Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / Neste trabalho procurou-se compreender o conceito heideggeriano de história do ser com o fim de podermos acompanhar o filósofo na sua leitura da história da filosofia. Essa leitura passa por outro conceito fundamental também aqui investigado: o acontecimento apropriador. Munidos de ambos os conceitos, podemos avançar na leitura da história da filosofia empreendida por Heidegger de modo a ver com maior clareza as modulações do conceito de verdade apresentadas por ele. Detivemo-nos na modulação da verdade do pensamento moderno que é, ainda, a sob a qual vivemos. De acordo com a leitura heideggeriana da história, precisamos compreender o acontecimento apropriador que nos abre o mundo para nos situarmos e não repetirmos velhas fórmulas metafísicas, e, sim, pormo-nos na preparação do outro início. / This work has as task the comprehension of the heideggerian concept of history of Being in order to follow the philosopher in his interpretation of the history of philosophy. Such an interpretation takes into consideration another concept which we investigate here as well: enowning. With both concepts we can keep track of Heideggers interpretation of the history of philosophy so that we can see clearly the truth changes throughout history which he shows. We focused on the modernity truth change under which we still live. According to the heideggerian interpretation of history we need to comprehend the enowing that opens the world for us to be able to locate ourselves and for us not to repeat old metaphysic formulae and, then, prepare ourselves for the other beginning.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A pesquisa investiga o texto profético de Isaías 65.17-25 por meio da análise semiótica discursiva aplicada à exegese bíblica para mostrar como a salvação é imaginada e concebida nesse anúncio. Basicamente, procura observar como o texto caracteriza o sujeito, o tempo e o espaço da salvação. O que se verifica é que a salvação descrita no texto reflete uma integração do ser humano com Deus, com seu meio de vida e ambiente, e reflete uma fusão de realidade cósmica e local. A partir da identificação do texto como um anúncio de salvação por meio da análise do gênero literário, a análise do texto procura contribuir com a reflexão teológica sobre o conceito de salvação do movimento da Missão Integral no contexto da teologia evangélica protestante da América Latina. O primeiro capítulo examina a história da interpretação desse texto desde o uso pelos autores do Novo Testamento até os desenvolvimentos recentes da exegese bíblica. O segundo capítulo investiga as diversas problemáticas em torno da busca do sentido nas ciências hermenêuticas, linguísticas e exegéticas, e apresenta o referencial teórico e a metodologia para a análise do texto. Seguindo o critério semiótico discursivo o texto é analisado primeiramente no seu plano de expressão, no capítulo três, e em seguida no seu plano de conteúdo, no capítulo quatro. / This thesis examines the prophetic text of Isaiah 65.17-25 through a semiotic discursive analysis applied to biblical exegesis to demonstrate how this text characterizes the persons, time and space of salvation. It is shown that the salvation described in the text reflect the integration of the human being with God, with the social and life contexts, and it reflects the unity of the local and the cosmic realities. From the identification by form criticism of the literary unit as an oracle of salvation, this analysis seeks to contribute to the theological reflection of the concept of salvation of the Integral Mission movement in the context of the protestant evangelical theology of Latin America. The first chapter examines the history of interpretation of the text, starting with its use by the New Testament writers to the recent developments of biblical exegesis. The second chapter investigates several issues concerning the search for meaning in the hermeneutics, linguistics and exegetical studies. It also presents the theoretical and methodological references for the analysis. Following a semiotic discursive criteria for the analysis of a text, chapter three analyzes the expression of the text and, chapter four, the content.

