Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais. / Made available in DSpace on 2012-10-21T07:47:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / A goiabeira-serrana (Acca seloowiana) é uma mirtácea nativa do planalto meridional brasileiro, com dispersão secundária no Uruguai. A polinização pode ocorrer tanto por pássaros como por abelhas, mas nenhum estudo mostrou a eficiência destes em polinizar as suas flores. Além disso, existe pouco conhecimento sobre muitas características relacionadas à morfologia floral e a biologia reprodutiva. Desta forma, este estudo teve por objetivos caracterizar a variação que existe na distância entre estigma e anteras (DEA), a distribuição dos estames na flor, determinar a quantidade de grãos de pólen e quantidade de óvulos, bem como a razão pólen/óvulo, caracterizar o sistema reprodutivo da goiabeira-serrana, em especial a contribuição dos diferentes sistemas de polinização na frutificação e em características fenotípicas dos frutos da espécie a relação da polinização com as diferentes classes de distancia entre estigma e antera das flores e estimar a taxa de cruzamento em acessos de goiabeira-serrana com base em locos microssátelites.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais. / Made available in DSpace on 2012-10-21T20:17:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 203907.pdf: 1713521 bytes, checksum: 5e8a98d2e1b57ffc18a16198c9c0e17a (MD5) / A organização da variabilidade genética de acessos de alhos mantidos em Bancos de Germoplasma tem sido bastante investigada com marcadores morfológicos e isoenzimáticos. Porém, a informação obtida com esses marcadores tem sido considerada inadequada, devido ao pequeno número de marcadores disponíveis e a pequena porção genômica acessada, respectivamente. Os marcadores genéticos baseados na análise direta da molécula de DNA, como RAPDs e AFLPs, permitem acesso a uma ampla região, distribuída ao acaso, devido sua capacidade multiplex e alto nível de polimorfismo detectado. O presente trabalho apresenta os resultados referentes (i) a avanços metodológicos e adequação de protocolos que possibilitaram o uso de descritores morfológicos e marcadores isoenzimáticos, RAPD e AFLP, (ii) e a caracterização da diversidade genética acompanhada da análise de agrupamento dos acessos do Banco Ativo de Germoplasma de Allium sativum L. de Santa Catarina. Constatou-se através de análise multivariada que 10 descritores morfológicos, dos 17 utilizados, foram de grande importância para caracterização dos 96 acessos de alho. A análise isoenzimática revelou que as cultivares comerciais apresentaram cinco padrões diferenciados. Entre as 20 cultivares avaliadas o percentual de locos polimórficos (P) variou de 0 a 57,1, sendo o valor médio 13,6%. No protocolo otimizado para a técnica RAPD, 16% dos iniciadores testados amplificaram um total de 47 bandas sendo que dessas, 25 revelaram polimorfismo. O maior avanço obtido na adaptação de protocolo da técnica AFLP foi a identificação de três novas combinações de iniciadores, e sua utilização pela primeira vez na análise de Alium sativum. Do grupo de 76 acessos de alho crioulo, apenas 25 foram considerados inequivocadamente como genótipos distintos. Em todas as análises, as 20 cultivares comerciais foram separadas em sete grupos de similaridade, sendo detectado apenas duas cultivares potencialmente duplicadas, uma de origem nacional e a outra de origem Chinesa. Assim, as principais conclusões deste trabalho foram: a) apesar da espécie em foco ser de propagação praticamente assexuada, os valores de heterozigosidade encontrados na análise de isoenzimas, sugerem que existe uma quantidade razoável de variabilidade genética entre os acessos; b) a utilização das técnicas moleculares mais modernas, pode possibilitar maior grau de segurança na discriminação, e conseqüentemente na recomendação desses genótipos, para atender as diversas regiões climáticas e c) o uso de marcadores moleculares se mostrou adequado neste estudo e, a possibilidade de obtenção de sementes botânicas de alho, abre espaço para o uso dessa técnica como suporte para a ampliação das atividades dos programas de melhoramento através de cruzamentos, aproveitando a variabilidade das linhagens segregantes.