO-PGF-G, all buffaloes received the superovulation protocol similar to C-G and, additionally, received from D8, a subcutaneous insertion of a mini osmotic pump, containing PGF2&alpha; (2.12 mg de sodic cloprostenol). The osmotic pump was removed on D10. No differences were found on the total number of recovered structures in buffaloes treated with PGF2&alpha; during the periovulatory period (C-G=2.1±0.8 vs. INJ-PGF-G=2.1±0.6 vs. BO-PGF-G=1.4±0.4; P=0.58). Treatments on the peri- ovulatory period with intravaginal P4 device (Chapter 1) and PGF2&alpha; (Chapter 2) were not efficient in increasing the recovery of embryonic structures in superovulated buffalo.

Em programas de transferência de embriões, as perdas embrionárias após a inovulação têm sido relacionadas com uma capacidade reduzida do corpo lúteo (CL) em secretar progesterona (P4), uma vez que este hormônio prepara o endométrio para a implantação e a manutenção da prenhez. Assim, o objetivo deste trabalho foi estudar a eficácia da utilização de dispositivo intravaginal contendo progesterona (CIDR®) por 14 dias em receptoras de embrião, para a indução de folículos persistentes e formação de CLs maiores do que aqueles formados com a utilização de CIDR® por 8 dias. Duzentas e setenta e oito novilhas Bos taurus x Bos indicus foram divididas em 4 grupos. As receptoras do Grupo 1 (G1, n = 70) receberam 2,0 mg de BE + 50 mg de P4 por via intramuscular (IM) no dia da colocação do CIDR® (D0), oito dias depois (D8), o dispositivo foi retirado e foi aplicado um análogo da prostaglandina F2 alfa (PGF2 alfa - 0,53 mg de Cloprostenol Sódico) IM pela manhã. No D9, foi aplicado 0,5 mg de BE IM e o D17 foi o dia da inovulação. Os animais do Grupo 2 (G2, n = 71) receberam 2,0 mg de BE + 50 mg de P4 no dia da colocação do CIDR® (D0), todavia, esses animais receberam 2 aplicações de PGF2 alfa, uma no início do tratamento e outra 5 dias depois. Nestes animais, o CIDR® foi mantido por 14 dias; assim, no D15 foi aplicado 0,5 mg de BE e o dia da inovulação, foi o D23. No Grupo 3 (G3, n = 67), o tratamento foi semelhante ao do G2, no entanto a PGF2 alfa foi aplicada uma única vez, 5 dias após o início do tratamento. No Grupo 4 (G4, n = 70), o tratamento foi semelhante ao do G2, tendo os animais recebido 2 aplicações de PGF2 alfa, uma no dia da colocação do CIDR® e outra no dia da retirada. A avaliação ultrassonográfica dos ovários foi realizada um dia após a retirada do CIDR® e no dia da inovulação, quando foram colhidas amostras de sangue para dosagem de P4. O diâmetro médio do folículo dominante (FD) foi maior nos grupos G2, G3 e G4 quando comparado com o grupo G1. A área do CL, a concentração plasmática de P4 e a taxa de aproveitamento foram maiores nos grupos G2 e G3 que no grupo G1, enquanto o grupo G4 não diferiu estatisticamente dos demais. A taxa de concepção nos grupos G2 e G3 foi inferior àquela do grupo G1, mas não diferiu entre o grupo G4 e os demais. A taxa de prenhez não apresentou diferença estatística entre os grupos. Esses resultados sugerem que a utilização de CIDR® por tempo prolongado, quando associada à aplicação de PGF2 alfa no início do tratamento, é eficaz na formação de folículos persistentes, que resultam em CLs aumentados e com maior capacidade de secretar P4 . No entanto, ao contrário do esperado, a taxa de concepção foi reduzida nos grupos em que o tratamento visava a formação de folículos persistentes. / Embryo losses in cattle embryo transfer programs have been related to a corpus luteum (CL) inability to secrete progesterone (P4), necessary to endometrial preparation for embryo implantation and pregnancy maintenance. Thus the objective of this experiment was to evaluate