Submitted by Lucienne Costa (lucienneferreira@ufcg.edu.br) on 2018-05-08T21:22:53Z No. of bitstreams: 1 TALITA ROSA MÍSTICA SOARES DE OLIVEIRA – DISSERTAÇÃO (PPGH) 2017.pdf: 2310890 bytes, checksum: 28b9255ba63697aae08e44a161550d62 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-08T21:22:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 TALITA ROSA MÍSTICA SOARES DE OLIVEIRA – DISSERTAÇÃO (PPGH) 2017.pdf: 2310890 bytes, checksum: 28b9255ba63697aae08e44a161550d62 (MD5) Previous issue date: 2017-06 / Capes / Este trabalho analisa as diferentes estratégias pedagógicas realizadas no Clube de Desbravadores, departamento da igreja Adventista do Sétimo Dia, voltado para o ensino e entretenimento de crianças e adolescentes. Considerando o Clube de Desbravadores enquanto uma apropriação do clube de escoteiros e de sua ideologia que, coadunava com o contexto de modernização e higienização social do século XX, problematizamos como tais ideais foram ressiginificados dando origem a esta instituição. Analisamos como os métodos de regramento do corpo, exercidos por esta entidade, são utilizados enquanto mecanismos para formar uma geração de fiéis fortes e saudáveis, diferenciando-os da sociedade secular que, em sua visão, se apresenta cada vez mais doente, fraca e decadente. Portanto, entendemos a criação do clube de desbravadores enquanto uma recepção feita pela igreja adventista dos escritos de Ellen White, que em sua narrativa escatológica associa a história do fim do mundo à necessidade de uma preparação, por parte do cristão, para resistir física e espiritualmente às perseguições dos últimos tempos. Assim, a figura do desbravador caracteriza-se enquanto uma representação do adventista por excelência, modelo que reúne os principais símbolos culturais adventistas, colaborando para a consolidação da identidade deste grupo religioso. / This work analyses the different pedagogical strategies conducted in the Pathfinders Club, a departament from the Seventh-day Adventist Church, focused on teaching and entertainment of children and teenagers. Considering the club of Pathfinders as an appropriation of the club of scouts and their ideology, which suits with the context of modernisation and social hygiene of the 20th century, we discuss as such ideals were remeant by giving rise to this institution. We analyze how the rules of the body, established by this entity, are used as mechanisms to form a generation of strong and healthy believers, differentiating them from the secular society that, in their vision, are increasingly sick, weak and decadent. Therefore, we understand the creation of the Pathfinder Club as a reception by the Adventist Church of Ellen White's writing, which in her eschatological narrative, associates the history of the end of the world to the necessity of a preparation, by the Christian, to resist physical and spiritually the persecutions of the recent times. As a result, the figure of the Pathfinder is characterized as an Adventist representation of excellence, a model that brings up the main Adventist cultural symbols, collaborating with the consolidation of the identity of this religious group.

Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / Fundação Carlos Chagas Filho de Amparo a Pesquisa do Estado do Rio de Janeiro / Neste trabalho procurou-se compreender o conceito heideggeriano de história do ser com o fim de podermos acompanhar o filósofo na sua leitura da história da filosofia. Essa leitura passa por outro conceito fundamental também aqui investigado: o acontecimento apropriador. Munidos de ambos os conceitos, podemos avançar na leitura da história da filosofia empreendida por Heidegger de modo a ver com maior clareza as modulações do conceito de verdade apresentadas por ele. Detivemo-nos na modulação da verdade do pensamento moderno que é, ainda, a sob a qual vivemos. De acordo com a leitura heideggeriana da história, precisamos compreender o acontecimento apropriador que nos abre o mundo para nos situarmos e não repetirmos velhas fórmulas metafísicas, e, sim, pormo-nos na preparação do outro início. / This work has as task the comprehension of the heideggerian concept of history of Being in order to follow the philosopher in his interpretation of the history of philosophy. Such an interpretation takes into consideration another concept which we investigate here as well: enowning. With both concepts we can keep track of Heideggers interpretation of the history of philosophy so that we can see clearly the truth changes throughout history which he shows. We focused on the modernity truth change under which we still live. According to the heideggerian interpretation of history we need to comprehend the enowing that opens the world for us to be able to locate ourselves and for us not to repeat old metaphysic formulae and, then, prepare ourselves for the other beginning.

