A superfície das folhas de árvores (filosfera) oferece uma grande área de habitat para os micro-organismos, mas constitui um ambiente extremo. O desenvolvimento de comunidades microbianas é dependente de fonte de carbono e de certos nutrientes essenciais inorgânicos comumente liberados pela planta para a sua superfície. No entanto, um grupo especial de bactérias, Cyanobacteria, é menos dependente da planta para sua nutrição, pois vários destes organismos são autotróficos para carbono e nitrogênio. Portanto, Cyanobacteria é particularmente interessante para se avaliar neste ambiente. Neste estudo, linhagens de cianobactérias presentes na superfície das folhas secretoras de sal da planta de manguezal Avicennia schaueriana foram isoladas e caracterizadas morfológica, molecular e ultraestruturalmente. O potencial destes isolados para sintetizar moléculas bioativas também foi avaliado. Para isso, folhas de A. schaueriana foram coletadas em um manguezal com histórico de contaminação por petróleo, localizado próximo ao Rio Iriri, em Bertioga-SP. O isolamento das cianobactérias foi realizado usando quatro meios de cultura (BG-11, SWBG-11, BG-11o e SWBG-11o) e dois métodos: a) esfregaço das folhas nos meios sólidos em placas de Petri; e b) submersão das folhas em frascos Erlenmeyer contendo meios líquidos. Após a obtenção de culturas puras, os isolados foram crescidos em meios líquidos, as células foram concentradas e usadas para extração de DNA genômico. O gene de RNAr 16S de cada isolado foi amplificado por PCR usando iniciadores específicos (27F/1494Rc), clonado e sequenciado. As sequências de RNAr 16S foram usadas na construção de árvore filogenética. O potencial dos isolados para sintetizar moléculas bioativas foi acessado pela amplificação de PCR usando iniciadores específicos para sequências gênicas codificadoras de peptídeo sintetase (NRPS), policetídeo sintase (PKS), cianopeptolina, aeruginosina, saxitoxina, anatoxina-a/homoanatoxina-a e microcistina. Como resultado, trinta morfotipos foram isolados em meio líquido e quatro em meio sólido. Estes morfotipos foram identificados como pertencentes a quatro ordens diferentes (12 Nostocales, 9 Pseudanabaenales, 8 Chroococcales e 5 Oscillatoriales). Entre os isolados, alta abundância de linhagens potencialmente fixadoras de N2 foi encontrada, indicando que elas possivelmente são uma importante fonte de nitrogênio neste habitat. As sequências do gene de RNAr 16S de vinte e quatro isolados ficaram distribuídas em onze clados distintos na árvore filogenética e mostraram baixas similaridades com gêneros já descritos. Na análise da ultraestrutura destas linhagens, destacou-se a presença de grânulos de elevado volume em uma cianobactéria unicelular e de um arranjo de tilacoides incomum em uma cianobactéria filamentosa homocitada com morfologia aparentemente simples. Sequências gênicas codificadoras de PKS foram detectadas em dezessete linhagens, de aeruginosina em sete linhagens e de cianopeptolina em dez linhagens. Entretanto, sequências gênicas codificadoras de NRPS e das cianotoxinas microcistina, saxitoxina e anatoxina-a/homoanatoxina-a não foram detectadas. A superfície das folhas de A. schaueriana apresenta elevado número de cianobactérias não descritas, provavelmente um resultado das condições peculiares tanto da filosfera quanto do manguezal estudado. Este é o primeiro relato de isolamento de cianobactérias da superfície de folhas de A. schaueriana / The tree leaf surface (phyllosphere) offer a large habitat area for microorganisms but constitute an extreme environment. The development of microbial communities is dependent of carbon source and certain essential inorganic nutrients commonly released from the plant to its surface. However, a special group of bacteria, Cyanobacteria, is less dependent of the plant for their nutrition since several of these organisms are autotrophic for carbon and nitrogen. Therefore, cyanobacteria are particularly interesting to be evaluated in this environment. In this study, cyanobacterial strains present in the salt-excreting leaf surface of the mangrove Avicennia schaueriana were isolated and morphologically, molecularly and ultrastructurally characterized. The potential of these isolates to synthesize bioactive molecules was also evaluated. To this purpose, A. schaueriana leaves were collected in a mangrove with history of oil contamination located near to the Iriri river in Bertioga-SP. The isolation of cyanobacteria was achieved using four culture media (BG-11, SWBG-11, BG-11o and SWBG-11o) and two methods: a) smearing of leaves into solid media in Petri dishes; and b) submersion of leaves in Erlenmeyer flasks containing liquid media. After obtaining pure cultures, the isolates were grown into liquid media, and the cells were concentrated and used for genomic DNA