the efficacy of a treatment with progesterone-releasing intravaginal devices (CIDR®) for a period of 14 days in order to induce the formation of a persistent follicle and a CL of larger diameter than the ones produced during the conventional 8 days CIDR® treatment. Two hundred seventy-eight cross-bred Bos taurus x Bos indicus heifers were randomly allocated in four groups. Heifers in Group 1 (G1, n = 70) received 2.0 mg estradiol benzoate (EB) + 50 mg of P4 at the moment of CIDR® insertion (D0), a 0.53 mg injection of cloprostenol (PGF2 alfa analogous) at the time of CIDR® removal (D8) and 0.5 mg EB on D9. On D17 animals received a frozen/thawed embryo by direct transfer. Heifers in Group 2 (G2, n = 71) received a CIDR® device combined with 2.0 mg of EB + 50 mg of P4 (D0). Animals of this group received 2 injections of PGF2 alfa, one on D0 and the other on D5. The CIDR® was removed on D14. A 0.5 mg injection of EB was administered on D15. The treatment in Group 3 (G3, n = 67) was similar to G2, except by the fact that a single injection of PGF2 alfa was administered on D5. Treatment performed on animals of Group 4 was similar to the one performed on G2. However, animals of this group received two injections of PGF2 alfa, one at the time of CIDR® insertion and the other at the moment of it?s removal. Ovarian ultrasonography was performed on the day after CIDR® removal and at the day of embryo transfer. Blood samples for P4 analysis were also collected on the day of embryo transfer. Mean diameter of the dominant follicle was larger in heifers in G2, G3 and G4 when compared to G1. The CL area, plasma progesterone concentrations and recipient selection rate was greater in G2 and G3 than in G1, but G4 was not different of the other groups. Conception rates were lower in G2 and G3 when compared to G1. No differences between groups were found regarding to the pregnancy rates. These results suggest that a CIDR® long-term treatment, when associated with PGF2 alfa in the beggining of the treatment is efficient to stimulate the formation of a persistent follicle, resulting in a larger CL which provides higher P4 concentration. However, the induction of a persistent follicle had a negative effect on the conception rates which was not expected.

Os esteroides ovarianos modulam a expressão de importantes moléculas no endométrio de fêmeas bovinas, incluindo os eicosanoides. Os eicosanoides sintetizados pelo endométrio controlam uma gama de eventos reprodutivos. A hipótese do presente estudo é que a síntese de eicosanoides pelo endométrio no sétimo dia pós-estro é regulada pelo ambiente endócrino periovulatório. Objetivou-se mensurar a expressão gênica de 23 proteínas envolvidas na síntese, transporte e sinalização de eicosanoides e quantificar uma série de eicosanoides no útero de vacas de corte com diferentes perfis hormonais peri-ovulatórios no início do diestro. O crescimento folicular foi farmacologicamente manipulado para que resultassem grupos apresentando folículo pré-ovulatório e corpo lúteo grande (F/CLG; n=11) ou pequeno (F/CLP; n=11). Vacas Nelores multíparas, não lactantes, pré-sincronizadas, receberam (F/CLG) ou não (F/CLP) uma dose de PGF2&#945; e um dispositivo de progesterona, juntamente com benzoato de estradiol. A remoção dos dispositivos de liberação de progesterona e aplicação de PGF2&#945; foi realizada 60 a 42 horas antes da indução da ovulação no grupo F/CLG e entre 48 a 30 horas no grupo F/CLP. A ovulação foi induzida (GnRH; 10g) no D0. Amostras de sangue foram obtidas entre os dias D-2 a D0 e D0 a D7 para mensuração das concentrações de estradiol os dias progesterona, respectivamente. No dia 7, tecidos e lavados