A contagem celular é uma técnica empregada para se monitorar a reprodução de células em meios de cultivo de interesse em ensaios biológicos. Um sistema de análise por injeção em fluxo foi desenvolvido para a contagem de células como uma alternativa ao sistema convencional, câmara de Neubauer. O método é baseado na proporcionalidade entre o sinal de sulfato de bário e das células. Apesar das diferenças nas propriedades físicas, foi possível estabelecer uma relação entre os sistemas de fluxo. No sistema FIA para determinação de sulfato, foi obtida a seguinte equação para curva analítica: S = 0,0087Csulfato + 0,000458. Para o Saccharomyces cerevisiae a curva analítica obtida foi S = 4,01 x 10-11CS.cerevisiae + 0,0018 e a relação entre os sistemas foi CS.cerevisiae = 2,17 x 108CSulfato + 0,002258. Os limites de detecção e quantificação foram, respectivamente, 2,37 x 108 células L-1 e 7,90 x 108 células L-1. O método foi comparado com os resultados obtidos na câmara de Neubauer e não existiram diferenças significativas a um nível de confiança de 95% (teste-t pareado). A determinação com a câmara de Neubauer apresentou menor precisão que o sistema FIA. Além disso, o método permite a monitoração do crescimento microbiano. As principais vantagens do sistema FIA foram a alta freqüência, a seletividade, exatidão e repetibilidade satisfatórias / Cell count is a procedure that has been used in screening of cell reproduction in different types of inquiry and science areas. A system of flow injection analysis (FIA) was developed for cell counting how an alternative to conventional system, the Neubauer Chamber. The method is based on the proportionality between the barium sulfate and the cell signals. In spite of differences in the physical properties, it was possible to establish a relationship among the flow systems. In the sulfate FIA system, it was obtained the following equation for calibration curve: (S 0.0087Csulfate + 0.000458). The Saccharomyces cerevisiae calibration curve obtained was: S = 4,01 x 10-11CS.cerevisiae + 0.0018 and the relationship between the systems was: CS.cerevisiae = 2,17 x 108CSulfate + 0.002258. The limits of detection and quantification was respectively equal to 2.37 x 108 cells L-1 and 7.90 x 108 cells L-1. The method was compared with results obtained in the Neubauer chamber and there was no significant difference at confidence level of 95% (paired t-test). The determination with classical Neubauer chamber presented lower precision than the FIA system. Besides this, the method has permitted the screening of microbial proliferation. The main advantages of FIA system were the high analytical frequency, the selectivity, accuracy and repeatability satisfactory

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:34:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2566.pdf: 3291164 bytes, checksum: 8f80bfd807f7f259b60940cfafe2a125 (MD5) Previous issue date: 2009-03-20 / Universidade Federal de Sao Carlos / The employment of flow injection systems to determination of N-acetylcysteine, captopril, dipyrone and fluoxetine hydrochloride in pharmaceutical formulations was investigated. The N-acetylcysteine was determinated employing a solid-phase reactor containing Zn3(PO4)2 immobilized in a polyester resin coupled to a flow injection system. The procedure was based on the chelation of Zn(II) ions with N-acetylcysteine in the solid-phase reactor, with consequent releasing of the complex Zn(II)-N-acetylcysteine of the reactor, this complex reacted with alizarin red S (VA) in borate buffer pH 9.0 generating the complex Zn(VA-BO3)3 which absorbance was measured spectrophotometrically at 540 nm. The second developed procedure was the determination of captopril (CAP) in pharmaceutical formulations employing a solid-phase reactor containing silver chrolanilate (Ag2C6Cl2O4) immobilized in a polyester resin. In this system occured the precipitation reaction of captopril with the Ag(I), producing in the reactor an insoluble salt between the CAP and the Ag(I) due to the lower solubility of the formed salt related to Ag2C6Cl2O4. After the formation of the insoluble salt in the reactor occured the releasing of chloranilate anion, C6Cl2O4 2-, that reacted with the Fe(III) producing the complex FeC6Cl2O4 + which was monitored spectrophotometrically at 528 nm. In another procedure, the N-acetylcysteine and captopril were determined separately in a flow injection system through the on-line of the Prussian blue formation. In this procedure, the N-acetylcysteine or the captopril were oxidized by Fe(III), producing Fe(II) that reacted with hexacyanoferrate(III) in a point of flow system, generating the Prussian blue (Fe4[Fe(CN)6]3), that was monitored spectrophotometrically at 700 nm. It was also proposed a flow injection system with merging zones and intermittent flow with turbidimetric