CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / A mamoneira (Ricinus communis) Ã tolerante a seca e cultivada para produÃÃo de Ãleo para uso industrial. Na regiÃo Nordeste os pequenos produtores cultivam a mamona consorciada algodÃo, feijÃo caupi, gergelim, girassol, milho, sorgo ou amendoim. Dois experimentos de campo foram conduzidos nos anos agrÃcolas 2008, 2009 e 2010, na Fazenda Experimental Lavoura Seca, QuixadÃ, CearÃ, com o objetivo de avaliar o comportamento da mamona e girasssol cultivados em dois padrÃes de consorciaÃÃo. No experimento I avaliou-se o consorcio mamona (Ma) x girassol (Gi) com 1Ma:1Gi; 1Ma:2Gi; 1Ma:3Gi; 2Ma:2Gi; 2Ma:3Gi fileiras, acrescidos da mamona e girassol em monocultivo. No experimento II, avaliou-se o consorcio mamona x girassol com antecipaÃÃo do plantio da mamona em 0, 7, 14 ou 21 dias antes do plantio do girassol. Para cada experimento adotou-se o delineamento de blocos ao acaso com 4 repetiÃÃes. Avaliou-se a produtividade de grÃos, seus componentes e o uso eficiente da terra para a mamona e girassol consorciados e em monocultivo. A produtividade da mamona e girassol no monocultivo foi significativamente superior nos dois sistemas de consÃrcio. A antecipaÃÃo do plantio da mamona 14 e 21 dias em comparaÃÃo ao girassol mostraram vantagens em relaÃÃo as demais datas de plantio. No experimentos I e II verificou-se que a mamona foi dominante sobre ao girassol. PrecipitaÃÃes pluviais inferiores a demanda hÃdrica das culturas da mamona e girassol, proporcionaram reduÃÃo no uso eficiente de terra (UET). / Castor bean (Ricinus communis L.) is an oil seed crop drought tolerant with its oil having several uses in industry. In the Northeast of Brazil it is commonly cultivated by small farmers intercropped with cotton, cowpea, sesamum, sunflower, sorghum or peanuts. Two field experiments were carried during 2008, 2009 and 2010, at â Fazenda Experiental Lavoura Secaâ, Quixada, Ceara, with the objective to evaluate the behavior of castor bean and sunflower under two intercropping arrangements. In experiment I, its was evaluated the intercropping castor bean (CB) x sunflower (SF) with 1CB:1SF; 1CB:2SF; 1CB:3SF; 2SB:2SF; 2CB:3SF rows, added of sole crop of castor bean and sunflower. In the experiment II, was evaluated with the early planting of castor bean in 0, 7, 14 or 21 days in relations to sunflower the intercropping systems. In both experiments it was used a randomized complete block design with 4 replications. In this study it was determined the yield, yield components and land equivalent ratio (LER) for castor bean and sunflower grown in intercropping and sole crop. The grain yield of castor bean and sunflower was significantly higher in sole crop than intercropping in both experiments. Between the intercropping systems the highest yields were observed when early planting of castor bean was of 14 or 21 days before sunflower. In experiments I and II, showed that the castor bean was the dominant crop in relation to sunflower. Rainfall lower the water requirements of castor bean and sunflower crops, showed a reduction in LER.