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais. / Made available in DSpace on 2012-10-22T04:19:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 206046.pdf: 1662271 bytes, checksum: fb1f8b782fd8c8ae9b4a7719d00d7890 (MD5) / A Araucaria angustifolia é uma espécie que desde o início da colonização na sua área de ocorrência no Estado, teve suas florestas intensamente exploradas. A sua exploração teve seu auge entre as décadas de 50 e 70 e desde então, a falta de uma política ambiental com medidas eficientes para controlar a exploração desordenada contribuiu para o esgotamento das suas reservas naturais. Atualmente a araucária é considerada uma espécie ameaçada de extinção (Portaria IBAMA Nº 37-N, de 3 de abril de 1992) dentro de sua área de ocorrência natural, a Floresta Ombrófila Mista (FOM), cujos remanescentes estimados são inferiores a 5%. A compreensão de questões como, a relação solo/planta em condições ambientais específicas, nas quais a araucária estabeleceu-se no território catarinense, podem ajudar na elaboração de estratégias que visem à conservação e manejo da espécie. O presente trabalho teve como principal objetivo, relacionar características de populações naturais de Araucaria angustifolia com características climáticas e edáficas em áreas de ocorrência natural da espécie, visando determinar possíveis adaptações das populações desta espécie, às condições do clima e solo no estado de Santa Catarina. Para execução dos objetivos propostos, foram estudadas 9 áreas de ocorrência natural da A. angustifolia onde foram realizados os levantamentos para caracterizar a estrutura demográfica da espécie e a coleta das amostras de solo para caracterização edáfica. A caracterização edáfica também foi realizada através de levantamentos bibliográficos visando obter informações sobre a formação geológica, relevo e gênese dos solos típicos que ocorrem nas regiões onde foram realizados os levantamentos. A caracterização macroclimática das regiões foi realizada com base nas informações disponíveis no CD-ROM do Atlas climatológico digital do

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais. / Made available in DSpace on 2012-10-20T15:02:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / O estudo da ecologia reprodutiva da espécie nativa S. terebinthifolius Raddi, a popular aroeira-vermelha, teve como objetivo principal à caracterização da fenologia floral e do sistema reprodutivo da espécie, através de observações naturalísticas, testes de polinização e coleta dos visitantes florais. Os estudos foram desenvolvidos entre março de 2002 e maio de 2003, em área com influência antrópica e com vegetação de restinga, em Florianópolis, SC. Constatou-se que a antese floral é diurna, a flor masculina possui duração de 12 horas, e a feminina permanece receptiva por um período de até 32 horas. No 1º período reprodutivo (primavera), apenas 22% das plantas floresceram. Já no 2º período (verão/outono) 100% dos indivíduos floresceram. As estruturas reprodutivas apresentaram dimorfismo sexual. Os tratamentos de polinização que resultaram em frutificação foram, o livre, maior média 45%, e cruzada manual, maior média 56,2%, caracterizando a espécie como dióica. A razão pólen/óvulo foi alta (99267: 1), classificando a espécie como xenogâmica obrigatória. Foi constatado um grande (750 indivíduos) e diversificado (04 ordens e 25 famílias) número de insetos sobre as flores da aroeira-vermelha. As espécies de abelhas Apis mellifera, Tectochlora alaris, Dialictus (chloralictus) sp. e Sphecodes sp. foram consideradas polinizadores efetivos. Conclui-se que, a morfologia das flores, o horário de abertura floral, somado à liberação dos grãos de pólen de maneira conspícua durante o período de receptividade do estigma e a maior visitação de potenciais polinizadores neste período, estão favorecendo as trocas gênicas (xenogamia) entre as plantas de aroeira-vermelha nas áreas de estudo.