Orientador: Ricardo Della Coletta / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-07-29T05:12:55Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Araujo_CintiadeSouzaAlferes_M.pdf: 3571957 bytes, checksum: c5f910a9d6f7a5f2982114f82f840e46 (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: A fibromatose gengival hereditária (FGH) é uma doença bucal incomum, caracterizada por um aumento gengival generalizado e progressivo. Histologicamente, a FGH apresenta um epitélio com profundas criptas epiteliais que se projetam em direção ao tecido conjuntivo subjacente, que é denso e rico em fibras colágenas. O objetivo do estudo foi analisar o padrão histomorlométrico e a expressão imunohistoquímica do receptor para o fator de crescimento epidérmico (EGF) e do antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA) em 10 amostras de FGH e 10 de gengiva normal (GN). Os resultados da análise histomorfométrica demonstraram que o perímetro epitelial e a profundidade das criptas epiteliais são significantemente maiores em FGH quando comparado com GN (p<O,OI). Embora a área epitelial tenha sido maior em FGH, esta diferença não foi estatisticamente significante. A expressão do receptor para EGF foi detectada nas camadas basal, espinhosa e granulosa do epitélio de todas as amostras de GN e FGH, com uma porcentagem de células positivas significantemente maior em GN (p<0,005). A expressão de PCNA foi localizada principalmente nas camadas basal e espinhosa do epitélio das amostras de GN e FGH, sem diferenças significantes. Estes resultados sugerem que a expressão do receptor de EGF está inversamente relacionada à profundidade e irregularidade das criptas epiteliais da gengiva de pacientes com FGH / Abstract: Histomorphometric analysis and expression of epidermal growth factor receptor and proliferative cell nuclear antigen in hereditary gingival fibromatosis. Hereditary gingival fibromatosis (HOF) is an uncommon buccal disease, clinically characterized by a generalized and progressive enlargement of the gingiva. HistologicalIy, HOF shows an epithelium with long slender rete pegs that extend into a dense connective tissue that is rich in collagens fibers. The aim of the present study was to analyze the histomorphometric features and the immunohistochemistry expression of the epidermal growth factor receptor (EOFr) and proliferative cell nuclear antigen (PCNA) in 10 samples of the HOF and 10 of normal gingiva (NO). The results from the histomorphometry demonstrated that the epithelial perimeter and thedeep of the epithelial rete pegs are significat1y higher in HOF when compared with NO (p<O,OI). Although the epithelial area had been higher in HOF, this difference was not statically significant. The expression of EOFr was observed in all epitheliallayers of NO and HOF, with a percentage of positive celIs significantly higher in NO group (p<0,005). PCNA expression was restricted for basal and suprabasallayers of the epithelium of the NG and HGF samples, without significant differences. These results suggest that the expression of EGFr is inversely related to the deep and irregularity of the epithelial rete pegs of gingiva of patients with HGF. Key words: hereditary gingival fibromatosis; histomorphometry; epidermal growth factor receptor; proliferation / Mestrado / Patologia / Mestre em Estomatopatologia

Orientador: Pablo Augustin Vargas / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-15T10:55:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rocha_LiliaAlves_D.pdf: 2316332 bytes, checksum: 8ea247f73bbb3c563d66cdcf3dcabe9e (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: O presente trabalho avaliou a expressão dos marcadores de proliferação celular Ki-67, Mcm-2 e HOXB7 em neoplasias malignas epiteliais basalóides de cabeça e pescoço. Foram avaliadas 42 amostras tumorais da região de cabeça e pescoço, sendo 15 de carcinoma espinocelular pouco diferenciado (CEC-pd), 18 de carcinoma escamoso basalóide (CEB) e nove de carcinoma adenóide cístico tipo sólido (CAC-sólido). Os dados clinicopatológicos foram coletados de formulários de encaminhamento para biópsia. Todas as amostras foram submetidas à análise imunoistoquímica para os três marcadores. A idade média dos pacientes avaliados foi de 57 (±14,5) anos, e a maioria pertenceu ao gênero masculino (76%). A expressão de Ki-67 nas amostras de CAC-sólido foi menor quando comparada com os demais grupos tumorais (IM=18,74% ±8,3, p<0,05). A proteína Mcm-2 apresentou um maior IM no grupo CEB (IM=55,57% ±13,4, p<0,05), quando comparado com os grupos CEC-pd (IM=35,55% ±19,5) e CAC-sólido (IM=28,60%, ±10,1). Este mesmo padrão foi observado para a proteína HOXB7, que apresentou um maior IM no grupo de CEB (IM=31,28% ±11,6, p<0,05), quando comparado aos demais grupos (CEC-pd: IM=23,19% ±8,4 e CAC-sólido: IM=18,66% ±9,8). Como o CEB apresenta um comportamento clínico mais agressivo quando comparado ao CEC-pd e CAC-sólido, os altos IMs para Mcm-2 e HOXB7 em CEB sugerem uma relação direta entre a maior expressão dessas proteínas e a agressividade tumoral. Os IMs de Mcm-2 e HOXB7 foram crescentes para os grupos CAC-sólido, CEC-pd e CEB. Assim, sugerimos que as proteínas Mcm-2 e HOXB7 podem ser úteis no diagnóstico diferencial de CEB, CEC-pd e CAC-sólido. Estudos adicionais devem ser realizados para confirmar nossos achados e determinar o valor prognóstico de Mcm-2 e HOXB7 nestas neoplasias malignas de cabeça e pescoço. / Abstract: The aims of this study were to determine the expression of Mcm-2, Ki-67 and HOXB7 in malignant basaloid tumors located in the head and neck region, and to evaluate their usefulness for diagnosis or prediction of tumor behaviour. There were 18 basaloid squamous cell carcinoma (BSCC), 15 squamous cell carcinoma poorly differentiated (SCC-pd), and nine adenoid cystic carcinoma solid type (AdCC-st). Clinicopathological data were collected retrospectively and immunohistochemical analyses of Ki-67, Mcm-2 and HOXB7 were performed on all lesions (n=42). The nuclear stain was considered as positive or negative, and labelling index (LI) for each tumor was determined by counting the percentage of positive cells in six random fields. The mean age of patients was 57 years (±14,5), and the most was male (76%). Ki-67 expression was lower in AdCC-st (LI=18,74% ±8,3, p<0,05) than in BSCC (LI=42,22%) and SCC-pd (LI=43,54) groups. Mcm-2 LI was higher in BSCC (LI=55,57% ±13,4, p<0,05) than in SCC-pd (LI=35,55 ±19,5) and AdCC-st (LI=28,60% ±10,1). A similar result was observed in HOXB7 that showed a higher LI expression in BSCC group (LI=31,28% ±11,6, p<0,05) than in SCC-pd (IM=23,19% ±8,4) and AdCC-st (LI=18,66% ±9,8). It was not possible to establish a correlation between LI and outcome for any of the markers. The present study suggests that Mcm-2 and HOXB7 may be useful for differential diagnosis among BSCC, SCC-pd and AdCC-st. Further studies are needed to assess the value of Mcm-2 and HOXB7 as a predictor of recurrence and survival in malignant basaloid tumors of head and neck region. / Doutorado / Patologia / Doutor em Estomatopatologia

Orientadores: Cesar Cabello dos Santos, Marcelo Alvarenga / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:10:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SalesJunior_JoseFernandodeSouza_M.pdf: 247906 bytes, checksum: 6fa2c9cd949ba15e85e759034dc8ec2d (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a freqüência de achados não-proliferativos, a expressão do marcador Ki-67 e dos receptores de estrógeno avaliados pelo método de imunoistoquímica em mama contralateral de pacientes em tratamento de câncer de mama, usuárias de 20mg/dia de tamoxifeno por um ano ou mais. As mulheres foram recrutadas no Ambulatório de Patologia Mamária do Centro de Atenção Integral à Saúde da Mulher da Universidade Estadual de Campinas e no Ambulatório de Oncologia Ginecológica da Prefeitura de São João da Boa Vista. Para isso, foi realizado um estudo descritivo que avaliou pacientes de abril a junho de 2003. Foram excluídas as pacientes com câncer de mama bilateral, as que estavam em uso de qualquer medicação que tenha ação como hormônio sexual, as pacientes com dificuldade de comunicação que interferisse na coleta de dados, as que haviam parado de usar o tamoxifeno há mais de 24 horas, as que estivessem em uso de medicações anticoagulantes, se o material para análise histológica fosse insuficiente ou se fosse encontrada alguma lesão maligna (nenhuma lesão atípica foi encontrada). Para o cálculo do tamanho amostral foi realizado um estudo-piloto com 13 pacientes. Foram então recrutadas 44 pacientes, submetidas à biópsia em mama contralateral com agulha grossa (dispositivo "biopsy-cut" com agulha gauge 14). A análise dos dados, quando necessária, foi feita pelo teste exato de Fisher com nível de significância estabelecido de 5%. Observamos que globalmente 82% das pacientes apresentaram achados não-proliferativos e 100% das pacientes apresentaram expressão leve do marcador Ki-67. Cerca de 70% das pacientes foram receptor de estrógeno negativo na mama contralateral. O tempo de uso do tamoxifeno não se associou aos achados não-proliferativos, nem à expressão do marcador Ki-67 e do receptor de estrógeno. O