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Avaliação de alimentos para ruminantes por intermédio de métodos in vivo e in vitro / Evaluation of feeds for ruminants by in vivo and in vitro procedures

Cabral, Luciano da Silva 28 February 2002 (has links)
Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-06T19:24:07Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 389525 bytes, checksum: 6cc14febae6fb28130546ca7e2a6a4e7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-06T19:24:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 389525 bytes, checksum: 6cc14febae6fb28130546ca7e2a6a4e7 (MD5) Previous issue date: 2002-02-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O presente trabalho teve os seguintes objetivos: (1) determinar as alterações na composição químico-bromatológica e nas frações protéicas e de carboidratos, determinar as taxas de digestão das frações de carboidratos e avaliar o valor nutricional de silagens de milho e de sorgo, com diferentes proporções de grãos e panículas, respectivamente, por meio da técnica de produção de gases e da digestibilidade in vitro da matéria seca e, estimar o teor em nutrientes digestíveis totais (NDT); (2) determinar o consumo e a digestibilidade aparente total e parcial dos nutrientes em bovinos alimentados com dietas à base de silagens de milho e de capim-elefante e feno de capim tifton-85; (3) determinar a eficiência microbiana e parâmetros ruminais em bovinos alimentados com dietas à base de silagens de milho e de capim-elefante e feno de capim tifton-85; (4) determinar as taxas de digestão das frações protéicas e de carboidratos para as silagens de milho e de capim-elefante, o feno de capim tifton-85 e o farelo de soja; (5) validar as estimativas relativas à digestão total da matéria seca, à digestão ruminal dos carboidratos totais, digestão total e ruminal dos carboidratos fibrosos e do fluxo de compostos nitrogenados (N) microbianos no abomaso pela utilização da técnica de produção de gases e (6) determinar a digestibilidade e a excreção fecal em bovinos por intermédio de indicadores internos e externos. As silagens de milho e de sorgo foram confeccionadas em silos de PVC com proporções de zero, 15, 30, 45 e 60% de grãos e, zero, 20, 40, 60, 80 e 100% de panículas, respectivamente. Foram determinados nas silagens de milho e sorgo, bem como nos alimentos avaliados na experimentação in vivo, os teores de matéria seca (MS), proteína bruta (PB), extrato etéreo (EE), matéria mineral (MM), carboidratos totais (CT), fibra em detergente neutro (FDN), FDN corrigida para cinzas e proteínas (FDNcp), lignina, compostos nitrogenados não protéicos (NNP), proteína solúvel em detergente neutro (B1+B2), nitrogênio insolúvel nos detergentes neutro (NIDN) e ácido (NIDA), carboidratos não fibrosos (CNF), FDN potencialmente digestível (fração B2) e indigestível (fração C). As taxas de digestão das frações dos carboidratos foram estimadas por intermédio da técnica de produção de gás in vitro, a digestibilidade in vitro da matéria seca por meio da técnica de dois estágios, o NDT por meio das equações do NRC (2001) e, as taxas de digestão das frações protéicas dos alimentos utilizados na experimentação in vivo foram estimadas pela incubação com proteases ruminais. A experimentação in vivo foi realizada por meio da utilização de seis bovinos, fistulados no rúmen e abomaso, distribuídos em delineamento em quadrado latino 3x3 duplo, para avaliação de dietas à base de silagens de silagem de milho e de capim-elefante e feno de capim tifton-85, as quais foram suplementadas com 10% de farelo de soja. Cada período experimental constou de 18 dias, sendo os 10 primeiros destinados à adaptação dos animais às dietas, seis dias para determinação do consumo e digestibilidade aparente total e parcial dos nutrientes, onde foram coletadas amostras de sobras, digesta abomasal e de fezes; no 17 0 dia foi determinado pH ruminal e coletadas amostras de fluido ruminal antes da alimentação e 2, 4 e 8 horas após, para a determinação da concentração N-NH 3 ; e no último dia de cada período, foi coletado conteúdo ruminal para isolamento e determinação da composição microbiana. A excreção fecal e o fluxo de matéria seca no abomaso foram determinados pela utilização da FDN indigestível (FDNI) como indicador, a qual foi determinada nas amostras dos alimentos, sobras, fezes e de digesta abomasal e, o fluxo de compostos microbianos no abomaso foi determinado pela utilização das bases purinas como indicador microbiano. Para avaliação da FDN indigestível (FDNI), da fibra em detergente ácido indigestível (FDAI) e do cromo como indicadores da excreção fecal e da digestibilidade aparente, a FDNI e a FDAI foram determinadas in vitro após 144 horas de incubação, tendo como referência, a coleta total, realizada durante três dias nos dois últimos períodos do experimento. Os dados relativos às silagens de milho e sorgo com diferentes proporções de grãos e panículas, respectivamente, foram avaliados por meio de análise de regressão; os dados de consumo, digestibilidade aparente total e parcial dos nutrientes e eficiência microbiana foram avaliados por meio de análise de variância; os dados relativos ao pH e à concentração de N-NH 3 ruminal foram analisados pelo esquema de parcelas subdivididas, tendo nas subparcelas o tempo de coleta; a validação das predições relativas à degradação ruminal dos carboidratos totais, da digestão total da matéria seca, da digestão total e ruminal dos carboidratos fibrosos e do fluxo de compostos nitrogenados microbianos no abomaso, obtidos por intermédio das estimativas oriundas da técnica de produção de gases, foi feita pela regressão dos valores preditos sobre os observados, sendo as estimativas dos parâmetros da regressão β 0 e β 1 testados de modo a identificar se as estimativas foram subestimadas ou superestimadas, por intermédio de análise de regressão linear simples; a comparação dos indicadores foi feita por meio de análise de regressão dos valores preditos sobre os observados e análise de variância pelo teste de Dunnett. O acréscimo de grãos à silagem de milho aumentou linearmente a MST, PB e CNF e, reduziu a MM, FDN, FDA e lignina. O NNP e as frações B 3 e C da PB da silagem de milho variaram de 34,04 a 54,62%, de 6,63 a 2,61 e de 7,83 a 1,32% da PB. Os teores dos CNF e das frações B 2 e C dos carboidratos totais foram influenciados linearmente pela adição de grãos à silagem de milho, as quais variaram de 153,55 a 585,10, 489,57 a 203,29 e de 233,50 a 85,51 g/kg de MS, respectivamente. As taxas de digestão dos CNF e da fração B 2 foram quadraticamente afetadas, apresentando valores máximos de 0,2723 e 0,02771 h - , para as silagens com 40,08 e 14,57% de grãos, respectivamente. O volume final de gás, a DIVMS e o NDT aumentaram linearmente em função da porcentagem de grãos à silagem de milho, os quais variaram de de 20,03 a 28,47 ximL, de 62,19 a 83,21% e de 56,08 a 81,40%, respectivamente. O acréscimo de panículas à silagem de sorgo aumentou linearmente os teores de MS, PB, CNF, EE e lignina e reduziu os teores de MM e FDN. O NNP e as frações B1+B2, B 3 e C variaram de 9,19 a 21,24, de 67,63 a 75,98, de 3,85 a 6,09 e de 5,09 a 10,98% do N total. Os teores dos CNF aumentaram linearmente e da fração B 2 dos carboidratos totais foram reduzidos pela adição de panículas à silagem de sorgo, os quais variaram de 208,18 a 564,07 e de 381,29 a zero g/kg de MS, respectivamente. As taxas de digestão dos CNF e da fração B 2 variaram de 0,1358 a 0,1563h- 1 e de 0,0247 a 0,0294 h- 1 . O volume final de gás não foi influenciado pela adição de panículas, variando de 23,09 a 25,26 mL e, a DIVMS máxima de 69,52% foi obtida com 60,10% de panículas. Embora o NDT estimado tenha aumentado linearmente com o acréscimo de panículas, considerando a não alteração da produção de gás e o comportamento quadrático da DIVMS, pode-se inferir que a utilização destas estimativas não parecem ser adequadas. Na experimentação in vivo, embora as dietas à base de silagem de milho e de feno de capim tifton-85 não tenham apresentando diferenças quanto à ingestão de matéria seca, a primeira permitiu maior ingestão de nutrientes digestíveis totais. A dieta de feno de capim tifton-85 apresentou maior consumo de FDN (4,52 kg/dia), enquanto a dieta de silagem de milho resultou em maior ingestão de carboidratos não fibrosos (1,95 kg/dia). A dieta de silagem de milho apresentou maior digestão aparente total da matéria seca (66,3%), da matéria orgânica (68,9%), da fibra em detergente neutro (55,7%) e dos carboidratos totais (68,2%). O rúmen foi o principal local de digestão dos carboidratos totais e da FDN para todas as dietas. Foi verificada uma relação inversa entre a digestibilidade total da matéria seca e a ingestão de FDNI e, desta forma, pode-se inferir que essa fração possa ser utilizada na estimação da digestibilidade de gramíneas tropicais. As dietas à base de silagem de milho e feno de capim tifton- 85 proporcionaram maior fluxo de compostos nitrogenados no abomaso. As bactérias isoladas do rúmen apresentaram em média 8,89% de N total e 18,40 para a relação N-RNA:N-total. A dieta à base de silagem de milho proporcionou maior degradação ruminal da matéria orgânica (2,96 kg/dia) e dos carboidratos totais (3,07 kg/dia) e maior fluxo de massa microbiana no abomaso (788,28 g/dia). As dietas à base de feno de capim tifton-85 e de silagem de capim- elefante apresentaram maior eficiência microbiana, cujos valores foram 28,10 e 30,39 g de N microbiano/kg de carboidratos degradados no rúmen. A dieta à base de silagem de milho proporcionou menores concentrações de N-NH 3 e pH ruminal em função do tempo após a alimentação o que, possivelmente, afetou negativamente a eficiência microbiana. As silagens de milho e de capim-elefante destacaram-se pela maior proporção dos seus compostos nitrogenados (N) na forma de NNP, o feno de capim tifton-85 destacou-se pela elevada proporção de PSDN e de fração B3 e, o farelo de soja pela elevada proporção de PSDN (B1+B2). Quanto às frações dos carboidratos (% dos CT), a silagem de milho e o farelo de soja destacaram-se pela elevada proporção de CNF (37,05 e 75,75%), e o feno de capim tifton-85 e a silagem de capim-elefante pelo elevado teor das frações B2 (51,20 e 51,70%) e C (41,77 e 33,56%). As taxas de digestão das frações PSDN (B1+B2) e B3 da PB variaram de 0,0469 a 0,1512 h -1 para o farelo de soja e silagem de capim-elefante e de 0,0081 a 0,0757 h -1 para o feno de capim tifton-85 e silagem de capim-elefante, respectivamente. As taxas de digestão estimadas para os CNF e a fração B2 variaram de 0,1294 a 0,1905 h -1 e de 0,0254 a 0,0300 h -1 para o feno de capim