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Expressão do gene L1 de papilomavírus humano tipos 18 e 33 em levedura Pichia pastorisCAMPOS, Júlia Furtado 31 January 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A prevalência dos tipos de papilomavírus (HPV) relacionados ao câncer cervical apresenta variações geográficas. Em todo o mundo, o HPV 16 é mais freqüente nos casos de câncer cervical, seguido do tipo 18. No Brasil, apesar de o HPV 16 ser o tipo predominante, existem variações regionais importantes com relação a outros tipos. O HPV 18 é o segundo tipo mais freqüente nas regiões Norte, Sudeste e Sul, entretanto, no Nordeste e Centro-Oeste, há uma maior prevalência dos HPVs 31 e 33, depois do HPV 16. Uma atenção especial é necessária aos tipos de HPV mais relevantes em determinadas regiões, permitindo a inclusão dessas vacinas em um amplo e efetivo programa de vacinação. Devido ao custo proibitivo em países em desenvolvimento das vacinas disponíveis até então, assim como à variação na distribuição dos tipos de HPV, este trabalho teve como objetivo a expressão do gene L1 de papilomavírus humano tipos 18 e 33 em levedura Pichia pastoris. Os genes L1 foram amplificados através de PCR com enzima de alta fidelidade e clonados no vetor de expressão pPICZA. Pichia pastoris foi transformada com as construções pPICZL1H18 e pPICZL1H33 e os clones recombinantes selecionados por resistência à Zeocina. A integração dos genes foi confirmada por PCR de colônia com os primers AOX1 e os clones transcrevendo RNAm de L1 foram analisados quanto à produção da proteína. Os lisados celulares foram usados em ensaios de dot blot com os anticorpos anti-L1 e anti-His. Todas as amostras testadas apresentaram resultado positivo, indicando expressão da proteína L1. Entretanto, nas condições utilizadas, o rendimento da produção da proteína L1 de HPV foi abaixo do esperado. A otimização em diversas etapas do processo (o uso de genes sintéticos otimizados, por exemplo) deverá mostrar-se uma solução para a utilização do sistema de células de P. pastoris para a expressão heteróloga da proteína L1
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Desenvolvimento de uma construção vacinal baseada no gene E5 de BPV usando códon usage a ser aplicada em imunização genéticaLIRA, Rafaelle Cavalcante de 31 January 2010 (has links)
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Previous issue date: 2010 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Os papilomavírus constituem um grupo de pequenos vírus de DNA de dupla fita
caracterizados por induzirem a formação de lesões que são em geral benignas, podendo
regredir naturalmente ou se transformar em tumores malignos, gerando importantes perdas
econômicas aos criadores. Os BPVs tipo 1 e 2 são carcinogênicos e estão relacionados com o
câncer da bexiga urinária e o tumor sarcóide em eqüino. Como existem muitos animais já
infectados e afetados pela doença, uma estratégia vacinal terapêutica torna-se necessária e
muito aguardada pelos criadores. A imunização genética é uma estratégia bastante eficaz na
indução de imunidades humoral e celular em grande número de modelos animais. O foco
deste trabalho foi realizar a construção e avaliação funcional in vitro do vetor vacinal
pCIE5sintB1/B2, usando o gene E5 otimizado para expressão em célula de mamífero. As
sequências do gene E5 dos BPVs 1 e 2 foram obtidas do GeneBank e analisadas quanto a suas
diferenças e ao uso preferencial de códons, sendo então construída uma sequência otimizada a
qual foi sintetizada (E5sintB1/2), contendo um epitopo AU1 na região N-terminal. O gene
E5sint foi então clonado no vetor de expressão pCI-neo usando sítios de restrição inseridos no
gene sintético. A construção pCIE5sintB1/2 foi seqüenciada para confirmação. Para análise da
funcionalidade o vetor pCIE5sintB1/2 foi utilizado para transfectar em células 293, usando o
Kit TransFast. Após 48 horas de cultivo, as células foram coletadas e os extratos celulares
processados para preparação do extrato protéico celular e de RNA total. A expressão gênica
foi avaliada por meio de RT-PCR, SDS-PAGE, Dot Blot e Western Blot (usando anticorpo
contra o epítopo AU1). Os resultados obtidos mostraram que apenas as células transfectadas
com a construção pCIE5sintB1/B2 apresentaram transcrição do gene E5 e conseqüente
produção da proteína. Estes resultados confirmam a expressão do antígeno vacinal em células
de mamífero
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Avaliação da efetividade da segunda dose da vacina BCG contra tuberculose em crianças e adolescentes na Região Metropolitana de RecifeDANTAS, Odimariles Maria Souza January 2004 (has links)
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Previous issue date: 2004 / A vacina BCG (bacilo de Calmette e Guerin), única e mais antiga usada mundialmente para controle da tuberculose, tem sua história cheia de controvérsias e dúvidas sobre sua eficácia ou efetividade. Utilizada pela primeira vez em 1921 como uma grande esperança para controlar uma doença que dizimava populações sem que se tivesse poder de controle sobre a mesma, veio posteriormente sofrer uma grande perda de credibilidade, com o acidente de Lübeck em 1930, na Alemanha, onde um grande número de crianças morreu após terem recebido a vacina BCG. Acidente depois esclarecido, quando descoberto que foi utilizado na preparação da vacina não o bacilo atenuado de Calmette e Guèrin, mas uma cepa virulenta do bacilo de Köch.
A autora se propõe nesse artigo fazer uma breve reflexão sobre a vacina BCG, as controvérsias sobre sua efetividade e ou eficácia, descrita nos vários desenhos de estudo realizados no Brasil e no mundo, sem pretensão de esgotar o assunto e sobre as novas vacinas que vêm sendo avaliadas ainda em fase experimental
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Eficácia da associação da vacina tríplice ao BCG / Efficacy of the combination of the triple vaccine to BCGPereira, Martha Maria Mutti 04 February 1986 (has links)
A eficácia da associação quádrupla (DPT + BCG) foi estudada através da proteção e comparação da soro conversão das vacinas, usando como adjuvante o hidróxido de alumínio e ou BCG. A potência da vacina pertussis foi avaliada pelo teste de proteção em camundongos e o BCG pelo teste de consumo de oxigênio e de vitalidade, sendo considerada satisfatória. Sendo os toxóides diftérico e tetânico considerados proteínas inertes e estáveis, suas potências não foram determinadas depois de associadas. Os níveis de anticorpos foram determinados para difteria e tétano pela reação imunoenzimática, para vacina pertussis pela reação de imunofluorescência e para o BCG pela conversão tuberculínica. Os níveis de conversão foram satisfatórios, revelando ser possível a associação sem prejuízo para nenhum dos antígenos. A associação DPT + BCG não causou reação local ou geral significante, possibilitando uma simplificação operacional. / The efficacy of the quadruple association (DPT + BCG) was studied though protection and comparison ot the conversion serum in vaccines using aluminium hydroxide or BCG as adjuvant. Both the protection power of the Pertussis vaccine evaluated by the protection test in mice and BCG by the oxygen uptake and counts of viable particles were considered satisfactory. Being difteria and tetanus toxoids considered inert and stable proteins, their protection wasn\'t determined after their combination. The antibody levels produced by the antigens were determined by the enzyme-linked immunosorbent assay to the difteria and tetanus toxoids, by the fluorescent antibody technique to the Pertussis vaccine and by the tuberculin conversion to the BCG. The conversion levels were satisfatory and there was no damage in their association. There was no meaningful local or general reaction in this association making an operational simplification possible.
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Avaliação do impacto da vacina antipneumocócica conjugada na ocorrência de doenças respiratórias em lactentes / Impact assessment of pneumococcal conjugate vaccine on the occurrence of respiratory diseases in infants.Wanderci Marys Oliveira Abrão 15 December 2014 (has links)
Estudos realizados e recomendados pela OMS e UNICEF, indicam alta prevalência de infecções pneumocócicas e meningocócicas, sobretudo em crianças abaixo dos dois anos de idade. O Streptococcus pneumoniae é um dos agentes mais frequentes de pneumonia, otite média aguda (OMA), meningite e sinusite em crianças. O número global de mortes em crianças menores de cinco anos de idade causadas por pneumonia foi de 8,8 milhões, em 2008. O Ministério da Saúde, devido ao alcance de bons resultados com soroconversão por imunização, indicou a implantação das vacinas antipneumocócica 10-valente e meningocócica C conjugadas no calendário vacinal das crianças menores de dois anos de idade. Na presente pesquisa, conduziu-se um estudo transversal com componente retrospectivo desenvolvido nas redes de Atenção Básica e Hospitalar de Guaranésia, cidade de pequeno porte do interior do estado de Minas Gerais. Objetivou-se avaliar o impacto da vacinação na ocorrência de doenças respiratórias em lactentes, considerando o período anterior e posterior à introdução da vacina antipneumocócica 10-valente, no Programa Nacional de Imunização. Na análise estatística definiu-se o período entre 2009 e 2012. O método de estudo adotado foi o um estudo transversal aninhado em uma série temporal, sendo observado que no período pós introdução da vacina antipneumocócica 10 valente conjugada houve uma redução de 40% na prevalência de pneumonia adquirida na comunidade, com diferença estatística entre os dois períodos . Confirmou-se que a oscilação sazonal tem interferência nas doenças estudadas. Em relação ao sexo, constatou-se que o masculino tem predomínio sobre o feminino quanto ao acometimento por pneumonia. Foi observado que o sexo masculino apresentou 28% mais chance de PNM. Em relação à otite média aguda e à rinossinusite, a variável sexo não apresentou predomínio entre elas. Os dados estatísticos, considerando a razão de prevalência (RP = 1,96 (IC95%: 1,52 2,53); p <0,05), sugeriram que não vacinar está associado com a ocorrência de PNM. Constatou-se que a prevalência de PNM foi 70% menor (RP 0,30 (IC95%: 0,24 0,37); p<0,05) nas crianças com vacina em dia comparando-se àquelas com a vacina em atraso, ou seja, manter vacina em dia sugere proteção contra PNM. No entanto, houve 53% menos OMA entre não vacinados do que entre vacinados (RP = 0,47 (IC95%: 0,35 0,64); p<0,05). Diante dos resultados encontrados, pode-se concluir que a vacinação antipneumocócica 10-valente está associada com redução dos casos de pneumonia adquirida na comunidade em lactentes. / Studies and recommended by WHO and UNICEF, indicate a high prevalence of pneumococcal and meningococcal infections, especially in children under two years of age. Streptococcus pneumoniae is one of the most frequent agents of pneumonia, acute otitis media (AOM), meningitis and sinusitis in children. The overall number of deaths in children under five years of age caused by pneumonia was 8.8 million in 2008. The Ministry of Health due to reach good results with seroconversion by immunization, indicated the implementation of pneumococcal vaccines 10- meningococcal C conjugate and brave in the immunization schedule of children under two years of age. In this research, conducted a cross-sectional study with retrospective component developed in primary care networks and Hospital Guaranésia, small town in the state of Minas Gerais. This study aimed to assess the impact of vaccination on the incidence of respiratory diseases in infants, considering the time before and after the introduction of the vaccine pneumococcal 10-valent, the National Immunization Program. Statistical analysis defined the period between 2009 and 2012. The adopted method of study was a cross-sectional study nested in a time series, it was observed that in the post introduction period of pneumococcal vaccine conjugate 10 brave there was a 40% reduction in the prevalence of community-acquired pneumonia, with statistical difference between the two periods. It was confirmed that the seasonal oscillation has interference in the diseases. With regard to gender, it was found that the male is predominant over females in relation to involvement by pneumonia. It was observed that men had 28% more chance of pneumonia. In relation to acute otitis media and sinusitis, sex does not showed a predominance among them. Statistical data, considering the prevalence ratio (PR = 1.96 (95% CI: 1.52 to 2.53), p <0.05), suggested that not vaccinating is associated with the occurrence of pneumonia. It was found that the prevalence of pneumonia was 70% lower (PR 0.30 (95% CI: 0.24 to 0.37), p <0.05) in children with day vaccine is compared to those of the vaccine in delay, ie to keep day suggests vaccine protection against pneumonia. However, there were 53% fewer of AOM than for unvaccinated vaccinated (OR = 0.47 (95% CI: 0.35 to 0.64); p <0.05). Considering the results, it can be concluded that vaccination pneumococcal 10-valent is associated with reduction of cases of community-acquired pneumonia in infants.
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Vacinas contra leptospirose: potencial imunoprotetor do antígeno OmpL37 / Vaccines against leptospirosis: immunoprotective potential of the OmpL37 antigenOliveira, Thaís Larré 07 August 2014 (has links)
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Previous issue date: 2014-08-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / A leptospirose é uma doença infecciosa emergente causada por espiroquetas patogênicas do gênero Leptospira, com complicações humana e veterinária. Essa doença é transmitida através do contato direto com um animal reservatório ou com o ambiente contaminado com a urina destes animais. O desenvolvimento de vacinas seguras e multivalentes contra leptospirose, que substituam as bacterinas existentes, permanece um desafio. Bacterinas são reatogênicas e conferem imunidade sorovar-específica e de curta duração. Esforços para o desenvolvimento de vacinas recombinantes tem focado em proteínas de membrana externa (OMPs). A proteína de membrana externa OmpL37 é conservada entre diferentes sorovares de Leptospira e atua na adesão aos tecidos do hospedeiro. Neste estudo, nós relatamos pela primeira vez, a avaliação do potencial imunoprotetor de OmpL37 como antígeno vacinal em hamsters, sob diferentes estratégias: vacina de subunidade, vacina de DNA e prime-boost. A caracterização da resposta imune através de ELISA indireto e qRT-PCR demonstrou que os maiores níveis de IgG foram estimulados pela vacina de subunidade, a qual também induziu resposta inflamatória. A vacina de DNA falhou em induzir imunidade humoral, porém também estimulou TNF-α. Apesar da resposta induzida, nenhuma formulação protegeu significativamente os animais contra a doença. / Leptospirosis is an emerging infectious disease caused by pathogenic spirochetes of Leptospira genus, of human and veterinary concern. This infectious disease is transmitted through direct contact with an animal reservoir or an environmental contaminated with their urine. The development of safe and multivalent vaccines against leptospirosis, which replace existing bacterins, remains a challenge. Bacterins are reactogenic and afford serovar specific and short-term immunity. Efforts to develop recombinant vaccines against leptospirosis have focused on outer membrane proteins (OMPs). The outer membrane protein OmpL37 is conserved among different Leptospira serovars and plays a role in adherence to host tissues. In this study we report for the first time, the evaluation of OmpL37 immunoprotective potential as a vaccine antigen in hamsters, under different strategies: subunit vaccine, DNA vaccine and prime-boost. The characterization of the immune response by indirect ELISA and qRT-PCR showed that higher levels of IgG were stimulated by the vaccine subunit, which also induced an inflammatory response. The DNA vaccine failed to induce humoral immunity, but also stimulated TNF-α. Despite the induced response, no formulation significantly protected the animals against the disease.
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Eficácia da associação da vacina tríplice ao BCG / Efficacy of the combination of the triple vaccine to BCGMartha Maria Mutti Pereira 04 February 1986 (has links)
A eficácia da associação quádrupla (DPT + BCG) foi estudada através da proteção e comparação da soro conversão das vacinas, usando como adjuvante o hidróxido de alumínio e ou BCG. A potência da vacina pertussis foi avaliada pelo teste de proteção em camundongos e o BCG pelo teste de consumo de oxigênio e de vitalidade, sendo considerada satisfatória. Sendo os toxóides diftérico e tetânico considerados proteínas inertes e estáveis, suas potências não foram determinadas depois de associadas. Os níveis de anticorpos foram determinados para difteria e tétano pela reação imunoenzimática, para vacina pertussis pela reação de imunofluorescência e para o BCG pela conversão tuberculínica. Os níveis de conversão foram satisfatórios, revelando ser possível a associação sem prejuízo para nenhum dos antígenos. A associação DPT + BCG não causou reação local ou geral significante, possibilitando uma simplificação operacional. / The efficacy of the quadruple association (DPT + BCG) was studied though protection and comparison ot the conversion serum in vaccines using aluminium hydroxide or BCG as adjuvant. Both the protection power of the Pertussis vaccine evaluated by the protection test in mice and BCG by the oxygen uptake and counts of viable particles were considered satisfactory. Being difteria and tetanus toxoids considered inert and stable proteins, their protection wasn\'t determined after their combination. The antibody levels produced by the antigens were determined by the enzyme-linked immunosorbent assay to the difteria and tetanus toxoids, by the fluorescent antibody technique to the Pertussis vaccine and by the tuberculin conversion to the BCG. The conversion levels were satisfatory and there was no damage in their association. There was no meaningful local or general reaction in this association making an operational simplification possible.
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Avaliação do impacto da vacina antipneumocócica conjugada na ocorrência de doenças respiratórias em lactentes / Impact assessment of pneumococcal conjugate vaccine on the occurrence of respiratory diseases in infants.Abrão, Wanderci Marys Oliveira 15 December 2014 (has links)
Estudos realizados e recomendados pela OMS e UNICEF, indicam alta prevalência de infecções pneumocócicas e meningocócicas, sobretudo em crianças abaixo dos dois anos de idade. O Streptococcus pneumoniae é um dos agentes mais frequentes de pneumonia, otite média aguda (OMA), meningite e sinusite em crianças. O número global de mortes em crianças menores de cinco anos de idade causadas por pneumonia foi de 8,8 milhões, em 2008. O Ministério da Saúde, devido ao alcance de bons resultados com soroconversão por imunização, indicou a implantação das vacinas antipneumocócica 10-valente e meningocócica C conjugadas no calendário vacinal das crianças menores de dois anos de idade. Na presente pesquisa, conduziu-se um estudo transversal com componente retrospectivo desenvolvido nas redes de Atenção Básica e Hospitalar de Guaranésia, cidade de pequeno porte do interior do estado de Minas Gerais. Objetivou-se avaliar o impacto da vacinação na ocorrência de doenças respiratórias em lactentes, considerando o período anterior e posterior à introdução da vacina antipneumocócica 10-valente, no Programa Nacional de Imunização. Na análise estatística definiu-se o período entre 2009 e 2012. O método de estudo adotado foi o um estudo transversal aninhado em uma série temporal, sendo observado que no período pós introdução da vacina antipneumocócica 10 valente conjugada houve uma redução de 40% na prevalência de pneumonia adquirida na comunidade, com diferença estatística entre os dois períodos . Confirmou-se que a oscilação sazonal tem interferência nas doenças estudadas. Em relação ao sexo, constatou-se que o masculino tem predomínio sobre o feminino quanto ao acometimento por pneumonia. Foi observado que o sexo masculino apresentou 28% mais chance de PNM. Em relação à otite média aguda e à rinossinusite, a variável sexo não apresentou predomínio entre elas. Os dados estatísticos, considerando a razão de prevalência (RP = 1,96 (IC95%: 1,52 2,53); p <0,05), sugeriram que não vacinar está associado com a ocorrência de PNM. Constatou-se que a prevalência de PNM foi 70% menor (RP 0,30 (IC95%: 0,24 0,37); p<0,05) nas crianças com vacina em dia comparando-se àquelas com a vacina em atraso, ou seja, manter vacina em dia sugere proteção contra PNM. No entanto, houve 53% menos OMA entre não vacinados do que entre vacinados (RP = 0,47 (IC95%: 0,35 0,64); p<0,05). Diante dos resultados encontrados, pode-se concluir que a vacinação antipneumocócica 10-valente está associada com redução dos casos de pneumonia adquirida na comunidade em lactentes. / Studies and recommended by WHO and UNICEF, indicate a high prevalence of pneumococcal and meningococcal infections, especially in children under two years of age. Streptococcus pneumoniae is one of the most frequent agents of pneumonia, acute otitis media (AOM), meningitis and sinusitis in children. The overall number of deaths in children under five years of age caused by pneumonia was 8.8 million in 2008. The Ministry of Health due to reach good results with seroconversion by immunization, indicated the implementation of pneumococcal vaccines 10- meningococcal C conjugate and brave in the immunization schedule of children under two years of age. In this research, conducted a cross-sectional study with retrospective component developed in primary care networks and Hospital Guaranésia, small town in the state of Minas Gerais. This study aimed to assess the impact of vaccination on the incidence of respiratory diseases in infants, considering the time before and after the introduction of the vaccine pneumococcal 10-valent, the National Immunization Program. Statistical analysis defined the period between 2009 and 2012. The adopted method of study was a cross-sectional study nested in a time series, it was observed that in the post introduction period of pneumococcal vaccine conjugate 10 brave there was a 40% reduction in the prevalence of community-acquired pneumonia, with statistical difference between the two periods. It was confirmed that the seasonal oscillation has interference in the diseases. With regard to gender, it was found that the male is predominant over females in relation to involvement by pneumonia. It was observed that men had 28% more chance of pneumonia. In relation to acute otitis media and sinusitis, sex does not showed a predominance among them. Statistical data, considering the prevalence ratio (PR = 1.96 (95% CI: 1.52 to 2.53), p <0.05), suggested that not vaccinating is associated with the occurrence of pneumonia. It was found that the prevalence of pneumonia was 70% lower (PR 0.30 (95% CI: 0.24 to 0.37), p <0.05) in children with day vaccine is compared to those of the vaccine in delay, ie to keep day suggests vaccine protection against pneumonia. However, there were 53% fewer of AOM than for unvaccinated vaccinated (OR = 0.47 (95% CI: 0.35 to 0.64); p <0.05). Considering the results, it can be concluded that vaccination pneumococcal 10-valent is associated with reduction of cases of community-acquired pneumonia in infants.
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Avaliação da interferência da vacinação contra febre amarela na vacinação contra rubéola / Evaluation of the interference of the vaccine yellow fever in the vaccine rubellaSilva, Juliana Romualdo do Nascimento da January 2008 (has links)
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Previous issue date: 2008 / A administração simultânea de várias vacinas em uma mesma visita a um serviço de saúde é amplamente recomendada como uma estratégia de evitar a perda de oportunidades de vacinação. No Brasil, a vacina contra febre amarela e a vacina combinada contra sarampo, rubéola e caxumba (triviral) são dadas simultaneamente narotina para crianças de 12 meses de idade apenas no Distrito Federal. Em outros estados brasileiros a administração simultânea dessas vacinas é recomendada para aqueles quenão foram imunizados contra febre amarela aos 9 meses de idade. A interferência de outras vacinas de vírus vivos atenuados pode explicar a baixa resposta imune contra febre amarela em crianças e isto pode ser bastante relevante quando o país estáfortemente engajado no controle da rubéola. Para avaliar a interação da vacina contra febre amarela e da vacina contra rubéola combinada com sarampo e caxumba foi conduzido um ensaio clínico randomizado duplo-cego com as vacinas 17D/213 e 17DDadministradas concomitantemente com a vacina triviral (em injeções separadas) ou com 30 dias de intervalo. Crianças com 12 a 23 meses de idade elegíveis para vacinação contra febre amarela e rubéola foram convidadas a participar do estudo em unidades públicas de saúde do Distrito Federal. Amostras de soro obtidas antes e 30 dias após avacinação foram testadas para anticorpos contra essas doenças. Em crianças vacinadas simultaneamente, 90,6 por cento e 66,8 por cento soroconverteram para rubéola e febre amarela, respectivamente. / Entre os vacinados contra febre amarela 30 dias após a triviral, as proporções de soroconversão foram 97,3 por cento e 85,9 por cento respectivamente. Consistentemente, os títulos médios geométricos dos anticorpos contra rubéola e febre amarela foramsignificativamente menores nas crianças vacinadas simultaneamente. A resposta imune não diferiu entre as subcepas vacinais de febre amarela. O estudo indica que a interferência recíproca entre a resposta imune para o componente rubéola da triviral epara a vacina contra febre amarela justifica uma revisão dos calendários vacinais e recomendações do Programa Nacional de Imunizações brasileiro.
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Avaliação do potencial imunoprotetor de antígenos recombinantes de Leptospira interrogans / Evaluation of the immune protective potential of Leptospira interrogans recombinant antigensFelix, Samuel Rodrigues 27 November 2009 (has links)
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Previous issue date: 2009-11-27 / Leptospirosis is a disease caused by pathogenic spirochetes of the Leptospira
genus. It is the most widespread zoonosis in the world, representing a veterinarian
and public health problem especially in developing countries. From a veterinarian
point of view, leptospirosis is important both as a medical problem, mainly in dogs,
which can suffer the ailment as well as transmit it, and as an economic problem,
mainly in cattle and pigs, where it causes direct production and reproductive losses.
Vaccination of these animals is largely applied, however protection is limited.
Conventional vaccines confer protection restricted to the sorovars present in the
preparation and fail to protect against renal infection, allowing seemingly healthy
animals to shed bacteria, and produce short term protection requiring frequent
revaccination. The vaccines are also available for humans, but are used only in a
few countries such as Cuba and China. The goal of this work was to test the immune
protective potential of recombinant Leptospira interrogans proteins produced in
Escherichia coli, using the hamster model. Twenty recombinant vaccine candidates
were produced and inoculated in hamsters in two doses, fourteen days apart. Two
weeks after the second dose all animals were challenged with 100 leptospires
(~2xLD50). After the challenge, animals were observed daily for disease. Of all the
proteins tested, seven protected animals to some extent, ranging from 16.7% to
50%. Two proteins presented promising results, and were recommended for further
studies, as potential leptospira subunit vaccine candidates. / A leptospirose é uma doença causada por espiroquetas do gênero
Leptospira. Ela é a zoonose mais difundida no mundo, sendo um problema de
saúde pública e veterinária, principalmente em países em desenvolvimento. Na área
de veterinária, a leptospirose é preocupante do ponto de vista clínico e econômico,
devido ao risco à saúde pública, perdas reprodutivas e óbitos. A vacinação animal é
amplamente realizada como medida de prevenção da enfermidade. Entretanto, a
proteção conferida pelas vacinas convencionais é limitada aos sorovares nelas
presentes, não evitando o estado portador, mantendo assim o potencial transmissor
desses animais, para humanos e outros animais. Por outro lado, vacinas para
humanos estão disponíveis e empregadas em alguns países como a China e Cuba.
O objetivo deste trabalho foi avaliar, em modelo animal, proteínas recombinantes de
Leptospira interrogans quanto ao seu potencial imunoprotetor. Para tanto, vinte
proteínas foram expressas em Escherichia coli e, após a adsorção em hidróxido de
alumínio, foram administradas em hamsters através da via intramuscular, em duas
doses, com intervalo de 14 dias. Duas semanas após a segunda dose realizou-se o
desafio dos animais com 100 leptospiras (~2xDL50). Após o desafio, os animais
foram observados diariamente para o aparecimento de sinais clínicos da
enfermidade e óbitos, e após 24 dias procedeu-se a eutanásia e necropsia dos
animais sobreviventes. Como resultado da avaliação realizada, sete proteínas
conferiram proteção ao modelo animal que variou de 16,7% a 50%. Das proteínas
que apresentaram maiores níveis de proteção, duas foram indicadas como
possíveis candidatas à vacina recombinante contra leptospirose.
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