Made available in DSpace on 2014-08-20T14:36:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao_Jaqueline_Pereira_Machado.pdf: 305752 bytes, checksum: 916358c1d4f9ebadf63ec2e9cbcd6291 (MD5) Previous issue date: 2008-12-19 / In Brazil, since the colonial period, the culture of castor bean had great economic and social importance, particularly for the Northeast region, due to the differentiated quality of its oil. Recently, with the establishment of the National Program of Production and Use of Biodiesel, its culture began to be stimulated in other regions of the Country, where the lack of research information still is great. The objective of this study was to evaluate the response of castor bean cultivars to the nitrogenous and phosphatic fertilizations in the conditions of the South region of Rio Grande do Sul. The study, comprising two experiments (nitrogenous fertilization and phosphatic fertilization), was carried out in the agricultural harvest of 2007/08, in a Planossolo Háplico (Albaqualf), in the municipality of Pelotas, RS. Two castor bean cultivars ('AL Guarany 2002' and 'Lyra') and five doses (0; 30; 60; 90 and 120 kg ha-1) of N or P2O5 were used, according to the experiment. The effects of the treatments on the nutrition and production of the castor bean were evaluated as well as the fertility of the soil after the harvest. In general, the nitrogenous and phosphatic fertilizations favored the nutritional state of the castor bean. The yield of the culture increased with the use of up to 84 kg ha-1 of N, being the dose of maximum economic efficiency 77 kg ha-1 of N. With regard to the response to phosphorus, the yield of grains increased with the use of up to 156 kg ha-1 of P2O5, for 'AL Guarany 2002', and of up to 90 kg ha-1 of P2O5, for 'Lyra'; the economic doses for these cultivars were, respectively, 134 ha-1 and 78 kg ha-1 of P2O5. The nitrogenous and phosphatic fertilizations promoted increase of the concentration of available phosphorus in the soil. / No Brasil, desde o período colonial, a cultura da mamona teve grande importância econômica e social, particularmente para a região Nordeste, em razão da qualidade diferenciada de seu óleo. Recentemente, com o estabelecimento do Programa Nacional de Produção e Uso de Biodiesel, seu cultivo passou a ser incentivado em outras regiões do País, onde a carência de informações de pesquisa ainda é grande. O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta de cultivares de mamoneira às adubações nitrogenada e fosfatada nas condições edafoclimáticas da região Sul do Rio Grande do Sul. O estudo, compreendendo dois experimentos (adubação nitrogenada e adubação fosfatada), foi realizado na safra agrícola 2007/08, em um Planossolo Háplico, no município de Pelotas, RS. Foram utilizadas duas cultivares de mamoneira (AL Guarany 2002 e Lyra) e cinco doses (0; 30; 60; 90 e 120 kg ha-1) de N ou de P2O5, de acordo com o experimento. Avaliaram-se os efeitos dos tratamentos sobre a nutrição e produção da mamoneira e sobre a fertilidade do solo após a colheita. De forma geral, as fertilizações nitrogenada e fosfatada favoreceram o estado nutricional da mamoneira. A produtividade da cultura aumentou com o uso de até 84 kg ha-1 de N, sendo a dose de máxima eficiência econômica 77 kg ha-1 de N. Com relação à resposta ao fósforo, a produtividade de grãos aumentou com o uso de até 156 kg ha-1 de P2O5, para a 'AL Guarany 2002', e de até 90 kg ha-1 de P2O5, para a 'Lyra'; as doses econômicas para essas cultivares foram, respectivamente, 134 kg ha-1 e 78 kg ha-1 de P2O5. As adubações nitrogenada e fosfatada promoveram aumento do teor de fósforo disponível no solo.

The hard tick Ixodes ricinus is an important blood-feeding parasite that transmits tick- borne diseases, such as tick-borne encephalitis and Lyme disease. Ticks employ a battery of proteolytic enzymes, including cathepsins, to digest their bloodmeal. These proteins are potential targets for the development of anti-tick vaccines. This work is focused on cathepsin L from I. ricinus (IrCL), namely its isoenzymes IrCL1 and IrCL3. IrCL1 was expressed in Pichia pastoris and chromatographically purified. Its substrate specifity was determined by the cleavage of (a) peptide fluorogenic substrates and (b) protein substrates analyzed by mass spectrometry. The proteolytic activity of IrCL1 was modulated by its interaction with glycosaminoglycans, which affected the pH optimum value. Futhermore, a proteolytically active mutant of IrCL1 with reduced number of N-glycosylation sites was prepared; this form will be used for crystallization experiments. IrCL3 was expressed in Escherichia coli, refolded and activated to its active form. The proteolytic activity of IrCL3 is in many ascpects similar to that of IrCL1, including substrate specifity, acidic pH optimum and activity modulation by glycosaminoglycans. Key words: cysteine proteases, cathepsin L, hard tick I. ricinus, substrate specifity, proteolytic activity...