tifton-85 e a silagem de milho, respectivamente. As estimativas foram acuradas na predição da digestão ruminal dos carboidratos totais, da digestão total e ruminal dos carboidratos fibrosos e do fluxo de N microbiano no abomaso. A digestão aparente total da matéria seca também foi acuradamente predita pela diferença entre o gás da dieta e das fezes. A excreção fecal e a digestibilidade aparente da matéria seca foram acuradamente preditas a partir do cromo e da FDNI, entretanto, com a utilização da FDAI, houve subestimação da digestibilidade e superestimação da excreção fecal para a dieta contendo feno de capim tifton-85. / The present work had the following objectives: (1) to determine the chemical composition and protein and carbohydrates fractions alteration, to determine the digestion rate of carbohydrate fractions and to evaluate the nutritional value of corn and sorghum silages with different grains and steam+leaf/head proportions, respectively, by in vitro gas production technique and in vitro dry matter digestibility and to estimate the content of total digestible nutrients (TDN); (2) to determine the intake and the total apparent and partial digestibility of nutrients in cattle fed diets based on corn silage, tifton-85 bermudagrass hay and elephant-grass silage; (3) to determine the microbial efficiency and ruminal parameters of cattle fed diets based with corn silage, tifton-85 bermudagrass hay and elephant-grass silage; (4) to determine the digestion rates of protein and carbohydrates fractions for the corn silage, the tifton-85 bermudagrass hay, elephant-grass silage and soybean meal; (5) to validate the estimates of total dry matter digestion, ruminal digestion of total carbohydrate, total and ruminal digestion of fiber carbohydrates and microbial nitrogen compounds in the abomasum by the gas production technique and (6) to determine the digestibility and faecal excretion in cattle by internal and external markers. The corn and sorghum silages were done in silos of PVC with zero, 15, xiv30, 45 and 60% of grains and zero, 20, 40, 60, 80 and 100% of steam+leaf/head, respectively. The content of dry matter (DM), crude protein (CP), ether extract (EE), ash, total carbohydrates (TC), neutral detergent fiber (NDF), NDF corrected for ash and protein (NDFcp), lignin, non-protein nitrogen compounds (NPN), neutral detergent soluble protein (NDSP), neutral and acid detergent insoluble protein (NDIN and ADIN), non fiber carbohydrates, potentialy digestible (B2) and indigestible (C) NDF were determined in corn and sorghum silages, as well in the feeds evaluated in in vivo experimentation. The digestion rate of carbohydrate fractions were estimated by in vitro gas production technique, the in vitro dry matter digestibility (IVDMD) by two-stage technique, the TDN by NRC (2001) equations and the digestion rate of protein fractions of feeds utilized in the in vivo experimentation by ruminal proteases incubation. The in vivo experimentation was realized by utilization of six rumen and abomasum fistulated cattle arranged in a double 3x3 latin square, in order to evaluate diets based on corn silage, tifton-85 bermudagrass hay and elephant-grass silage supplemented with 10% of soybean meal (in dry matter). Each experimental period had duration of 18 days, in which the 10 first days were destinated for animal adaptation to the diets, the next six days for determination of intake and apparent total and partial digestibilities of nutrients by collection of orts, abomasal digesta and faecal samples; in 17th day for determination of ruminal pH and samples collection of ruminal fluid before and 2, 4 and 8 hours after feeding for N-NH 3 concentration determination; and in the 18th day of each period for collection of ruminal content for isolation and microbial composition determination. The fecal excretion and the dry matter flow in the abomasum were determined by the utilization of indigestible NDF (INDF) as marker, being determined in samples of feeds, orts, faeces and abomasal digesta, and the microbial compounds flow in the abomasum was determined by utilization of purinas as microbial marker. For evaluation of INDF, IADF and chrome as markers of faecal excretion and apparent digestibility, the INDF and IADF were determined in vitro after 144 hours of incubation, having as reference the total collection, realized during three days in the last two periods. The data related to xvcorn and sorghum silage with different grains and steam+leaf/proportions were evaluated by regression analysis; the intake, total apparent and partial digestibilities of nutrients and microbial efficiency were evaluated by variance analysis; the data related to pH and ruminal N-NH 3 concentration were evaluated by split plot design, with time of sampling as subplot; the validation of preditions related to total carbohydrates ruminal degradation, total dry matter digestion, total and ruminal digestion of fiber carbohydrates and microbial nitrogen compounds flow in the abomasum obtained by estimatives from in vitro gas production technique was realized by regression of predicted values over the observed values. The estimative of the regression parameters β 0 and β 1 were tested for identifying if the estimatives were under or overestimated by analysis of simple linear regression. The comparation of markers was realized by regression analysis of predicted values over the observed values and by variance analysis using Dunnett test. The addition of grains in the corn silage increased linearly the total DM, CP and NFC and reduced the ash, NDF, ADF and lignin. The NPN and the B3 and C protein fractions of corn silage ranged from 34.04 to 54.62%, from 6.63 to 2.61 and from 7.83 to 1.32% of CP. The content of NFC and of B2 and C fractions of TC were linearly influenced by grains addition in the corn silage, that ranged from 153.55 to 585.10, from 489.57 to 203.29 and from 233.50 to 85.51g/kg of DM, respectively, for silage with zero and 60% of grains. The digestion rates of NFC and B2 fraction of TC were quadraticaly affected, presenting maximum values of 0.2723 and 0.02771 h -1 , for corn silage with 40.08 and 14.57% of grains, respectively. The total gas production, IVDMD and estimated TDN linearly increased in function of grains porcentage in the corn silage, that ranged from 20.03 to 28.47 mL, from 62.19 to 83.21% and from 56.08 to 81.40%, respectively. The addition of steam+leaf/head in the sorghum silage increased linearly the amounts of DM, CP, NFC, EE and lignin and reduced the ash and NDF. The NPN and B1+B2, B3 and C nitrogen fractions ranged from 9.19 to 21.24, from 67.63 to 75.98, from 3.85 to 6.09 and from 5.09 to 10.98% of total N. The contents of NFC increased linearly and of B 2 fraction of total carbohydrates reduced by addition of steam+leaf/head in sorghum silage, xvithat ranged from 208.18 to 564.07 and from 381.29 to zero g/kg of DM, respectively. The digestion rates of NFC and of B 2 fraction ranged from 0.1358 to 0.1563h- 1 and from 0.0247 to 0.0294 h- 1 . The total gas production was not affected by steam+leaf/head addition ranging from 23.09 to 25.26 mL, and the maximum IVDMD from 69.52% was obtained with 60.10% of steam+leaf/head. Even though he estimated TDN had increased linearly with the steam+leaf/head addition, considering the non alteration in total gas production and the quadratical behaviour for IVDMD, it can be infered that the utilization of these estimatives are not correct. In the in vivo experimentation, despite of the corn silage and tifton-85 bermudagrass hay diets had not presented differences for the dry matter intake, the first allowed higher intake of total digestive nutrients. The tifton-85 bermudagrass hay diet presented the highest NDF intake (4.52 kg/day), while corn silage diet resulted in the highest NFC intake (1.95 kg/day). The corn silage diet presented the highest total apparent digestibility of dry matter (66.3%), organic matter (68.9%), NDF (55.7%) and total carbohydrates (68.2%). The rumen was the main site of digestion of total carbohydrates and NDF for all diets. It was verified a inverse relationship between the total dry matter digestibility and the INDF intake, and therefore, it can be infered that this fraction may be utilized in the digestibility estimation of tropical grasses. The corn silage and tifton-85 bermudagrass hay diets provided the highest nitrogen compounds flow in the abomasum. The isolated rumen bacteria presented average of 8.89% of total N and 18.40 for the N-RNA:N-total relation. The corn silage diet provided the highest ruminal degradation of organic matter (2.96 kg/day) and total carbohydrate (3.07 kg/day) and the highest microbial mass flow in the abomasum (788.28 g/day). The tifton-85 bermudagrass hay and elephant- grass silage diets presented the highest microbial efficiency, with values of 28.10 and 30.39 g of microbial N/kg of rumen degraded carbohydrate. The corn silage diet provided the smallest N-NH 3 concentration and ruminal pH in function of time after feeding, possible affecting negatively the microbial efficiency. The corn silage and the elephant-grass silage presented the highest NPN proportions in the CP, the tifton-85 bermudagrass hay presented the highest NDSP proportion xviiand B3 fraction and the soybean meal the highest NDSP proportion. For the carbohydrate fractions, the corn silage and the soybean meal presented the largest NFC proportion, whose values were 37.05 and 75.75%, and the tifton-85 bermudagrass hay and the elephant-grass silage presented the highest content of B2 and C fractions, whose values were 51.20 and 51.70% and 41.77 and 33.56%, respectively. The digestion rates of NDSP and of B3 fraction of CP ranged from 0.0469 to 0.1512 h -1 for the soybean meal and elephant-grass silage and from 0.0081 to 0.0757 h -1 for the tifton-85 bermudagrass hay and elephant-grass silage, respectively. The estimated digestion rate of NFC and B2 fraction of TC ranged from 0.1294 to 0.1905 h -1 and from 0.0254 to 0.0300 h -1 for the tifton-85 bermudagrass hay and corn silage, respectively. The estimates were accurate in predition of ruminal digestion of total carbohydrates, total and ruminal digestion of fiber carbohydrates and microbial nitrogen flow in the abomasum. The total apparent dry matter digestion also was predicted accurately by difference between diet and faeces gas production. The fecal excretion and the apparent digestibility of dry matter were predicted accurately by chrome and INDF, however, with the IADF utilization, there was underestimation of digestibility and overestimation of faecal excretion for the tifton-85 bermudagrass hay diet.
