Made available in DSpace on 2015-02-27T17:39:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 46.pdf: 1731488 bytes, checksum: e102af3d41575936ba17db558854d0cc (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / Uma pesquisa foi realizada para testar a aplicação de ferramentas de garantia da qualidade em ensaios de potência da vacina oral contra poliomielite (OPV) e testar novas abordagens para validação de métodos analíticos, levando em conta a maior variabilidade de ensaios biológicos, com a finalidade de traçar o perfil deste ensaio. Foram adotadas duas abordagens para a validação do ensaio: a abordagem Clássica da "International Conference on Harmonization" aplicada aos ensaios biológicos de acordo com as recomendações descritas pela comissão da "Societé Française des Sciences et Techniques Pharmaceutiques" (SFSTP) e a abordagem do Conceito do Erro Total seguindo as recomendações da para esta abordagem também da SFSTP. As principais características avaliadas no estudo de validação, por se tratar de um ensaio quantitativo, foram a Exatidão e a Precisão. O Cpk, um índice gerencial de capacidade de processos, foi calculado para avaliar a capacidade do ensaio de potência e a adequação à regra 4-6-20 foi avaliada. Para cada componente viral da OPV, gráficos de controle da diferença entre os resultados dos dois laboratórios foram utilizados para detectar tendências não aleatórias nos resultados e a média das variâncias entre os resultados obtidos em cada laboratório, por amostra, foram utilizada para calcular o coeficiente de variação geométrico % geral em uma abordagem prática para determinar a reprodutibilidade do ensaio. O ensaio foi considerado Exato e Preciso nas duas abordagens de validação. / Uma pesquisa foi realizada para testar a aplicação de ferramentas de garantia da qualidade em ensaios de potência da vacina oral contra poliomielite (OPV) e testar novas abordagens para validação de métodos analíticos, levando em conta a maior variabilidade de ensaios biológicos, com a finalidade de traçar o perfil deste ensaio. Foram adotadas duas abordagens para a validação do ensaio: a abordagem Clássica da "International Conference on Harmonization" aplicada aos ensaios biológicos de acordo com as recomendações descritas pela comissão da "Societé Française des Sciences et Techniques Pharmaceutiques" (SFSTP) e a abordagem do Conceito do Erro Total seguindo as recomendações da para esta abordagem também da SFSTP. As principais características avaliadas no estudo de validação, por se tratar de um ensaio quantitativo, foram a Exatidão e a Precisão. O Cpk, um índice gerencial de capacidade de processos, foi calculado para avaliar a capacidade do ensaio de potência e a adequação à regra 4-6-20 foi avaliada. Para cada componente viral da OPV, gráficos de controle da diferença entre os resultados dos dois laboratórios foram utilizados para detectar tendências não aleatórias nos resultados e a média das variâncias entre os resultados obtidos em cada laboratório, por amostra, foram utilizada para calcular o coeficiente de variação geométrico % geral em uma abordagem prática para determinar a reprodutibilidade do ensaio. O ensaio foi considerado Exato e Preciso nas duas abordagens de validação.

Made available in DSpace on 2015-02-27T17:39:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 81.pdf: 872019 bytes, checksum: b8e894b7b58911018e4a590c0266cbe1 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / A bactéria Haemophilus da espécie influenzae, pode causar no homem diversas infecções, invasivas ou não. O H. influenzae do tipo b (Hib), antes da introdução da vacina conjugada contra Hib, associava-se a infecções como epiglotite, artrite séptica, bacteriemia, pneumonia septicemia e meningite, principalmente em crianças. As outras espécies tipáveis (a,c,d,e,f) e não tipáveis estavam associadas a infecções do trato respiratório adquiridas na comunidade. Após a introdução dessa vacina, houve redução expressiva das doenças causadas pelo Hib em diversas partes do mundo, inclusive no Brasil. Atualmente, outros tipos da espécie H. influenzae (Hi) que não o Hib estão sendo isoladas não somente em crianças, causando infecções graves. O ressurgimento de casos por Hib, em crianças vacinadas, tem sido reportado como possível falha vacinal. Esses fatos preocupam a Saúde Pública no mundo, demonstrando que mudanças epidemiológicas podem estar ocorrendo devido à seleção de cepas após a introdução da vacina. Neste estudo, mudanças genéticas na região capsular do Hi foram encontradas em cepas isoladas nos períodos pré e pós-vacinal de três estados brasileiros. Através do estudo de susceptibilidade foram encontradas cepas produtoras de β-lactamase (BLA+) e não produtoras resistentes a ampicilina (BLNAR). A análise de redução da susceptibilidade às quinolonas foi avaliada utilizando-se o ácido nalidíxico como marcador, confrontando-se a resistência deste antibiótico com os marcadores moleculares das regiões determinantes de resistência a quinolonas (QRDRs) através do sequenciamento