índice de massa corpórea não se associou aos achados não-proliferativos, à expressão do marcador Ki-67 e nem do receptor de estrógeno. A presença de achados não-proliferativos não esteve associada ao padrão de densidade mamográfica pelo método de Wolfe. Concluímos que o uso de tamoxifeno por mais de um ano associou-se a uma taxa de cerca de 80% de achados não-proliferativos e a uma baixa taxa de proliferação celular avaliada pelo marcador Ki-67. Com relação ao receptor de estrógeno, apenas 30% das pacientes apresentaram expressão positiva na mama contralateral de pacientes tratadas por câncer de mama / Abstract: The issue of this study was evaluate the frequency of no-proliferate findings, the immunoreactions of the monoclonal Ki-67 antibody and estrogen receptor in contra lateral breast of patients treated of breast cancer and in use of 20mg tamoxifen daily for one year or more They were selected in Breast Pathology Unit in State University of Campinas and in Gynecology-Oncology Unit of Prefeitura Municipal de São João da Boa Vista. A descriptive study had been done, evaluating patients from April to June 2003. Patients with bilateral cancer, in use of any sexual hormones at least one year, difficult of communication to collect information, if tamoxifen had been interrupted up to 24 hours, in use of any anticoagulant agents, if the tissue hadn't been proper to histological evaluation and if we had found any malignant lesion, in any of this cases, the patients were excluded. A pilot trial with 13 patients was carried out. Biopsy-cut with gauge 14 needle has done in contra lateral breast of 44 patients. Some data were analyzed with the help of Fisher's exact test, and others variables were merely descriptive. The significance level was defined at 5%. We observed that around 82% of the patients have had no-proliferate findings and 100% of the patients have had mild immunoreaction of monoclonal Ki-67 antibody. Around 70% of the patients have had a negative expression of estrogen receptor. The length of time of use of tamoxifen did not associate to no-proliferate findings, immunoreactions of monoclonal Ki-67 antibody or estrogen receptor. The body mass index (BMI) didn't associate to no-proliferate findings, immunoreactions of monoclonal Ki-67 antibody or estrogen receptor. The no-proliferate findings did not associate to Wolfe's parenchyma pattern in mammograms. We have concluded that the use of tamoxifen at least 1 year has shown around of 80% no-proliferate findings in opposite breast of breast cancer patients. In concern of expression of estrogen receptor, just 30% of patients have had positive expression / Mestrado / Tocoginecologia / Mestre em Tocoginecologia

Orientador: Fernanda Ramos Gadelha / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:26:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_AlbaninAparecidaMielniczki_M.pdf: 4105701 bytes, checksum: cc9dfe550a8a18e449ecaa59da5d0970 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PD) e 6-fosfogluconato desidrogenase (6PGD) são enzimas relacionadas com os processos de proliferação e detoxificação celular. Neste trabalho a atividade/expressão da G6PD e atividade da 6PGD foram determinadas em duas cepas de Trypanossoma cruzi (Y e Tulahuen 2) que diferem quanto ao índice de proliferação e resistência ao estresse oxidativo. As dosagens da atividade enzimática foram feitas ao longo da curva de crescimento e após incubação das células em presença de peróxido de hidrogênio (H2O2). Nessas condições foram determinados também os níveis de rnRNA e expressão da proteína triparedoxina peroxidase (TcCPx), importante enzima do sistema de defesa antioxidante do parasita. Na cepa Y, menos resistente ao estresse oxidativo, a atividade da 6PGD não sofre grandes variações ao longo da curva de crescimento e, com exceção do primeiro dia de crescimento, supera a da G6PD. Na cepa Tulahuen 2, a atividade da 6PGD fica em tomo de 18 a 33% da G6PD (também com exceção do 1° dia). Ao longo da proliferação da cepa Y observou-se ainda que não existe um padrão comum entre os níveis de rnRNA da G6PD e TcCPx, nem entre a atividade enzimática da primeira e o conteúdo protéico da segunda. Na cepa Tulahuen 2 essas semelhanças existem, principalmente em termos de conteúdo total de rnRNA para as referidas enzimas. A expressão da G6PD nas células Y parece ser mais dependente de glicose do que na outra cepa, especialmente após os tratamentos com H2O2. Na cepa Tulahuen 2 o tratamento com H2O2 ocasiona variações tanto na expressão da G6PD quanto na expressão da T cCPx, desencadeando em ambas uma resposta