Made available in DSpace on 2016-04-29T14:27:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ivany Dantas Pimentel.pdf: 623770 bytes, checksum: 916aa559472354dec90a569b9e9dcb10 (MD5) Previous issue date: 2011-02-22 / The aim of this work is to show the life and the achievements of Jesus from Nazareth within the historical context of the society of his time, as a real person who assumes the human condition to insert the principles of the coming kingdom in the society, forging with his words and actions a new kind of existence based on brotherhood, solidarity, justice and, love. According to the synoptic tradition, Jesus has come to establish the kingdom of God not as a landlord of men over men, but as a landlord of service, a good news for the poor people who are the recipients of this kingdom. The idea of the kingdom of God, which is present in the beliefs of the people of Israel since its origins, becomes the center of Jesus activities and teachings, as described in the Gospels. Its approach permeates distinct periods of the History, nevertheless the rescue of its centrality will occur only after the Vatican Council II within the emergence of the liberation theology. In this period, the contributions of Latin American theologians stood out, mainly those of Jon Sobrino. The Liberation Theology aims the society´s commitment with a social transformation of the reality, based on the belief that it is possible to have a world where there is a place for everyone and the human dignity is preserved. The struggle for a fair world (without oppression and servitude) is a sign of the coming of the kingdom. In this sense, Jesus, the ultimate mediator of the Kingdom of God, brings within his message the offer of salvation to all humanity in all its dimensions. Jesus frees the mankind from the negative situations of ignorance, sin, suffering and death / Este trabalho tem como objetivo mostrar a vida e a atuação de Jesus de Nazaré no contexto histórico da sociedade de seu tempo, como um personagem real que assume a condição de criatura para introduzir nela os princípios do reino que se aproxima, forjando com seu exemplo e sua palavra um novo tipo de existência que se firma na fraternidade, na solidariedade, na justiça e no amor. Segundo a tradição sinótica, Jesus veio estabelecer o reino de Deus não como o senhorio de homens sobre homens, mas senhorio de serviço, uma boa notícia para os pobres que são os destinatários do reino. A idéia do reino de Deus, que faz parte das convicções do povo de Israel desde as suas origens, torna-se o centro da atuação e dos ensinamentos de Jesus narrados nos Evangelhos. Sua abordagem permeia os diferentes períodos da história, mas o resgate de sua centralidade ocorrerá somente após o Concílio Vaticano II com o surgimento da teologia da libertação. Nesse período, destacam-se as contribuições de teólogos latino-americanos, em especial as de Jon Sobrino. A Teologia da Libertação busca na sociedade o compromisso com a transformação social da realidade mediante a crença de que é possível a existência de um mundo onde há lugar para todos e a dignidade humana seja preservada. A luta por um mundo justo sem opressão nem servidão é um sinal da vinda do reino. Neste sentido Jesus, mediador definitivo do Reino de Deus traz em sua mensagem a oferta de salvação para toda a humanidade em todas as suas dimensões, libertando-a das situações negativas de ignorância, de pecado, de sofrimento e de morte

Made available in DSpace on 2016-04-29T14:27:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Francisco Valter Lopes.pdf: 1319873 bytes, checksum: f0a158caba2557f3448964de0c7c9677 (MD5) Previous issue date: 2011-12-13 / The painful and violent death suffered by Jesus was consequence of his prophetic acts, his religious doctrines opposed to the Temple role and to Moses‟ Law and the announcement of the Kingdom. The significance of Jesus of Nazareth‟s death can not be apart from his existence and his mission as Son of God. Jesus of Nazareth surrenders to the Father on behalf of his brothers/sisters and for the reason that will provide them with abundant life. The expression died for us‟ demonstrates that the meaning of Jesus‟ death is understood as a solidary act provided to humanity. This continuous act of Jesus has dictated all his mission, realized in the name of God Father and his Spirit, revealed in his message. His death must be understood as an act of fraternal solidarity, while at the same time, of liberation, for such was a symmetric event with his own life. Jesus has taken to the cross the weight of our sins. In this way of revelation from God, we see his suffering and death not as a failure of a human project, on the contrary, as the Son of God‟s passion which brings salvation. The meaning of Jesus‟s death does not reveal us a cruel God, demanding from his Son an endless sacrifice in order to redeem humanity from its sins and bring it to a free, fulfilling life and in that sense saved. The reflection about the meaning of the death of Jesus of Nazareth implies the perception of the