dos genes gyrA e parC que codificam a síntese das proteínas GyrA e ParC. Os resultados obtidos demonstraram que o ácido nalidíxico é o antibiótico mais indicado desse grupo para detectar a redução da sensibilidade. / A bactéria Haemophilus da espécie influenzae, pode causar no homem diversas infecções, invasivas ou não. O H. influenzae do tipo b (Hib), antes da introdução da vacina conjugada contra Hib, associava-se a infecções como epiglotite, artrite séptica, bacteriemia, pneumonia septicemia e meningite, principalmente em crianças. As outras espécies tipáveis (a,c,d,e,f) e não tipáveis estavam associadas a infecções do trato respiratório adquiridas na comunidade. Após a introdução dessa vacina, houve redução expressiva das doenças causadas pelo Hib em diversas partes do mundo, inclusive no Brasil. Atualmente, outros tipos da espécie H. influenzae (Hi) que não o Hib estão sendo isoladas não somente em crianças, causando infecções graves. O ressurgimento de casos por Hib, em crianças vacinadas, tem sido reportado como possível falha vacinal. Esses fatos preocupam a Saúde Pública no mundo, demonstrando que mudanças epidemiológicas podem estar ocorrendo devido à seleção de cepas após a introdução da vacina. Neste estudo, mudanças genéticas na região capsular do Hi foram encontradas em cepas isoladas nos períodos pré e pós-vacinal de três estados brasileiros. Através do estudo de susceptibilidade foram encontradas cepas produtoras de β-lactamase (BLA+) e não produtoras resistentes a ampicilina (BLNAR). A análise de redução da susceptibilidade às quinolonas foi avaliada utilizando-se o ácido nalidíxico como marcador, confrontando-se a resistência deste antibiótico com os marcadores moleculares das regiões determinantes de resistência a quinolonas (QRDRs) através do sequenciamento dos genes gyrA e parC que codificam a síntese das proteínas GyrA e ParC. Os resultados obtidos demonstraram que o ácido nalidíxico é o antibiótico mais indicado desse grupo para detectar a redução da sensibilidade. O presente estudo mostra a necessidade de que os laboratórios de rotina e de pesquisa avaliem e desenvolvam métodos simples e rápidos, capazes de indicar as possíveis mudanças capsulares e o surgimento de cepas resistentes auxiliando a Vigilância Epidemiológica e a Vigilância Sanitária.

Made available in DSpace on 2015-02-27T17:39:02Z (GMT). No. of bitstreams: 2 76.pdf: 1337746 bytes, checksum: c97b92460d1afa99fa7e64e58c7a94a9 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / A disponibilidade de água potável e segura é um direito e uma condição indispensável para vida, garantidos pela Constituição Federal e pelo Sistema Único de Saúde (SUS). Em sua tabela 3, a Portaria 518/2004 - MS apresenta o padrão de potabilidade para substâncias químicas que representam risco à saúde e estabelece os valores máximos permitidos (VMP) em água para consumo humano para uma série de agrotóxicos, em sua maioria substâncias organocloradas. No entanto, somente a água distribuída pela rede geral de abastecimento tem a sua qualidade avaliada através do monitoramento realizado pelas companhias distribuidoras em seus laboratórios. O monitoramento da água das soluções alternativas apresenta uma dificuldade peculiar, pois muitas vezes não há um responsável ao qual possa ser formalmente imputado o controle da qualidade da água fornecida. No sentido de atender a necessidade de monitoramento da água das soluções alternativas, o objetivo principal deste trabalho foi a validação e a implementação de um método para análise de agrotóxicos organoclorados em água potável no Laboratório Central Noel Nutels/Rio de Janeiro visando o menor custo, menor tempo de execução, e menor geração de resíduos. O método escolhido foi a microextração líquido-líquido dispersiva (MELLD), onde uma mistura de solvente de extração, mais denso e imiscível no meio aquoso, com um solvente de dispersão miscível em ambos, é rapidamente injetada na amostra aquosa por meio de uma seringa. A análise instrumental foi efetuada por cromatografia à gás com detecção por captura de elétrons. O método foi validado para 12 agrotóxicos sendo: 4,4 -DDT, 2,4 -DDT, alfa-endossulfam, beta-endossulfam, alfa-HCH, beta-HCH, gama-HCH, delta-HCH, endrin, hexaclorobenzeno, metoxicloro e trifuralina. Os parâmetros de validação verificados encontraram-se todos dentro das faixas exigidas pelas normas em vigor. / A disponibilidade de água potável e segura é um direito e uma condição indispensável para vida, garantidos pela Constituição Federal e pelo Sistema Único de Saúde (SUS). Em sua tabela 3, a Portaria 518/2004 - MS apresenta o padrão de potabilidade para substâncias químicas que representam risco à saúde e estabelece os valores máximos permitidos (VMP) em água para consumo humano para uma série de agrotóxicos, em sua maioria substâncias organocloradas. No entanto, somente a água distribuída pela rede geral de abastecimento tem a sua qualidade avaliada através do monitoramento realizado pelas companhias distribuidoras em seus laboratórios. O