Les tiques sont des arthropodes ectoparasites obligatoires qui se nourrissent sur une grande variété de vertébrés sur une large partie du globe. Au cours de leur repas, les tiques sécrètent dans leur salive de nombreux facteurs leur permettant de contourner bon nombre des défenses de l’hôte. Bien que la littérature rapporte beaucoup d’informations au sujet des effets du repas de la tique sur l’hôte, la nature des facteurs actifs exprimés par les glandes salivaires de la tique est peu connue. Au cours d’anciens travaux au sein du laboratoire, le crible de deux banques d’ADN complémentaires - issues de la rétro-transcription des ARN messagers synthétisés par les glandes salivaires de la tique Ixodes ricinus – a permis l’identification de 27 protéines dont l'expression est spécifiquement induite ou régulée positivement pendant le repas sanguin de la tique I. ricinus. Parmi ces protéines, la protéine Seq24, induite au cours du repas sanguin, présente la capacité de moduler les immunités innée et acquise de l’hôte. En conséquence, la protéine Seq24 a été nommée Iris pour « Ixodes ricinus Immunosuppressor ». Au cours de la présente étude, notre but fût de caractériser le rôle d’Iris et de déterminer son importance dans le repas sanguin de la tique I. ricinus. La protéine Iris appartient à la famille des inhibiteurs de sérine protéases et présente une homologie significative avec l’inhibiteur d’élastase de leucocytes. Une analyse in silico a confirmé qu’Iris présentait la structure des serpines, et notamment le RCL (Reactive Center Loop), boucle responsable de l’activité anti-protéasique. Comme attendu (sur base de l’analyse in silico), Iris inhibe de manière spécifique l’activité de plusieurs sérine protéases, et en particulier l’élastase de leucocyte. Ces tests effectués, nous avons essayé de comprendre quel(s) pouvai(en)t être le(s) rôle(s) d’Iris dans l’accomplissement du repas sanguin de la tique, c’est à dire dans la lutte contre les différents systèmes de défenses de l’hôte. Tout d’abord, des tests ont démontré la capacité d’Iris à inhiber les mécanismes de l’hémostase. Des tests sur du plasma et du sang complet ont montré qu’Iris allonge le temps de fibrinolyse, la voie intrinsèque de la coagulation et l’adhésion plaquettaire. L’utilisation de mutants a également démontré que si les deux premières activités sont dépendantes du RCL, et donc d’un mode de fonctionnement anti-protéolytique, l’adhésion plaquettaire est indépendante de ce système. Ce résultat met en évidence l’existence d’autres sites actifs, isolés par analyse in silico, nommés Receptor Binding Domain (RBD). Un travail antérieur du laboratoire avait permis d’indiquer la capacité de la protéine recombinante Iris semi-purifiée à inhiber la production de TNF-a, d’IL-6, et d’IL-8 (cytokines pro-inflammatoires) ainsi que l’IFN-g par des PBMCs (Peripherical Blood Mononuclear Cells) humaines. Ces résultats ont été confirmés avec de la protéine purifiée. Des analyses complémentaires ont démontré qu’un mutant d’Iris - dépourvu d’activité anti-protéasique - conserve l’activité pro-inflammatoire. Là encore, ce mécanisme semble impliquer un ou plusieurs RBD. L’utilisation d’anticorps dirigés contre ces zones a permis de déterminer le domaine d’interaction (aa : 105-120) impliqué dans cette fonction. D’autre part, une analyse par FACS a permis de démontrer qu’Iris interagit uniquement avec les cellules d’origine monocytaire. Enfin, nous avons également analysé l’importance d’Iris au cours du repas sanguin de la tique par une approche vaccinale. Les résultats observés indiquent que 30 % des tiques nourries sur des lapins immunisés par la protéine rIris ne survivent pas au repas.