uterinos foram coletados. Em comparação ao grupo F/CLG, os animais do grupo F/CLP apresentaram folículos pré-ovulatórios e CL menores que resultaram em menores concentrações de estradiol e progesterona, respectivamente (P<0,5). A quantificação dos transcritos foi feita por qPCR. A abundância dos genes PTGES, AKR1C3, AKR1C4, CBR1, PTGIS e ALOX12, foi maior para os animais do grupo F/GLG, e PLA2G10 foi menor no mesmo grupo quando comparado com o grupo F/CLP (P<0,10). A concentração de metabólitos foi mensurada no tecido endometrial (pg/g) e lavado uterino (ng/mL) por espectrometria de massas. Maiores concentrações do metabolito 9-HETE foram encontradas no tecido endometrial do grupo F/CLP (P<0,05). Comparações entre médias foram determinadas pelo teste t de Student. Conclui-se que diferentes concentrações de estradiol (proestro) e progesterona (início do diestro) foram capazes de modular a expressão de genes relativos à síntese de eicosanoides, sem influenciar as concentrações dos eicosanoides no endométrio e lavado uterino de fêmeas bovinas no sétimo dia do ciclo. / Ovarian steroids modulate the expression of important molecules on bovine endometrium, including eicosanoids. The eicosanoids synthetized by the endometrium control many reproductive processes. The hypothesis of this study is that the eicosanoids synthesis by the endometrium on day seven after the estrous is regulated by the periovulatory endocrine milieu. The aims of this study were (1) to measure the expression of 23 genes that encode proteins involved in eicosanoids synthesis, transport and signaling and (2) to quantify eicosanoids on beef cows uterus exposed to different periovulatory hormonal profiles. Follicular growth was pharmacologically manipulated to generate two groups presenting large or small preovulatory follicle and corpus luteum (LF/CL and SF/CL respectively; n=11/group). Cyclic, non-lactating Nelore cows received two injections of cloprostenol (PGF2&alpha; 0.5mg; i.m.) 14 days apart. Ten days later (D-10), cows received a P4-releasing device along with estradiol benzoate (2mg; i.m.). To modulate the growth of the preovulatory follicles, on D-10, animals received PGF2&alpha; (LF/CL) or not (SF/CL). The P4-releasing devices were removed and PGF2&alpha; injected 60 to 42 hours before the ovulation induction in the LF/CL group and 48 to 30 hours before the ovulation induction in the SF/CL group. Ovulation was induced with buserelin (GnRH; 10&#181;g; i.m.) on D0. Plasma was obtained for measurement of estradiol concentrations from D-2 to D0 and from D0 to D7 for progesterone measurements. On D7, the animals that ovulated in response to GnRH were slaughtered and uterus flushing and endometrium were collected. Differences between group means were determined by students t test. Animals from LF/CL group presented larger preovulatory follicles, corpus luteum, estradiol and progesterone levels when compared to animals from SF/CL group (P<0.1). The quantification of the transcripts was performed by qPCR. PTGES, AKR1C3, AKR1C4, CBR1, PTGIS and ALOX12 were more abundant and PLA2G10 was less expressed in the endometrium from animals from LF/CL when compared to SF/CL (P<0.10). Metabolites concentration was measured by mass spectrometry in endometrial tissue (pg/g) and uterine flushings (ng/mL). The metabolite 9-HETE was more abundant on uterine flushings from animals with SF/CL (P<0.05). Different concentrations of estradiol (proestrous) and progesterone (beginning of diestrous) modulated the expression of genes related to eicosanoids synthesis, but it did not affect eicosanoids levels in the endometrium and uterine flushing in beef cattle on day 7 of the estrous cycle.