monitoramento da água das soluções alternativas apresenta uma dificuldade peculiar, pois muitas vezes não há um responsável ao qual possa ser formalmente imputado o controle da qualidade da água fornecida. No sentido de atender a necessidade de monitoramento da água das soluções alternativas, o objetivo principal deste trabalho foi a validação e a implementação de um método para análise de agrotóxicos organoclorados em água potável no Laboratório Central Noel Nutels/Rio de Janeiro visando o menor custo, menor tempo de execução, e menor geração de resíduos. O método escolhido foi a microextração líquido-líquido dispersiva (MELLD), onde uma mistura de solvente de extração, mais denso e imiscível no meio aquoso, com um solvente de dispersão miscível em ambos, é rapidamente injetada na amostra aquosa por meio de uma seringa. A análise instrumental foi efetuada por cromatografia à gás com detecção por captura de elétrons. O método foi validado para 12 agrotóxicos sendo: 4,4’-DDT, 2,4’-DDT, alfa-endossulfam, beta-endossulfam, alfa-HCH, beta-HCH, gama-HCH, delta-HCH, endrin, hexaclorobenzeno, metoxicloro e trifuralina. Os parâmetros de validação verificados encontraram-se todos dentro das faixas exigidas pelas normas em vigor. O teste com duas misturas de solvente de extração revelou que a mistura tetracloroetileno/acetona apresentou os melhores resultados em comparação com a de clorobenzeno/acetona. A análise de 10 amostras de água provenientes de soluções alternativas de abastecimento espalhadas pelo município de São José do Vale do Rio Preto/RJ mostrou que não há contaminação pelos agrotóxicos estudados, sendo todos os valores obtidos abaixo do limite de quantificação.

Made available in DSpace on 2015-02-27T17:39:03Z (GMT). No. of bitstreams: 2 71.pdf: 672416 bytes, checksum: 70cf8a1b19f9e6bc3f794ea9716e54d9 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / A heparina é um polissacarídeo sulfatado usado como droga anticoagulante com diferentes preparações comerciais disponíveis no mercado brasileiro. Em fevereiro de 2008, seu uso foi relacionado a uma centena de mortes nos Estados Unidos onde foi detectada a contaminação de alguns lotes por sulfato de condroitina. Este fato fez crescer mundialmente a busca por ensaios laboratoriais que garantam sua segurança e eficácia. Neste trabalho foram avaliados comparativamente, cinco lotes procedentes de diferentes produtores de heparinas não-fracionadas, de origem suína ou bovina. Estas amostras foram testadas contra o 5o Padrão Internacional de Heparina de Mucosa Intestinal Suína, provenientes de coletas efetuadas pelas autoridades sanitárias para análise quanto à pureza e potência anticoagulante, pelos dois métodos farmacopéicos: a Inibição da Coagulação do Plasma Ovino (ICPO) e o Tempo de Tromboplastina Parcial Ativada (TTPA), no Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde (INCQS), laboratório nacional de controle. Os resultados obtidos (potências médias de 104,71por cento e 106,17por cento, respectivamente) apontaram boa concordância entre os métodos, além de comprovar que o TTPA apresenta metodologia mais simples e rápida devido à utilização do coagulômetro para a medição do tempo de formação de coágulos, em detrimento da leitura subjetiva com observação visual dos graus de coagulação adotado pelo ICPO. A implantação e a execução do TTPA, em paralelo à utilização do ICPO, permitirá uma melhoria na avaliação da segurança e eficácia de heparinas não-fracionadas. / A heparina é um polissacarídeo sulfatado usado como droga anticoagulante com diferentes preparações comerciais disponíveis no mercado brasileiro. Em fevereiro de 2008, seu uso foi relacionado a uma centena de mortes nos Estados Unidos onde foi detectada a contaminação de alguns lotes por sulfato de condroitina. Este fato fez crescer mundialmente a busca por ensaios laboratoriais que garantam sua segurança e eficácia. Neste trabalho foram avaliados comparativamente, cinco lotes procedentes de diferentes produtores de heparinas não-fracionadas, de origem suína ou bovina. Estas amostras foram testadas contra o 5o Padrão Internacional de Heparina de Mucosa Intestinal Suína, provenientes de coletas efetuadas pelas autoridades sanitárias para análise quanto à pureza e potência anticoagulante, pelos dois métodos farmacopéicos: a Inibição da Coagulação do Plasma Ovino (ICPO) e o Tempo de Tromboplastina Parcial Ativada (TTPA), no Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde (INCQS), laboratório nacional de controle. Os resultados obtidos (potências médias de 104,71% e 106,17%, respectivamente) apontaram boa concordância entre os métodos, além de comprovar que o TTPA apresenta metodologia mais simples e rápida devido à utilização do coagulômetro para a medição do tempo de formação de coágulos, em detrimento da leitura subjetiva com observação visual dos graus de coagulação adotado pelo ICPO. A implantação e a execução do TTPA, em paralelo à utilização do ICPO, permitirá uma melhoria na avaliação da segurança e eficácia de heparinas não-fracionadas.