detection to determination of fluoxetine hydrochloride in pharmaceuticals. This system was based on the formation of an insoluble salt (AgCl(s)) between the AgNO3 and the chloride of the hydrochloride of the fluoxetine molecule that was turbidimetrically detected at 420 nm. Finally, two procedures were developed employing a flow injection system to determination of dipyrone in pharmaceuticals using Fe(III) as chromogenic reagent. In the first procedure, it was employed an analytical microsystem constructed with LTCC and in the second one, it was used a flow injection system with merging zones without the use of microsystem. In these systems, occured the formation on-line of an blue chromophore between Fe(III) and the dipyrone that was monitored spectrophotometrically at 622 nm. / O emprego de sistemas de análise por injeção em fluxo para a determinação de N-acetilcisteína, captopril, dipirona e cloridrato de fluoxetina em formulações farmacêuticas foi investigado. A N-acetilcisteína foi determinada empregando um reator em fase sólida contendo fosfato de zinco imobilizado em resina poliéster acoplado ao sistema FIA. O procedimento baseou-se na complexação dos íons Zn(II) pela N-acetilcisteína no reator em fase sólida, com consequente remoção do complexo Zn(II)-N-acetilcisteína do reator, esse complexo reagiu com o regente vermelho de alizarina S (VA), em tampão borato pH 9,0, formando o complexo Zn(VA-BO3)3 cuja absorbância foi monitorada espectrofotometricamente em 540 nm. O segundo procedimento desenvolvido foi a determinação de captopril empregando um reator em fase sólida contendo cloranilato de prata (Ag2C6Cl2O4) imobilizado em resina poliéster. Esse sistema baseou-se na reação de precipitação do captopril com Ag(I), gerando no reator um sal insolúvel entre o captopril e Ag(I) devido à menor solubilidade do sal formado em relação ao Ag2C6Cl2O4. Após a formação do sal insolúvel no reator ocorreu o deslocamento do ânion cloranilato, C6Cl2O4 2-, que reagiu com o Fe(III) em um ponto de confluência do sistema em fluxo produzindo o complexo FeC6Cl2O4 + que foi monitorado espectrofotometricamente em 528 nm. Em um outro procedimento, a N-acetilcisteína e o captopril foram determinados separadamente em um sistema de análise por injeção em fluxo através da formação em linha do azul da Prússia. Nesse procedimento, a N-acetilcisteína ou o captopril foram oxidados pelo Fe(III), produzindo Fe(II) que reagiu com hexacianoferrato(III) em um ponto de confluência do sistema FIA, gerando o azul da Prússia (Fe4[Fe(CN)6]3), que foi monitorado espectrofotometricamente em 700 nm. Foi proposto também um sistema de análise por injeção em fluxo com zonas coalescentes e fluxo intermitente com detecção turbidimétrica para a determinação de cloridrato de fluoxetina em produtos farmacêuticos. O sistema baseou-se na reação entre o cloreto do cloridrato de fluoxetina e o nitrato de prata (AgNO3), formando o (AgCl(s)), que foi monitorado turbidimetricamente em 420 nm. Por último, foram desenvolvidos dois procedimentos empregando sistema de análise por injeção em fluxo para a determinação de dipirona em formulações farmacêuticas utilizando Fe(III) como reagente cromogênico. No primeiro procedimento foi empregado um microssistema analítico construído com LTCC e no segundo foi utilizado um sistema FIA com zonas coalescentes sem o acoplamento do microssistema. Nesses sistemas, sucedeu a formação em linha de um cromóforo azul, a partir da reação entre o Fe(III) e a dipirona, que foi monitorado espectrofotometricamente em 622 nm.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissLSC.pdf: 1042370 bytes, checksum: ffcdd5ffefc617fdd96b39d65fd2f0c3 (MD5) Previous issue date: 2004-07-23 / Antimuscarinic compounds are drugs, which play important role on the central nervous system. The most widely used are atropine, escopolamine, homatropine and homatropine methylbromide. These drugs are utilized in several clinical situations, and, because of this, it is necessary to develop simple, fast and effective analytical procedures for the dosage of these pharmaceuticals. In this work, three procedures for the determination of homatropine methylbromide in the pharmaceuticals were described: two with turbidimetric detection, and one with condutometric detection. In the first procedure, the homatropine methylbromide (C16H21NO3.CH3Br)reacted with silicotungstic acid (H4Si(W3O10)4) forming a precipitated ([C16H21NO3.CH3]4[Si(W3O10)4](s)), which was measured at 410 nm. A volume of 125µL of the 1.0x10-3 mol L-1 silicotungstic acid solution and a sample volume of 375µL were introduced into a carrier at flow rates of 2.0 mL min-1 and 3.9 mL min-1 respectively and a tubular coiled reactor of 50 cm was used. A solution of 0.05 mol L-1 HCl was used to carry the sample and reagent solutions. The analytical curve was linear in the homatropine