Os equinos são animais que, quando adultos, apresentam elevado peso corpóreo e ossos bastante resistentes para sustentar esse peso. Dessa forma, para que ocorra fratura nos ossos do cavalo é necessário um trauma de elevada energia resultando em fraturas cominutivas, que podem formar falhas ósseas impedindo o contato entre os fragmentos ósseos, o que compromete a estabilidade e resistência da osteossíntese. Devido à complexidade desse tipo de fraturas e aos implantes disponíveis apresentarem baixa resistência para o uso nessa espécie e devido a seu comportamento, o tratamento de fraturas em equinos apresenta baixos índices de sucesso. Dessa maneira, o uso de um material osteocondutor com resistência mecânica para o preenchimento dessas falhas poderia elevar a resistência da osteossíntese, levando a melhores índices de sucesso na correção dessas fraturas. O presente estudo teve como objetivo a avaliação biomecânica em laboratório de dois biomateriais substitutos ósseos no preenchimento de falha óssea. Para isso foram utilizados 30 ossos terceiro metacarpiano de equinos que foram submetidos a osteossíntese com placa LCP em sua face dorsal e criada uma falha óssea transversal completa de um centímetro na diáfise média. Dez dessas peças foram submetidas a ensaios biomecânicos não destrutivos até a carga de 1000N, onde foram avaliadas a rigidez, as deformações da peça inteira, da placa e do osso individualmente em diferentes regiões. As outras 20 dessas peças foram submetidas a ensaios destrutivos, onde foram avaliadas a carga e deformação suportada no limite elástico e no ponto de ruptura. Dessa forma, pôde-se observar que houve aumento na rigidez de 699,39N/mm para 2905,38N/mm e 4274,93N/mm devido ao preenchimento da falha com poliuretana de mamona e quitosana, respectivamente. A peça inteira teve sua deformação diminuída de 1,73mm para 0,5mm e 0,35 com carga de 1000N, devido ao preenchimento da falha com poliuretana de mamona e quitosana, respectivamente. A placa teve sua deformação diminuída de 2260,64µd para 320,25µd pelo preenchimento da falha com poliuretana de mamona e para 89,88µd com o preenchimento com quitosana durante a aplicação de 1000N. O osso próximo à falha sofreu maiores deformações tanto com poliuretana de mamona quanto com quitosana, contudo não apresentou maiores deformações em região distante da falha. A peça inteira teve aumento da carga suportada em seu limite elástico de 1008N para 8804N apenas com o preenchimento da falha com quitosana. A peça inteira teve sua deformação diminuída de 1,64mm para 1,26 no limite elástico apenas devido ao preenchimento da falha poliuretana de mamona. A peça inteira teve aumento da força suportada no momento de ruptura de 1660N para 15187N e 11012N com o preenchimento da falha com poliuretana de mamona e quitosana, respectivamente. A peça inteira teve sua deformação máxima no ponto de ruptura diminuída de 5,4mm para 2,16mm apenas com o preenchimento da falha com quitosana. / Adult horses are heavy animals equipped with bones strong enough to support their body weight. High energy trauma is required to produce comminuted fractures, where bone loss may prevent proper fracture reduction and compromise osteosynthesis resistance and stability. In horses, aside from behavioural issues, low success rates associated with comminuted fracture resolution may be due to the complexity of such fractures or the low resistance of bone implants. Therefore, osteoconductive biomaterials with good mechanical resistance would potentially benefit treatment outcomes. This ex vivo study evaluated the biomechanical behaviour of two bone surrogate biomaterials in experimental third metacarpal fractures in horses. Thirty equine third metacarpal bone specimens were submitted to dorsal LCP (locking compression plate) osteosynthesis following creation of a transverse 1 cm wide middiaphiseal defect. Defects were filled either with Ricinus communis polyurethane or calcium phosphate cement-chitosan composite. Ten specimens were submitted to non-destructive biomechanical testing under 1000N maximum load; construct stiffness, construct deformation and isolated deformation of LCP and third metacarpal bone in different regions were evaluated. The remaining 20 specimens were submitted to destructive biomechanical testing; maximum load and deformation within the elastic limit, and to failure were documented. Bone defect repair with RCP or CPC-chitosan composite increased construct stiffness from 699,39N/mm to 2905.38N/mm and 4274.93N/mm and decreased construct deformation under 1000N from 1.73mm to 0,5mm and 0.35 respectively. LCP deformation under 1000N decreased from 2260.64d to 320.25µd and from 2260.64µd to 89.88d following filling of the bone defect with RCP or CPC-chitosan composite respectively. Bone deformation around the defect increased following treatment with RCP or CPC-chitosan composite. However bone deformation away from the defect remained unchanged. Maximum load within the elastic limit increased from 1008N to 8804N when the experimental defect was filled with chitosan composite. Conversely, construct deformation within the elastic limit decreased from 1.64mm to 1.26mm following treatment with RCP. Maximum load to construct failure increased from 1660N to 15187N and 11012N following bone defect repair with RCP or calcium phosphate cement-chitosan composite respectively. However, construct maximum deformation decreased from 5.4mm to 2.16mm when calcium phosphate cement-chitosan composite was used.