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Doença neurológica em ruminantes associada ao consumo de bagaço de malte contaminado por Aspergillus clavatus

Bezerra Junior, Pedro Soares January 2008 (has links)
São descritos dois surtos de uma doença neurológica que afetou rebanhos bovinos de aptidão leiteira alimentados com bagaço de malte contaminado por Aspergillus clavatus, no município de Viamão, estado do Rio Grande do Sul. A morbidade foi semelhante em ambos os surtos (em torno de 30%). Em uma propriedade de 10 bovinos que consumiam o subproduto três adoeceram e morreram e na outra de 33 bovinos, 10 foram afetados e 5 desses morreram. A evolução clínica da doença variou de 5 a 64 dias. Dos animais que se recuperaram apenas um permaneceu com seqüelas locomotoras leves. Os sinais clínicos eram predominantemente locomotores e incluíam tremores musculares, hiperestesia e membros pélvicos com ataxia, paresia e paralisia progressivas e apoio sobre os boletos. Os distúrbios locomotores eram intensificados pelo exercício que em geral desencadeava quedas. Havia queda na produção leiteira, mas o apetite e dipsia foram mantidos até próximo da morte ou eutanásia. Cinco bovinos foram necropsiados e dois apresentaram lesões macroscópicas nos músculos esqueléticos, principalmente dos membros pélvicos e torácicos, que consistiam de áreas claras bilaterais e relativamente simétricas. Histologicamente, as lesões musculares se caracterizavam por miopatia degenerativo-necrótica segmentar, por vezes associada a mineralização, regeneração e fibrose. No sistema nervoso os principais achados microscópicos consistiam de degeneração e necrose neuronal cromatolítica em núcleos nervosos específicos no tronco encefálico, cornos ventrais da medula espinhal e gânglios espinhais, trigeminal, estrelado e celíaco. No tronco encefálico as lesões foram observadas nos núcleos vermelhos, formação reticular da ponte, motor dorsal do nervo vago e ambíguo. Em dois bovinos havia adicionalmente degeneração walleriana nos funículos dorsais da medula espinhal, nervos isquiádicos e fibulares. Através da lectina-histoquímica foi evidenciado acúmulo de glicoconjugados contendo oligossacarídeos N-ligados ricos em manose no pericário de neurônios cromatolíticos de bovinos. As lectinas Concanavalian ensiformis e Triticum vulgaris apresentaram as melhores marcações. A doença foi reproduzida experimentalmente em sete ovinos. A três destes foram administrados 40g/kg por dia do bagaço de malte utilizado nas propriedades onde ocorreram os surtos espontâneos em bovinos por períodos de 2, 3 ou 19 dias. Os primeiros sinais clínicos foram observados 51 a 147 horas após a primeira administração e a evolução clínica até o óbito ou eutanásia foi de aproximadamente 39 a 288 horas. A quatro ovinos foram administrados 12ml/kg por dia de cultura pura de A. clavatus por 4 ou 6 dias. Os primeiros sinais clínicos nesses ovinos foram observados 72 horas após a primeira administração e a evolução clínica foi de 37 a 96 horas. Os sinais clínicos foram semelhantes aos dos casos naturais, sendo proeminentes a hiperestesia, os tremores musculares e a taquipnéia. Nenhum dos sete ovinos apresentou lesões macroscópicas. A distribuição topográfica das lesões neuronais nos ovinos foi semelhante à dos bovinos. Porém, a tumefação neuronal e as alterações regressivas eram menos proeminentes nos ovinos. Três de sete ovinos apresentaram lesões musculares que foram leves e não associadas a processos regenerativos ou mineralização. / Two outbreaks of a neurological disease affecting herds of dairy cattle that were fed moldy beer residues contaminated with Aspergillus clavatus in the county of Viamão, Rio Grande do Sul, Brazil, are described. The morbidity of both outbreaks was of 30%. Among 10 bovines that had fed the beer by-product at one farm, three were affected and died. On another farm, among 33 bovines, 10 were affected and five died. The clinical evolution varied from 5 to 64 days. Only one of the animals that recovered from the disease remained with mild locomotor sequels. The clinical signs were predominantly locomotor and included muscle tremors, hyperesthesia and progressive posterior ataxia, paresis and paralysis with knuckling of fetlocks of the hind limbs. Gait abnormalities were more pronounced after exercises that in general led to falling down. There was also reduced milk production, but appetite and water intake were maintained until close to death or euthanasia. Five cattle were necropsied and two presented macroscopic lesions consisting of white areas with bilateral symmetric distribution mainly in pelvic and thoracic limbs muscles. Histologically muscular lesions were characterized by segmental degenerative-necrotic myopathy, sometimes associated with mineralization, regeneration and fibrosis. In the nervous system the main histological finding consisted of chromatolytic neuronal degeneration and necrosis in selected nuclei of the brain stem, the ventral horn of the spinal cord and spinal, trigeminal, stellate and celiac ganglions. In the brain stem lesions were observed in the red nuclei, reticular formation of the pons and dorsal motor of the vagus nerve and ambiguous nuclei. In two cattle there was Wallerian degeneration in dorsal funiculi of the spinal cord and ischiadic and fibular nerves. The lectin-histochemistry showed accumulation of glycoconjugates with N-linked high-manose oligosaccharides in the chromatolytic neuron perikaryon of bovines. Concanavalian ensiformis and Triticum vulgaris lectins showed the best staining. The disease was reproduced experimentally in seven sheep. Three sheep received 40g/kg/day of beer by-product originated from two farms where outbreaks of A. clavatus poisoning in cattle had occurred. The administration of by-product was carried on for two, three or 19 days. The first clinical signs in these sheep were observed after 51 to 147 hours of the first administration of by-product, and the clinical course lasted from 39 to 288 hours. Four sheep received 12 ml/kg/day of pure culture of the fungus for four or six days. In these sheep the first clinical signs were observed 72 hours after the first administration and the clinical evolution was of 37 to 96 hours. Clinical signs were similar to the natural cases, but hyperesthesia, muscle tremors and tachypnea were most prominent. There were no macroscopic lesions in sheep. The topographic distribution of the neuronal lesions in sheep and bovines was similar. However, the neuronal swelling and regressive alterations were less intensive. Three sheep presented mild muscle lesions.