Made available in DSpace on 2015-02-27T17:39:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 72.pdf: 596399 bytes, checksum: 73031b2896fa6d41d8df381fdbbbe46d (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde. Rio de Janeiro, RJ, Brasil. / Diversos relatos indicam que queijos Minas Frescal comercializados no Brasil são amplamente contaminados, sendo o gênero Staphylococcus spp. incriminado em diversos surtos de toxinfecção alimentar. Os objetivos deste estudo são a pesquisa de características fenotípicas e genotípicas de resistência a antimicrobianos de Staphylococcus spp. isolados a partir de queijo Minas Frescal, verificando a presença dos genes mecA e qacA/B através da técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR). Estes isolados, caracterizadas como estafilococos coagulase positiva e estafilococos coagulase negativa por Freitas (2005), neste estudo passaram por verificação de sua pureza, através de características macroscópicas das colônias em crescimento em Triptic Soy Agar, coloração de Gram, prova da catalase e da coagulase. Após a seleção de culturas puras de estafilococos foi realizado teste de suscetibilidade a antimicrobianos (mupirocina, ampicilina, tetraciclina, clindamicina, sulfazotrim, norfloxacina, cefotaxima, piperacilina+tazobactam, meropenem, penicilina G, cefepima, cloranfenicol, gentamicina, eritromicina, oxacilina e cefoxitina), extração de DNA e pesquisa dos genes mecA e qacA/B através da reação em cadeia da polimerase. Os resultados foram que apenas 14 (14,7por cento) dos isolados analisados pelo antibiograma se mostraram sensíveis a todos os antibióticos testados. Encontrou-se 27 (28,4por cento) dos isolados multiresistentes e suscetíveis à meticilina e 15 (15,8por cento) eram multiresistentes e resistentes à meticilina. O gene mecA foi detectado em 21 (22,1por cento) dos 95 isolados pesquisados, e dentre estes, 9 (9,5por cento) apresentaram-se como resistentes pelo teste de suscetibilidade a antimicrobianos (incluindo dois isolados coagulase negativos). Dentre os isolados 74 (77,9por cento) não apresentaram o gene mecA e 6 (6,3por cento) apresentaram-se resistentes à meticilina pelo antibiograma...

Made available in DSpace on 2015-02-27T17:39:04Z (GMT). No. of bitstreams: 2 64.pdf: 604343 bytes, checksum: edae78b2242ec5e83a56d865390be3ce (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / O presente trabalho teve como objetivo (i) avaliar o processo de controle da qualidade relacionado às vacinas contra febre amarela utilizadas pelo Programa Nacional de Imunizações (PNI) do Ministério da Saúde no período de 2000 a 2008, através de levantamento de dados provenientes do Sistema de Gerenciamento de Amostras (SGA) do Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde (INCQS) da Fundação Oswaldo Cruz (Fiocruz) e (ii) propor a utilização de gráficos de controle, como ferramentas úteis para a melhoria desse processo, a partir da análise comparativa dos resultados obtidos para vacinas nacionais e importadas, e da consistência de produção e detecção de tendências sistemáticas. Teve ainda como proposta (iii) a validação retrospectiva do teste de potência da vacina em questão, através da demonstração de sua confiabilidade (variabilidade e precisão) e do acompanhamento do desempenho da vacina de referência usada nos testes de potência e termoestabilidade. Compuseram a análise relativa ao controle da qualidade das vacinas contra febre amarela os seguintes parâmetros: (i.) análise do protocolo resumido de produção e controle emitido pelo fabricante, (ii.) teste de potência, (iii.) teste de termoestabilidade, (iv.) teste de determinação de ovalbumina, (v.) teste de esterilidade bacteriana e fúngica, (vi.) teor de umidade residual e (vii.) endotoxina bacteriana. Para confecção dos gráficos de controle foram estabelecidos os limites de controle (3 DP a partir da média) e limites de alerta (2 DP), calculados a partir dos 20 primeiros resultados a cada ano, como definido pela OMS (OMS, 1997) e através do programa SPC Explorer RT, versão 5.21 (Quality America Inc.). No período estudado ingressaram no INCQS 1031 lotes de vacinas contra febre amarela, produzidos por dois fabricantes distintos (97% pelo fabricante A e 3% pelo fabricante B), representando um total de 285 milhões de doses individuais. / O presente trabalho teve como objetivo (i) avaliar o processo de controle da qualidade relacionado às vacinas contra febre amarela utilizadas pelo Programa Nacional de Imunizações (PNI) do Ministério da Saúde no período de 2000 a 2008, através de levantamento de dados provenientes do Sistema de Gerenciamento de Amostras (SGA) do Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde (INCQS) da Fundação Oswaldo Cruz (Fiocruz) e (ii) propor a utilização de gráficos de controle, como ferramentas úteis para a melhoria desse processo, a partir da análise comparativa dos resultados obtidos para vacinas nacionais e importadas, e da consistência de produção e detecção de tendências sistemáticas. Teve ainda como proposta (iii) a validação retrospectiva do teste de potência da vacina em questão, através da demonstração