lack of goodness in reality and the desire to correct the human injustices which bring death and lead to the cross. Therefore, Jesus‟ death gives us the possibility to assume our human condition with a glimmer of hope. We have in his death, which wasn‟t for himself, but for us, the strength to preserve the meaning of our existence and to support our encouragement for the reality of the Kingdom, inaugurated by us and definitely sealed with the death on the cross for us and for our salvation / A morte dolorosa e violenta que Jesus sofreu foi consequência de sua atuação profética, sua concepção religiosa oposta ao papel do Templo e à Lei de Moisés e seu anúncio do Reino. O sentido da morte de Jesus de Nazaré não pode ser desligado de sua existência e de sua missão enquanto Filho de Deus. Jesus de Nazaré se entrega ao Pai por seus irmãos e por uma causa que lhes proporcionará vida abundante. A expressão morreu por nós‟ explicita que o sentido da morte de Jesus é compreendido como ato solidário prestado à humanidade. Esse ato contínuo de Jesus determinou toda a sua missão realizada em nome de Deus-Pai e do seu Espírito, revelado em sua mensagem. Sua morte deve ser entendida como ato de solidariedade filial e, ao mesmo tempo, de libertação na medida em que foi acontecimento simétrico com a sua vida. Jesus levou para a cruz o peso dos nossos pecados. Nessa forma de revelação de Deus, compreendemos seu sofrimento e morte não como fracasso de um projeto humano, mas, ao contrário, como paixão do Filho de Deus que gera salvação. O sentido da morte de Jesus não nos revela um Deus cruel que exige algo de infinito ao seu Filho para redimir a humanidade do seu pecado e conduzi-la para uma vida em liberdade, vida plena e, nesse sentido, salva. A reflexão sobre o sentido da morte de Jesus de Nazaré suscita a percepção da ausência do bem na realidade e o desejo de corrigir as injustiças humanas que geram a morte e levam à cruz. Assim, a morte de Jesus nos dá a possibilidade de assumir a nossa condição humana com um fio de esperança. Temos na morte de Jesus, que não foi por si, mas por nós, a força que conserva o sentido de nossa existência e ampara a capacidade de ânimo pela realidade do Reino, inaugurado por nós e selado definitivamente na morte de cruz por nós e para nossa salvação

Made available in DSpace on 2016-04-25T19:20:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Roberto Serafim Simoes.pdf: 691125 bytes, checksum: 32092ba2fd7a7ff334cb6f6c7aca90fd (MD5) Previous issue date: 2015-09-14 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The ancient yoga period emerges amid a stratified Indian society and influenced by religions like samkhya and the Brahmanical Hinduism if systematizing it as an orthodox Hindu darśana through ancient scripture Yoga Sutras (IS) some centuries before the Christian era. The IS explains both the causes of human suffering and the promise of a good yogi life, based on the behavioral theory of klesas (attachment, aversion, fear of death, pride and ignorance) as adverse spiritual evolution. An eightfold path or asthanga yoga (AI) is built-from it as the yogic proposal for salvation of the soul. The AI aims, through ethical conduct, practices corporal rituals and mystical experience of samadhi mitigate klesas seeking union with God/Isvara. On average Indian age, between X-XV centuries AD, this system of yogic beliefs is the Tantric religiosity, Jain and Buddhist raising the body's value over the other doctrinal aspects of IS. The modern phase of yoga, however, is being erected under the influence of a new social - religious context . Currently, more than Brahmins and swamis , yoga seeks its legitimacy as spiritual path under the aegis of scientific rationality and new religious movements in the West . In this process , the yoga reframes its mystical language circulating among ashrams and Indian forests of ancient and medieval times to an audience facing the stressful challenges of living in large Western cities, above all, a society of consumption, secular and privatized religiously. It is known that nowadays the yoga reframes its metaphysical physiology in the light of biomedical science , I suspect that the theory of klesas , may be going through a religious reform as well. In order to understand these possible soteriological transformation of the current yoga, I led 13 semi-structured interviews with ten way yogis and three Brazilian scientists psychobiological area investigating the yogic system acts as therapy and healing. The data revealed a cleavage perception in the modern yoga, between belonging to a therapeutic New Age or more a Western biomedical technique. From this juncture new beliefs emerged to legitimize the discourse yoga against the socialreligious situation in which it now lives. More than just symbolic reframing, modern yogic soteriology is passed today by a salvific transformation process. The main changes that stood out are: 1) the elevation of design stress level of klesa or spiritual obstacle; and 2) the relaxation antagonistic to stress-klesa, achievement