Lyme borreliosis (LB) is the most frequent vectorborne disease in the Northern Hemisphere. It is a complex bacterial zoonosis involving vertebrate hosts and hard ticks of the genus Ixodes. The causative agents, bacteria of the LB group of spirochaetes, form a species complex comprising 17 named species. As is the case for most microbial pathogens, epidemiological and ecological studies require appropriate genotyping. Although the use of single loci may provide rapid results, there are serious disadvantages, in particular when inferring evolutionary relationships or geographic population structure. A novel multilocus sequence analysis (MLSA) system of the LB group spirochaetes has been developed based on housekeeping genes to overcome these problems. Here, the system is optimized and tested using extracted spirochaetal DNA directly from ticks and then utilized to obtain insights into the migration and spread of individual species as well as to investigate the evolutionary origins of the species complex. Species belonging to the LB group of spirochetes display different patterns and levels of host specialisation which makes this an ideal system to study the impact of host associations on spread of zoonotic tickborne diseases. For example, Borrelia valaisiana and B. garinii are transmitted exclusively by birds while B. afzelii is transmitted by rodents. I demonstrate that the migration of the LB species is dependent on, and limited by, the migration of their respective hosts. I also show the presence of B. afzelii strains in England and, through the use of the MLSA scheme, demonstrate that the strains are highly structured. A close evolutionary relationship between B. afzelii and its rodent host species is shown. Furthermore, through phylogenetic analyses, some evidence of a coevolutionary relationship between the LB group species and their major group of vector species, the Ixodes persulcatus species complex, is presented and a Eurasian origin for the species group is suggested.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-01-29Bitstream added on 2014-06-13T19:07:36Z : No. of bitstreams: 1 souzaschlick_gd_me_botfca.pdf: 1162676 bytes, checksum: ea5596a01761141a74d3a02f1103f6ca (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Com o lançamento de novas cultivares de mamona de porte baixo e frutos indeiscentes, adequados para o cultivo em grandes áreas e colheita mecanizada, fez-se necessário estabelecer quais os melhores espaçamentos e populações de plantas, para que cada um desses materiais possa atingir a máxima produtividade. Nesse sentido, objetivou-se com o presente trabalho avaliar a influência do espaçamento entre fileiras e da população de plantas no crescimento e produtividade de cultivares de mamona de porte baixo na safra de verão (novembro) e em safrinha (março). Para tanto, foram realizados quatro experimentos, com dois cultivares (FCA-PB e IAC 2028), em duas épocas de cultivo (safra de verão e safrinha), conduzidos durante os anos agrícolas 2007/08 e 2008/09. O delineamento experimental utilizado em todos os experimentos foi o de blocos casualizados, em esquema de parcelas subdivididas, com quatro repetições. As parcelas foram constituídas por quatro espaçamentos entre fileiras (0,45, 0,60, 0,75 e 0,90 m) e as subparcelas por quatro populações iniciais de plantas (25.000, 40.000, 55.000 e 70.000 plantas ha-1). O trabalho de pesquisa foi conduzido em condições de campo, na Fazenda Experimental Lageado da Faculdade de Ciências Agronômicas – UNESP, campus de Botucatu, SP. Na safra de verão foi possível observar que: para a cultivar FCA-PB, o aumento da população de plantas, independente do espaçamento entre fileiras, diminuiu a população final de plantas, a matéria seca da parte aérea, o número de racemos por planta e de frutos por racemo; o aumento da população de plantas nos espaçamentos de 0,60 e 0,75 m entre fileiras aumentou a altura de inserção do primeiro racemo; a maior produtividade de grãos e de óleo da mamoneira FCA-PB foi obtida com população inicial entre 55.000 e 70.000 plantas... / The release of new dwarf castor bean cultivars and indehiscent fruit is suitable for growth in large scale with and mechanized harvest, therefore there is a need to establish which row spacing and plant