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Variáveis clínica, parasitológica hematológica e bioquímica de caprinos e ovinos infectados naturalmente por nematóides gastrintestinais sob o mesmo sistema de produção

Cavele, Alfeu 12 July 2016 (has links)
Submitted by Emanoel Martins Filho (emanoelfilho@ufba.br) on 2016-07-11T12:56:30Z No. of bitstreams: 1 Alfeu Dissertacao.pdf: 478381 bytes, checksum: 83c0e1548ee1f84af5bfb31a0849646a (MD5) / Approved for entry into archive by Patricia Barroso (pbarroso@ufba.br) on 2016-07-13T01:16:39Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Alfeu Dissertacao.pdf: 478381 bytes, checksum: 83c0e1548ee1f84af5bfb31a0849646a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-13T01:16:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alfeu Dissertacao.pdf: 478381 bytes, checksum: 83c0e1548ee1f84af5bfb31a0849646a (MD5) / Programa de Demanda Social (CAPES) / Foram realizados dois estudos: No primeiro foi avaliado o método FAMACHA© em caprinos e ovinos, mantidos nas mesmas condições, no sertão do Estado da Bahia, Brasil. Foram selecionados 60 caprinos mestiços Anglo Nubiano e 60 ovinos mestiços (Santa Inês x Dorper), entre quatro e oito meses de idade, criados em sistema extensivo e mantidos nas mesmas pastagens. A cada semana durante três meses, Julho a Outubro, foi determinado o grau FAMACHA© e o escore corporal (EEC) e coletadas amostras de fezes e de sangue. A comparação de médias da contagem de ovos nas fezes (OPG) foi de 1991(116,3) nos caprinos e 596,2(104,4) em ovinos; do volume globular (VG) foi de 25,4% (0,38) nos caprinos e 31,5%(0,37) em ovinos; grau FAMACHA© 2,8(0,06) nos caprinos e 1,9(0,34) em ovinos; fibrinogênio plasmático nos caprinos 338,6 mg/dl(10,17) em ovinos 269,9 mg/dl8,62) e de larvas do gênero Haemonchus caprinos 41,1%(3,37) em ovinos 26,4%(4,3), estatisticamente diferente (P<0,05), entretanto o mesmo não foi observado com o valor da proteína plasmática e do percentual de larvas dos gêneros Trichostrongylus e Oesophagostomum. Na análise de todas as avaliações foi demonstrado que o grau 3 foi mais predominante nos caprinos e o grau 2 para os ovinos, com as percentual válido de 47,93 e 57,14, respectivamente. Na comparação entre a presença de anemia e o grau FAMACHA©, a especificidade foi alta e a sensibilidade baixa para ambas as espécies. O valor preditivo positivo foi baixo, porém o negativo foi alto, o que pode assegurar que animais com um resultado negativo no método FAMACHA© realmente não tenham anemia. No segundo experimento, realizado na mesma propriedade, utilizando a mesma base de dados foi feita a análise de agrupamento, utilizando grau FAMACHA©, OPG, e o VG sendo selecionadas 10 cabras com potencial para resistência (PR) e 10 com potencial para suscetibilidade (PS) aos nematóides, acompanhados quinzenalmente por mais 2 meses. Doze destes animais, seis do grupo PR e seis do grupo PS, foram abatidos para contagem e identificação dos xi helmintos gastrintestinais. Os caprinos pertencentes ao grupo PS apresentaram os maiores valores do grau FAMACHA©, do OPG, do percentual de L3 de Haemonchus,, Trichostrongylus e Oesophagostomum e da concentração de fibrinogênio, e os menores valores de VG e escore corporal, diferindo estatisticamente (P<0,05), enquanto a proteína total não diferiu estatisticamente. Na análise de todas as avaliações foi demonstrado que os graus 3 e 4 foi mais predominante nos animais PS, com as percentuais válidos de 45,5 e 30,5 respectivamente, e os graus 2 e 3 nos PR, com os respectivos percentuais válidos de 34,4% e 51,9. Observou-se também que 58,4% dos animais PS e 90,6% dos PR estão entre o grau FAMACHA© 1 e 3. O aumento do nível de infecção parasitária refletiu estatisticamente na diminuição dos valores médios do volume globular dos PS. O total de estádios jovens e adultos de nematóides obtidos dos caprinos PS foi 2660,41 contra 1669,34 dos PR. Apesar de não ser encontrado diferença estatística significativa entre as espécies de nematóides, o grau de infecção foi moderado para o H. contortus nos animais do grupo PS e leve nos PR, enquanto a infecção por T. colubriformes foi considerada pesada e moderada nos grupos PS e PR respectivamente, e para ambos os grupos a infecção por O. columbianum foi alta. A associação dessas técnicas é um modelo importante na abordagem das nematodeoses em caprinos em condições do semi-árido onde possibilitou monitorar a haemoncose em pequenos ruminantes criados no sertão baiano, auxiliando no controle das parasitoses. / Two studies were carried out: On the first study FAMACHA© system was evaluated in sheep and goats, kept under the same conditions, in Bahia state, Brazil. Sixty Anglo Nubiano mixed goats and sixty Santa Inês x Dorper cross breed sheep, four to eight months old age, raised at extensive farming system under the same pasture area were selected. FAMACHA© score, body condition, blood and faecal samples were collected every week during three months, from July to October. Mean faecal worm egg counts (FEC) comparisons were 1991(116.3) for goats and 596.2(104.4) for sheep; packed cell volume (PCV) were 25.4% (0.38) for goats and 31,5%(0.37) for sheep; FAMACHA© score 2.8(0.06) for goats and 1.9(0.34) for sheep; plasma fibrinogen in goats 338.6 mg/dl(10.17) and in sheep 269.9 mg/dl(8.62) and Haemonchus larvae in goat 41.1%(3.37) and in sheep 26.4%(4.3), were statistically different (P<0.05), that was not observed with plasmatic protein and Trichostrongylus and Oesophagostomum larvae percentages. FAMACHA© score 3 for goats and score 2 for sheep were the most predominant observation in overall analysis of all evaluations, with valid percentages of 47.93 and 57.14, respectively. Comparing presence of anemia and FAMACHA© score, specificity was high and sensibility was low, for both species. Positive predictive value was low, but negative value was high, assuring that animals with FAMACHA© negative results were not anemic. The second experiment, conducted at the same property, used the same database for groupment analysis, using FAMACHA© score, EPG and PCV. Ten goats with potential to resistance (PR) and 10 goats with potential to suscetibility (PS) to nematode infection were evaluated at 15 days intervals during 2 months. Twelve animals, six of the PR group and six of the PS group were killed for gastro-intestinal helminth counts and identification. Goats from PS group presented the highest FAMACHA© scores, EPG counts, Haemonchus, Trichostrongylus and Oesophagostomum L3 larvae percentages and plasma fibrinogen concentration, and the lowest PCV values and body condition scores, differing statistically (p<0.05), whereas total serum protein showed no statistical difference. Analysis of all evaluations showed xiii that scores 3 and 4 were the most predominant in animals PS with valid percentages of 45.4 and 30.5, respectively, and scores 2 and 3 in PR, with respective valid percentages of 34.4 and 51.9. Is was also observed that 58.4% of the PS animals and 90.6% of PR are between FAMACHA© score 1 and 3. Increase of the parasitic infection level was statistically related to mean PCV value reduction in PS. Total number of immature and adult nematodes were 2660.41 in PS goats against 1669.34 in PR. Although there was no statistically significant difference among nematode species, H. contortus infection degree was moderate in PS animals and slight in PR, whereas T. colubriformes infection was considered intense and moderate in groups PS and PR, respectively, and O. columbianum infection was intense in both groups. Association of these techniques is an important model to access nematodiosis in goats under semi-arid conditions. It was possible to evaluate haemonchosis in small ruminants raised in Bahia, and aid parasite control.