possivelmente regulada ao nível pós-transcricional. A alta atividade da G6PD na cepa Tulahuen 2, bem como a capacidade da mesma de responder ao estímulo por H2O2 na ausência de glicose e de forma simultânea com a TcCPx, são fatores que devem contribuir tanto para a maior resistência ao estresse oxidativo quanto para o maior nível de proliferação que estas células apresentam em relação às células da cepa Y / Abstract: Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) and 6-phosphogluconate dehydrogenase (6PCJD) are enzyrnes related to cell proliferation and to detoxification processes. In this work, the activity/expression of CJ6PD and 6PCJD activity were determined in two strains of Trypanosoma cruzi (Y and Tulahuen 2) that differ in the proliferation index and resistance to oxidative stress. Enzymatic activity was assayed throughout the growth curve and after incubation with hydrogen peroxide (H2O2). It was also established under the same condition, rnRNA levels and protein expression of tryparedoxin peroxidase (TcCPX), an important enzyrne of the parasite antioxidant defense system. 6PCJD activity in Y strain, less resistance to oxidative stress, remained amost constant throughout the growth curve and except for the first day of growth, was higher than G6PD. In the Tulahuen 2 strain, 6PCJD activity was 18-33% of CJ6PD activity (except for the first day). For Y strain there was neither a common pattern between CJ6PD and TcCPx mRNA levels, nor between J6PD activity and TcCPx protein levels. In the Tulahuen 2 strain these similarities exist, mainly at the rnRNA content of these enzymes. CJ6PD expression in Y strain appears to be more glucose-dependent than the other strain, especially after H2O2 incubation. In Tulahuen 2 strain, H2O2 treatment lead to variations in CJ6PD and TcCPx expression, regulated probably at the post transcriptional level. The high CJ6PD activity in the Tulahuen 2 strain and the ability of these cells to respond to H2O2 in the absence of glucose simultaeously with TcCPx can contribute to the higher resistance to oxidative stress and also to the higher proliferation index observed in these ce1ls when compared to the other strain / Mestrado / Bioquimica / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Wílson de Mello Junior / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:42:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_Sergio_M.pdf: 374479 bytes, checksum: 392ffdc923e446cf4f5b7394ea7e7fb8 (MD5) Previous issue date: 2003 / Mestrado

Orientador: Miriam Hatsue Honda Federico / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-24T23:19:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Maistro_Simone_M.pdf: 6276849 bytes, checksum: 41af8f48efd262a046ab1778a9771628 (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A 1,25-dihidroxivitamina D3, o metabólito ativo da vitamina D3, parece influir não só na homeostase do cálcio, mas também em vários processos celulares tais como, o controle da proliferação e diferenciação celulares. Sua ação na transcrição gênica ocorre através de interação com um receptor específico nuclear, o Receptor de Vitamina D (VDR). VDR está presente na maioria das linhagens de carcinoma mamário e em 80% dos cânceres de mama humanos. Comparando células HC11, derivada da glândula mamária normal de camundongo, com a linhagem HC11 transformada com alelo ativado de Ha-ras (HCll-ras), Escaleira e Brentani (1999) já haviam demonstrado inibição de crescimento induzido pelo tratamento com vitamina D na linhagem HCll, mas não na HC1 \-ras. Como a HC11 apresenta alto conteúdo de VDR ao contrário da HC11 -ras, interrogamos se essa seria a causa da falha da HC1 \-ras em responder a vitamina D. Para responder a essa pergunta, inicialmente, amplificamos por PCR a região do cDNA codificadora para VDR, a partir do RNA total da HC11 e iniciadores específicos. Com esse cDNA de VDR inserido no vetor de expressão pOP13 geramos 16 clones de HCll- ras transfectados com VDR, apresentando variado conteúdo de VDR. Desses clones, o clone I caracterizou-se como apresentando alta expressão de VDR, tanto por aumento do seu RNA mensageiro medido por ensaio de Northern como por aumento da proteína de VDR, determinada pelo uso de anticorpo monoclonal anti-VDR e analisada por citometria de fluxo (64,9% + 8,2% de positividade); os outros clones apresentaram expressão semelhante à HCII- ras (HC1 \-ras = 35,93% ± 15,10%; clone 7= 29,28% ± 10,62%; clone 13= 31,11% ± 27.2%), sendo a expressão da linhagem HC11= 85,5% ± 14%. O clone 1 respondeu com inibição de proliferação, como demonstrado pelo aumento do tempo de