methylbromide concentration range from 8.1 x 10-5 to 2.2 x 10-4 mol L-1 (r=0,996), with a detection limit of 5.0 x 10-6 mol L-1 (3σB /slope). Relative standard deviations (RSD) of smaller than 1.5% were obtained for the homatropine methylbromide solutions in the concentrations of 1.08 x 10-4 and 1.62 x 10-4 mol L-1 (n=10). Recoveries ranging from 96.0 to 103.0% were obtained. This method was applied in the determination of this drug in the pharmaceuticals, with a sample throughput of 70 h-1.In the other flow injection procedure, the homatropine methylbromide (C16H21NO3.CH3Br) reacted with AgNO3 forming a precipitated AgBr(s), which was measured at 410 nm. A volume of 25µL of the 1.0x10-2 mol L-1 AgNO3 solution and a sample volume of 375µL were introduced into a carrier at flow rates of 2.0 mL min-1 and 3.9 mL min-1 respectively and a tubular coiled reactor of 50 cm was used. The analytical curve was linear in the homatropine methylbromide concentration range from 8.0 x 10-4 a 1.7 x 10-3 mol L-1 (r= 0,998), with a detection limit of 9.5 x mol L-1 10-5 (3σB /slope). Relative standard deviations (RSD) smaller than 2.0% were obtained for 1.2 x 10-3 and 1.5 x 10-3 mol L-1 homatropine methylbromide solutions (n=10). Recoveries ranging from 94.9 a 104,0% were obtained. This method was applied in the determination of this drug in the pharmaceuticals, with a sample throughput of 75 h-1. In the final condutometric procedure, 10 mL of either the sample solution or the homatropine methylbromide solution (C16H21NO3.CH3Br) was titrated with 1.0x10-3 mol L-1 AgNO3 at 200 rpm and 25°C. The LD was 1.0x10-4 mol L-1. / Os compostos antimuscarínicos são drogas que atuam no sistema nervoso parassimpático sendo a atropina, escopolamina, eucatropina, homatropina e metilbrometo de homatropina (MBH) as mais amplamente usadas. Uma vez que essas drogas têm sido empregadas em diversas situações clínicas, tornou-se necessário o desenvolvimento de procedimentos analíticos simples, rápidos e eficazes para o monitoramento desses fármacos. Nesta dissertação três procedimentos foram descritos para determinação de metilbrometo de homatropina em formulações farmacêuticas, dois em fluxo com detecção turbidimétrica e um com titulação condutimétrica. No primeiro procedimento o metilbrometo de homatropina (C16H21NO3.CH3Br) reagiu com o ácido silicotúngstico (H4Si(W3O10)4) formando um precipitado ([C16H21NO3.CH3]4[Si(W3O10)4](s)) que foi monitorado em 410 nm. Foi utilizado 125 µL de uma solução de ácido silicotúngstico 1,0x10-3 mol L-1 e um volume de amostra de 375µL, a uma vazão de 2,0 mL min-1 e 3,9 mL min-1 respectivamente, inseridos em um transportador de HCl 0,05 mol L-1, neste sistema também utilizou-se um reator de 50 cm. A curva analítica apresentou linearidade de 8,1 x 10-5 a 2,2 x 10-4 mol L-1 e a equação obtida foi A = - 0,17616 + 0,00662 [MBH], r= 0,996, onde A é a absorbância e [MBH] e a concentração molar de metilbrometo de homatropina. O limite de detecção (três vezes o desvio padrão do branco/inclinação da curva analítica) foi de 5,0 x 10-6 mol L-1 e um desvio padrão relativo (RSD) para soluções de metilbrometo de homatropina com concentrações iguais a 1,08 x 10-4 e 1,62 x 10-4 mol L-1. menor que 1,5 % (n= 10). Os índices de recuperação variaram de 96,0 a 103,0 %. O método foi empregado com sucesso na determinação desse fármaco em dois produtos farmacêuticos com umaeqüência de amostragem de 70 h-1.No segundo procedimento o metilbrometo de homatropina (C16H21NO3.CH3Br) reagiu com nitrato de prata (AgNO3) formando um precipitado AgBr(s) que foi monitorado em 410 nm. Foi utilizado 25 µL de solução de nitrato de prata 1,0x10-2 mol L-1 e um volume de amostra de 375µL, a uma vazão de 2,0 mL min-1 e 3,9 mL min-1 respectivamente, inseridos no transportador (água). Nesse sistema utilizou-se um reator de 200 cm. A curva analítica apresentou linearidade de 8,0 x 10-4 a 1,7 x 10-3 mol L-1 e a equação obtida foi A= - 0,978 + 1287,4 [MBH], r= 0,998, onde A é a absorbância e [MBH] é a concentração molar de metilbrometo de homatropina. O limite de detecção (três vezes o desvio padrão do branco/inclinação da curva analítica) foi de 9,5 x 10-5 mol L-1 e um desvio padrão relativo (RSD) para soluções de metilbrometo de homatropina com concentrações iguais a 1,2 x 10-3 e 1,5 x 10-3 mol L-1 menores que 2,0 % (n=10) foram obtidos. A percentagem de recuperação variou de 94,9 a 104,0 %. O método foi empregado com sucesso na determinação desse fármaco em dois produtos farmacêuticos com umaeqüência de amostragem de 75 h-1 No procedimento condutométrico 10 mL de amostra ou solução de metilbrometo de homatropina (C16H21NO3.CH3Br) foram tituladas com nitrato de prata (AgNO3) 1,0x10-3 mol L-1, a 200 rpm e a 25°C. O limite de detecção foi de 1,0 x 10-4 mol L-1. Os métodos propostos se mostraram concordantes com o método oficial de análise.