de sua confiabilidade (variabilidade e precisão) e do acompanhamento do desempenho da vacina de referência usada nos testes de potência e termoestabilidade. Compuseram a análise relativa ao controle da qualidade das vacinas contra febre amarela os seguintes parâmetros: (i.) análise do protocolo resumido de produção e controle emitido pelo fabricante, (ii.) teste de potência, (iii.) teste de termoestabilidade, (iv.) teste de determinação de ovalbumina, (v.) teste de esterilidade bacteriana e fúngica, (vi.) teor de umidade residual e (vii.) endotoxina bacteriana. Para confecção dos gráficos de controle foram estabelecidos os limites de controle (3 DP a partir da média) e limites de alerta (2 DP), calculados a partir dos 20 primeiros resultados a cada ano, como definido pela OMS (OMS, 1997) e através do programa SPC Explorer RT, versão 5.21 (Quality America Inc.). No período estudado ingressaram no INCQS 1031 lotes de vacinas contra febre amarela, produzidos por dois fabricantes distintos (97% pelo fabricante A e 3% pelo fabricante B), representando um total de 285 milhões de doses individuais. Desse total, 5 lotes do fabricante A (0,5% do total de lotes deste fabricante) foram consideramos insatisfatórios (cerca de 1,7 milhões de doses), sendo três lotes no teste de esterilidade bacteriana e fúngica e dois lotes no teste de umidade residual. A avaliação dos gráficos de controle dos resultados de potência e de termoestabilidade mostraram que estes testes apresentam menor variação no INCQS do que no fabricante A. Além disso, no ano de 2007 foi possível observar um número significativo de valores do teste de potência deste fabricante abaixo do limite inferior de controle. Estes valores concentravam-se na segunda metade do gráfico, coincidindo com um período em que houve maior demanda pela vacina contra febre amarela, devido ao aumento no número de casos da doença no Brasil e em alguns países da América do Sul. Nosso resultados indicam ainda que no INCQS, o processo está sob controle estatístico e as causas especiais de variação, caso ocorram estão sendo controladas. Quanto à validação retrospectiva do teste de potência contra febre amarela no INCQS, concluímos que a exatidão foi de 0,19 (0,09-0,25), e recuperação de 96,14. A precisão total foi de 14,48%, sendo a repetitividade de 11,92% e precisão intermediária de 7,78% entre ensaios, e 7,80% entre analistas. Estes valores encontram-se satisfatórios e de acordo com o preconizado para ensaios biológicos por agências internacionais.

Made available in DSpace on 2015-03-16T14:27:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 40.pdf: 1772922 bytes, checksum: bd631963f3e0febd6a4e1753b7433d3a (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / No Brasil, a expansão de área plantada de cana-de-açúcar, impulsionada pela demanda crescente do etanol como combustível que compõe a matriz energética nacional, é acompanhada pelo aumento no consumo de insumos específicos para a cultura, incluindo os herbicidas. Dentre os herbicidas mais utilizados na agricultura, a atrazina (2-cloro-4-etilamina-6-isopropilamina-s-triazina), um herbicida da classe dos triazínicos, é usada intensivamente no controle de ervas daninhas em pré ou pós-emergência. Devido a sua estrutura química representada por um anel triazínico substituído com cloro, etilamina e isopropilamina, a atrazina se mostra uma substância altamente recalcitrante para a degradação biológica no ambiente. A aplicação de fungos para biodegradação de substâncias químicas recalcitrantes vem sendo amplamente estudada. Portanto, o presente estudo teve como objetivo testar a tolerância de Candida rugosa INCQS 71011, Lentinula edodes INCQS 40220, Penicillium simplicissimum INCQS 40211 e Pleurotus ostreatus UFLA ao herbicida atrazina na concentração final de 10 mgL-1 e a partir desses resultados, os fungos que se apresentaram tolerantes foram selecionados e utilizados para os testes de degradação de atrazina e o melhoramento da composição do meio de cultivo visando um maior percentual de degradação. Foi constatado que a tolerância não se mostrou relacionada à degradação. Embora todos os fungos estudados tenham se mostrado tolerantes à presença de atrazina, somente Pleurotus ostreatus UFLA foi capaz de degradá-la e produzir a enzima lacase. Nos experimentos de degradação, o fungo Pleurotus ostreatus UFLA avaliado por 15 dias atingiu um percentual máximo de 39% no 15° dia de cultivo, produzindo os metabólitos desetilatrazina e deisopropilatrazina. / No Brasil, a expansão de área plantada de cana-de-açúcar, impulsionada pela demanda crescente do etanol como combustível que compõe a matriz energética nacional, é acompanhada pelo aumento no consumo de insumos específicos para a cultura, incluindo os herbicidas. Dentre os herbicidas mais utilizados na agricultura, a atrazina (2-cloro-4-etilamina-6-isopropilamina-s-triazina), um herbicida da classe dos triazínicos, é usada intensivamente no controle de ervas daninhas em pré ou pós-emergência. Devido a sua estrutura química representada por um anel triazínico substituído com cloro, etilamina e isopropilamina, a