population is the best for each of these materials can achieve the maximum yield. In this sense, the objective of this study was to evaluate the influence of the row spacing and plant population in the growth and yield of dwarf castor bean cultivars in the summer (November) and out-of-season (March) cropping. Therefore, four experiments were performed, i.e., two cultivars (FCA-PB e IAC 2028) in two cropping seasons (summer and out-of-season), conducted during 2007/08 and 2008/09 agricultural years. The experiment was arranged in a randomized block design with split-plot and four replications. Plots comprised four row spacings (0.45, 0.60, 0.75, and 0.90 m), and subplots comprised four initial plant populations (25,000, 40,000, 55,000, and 70,000 plants per hectare). In summer cropping season was observed: in the FCA-PB cultivar, plant population increasing, regardless of row spacing, decreased final plant population, aboveground dry matter, stem diameter, racemes per plant and fruits per raceme; the plant population increasing, at 0.60 and 0.75 m row spacings, increased the height of the first raceme insertion; the highest grain and oil yields were obtained with a population among 55,000 and 70,000 plants per hectare and 0.45 or 0.60 m row spacings. In the IAC 2028 cultivar, the plant population increasing, decreased final plant population, aboveground dry matter, stem diameter, number of racemes per plant, number of fruits per raceme, mass of 100 grains... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:22:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-02-07Bitstream added on 2014-06-13T20:48:36Z : No. of bitstreams: 1 moro_e_me_botfca.pdf: 1246010 bytes, checksum: e877db9571cce58a0d163f8e6557b0c3 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência de épocas de aplicação, fontes e doses de nitrogênio em híbridos de mamona de porte baixo em sistema plantio direto, possibilitando a obtenção de informações para o manejo adequado da adubação nitrogenada tanto em safra como em safrinha. O projeto de pesquisa foi constituído de três experimentos conduzidos em safra e safrinha por dois anos agrícolas (2005/2006 e 2006/2007) na Fazenda Experimental Lageado pertencente a Faculdade de Ciências Agronômicas da UNESP, em Botucatu-SP. No Experimento 1 o delineamento experimental foi em blocos casualizados em esquema parcela subdividida, com quatro repetições. As parcelas foram constituídas por dois híbridos de mamona (híbrido Lyra e híbrido Savana) e as subparcelas, por cinco doses de N (0, 50, 100, 150 e 200 kg ha-1). A fonte de N utilizada foi o nitrato de amônio (32% de N), sendo que a aplicação foi realizada aos 20 dias após a emergência. No Experimento 2 o delineamento experimental foi em blocos casualizados em esquema parcela subdividida, com quatro repetições. As parcelas foram constituídas por dois híbridos de mamona (híbrido Lyra e híbrido Savana) e as subparcelas, por seis formas de parcelamento da adubação nitrogenada (0-0, 0-100, 100-0, 30-70, 70-30, 50-50 kg ha-1 de N) aplicados em duas épocas (20 DAE e aos 40 DAE). A fonte de nitrogênio utilizada também foi o nitrato de amônio. Por fim, no Experimento 3 o delineamento experimental foi em blocos casualizados em esquema fatorial 2 x 4, com quatro repetições. Os tratamentos foram constituídos pela combinação de duas fontes de nitrogênio (sulfato de amônio e uréia), com quatro doses de nitrogênio (0, 30, 60 e 120 kg ha-1 de N) aplicadas em cobertura aos 20 dias após a emergência, sendo utilizado o híbridoLyra. Vale ressaltar que na safrinha de 2007 o híbrido Savana foi substituído pelo... / The aim of this study was to evaluate the effect’s time, as well as sources and nitrogen doses in castor bean hybrids in no-till system, enabling the appropriate nitrogen fertilization management both in summer crop and fall crop for two crop years (2005/2006 and 2006/2007) in an experimental area located in Botucatu, São Paulo State, Brazil. In the experiment 1, the experimental design was a randomized complete block design, in splitplot scheme with four replications, was used. The plots were constituted by two castor bean hybrids (Lyra and Savana). Five N levels (0, 50, 100, 150, and 200 kg ha-1) side dressing fertilization constituted the subplots. Ammonium