mystical nature of samadhi; and 3) consequently, salvation/liberation of klesas-stress acquire substance "empirical" an unchanging spiritual state of no stress or a kind of "divine homeostasis." It is concluded that scientific rationality rather than promote religious yoga disenchantment, it legitimizes it as a new system of beliefs and produces new goods of salvation (stress-klesa, relaxation-samadhi and homeostasis-kaivalya) . The association of the health benefits of yoga practices defended and propagated by biomedical physiology associated with the restlessness of the western urban centers , may have weakened the behavioral theory of klesas as essential cause of human suffering / O período antigo do ioga emerge em meio a uma sociedade indiana estratificada e influenciado por religiões como o samkhya e o hinduísmo bramânico, sistematizando-se como um dársana ortodoxo hinduísta por meio da escritura antiga Ioga Sutras (IS) alguns séculos antes de era cristã. O IS explica tanto as causas do sofrimento humano quanto a promessa de uma boa vida iogue, baseando-se na teoria comportamental dos klesas (apego, aversão, medo da morte, orgulho e ignorância) como nefastos a evolução espiritual. Um caminho óctuplo ou asthanga ioga (AI) edifica-se a partir dele como a proposta ioguica de salvação da alma. O AI visa, por meio de condutas éticas, práticas rituais corporais e a experiência mística do samadhi atenuar os klesas em busca da união com deus/Isvara. Na idade média indiano, entre os séculos X-XV d.C., esse sistema de crenças ioguico encontra a religiosidade tântrica, jainista e budista elevando o valor do corpo em detrimento a outros aspectos doutrinais do IS. A fase moderna do ioga, no entanto, está sendo erigida por influência de um novo contexto social-religioso. Atualmente, muito mais do que brâmanes e swamis, o ioga busca a sua legitimidade como caminho espiritual sob a égide da racionalidade científica e de novos movimentos religiosos do ocidente. Nesse processo, o ioga ressignifica a sua linguagem mística que circulava entre os ashrams e florestas indianos dos tempos antigo e medieval, para um público que enfrenta os desafios estressantes de se viver nos grandes centros urbanos ocidentais, sobretudo, uma sociedade do consumo, secular e privatizada religiosamente. Sabe-se que nos tempos atuais o ioga ressignifica a sua fisiologia metafísica à luz da ciência biomédica, desconfio que a teoria dos klesas, pode estar passando por uma reforma religiosa também. Para buscar compreender essas possíveis transformações soteriológicas do ioga atual, saí a campo e conduzi de forma semiestruturada entrevistas com dez iogues e três cientistas brasileiros da área psicobiológica que investigam o sistema de atos ioguicos como terapia e cura. Os dados revelaram uma percepção de clivagem no ioga moderno, entre pertencer a uma terapêutica Nova Era ou mais uma técnica biomédica ocidental. A partir dessa conjuntura novas crenças despontaram para legitimar o discurso do ioga frente ao panorama social-religioso em que ele vive atualmente. Mais do que simples ressignificação simbólica, a soteriologia ioguica moderna está passado hoje por um processo de transformação soteriológica. As principais transformações que se destacaram, estão: 1) na elevação da concepção de estresse ao nível de klesa ou obstáculo espiritual; e 2) o relaxamento, antagônico ao estresse-klesa, conquista natureza mística do samadhi; e 3) por consequência, a salvação/libertação dos klesasestresse adquiri substância empírica de um estado espiritual imutável de não-estresse ou de uma espécie de homeostase divina . Conclui-se que a racionalidade científica ao invés de promover o desencantamento religioso do ioga, legitima-o como um novo sistema de crenças e produz novos bens de salvação (estresse-klesa, relaxamento-samadhi e homeostasekaivalya). A associação dos benefícios para a saúde das práticas do ioga defendidos e propalados pela fisiologia biomédica associado ao desassossego dos centros urbanos ocidentais, pode ter enfraquecido a teoria comportamental dos klesas como causa essencial do sofrimento humano

O Schistosoma mansoni, parasita responsável pela esquistossomose (barriga dágua), doença que afeta cerca de 300 milhões de pessoas em todo mundo, não possui a via de síntese de purinas, dependendo integralmente da via de salvação de purinas para seu suprimento dessas bases. Uma vez que a terapia se resume a administração de um único fármaco, o praziquantel, diversos casos de resistência do parasita a esse medicamento foram reportadas, sendo assim esta via tem sido citada como alvo potencial para o desenvolvimento de novos fármacos contra a doença. As enzimas adenosina kinase (AK), hipoxantina-guanina fosforibosiltransferase (HGPRT), adenilsuccinato liase (ADSL) e adenilsuccinato sintetase (ADSS) são enzimas chave desta via. Este trabalho faz parte de um projeto maior que visa a obtenção de todas as estruturas das enzimas envolvidas na via de salvação de purinas de Schistosoma mansoni. O cDNA correspondente às enzimas foi amplificado e