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Consumo, digestibilidade dos nutrientes, comportamento ingestivo e balanço de nitrogênio em cordeiros Santa Inês alimentados com resíduo de cervejaria desidratado / Intake, nutrient of digestibility, ingestion behavior and nitrogen balance in Santa Ines lambs fed with dehydrated brewery residue

Gonçalves, Ana Gláucia Carneiro Melo January 2017 (has links)
GONÇALVES, Ana Gláucia Carneiro Melo. Consumo, digestibilidade dos nutrientes, comportamento ingestivo e balanço de nitrogênio em cordeiros Santa Inês alimentados com resíduo de cervejaria desidratado. 2016. 55 f. Dissertação (Mestrado em Zootecnia)–Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Francisca Gomes (francisbeserra@yahoo.com.br) on 2017-09-14T14:00:53Z No. of bitstreams: 1 2016_dis_agcmgonçalves.pdf: 1570721 bytes, checksum: 63d6b26157a62dabaee10e51d6d3e7c8 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-09-22T17:58:10Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_dis_agcmgonçalves.pdf: 1570721 bytes, checksum: 63d6b26157a62dabaee10e51d6d3e7c8 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-22T17:58:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_dis_agcmgonçalves.pdf: 1570721 bytes, checksum: 63d6b26157a62dabaee10e51d6d3e7c8 (MD5) Previous issue date: 2017 / This study was accomplished with the objective to investigate the intake, apparent digestibility of nutrients, feeding behavior and nitrogen balance in Santa Ines lambs fed rations containing dehydrated brewery residue (BDG). Thirty-five male lambs non-castrated with average initial weight of 16.00 ± 1.69 kg, and, approximately, 70 days of age were used. Were adopted a completely randomized design with five treatments and seven replications, consisting the treatments to 0; 20; 40; 60 to 80% of inclusion of BDG in the concentrate portion of the ration. The duration of the experiment was determined by the time required for the mean body weight of the animals of the treatment reached 28 kg, at which all the experimental animals were slaughtered. The intake of dry matter (DM) in g day-1, % PC and g kg0.75 showed decreasing linear effect (P<0.05). The same behavior was observed for consumption of organic matter (OM), mineral matter (MM), crude protein (CP), total carbohydrates (TC) and total digestible nutrients (TDN), expressed in g day-1. However, the intake of neutral detergent fiber (NDF) increased linearly (P <0.05) with the addition of the BDG, when expressed in % PC and g kg-0.75. The apparent digestibility of ether extract (EE), NDF, acid detergent fiber (ADF) showed linear increase (P<0.05). For the variables related to feeding behavior, feed efficiency (g DM h-1), rumination efficiency (gDM h-1 and gNDF h-1) and entertainment showed decreasing linear effect (P<0.05 ), while the rumination time, total chewing time and number of chews presented increasing linear effect on higher levels of BDG in the feed. It was observed linear effect (P<0.05) for N intake, N and fecal N basal endogenous, however the observed decrease did not affect the nitrogen balance (P>0.05). The brewery waste inclusion levels dehydrated in confinement in sheep rations promote reduced consumption and low coefficients of apparent digestibility of nutrients, as well as reduction in power efficiencies and rumination, however, RCD inclusions are not enough to compromise the nitrogen balance. However, adding up to 20% of the combined potion may be recommended depending on the feasibility of acquisition / Este estudo foi realizado com o objetivo de avaliar o consumo, a digestibilidade aparente dos nutrientes, o comportamento ingestivo e o balanço de nitrogênio em cordeiros Santa Inês alimentados com rações contendo resíduo de cervejaria desidratado (RCD). Foram utilizados 35 cordeiros, machos, não-castrados, com peso médio inicial de 16,00 ± 1,69 kg e, aproximadamente 70 dias de idade. Adotou-se o delineamento inteiramente casualizado, com cinco tratamentos e sete repetições, consistindo os tratamentos em: 0; 20; 40; 60 e 80% de inclusão de RCD na porção concentrada da ração. A duração do experimento foi determinada pelo tempo necessário para que a média de peso corporal dos animais de um dos tratamentos atingisse 28 kg, ocasião em que todos os animais experimentais foram abatidos. O consumo de matéria seca (MS), expresso em g dia-1, % PC e g kg0,75 apresentou efeito linear decrescente (P<0,05). O mesmo comportamento foi observado para o consumo de matéria orgânica (MO), matéria mineral (MM), proteína bruta (PB), carboidratos totais (CHOT) e nutrientes digestíveis totais (NDT), expressos em g dia-1. Contudo, a ingestão de fibra em detergente neutro (FDN) aumentou linearmente (P<0,05) com a adição do RCD, quando expressa em % PC e g kg-0,75. A digestibilidade aparente da MS, MO e CHOT apresentou efeito quadrático (P<0,05), com menor valor para digestibilidade da MS com a inclusão de 42,5% do subproduto na ração. A digestibilidade aparente do extrato etéreo (EE), da FDN e fibra em detergente ácido (FDA) apresentou efeito linear crescente (P<0,05). Para as variáveis relacionadas ao comportamento ingestivo, a eficiência de alimentação (g MS h-1), eficiência de ruminação (gMS h-1 e gFDN h-1) e ócio apresentaram efeito linear decrescente (P<0,05), enquanto o tempo de ruminação, tempo de mastigação total e número de mastigações merícicas por dia apresentaram efeito linear crescentes (P<0,05) a medida que o RCD foi adicionado à ração. Foi observado efeito linear decrescente (P<0,05) para o N consumido, N fecal e N endógeno basal, entretanto o decréscimo constatado não influenciou o balanço de nitrogênio (BN) (P>0,05), expresso em g dia-1. Os níveis de inclusão de resíduo de cervejaria desidratado nas rações de ovinos em confinamento promovem redução no consumo e baixos coeficientes de digestibilidade aparente dos nutrientes, como também redução nas eficiências de alimentação e ruminação, entretanto, as inclusões do RCD não são suficientes para comprometer o balanço de nitrogênio. Contudo, a adição em até 20% da porção concentrada pode ser recomendada a depender da viabilidade de aquisição.
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Análise comparativa dos benefícios fiscais para exportação de rações de nutrição animal para países da América do Sul / Comparative analysis of tax benefits for export of animal nutrition feeds for coutries of South America

Silva, Gilmar Lucio da 13 August 2018 (has links)
Submitted by GILMAR LUCIO DA SILVA (gilmar.silva@hotmail.com) on 2018-09-10T13:31:34Z No. of bitstreams: 1 REPOSITÓRIO_Dissertacao_Gilmar_Lucio_da_Silva.pdf: 580764 bytes, checksum: f73c4b2bee64967855e266087f894fa5 (MD5) / Rejected by Neli Silvia Pereira null (nelisps@fcav.unesp.br), reason: Solicitamos que verifique normas de publicação da pós graduação para capa e página de rosto e que faça o depósito novamente, observando as normas do tutorial em relação ao título e palavras-chave. Agradecemos a compreensão. on 2018-09-11T13:15:47Z (GMT) / Submitted by GILMAR LUCIO DA SILVA (gilmar.silva@hotmail.com) on 2018-09-18T14:32:06Z No. of bitstreams: 1 REPOSITÓRIO_Dissertacao_Gilmar_Lucio_da_Silva.pdf: 580764 bytes, checksum: f73c4b2bee64967855e266087f894fa5 (MD5) / Approved for entry into archive by Neli Silvia Pereira null (nelisps@fcav.unesp.br) on 2018-09-19T16:36:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 silva_gl_me_jabo.pdf: 580764 bytes, checksum: f73c4b2bee64967855e266087f894fa5 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-09-19T16:36:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 silva_gl_me_jabo.pdf: 580764 bytes, checksum: f73c4b2bee64967855e266087f894fa5 (MD5) Previous issue date: 2018-08-13 / Esta pesquisa tem como objetivo informar as empresas como poderão aumentar seus lucros usando o benefício fiscal que melhor se adapta a sua realidade, comparando os benefícios fiscais brasileiros para exportação de ração animal. Especificamente, analisando as condutas fiscais nacionais existentes para exportação de ração animal para os diversos países latino-americanos; demonstrando custos atuais no mercado nacional, possibilidades de incentivos na importação com objetivo de exportação, produção nacional e seus incentivos à exportação e analisando a viabilidade da importação de matérias-primas que fazem parte do produto final, produção em território brasileiro e exportação de rações prontas. Pesquisa desenvolvida levando em consideração o seguinte encadeamento: a) levantamento teórico do tema; b) entendimento dos benefícios fiscais vigentes; c) análise quantitativa dos impostos usando os incentivos fiscais Compra Equiparada, Reintegra e Drawback; d) análise comparativa destes benefícios; e, e) análise SWOT das organizações do setor de Nutrição Animal no Brasil. Comparando os benefícios fiscais oferecidos pelo Governo e divulgando-os, as empresas interessadas tomarão a decisão de que qual destes benefícios, melhor que se encaixa em seu perfil. De posse desta informação, o empresário a utilizará como ferramenta para redução de custos, alavancando suas exportações. Alavancando as exportações, aumenta-se a entrada de divisas no país, haverá um aumento de investimentos internos. Os benefícios fiscais escolhidos têm suas particularidades e não podem ser comparados de igual para igual, pois cada um tem suas características sendo estas detalhadas nesta pesquisa. Mediante comparativo foi possível determinar a melhor opção por perfil de empresa e determinadas as limitações envolvendo os benefícios. Trata-se de um projeto com objetivo de informar e ajudar as empresas que tem interesse em exportar a alavancarem suas vendas utilizando o benefício fiscal que melhor se encaixar em seu perfil. / This study has to do with how their companies better their savings using the economic fiscal that best fits their reality, comparing the Brazilian tax benefits to the export of animal feed. Specifically, analyzing the existing national fiscal conduct for the export of animal feed to the various Latin American countries; demonstrating current costs in the domestic market, import incentives for export purposes, domestic production and export incentives, and analyzing the feasibility of importing raw materials that are part of the final product, production in Brazil and export of ready-made rations reintegration, ruminants. This research is being conducted in conjunction with the following chain: a) theoretical theme survey; b) understanding of the tax benefits in force; c) the quantitative analysis of resources using the incentives under the use of a purchasing capacity, Reintegra and Drawback; d) comparative analysis of the benefits e) SWOT analysis of organizations of the Animal Nutrition sector in Brazil. Comparing the benefits provided by the Government and informing them, as the companies that make the decision, they are best in terms of placement in your profile. With this information, the entrepreneur uses tools to reduce costs, leveraging his exports. By leveraging exports, the country's foreign exchange inflows increase; there will be an increase in domestic investment. The choose benefits are specific and cannot be compared as equals because they are responsible for their characteristics and are highlights of this research. By comparative for an option for a profile of company and determined the collections the benefits. It´s a project with the goal of informing and helping companies that are interested in exporting the expenses with the tax benefit that best fits your profile
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Doença neurológica em ruminantes associada ao consumo de bagaço de malte contaminado por Aspergillus clavatus

Bezerra Junior, Pedro Soares January 2008 (has links)