duplicação da população, medido pela contagem de células em cultura expostas a ação da Vitamina D 10 nM durante 3 dias (controle 17,28h ± l,98h vs. VD: 28,48h + 7,02h; p- 0,056) quando comparado a HCll-ra* (controle: 18,24h vs VD: 19,92h), Além disso, observamos um acúmulo de células na fase GO/Gl do ciclo celular, após o tratamento com vitamina D (controle: 79,54% ± 1,30% vs VD: 91.01% ± 2,66%, p < 0,005), como demonstrado pelo método de quantificação de conteúdo de DNA pela incorporação de Iodeto de Propídio e analise por citometria de fluxo. Note-se que esses parâmetros foram semelhantes a aqueles apresentados pela linhagem HC11 parental na presença de Vitamina D (controle: 55,9% vs VD: 82,0%). Os clones 7 e 13 com baixo conteúdo de VDR, apresentaram comportamento proliferativo semelhante ao da HC 11-ras. Nossos dados sugerem que, no modelo de progressão tumoral proporcionado pela linhagem HC11 e HC11-ras, o escape do controle de VDR determine uma vantagem proliferativa para a linhagem HCll-ras. O aumento de VDR, por si, restaurou no clone 1, um comportamento mais próximo da normalidade, o que leva a supor que os controles de proliferação normal sejam possíveis de serem recuperados em cânceres já estabelecidos. Uma diminuição de VDR em carcinoma mamário humano tem sido correlacionado com pior sobrevida sugerindo que as manipulações das vias de controle de VDR possam beneficiar estes pacientes / Abstract: tamin D3, through its active metabolite la,25-dihydroxyvitamin D3 (1,25- (OH)2 D3), is a powerful regulator of calcium homeostasis and is involved in the regulation of cell growth and differentiation in a large variety of cells. Its action is mediated primarily through binding to a member of the nuclear hormone receptor superfamily, the vitamin D receptor (VDR). Most breast cancer cells lines express VDR and breast carcinoma patients presenting with VDR positive tumors appear to be associated with longer disease free survival as compared to patients with negative tumours HC-11 cells, a mammary epithelial lineage established from midpregnant BALB/c mice, but not HC11 transformed with Haras showed a strong growth inhibition with higher percentage of cells arrested in G0/G1 phase of cell cycle when exposed to vitamin D3. In this work we asked whether the low VDR content would be the underlying cause of the lack of response of the HCll-ras cells to Vitamin D treatment. In order to study the effect of VDR overexpression in HC 11 -ras cell growth, we first obtained the mouse VDR cDNA using total HC11 RNA as the template for PCR. Using this VDR cDNA cloned into the Not-1 site of the pOP13 expression vetor, we generated 16 VDR-transfected HCll-ras clones expressing variable amount of VDR. Clone 1 presented with high VDR mRNA content, as determined by Northern blotting and high VDR protein, as measured by using biotilated anti-VDR MoAb and flow cytometry (64% ± 8,2% VDR positive cells). Clones 7 and 13 presented VDR content similar to HCll-ras (HCll-ras = 35,93% ± 15,10%; clone 7= 29,28% ± 10,62%; clone 13= 31,11% ± 27.2%) and lower than HC11 (85,5% ± 14% VDR positive cells). Clone 1 was growth inhibited, when treated with Vitamin D 10 nM during 72 hours, as showed by Cell Doubling Time (CT: 17,28h ± l,98h vs. VD: 28,48h ± 7,02h, p = 0,056) when compared to HCll-ras (CT: 18,24h vs VD: 19,92h). In addition, clone 1 increased G0/G1 phase fraction, determined by flow cytometry, when exposed to Vitamin D (CT: 79,54% ± 1,3 vs VD: 91.01% ± 2,66; p < 0,005). In keeping with these data, Clones 7 and 13 presenting with lower VDR content, were not growth inhibited as expected . Our data suggest that, in HC11 tumor progression model, the lack of susceptibility of HCll-ras to growth inhibition induced by Vitamin D treatment might be reputed to its low VDR content. Furthermore, the effect of VDR replacemente in clone 1, restoring HC11 susceptibility to Vitamin D treatment, suggests VDR might be a possible therapeutic target in breast cancer / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências Médicas