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Pós-graduação em Recursos Genéticos Vegetais / Made available in DSpace on 2012-10-19T05:04:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Neste trabalho, foram estudados aspectos da biologia reprodutiva de Bromelia antiacantha.O mesmo foi desenvolvido no final de janeiro de 2000 e entre dezembro e janeiro de 2001 na Floresta Nacional de Três Barras/IBAMA SC. Foram feitas observações sobre e as características morfológicas, horário, seqüência e duração da antese e número de flores por inflorescência. A quantificação do volume e concentração do néctar e a receptividade do estigma também foram avaliados. Além disso, foram realizados experimentos controlados para a caracterização do sistema reprodutivo da espécie e feitas observações do comportamento e a identificação dos visitantes às flores de Bromelia antiacantha; que foram feitas diretamente no campo e complementadas por fotografias. Também realizou-se experimento para avaliar o comportamento germinativo das sementes da espécie. As várias características morfológicas, somadas aos recursos florais disponibilizados pela Bromelia antiacantha, caracterizam-na como uma espécie alógama e ornitófila. O comportamento germinativo das sementes da Bromelia antiacantha mostrou-se ajustado para dois diferentes modelos e demonstra a existência de uma estratégia adaptativa que possibilita a entrada contínua e gradual das plântulas. Os dados apresentados neste trabalho, além de serem dados inéditos, constitui-se numa contribuição para o embasamento de estratégias de manejo da espécie

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias. Pós-graduação em Recursos Genéticos Vegetais / Made available in DSpace on 2012-10-19T05:23:13Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Caracterização de sistemas de cultivos celulares de Mandevilla velutina, com o intuito de incrementar a produção de velutinol A, composto pregnânico antagonista de bradicinina. Foram adotadas estratégias de seleção, identificação e análise de linhagens celulares, capazes de metabolizar fontes de carbono que não a sacarose: glucose, frutose, lactose e glucose e lactose em combinação, quanto ao seu potencial de síntese de biomassa e composto de interesse. A estabilidade das linhagens selecionadas foi avaliada por análise do teor de clorofila total, determinação do padrão morfológico e análise da ocorrência de diferenciação celular. A análise da cinética de incremento de biomassa de linhagens celulares selecionadas foi realizada por parâmetros de dissimilação de carbono, peso fresco e peso seco. O monitoramento da cinética do metabolismo de carbono, em culturas celulares mantidas em meio líquido e semi-sólido foi realizado via ressonância magnética nuclear de hidrogênio (1H-RMN), nos meios intra e extracelulares, respectivamente. A biossíntese e o teor de velutinol A foram analisados via cromatografia em camada delgada (CCD) e densitometria ótica (DO). Os resultados deste trabalho são de importância quando se busca alternativas no que diz respeito à otimização dos sistemas de produção e obtenção de um composto bioativo de alto valor agregado e de cunho biotecnológico.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciência Agrárias. Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais / Made available in DSpace on 2012-10-19T14:33:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / O presente trabalho objetivou-se a elucidação dos aspectos relacionados com a morfogênese in vitro da F. sellowiana dos acessos 291x458 e 101, com ênfase ao estabelecimento de um sistema modelo para a embriogênese somática de espécies arbóreas e para a aplicação em programas de domesticação e melhoramento genético nesta espécie. Estudaram-se os efeitos do Glu e sua amina, assim como diferentes níveis de mioinositol na indução da embriogênese somática. Na otimização da conversão dos embriões somáticos testou-se os efeitos dos fitorreguladores, osmorreguladores e do carvão ativado. Na utilização da técnica de semente sintética testou-se a composição de um endosperma artificial, visando melhorar a conversão dos embriões somáticos em plântulas completas. Para determinar a dinâmica de crescimento das culturas embriogenéticas foram utilizados embriões somáticos no estagio torpedo provenientes de duas fonte de carbono (maltose e sacarose). Análises de proteínas, açúcares solúveis totais e amido foram efetuadas nas culturas embriogenéticas e nos diferentes estágios de desenvolvimento, assim como se estudaram aspectos histológicos e estruturais mediante a utilização da historesina. O processo de indução e expressão da embriogênese somática de alta freqüência na F. sellowiana foi dependente da fonte de nitrogênio. Por outro lado, os fitorreguladores BAP e AG3 promoveram a conversão a plântulas, e conjuntamente com os osmorreguladores PEG e manitol, aumentaram a taxa de conversão dos embriões somáticos à plântula. A utilização da técnica de reconstituição de endosperma