O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da administração de hCG na indução de ovulação e estudo da dinâmica folicular no protocolo de nove dias de sincronização de estros em ovelhas cíclicas da raça Santa Inês. O experimento foi dividido em duas etapas consecutivas. Na primeira etapa, em dia aleatório do ciclo estral (D0), 9 ovelhas receberam um novo dispositivo intravaginal de progesterona (Primer-PR®, Tecnopec, Brasil). Nove dias após (D9) o dispositivo foi retirado, administraram-se 30 µg de d-cloprostenol (Prolise®, Syntex, Argentina) e 250 UI de eCG (Folligon®, Intervet, Holanda). A partir deste momento, as ovelhas foram alocadas, aleatoriamente, a um de dois tratamentos: Grupo controle (GC) e Grupo hCG (GhCG). No GC, as ovelhas não receberam nenhum tipo de indutor de ovulação. No GhCG, 24 horas após a retirada do dispositivo, foram administrados, via i.m.,. 500 UI de hCG (Vetecor®,HertapeCalier, Espanha). Após um intervalo de 30 dias foi realizada uma réplica alternada do experimento (etapa 2), ou seja, as ovelhas que na primeira etapa estavam no grupo controle foram alocadas no grupo hCG e vice-versa. O delineamento estatístico utilizado foi o inteiramente casualizado com medidas repetidas no tempo. Houve regressão de todos os folículos presentes no início do tratamento e emergência da onda ovulatória, em média, 3,54±1,5 e 7.88±1.05 dias da colocação do dispositivo, respectivamente. Não houve diferença entre os grupos quanto ao diâmetro do primeiro folículo pré-ovulatório (GC: 5,78±0,30 mm vs. GhCG: 5,36±0,69 mm; P=0,09) e segundo folículo pré-ovulatório (GC: 5,41±0,85 vs. GhCG: 4,71±0,50; P=0,08) em ovelhas com ovulações duplas. Observou-se maior proporção (P=0.009) de comportamento de estro nos animais do GC (9/9) quando comparado ao GhCG (3/8). Não houve diferença significativa entre os grupos no intervalo médio entre retirada do dispositivo e início (47.4±15.0 no GC e 32.0±0.0 no GhCG, P=0.11) ou na duração do estro (36.22±18.57 h no GC e 38.6±30.6 h no GhCG, P=0.72). A concentração de progesterona sérica entre os dias D0 e D8 não diferiu estatisticamente (P=0.49) entre os grupos (CG:11.06±4.82 ng/ml vs GhCG: 9.74±4.37 ng/ml). As ovelhas do grupo hCG apresentaram menor intervalo entre retirada do dispositivo e ovulação (GC: 79,9±15,4 h vs. GhCG: 54,7±4,9 h; P=0,001). Além disso, os animais que receberam hCG tiveram as ovulações mais sincronizadas. Conclui-se que a administração de hCG antecipa e promove ovulações mais sincronizadas, o que pode ser importante para aumentar a eficiência da inseminação em tempo fixo. / The aim of this study was to evaluate the effect of hCG administration for ovulation induction and assessment of follicular dynamics on a nine day estrus synchronization protocol in Santa Ines cycling ewes. The experiment was conducted in two consecutive steps. In a random oestrus cycle day (D0), 9 ewes received a new intravaginal progesterone device (Primer-PR®, Tecnopec, Brasil). Nine days after (D9), 30 µg of d-cloprostenol (Prolise®, Syntex, Argentina ) and 250 IU of eCG (Folligon®, Intervet, Holanda) were administered and the progesterone device was removed. After this procedure, the ewes were randomly assigned to one of two treatments: Control Group (CG) and hCG Group (hCGG). In CG, ewes did not receive any ovulation inductor. In hCGG, 500 IU were administered (Vetecor®,HertapeCalier-Spain), intramuscular, 24 hours after device removal. After a 30 day interval, a replicate of the experiment was performed (phase 2), in which control group animals were allocated into hCG group and vice versa. In this study a randomized experimental design was used with repeated measures over time. In the present study it was observed regression of all follicles present on the day of device insertion and follicular wave emergence occurred averagely 3,54±1,5 and 7.88±1.05 days after device insertion, respectively. There was no difference between groups regarding the first preovulatory follicle diameter (CG: 5.78±0.30 mm vs. hCGG: 5.36±0.69 mm; p=0.09) and the second preovulatory follicle (CG: 5.41±0.85 vs. hCGG: 4.71±0>0.50; P=0.08) for ewes with double ovulations. CG animals showed a higher proportion of estrus behavior (P=0.009) than hCGG. There was no difference between groups regarding average interval from device removal and estrus onset (CG:47.4±15.0 and hCGG: 32.0±0.0, P=0.11) or on estrus duration (36.22±18.57 h on CG and 38.6±30.6 h on hCGG, P=0.72). Serum progesterone concentration between D0 and D8 did not differ (P=0.49) between groups (CG: 11.06±4.82 ng/ml and hCGG: 9.74±4.37 ng/ml). hCG group ewes had smaller interval between device removal and ovulation (CG: 79.9±15.4 h vs. hCGG: 54.7±4.9 h; P=0.001). Animals given hCG had more synchronized ovulations. It can be concluded that hCG administration hastens and improves ovulatory synchronization, which could be important to increase fixed time insemination efficiency.