Orientador: Mary Luci de Souza Queiros / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-23T19:13:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Bincoletto_Claudia_D.pdf: 4247184 bytes, checksum: a0026bf456d6bf0cd05ab5acf14add45 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Neste trabalho estudamos o crescimento e diferenciação dos precursores hematopoiéticos da medula óssea, na ausência de fatores estimuladores de colônias (autoproljferação) em vinte e oito pacientes com Leucemia Mielóide Aguda (LMA), doze pacientes com Síndrome Mielodisplásica (SMD) e dezenove controles (indivíduos normais). Os nossos resultados demonstraram que pacientes com LMA e SMD apresentam um aumento autócrino no número de colônias hematopoiéticas que é significativamente superior ao observado em indivíduos normais (p = 0.001). Além disso, verificamos que a presença de autoproliferação celular está associada a um mau prognóstico nas leucemias agudas, pois os pacientes com autoproliferação celular (n = 15) apresentaram uma sobrevida menor em relação aos pacientes com ausência de capacidade autoproliferativa (n = 13), (p = 0.01). O estudo da sobrevida celular, realizado através da caracterização morfológica por microscopia óptica de células apoptóticas, revelou um baixo índice de células apoptóticas em pacientes com LMA (n = 18, P = 0.001) em relação aos controles. Por outro lado, pacientes com SMD apresentaram um alto índice de apoptose celular quando comparado aos indivíduos normais (n = 11, p = 0.001). Em relação à expressão do proto-oncogene bcl-2, verificamos novamente resultados opostos entre os pacientes com LMA e SMD, pois observamos um alto índice de expressão do bcl-2 em células mononucleares de pacientes com LMA (n = 28, P = 0.002) em relação aos controles, e um baixo índice de expressão do proto-oncogene bcl-2 em células mono nucleares de pacientes com SMD (n = 15, p = 0.002). Além disso, verificamos uma correlação linear negativa entre a expressão do proto-oncogene bcl-2 e apoptose celular em pacientes com LMA (rs = - 0.664; P < 0.001). A elevada expressão do bcl-2 verificada nos pacientes com LMA também indica uma interferência deste proto-oncogene na resposta celular à quimioterapia, pois sua expressão estava significativamente maior em pacientes refratário& à quimioterapia (p = 0.03). Sendo assim, os resultados obtidos neste trabalho contribuem para uma melhor compreensão dos mecanismos envolvidos no processo de resistência celular à quimioterapia nos pacientes com LMA e também ajudam a esclarecer, pelo menos em parte, alguns processos envolvidos na hematopoiese desordenada nos casos de SMD / Abstract: In this work we studied the growth and differentiation of early bone marrow progenitor cells in the absence of exogenous growth factors (autonomous proliferation), the bcl-2 expression and the number of apoptotic cells in mononuclear bone marrow cells from patients with confirmed diagnosis of Acute Myeloid Leukaemia (AML) and Myelodysplastic Syndrome (MDS). Bone marrow cells from normal individuals were used as controls. We observed an increased percentage of bcl-2 expression on mononuclear bone marrow cells from AML patients in relation to controls (p = 0.002). Accordingly, the number of apoptotic cells was reduced (p = 0.001) and there was a negative correlation between bcl-2 expression and the number of apoptotic cells (r= - 0.664, P < 0.001) in these patients. In addition, bcl-2 expression was significantly increased in the chemotherapy resistant group in relation to the responsive group (p = 0.03). Survival in the group of AML patients with autonomous proliferation was reduced (p = 0.01). These results suggest that a high bcl-2 expression and the presence of autonomous proliferation are related with a poor prognosis in AML. In the MDS patients, the autonomous proliferation and the percentage of apoptotic cells were also significantly greater when compared to controls (p = 0.001). However, bcl-2 expression was significantly lower on mononuclear bone marrow cells from MDS patients In relation to normal individuals (p = 0.002 - Wilcoxon). These results suggest that the autonomous proliferation observed in these patients is counteracted by the high range of cell death which is probably related to the lower bcl-2 expression / Doutorado / Doutor em Ciências Biológicas

Orientador: Rodney C. Bassanezi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Matematica, Estatistica e Computação Ciêntífica / Made available in DSpace on 2018-07-19T11:08:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_MeichelIskindaSilveira_D.pdf: 1603696 bytes, checksum: 4a65445e335e85e6c670a59ff5dcccb5 (MD5) Previous issue date: 1993 / Resumo: Este trabalho vem propor estratégias de tratamentos quimioterápicos que têm como objetivo minimizar o tamanho da população de células tumorais - composta de células resistentes e sensíveis ao fármaco - e a toxidez decorrente da aplicação do fármaco. Para este fim foi utilizada a teoria de Controle Ótimo Determinístico, levando em consideração funçôes genéricas de crescimento celular. Os resultados mostraram que a aplicação de concentração máxima do fármaco é uma