El presente trabajo tiene como objetivo la síntesis estereoselectiva de oxazinonas y oxazolidinonas quirales a partir del aminoácido natural L-Serina, estos heterociclos constituyen formas protegidas cuya posterior ruptura en condiciones suaves permite obtener aminodioles y aminoácidos con configuración definida. La obtención de oxazinonas y oxazolidinonas quirales se realizo por reacciones de ciclocarbamación de carbamatos alilicos y apertura de epoxidos de carbamatos alilicos. Como muestra de la viabilidad de estos substratos para la obtención de aminodioles y aminoácidos quirales. Se sintetizo los aminodioles quirales (2R,4S)-2-aminopentano-1,4-diol, (1S,3R)-3-amino-1-fenilbutano-1,4-diol y la 2R,4S-g-hidroxinorvalina en su forma de lactona (2R, 4S)--hidroxinorvalina a partir de la oxazinonas (4S,5S,6R) 4-Hidroximetil-5-iodo-6-fenil-1,3-oxazin-2-ona y (4S,5S,6S)-4-Hidroximetil-5-iodo-6-metil-1,3-oxazin-2-ona. Además, la configuración de los carbonos asimétricos en el compuesto Ácido (4R, 6S)-6-metil-2-oxo-1,3-oxazin-4-carboxílico fue confirmada mediante análisis cristalográfico de rayos X / The aim of the present work is the estereoselective synthesis of chiral oxazinones and oxazolidinones from the natural aminoacid L-Serine, these heterocicles constitute protected forms which posterior cleavage in soft conditions allows to obtain aminodiols and aminoacids with definite configuration. The obtaining of chiral oxazinones and oxazolidinones is realized for reactions of ciclocarbamation of allilic carbamates and opening of epoxides of allilic carbamates.As sample of the viability of these substrates for the obtaining of aminodioles and charal aminoacids. I synthesize the chiral aminodiols (2R, 4S)-2-aminopentane-1,4-diol, (1S, 3R)-3-amino-1-phenylbutane-1,4-diol and it 2R, 4S--hydroxinorvaline in its form of the lactone (2R, 4S) - -hydroxinorvaline from the oxazinones (4S, 5S, 6R) 4-Hydroximethyl-5-iodo-6-phenyl-1,3-oxazin-2-one and (4S, 5S, 6S)-4-Hydroximethyl-5-iode-6-methyl-1,3-oxazin-2-one. In addition, the configuration of the asymmetric carbons in the Acid compound (4R, 6S)-6-methyl-2-oxo-1,3-oxazin-4-carboxílic was confirmed by means of analysis cristalographic of RX.

En las últimas décadas han surgido una gran cantidad de métodos catalíticos para formar biarilos a partir de precursores monoarilos. La formación de enlaces carbono-carbono vía acoplamiento de reactivos organometálicos con haluros orgánicos o triflatos catalizado por metales de transición se ha convertido en una importante metodología de síntesis. En la actualidad, las reacciones de acoplamiento cruzado (cross-coupling), son una estrategia ampliamente generalizada para la obtención de sistemas de tipo biarilo. En el caso de las triazolopiridinas no existían ejemplos de reacciones de acoplamiento. Basándonos en la literatura descrita se decidió la aplicación de las metodologías de acoplamiento para preparar biheterociclos del tipo triazolopiridinas arilsustituídas con la finalidad de estudiar sus propiedades ópticas y su potencialidad como ligandos. La utilización de triazolopiridinas en este ámbito, química de coordinación, ha sido escasamente estudiada. Los pocos precedentes existentes en la literatura muestran las posibilidades reales del sistema triazolopiridina y sus derivados como ligandos polinitrogenados, siendo potencialmente capaces de formar compuestos con metales que puedan actuar como sensores fluorescentes, sensores químicos o bien que tengan aplicaciones en el campo de los materiales magnéticos. El primer objetivo de la tesis consisti¨® en el estudio de reacciones de acoplamiento, principalmente reacciones de tipo Suzuki, en el campo de las triazolopiridinas para la obtención de ariltriazolopiridinas. Las nuevas series de derivados ariltriazolopiridinas preparadas resultaron ser productos altamente fluorescentes. En segundo lugar, también se ha contribuido al desarrollo de una nueva metodología de acoplamiento para sistemas heterocíclicos. La técnica se basa en la utilización de complejos organometálicos de magnesio y zinc tipo "ate" (magnesiatos / zincatos) y presenta como principales ventajas la baja toxicidad de los reactivos y la posibilidad de trabajar en condiciones de reacción suaves. Uno de los problemas habituales en química organometálica es el uso de condiciones extremas no asumibles a nivel industrial (muy bajas temperaturas). El uso de magnesiatos permite moderar dichas condiciones posibilitando el traslado de reacciones a mayor escala, pero su uso no está generalizado, siendo necesaria la validación con diferentes sistemas heterocíclicos (TT-defitarios y TT-excedentarios). El segundo de los objetivos de este trabajo ha sido, por tanto, el estudio de la formación de complejos "ate" de magnesio en diversos sistemas heterocíclicos y su reactividad frente a electrófilos y en reacciones de acoplamiento directo catalizadas por paladio.Por último se ha llevado a cabo un estudio teórico y experimental de la isomerización anillo-cadena en