clonado no vetor de expressão pOPIN; as enzimas AK isoforma 1, HGPRT isoforma 1 e ADSL foram expressas em E. coli Lemo21(DE3) e HGPRT isoforma 3 em E. coli B834(DE3); purificadas em coluna de cobalto agarose por afinidade, concentradas e cristalizadas no kit de cristalização Morpheus (Molecular Dimensions) no Oxford Protein Production Facility (OPPF) em Harwell UK. As coletas de dados por difração de raio-X foram realizadas no Síncrotron Diamond Light Source (DLS) - UK. Foram coletadas duas estruturas de ADSL, a 2.36Å de resolução em complexo com AMP e 2.14Å na forma Apo. A análise das estruturas revelou uma estrutura tetramérica bastante conservada entre as ADSLs, sendo este estado de oligomerização requerido, uma vez que resíduos de três das quatro subunidades compõem o sítio ativo. Apesar do sítio ativo ser altamente conservado entre SmADSL e ADSL humana, a interface dimérica dessas enzimas tem se apresentado suficientemente distintas, o que pode representar um potencial alvo para o desenvolvimento de um inibidor. O ensaio de atividade enzimática de ADSL revelou uma reação endotérmica, indicando que a contribuição da entropia relacionada a grande quantidade de moléculas de água presentes no sítio ativo é importante para a reação cinética. Após diversos experimentos de otimização dos cristais de HGPRT1 e aproximadamente 200 cristais testados, foi obtida uma estrutura em complexo com IMP a 2.8Å de resolução. A análise da estrutura revelou uma estrutura tetramérica. Apesar das subunidades não compartilharem o sítio ativo, este estado de oligomerização é requerido, uma vez que resíduos que compõem o sítio ativo também estão envolvidos em interações na interface dimérica, orientando o resíduo invariável Arg206 na direção do sítio ativo. Foram identificadas quatro mutações na região do sítio ativo entre SmHGPRT e HGPRT humana: Ile149Met, Pro176Arg, Val189Ile e Arg192Lys. Desta forma, a obtenção das estruturas contribui para o entendimento bioquímico desta via essencial para o parasita e de como este pode ser seletivamente privado de recursos. / Schistosoma mansoni is the parasite responsible for schistosomiasis, disease that affects about 300 million people worldwide, and does not have the purine de novo pathway, depending entirely on the purine salvage pathway to supply its demands on purines. Currently, both direct treatment and most disease control initiatives, rely on chemotherapy using a single drug, praziquantel. Concerns over the possibility of resistance developing to praziquantel, has stimulated efforts to develop new drugs for the treatment of schistosomiasis. The purine salvage pathway has been reported as a potential target for developing new drugs against schistosomiasis. Adenosine kinase (AK), hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase (HGPRT), adenylosuccinate lyase (ADSL), adenylosuccinate synthetase (ADSS) are key enzymes in this pathway. This work is part of a larger project aimed at obtaining all the structures of enzymes involved in purine salvage pathway of Schistosoma mansoni. The cDNA corresponding to the enzymes was amplified and cloned in vector pOPIN, AK isoform 1, HGPRT isoform 1 and ADSL were expressed in E. coli Lemo 21 (DE3) and HGPRT isoform 3 in E. coli B834(DE3); purified in cobalt agarose column, concentrated and crystallized in several conditions of the Morpheus (Molecular Dimensions) crystallization kit at the Oxford Protein Production Facility (OPPF) in Harwell UK. The data collection by xray diffraction were performed at Diamond Light Source UK. Two ADSL structures were obtained, ADSL in complex with AMP at 2.36Å resolution and ADSL Apo form at 2.14Å The analysis revealed a tetrameric structure highly conserved between ADSLs, and this oligomerization state is required since residues three of the four subunits comprise the active site. Despite the active site being highly conserved between human ADSL and SmADSL, the dimeric interface of these enzymes it has been shown sufficiently distinct, which may represent a potential target for the development of an inhibitor. The ADSL enzymatic activity assay showed an endothermic reaction, indicating the contribution of the entropy related to the large quantity of water molecules present in the active site is important for the reaction kinetics. After several optimization experiments of HGPRT1 crystals and about 200 crystals tested was obtained a structure in complex with IMP at 2.8Å resolution. The structure analysis revealed a tetrameric structure. Despite the subunits do not share the active site, this oligomerization state is required, since residues that make up the active site are also involved in interactions in dimeric interface, guiding the invariable residue Arg206 toward the active site. Four mutations were identified in the region of the active site between SmHGPRT and human HGPRT: Ile149Met, Pro176Arg, Val189Ile e Arg192Lys. These structures increase the important structural information available about the Schistosoma mansoni purine salvage pathway and how it can be selectively private resources.