artificial melhorou a conversão a plântulas. O BAP e o sorbitol, adicionados ao endosperma artificial, melhoraram a taxa de conversão. O modelo indireto na embriogênese somática em F. sellowiana, formou embriões somáticos a partir de uma célula embriogênica originada a partir de calos ou nódulos meristemáticos. Estas células embriogênicas revelaram característica especificas, especialmente no que tange às substâncias de reserva, como proteínas, amido e substâncias polifenóis. Em alguns casos, grupos de células foram capazes de originar uma protoderme circundante, onde cada célula revelou competência embriogenética. A maltose, como fonte de carbono na indução de embriões somáticos, promoveu o crescimento de culturas embriogênicas secundárias. Os níveis de proteínas totais na indução diminuíram ao longo do período em cultura, enquanto que os níveis de açúcares solúveis totais e de amido aumentaram durante o período em cultivo, afetando o desenvolvimento dos embriões somáticos. Por outro lado, os níveis de proteínas totais aumentaram de acordo com a evolução de desenvolvimento dos embriões somáticos. Já, os níveis de açúcares solúveis totais e amido foram altos nos estádios coração e cotiledonar e baixos nos estádios torpedo e pré-cotiledonar.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2018. / Submitted by Fabiana Santos (fabianacamargo@bce.unb.br) on 2018-08-22T19:33:34Z No. of bitstreams: 1 2018_RicardoMenesesSayd.pdf: 2343312 bytes, checksum: 8f083e0c024f093820a0aa626c23e89d (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-08-27T20:55:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2018_RicardoMenesesSayd.pdf: 2343312 bytes, checksum: 8f083e0c024f093820a0aa626c23e89d (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-27T20:55:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018_RicardoMenesesSayd.pdf: 2343312 bytes, checksum: 8f083e0c024f093820a0aa626c23e89d (MD5) Previous issue date: 2018-08-22 / A demanda por cultivares de cevada cervejeira adaptadas ao cultivo irrigado no Cerrado tem crescido de forma constante. Cultivares oriundas da região Sul do país têm sido introduzidas e avaliadas na região a fim de suprir essa demanda instantânea. Com o objetivo de fornecer melhores condições de cultivo ao sistema produtivo do Cerrado, esse trabalho propôs estimar os parâmetros genéticos em diferentes anos e locais a fim de subsidiar uma seleção criteriosa dos genótipos mais aptos a essas condições e analisar a variabilidade genética existente entre eles com base em dados agronômicos e moleculares. Primeiramente foram avaliadas seis características agronômicas (rendimento de grãos, classificação comercial de grãos, peso de mil sementes, altura de plantas, grau de acamamento e ciclo de espigamento) de 113 genótipos de cevada cervejeira em dois ambientes no Cerrado do Distrito Federal com o objetivo de estimar os parâmetros genéticos (valores de F, herdabilidade em sentido amplo, coeficiente de variação ambiental, genotípico e relativo e as correlações fenotípicas, genotípicas e ambientais). A partir dos dados desse primeiro trabalho, foram selecionados 69 genótipos utilizando as características avaliadas. Em um segundo momento, foram avaliados os parâmetros genéticos dos 69 genótipos considerando três anos de avaliações utilizando as mesmas características agronômicas com intuito de verificar a influência dos anos agrícolas no comportamento dos genótipos. Baseado nos dados obtidos nos cinco ensaios realizados, os genótipos foram selecionados por um método proposto pelo melhorista (Seleção Combinada) que foi comparado a quatro índices de seleção (índice livre de pesos e parâmetros, índice dos ganhos desejados, soma de ranks e genótipoideótipo). Foram gerados índices de frequência de seleção e os métodos foram comparados em relação ao ganho de seleção em % para cada experimento. Foram selecionados 20 genótipos de alto rendimento agronômico além de quatro genótipos a serem utilizados como genitores em blocos de cruzamentos por apresentarem uma ou duas características importantes para o melhoramento de cevada. Foram realizados estudos de diversidade genética agronômica e molecular dos 24 genótipos selecionados acrescidos de cinco cultivares de cevada recomendadas para o Cerrado. Os dados agronômicos foram obtidos em dois locais do Distrito Federal utilizando a distância de Mahalanobis. Para a análise de diversidade genética molecular os dados foram obtidos utilizando marcadores moleculares RAPD, SSR e ISSR. A partir dos dados obtidos foram gerados dendrogramas e gráficos de dispersão tanto para a diversidade agronômica como para os dados moleculares, possibilitando através das análises indicar os cruzamentos que possam ter maior efeito heterótico. Os resultados indicaram a existência de variabilidade entre os acessos avaliados, assim como efeito da interação G x A tanto na comparação de locais como em anos. Os genótipos de origem colombiana mostraram-se mais aptos em relação aos demais. Verificou-se que é possível a seleção de acessos de cevada com alto rendimento e ciclo de espigamento precoce simultaneamente, fator decisivo no processo de escolha de genótipos a seguirem em futuros experimentos. No estudo de diversidade observouse a baixa correlação entre as distâncias genéticas, e que os marcadores ISSR correlacionouse positivamente com as distâncias agronômicas. É necessário a realização de estudo de diversidade complementar entre características agronômicas e marcadores moleculares para indicação dos melhores cruzamentos através de genótipos com a maior variabilidade possível. / A demand for breeding barley cultivars adapted as irrigated Cerrado conditions is constant. Cultivars from the southern area of the country have been tested in the Cerrado region aiming to supply this immediate demand. With the purpose of providing better conditions for this production system, this work proposes to estimate genetic parameters in different years and environments in order to promote a careful selection of more suitable genotypes to these conditions and to analyze the existing genetic variability among them based on agronomic and molecular data. First, six agronomic characteristics (grain yield, plumpness kernel, thousand seed weight, plant height, lodging degree and days to heading) of 113 brewery barley genotypes were evaluated in two environments in the Cerrado of the Distrito Federal, focusing on estimating the genetic parameters (F values, heritability in broad sense, environmental, genotypic and relative variation coefficients). Based on the data from the first trial, 69 genotypes were selected based on the evaluated characteristics. In a second experiment, the genetic parameters of the 69 genotypes were evaluated considering three years of evaluations using the same agronomic characteristics. Based on the data obtained in the five experiments, the genotypes were selected by a method proposed by the breeder and compared to four selection indices (free index of weights and parameters, desired earnings index, rankings sum and genotype-ideotype) that served as basis for the accomplished selection. Frequency indices of selection were generated, and methods were compared to the selection gain for each experiment. Twenty genotypes of high agronomic yield were selected, as well as four genotypes to be used as parents in crossbred blocks since they presented one or two important traits for barley breeding. Genetic diversity studies were carried out for the 24 selected genotypes plus five barley cultivars recommended for the Cerrado, based on agronomic data from two locations in the Federal District, using Mahalanobis distance. For the analysis of molecular genetic diversity, the data was obtained using molecular markers RAPD, ISSR and SSR. From the obtained data were generated dendrograms and dispersion graphs for both agronomic diversity and for the molecular data, allowing, through the analysis, to indicate the crosses that could have greater heterotic effect. The results indicated the existence of variability among the accessions, as well as the interaction effect G x E in both location and year comparisons. The genotypes of Colombian origins were more apt in relation to the others. It was verified that the selection of accessions of barley with high yield and early breeding cycle simultaneously is possible, which is a decisive factor in the process of choosing genotypes to survey in future experiments. The diversity study detected a low correlation between genetic distances, and that ISSR markers correlated positively with the agronomic distances. It is necessary to carry out a study of complementary diversity between agronomic traits and molecular markers to indicate the best crosses through genotypes with the greater variability.

A mandioca (Manihot esculenta Crantz) é uma das mais importantes espécies tropicais cultivadas. O gênero Manihot tem 98 espécies e entre elas não existem barreiras para isolamento reprodutivo, portanto, há um imenso pool gênico à disposição dos melhoristas de mandioca. Muitos cientistas têm enfatizado a importância, para o desenvolvimento de cultivares melhoradas, utilizando os acessos de espécies silvestres de Manihot. O objetivo desse trabalho foi à seleção de descritores morfoagronômicos e análise de diversidade genética de acessos do banco ativo de mandioca da Embrapa Mandioca e Fruticultura. Para a caracterização dos acessos do germoplasma de mandioca foram usados 35 descritores morfológicos e agronômicos, sendo 19 qualitativos e 16 quantitativos. Foi realizada a identificação dos descritores redundantes, por meio da metodologia proposta por Jollife e levando-se em consideração a contribuição relativa de cada característica para a divergência genética, segundo o método proposto por Singh. Conclui-se que os descritores comprimento e diâmetro da raiz, número de raízes por planta, peso de raiz por planta, teor de amido e ácido cianídrico na raiz, distância entre cicatrizes foliares, número de hastes a partir da maniva mãe, altura da primeira ramificação, comprimento do lóbulo médio e do pecíolo, cor da película da raiz, cor da casca da raiz sem película, forma da raiz, cor do caule, hábito de ramificação, cor dos ramos terminais, forma do lóbulo, cor do pecíolo são importantes na caracterização de germoplasma da mandioca. E que o descarte de 57 % dos descritores não ocasiona perda de informação, minimiza custos e dinamiza o manejo de germoplasma da mandioca. O método de Gower foi eficiente na discriminação dos grupos considerando a análise conjunta dos descritores estudados demonstrando, que a análise simultânea de dados qualitativos, quantitativos é viável e pode permitir uma maior eficiência no conhecimento da divergência genética entre acessos de germoplasma, por considerar a influência resultante da interdependência entre as respectivas características. / The cassava (Manihot esculenta Crantz) is one of the most important tropical species grown. The genus Manihot has 98 species and among them, there are no barriers to reproductive isolation, therefore, there is an immense gene pool available to the breeders of cassava. Many scientists have emphasized the importance for the development of improved cultivars, using the accessions of wild species of Manihot. The objective of this work was Selection of descriptors morphological and agricultural traits and analysis of genetic diversity of accesses active bank of cassava of Embrapa Cassava and Tropical Fruits. For characterization of cassava germplasm accessions were used 35 morphological and agronomic descriptors, being 19 qualitative and 16 quantitative. It was carried out the identification of redundant descriptors, by means of the methodology proposed by Jollife and taking into account the relative contribution of each characteristic for genetic divergence, according to the method proposed by Singh. It is concluded that the descriptors length and root diameter, number of roots per plant, root weight per plant, starch content and hydrocyanic acid in root, distance between leaf scars, number of stems from the manioc cuttings mother, height of the first branch, length of the middle lobe and the petiole, color of the film from root, color of the root bark without film, form of root, stem color, branching habit, color, shape of the terminal branches of the lobe, color of the petiole are important in the characterization of germplasm of cassava. The method of Gower was efficient in discrimination of germplasm of cassava. The method of Gower was efficient in discrimination of groups whereas the joint analysis of descriptors studied, demonstrating that the simultaneous analysis of qualitative data, quantitative is viable and can allow a greater efficiency in the knowledge of the genetic divergence among accessions of germplasm banks by consider the influence resulting from the interdependence between their respective characteristics / Dissertação submetida ao Colegiado de Curso do Programa de Pós-Graduação em Recurcos Genéticos Vegetais da Universidade Federal do Recôncavo da Bahia e Embrapa Mandioca e Fruticultura, como requisito para obtenção do Grau de Mestre em Recursos Genéticos Vegetais, Área de Concentração em Melhoramento e Biotecnologia Vegetal.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Recursos Genéticos Vegetais, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2016-09-20T04:01:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 340551.pdf: 2534346 bytes, checksum: bee632d7e3b4d8a516ae521bdc5d0c02 (MD5) Previous issue date: 2016 / As orquídeas compreendem espécies frequentes do bioma Mata Atlântica, as quais têm sofrido ameaça continua devido à destruição e fragmentação dos seus habitats naturais. Devido às características ornamentais e paisagísticas, elas têm sido extraídas desordenadamente de seus habitats e comercializadas em todo o país. Técnicas de cultura de tecidos abrangem ferramentas que podem ser aplicadas à propagação massal e a conservação de orquídeas em extinção. Durante o estabelecimento in vitro, um padrão de resposta morfogênico definido como estruturas semelhantes à protocormos (ESPs) tem sido proposto para várias espécies de orquídeas como a espécie em estudo. Neste contexto, o objetivo desse trabalho foi avaliar o padrão de desenvolvimento de ESPs em Cattleya tigrina, visando o avanço no conhecimento desta rota da morfogênese e dos fatores que modulam, bem como, suas aplicações para a conservação e propagação de germoplasma. Explantes foliares, obtidos de plantas jovens, micropropagadas in vitro foram inoculados em meio de cultura MS/2 suplementado com 9µM de TDZ, para a indução e desenvolvimento das ESPs. As culturas foram coletadas aos zero, dois, sete, 14, 30, 60 e 100 dias de cultivo para posteriores análises. Realizou-se análises proteômicas mediante a combinação de géis bidimensionais e espectrometria de massas. Adicionalmente, foram realizadas avaliações do padrão de carboidratos solúveis totais e amido, qualificação dos açúcares e quantificação do hormônio AIA (ácido indol-3-acético) durante a indução e desenvolvimento das ESPs. Através dos resultados foi possível verificar uma reprogramação gênica durante a indução e desenvolvimento dessas estruturas, acompanhada de alterações anatômicas, bioquímicas e metabólicas. Na indução das ESPs foi possível verificar um número significativo de proteínas expressas ao zero dia de cultivo, quando comparado aos demais tempos de cultivo. Proteínas relacionadas ao metabolismo energético e carboidratos; defesa e resposta ao estresse e síntese de proteínas apresentaram significativas alterações na sua expressão durante a indução das ESPs. Durante o desenvolvimento das ESPs alterações na expressão de proteínas associadas aos processos metabólicos; metabolismo energético e carboidratos; ciclo celular e metabolismo secundário e fitohormônios, contribuíram no elevado potencial regenerativo dessas estruturas. Aos 100 dias de cultivo houve maior expressão de proteínas em relação aos demais tempos, o que pode estar relacionado com a ativação do metabolismo em relação ao desenvolvimento das ESPs. Em relação as avalições bioquímicas, foi possível observar que a indução e o desenvolvimento das ESPs foram claramente acompanhados por um aumento nos teores de AIA e diminuição nos teores de açúcares, sendo que este sinal parece ter sido importante para que as células se diferenciassem e adquirissem a necessária competência. Os resultados aqui obtidos ampliam a base científica para aprofundar a compreensão dos fatores que modulam o processo de indução e desenvolvimento das ESPs em C. tigrina.<br> / Abstract : Orchids are species of the Atlantic Forest biome, which are under continuing threat due to the destruction and fragmentation of their natural habitats. Because of its ornamental features, they have been inordinately taken from their habitats and marketed throughout the country. Tissue culture techniques include tools that can be applied to mass propagation and conservation of endangered orchids. During establishment of in vitro cultures of this species, a pattern of morphogenic response defined as protocorm-like bodies (PLBs) have been proposed for various orchid species as the species under study. In this context, the aim of this study was to evaluate the PLBs development pattern in C. tigrina for the advancement in knowledge of this morphogenetic route (pathways) and the factors that modulate, and their applications in the conservation and propagation of germplasm. Leaf explants obtained from young plants, in vitro micropropagated were inoculated into culture medium MS/2 supplemented with 9µM TDZ for the induction and development of PLBs. The cultures were collected after zero, two, seven, 14, 30, 60 and 100 days of cultivation, for further analysis. Proteomic analysis were performed by combining two-dimensional gels and mass spectrometry. Additionally, we performed standard evaluations of total soluble carbohydrates and starch, sugars qualification and quantification of the IAA (Indole-3-acetic acid) hormone during induction and development of PLBs .Through the results it was possible to check a reprogramming of gene during induction and development of these structures, accompanied by anatomical, biochemical and metabolic changes.The induction of PLBs observed a significant number of proteins expressed to zero days of culture, when compared to other cultivation times. Proteins related to energy and carbohydrate metabolism; defense and response to stress and in protein synthesis showed significant changes in expression during induction of PLBs. During the development of PLBs changes in expression of proteins associated with metabolic processes; energy and carbohydrate metabolism; cell cycle and secondary metabolism and phytohormones, contributed to the high regenerative potential of these structures. After 100 days of cultivation there was greater expression of proteins compared to the other times, which may be related to metabolic activation in relation to the development of PLBs. Regarding the biochemical evaluations, it was observed that the induction and development of PLBs was clearly accompanied by an increase in IAA level and a decrease in sugar content, and this signal appears to be important for cells to differentiate and acquire the necessary competence. The results obtained broaden the scientific basis for a deeper understanding of the factors that modulate the process of induction and development of PLBs in C. tigrina.