piridiltriazolopiridinas, uno de los sustratos utilizados a lo largo de la investigación realizada. Basándonos en los resultados se ha podido establecer un patrón de comportamiento en función de las características electrónicas de los grupos sustituyentes. / 1. Biaromatic fluorophores have been exploited in several analytical applications. Heterobiaryls have important biological properties and the biaryl unit is represented in several types of compounds of current interest including natural products, polymers, advanced materials, liquid crystals, luminescent molecular chemosensors, and molecules of medicinal interest. The architecture of p-conjugated heteroaromatic compounds assumes significance in view of the applications of these compounds. Recently, we have obtained a sensor of cations and anions based on the fluorogenic properties of a terheteroaryl system in which the [1,2,3]triazolo[1,5-a]pyridine nucleus is present. Nevertheless the fluorescence properties of [1,2,3]triazolo[1,5-a]pyridines have been scarcely studied. Two series of compounds, 3-aryl- and 3-methyl-7-aryl-[1,2,3]triazolo[1,5-a]pyridines have been synthesized by Suzuki cross-coupling reactions. All compounds obtained are fluorescents.2. We describe the first deprotonation¨Celectrophilic trapping sequences using magnesates. The preparation of functional heterocycles is an important synthetic goal because of the multiple applications of these molecules. Among the methods developed, lithiation is convenient to allow a number of polyfunctional azine (pyridines, quinolines,. . .) and diazine syntheses since lithiated derivatives display a high reactivity towards many electrophilic functions. Nevertheless, this methodology often requires low temperatures, which can be difficult to realize on an industrial scale. Herein, we describe the synthesis and reactivity of lithium arylmagnesates through the regioselective deprotonation of aromatic compounds using lithium magnesates. The main advantage of this methodology is the relative stability of the organometallic species formed.3. An experimental (1H NMR) and theoretical (DFT) study of the ring¨Cchain¨Cring isomerization of 3-(2-pyridyl)-[1,2,3]triazolo[1,5-a]pyrid-7-yl derivatives (A) into 6-{[1,2,3]triazolo[1,5-a]pyrid-3-yl}-2-pyridyl derivatives (B) has been carried out. Based on the calculations, a mechanism of several steps will be proposed. The experimental results as well as the calculations lead to the conclusion that the A¨CB ratio depends on the electronic properties of the substituents.

La patogénesis de la fasciolosis depende de la carga parasitaria y del tamaño de los trematodos adultos. En zonas de hiperendemia, las intensidades individuales de parasitación humana pueden alcanzar niveles muy altos, estando la mayoría de los individuos parasitados en la fase de cronicidad avanzada. En este estudio se ha utilizado el modelo experimental de fasciolosis en rata Wistar por ser un modelo animal útil que mimetiza la fasciolosis crónica avanzada en humanos. Se ha infectado un total de 169 ratas con 20 metacercarias/rata vía oral, llevándose a cabo los siguientes análisis: A) Estudio la influencia de la intensidad individual de infección por rata (entendiendo la intensidad de infección como el número de trematodos por hospedador en el canal biliar principal) sobre: a) el desarrollo del adulto; b) el tiempo comprendido entre la ingestión de metacercarias y la presencia de huevos en heces (el periodo prepatente, pp) y c) el número de huevos por gramo de heces y por adulto (hgh/adulto). B) Estudio la influencia de la presencia de litiasis sobre el desarrollo del adulto. C) Estudio la influencia del género del hospedador definitivo experimental sobre la producción de huevos (hgh). Se ha calculado las trayectorias ontogenéticas de las siguientes medidas biométricas: área corporal (AC), perímetro corporal (P), anchura corporal (AnC) y longitud corporal (LoC). En los grupos analizados las trayectorias ontogenéticas de las medidas siguen un modelo logístico [y = ym / {1 + z0 exp (-kt)}, donde ym es el valor máximo al cual tiende la variable biométrica y; z0 y k = parámetros de las trayectorias; t= tiempo]. Los resultados obtenidos muestran que cuando el número de adultos aumenta, el valor de ym de estas medidas (AC, P, LoC y AnC) disminuye. El “crowding effect” se manifiesta cuando las medidas corporales del Trematodo adulto se aproximan a los valores máximos alcanzados en la fase de cronicidad avanzada. En las últimas fases de desarrollo, las tasas de crecimiento de las medidas corporales son más altas cuando menor es la carga parasitaria. El pp y los hgh/adulto se muestran dependientes del nivel de infección, disminuyendo cuando la carga parasitaria aumenta. Esto significa que el número de huevos por gramo de heces tiende a desestimar la carga parasitaria. En todas las medidas biométricas analizadas, los valores del tiempo en el punto de inflexión en el modelo logístico son similares a los datos empíricos sobre el pp, es decir, el