atrazina se mostra uma substância altamente recalcitrante para a degradação biológica no ambiente. A aplicação de fungos para biodegradação de substâncias químicas recalcitrantes vem sendo amplamente estudada. Portanto, o presente estudo teve como objetivo testar a tolerância de Candida rugosa INCQS 71011, Lentinula edodes INCQS 40220, Penicillium simplicissimum INCQS 40211 e Pleurotus ostreatus UFLA ao herbicida atrazina na concentração final de 10 mgL-1 e a partir desses resultados, os fungos que se apresentaram tolerantes foram selecionados e utilizados para os testes de degradação de atrazina e o melhoramento da composição do meio de cultivo visando um maior percentual de degradação. Foi constatado que a tolerância não se mostrou relacionada à degradação. Embora todos os fungos estudados tenham se mostrado tolerantes à presença de atrazina, somente Pleurotus ostreatus UFLA foi capaz de degradá-la e produzir a enzima lacase. Nos experimentos de degradação, o fungo Pleurotus ostreatus UFLA avaliado por 15 dias atingiu um percentual máximo de 39% no 15° dia de cultivo, produzindo os metabólito s desetilatrazina e deisopropilatrazina. A atividade máxima da enzima lacase foi 0,533 U/mL, no entanto não foi possível correlacionar degradação e atividade enzimática. Após esses experimentos, foi realizado um planejamento experimental para maximizar a degradação de atrazina. Foi realizado um delineamento fatorial fracionado 28-4 com 20 ensaios. Com esses experimentos foi possível aumentar os níveis de degradação para 65% em 15 dias e aumentar também a diversidade dos metabólitos formados. Além de desetilatrazina e deisopropilatrazina, formou-se também desetilhidroxiatrazina, deisopropilhidroxiatrazina e desetildeisopropilatrazina. Com base nestes resultados, Pleurotus ostreatus UFLA apresenta grande potencial para ser utilizado na biorremediação de ambientes contaminados por atrazina, minimizando os impactos deste herbicida na saúde pública.

Made available in DSpace on 2015-03-16T14:27:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 50.pdf: 1867882 bytes, checksum: af8a86de2d01897e472d78c908f1e225 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / Este estudo avaliou a colonização por Staphylococcus spp em superfícies de artigos médicos (estetoscópio, esfigmomanômetro e Sonar Doppler) e das fossas nasais e mãos dos profissionais do serviço de atendimento ao pré-natal de duas Unidades Básicas de Saúde no Município do Rio de Janeiro, no período de 2009-2010. Foram coletadas 79 amostras que resultaram em 49 isolados, submetidos à caracterização fenotípica (bioquímica e suscetibilidade aos antimicrobianos) e molecular (PCR dos genes coa, femA e mecA). Trinta e cinco (71,4%) foram coagulase positivas e 41 (83,6%) apresentaram a enzima DNase. A susceptibilidade aos antimicrobianos resultou em 19 perfis de resistência, 34,6% apresentaram susceptibilidade aos nove antimicrobianos analisados, 53,6% foram resistentes à eritromicina, 34,6% à cefoxitina, 30,6% a oxacilina, 16,3 % a clindamicina e 2% a vancomicina. A PCR dos genes coa, femA e mecA resultou na amplificação de um único fragmento variável de 650 a 900 pb, 900 pb e 500 bp respectivamente em 75,5%, 71,4% e 30,6% dos isolados, respectivamente. Dos 49 isolados, 20,4% foram coagulase positiva e resistente à oxacilina e, portanto considerados Meticillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) e 10,20% Meticillin Resistant coagulase negativa Staphylococci (MR-CoNS) após a confirmação pela amplificação do gene mecA. A resistência concomitante à eritromicina e a clindamicina foi observada em 10 cepas (20,4%) que apresentaram o fenótipo Macrolide-Lincosamide-Streptogramin type B (MLSB) constitutivo. Oito isolados (16,3%), apresentaram perfis multirresistentes (cinco ou mais antimicrobianos) e foram identificados como MRSA. Dentre essas oito cepas multirresistentes, uma cepa isolada da mão de um profissional, apresentou também resistência à vancomicina. A evidência de Staphylococcus patogênicos em equipamentos e profissionais de saúde traduz a preocupação com a proteção da saúde de pacientes, profissionais e da comunidade... / Este estudo avaliou a colonização por Staphylococcus spp em superfícies de artigos médicos (estetoscópio, esfigmomanômetro e Sonar Doppler) e das fossas nasais e mãos dos profissionais do serviço de atendimento ao pré-natal de duas Unidades Básicas de Saúde no Município do Rio de Janeiro, no período de 2009-2010. Foram coletadas 79 amostras que resultaram em 49 isolados, submetidos à caracterização fenotípica (bioquímica e suscetibilidade aos antimicrobianos) e molecular (PCR dos genes coa, femA e mecA). Trinta e cinco (71,4%) foram coagulase positivas e 41 (83,6%) apresentaram a enzima DNase. A susceptibilidade aos antimicrobianos resultou em 19 perfis de resistência, 34,6% apresentaram susceptibilidade aos nove antimicrobianos analisados, 53,6% foram resistentes à eritromicina, 34,6% à cefoxitina, 30,6% a oxacilina, 16,3 % a clindamicina e 2% a vancomicina. A PCR dos genes coa, femA e mecA resultou na amplificação de um único fragmento variável de 650 a 900 pb, 