nitrate was the nitrogen source utilized (32% of N) applied 20 days after emergence. In the experiment 2, the experimental design was a randomized complete block design, in splitplot scheme with four replications, was used. The plots were constituted by two castor bean hybrids (Lyra and Savana). Six combination of times out rates (0-0, 0-100, 100-0, 30-70, 70-30, 50-50 kg ha-1 of N) side dressing nitrogen fertilization constituted the subplots. The N source used was also ammonium nitrate, applied 20 days after emergence and 40 days after emergence. Finally, in experiment 3, the experimental design was a randomized blocks, in 2 x 4 factorial design, with four replications. The treatments comprised the combination of two nitrogen sources (ammonium sulfate and urea), with four doses of nitrogen (0, 30, 60 and 120 kg ha-1 of N) surface applied 20 days after emergence, plus a control. In the latter experiment, hybrid Lyra was utilized. It’s important to highlight that in the 2007 fall crop, Savana hybrid was replaced by Sara. In the summer crop, the conclusions were: a) Lyra hybrid was more productive than Savana; b) Lyra was more efficient in N utilization as to the application of 150 kg ha-1; e) the components ...(Complete abstract click electronic access below)

Resumo: A mamona pode ser utilizada para mais de 700 finalidades diferentes, porém a sua toxidez é o limitante principalmente para o uso restrito da torta originada após a extração do óleo. Para as análises utilizou-se um organismo com o modo de reação a medicamentos e toxinas semelhante ao ser humano, o nematóide Caenorhabditis elegans, o qual tem sido amplamente utilizado pela indústria farmacêutica. O trabalho teve inicio com ensaios preliminares os quais se utilizaram culturas de C. elegans. Estas foram expostas às toxinas que foram colocadas em pequenas cavidades no meio de cultura, porém, devido à falta de praticidade do método, à difícil leitura e sua degradação pela E. coli, passou-se a realizar os testes em placas de 24 poços transparentes contendo apenas água, o nematóide e a toxina. Os resultados mostraram que o teste utilizando placas de 24 poços para exposição do nematóide, e a extração feita através da homogeneização, seguida por banho-maria seguida por centrifugação se mostrou eficiente para medir a ricina sendo semelhantes aos obtidos pelos testes de radioimunodifusão e Elisa, testes bastante específicos, porém de custo mais elevado. O presente trabalho teve por objetivo desenvolver um bioensaio para quantificar a ricina tóxica da mamona, pois a relação entre as análises realizadas por diferentes métodos de quantificação existentes, nem sempre refletem a toxidez real, podendo ocorrer que sementes analisadas por estes métodos, apresentem menor teor de ricina, embora sejam mais tóxicas do que outras sementes que tenham maior teor de ricina quando analisada pelo método. Isto se deve aos métodos empregados que medem além da ricina o RCA Ricinus Communis Aglutimina, um composto menos tóxico do que a ricina pura. / Abstract: The castor oil can be used to 700 different products but its toxicity limits mainly the use of the castor bean cake, the product you have after extract the oil. The present reseach developed a bioassay to quantify the ricin content on castor bean seed because the relationship between the analyses performed by different quantifying methods not always reflect the actual toxicity, witch can occur that seeds analysed by these methods have lower ricin levels although are more toxic than other seeds, because when it test not only the ricin but also the complex ricin + RCA Ricinus Communis Algutimin is measured and the RCA is less toxic than the pure ricin. That is why it was used an organism that has similarities in the way the human body reacts to drugs and toxin, choosing to use the Caenorhabditis elegans that has been used to the pharmaceutical industry. This assay started with preliminary assays using C. elegans colonies that were exposed to the toxins placed in small holes did in the media , but it was hard to read and the E. coli degradation, the method changed to the 24 well plates with water, nematode and the ricin. The results showed the method is efficient to measure ricin and very similar to the radio-imuno-diffusion and the Elisa, very specific tests, but expensive with some operational problems. / Orientador: Maurício Dutra Zanotto / Coorientador: Dick Auld / Banca: Rogério Peres Soratto / Banca: Mirina Luiza Myczkowski / Banca: Tammy Aparecida Manabe Kiihl / Banca: José Geraldo Carvalho do Amaral / Doutor