São descritos dois surtos de uma doença neurológica que afetou rebanhos bovinos de aptidão leiteira alimentados com bagaço de malte contaminado por Aspergillus clavatus, no município de Viamão, estado do Rio Grande do Sul. A morbidade foi semelhante em ambos os surtos (em torno de 30%). Em uma propriedade de 10 bovinos que consumiam o subproduto três adoeceram e morreram e na outra de 33 bovinos, 10 foram afetados e 5 desses morreram. A evolução clínica da doença variou de 5 a 64 dias. Dos animais que se recuperaram apenas um permaneceu com seqüelas locomotoras leves. Os sinais clínicos eram predominantemente locomotores e incluíam tremores musculares, hiperestesia e membros pélvicos com ataxia, paresia e paralisia progressivas e apoio sobre os boletos. Os distúrbios locomotores eram intensificados pelo exercício que em geral desencadeava quedas. Havia queda na produção leiteira, mas o apetite e dipsia foram mantidos até próximo da morte ou eutanásia. Cinco bovinos foram necropsiados e dois apresentaram lesões macroscópicas nos músculos esqueléticos, principalmente dos membros pélvicos e torácicos, que consistiam de áreas claras bilaterais e relativamente simétricas. Histologicamente, as lesões musculares se caracterizavam por miopatia degenerativo-necrótica segmentar, por vezes associada a mineralização, regeneração e fibrose. No sistema nervoso os principais achados microscópicos consistiam de degeneração e necrose neuronal cromatolítica em núcleos nervosos específicos no tronco encefálico, cornos ventrais da medula espinhal e gânglios espinhais, trigeminal, estrelado e celíaco. No tronco encefálico as lesões foram observadas nos núcleos vermelhos, formação reticular da ponte, motor dorsal do nervo vago e ambíguo. Em dois bovinos havia adicionalmente degeneração walleriana nos funículos dorsais da medula espinhal, nervos isquiádicos e fibulares. Através da lectina-histoquímica foi evidenciado acúmulo de glicoconjugados contendo oligossacarídeos N-ligados ricos em manose no pericário de neurônios cromatolíticos de bovinos. As lectinas Concanavalian ensiformis e Triticum vulgaris apresentaram as melhores marcações. A doença foi reproduzida experimentalmente em sete ovinos. A três destes foram administrados 40g/kg por dia do bagaço de malte utilizado nas propriedades onde ocorreram os surtos espontâneos em bovinos por períodos de 2, 3 ou 19 dias. Os primeiros sinais clínicos foram observados 51 a 147 horas após a primeira administração e a evolução clínica até o óbito ou eutanásia foi de aproximadamente 39 a 288 horas. A quatro ovinos foram administrados 12ml/kg por dia de cultura pura de A. clavatus por 4 ou 6 dias. Os primeiros sinais clínicos nesses ovinos foram observados 72 horas após a primeira administração e a evolução clínica foi de 37 a 96 horas. Os sinais clínicos foram semelhantes aos dos casos naturais, sendo proeminentes a hiperestesia, os tremores musculares e a taquipnéia. Nenhum dos sete ovinos apresentou lesões macroscópicas. A distribuição topográfica das lesões neuronais nos ovinos foi semelhante à dos bovinos. Porém, a tumefação neuronal e as alterações regressivas eram menos proeminentes nos ovinos. Três de sete ovinos apresentaram lesões musculares que foram leves e não associadas a processos regenerativos ou mineralização. / Two outbreaks of a neurological disease affecting herds of dairy cattle that were fed moldy beer residues contaminated with Aspergillus clavatus in the county of Viamão, Rio Grande do Sul, Brazil, are described. The morbidity of both outbreaks was of 30%. Among 10 bovines that had fed the beer by-product at one farm, three were affected and died. On another farm, among 33 bovines, 10 were affected and five died. The clinical evolution varied from 5 to 64 days. Only one of the animals that recovered from the disease remained with mild locomotor sequels. The clinical signs were predominantly locomotor and included muscle tremors, hyperesthesia and progressive posterior ataxia, paresis and paralysis with knuckling of fetlocks of the hind limbs. Gait abnormalities were more pronounced after exercises that in general led to falling down. There was also reduced milk production, but appetite and water intake were maintained until close to death or euthanasia. Five cattle were necropsied and two presented macroscopic lesions consisting of white areas with bilateral symmetric distribution mainly in pelvic and thoracic limbs muscles. Histologically muscular lesions were characterized by segmental degenerative-necrotic myopathy, sometimes associated with mineralization, regeneration and fibrosis. In the nervous system the main histological finding consisted of chromatolytic neuronal degeneration and necrosis in selected nuclei of the brain stem, the ventral horn of the spinal cord and spinal, trigeminal, stellate and celiac ganglions. In the brain stem lesions were observed in the red nuclei, reticular formation of the pons and dorsal motor of the vagus nerve and ambiguous nuclei. In two cattle there was Wallerian degeneration in dorsal funiculi of the spinal cord and ischiadic and fibular nerves. The lectin-histochemistry showed accumulation of glycoconjugates with N-linked high-manose oligosaccharides in the chromatolytic neuron perikaryon of bovines. Concanavalian ensiformis and Triticum vulgaris lectins showed the best staining. The disease was reproduced experimentally in seven sheep. Three sheep received 40g/kg/day of beer by-product originated from two farms where outbreaks of A. clavatus poisoning in cattle had occurred. The administration of by-product was carried on for two, three or 19 days. The first clinical signs in these sheep were observed after 51 to 147 hours of the first administration of by-product, and the clinical course lasted from 39 to 288 hours. Four sheep received 12 ml/kg/day of pure culture of the fungus for four or six days. In these sheep the first clinical signs were observed 72 hours after the first administration and the clinical evolution was of 37 to 96 hours. Clinical signs were similar to the natural cases, but hyperesthesia, muscle tremors and tachypnea were most prominent. There were no macroscopic lesions in sheep. The topographic distribution of the neuronal lesions in sheep and bovines was similar. However, the neuronal swelling and regressive alterations were less intensive. Three sheep presented mild muscle lesions.
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Genômica comparativa e predição de peptídeos antimicrobianos em genomas de Streptococcus isolados do rúmen bovino / Comparative genomics and prediction of antimicrobial peptides in Streptococcus genomes isolated from the bovine rumen

Oliveira, Isabela Maria Fernandes 26 June 2017 (has links)
Submitted by MARCOS LEANDRO TEIXEIRA DE OLIVEIRA (marcosteixeira@ufv.br) on 2018-08-23T11:41:13Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1357280 bytes, checksum: d84ea26fc09b10e0e096ba1387bdb81e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-23T11:41:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1357280 bytes, checksum: d84ea26fc09b10e0e096ba1387bdb81e (MD5) Previous issue date: 2017-06-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O ecossistema ruminal é composto por uma alta diversidade de microrganismos que desepenham papel fundamental na nutrição e saúde do hospedeiro. Estudos recentes tem sugerido que o rúmen representa uma fonte promissora de novos peptídeos antimicrobianos e resultados anteriores demonstraram que os peptídeos produzidos por algumas linhagens de Streptococcus possuem características úteis para o controle de patógenos. Neste trabalho, o objetivo foi isolar, caracterizar e sequenciar o genoma de bactérias produtoras de peptídeos antimicrobianos obtidas do rúmen de bovinos Nelore alimentados com forrageiras tropicais. Cinco isolados foram selecionados e identificados como Streptococcus lutetiensis. Após a anotação dos genomas foram utilizadas ferramentas computacionais para mineração de clusters de biossíntese de bacteriocinas para identificação e comparação de sequências de peptídeos antimicrobianos. Além disso, foi realizada uma análise comparativa com genomas de Streptococcus isolados de humanos, para avaliar diferenças quanto aos requerimentos nutricionais e potencial patogênico dessas espécies. Nas análises usando bancos de dados de acesso livre, os cinco genomas de Streptococcus apresentaram clusters putativos de biossíntesse de bacteriocinas da classe II e apenas o S. lutetienses 59 apresentou um cluster associado com a biossíntese de lantibióticos (classe I). Em análises complementares usando a ferramenta protótipo AMPLY, foi observado um padrão de sequências homólogas a pre-peptídeos mais diverso do que o observado para peptídeos maduros, modificados pós traducionalmente. Nas análises comparativas dos cinco genomas ruminais com os genomas de Streptococcus gallolyticus subsp. gallolyticus ATCC 43143, Streptococcus pyogenes M1 GAS e Streptococcus pasteurianus ATCC 43144, foi observado que os genomas dos Streptococcus isolados de humanos apresentavam vias metabólicas mais completas para a utilização de carboidratos, o que não ocorreu para as vias de biossíntese de vitaminas e metabolismo de nitrogênio, nos quais os isolados do rúmen apresentaram mais genes associados com essas vias do anabolismo. Fatores de virulência foram identificados em todas as espécies analisadas, porém as espécies clínicas apresentaram maior quantidade e diversidade de genes relacionados com o fenótipo de patogenicidade, com destaque para S. pyogenes. Os resultados demonstraram que todos os isolados de Streptococcus do rúmen são potenciais produtores de AMPs e indicaram que linhagens do complexo Streptococcus bovis/equinus representam uma fonte promissora de bacteriocinas das classes I e II. / The ruminal ecosystem is composed of a high diversity of microorganisms that play a fundamental role in the nutrition and health of the host. Recent studies have suggested that the rumen also represents a promising source of new antimicrobial peptides and preliminary work demonstrated that the peptides produced by some strains of Streptococcus have useful characteristics for the control of pathogens. In this work, the objective was to isolate, characterise and sequence the genome of antimicrobial peptide- producing bacteria obtained from the rumen of Nelore cattle fed with tropical forages. Five isolates were selected and identified as S. lutetiensis. After the annotation of the genomes, computational tools were used to mine gene clusters probably associated with the biosynthesis of bacteriocins aiming to identify and compare new sequences of antimicrobial peptides. In addition, a comparative genomic analysis was carried out to evaluate the nutritional requirements and pathogenic potential of other Streptococcus isolated from humans. The five genomes of Streptococcus presented clusters involved in the biosynthesis of class II bacteriocins and only S. lutetienses 59 presented a cluster involved in the biosynthesis of lantibiotics (class I). Complementary analyses using the AMPLY prototype tool, allowed the identification of sequences that were homologous to prepeptides showing greater diversity than that observed for mature, posttranslationally modified peptides. In the comparative analyses of the five ruminal genomes with Streptococcus gallolyticus subsp. gallolyticus ATCC 43143, Streptococcus pyogenes M1 GAS and Streptococcus pasteurianus ATCC 43144, it was observed that the genomes from human isolates presented more complete metabolic pathways for carbohydrate metabolism, which was not observed for the pathways of vitamin biosynthesis and nitrogen metabolism, in which the rumen isolates presented more complete pathways. Virulence factors were identified in all species analysed, but the clinical species presented a greater quantity and diversity of genes related to the phenotype of pathogenicity, especially S. pyogenes. The results demonstrated that ruminal Streptococcus are potential producers of AMPs and indicated that strains of the Streptococcus bovis/equinus complex represent a promising source of class I and II bacteriocins.