Submitted by Luis Guilherme Macena (guilhermelg2004@gmail.com) on 2013-05-07T13:58:14Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO - Karen Helene Asch.pdf: 1993056 bytes, checksum: 37006a8cb3f8fe11cf9d8147b382b8f8 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-05-07T13:58:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO - Karen Helene Asch.pdf: 1993056 bytes, checksum: 37006a8cb3f8fe11cf9d8147b382b8f8 (MD5) Previous issue date: 2011 / Fundação Oswaldo Cruz. Instituto Fernandes Figueira. Departamento de Ensino. Programa de Pós-Graduação em Saúde da Criança e da Mulher. Rio de Janeiro, RJ, Brasil

A adesão de plaquetas nas paredes dos vasos sanguíneos e subsequente agregação são eventos cruciais tanto na hemorragia e quanto na trombose. A hiperagregação (agregação excessiva) das plaquetas pode causar a formação de um trombo e a posterior oclusão dos vasos sanguíneos levando a um processo isquêmico. A terapia antiplaquetária com ácido acetilsalicílico reduz em até 25% o risco de infartos do miocárdio não-fatais, acidentes vasculares cerebrais isquêmicos ou mortes de causa vascular em pacientes de alto risco, independentemente do sexo ou idade. Para avaliar laboratorialmente a eficácia dessa terapêutica, o método mais utilizado é o teste de agregação plaquetária, que pode ser feito em duas metodologias, a turbidimétrica e a por impedância elétrica. Com esse cenário, o objetivo do estudo é comparar essas duas metodologias para a monitorização do tratamento. Para isso foram utilizadas amostras de sangue de 30 pacientes adultos (média de 42 anos) de ambos os sexos que fazem uso regular do fármaco e analisadas através das duas metodologias, tendo seus resultados analisados e comparados. Os resultados do estudo mostraram pouca diferença estatística significante (p<0,05) entre os dois métodos nos principais agentes estimulantes, indicando que o método de impedância elétrica pode ser utilizado em rotina laboratorial em substituição, ou em complementação, com a metodologia turbidimétrica para monitorar a terapia antiplaquetária a base de ácido acetilsalicílico / The adhesion of platelets in the blood vessel wall and subsequent aggregation are crucial events in both bleeding and thrombosis. The hyperaggregation (excessive aggregation) of platelets can cause the formation of a thrombus and subsequent occlusion of blood vessels leading to an ischemic process. Antiplatelet therapy with acetylsalicylic acyd reduces by 25% the risk of myocardial infarctions, non-fatal strokes or deaths from vascular causes in patients at high risk, regardless of sex or age. To laboratory evaluation of the effectiveness of this therapy, the method most used is the platelet aggregation test, which can be done in two methods, the turbidimetric and electrical impedance. With this scenario, the objective of the study is to compare these two methodologies for monitoring the treatment. For such purpose, blood samples from 30 adult patients (mean 42 years) of both sexes who make regular use of the drug was analyzed using the two methodologies, and their results was analyzed and compared. The studys results showed little difference statistically significant (p <0.05) between the two methods with the main stimulant agents, indicating that the method of electrical impedance can be used in routine laboratory instead or complementing the methodology of turbidimetric for monitor antiplatelet therapy by acetylsalicylic acyd

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DissEP.pdf: 1396653 bytes, checksum: 663940895afdaa334ba4420083e47789 (MD5) Previous issue date: 2004-02-17 / Financiadora de Estudos e Projetos / In this dissertation, three flow injection analysis methods for total polyphenol determination in tea and acacia s tannins commercial extracts were developed. The first method is based on the reaction between the polyphenol compounds and the metavanadate anion (VO3 -), yielding a colored product with strong absorption at 585 nm. In the flow injection system with merging zones employed, 500 µL of the sample solutions and 500 µL of 0.10 mol L-1 ammonium metavanadate solution were injected into the individual carrier solutions (deionised water). With the reaction development in a 150 cm coil reactor, the chromogenic product formed was monitored spectrophotometrically at 585 nm. The analytical curve was linear in the tannic acid concentrations ranging from 35.7 and 544 mgL-1 (2.1 x 10-5 