900 pb e 500 bp respectivamente em 75,5%, 71,4% e 30,6% dos isolados, respectivamente. Dos 49 isolados, 20,4% foram coagulase positiva e resistente à oxacilina e, portanto considerados “Meticillin Resistant Staphylococcus aureus” (MRSA) e 10,20% “Meticillin Resistant coagulase negativa Staphylococci” (MR-CoNS) após a confirmação pela amplificação do gene mecA. A resistência concomitante à eritromicina e a clindamicina foi observada em 10 cepas (20,4%) que apresentaram o fenótipo “Macrolide-Lincosamide-Streptogramin type B” (MLSB) constitutivo. Oito isolados (16,3%), apresentaram perfis multirresistentes (cinco ou mais antimicrobianos) e foram identificados como MRSA. Dentre essas oito cepas multirresistentes, uma cepa isolada da mão de um profissional, apresentou também resistência à vancomicina. A evidência de Staphylococcus patogênicos em equipamentos e profissionais de saúde traduz a preocupação com a proteção da saúde de pacientes, profissionais e da comunidade. Uma das atribuições da Vigilância Sanitária é a conscientização da importância dos procedimentos de limpeza e desinfecção das mãos e dos artigos médicos utilizados nos ambientes de saúde.

Made available in DSpace on 2015-07-03T12:37:56Z (GMT). No. of bitstreams: 2 30.pdf: 1527528 bytes, checksum: b2333ef3f46a54e4c0f35d84738af88e (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / As variações das propriedades físico-químicas do insumo farmacêutico ativo (IFA) podem influenciar os resultados do ensaio de dissolução dos produtos. Estas podem gerar alterações polimórficas e pseudo-polimórficas, que são significativamente diferentes com respeito à solubilidade e propriedades de fusão. No levantamento realizado no SGA do INCQS no período de 2000/08, 40% dos medicamentos suspeitos de ineficácia terapêutica, tinham polimorfos. A glibenclamida analisada apresenta esta característica. Entre os medicamentos contendo glibenclamida pesquisados, 96% são produtos similares e algumas obtiveram resultado insatisfatório no ensaio de dissolução. Estudos relacionados aos processos de liberação, dissolução, biofarmacotécnica e influência dos excipientes podem ser de vital importância sobre a biodisponibilidade / bioequivalência dos medicamentos. O ensaio de dissolução é uma importante ferramenta utilizada para esta avaliação e pode ser indicativa de falta de biodisponibilidade do medicamento. Foi pesquisado dentre as possíveis causas de ineficácia terapêutica as relacionadas com as propriedades físico químicas do IFA, assim como as relacionadas as diferentes formulações dos produtos. Caracterizou-se cinco produtos e seus IFAs, o de referência e um par de similares e genéricos. A colorimetria exploratória diferencial, termogravimetria e a análise de difração de raios-X de pó não evidenciaram presença de polimorfos nas amostras de IFAs. As velocidades de dissolução intrínseca dos IFAs igualmente foram muito semelhantes e homogêneas entre si, entretanto os perfis de dissolução dos produtos, principalmente entre os produtos similares analisados, foram muito diferentes e heterogêneos, possibilitando traçar um paralelo entre os resultados e a presença de diferentes e distintos excipientes, como o manitol. / Variations of the physicochemical properties of the active pharmaceutical ingredient (API) can influence the results of the dissolution test of products. These can produce polymorphic and pseudo-polimorphic modifications which are significantly different with regard to solubility and melting properties. In the survey conducted in the SGA INCQS in the period 2000–2008, 40% of drugs suspected of ineffective therapy were polymorphic. Glibenclamide has analysed this feature. Among the products containing glibenclamide surveyed 96 % are similar products and some had unsatisfactory results in the dissolution test. Studies related to the processes of release, dissolution, biopharmaceutical and influence of excipient may be of vital importance on the bioavailability / bioequivalence of drugs. The dissolution test is an important tool for this the evaluation and may be indicative of lack of bioavailability of the drug. A search among the possible causes of the therapeutic ineffectiveness related to physicochemical properties of the API, as well as those related to the different formulations of the products. It had been characterized five products and their APIs, the reference and a pair of similar and generic. The differential scanning colorimetry, thermogravimetry analysis and X-ray diffraction powder showed no presence of polymorphs in the samples of APIs. The intrinsic dissolution rates of APIs were also very similar and homogeneous between them however the dissolution profiles of products especially among similar products analysed were very different and heterogeneous, allowing to establish a parallel between the results and the presence of different and distinct excipients such as mannitol. The change in excipients of similar drugs can classify them as a “new” medicine because the safety, efficacy and quality of drugs can not be attributes solely to the intrinsic pharmacological properties of the API.

Made available in DSpace on 2015-07-08T12:28:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 17.pdf: 1549058 bytes, checksum: d1d338fb698a95bb0d0ea23528f8cf74 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Saúde / A doença meningocócica permanece como um problema de saúde pública, estando relacionada a altas taxas de morbidade e mortalidade, principalmente em crianças e lactentes. A rápida evolução da doença requer uma intervenção terapêutica específica e precoce, e enfatiza a necessidade de disponibilizar vacinas que possam ser utilizadas na prevenção dessa doença. Estratégias utilizando proteínas de membrana externa de Neisseria meningitidis como antígeno estão sendo desenvolvidas para a produção de uma vacina universal contra o sorogrupo B, que pode, inclusive, conferir proteção contra outros sorogrupos. Duas vacinas se encontram atualmente em ensaios clínicos. A vacina recombinante rfHbp possui duas variantes da proteína fHbp (V1 e V2) como antígeno, e a vacina 4CMenB é uma vacina multicomponente que inclui três proteínas (fHbp, NHBA e NadA) combinadas com OMVs da cepa epidêmica da Nova Zelândia. Embora estes antígenos sejam relativamente conservados, os mesmos já demonstraram variabilidade em diferentes regiões. O objetivo deste estudo foi avaliar a prevalência e diversidade genética destes antígenos em isolados clínicos de N. meningitidis sorogrupos B e C circulantes no Brasil. A caracterização dos isolados pelo MLST revelou seis complexos clonais principais (CCS ST-41/44, ST-1136, ST-32/ET-15, ST-8/A4, ST-11/ET-37 E ST 103). Todos os isolados apresentaram o gene de fHbp, onde a variante 1 foi predominante para sorogrupo B e a variante 2 para o sorogrupo C. O gene NHBA também foi identificado em todos os isolados. Apenas 29,73% dos isolados apresentaram o gene nadA. Nenhuma das cepas analisadas apresentou o mesmo subtipo de PorA presente na OMV que compõe a vacina, não sendo interessante a inclusão desta vesícula em uma possível vacina brasileira. Apenas três variantes de VR3 de PorA foram identificadas, demonstrando a baixa variabilidade desta região da proteína e a possível aplicação em uma vacina. / Meningococcal disease remains a public health problem causing high case-fatality rates worldwide, especially among young children and young adults. The rapid evolution of the disease requires specific and fast therapeutic actions and the use of prophylaxis through vaccination is the best choice to halt the spread of the disease. New vaccine approaches using surface exposed proteins from Neisseria meningitidis have been developed for the design of a universal vaccine against serogroup B, which could also elicit protection against other serogroups. Two vaccines using this strategy are currently through clinical trials. The recombinant vaccine rfHbp with two fHbp antigenic variants (V1 and V2) and the multicomponent vaccine 4CMenB including three proteins (fHbp, NHBA and NadA) combined with an OMV from the New Zealand vaccine strain. Although these are highly conserved antigens, some genetic variation has been already observed within their genes. The main objective of this study was to evaluate the prevalence and genetic diversity of these antigens among N. meningitidis serogroup B and C isolates circulating in Brazil. The characterization of such isolates by MLST analysis, revealed the presence of six main clonal complexes (CCS ST-41/44, ST-1136, ST-32/ET-15, ST-8/A4, ST-11/ET-37 E ST 103). The gene fHbp was amplified from all isolates and Variant 1 was predominant among serogroup B and Variant 2 among serogroup C. Gene NHBA was also amplified from all isolates. Gene nadA was only amplified form 29.73% of all isolates. We didn´t find any strain matching the same PorA subtype of the OMV used in the 4CMenB vaccine, thus the inclusion of such bacterial structure in a future vaccine to be used in Brazil would be useless. Only three PorA VR3 variants were detected showing the low diversity of this protein region and the possible inclusion of this structure on a future vaccine. We have detected a possible indication of capsule “switching” among some isolates which shows the need of a wide surveillance of meningococcal strains that can escape the protection of serogroup C conjugate vaccines. The rfHbp vaccine suggested that it could show a higher efficiency when compared with 4CMenB, but it is important to cover possible scape mechanisms showed by several strains.