O Schistosoma mansoni, parasita responsável pela esquistossomose (barriga dágua), doença que afeta cerca de 300 milhões de pessoas em todo mundo, não possui a via de síntese de purinas, dependendo integralmente da via de salvação de purinas para seu suprimento dessas bases. Uma vez que a terapia se resume a administração de um único fármaco, o praziquantel, diversos casos de resistência do parasita a esse medicamento foram reportadas, sendo assim esta via tem sido citada como alvo potencial para o desenvolvimento de novos fármacos contra a doença. As enzimas adenosina kinase (AK), hipoxantina-guanina fosforibosiltransferase (HGPRT), adenilsuccinato liase (ADSL) e adenilsuccinato sintetase (ADSS) são enzimas chave desta via. Este trabalho faz parte de um projeto maior que visa a obtenção de todas as estruturas das enzimas envolvidas na via de salvação de purinas de Schistosoma mansoni. O cDNA correspondente às enzimas foi amplificado e clonado no vetor de expressão pOPIN; as enzimas AK isoforma 1, HGPRT isoforma 1 e ADSL foram expressas em E. coli Lemo21(DE3) e HGPRT isoforma 3 em E. coli B834(DE3); purificadas em coluna de cobalto agarose por afinidade, concentradas e cristalizadas no kit de cristalização Morpheus (Molecular Dimensions) no Oxford Protein Production Facility (OPPF) em Harwell UK. As coletas de dados por difração de raio-X foram realizadas no Síncrotron Diamond Light Source (DLS) - UK. Foram coletadas duas estruturas de ADSL, a 2.36Å de resolução em complexo com AMP e 2.14Å na forma Apo. A análise das estruturas revelou uma estrutura tetramérica bastante conservada entre as ADSLs, sendo este estado de oligomerização requerido, uma vez que resíduos de três das quatro subunidades compõem o sítio ativo. Apesar do sítio ativo ser altamente conservado entre SmADSL e ADSL humana, a interface dimérica dessas enzimas tem se apresentado suficientemente distintas, o que pode representar um potencial alvo para o desenvolvimento de um inibidor. O ensaio de atividade enzimática de ADSL revelou uma reação endotérmica, indicando que a contribuição da entropia relacionada a grande quantidade de moléculas de água presentes no sítio ativo é importante para a reação cinética. Após diversos experimentos de otimização dos cristais de HGPRT1 e aproximadamente 200 cristais testados, foi obtida uma estrutura em complexo com IMP a 2.8Å de resolução. A análise da estrutura revelou uma estrutura tetramérica. Apesar das subunidades não compartilharem o sítio ativo, este estado de oligomerização é requerido, uma vez que resíduos que compõem o sítio ativo também estão envolvidos em interações na interface dimérica, orientando o resíduo invariável Arg206 na direção do sítio ativo. Foram identificadas quatro mutações na região do sítio ativo entre SmHGPRT e HGPRT humana: Ile149Met, Pro176Arg, Val189Ile e Arg192Lys. Desta forma, a obtenção das estruturas contribui para o entendimento bioquímico desta via essencial para o parasita e de como este pode ser seletivamente privado de recursos. / Schistosoma mansoni is the parasite responsible for schistosomiasis, disease that affects about 300 million people worldwide, and does not have the purine de novo pathway, depending entirely on the purine salvage pathway to supply its demands on purines. Currently, both direct treatment and most disease control initiatives, rely on chemotherapy using a single drug, praziquantel. Concerns over the possibility of resistance developing to praziquantel, has stimulated efforts to develop new drugs for the treatment of schistosomiasis. The purine salvage pathway has been reported as a potential target for developing new drugs against schistosomiasis. Adenosine kinase (AK), hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase (HGPRT), adenylosuccinate lyase (ADSL), adenylosuccinate synthetase (ADSS) are key enzymes in this pathway. This work is part of a larger project aimed at obtaining all the structures of enzymes involved in purine salvage pathway of Schistosoma mansoni. The