and 3.2 x 10-4 mol L-1), with a detection limit of 12.9 mg L-1 (7.6x10-6 mol L-1). An analytical sampling of 70 determinations per hour was obtained with relative standard deviations smaller than 0.8 % for tannic acid solutions containing 81.7 and 493 mg L-1 (4.8 x 10-5 and 2.8 x 10-4 mol L-1). Because the recoveries from tea samples varied between 87.3 and 94.2%, the standard multiple additions method was used for total polyphenol determination in these samples. In the second proposed method the same reagent was employed in the determination of the polyphenol compounds. In this case, a single-line flow injection system coupled with a solid phase reactor containing silver metavanadate (AgVO3) immobilized in polyesther resin was employed. In this system, volumes of 500 µL of the sample solutions injected into the carrier solution were converted in the chromogenic product in the solid phase reactor with 10 cm of length containing particles with size ranging from 250 and 300 µm of AgVO3 immobilized in polyesther. The analytical curve was linear in the tannic acid concentrations ranging from 88.5 and 2041 mg L-1 (5.2 x 10-5 e 1.2 x 10-3 mol L-1), with a detection limit of 10.0 mg L-1 (5.9 x 10-6 mol L-1). An analytical sampling of 35 determinations per hour was obtained with relative standard deviations smaller than 1.1 % for tannic acid solutions containing 175 and 1350 mg L-1 (1.0 x 10-4 and 7.9 x 10-4 mol L-1). Since the recoveries from acacia s tannin extracts of samples varied between 98.5 and 104%, the total polyphenol analysis were made directly by the use of an analytical curve. In the third developed method, a flow injection analysis system was employed for turbidimetric determination of total polyphenols, using copper(II) íons in a acetate medium as the precipitin reagent. In this system, 350 µL of reagent solution (0.10 mol L-1 copper(II)) and 350 µL of the sample solutions were injected simultaneously into a merging zones system. After a previous mixing at a 50 cm coil reactor, they receive an 0.10 mol L-1 ammonium acetate solution by confluence. The precipitate formed at a 100 cm coil reactor, was monitored turbidimetrically at 500 nm. A 10-2 mol L-1 HNO3 solution flowing intermittently at 3.5 mL min-1 was used to wash the flow system during the sampling. The determination of polyphenol compounds in tea samples in the concentration range from 18.0 to 725 mg L-1 (1.1 x 10-5 e 4.3 x 10-4 mol L-1) with a detection limit of 6.49 mg L-1 (3.8 x 10-6 mol L-1) for standard solutions of tannic acid was obtained. The analytical sampling was 90 determinations per hour with relative standard deviations smaller than 0.9 % for tannic acid solutions containing 109 and 357 mg L-1 (6.4 x 10-5 and 2.1 x 10-4 mo L-1) (n = 10). Because the recoveries from tea samples varied between 91.4 and 111%, the standard multiple additions method was used for total polyphenol determination in these samples. The results of the sample analysis obtained with the proposed methods were compared with those obtained employing the AOAC official method with relative errors smaller than 6.4%. / Descrevem-se neste trabalho três métodos de análises por injeção em fluxo para determinação de polifenóis totais em amostras de chás e extratos comerciais tanínicos de acácia. O primeiro método baseia-se na reação de oxidação entre os compostos polifenólicos e o ânion metavanadato (VO3 -), originando como produto um cromóforo com forte absorção em 585 nm. No sistema em fluxo com zonas coalescentes empregado, volumes de 500 µL de soluções das amostras e 500 µL de solução de metavanadato de amônio (NH4VO3) 0,10 mol L-1 foram injetados em soluções transportadoras (água deionizada) individuais, percorrendo distâncias iguais até se encontrarem em um ponto de confluência. Com o desenvolvimento da reação em um reator helicoidal de 150 cm, o cromóforo formado foi então monitorado espectrofotometricamente naquele comprimento de onda. A curva analítica foi linear no intervalo de concentrações de ácido tânico entre 35,7 e 544 mg L-1 (2,1 x 10-5 e 3,2 x 10-4 mol L-1), com um limite de detecção de 12,9 mg L-1 (7,6 x 10-6 mol L-1). A freqüência de amostragem foi de 70 determinações por hora com desvios padrões relativos menores que 0,8% para soluções de ácido tânico de 81,7 e 493 mg L-1 (4,8 x 10-5 e 2,8 x 10-4 mol L-1) (n = 10). Como as recuperações em amostras de chás variaram entre 87,3 e 94,2%, empregou-se o método de adição