estratégia presente em todos os casos analisados, sendo a única estratégia ótima em certos casos. Tratamentos cuja aplicação de fármaco depende da população de células tumorais também mostraram ser ótimos em alguns casos, ao passo que a alternância de concentração máxima e repouso mostrou ser subótima em certas circunstâncias ou uma estratégia alternativa na falta de soluções ótimas. / Abstract: A system of differential equations for the control of tumor cells growth in a cycle-nonspecific chemotherapy is presented. Drug resistance and toxicity are also taken into account. The aim of the control is to minimize the final tumor leveI and the toxicity. The analysis resorted to the Optimal ContraI Theory and the results showed that maximum drug concentration featured in all treatments - in some cases it was the sole optimal strategy. Treatments dependent on tumor leveI were also optimal whereas alternating maximum drug concentration and rest periods proved to be suboptimal or an alternative strategy when there is no optimal solution. / Doutorado / Doutor em Matemática Aplicada

Orientadores: Miriam Aparecida da Silva Trevisan, Jose Vassallo / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-07-19T15:12:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Irazusta_SilviaPierre_D.pdf: 2208520 bytes, checksum: 5f79b174921f4a7522941494522db6bb (MD5) Previous issue date: 1994 / Resumo: O antígeno de proliferação célular (PCNA) é uma proteína de 36kDa, auxiliar da DNA polimerase delta e sua expressão está relacionada com o estado proliferativo das células. Métodos imuno-histoquímicos com o anticorpo anti-PCNA, PC 10, têm vantagens, comparados. Com outras técnicas, particularmente, pela manutenção da arquitetura do tecido e simplicidade da metodologia. As regiões organizadoras de nucléolo (NORs) têm sido identificadas por meio de uma técnica argêntica (AgNOR), em cortes de material fixado e incluído em parafina. O método revela as NORs como pontos negros no núcleo das células, decorrente da argirofilia das proteínas associadas às NORs. O número de AgNORs têm sido correlacionado à proliferação celular. Tivemos por objetivos verificar se a quantificação desses marcadores de proliferação teria aplicação diagnóstica em biópsias gástricas endoscópicas e, também, investigar a existência de uma correlação entre o número de AgNORs interfásicas e o índice de PC1O na mucosa gástrica normal, regenerativa, displásica e neoplásica. Em 57 biópsias endoscópicas da região pilórica foram determinados os índices de PC1O e o número de AgNORs por núcleo. Os resultados mostraram que, para ambos os marcadores, as determinações foram significativamente maiores na mucosa neoplásica em relação às demais condições (p<0,001). Apesar das diferenças, a distinção entre os grupos, apenas pela quantificação, não foi possível devido à considerável sobreposição de valores. A análise de regressão mostrou que há uma correlação positiva e significante entre os métodos, somente para os casos normais e inflamatórios, nas outras situações, onde há perda gradual da diferenciação, esta correlação é inexistente. Esses achados são provavelmente, decorrentes do fato dessas proteínas representarem diferentes componentes e fases do ciclo célular. Além disso, nas condições malignas, onde os mecanismos regulatórios normais da divisão célular estão comprometidos, a expressão do antígeno de proliferação pode estar desregulada pela influência da secreção autócrina de fatores de crescimento, bem como, pela presença de oncogenes. Com relação às AgNORs, muito embora suas contagens tenham sido de pouco valor diagnóstico, a sua característica irregularidade na apresentação as definiram como marcadores morfológicos de malignidade. / Abstract: The proliferation cell nuclear antigen (PCNA) is a 36 Kda protein, acting as a synergist of the delta-DNA-polymerase. As compared to other methods to study cell proliferation, its detection by immuno-histochemistry using a monoclonal antibody to PCNA, PC 10, has the advantage of being simple and preserves tissue morphology as well. It can be performed in formalin-fixed, paraffin embedded tissues, allowing studies in archival material. Such advantages are shared with the detectation of nucleolar organizing regions by a silver impregnation technique (AgNOR). The number of black spots, which reflect the silver affinity of proteins related to NORs, has been correlated to cell proliferation. The aim of this retrospective study is to verify to which extent the rate of PC 10 - positive - cells and quantification of AgNORs can be helpful in identifying