extraction. The gene of rRNA 16S of each isolate was amplified by PCR using specific primers (27F/1494Rc), cloned and sequenced. The 16S rRNA sequences were used for the construction of a phylogenetic tree. The potential of the isolates to synthesize bioactive molecules was assessed by PCR amplification using primers specific for gene sequences encoding non-ribosomal peptide synthetase (NRPS), polyketide synthase (PKS), cyanopeptolin, aeruginosin, saxitoxin, anatoxin-a/homoanatoxin-a and microcystin. As results, thirty morphotypes were isolated in liquid media and four in solid media. These morphotypes were identified as belonging to four different orders (12 Nostocales, 9 Pseudanabaenales, 8 Chroococcales and 5 Oscillatoriales). Among the isolates, it was found a high abundance of potentially N2-fixing strains, what indicates that they possibly are an important source of nitrogen in this habitat. The 16S rRNA gene sequences of twenty-four isolates were distributed into eleven distinct clades in the phylogenetic tree and showed low similarities with described genera. In the ultrastructural analyses of these strains, the highlight was the presence of granules of high volume in a unicellular cyanobacterium and an unusual thylakoid arrangement in a homocytous filamentous cyanobacterium with apparently simple morphology. Gene sequences encoding for PKS were detected in seventeen strains, for aeruginosine in seven strains and cyanopeptolin in ten strains. Gene sequences encoding for NRPS and for the cyanotoxins microcystin, saxitoxin, and anatoxin-a/homoanatoxin-a were not found. The leaf surface of A. schaueriana presents a high number of undescribed cyanobacteria, probably as a result of the peculiar conditions of the phyllosphere and the studied mangrove. This is the first report of isolation of cyanobacteria from the leaf surface of A. schaueriana

Popularmente conhecidas como flowering stones ou ice plants, as plantas da família Aizoaceae (Caryophyllales) caracterizam-se por suas folhas suculentas morfologicamente diversas. Com centro de origem no sul da África, a maior parte das espécies pertence a subfamília Ruschioidaeae, com plantas de folhas dorsiventrais, cilíndricas e trígonas, sendo marcante a ocorrência de conação entre as bases de folhas opostas, e a presença de feixes vasculares periféricos, com xilema endoscópico. Nosso estudo mostra que a formação dos feixes vasculares periféricos é posterior ao estabelecimento da blastozona marginal, e que tecidos da face abaxial diferenciam-se no domínio adaxial da folha durante a histogênese da lâmina. Sugerimos que um mecanismo de abaxialização foliar esteja vinculado à formação da margem foliar de Aizoaceae. O xilema dos feixes vasculares periféricos é formado wide band tracheids - \"wbts\", um tipo especializado de elemento traqueal com acentuado espessamento da parede secundária. \"Wbts\" vinculam-se a órgãos suculentos e ocorrem somente em Aizoaceae, Anacampserotaceae e Cactaceae, tendo despertado interesse dos pesquisadores quanto à sua origem e função. A partir de análises comparativas de anatomia, ultraestrutura e de imunomarcação de pectina, concluímos que a definição de \"wbts\" deve ser mantida nas famílias, no entanto, destacamos a possível ocorrência de idioblastos traqueoidais na região de medular de algumas espécies. Este trabalho contribui no conhecimento da anatomia e ontogênese foliar de Aizoaceae, abrindo oportunidades de estudos sobre os mecanismos envolvidos no estabelecimento da dorsiventralidade em folhas de simetria radial. A análise comparativa de wide-band tracheids \"wbts\" em Aizoaceae, Anacampserotaceae e Cactaceae traz contribuições ao conhecimento sobre sua distribuição e características nos diferentes órgãos / Popularly known as flowering stones or ice plants, the species of Aizoaceae (Caryophyllales) are characterized by morphologically diverse succulent leaves. With center of origin in Southern Africa, most species are classified in the subfamily Ruschioidaeae, which present dorsiventral, cylindrical and three-angled leaved plants, being remarkable the occurrence of conation between the bases of opposite leaves, and the presence of peripheral vascular bundles with endoscopyc xylem. Our study shows that the formation of peripheral vascular bundles occurs after the marginal blastozone establishment, and abaxial tissues differentiate in the adaxial domain of the leaf, during blade histogenesis. We suggest that an abaxialization mechanism is involved in the formation of leaf margins in Aizoaceae. The xylem of peripheral vascular bundles is composed by wide band tracheids - wbts, a specialized type of cell that occurs only in Aizoaceae, Cactaceae Anacampserotaceae. The origin and function of this cell type has been the subject of study by some researchers. By means of comparative analysis of anatomy, ultrastructure and pectin immunolabeling, we conclude that the definition of \"wbts\" should be kept in the three families; however, we highlight the possibility of idioblasts tracheids in the some cases. This work contributes to the knowledge of leaf anatomy and ontogenesis in Aizoaceae, opening opportunities for studies on the mechanisms involved in the establishment of dorsiventrality in leaves with radial symmetry. A comparative analysis of wbts in Aizoaceae, Cactaceae Anacampserotaceae brings contributions to knowledge about their distribution and characteristics in different organs

Os tendões são tecidos de transição das forças contráteis geradas pelos músculos e as transferindo para os ossos, podendo assim gerar movimento. A região em que o tecido tendíneo se insere ao ósseo é chamada de junção osteotendínea ou entese. Estas junções podem ser classificadas como fibrosas ou fibrocartilaginosas, as fibrosas são aquelas em que os tendões e/ou ligamentos se inserem no eixo (diáfise) dos ossos longos e as fibrocartilaginosas a inserção ocorre nas epífises dos ossos longos ou nos ossos curtos. Este estudo tem como propósito analisar as fibras colágenas e as células presentes na junção osteotendínea, utilizando microscopia de luz com as colorações de Hematoxilina-eosina, Azocarmim, Picro-sírius e Tricromo de Masson e os aspectos ultraestruturais empregando os métodos de microscopia eletrônica de varredura e de transmissão. Foram utilizados 30 ratos Wistar machos, sendo 15 adultos com idade de 4 meses (grupo A) e 15 idosos com idade de 18 meses (grupo B), sendo utilizados 5 ratos de cada grupo para microscopia de luz, 5 para microscopia eletrônica de varredura e 5 para microscopia eletrônica de transmissão. Os membros posteriores dos ratos foram retirados, dissecados e desmineralizados com EDTA a 7% para microscopia de luz e EDTA 0,15M pH 7,4 para microscopia eletrônica de transmissão durante 4 semanas, não foi necessário desmineralizar as amostras para microscopia eletrônica de varredura. Cortes de 6 m foram realizados e montados em lâminas histológicas para análise em microscópio de luz, a técnica de criofratura em nitrogênio líquido foi realizada para análises em microscópio eletrônico de varredura e cortes de 60 nm foram realizados, montados em telas de cobre de 200 mesh (EMS) para análises em microscópio eletrônico de transmissão. O processo de envelhecimento mostrou alterações das fibrilas colágenas, em que o tipo I predomina no grupo adulto e o tipo III no idoso, diminuição na quantidade de células de fibrocartilagem, processos citoplasmáticos destas células curtos e em número reduzido e uma diminuída capacidade de síntese devido a aparelhos de Golgi menores, poucas cisternas de retículo endoplasmático granular e escassas mitocôndrias. / Tendons are transition tissues of contractile forces generated by muscles and transferring to bone, generating this way move. The region where tendon attach to bone is called bone-tendon junction or enthesis. These junctions can be classified as fibrous or fibrocartilaginous, the fibrous are those in which tendons/ligaments are attached in the shaft (diaphysis) of the long bones and fibrocartilaginous attachment occur in the epiphyses of the long bones or short bones. This study aims to analyze collagen fibers and the cells present in the bone-tendon junction, using light microscope with Hematoxylineosin, Azocarmine, Picrosirius red and Masson\'s trichrome staining and ultrastructural aspects using scanning electron microscope, transmission electron microscope methods. Thirty male Wistar rats were using, 15 adults rats at 4 months-old (A group) and 15 old rats at 18 months-old (B group), were used 5 rats of each group to light microscopy, 5 rats to scanning electron microscopy and 5 rats to transmission electron microscopy. The hind limbs of the rats were removed, dissected and demineralized using 7% EDTA solution to light microscopy and 0,15M pH 7,4 EDTA solution to transmission electron microscopy for 4 weeks, was not necessary demineralize the samples to scanning electron microscopy. Cut in slices 6 m thickness were made and mounted on histological slides to analyze in light microscope, freeze-fracture technique with liquid nitrogen was performed to analysis in scanning electron microscope and cuts in slices 60 nm thickness were made, mounted on copper grids (200-mesh - EMS) to analysis in transmission electron microscope. The aging process showed changes of the collagen fibrils, in which type I predominates on adult groups and the type III on the old group, decrease in the amount of the fibrocartilage cells, few and short cytoplasmic processes of this cells and a decreased synthesis capacity due a small Golgi apparatus, a few cisternae of rough endoplasmatic reticulum and few mitochondria.

Tendões são descritos como tecido conjuntivo denso modelado que inserem os músculos aos ossos. Sua principal função é servir como tecido de transição das forças contráteis geradas pelos músculos aos ossos, podendo assim gerar movimentos. Entre todos os tendões, o calcâneo é um dos mais frequentemente lesados. As lesões ocorrem principalmente em homens e são mais frequentes entre a terceira e quarta década de vida. Dentre os vários métodos de sutura existentes, do ponto de vista clínico, a de Kessler-Tajima com os nós entre os cotos é muito utilizada por evitar o estrangulamento da microcirculação. Após a cirurgia o paciente retorna ao trabalho após 85 dias, em média, podendo atingir até 270 dias. O objetivo do presente estudo foi testar a eficiência da aplicação da proteína biocompatível F1, uma proteína extraída a partir do látex natural da Hevea brasiliensis, sobre tendões lesados, buscando uma melhora no reparo, assim como, a influência da sutura-U e de Kessler-Tajima. Alterações musculares decorrentes da lesão no tendão também foram avaliadas. Para isso, utilizamos ratos Sprague Dawley machos de 3 meses, que foram submetidos a tenotomia completa, a lesão foi corrigida com ambas as suturas, seguido da aplicação da proteína e avaliados após duas e quatro semanas. As técnicas utilizadas para análises no tendão foram as de microscopia de luz, microscopia eletrônica de varredura e transmissão, bem como, a síntese de colágeno tipos I e III, TIMP-1 e 2, MMP-2 e 9 por western blot. Para analisar as alterações musculares, a expressão dos genes MuRF1 e Atrogin1 foram quantificadas por RT-qPCR, seguido de análises de contração muscular máxima e teste de fadiga. Os resultados sugerem uma melhora no reparo do tendão no grupo que utilizamos a sutura-U associada à proteína após quatro semanas, devido ao aumento na síntese de colágeno tipo I e a diminuição de MMP-9, assim como, a capacidade de contração muscular máxima retorna aos níveis do grupo controle. A sutura-U também influencia menos na fadiga muscular. / Tendons are described as dense modeled connective tissue which insert the muscles to the bones. Its main function is to serve as transition tissue of the contractile forces generated by muscles to the bones, and thus generate movements. Among all the tendons, the calcaneal is the most frequently injured one. The lesions occur mainly in men and are more frequent between the third and fourth decade of life. Among the several existing suture methods, from a clinical point of view, the Kessler-Tajima with the nodes between the stumps is used to a great extent in order to avoid the microcirculations strangling. After surgery, the patient returns to work after 85 days, on average, and can reach up to 270 days. The objective of this study was to test the efficiency of the application of biocompatible F1 protein, a protein extracted from natural latex from the Hevea brasiliensis, on injured tendons, seeking an improvement in the repair, as well as the influence of the suture-U and Kessler-Tajima. Muscle changes arising from the tendon injury were also evaluated. For this reason, Sprague Dawley male rats at 3 mounths-old were used, which underwent complete tenotomy, the lesion was corrected with both sutures, followed by the application of protein and evaluated after two and four weeks. The techniques used for analyzes in the tendon were the light microscopy, scanning electron microscopy and transmission, as well as the synthesis of collagen types I and III, TIMP-1, -2, MMP-2, and -9 by Western blot. In order to analyze the muscular alterations, the expression of genes MuRF1 and Atrogin1 were quantified by RT-qPCR, followed by analysis of maximum muscle contraction and fatigue testing. The results suggest an improvement in the tendon repair in the group that the suture-U was used associated with protein after four weeks, due to the increase in the synthesis of collagen type I and the decrease of MMP-9, as well as the ability of maximum muscle contraction to return to the levels of the control group. The suture-U also influences on less muscle fatigue.

Verificou-se o metabolismo e as repercussões morfológicas no timo de forma qualitativa e quantitativa através de morfometria e estereologia.Utilizaram-se 30 ratos wistar () nos grupos Nutrido (N=10), Desnutrido (D=10) e Renutrido (R=10). O peso corporal e a ingestão foi maior no N, menor no D, e os R apresentaram valores médios em relação a estes grupos. Todos os outros parâmetros (ingestão de água, excreção de fezes e urina, %ingestão/peso corporal, %fezes/ingestão, água/peso corporal, %urina/água consumida e peso tímico) não obtiveram diferença estatística entre o N e R. O grupo D mostrou exuberante alteração nos componentes elásticos e fibrosos, menor calibre dos seus vasos, atrofia dos lóbulos tímicos (com limite córtex-medular muitas vezes indefinido), e grande quantidade de timócitos em apoptose no córtex e na medula. Poucos corpúsculos tímicos foram verificados no grupo D, diferindo dos animais N e R. Deste modo, afirma-se que os animais R conseguiram restituir a morfologia da glândula após intervenção nutricional. / The Metabolism and morphologic repercussions on thymus were verified in a qualitative and quantitative way by morfometric and stereologycal assessment. 30 wistar rats were used () in the Nourishment (N=10), Undernourishment (UN=10) and Re-nourishment (RN=10) groups. The body weight and ingestion were higher in N, lower in UN, and RN presented medium values in relation to the others groups. All the addicional parameters as water ingestion, faeces and urine excrecion, %ingestion/corporal weigh, %faeces/ingestion, water/corporal weight, %urine/water consumed and thymic weight, had no statistics difference between N and RN. The UN group showed exuberant modification on elastic and fibrous components, smaller caliber of their vessels, thymic lobule atrophy (with many times indefinite cortex-medular limit), and apoptose of timocytes in the cortex and medulla. Few thymic corpuscles were verified in UN group differing of the N and RN. Therefore, after nutricional intervencional, the gland morphology was reestablished.

Orientador: Tatiane Maria Rodrigues / Resumo: Espécies de Burseraceae são conhecidas pela produção de resinas e óleos utilizados pelas indústrias farmacêutica, cosmética, civil, náutica e na produção de incensos. Tais substâncias são produzidas por espaços secretores, i.e. cavidades e/ou canais secretores, associadas ao floema primário e secundário de órgãos aéreos e subterrâneos. Entretanto, poucas espécies foram estudadas quanto aos aspectos ontogenéticos, estruturais e funcionais do sistema secretor, principalmente no que diz respeito às espécies nativas. Protium ovatum Engl. é uma espécie arbustiva endêmica do cerrado e representa uma das espécies exploradas por agroextrativistas na comercialização de produtos não-madeireiros. A secreção produzida por essa espécie apresenta atividade no combate a fungos, bactérias e protozoários, além de ser utilizada no controle biológico de pragas prejudicais à agricultura. Nosso objetivo foi estudar a distribuição, morfologia e ultraestrutura dos espaços secretores no eixo vegetativo de P. ovatum sob o ponto de vista do desenvolvimento. Amostras de raiz, caule e folhas foram processadas para estudos em microscopia de luz e eletrônica de transmissão. Canais secretores constituídos por epitélio unisseriado e lume ocorrem associados ao floema em todos os órgãos estudados. Os canais secretores se originam por lisogenia e se desenvolvem por esquizo-lisogenia; alongamento, fusão e ramificação de canais foram observados no caule. Canais ativos em secreção apresentaram células epiteliais ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Burseraceae species are known by the production of oil and resin used by the pharmaceutical, cosmetic, civil, and nautical industries and in the incense production. These substances are produced by secretory spaces, i.e. secretory cavities and canals, immersed in the primary and secondary phloem in aerial and underground organs. However, few species were studied on the ontogenetic, structural and functional features of the secretory system, mainly concerning the native species. Protium ovatum Engl. is a shrub species endemic from the Cerrado and represents one of exploited species by agroextractivists in the commercialization of non-wood products. The secretion produced by this species display activity against fungi, bacteria and protozoa, in addition to being used in the biological control of pests that are harmful to agriculture. We aimed to study the distribution, morphology and ultrastructure of the secretory spaces in the vegetative axis of P. ovatum under a developmental view. Root, stem and leaf samples were processed for studies on light microscopy and transmission electron microscopy. Secretory canals constituted by uniseriate epithelium and lumen occurred associated to the phloem in all the studied organs. The secretory canals originate from lysigenesis and develop by schyzo-lysigenesis; elongation, fusion and branching of canals were observed in the stem. Active canals showed epithelial cells will pectin-cellulosic walls with thickenings in the anticlinal and radia... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Resumo: O Diabetes mellitus, doença que atinge milhões de pessoas em todo o mundo, é considerado um significante fator de risco para o desenvolvimento de problemas cardiovasculares. Caracterizado principalmente pelo quadro de hiperglicemia, o diabetes pode apresentar ainda um conjunto de características que, associadas, contribuem para o surgimento de complicações vasculares e para o aumento do risco de morte por problemas cardíacos independente de outros fatores. Atualmente, o exercício físico regular, juntamente com a insulinoterapia e o planejamento alimentar, tem sido considerada como uma das principais abordagens no tratamento do diabetes tipo I, com o objetivo de aproximar as condições metabólicas do paciente a um estado fisiológico normal, impedindo ou retardando as complicações crônicas do diabetes. Este estudo tem por objetivo avaliar as alterações morfológicas causadas pelo diabetes na musculatura ventricular esquerda de ratos diabéticos, bem como o efeito do exercício físico na recuperação ou prevenção destas alterações. Para isso, foram utilizados ratos adultos da linhagem Wistar divididos em quatro grupos: diabéticos sedentários (DS), diabéticos treinados (DT), controle sedentário (CS) e controle treinado (CT), sendo que os grupos treinados realizaram um protocolo de exercício físico. O diabetes experimental do tipo I foi induzido por meio da aplicação de aloxana monoidratada Sigma® (35 mg/kg de peso corporal) dissolvida em tampão citrato 0,01M, pH 4,5. O protocolo de treinamento consistiu de natação por 60 minutos diários, 5 dias por semana, durante 8 semanas consecutivas com uma carga de 4,8% (para animais diabéticos) e 5,2% (para os animais saudáveis), correspondente à máxima fase estável de lactato. As análises histológicas e histoquímicas mostraram várias alterações morfológicas em decorrência do diabetes experimental... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Diabetes mellitus, a disease that affects millions of people around the world, is considered a significant risk factor for developing cardiovascular problems. Mainly characterized by hyperglycemia, diabetes can also present a set of characteristics wich when associated contribute to the onset of vascular complications and to the increase of the risk of death from heart disease independent of other factors. Currently, regular exercise, along with insulin therapy and meal planning, has been regarded as one of the main approaches in the treatment of type 1 diabetes, aiming to approximate the metabolic conditions of the patient to a normal physiological state, preventing or delaying the chronic complications of diabetes. This study aims to analyse the morphological changes caused by diabetes in the left ventricular muscle of diabetic rats and the effect of exercise on recovery or prevention of these changes. To do this, were used adult male Wistar rats, wich were divided into four groups: diabetic sedentary (DS), diabetic training (DT), sedentary control (SC) and trained control (TC), and the trained groups conducted a protocol of physical exercise. Experimental diabetes type 1 was induced by the application of alloxan monohydrate Sigma® (35 mg / kg body weight) dissolved in citrate buffer 0.01 M, pH 4.5. Training protocol consisted of swimming for 60 minutes daily, 5 days a week for 8 weeks, with a load of 4.8% (for diabetic animals) and 5.2% (for healthy animals), corresponding to the maximal lactate steady state. Histological and histochemical analisys showed morphological changes due to experimental diabetes. It was evident through the hematoxylin-eosin technique tissue disorganization of the ventricular muscle which occurred in DS. However tissue organization was close to normal in DT animals. The PAS reaction was most intense in DS animals, both in the endomysium as in the cytoplasm... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Flávio Henrique Caetano / Coorientador: Ricardo José Gomes / Banca: Gustavo Puggina Rogatto / Banca: Claudia Helena Pellizzon / Mestre

Neste trabalho investigamos a porosidade nanométrica de materiais lignocelulósicos derivados do bagaço de cana-de-açúcar que foram submetidos à compressão úmida. A produção dos materiais estudados a partir do bagaço de cana-de-açúcar utilizou processos de tratamento hidrotérmico seguido de processos de deslignificação organossolve (etanol-água) e soda (hidróxido de sódio). Os tratamentos hidrotérmicos utilizaram a fração fibra do bagaço de cana-de-açúcar, no estado bruto e moído, seguindo planejamento experimental fatorial de 2² com ponto central mais configuração estrela. O tratamento hidrotérmico ocorreu em temperaturas de 150-190°C com tempos de 20-60 minutos. Os processos de deslignificação utilizaram temperaturas de 160°C e 190°C para o processo soda e organossolve respectivamente, com tempos de 20, 40, 60, 80 e 100 minutos de tratamento. Os ensaios de compressão úmida foram realizados com cargas de 5, 10, 15, 20 e 25 toneladas e mostraram que materiais mais homogêneos e com menor granulometria, como o material moído e as polpas, são mais fáceis de comprimir. No entanto, os ensaios mostraram que os materiais comprimidos não são homogêneos, apresentando uma variação no teor de humidade do material comprimido (o centro da pastilha é mais seco que a periferia). O adensamento dos materiais também não é homogêneo, sendo o centro mais denso que a periferia das pastilhas. A perda de água durante a compressão foi de 74-85% para o material tratado hidrotermicamente, 66-85% para as polpas obtidas no processo soda e 81-94% para as polpas obtidas no processo organossolve. As análises de termoporometria mostraram que fração apreciável da porosidade nanométrica dos materiais deslignificados é colapsada com as menores pressões aplicadas (21 MPa). Incrementos de pressão (até carga de 107 MPa) promovem reduções comparativamente muito menores na porosidade nanométrica. / In this work we investigate the nanometric porosity of lignocellulosic materials derived from sugarcane bagasse and tested for wet pressing. The production of the studied materials from sugarcane bagasse employed hydrothermal treatments followed by organosolv (ethanol-water) and soda (sodium hydroxide) delignifications. For the hydrothermal treatments, we used bagasse fiber fractions in crude and milled states, following the factorial experimental design of 2² with central point plus star configuration. Hydrothermal treatment used temperatures of 150-190°C and times of 20-60 minutes. The delignification processes used temperatures of 160°C and 190°C for the soda and organosolv, respectively, with treatment times of 20, 40, 60, 80 and 100 minutes. Wet pressing was carried out with loads of 5, 10, 15, 20 and 25 tons and showed that materials with small and homogeneous particles such as the ground materials and the pulps are easier to compress and form a mass of material. However, the tests showed that the compressed materials are not homogeneous, presenting variations in the moisture content of the compressed materials (the center of the tablets were dryer than the periphery). Densification of the materials is also not uniform, the center being denser than the periphery. Water loss during compression was 74-85% for hydrothermally treated material, 66-85% for soda pulps and 81-94% for organosolv pulps. Thermoporometry analysis showed that appreciable fraction of the nanoscale porosity of the delignified materials collapse with the lowest applied pressures (21 MPa). Pressure increments (up to 107 MPa) promotes comparatively much lower reduction on nanoscale porosity.

by Lai Wing Hong Kevin. / Thesis (M.Phil.)--Chinese University of Hong Kong, 1995. / Includes bibliographical references (leaves 63-74). / Acknowledgments --- p.i / Abbreviations --- p.ii / Abstract --- p.1 / Chapter Chapter 1 --- General Introduction --- p.3 / Chapter 1.1 --- Advantages of Antisense Oligonucleotides Inhibition --- p.4 / Chapter 1.2 --- The Uses of Antisense Oligonucleotide in Leukemic Therapy --- p.5 / Chapter 1.3 --- Oncogenes in the Pathogenesis of Leukemia --- p.6 / Chapter 1.4 --- Apoptosis and Apoptosis-Related Genes --- p.9 / Chapter 1.5 --- Protooncogene bcl-2 --- p.10 / Chapter 1.6 --- Bcl-2 Homologues --- p.11 / Chapter 1.7 --- Regulation of Apoptosis by Other Genes --- p.13 / Chapter 1.8 --- Promyelocytic Leukemia HL-60 Cell Line --- p.15 / Chapter 1.9 --- Aim of Project --- p.16 / Chapter Chapter 2 --- Chemical Synthesis of DNA Oligonucleotides / Chapter 2.1 --- Introduction --- p.17 / Chapter 2.2 --- Materials and Methods --- p.20 / Chapter 2.3 --- Results --- p.24 / Chapter 2.4 --- Discussion --- p.26 / Chapter Chapter 3 --- The Apoptotic Effects of TPA and Ouabain on the Promyelocytic Leukemic HL-60 cell line / Chapter 3.1 --- Introduction --- p.30 / Chapter 3.2 --- Materials and methods --- p.33 / Chapter 3.3 --- Results --- p.40 / Chapter 3.4 --- Discussion --- p.44 / Chapter Chapter 4 --- Effect of Antisense Oligonucleotides on TPA-Induced Apoptosisin Leukemic HL-60 cells / Chapter 4.1 --- Introduction --- p.48 / Chapter 4.2 --- Materials and Methods --- p.49 / Chapter 4.3 --- Results --- p.52 / Chapter 4.4 --- Discussion --- p.54 / Chapter Chapter 5 --- General Discussion --- p.57 / References --- p.63

Os isópodos terrestres possuem uma cutícula protetora que mantém a forma corporal, permite locomoção e comunicação com o ambiente e protege contra dessecação, infecção e predação. Assim como nos demais crustáceos, a cutícula é composta por uma matriz orgânica que é mineralizada com cálcio. A cutícula é uma estrutura versátil que reflete adaptações ambientais e a ampla distribuição geográfica do grupo. Dessa forma, a ultraestrutura e a composição da cutícula variam entre espécies. Isópodos terrestres fazem mudas frequentes ao longo da vida para crescer e/ou renovar receptores de superfície, o que resulta em reabsorção e deposição cuticular constante. Esse grupo apresenta muda bifásica e deposição de placas de cálcio nos esternitos anteriores antes da ecdise como estratégia para reciclar o cálcio corporal. Estudos relacionados à cutícula nesse grupo contemplam a ultraestrutura, a composição e a deposição bem como o efeito de alguns fatores ambientais na muda. No entanto, poucos estudos exploram as ligações entre ecomorfologia e história de vida. Essa tese visa explorar diversos aspectos relacionados à cutícula e a muda de duas espécies neotropicais de isópodos terrestres. Atlantoscia floridana e Balloniscus glaber foram usados como modelo uma vez que são frequentemente encontrados nas mesmas localidades e diferem em tipo ecomorfológico e estratégias ambientais. No Capítulo I, foram exploradas as estruturas de superfície e a ultraestrutura da cutícula das duas espécies a fim de ver como as diferenças encontradas podem ser relacionadas à história de vida de cada espécie, utilizando técnicas de microscopia. As espécies diferiram em tipo e disposição das estruturas de superfície bem como em espessura e proporção de camadas da cutícula. De maneira geral, as diferenças das estruturas de superfície estão relacionadas à seleção de microhabitat e nicho ecológico. Características cuticulares ajudam a explicar o hábito endógeno de B. glaber e epígeo de A. floridana enquanto que as diferenças em ultraestrutura são relacionadas a estratégias comportamentais e tolerância ambiental. No Capítulo II, o efeito do cálcio alimentar no ciclo de muda das espécies foi testado. Para isso, dieta experimental e análise estrutural da cutícula foram realizadas a fim de entender como diferentes concentrações de cálcio alimentar interferem na duração do ciclo de muda. Peculiaridades na ecdise em A. floridana refletem morfologia específica do animal. A duração da intramuda foi maior em B. glaber assim como a sobrevivência média nos tratamentos. A duração do ciclo de muda foi influenciada pela concentração de cálcio; uma tendência a menor duração do ciclo com o aumento da concentração de cálcio foi observada em B. glaber, enquanto em A. floridana a diferença encontrada foi apenas entre o controle sem cálcio e os demais tratamentos. Não houve efeito da dieta no grau de mineralização ou na ultraestrutura em B. glaber. Independentemente do tratamento, a maior taxa de mortalidade em laboratório parece estar relacionada com o próprio processo de ecdise, com mortalidade acumulada de 20% do início da ecdise até o início da pós-muda para ambas as espécies. No Capítulo III, a secreção da cutícula durante a pré- e pós-muda muda foi observada utilizando microscopia de transmissão. A deposição seguiu o padrão observado para outros isópodos. Entretanto, grânulos eletrondensos presentes no espaço ecdisial durante a pré-muda são provavelmente constituídos de cálcio, sugerindo a reciclagem de cálcio diretamente da cutícula velha para a nova no mesmo segmento. Esses grânulos são depositados nas escamas na nova epicutícula antes da ecdise, sugerindo a presença de cálcio na superfície cuticular das espécies. Além disso, regiões sem a ultraestrutura típica encontrada na pós-muda indicam que há modificação na exocutícula após a ecdise uma vez que a expansão e endurecimento da nova cutícula apenas após a ecdise. De maneira geral, esse trabalho não apenas trouxe novas informações sobre a estrutura cuticular de duas espécies neotropicias, mas também contribuiu para esclarecer conexões entre ecomorfologia e requerimentos biológicos de isópodos terrestres. / Terrestrial isopods have a protective cuticle that maintains body shape, allows locomotion, enables communication with the environment and protects them against desiccation, infection and predation. As in all crustaceans, their cuticle is composed of an organic matrix that is mineralized with calcium. The cuticle is highly versatile reflecting adaptations to environmental conditions and large geographical distribution of this group. Therefore, cuticle ultrastructure and composition vary among species. Terrestrial isopods molt frequently throughout their lives in order to grow and/or renew surface receptors, resulting in constant cuticular resorption and deposition. In this group, this dynamics of cuticle formation is affected by the biphasic molt and by the calcium deposition on sternal deposits prior ecdysis, strategies to recycle body calcium. Studies related to cuticle on this group include ultrastructure, composition and deposition as well as effect of some environmental factors on molting. However, few studies explore connections of ecomorphology and life history of animals. This thesis aimed to explore various aspects of cuticle structure and molting using two Neotropical species of terrestrial isopods. Atlantoscia floridana and Balloniscus glaber were used as models since they are found in the same locations while differing in ecomorphology and behavioral strategies. In Chapter I, I explored the cuticle surface structures and ultrastructure of both species to see how their differences can be related to each species life history traits, using microscopy techniques. Species differed in surface structures type and disposition, as well as cuticle thickness and layer proportion. Overall, differences in surface structure are related to microhabitat selection and ecological niche. Cuticular features further explain the endogeic habit of B. glaber and epigeic habit of A. floridana, while differences in cuticle ultrastructure relate to behavioral strategies and environmental tolerance. Next, differences on molting cycle and environmental requirements were analyzed. In Chapter II, I tested the effects of dietary calcium on the molting cycle of both species. For that, artificial diet and structural analysis of the cuticle were used to understand how different concentrations of dietary calcium interfere with molt cycle duration. Peculiarities were observed during ecdysis in A. floridana and reflect to specific morphology of the species. Intramolt duration was longer for B. glaber as well as overall survivorship in treatments. Cycle duration was influenced by calcium concentration; a trend of shorter molt cycle length with increasing calcium concentration was observed for B. glaber, while in A. floridana, only difference between control without calcium and other treatments was observed. Degree of mineralization and cuticle ultrastructure of B. glaber showed no difference between treatments. Regardless of treatment or species, higher mortality rate under lab conditions seems to be related to the process of ecdysis itself, with cumulative mortality of 20% from the beginning of ecdysis until the beginning of postmolt. In Chapter III, I used transmission electron microscopy to analyze cuticle secretion in both species during pre- and postmolt stages. Cuticle deposition during premolt followed the same pattern as other terrestrial isopods. Nonetheless, electron dense granules present on the ecdysial space during premolt are likely calcium granules, suggesting the recycling of calcium within the same segment. These granules are deposited on the scales of the new epicuticle prior ecdysis, suggesting the presence of calcium on the cuticular surface of both species. Moreover, regions without typical lamellate ultrastructure during postmolt indicate modification of the exocuticle after ecdysis since expansion and hardening must occur after ecdysis. Overall, this work not only added information on cuticular structure of two Neotropical species but also clarified connections between ecomorphology and biological requirements of terrestrial isopods.