múltipla de padrões para determinação de polifenóis totais nessas amostras. No segundo método proposto empregou-se o mesmo reagente para determinação de polifenóis em amostras de extratos de acácia. A reação química envolvida no segundo método proposto também tem como base a oxidação dos compostos polifenólicos com o ânion metavanadato (VO3 -). Nesse caso, empregou-se um sistema em fluxo de linha única com um reator em fase sólida acoplado contendo metavanadato de prata (AgVO3) imobilizado em resina de polié ster. Nesse sistema, os volumes de 500 µL das soluções das amostras injetadas no fluxo transportador (água deionizada), ao passarem pelo reator em fase sólida com comprimento de 10 cm contendo partículas com tamanhos entre 250 e 300 µm, são convertidas no cromóforo monitorado em 585 nm. A curva analítica foi linear na faixa de concentrações de ácido tânico de 88,5 a 2041 mg L-1 (5,2 x 10-5 e 1,2 x 10-3 mol L-1), com limite de detecção de 10,0 mg L-1 (5,9 x 10-6 mol L-1) e desvios padrões relativos menores que 1,1% (n = 11) para soluções de referência de ácido tânico de 175 e 1350 mg L-1 (1,0 x 10-4 e 7,9 x 10-4 mol L-1). A freqüência de amostragem foi de 35 determinações por hora com recuperações em amostras de extratos tanínicos de acácia entre 98,5 e 104%. A análise de polifenóis totais nessas amostras foi feito diretamente empregando-se uma curva analítica. No terceiro método desenvolvido, um sistema de análises por injeção em fluxo foi empregado para determinação turbidimétrica de polifenóis totais utilizando como reagente precipitante íons Cu2+ em meio de acetato. Nesse sistema, solução do reagente Cu2+ 0,10 mol L-1 e da amostra são injetados simultaneamente em zonas coalescentes em volumes de 350 µL. Após uma prévia mistura em um reator helicoidal de 50 cm, recebem por confluência solução de acetato de amônio 0,10 mol L-1. O precipitado formado em um reator helicoidal de 100 cm foi monitorado turbidimétricamente em 500 nm. Adaptou-se um fluxo intermitente de HNO3 10-2 mol L-1 que efetuasse a limpeza do sistema durante a amostragem. O método foi aplicado em análise de amostras de chás, apresentando uma curva analítica linear no intervalo de concentrações de ácido tânico de 18,0 a 725 mg L-1 (1,1 x 10-5 e 4,3 x 10-4 mol L-1), limite de detecção de 6,49 mg L-1 (3,81 x 10-6 mol L-1) e freqüência de amostragem de 90 determinações por hora. Os desvios padrões relativos foram menores que 0,9% para soluções de ácido tânico de 109 e 357 mg L-1 (6,4 x 10-5 e 2,1 x 10-4 mo L-1) (n = 10). As recuperações nas amostras de chás variaram entre 91,4 e 111%. Sendo assim, empregou-se o método de adição múltipla de padrões para determinação de polifenóis totais em amostras de chás. Os resultados das análises de amostras obtidos empregando-se os três métodos desenvolvidos foram comparados com aqueles obtidos empregando o método oficial da AOAC, com erros relativos menores que 6,4%.

A adesão de plaquetas nas paredes dos vasos sanguíneos e subsequente agregação são eventos cruciais tanto na hemorragia e quanto na trombose. A hiperagregação (agregação excessiva) das plaquetas pode causar a formação de um trombo e a posterior oclusão dos vasos sanguíneos levando a um processo isquêmico. A terapia antiplaquetária com ácido acetilsalicílico reduz em até 25% o risco de infartos do miocárdio não-fatais, acidentes vasculares cerebrais isquêmicos ou mortes de causa vascular em pacientes de alto risco, independentemente do sexo ou idade. Para avaliar laboratorialmente a eficácia dessa terapêutica, o método mais utilizado é o teste de agregação plaquetária, que pode ser feito em duas metodologias, a turbidimétrica e a por impedância elétrica. Com esse cenário, o objetivo do estudo é comparar essas duas metodologias para a monitorização do tratamento. Para isso foram utilizadas amostras de sangue de 30 pacientes adultos (média de 42 anos) de ambos os sexos que fazem uso regular do fármaco e analisadas através das duas metodologias, tendo seus resultados analisados e comparados. Os resultados do estudo mostraram pouca diferença estatística significante (p<0,05) entre os dois métodos nos principais agentes estimulantes, indicando que o método de impedância elétrica pode ser utilizado em rotina laboratorial em substituição, ou em complementação, com a metodologia turbidimétrica para monitorar a terapia antiplaquetária a base de ácido acetilsalicílico / The adhesion of platelets in the blood vessel