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Utilização do ionóforo monensina sódica na alimentação de ruminantes / Use of the ionophore monensin in the feeding of ruminants

Oliveira, Marcus Vinicius Morais de 26 March 2003 (has links)
Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-11T16:23:48Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 386652 bytes, checksum: 4f433c7edc0d7c2c9a12cb89e318f6bc (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-11T16:23:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 386652 bytes, checksum: 4f433c7edc0d7c2c9a12cb89e318f6bc (MD5) Previous issue date: 2003-03-26 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Este trabalho objetivou avaliar os efeitos da inclusão de monensina sódica na dieta de ruminantes, e desse modo verificar as alterações no consumo de alimentos, na fermentação ruminal e, conseqüentemente, nos produtos gerados, na digestibilidade, na retenção de nitrogênio, nos parâmetros sanguíneos e no desempenho de animais. Para isso, foram realizados três experimentos. O primeiro, utilizando quatro novilhos holandeses fistulados ruminalmente e alimentados com dietas contendo baixo (11,4%) e alto teor protéico (16,5%), à base de feno de capim-braquiária (Brachiaria decumbens), visou quantificar as alterações no consumo e na fermentação ruminal. Nesse ensaio, as dietas com alto teor protéico promoveram aumento da concentração do ácido butírico e da amônia ruminal. A inclusão de monensina, independente do teor protéico das dietas, promoveu diminuição no consumo de alimentos, elevação do ácido propiônico, e redução do ácido butírico, da relação acetato:propionato e da atividade específica de produção de amônia (AEPA). Quando associada à dieta com baixo teor protéico a monensina também reduziu a concentração do ácido acético e promoveu elevação do pH e da síntese de proteína microbiana ruminal. A concentração de amônia ruminal não foi afetada significativamente com a monensina. O segundo experimento, utilizando 25 carneiros mantidos em gaiolas de metabolismo, avaliou a digestibilidade dessas dietas; visando, desse modo, complementar as informações obtidas com os bovinos. Neste experimento, o nível de proteína influenciou significativamente os consumos de proteína bruta (PB), extrato etéreo (EE) e carboidratos totais (CHOT), havendo maior consumo de proteína na dieta com alto teor protéico e maior consumo de lipídios e carboidratos na dieta com baixo teor protéico. O nível de proteína não influenciou a digestibilidade, com exceção da PB e EE que foram maiores para os animais que consumiram dietas com alto e baixo teor protéico, respectivamente. As dietas com monensina promoveram uma diminuição significativa nos consumos de matéria seca (MS), matéria orgânica (MO), PB, EE, CHOT, fibra em detergente neutro (FDN) e nutrientes digestíveis totais (NDT), não sendo, no entanto, verificadas alterações na digestibilidade. A monensina reduziu a perda de nitrogênio pelas fezes; todavia, a maior retenção de nitrogênio ocorreu nos animais que não receberam monensina. A dieta contendo feno de capim- braquiária puro foi menos consumida, apresentou menor digestibilidade e balanço de nitrogênio negativo. Um terceiro experimento foi realizado com o intuito de verificar a influência de níveis de monensina (0, 14, 28 e 42 mg/kg de MS consumida) no crescimento de 28 novilhas leiteiras, alimentadas com dietas contendo 32,84% de concentrado e 67,16% de silagem de milho e cana-de-açúcar, na proporção de 1:1, na MS. Neste ensaio foram também avaliadas as modificações na fermentação ruminal, através de coletas de líquido ruminal às 0 e 2 horas após a alimentação, via sonda esofágica, a digestibilidade e alguns parâmetros sanguíneos. A adição de monensina promoveu uma elevação do custo das dietas, porém os diferentes níveis de monensina não influenciaram significativamente o consumo, o ganho de peso médio diário (GMD), a conversão alimentar (CA) e as alturas de cernelha e de garupa. Antes da alimentação (zero hora), a monensina não influenciou o pH ruminal e nem a concentração de amônia e dos ácidos acético, propiônico e butírico, havendo redução na relação acetato:propionato. Às duas horas, verificou-se redução no pH e na relação acetato:propionato, e aumento na concentração de ácido propiônico. Os estudos de contrastes, onde se comparou o tratamento sem e com monensina, revelaram que ocorreu diminuição da concentração de amônia antes da alimentação. Não foram verificadas mudanças significativas nas concentrações de glicose e uréia sangüínea e de uréia urinária. A monensina também não influenciou os consumos de MS, MO, PB, EE, CHOT e FDN. As digestibilidades da MS, EE e CHOT, e a perda de nitrogênio urinário apresentaram respostas quadráticas. / This work aimed to evaluate the effects of the inclusion of monensin in the diet of ruminant, and thus to verify the alterations in the feed intake, in the ruminal fermentation and, consequently, in the generated products, in the digestibility, in the retention of nitrogen, in the blood parameters and in the performance of animals. For that, three experiments were accomplished. In the first experiment, it was used four rumen fistulated Holstein steers, fed diets containing low (11.4%) and high (16.5%) crude protein content, based on brachiaria hay (Brachiaria decumbens), seeking to quantify the alterations in the intake and in the ruminal fermentation. In this experiment, the diets with high crude protein content promoted increases in ruminal concentration of butyric acid and ammonia. The monensin inclusion, independent of crude protein content of the diets, promoted decrease in feed intake, elevation of the propionic acid; and reductions of butyric acid, acetate:propionate ratio and specific activity of ammonia production (S.A.A.P.). When associated with the diet with low crude protein content, monensin also reduced the concentration of acetic acid and promoted elevation of ruminal pH and microbial protein synthesis. The concentration of ruminal ammonia was not affected significantly by monensin. The second experiment, using 25 rams maintained in metabolism cages, allowed to evaluate the apparent digestibility of those diets, seeking complementary information obtained with the steers. In this experiment, ixthe protein level influenced significantly the intakes of crude protein (CP), ethereal extract (EE) and total carbohydrates (TC), having larger intake of protein in the high CP diet and larger intakes of lipids and carbohydrates in the diet with low crude protein diet. The protein level did not influence the digestibility, except for CP and EE that were larger for the animals that consumed diets with high and low protein content, respectively. The diets with monensin promoted a significant decrease in the intakes of dry matter (DM), organic matter (OM), CP, EE, TC, neutral detergent fiber (NDF) and total digestible nutrients (TDN), not being, however, verified alterations in the digestibility. The monensin reduced the loss of nitrogen in the feces; though, the largest retention of nitrogen happened in the animals that did not receive monensin. The diet containing only brachiaria hay was less eaten, presented smaller digestibility and negative nitrogen balance. A third experiment was accomplished with the intention of verifying the influence of monensin levels (0, 14, 28 and 42 mg/kg of DM intake) in the growth of 28 Holstein heifers fed with diets containing 32.84% of concentrate and 67.16% of corn silage and sugarcane, in the proportion of 1:1 in DM. In this experiment, it was also appraised the modifications in the ruminal fermentation through collections of ruminal fluid at 0 and 2 hours after feeding, by esophageal sounding, digestibility and some blood parameters. The monensin addition promoted an elevation of the cost of the diets, however the different monensin levels did not influence significantly the intake, average daily gain (ADG), feed:gain ratio and the withers and croup heights. Before the feeding (zero hour), monensin did not influence the ruminal pH and the concentration of ammonia and acetic, propionic and butyric acids, but there was reduction in the acetate:propionate ratio. At the 2 hours, there was reduction in the pH and in the acetate:propionate ratio, and increase in the concentration of propionic acid. The studies of contrasts, in which was compared the treatment without versus with monensin, revealed that there was decrease of the concentration of ammonia 0 hour after feeding. There were no effects on glucose and blood urea concentrations and urinary urea. Monensin did not also influence the intakes of DM, OM, CP, EE, TC and NDF. The digestibilities of DM, EE and TC, and the loss of urinary nitrogen presented quadratic effects.