As Proteínas Inativadoras de Ribossomos (RIPs) compreendem uma família de enzimas que inibem a síntese protéica através da depurinação de uma adenina específica do RNA ribossomal. Os membros desta família são classificados como RIPs do tipo I, quando possuem somente o RNA-N-Glicosidase e RIPs do tipo II quando além do domínio glicosidase, também apresentam um domínio de lectina. As RIPs foram mais estudadas em plantas, onde a ricina e a aglutinina, ambas RIP do tipo II de mamona (Ricinus communis), estão entre as primeiras descritas. O presente trabalho teve o objetivo de identificar parálogos da ricina e aglutinina, bem como RIPs do tipo I de mamona e analisar as suas relações filogenéticas. Além disso, validar o uso de 14 potenciais genes de referência para qRT-PCR em cinco estádios do desenvolvimento da semente de mamona. O padrão de expressão gênica por RT-qPCR de todas RIPs de mamona identificadas, também foram analisados nestes mesmos estádios. Um total de 18 genes de RIPs foi identificado em mamona (Rcom RIPs), dos quais 10 foram classificados como do tipo II e 8 do tipo I. As topologias das árvores filogenéticas sugerem que as Rcom RIPs foram originadas a partir de múltiplos eventos de duplicação gênica. Dois modelos evolutivos foram propostos para a radiação das Rcom RIPs, baseados em processos de fusão gênica associado ou não a eventos de duplicação parcial. Os genes Act 2/7, EF β, Ubi, TIP e UBC foram os que apresentaram perfil de expressão mais estável e foram selecionados para subsequente normalização dos dados de expressão das Rcom RIPs. Os genes que codificam as Rcom RIPI 3, 4, 5, 7 e 8 e as Rcom RIPII 1, 2, 4, 5, 6 e 8 são transcritos em sementes, sendo que a Rcom RIPII 1 (ricina) e a Rcom RIPII 2 (aglutinina) foram as mais expressas. O presente trabalho apresenta um modelo evolutivo das Rcom RIPs, o qual pode ser extrapolado para outras espécies de plantas. Este trabalho também demonstra o primeiro esforço para a padronização de genes de referência para RT-qPCR em mamona e o primeiro que apresenta a expressão outras Rcom RIPs, além da ricina e aglutinina. / Ribosome inactivating proteins (RIPs) comprise a family of enzymes that inhibit protein synthesis, after depurination of an adenine-specific ribosomal RNA. The members of this family are classified as type I RIPs, which have a RNA-Nglycosidase domain and type II RIPs encompassing a RNA-N-glycosidase and a lectin domain.The RIPs were more studied in plants, where ricin and agglutinin, both type II RIP of castor bean (Ricinus communis), were the first to be described. This work aimed to: 1) identifine paralogous of ricin and agglutinin, as well as the type I RIPs of castor bean; 2) analyze their phylogenetic relationships; 3) validate the use of 14 potential housekeeping genes for qRT-PCR for five developmental stages of R. communis seeds; 4) analyze the pattern of gene expression by RTqPCR of all RIPs castor identified in these same stages. A total of 18 genes that encode RIPs were identified in castor bean (Rcom RIPs), 10 of which were classified as type II and 8 as type I. The phylogenetic trees topologies suggest that Rcom RIPs were originated from multiple events of gene duplications. Two evolutionary models have been proposed for the radiation of Rcom RIPs based on gene fusion processes associated or not to events of partial duplication. The genes Act 2/7, EF β, Ubi, TIP and UBC presented the more stable expression profile and were selected for further RT- qPCR normalization experiments. The Rcom RIPI 3, 4, 5, 7 and 8 and Rcom RIPI 1, 2, 4, 5, 6 and 8 genes are actively transcribed in seeds, whereas the Rcom RIPI 1 (ricin) and Rcom RIPI 2 (agglutinin) were the most expressed. This paper presents an evolutionary model of Rcom RIPs, which can be extrapolated to other plant species. Also, corresponds to the first effort to standardize housekeeping genes for RT-qPCR in castor bean and the first that shows the expression Rcom RIPs, other than ricin and agglutinin.