wall and subsequent aggregation are crucial events in both bleeding and thrombosis. The hyperaggregation (excessive aggregation) of platelets can cause the formation of a thrombus and subsequent occlusion of blood vessels leading to an ischemic process. Antiplatelet therapy with acetylsalicylic acyd reduces by 25% the risk of myocardial infarctions, non-fatal strokes or deaths from vascular causes in patients at high risk, regardless of sex or age. To laboratory evaluation of the effectiveness of this therapy, the method most used is the platelet aggregation test, which can be done in two methods, the turbidimetric and electrical impedance. With this scenario, the objective of the study is to compare these two methodologies for monitoring the treatment. For such purpose, blood samples from 30 adult patients (mean 42 years) of both sexes who make regular use of the drug was analyzed using the two methodologies, and their results was analyzed and compared. The studys results showed little difference statistically significant (p <0.05) between the two methods with the main stimulant agents, indicating that the method of electrical impedance can be used in routine laboratory instead or complementing the methodology of turbidimetric for monitor antiplatelet therapy by acetylsalicylic acyd

A cistatina C sérica tem sido apontada como um marcador de filtração glomerular. Neste trabalho realizamos a validação de um método específico e automatizado, a imunonefelometria, mensurando os níveis séricos de cistatina C através do nefelômetro da empresa Behring (BN II). O ensaio perfaz o intervalo de referência de 0.23-7.25 mg/L, até sete vezes acima dos limites considerados normais. A imprecisão intra e interensaio foram de 8,73% and 5,38% , respectively. A recuperação analítica de cistatina C após adição de controle foi entre 86,7 % e 98% (média 92,3%). A estabilidade da cistatina C a temperatura ambiente, sob refrigeração e sob congelamento foi testada. A perda mais significativa foi encontrada nas amostras armazenadas sob temperatura ambiente, onde foi perdido até 10% da concentração inicial. Nós encontramos CV de 14,79 % para sensibilidade analítica. Durante todo o processo nós comparamos os resultados com o controle de qualidade e obtivemos bons resultados. Depois destes testes, nós comparamos as correlações em 3 grupos de pacientes transplantados renais sob diferentes esquemas de imunossupressão (n=197) [azatioprina (n=36), micofenolato mofetil (n=131) ou sirolimus (n=30)], entre as equações de estimativa de filtração glomerular( Cockroft Gault, Nankivell e MDRD) e cistatina C sérica ou creatinina sérica. Nós concluimos que o ensaio nefelométrico cistatina C pode perfeitamente ser adequado à nossa rotina laboratorial e as correlações entre creatinina sérica e as diferentes equações de estimativa de filtração glomerular são melhores do que quando comparamos as mesmas à cistatina C nos 3 grupos independentemente da terapia imunossupressora utilizada. / Serum cystatin C has been suggested as a marker of glomerular filtration rate (GFR). We describe a validation of an automated and rapid particle-enhanced nephelometric immunoassay (PENIA) for measuring serum cystatin C on the Behring nephelometer (BN II). The assay covers the range 0.23-7.25 mg/L, up to seven times the upper limit of normal. The intra- and interassay imprecision are 8,73% and 5,38% , respectively. The analytical recovery by cystatin C addition between 86,7% and 98% (mean 92,3%). The estability of cistatyn C room temperature, refrigerator temperature and frozen temperature was tested. The higher lost was when we stored sample in a room temperature, when we can lost until 10% of initial concentration. We found CV of 14,79 % for analytical sensibility. During all the process we compare the results with a quality control and we obtained good results. After this validation, we have compared the correlation, in 3 different patients groups after renal transplant (n=197) were using different imunossupressors [azatioprine (n=36), micophenolic acid (n=131) or sirolimus (n=30), between glomerular filtration equations (Cockroft Gault, Nankivell and MDRD) and cystatin C or creatinine serum levels. We concluded cystatin C assay may be perfectly used in our laboratory and the correlation between serum creatinine and glomerular filtration equations are better then cystatin C at the same groups independent of imunosupressor therapy.

O trabalho tem como objetivo determinar a influencia da concentração de monoestearato de sorbitano, componente do núcleo oleoso das nanocápsulas, na cinética de liberação do éster etílico de indometacina a partir de nanocápsulas de poli(ε-caprolactona) (PCL). Com este propósito o éster etílico de indometacina foi associado a cada sistema e sua hidrólise alcalina foi realizada para simular uma condição sink. A velocidade de consumo do éster etílico de indometacina foi menor conforme o aumento da concentração do monoestearato de sorbitano. O tempo de meia-vida do consumo do éster etílico de indometacina associado as nanocápsulas foi relacionado com a concentração do monoestearato de sorbitano, sendo maior, enquanto maior a concentração do monoestearato. O mecanismo de liberação foi determinado como sendo transporte anômalo. Foi observada uma relação linear direta entre o aumento da concentração do monoestearato de sorbitano e a concentração de partículas nas suspensões de nanocápsulas (R2=0,9711). Mistura de outras nanopartículas que não as nanocápsulas, foram observadas e caracterizadas. O fluxo difusional do éster a partir das nanocápsulas foi determinado e diminuiu significativamente com o aumento da concentração do monoestearato, devido a mudanças na viscosidade do núcleo das nanocápsulas com o aumento da concentração do monoestearato de sorbitano. Por fim, os resultados demonstraram que o principal fator que contribui para o retardo no tempo para o consumo do éster etílico de indometacina é a relação direta entre a concentração do monoestearato de sorbitano e a permeabilidade das nanocápsulas (R=0,9894). / The aim of this work was to evaluate the influence of the sorbitan monoestearate concentration, one of the components of the oil core of the nanocapsules, in the release kinetic of the indomethacin ethyl ester-loaded poli(ε-caprolactone) nanocapsules. In this way, the indomethacin ethyl ester was entrapped within each system and its alkaline hydrolysis was carried out to simulate a sink condition. The rate for the indomethacin ethyl ester consumption decreased with the increase in sorbitan monostearate concentrations. The indomethacin ethyl ester half-live was related to the sorbitan monostearate concentration, increasing as the sorbitan monostearate concentration increased. The drug release mechanism was determined as anomalous transport. Linear correlations were obtained between the increase in the sorbitan monostearate concentration and the particles concentration in the suspensions (R2 = 0.9711). Mixture of different nanoparticles that are not nanocapsules were observed by density gradient and characterized. The indomethacin ethyl ester fluxes from the nanocapsules were determined and presented a decrease of the flux as the sorbitan monostearate concentration increased. This result was related to changes in the oil core viscosity caused by the variation of the sorbitan monostearate concentration. Finally, the results demonstrated that the main factor that contributes for the delaying in the time for the indometahcin ethyl ester consumption was the direct relation between the sorbitan monostearate concentration and the apparent permeability of the nanocapsules (R2 = 0.9894).

O trabalho tem como objetivo determinar a influencia da concentração de monoestearato de sorbitano, componente do núcleo oleoso das nanocápsulas, na cinética de liberação do éster etílico de indometacina a partir de nanocápsulas de poli(ε-caprolactona) (PCL). Com este propósito o éster etílico de indometacina foi associado a cada sistema e sua hidrólise alcalina foi realizada para simular uma condição sink. A velocidade de consumo do éster etílico de indometacina foi menor conforme o aumento da concentração do monoestearato de sorbitano. O tempo de meia-vida do consumo do éster etílico de indometacina associado as nanocápsulas foi relacionado com a concentração do monoestearato de sorbitano, sendo maior, enquanto maior a concentração do monoestearato. O mecanismo de liberação foi determinado como sendo transporte anômalo. Foi observada uma relação linear direta entre o aumento da concentração do monoestearato de sorbitano e a concentração de partículas nas suspensões de nanocápsulas (R2=0,9711). Mistura de outras nanopartículas que não as nanocápsulas, foram observadas e caracterizadas. O fluxo difusional do éster a partir das nanocápsulas foi determinado e diminuiu significativamente com o aumento da concentração do monoestearato, devido a mudanças na viscosidade do núcleo das nanocápsulas com o aumento da concentração do monoestearato de sorbitano. Por fim, os resultados demonstraram que o principal fator que contribui para o retardo no tempo para o consumo do éster etílico de indometacina é a relação direta entre a concentração do monoestearato de sorbitano e a permeabilidade das nanocápsulas (R=0,9894). / The aim of this work was to evaluate the influence of the sorbitan monoestearate concentration, one of the components of the oil core of the nanocapsules, in the release kinetic of the indomethacin ethyl ester-loaded poli(ε-caprolactone) nanocapsules. In this way, the indomethacin ethyl ester was entrapped within each system and its alkaline hydrolysis was carried out to simulate a sink condition. The rate for the indomethacin ethyl ester consumption decreased with the increase in sorbitan monostearate concentrations. The indomethacin ethyl ester half-live was related to the sorbitan monostearate concentration, increasing as the sorbitan monostearate concentration increased. The drug release mechanism was determined as anomalous transport. Linear correlations were obtained between the increase in the sorbitan monostearate concentration and the particles concentration in the suspensions (R2 = 0.9711). Mixture of different nanoparticles that are not nanocapsules were observed by density gradient and characterized. The indomethacin ethyl ester fluxes from the nanocapsules were determined and presented a decrease of the flux as the sorbitan monostearate concentration increased. This result was related to changes in the oil core viscosity caused by the variation of the sorbitan monostearate concentration. Finally, the results demonstrated that the main factor that contributes for the delaying in the time for the indometahcin ethyl ester consumption was the direct relation between the sorbitan monostearate concentration and the apparent permeability of the nanocapsules (R2 = 0.9894).