normal, inflammatory/regenerative, dysplastic and neoplastic gastric mucosa. The results obtained by both methods in 57 endoscopic pyloric biopsies reveal significant higher counts in the neoplastic group, as compared to other conditions (p < 0,001). Nevertheless, distinction of each group by quantification of PC 10 and AgNORs alone is not possible, due to overlap of values. This represents a handicap of both methods for diagnosis in individual cases. Regression analysis shows a statistically significant correlation between both methods only in the normal and inflammatory/regenerative groups. For the other conditions there is no statistical significance, possibly because proteins detected by both methods are diversely expressed and regulated during the cell cycle. Although AgNOR quantification is of limited diagnostic value, irregular shaped spots can be considered reliable markers for malignancy. / Doutorado / Doutor em Anatomia Patologica

Orientador: José Luiz Laus / Coorientador: Alvio Isao Shiguematsu / Banca: Andreia Vitor Couto do Amaral / Banca: Antonio Carlos Alessi / Banca: Jayter Silva de Paula / Banca: Noeme Sousa Rocha / Resumo: A córnea atua como principal elemento refrativo do olho, para tal tem que manter-se transparente. O endotélio corneal é um peça chave para essa manutenção, possuindo mecanismos como a bomba de Na+ e K+ que ajudam a garantir a desturgescência corneal. Descompensações endoteliais constituem uma importante indicação de transplante da córnea, uma vez que as células endoteliais corneais apresentam limitada capacidade proliferativa. Entretanto, transplantes são procedimentos cirúrgicos complicados e de elevado custo. Alternativas e coadjuvantes medicamentosos vêm sendo estudadas. O fucoidam é uma substância que, dentre outras propriedades, promove migração e proliferação celular, portanto objetivou-se, com a presente pesquisa, avaliar seus efeitos sobre a morfologia, a ploidia e o metabolismo de células endoteliais da córnea de coelhos, após criolesão experimental. Para tal, foram realizadas avaliações quanto à morfologia e viabilidade celular empregando-se dupla marcação com corantes vitais (alizarina vermelha e azul de tripan) e ultraestrutural pela microscopia eletrônica de transmissão e de varredura. Outrossim, avaliou-se a morfometria in vivo e in vitro de seguintes parâmetros: número de células, densidade, hexagonalidade e coeficiente de variação celulares. Estudou-se o metabolismo dessas células empregando-se a imunofluorescência com observação em confocal dos anticorpos Ki-67, Na+K+/ATPase, n-Caderina e Zo-1, conjugados com Alexafluor-488. Visando-se a conseguirem conhecime... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The cornea as the main refractive element of the eye, which has to remain transparent. The corneal endothelium is a key piece for this maintenance, having mechanisms such as the Na + and K + pump that help to ensure corneal dysurgescence. Endothelial decompensations are an important indication for corneal transplantation, since the corneal endothelial cells have limited proliferative capacity. However, transplants are complicated and expensive surgical procedures. Alternatives and drug coadjuvants have been studied. Fucoidam is a substance that, among other properties, promotes cell migration and proliferation, therefore, the objective of this research was to evaluate its effects on the morphology, ploidy and metabolism of rabbit cornea endothelial cells after experimental cryoinjury. For this, evaluations were made for morphology and cell viability using double labeling with vital dye (alizarin red and tripan blue) and ultrastructural analysis by transmission and scanning electron microscopy. Morphometry (in vivo and in vitro) of the following parameters were also evaluated: cell number, cell density, hexagonality and coefficient of variation. The metabolism of these cells was studied using immunofluorescence with confocal observation of the Ki-67, Na + K + / ATPase, n-Caderin and Zo-1 antibodies, conjugated to Alexafluor-488. In order to obtain additional knowledge regarding the nuclear activity during the healing process of the corneal endothelium in the presence of fucoidam were analyzed, from the feulgen reaction, nuclear perimeter and area, in addition to the chromatin supraorganization. Cryoinjury resulted in worsening of all morphometric parameters, with cell decrease, cell density, the percentage of standard cells with 6 sides and increase in coefficient of variation, the recovery to normal values with time was better in eyes tre... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor