Stroke is the third leading cause of death and the most common cause of disability in the world. To relieve the heavy burden of stroke, we need to understand the mechanisms that will form the basis of improved prevention and treatment. Epidemiological studies have found evidence for a genetic influence on the common form of stroke. However the genetic of stroke is still in its infancy. Subclinical intracranial atherosclerosis is sometime a predisposing factor for ischemic stroke (IS). This study was carried out to elucidate genetic factors influencing the complex phenotype of IS and subclinical intracranial atherosclerosis.<p>In the Belgium Stroke Study (BSS), we collected 237 middle-aged (45-60 yrs) patients with small vessel occlusion (SVO) or large vessel atherosclerosis (LVA) IS, according to the Acute Stroke Treatment (TOAST) criteria, 326 ethnicity and gender matched subjects were used as controls. We tested variants in cholesterol-related candidate genes (sterol regulatory element binding protein, SREBP, SREBP-cleavage activating protein, SCAP, Apolipoprotein E, APOE, and Proprotein convertase subtilisin/kexin type 9, PCSKA) for association with IS. Significant gene-IS associations were further tested in a Finnish autopsy collection of 1004 cases with a quantitative assessment of atherosclerosis in the circle of Willis.<p>While we could not detect any significant association between polymorphisms in the SREBP and SCAP genes and IS, we found evidence for association at the APOE and PCSK9 loci. The APOE &949;4+ genotype was related to a more severe intracranial atherosclerosis score in men, and within the most common APOE &949;3/&949;3 genotype group a higher risk of IS was associated with the G-allele at the -219G/T promoter polymorphisms. At PCSK9, the minor allele (G) of the tagging E670G polymorphism appeared as a significant predictor of LVA (OR = 3.52, 95% CI 1.25-9.85; p = 0.017). Accordingly, in the Finnish autopsy series, G-allele carriers tended to have more severe allele copy number-dependent (p=0.095) atherosclerosis in the circle of Willis and in its branches. <p>Our findings in this unique combination of clinical and autopsy data suggest a multifaceted role of apoE on the risk of cerebrovascular diseases. The APOE &949;4+ genotype did not predict the risk of IS, but was associated with severity of subclinical intracranial atherosclerosis in men. In contrast, the promoter variants affecting apoE expression were significant predictors of IS, suggesting that quantitative rather than qualitative variation of apoE is related to IS independently of subclinical intracranial atherosclerosis. Furthermore, we demonstrated that PCSK9 associates with the risk of LVA stroke subtype, and suggest that the risk is related to the severity of the underlying intracranial atherosclerosis. <p>Atherogenesis is considered as an active, inflammatory process, interleukin (IL)-18 a proinflammatory cytokine, is thought to play a central role in the development of atherosclerosis and more specifically in plaque rupture. We genotyped four haplotype tagging polymorphisms at the IL18 gene in the BSS and the Finnish autopsy series. The minor alleles of the IL18 -607 and +127 polymorphisms, as well as the haplotype carrying both minor alleles, associated with IS after adjustment for all cardiovascular risk factors. No association was seen with the development of subclinical intracranial atherosclerosis. Our findings suggest that variation in the IL18 gene influences the acute atherosclerotic IS event, but not the previous development of subclinical intracranial atherosclerosis, suggesting a causal role of IL18 in the vulnerability of cerebral arterial atherosclerotic plaques to acute rupture and subsequent thrombosis. <p><p> / Doctorat en Sciences médicales / info:eu-repo/semantics/nonPublished

Récemment notre laboratoire a démontré la présence des récepteurs de l'endothéline-1 de type ET[indice inférieur A] ainsi que de type ET[indice inférieur B] dans les cellules endothéliales vasculaires humaines (CEVhs). De plus, notre laboratoire a mis en évidence que dans les cellules du muscle lisse vasculaire humain (CMLVhs), les récepteurs de type ET[indice inférieur B] semblent jouer un rôle dans la survie de ce type cellulaire. Dans cette étude, nous voulons donc, vérifier l'hypothèse que le récepteur ET[indice inférieur B] peut jouer un rôle important dans la survie des CEVhs tout comme dans les CMLVhs. Afin de vérifier cette hypothèse, nous avons entamé des études de survie des CEVhs en utilisant en premier temps la technique du marquage a l'annexine V combinée à la microscopie confocal en 3-D lors d'apoptose induite par la génistéine. En deuxième temps, nous avons entamé les mêmes études en utilisant l'ISEL «in situ tunel» combiné à la microscopie à fluorescence. Nos résultats suggèrent que le traitement à l'ET-1 (10[exposant -7]M) semble prévenir l'apoptose induite par la génistéine et que cet effet de l'ET-1 est mimé par le traitement avec l'agoniste sélectif des récepteurs ET[indice inférieur B], l'IRL- 1620. De plus, ces premiers résultats indiquent que le blocage des récepteurs ET[indice inférieur B] par l'antagoniste sélectif du récepteur ET[indice inférieur B], le A192621, prévient 1'effet antiapoptotique de l'ET-1. Par contre, l'activation du récepteur ET[indice inférieur A] seul ne semble pas contribuer à l'effet antiapoptotique de l'ET-1. De plus, nos résultats démontrent que cet effet antiapoptotique du récepteur ET[indice inférieur B] est médié via Pinhibition de l'activation de la caspase 3. En plus, nos résultats montrent que le rolle protecteur du récepteur ET[indice inférieur B] ne dépend pas de la densité de celui-ci. En conclusion, nos résultats démontrent que l'ET-1 possède un effet antiapoptotique dans les CEVhs et que cet effet est médié en grande partie par l'activation des récepteurs ET[indice inférieur B]. Cette étude a permis une meilleure compréhension du rôle de l'ET-1 dans la survie des CEVhs. [Symboles non conformes]

Les maladies chroniques (dont les maladies cardio-vasculaires (MCV)) constituent dans la majorité des pays en Europe voire dans le monde, une des principales causes de mortalité et de morbidité. En Belgique, ces pathologies sont responsables de 37% des décès (33% des décès chez les hommes et 40% chez les femmes) . Les études épidémiologiques ont montré que certaines populations sont plus susceptibles que d’autres de développer ou de décéder des maladies cardio-vasculaires (1). Pendant longtemps, l’Europe a été caractérisée par des écarts importants de mortalité cardio-vasculaire entre le Nord, plus à risque, et le Sud. Ces différences entre populations s’expliquent par des facteurs génétiques, environnementaux, sociaux et culturels. Parmi les facteurs culturels et environnementaux, des travaux scientifiques montrent, depuis plusieurs dizaines d’années, que l’alimentation et l’état nutritionnel participent de façon essentielle au développement et à l’expression clinique des maladies dans l’ensemble des pays industrialisés. Un équilibre nutritionnel, une consommation alimentaire variée, avec une répartition satisfaisante des quantités ingérées permettent de préserver un bon état de santé. Les études épidémiologiques interethniques ont joué un rôle important dans l’avancée de la recherche de ces facteurs. Les études d’observation révèlent que lorsque des sujets d’un groupe ethnique particulier changent d’environnement, leur statut physique change au contact du nouvel environnement et diffère généralement de ceux restés dans le pays d’origine. La comparaison des taux de mortalité et de morbidité des immigrés de longue date aux taux observés dans le pays d’origine permet d’étudier la contribution des facteurs génétiques et environnementaux dans les variations de morbidité et de mortalité. Les différences de morbidité et de mortalité entre ethnies ont été largement documentées pour les immigrés hispaniques, africains et sud-asiatiques en Amérique du Nord et en Grande Bretagne. Ces études ont montré que le profil de santé des immigrés est influencé tant par l’environnement du pays de naissance que par celui du pays d’accueil. L’influence de ces deux environnements peut donner lieu à 3 modèles de morbidité et de mortalité : la sous-mortalité (principalement observée parmi les immigrés de première génération issus de pays moins développés), la convergence (mortalité ou morbidité égale. Ce modèle concerne essentiellement les immigrés de seconde génération) et le dépassement (sur-mortalité ou sur-morbidité). La santé des immigrés en Belgique est mal connue et peu étudiée. Dans la majorité des statistiques sanitaires comme dans les recherches épidémiologiques, les critères de nationalité et de naissance soit n'apparaissent pas du tout, soit ne font l'objet d'aucune analyse. L'occultation de ces variables a cependant pour conséquence de laisser dans l'ombre des indications précieuses pour la mise en œuvre de politiques de santé publique. Bien que d’un intérêt évident en épidémiologie, les études interethniques posent un certain nombre de problèmes méthodologiques. Difficile à traiter, cette question n'en demeure pas moins essentielle à penser.

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

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Thèse numérisée par la Division de la gestion de documents et des archives de l'Université de Montréal.

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

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L’augmentation de la fréquence des pathologies vasculaires va créer ces prochaines années, des besoins importants en substituts vasculaires de petits calibres. L’idéal, à ce jour, reste l’utilisation de vaisseaux autologues réduisant les risques infectieux et immunologiques mais d’usage limité ce qui est à l’origine de l’ingénierie cellulaire. L’identification des progéniteurs vasculaires est d’un intérêt majeur dans ce domaine. Ces cellules d’origine autologues sont douées d’une grande capacité de prolifération et d’un potentiel de différenciation en cellules vasculaires (cellules endothéliales (CE) et cellules musculaires lisses (CML)) mais la difficulté réside dans le choix du recouvrement de la surface du support de culture qui favorise leur adhésion et prolifération Dans ce travail, nous avons choisi les films multicouches de polyélectrolytes et mesuré leur impact sur le comportement de ces cellules progénitrices en fonction de différentes conditions de culture (normoxie ou hypoxie). Nous avons montré dans un premier temps, que ces films multicouches de polyélectrolytes permettaient d’accélérer la différenciation de ces cellules en CE matures. Nous avons également montré que ces mêmes cellules cultivées en hypoxie étaient capables de se différencier en cellules contractiles stables dans le temps, présentant un phénotype comparable à celui des CML matures. L’association de ces résultats additionnés aux avantages apportés par des feuillets détachables est à la base de la construction d’un substitut vasculaire autologue de petit calibre, composé de CE et de CML issues d’un même pool de cellules, mais cultivées dans des conditions différentes. / The increase of vascular pathologies is going to create these next years, important needs in vascular substitutes of small calibres. The gold standard, this day, remains the use of autologous vessels reducing the infectious and immunological risks, but of limited custom, which is at the origin of tissue engineering. The identification of vascular progenitor cells is of major interest in vascular engineering. These autologous cells present a high capacity of proliferation and a potential of differentiation in vascular cells (endothelial cells (EC) and smooth muscle cells (SMC)) but the difficulty lies in the choice of the coated surface of culture which facilitates their adhesion and proliferation. In this work, we chose polyelectrolytes multilayer films and measured their impact on these vascular progenitor cells in various conditions of culture (normoxia or hypoxia). We showed at first, that these polyelectrolytes multilayer films allowed to accelerate the differentiation of these cells into matures EC. We also showed that these same cells cultivated under hypoxic conditions were able to differentiate into stable and contractile cells, presenting a phenotype comparable to the mature SMC. The association of these results added to the advantages brought by detachable sheet is the basis of the construction of an autologous small calibre vascular substitute consisting of EC and SMC differentiated from the same pool of cells, but cultivated in different conditions.

L'hypothèse que l'hypertension peut conférer un état d'hypercoagulabilité découle des principales complications liées à l'hypertension, l'infarctus du myocarde et accident vasculaire cérébral. Notre objectif était de déterminer si l'hypertension spontanée confère des changements dans les protéines de la coagulation et de la capacité de production de thrombine dans le sang et la paroi vasculaire. Nous avons utilisé le modèle de rats spontanément hypertendus (SHR) par rapport aux rats Wistar. La génération de thrombine est plus faible dans le plasma riche en plaquettes et plasma sans plaquettes de SHR par rapport à Wistar. Ceci est lié aux faibles concentrations en facteur tissulaire (TF) et en prothrombine, ainsi qu?un taux plus élevé de TFPI dans le plasma des SHR. En revanche, l'ajout d'anneaux d'aorte thoracique de SHR à un pool de plasma Wistar a donné lieu à une augmentation plus importante dans la génération de thrombine par rapport à l'ajout d'anneaux équivalent du Wistar. Alors qu'aucune différence n'a été observée pour les cellules endothéliales, la formation de thrombine était plus élevée à la surface de culture CML aortiques des SHR que des Wistar. L'exposition des phospholipides chargés négativement est plus élevée sur les anneaux et les CML des SHR que les Wistar. Les activités TF et TFPI étaient plus élevés chez les CML des SHR. Ces résultats montrent une opposition de génération de thrombine à la surface de la paroi artérielle et dans le plasma des rats SHR par rapport aux rats Wistar. Le phénotype thrombotique plus élevé de la paroi vasculaire SHR est dû à la capacité du CML à soutenir la génération de thrombine. Ces résultats suggèrent que le remodelage de la membrane phospholipidique et la synthèse de molécules pro-coagulantes induites par hypertension dans les CML sont des substrats pour une formation de thrombine accrue dans la paroi vasculaire / The hypothesis that hypertension may confer a hypercoagulable state arises from the main complications associated with hypertension, stroke and myocardial infarction. Our objective was to determine whether spontaneous hypertension confers changes in the coagulation proteins and the thrombin generating capacity in blood and the vascular wall. We used the model of spontaneously hypertensive rats (SHR) compared with Wistar rats. Thrombin generation was lower in platelet-rich plasma and platelet-free plasma from SHR compared to Wistar. This was related to lower tissue factor (TF) and prothrombin as well as higher TFPI levels in SHR plasma. In contrast, the addition of thoracic aorta rings of SHR to a Wistar plasma pool resulted in a higher increase in thrombin generation compared to the addition of equivalent rings from Wistar. Whereas no difference was observed for endothelial cells, thrombin formation was higher at the surface of cultured SHR aortic SMCs than from Wistar. Exposure of negatively-charged phospholipids was higher on SHR than on Wistar rings as well as on SMCs. TF and TFPI activities were higher in SHR SMCs. These results show opposite thrombin generating capacity of plasma and vessel walls in SHR compared to Wistar. The higher prothrombotic phenotype of the SHR vessel wall was due to the ability of SMCs to support thrombin generation. These findings suggest that the hypertension-induced membrane phospholipid reorganization and synthesis of procoagulant molecules in SMCs provide substrates for increased thrombin formation within the vessel wall