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Efeito de ácido láurico sobre a fermentação ruminal, população de protozoários no rúmen e desempenho de vacas leiteiras / Effects of lauric acid on fermentation patterns, ruminal protozoa, and performance of dairy cows

Faciola, Antonio Pinheiro 23 August 2004 (has links)
Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-12T16:55:18Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 908325 bytes, checksum: 0b0e6b826ab7db363e25bea85aa5b369 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-12T16:55:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 908325 bytes, checksum: 0b0e6b826ab7db363e25bea85aa5b369 (MD5) Previous issue date: 2004-08-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os protozoários ruminais exercem efeito negativo sobre a utilização de proteína em ruminantes, reduzindo a proteína de origem microbiana sintetizada no rúmen e a PNDR, que são as principais fontes da AA para os ruminantes. Dessa forma, os objetivos deste trabalho foram: (1) Avaliar a viabilidade do uso do Ácido Láurico (C12:0) como um defaunador de rotina e (2) avaliar os efeitos da defaunação parcial do rúmen sobre a fermentação ruminal e o desempenho de vacas leiteiras. No primeiro experimento, seis vacas da raça Holandesa (sendo uma seca), com media de 660 (SD 46) kg de PV; 3,5 (SD 1) partos; 102 (SD 23) dias de lactação e 40,4 (SD 6,2) kg/leite/dia; canuladas no rúmen foram divididas com base nos dias em lactação em 2 grupos de três, em um delineamento inteiramente casualisado. Os tratamentos foram: 1) Controle, 2) 160 g/d de AL e 3) 160 g/d de laurato de sódio. Ambos AL e LANa foram infundidos em dose única via canula ruminal diariamente antes da alimentação. A ração total continha (na base da MS): 15% de silagem de alfafa, 40% de silagem de milho, 30% de silagem de milho úmido, 14% de farelo de soja, 1% de premix de vit. e minerais, tendo a dieta total, 16,6% PB e 29% FDN. No Segundo experimento, 32 vacas da raça Holandesa multíparas (8 canuladas no rúmen) com média de 633 (SD 52) kg de PV; 152 (SD 72) dias em lactação; 2,6 (SD 1) partos e 43,1 (SD 11) kg/leite/dia e 20 vacas da raça Holandesa primíparas com media de 566 (SD 39) kg de PV; 123 (SD 42) dias em lactação e 40,5 (SD 2,6) kg/leite/dia foram divididas com base nos dias em lactação em grupos de 4, formando 8 blocos de multíparas (2 com vacas canuladas) e 5 blocos de primíparas em um delineamento interamente casualisado. Antes do início dos tratamentos, todas os animais foram alimentados com a mesma dieta (controle) por 2 semanas em um período de co-variância, onde a produção de leite e a contagem de protozoários foram determinadas para utilização nas análises estatísticas. Os animais dentro dos blocos foram então aleatóriamente distribuídos em um dos quatro tratamentos, onde foram alimentadas por 8 semanas. As quatro dietas experimentais foram semelhantes, onde parte do milho moído foi substituído por um premix constituído de 8% de AL e 92% de milho moído. O premix com AL foi adicionado nas proporções de 0; 4,05; 8,11 e 12,16% na base da MS da dieta (0, 80, 160 e 240g/LA/d). Todos os animais foram injetados com bST a cada 14 dias. Os dados foram analisados usando o procedimento Proc Mixed do programa estatístico SAS. Ambos AL e LANa apresentaram efeito altamente inibitórios aos protozoários ruminais quando dosados em 160 g/d via canula ruminal, reduzindo a população de protozoários em 90%. AL reduziu a concentração de amônia ruminal em 60% sem reduzir o CMS. Ambos agentes reduziram a concentração de aminoácidos livres no rúmen. AL não afetou o pH ruminal, nem reduziu a concentração total de AGV no rúmen. Nas condições do primeiro experimento, AL se mostrou um potente agente dafaunador, evitando a necessidade de utilizar LANa que é mais caro. AL fornecido na dieta em níveis de 80, 160 e 240 g/d não reduziu o CMS, não afetou o pH ruminal, os parâmetros fermentativos no rúmen e a produção de leite. AL misturado na dieta total de vacas da raça Holandesa, em níveis de 160 e 240 g/d reduziu a população de protozoários ruminais em apenas 25 e 30%, respectivamente, mostrando que estes níveis de AL na dieta não foram suficientes para permitir atingir uma concentração no rúmen que fosse suficiente para promover os efeitos defaunadores do AL. / Ruminal ciliate protozoa have a negative effect on protein utilization in ruminants by reducing both microbial protein and RUP flow out of the rumen. The aims of this study were: (1) To evaluate lauric acid as a practical defaunating agent, (2) to assess the effects of partial defaunation on fermentation patterns and milk production in dairy cows. In the first trial, six multiparous Holstein cows (one dry), averaging 660 (SD 46) kg of BW, parity 3.5 (SD 1), 102 (SD 23) DIM, and 40.4 (SD 6.2) kg/d of milk; fitted with ruminal cannulae were blocked into groups of 3 by DIM to give 2 blocks in a trial of randomized complete block design. The treatments were: 1) Control, 2) 160g/d of LA, or 3) 160g/d of sodium laurate. Both LA and NaLA were given in a single dose into the rumen via cannulae before feeding. The TMR contained (DM basis): 15% alfalfa silage, 40% corn silage, 30% rolled high moisture corn, 14% soybean meal, 1% Vit. & Min. premix, 16.6% CP and 29% NDF. In the second trial, thirty-two multiparous Holstein cows (8 with ruminal cannulae) averaging parity 2.6 (SD 1), 633 (SD 52) kg of xvBW, 152 (SD 72) DIM, and 43.1 (SD 11) kg milk/d, and twenty primiparous Holstein cows averaging 566 (SD 39) kg of BW, 123 (SD 42) DIM, and 40.5 (SD 2.6) kg milk/d were blocked into groups of 4 by DIM to give 8 multiparous blocks (2 cows with ruminal cannulae) and 5 primiparous blocks in a trial of randomized complete block design. Prior to starting the experimental phase of the trial, all cows were fed the same diet (control) for a 2-wk covariate period and production of milk and protozoal counts were determined for use in statistical analysis. Cows within blocks of 4 were then randomly assigned to one of the 4 diets and fed only that diet during the remaining 8 weeks of the study. The four experimental diets were similar, except that some of the finely ground dry corn was replaced with finely ground dry corn plus lauric acid (8% LA and 92% corn, DM basis) in stepwise increments from 0 to 12.16% of dietary DM. All cows were injected biweekly with bST. Data were analyzed using the Proc Mixed procedure of SAS. Both lauric acid and sodium laurate showed high anti-protozoal activity when dosed at 160 g/d via ruminal canulae, reducing the ciliate population within the rumen by 90%. Lauric acid reduced ruminal ammonia concentration by 60% without reducing DMI. Both agents reduced ruminal free amino acid concentration. Lauric acid did not affect ruminal pH, nor reduce total ruminal VFA concentration. Under the condition of the first trial, Lauric Acid was shown to be a potent defaunation agent, obviating the need to use Na-laurate, which is more costly. Lauric acid fed on the diets at 80, 160, and 240 g/d did not reduce DMI, did not affect ruminal pH, ruminal parameters, or milk production. Lauric acid fed at 160 and 240 g/d on the TMR of Holstein's dairy cows reduced ruminal protozoal population by only 25 and 30% respectively, showing that these levels on the diet were not sufficient to achieve a concentration within the rumen that promote the anti-protozoal effect of lauric acid.
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Influência das lactonas macrocíclicas utilizadas em bovinos no desenvolvimento de microrganismos e decomposição das fezes

Morello, Amábile França January 2018 (has links)
Orientador: Ricardo Velludo Gomes de Soutello Soutello / Resumo: Os parasitos influenciam de maneira significativa a bovinocultura no Brasil, sendo a aplicação de endectocidas da família das lactonas macrocíclicas umas das formas mais utilizadas para o controle, porém podem proporcionar contaminação ao ambiente, visto que sua eliminação é principalmente via fezes e urina. Com isto, este trabalho objetivou verificar o desenvolvimento de microrganismos edáficos e a decomposição das fezes de bovinos ao longo do tempo após o tratamento com diferentes lactonas macrocíclicas. Foram avaliadas as fezes de doze animais, divididos em quatro grupos homogêneos, sendo o G1- controle (sem a administração de endectocida), G2-Ivermectina 1%, G3-Ivermectina 3,15% e G4- Moxidectina 1%. As colheitas das fezes dos animais foram realizadas nos dias 0, 7, 14, 21, 28,42 e 56 pós tratamento, e submetidas a três ambientes de decomposição, sendo ambiente controlado (BOD), Natural (NAT): exposto as condições climáticas naturais e enterradas no solo (Solo). Nos dias das cada colheitas e 112 dias após cada colheita, foi realizada a avaliação matéria orgânica. As avaliações da microbiota das fezes foram realizadas nos dias das colheitas e 7 após cada colheita. Observou-se que as ivermectinas em suas duas concentrações (1 e 3,15%) interferiram no desenvolvimento da população microbiana, já a moxidectina 1% não alterou a dinâmica populacional das bactérias, que também não foi influenciada pelo ambiente exposto em nenhum dos tratamento. A decomposição não foi afetada pela... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

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