cDNA corresponding to the enzymes was amplified and cloned in vector pOPIN, AK isoform 1, HGPRT isoform 1 and ADSL were expressed in E. coli Lemo 21 (DE3) and HGPRT isoform 3 in E. coli B834(DE3); purified in cobalt agarose column, concentrated and crystallized in several conditions of the Morpheus (Molecular Dimensions) crystallization kit at the Oxford Protein Production Facility (OPPF) in Harwell UK. The data collection by xray diffraction were performed at Diamond Light Source UK. Two ADSL structures were obtained, ADSL in complex with AMP at 2.36Å resolution and ADSL Apo form at 2.14Å The analysis revealed a tetrameric structure highly conserved between ADSLs, and this oligomerization state is required since residues three of the four subunits comprise the active site. Despite the active site being highly conserved between human ADSL and SmADSL, the dimeric interface of these enzymes it has been shown sufficiently distinct, which may represent a potential target for the development of an inhibitor. The ADSL enzymatic activity assay showed an endothermic reaction, indicating the contribution of the entropy related to the large quantity of water molecules present in the active site is important for the reaction kinetics. After several optimization experiments of HGPRT1 crystals and about 200 crystals tested was obtained a structure in complex with IMP at 2.8Å resolution. The structure analysis revealed a tetrameric structure. Despite the subunits do not share the active site, this oligomerization state is required, since residues that make up the active site are also involved in interactions in dimeric interface, guiding the invariable residue Arg206 toward the active site. Four mutations were identified in the region of the active site between SmHGPRT and human HGPRT: Ile149Met, Pro176Arg, Val189Ile e Arg192Lys. These structures increase the important structural information available about the Schistosoma mansoni purine salvage pathway and how it can be selectively private resources.

Made available in DSpace on 2016-08-03T12:19:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 SUEHELLEN MONTEIRO DE MATOS.pdf: 677634 bytes, checksum: 59a28d5b0f6afe29b7c40c031f6365be (MD5) Previous issue date: 2013-08-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This exegetical study aims to demonstrate the maternal face of Yahweh revealed in the writings of Deutero-Isaiah, having as main source the oracle of salvation Is 43.1-7. To this end, we start from the analysis of the literary context, historical and religious Deutero-Isaiah, so that make the exegetical analysis of the text proposed by which we will focus, among various contents, the characteristic maternal presented in the passage. Understanding a text arises within a social environment, will highlight, based on the writings Deutero-Isaiah, the exiled community to which they are addressed prophets and prophetesses. Finally, combining the attributes of maternal goddesses Asherah and Ishtar with the fledgling maternal conception of Yahweh made by Hosea, we propose the maternal face of God based on texts of Deutero-Isaiah, in particular Is 43.1 to 7. / O presente estudo exegético tem por objetivo demonstrar a face materna de Javé revelada nos textos de Dêutero-Isaías, tendo como fonte principal o oráculo de salvação de Is 43,1-7. Para tal, partimos da análise do contexto literário, histórico e religioso de Dêutero-Isaías, paraentão fazer a análise exegética do texto proposto, através da qual enfocaremos, dentre os diversos conteúdos, a característica materna apresentada na perícope. Compreendendo que um texto surge dentro de um ambiente social, evidenciaremos, com base nos escritos de Dêutero-Isaías, a comunidade exilada à qual se dirigem profetas e profetisas. Por fim, combinando os atributos maternos das deusas Asherah e Ishtar com a incipiente concepção materna de Javé apresentado por Oséias, propomos a face materna de Deus com base nos textos dêuteroisaiânicos, em especial, Is 43,1-7.