momento donde empieza la emisión de huevos. Los resultados muestran que los adultos de F. hepatica alcanzan un menor desarrollo corporal cuando existe la presencia de litiasis concomitante en los conductos hepáticos. El estudio de la influencia del género del hospedador definitivo experimental revela que, en la fasciolosis crónica avanzada, en hembras Wistar (con una intensidad individual de infección de Trematodos adultos por rata similar a los machos) existe una mayor producción de hgh que en machos. Los resultados obtenidos muestran que la intensidad de infección, la litiasis y el género del hospedador definitivo son factores a tener en consideración cuando estudiamos el desarrollo de los adultos de F. hepatica en el modelo Wistar en la fase crónica avanzada. La consideración de estos factores es de interés tanto en estudios epidemiológicos, como en estudios experimentales in vivo sobre la acción de fármacos antihelmínticos y vacunas, patología, inmunología y resistencia. / Fascioliasis pathogenesis depends on fluke burden and size. In human hyperendemic zones, individual infection intensities can reach very high levels being the majority of infected subjects in the advanced chronic phase. Wistar rat model has been used due to the fact it offers a useful approach for pathological research in the advanced chronic period in humans. 169 rats have been orally infected with 20 metacercariae/rat, developing the following tests: (i) influence of infection intensity per rat on fluke development (adult’s development, time between metacarcariae intake and presence of eggs in faeces, and number of eggs per gramme of faeces and adult); (ii) influence of lytiasis on the adult’s development; and (iii) influence of the experimental definitive host genus on egg production. Ontogenetic trajectories of fluke body measurements (AC, P, AnC and LoC), followed a logistic model. Results showed that (i) when burden increases, maximum values of fluke body measurements decrease; (ii) crowding effect is apparent when fluke measurements approximate their maximums in the advanced chronic stage; (iii) pre-patent period (pp) and egg production (hgh) decrease when fluke burden increases, meaning that measurements of eggs per gramme of faeces tend to underestimate the fluke burden; (iv) adults of F. hepatica reach a lower body development when concomitant lytiasis is observed in liver ducts; (v) when fasciolasis chronic stage, egg production is higher in Wistar rat females. Thus, intensity of infection, lytiasis and definitive host genus are factors to take into consideraction when studying the development of the adults of F. hepatica in Wistar model on an advanced fasciolasis chronic stage. This quantification may be of great interest in both, epidemiological studies and experimental research on the in vivo actions of different anthelminthic drugs and vaccines, pathology, immunology and resistance studies.

En los últimos años, la industria alimentaria ha incrementado su interés en el desarrollo de alimentos funcionales, siendo el enriquecimiento de bebidas a base de zumo de frutas con vitaminas y minerales uno de los métodos empleados. Esta estrategia persigue mejorar el estado nutricional de la población, o de grupos específicos de población y/o corregir posibles deficiencias en la ingesta diaria de vitaminas o minerales, debidas a cambios en los hábitos alimentarios. No obstante, se precisa un mayor conocimiento sobre las interacciones que puedan producirse entre los compuestos bioactivos de las bebidas a base de zumo de frutas y los minerales adicionados, o viceversa. Para ello, se estudia la influencia del almacenamiento en refrigeración (2-4 ºC) y digestión gastrointestinal simulada en las muestras objeto de estudio (bebidas a base de zumo de frutas (uva-naranja-melocotón) con o sin leche y/o minerales (Fe y Zn)) sobre la capacidad antioxidante total (métodos ORAC y TEAC), polifenoles solubles totales y contenido de ácido ascórbico. Se observa que las propiedades antioxidantes de las bebidas no disminuyen durante su período de vida útil (135 días) tras el almacenamiento en refrigeración así como después de un proceso de digestión gastrointestinal in vitro. Destacar que la presencia de hierro y/o cinc y/o leche, disminuye el contenido de polifenoles solubles totales, observando, sin embargo, un efecto positivo del cinc sobre los flavan-3-oles tras la digestión gastrointestinal. Asimismo, se evalúan los efectos biológicos, en cultivos celulares, de las fracciones bioaccesibles de las bebidas objeto de estudio a través de la actividad citoprotectora frente a estrés oxidativo inducido y mediante la actividad antiproliferativa en células tumorales de cáncer de colon (Caco-2 y HT-29). Las bebidas a base de zumo de frutas que contienen cinc y cinc-leche son aquellas con mayores efectos beneficiosos, ya que ejercen un efecto citoprotector manteniendo la integridad mitocondrial y metabólica de las células, inducen la enzima GSH-Rd, ejercen una respuesta adaptativa del ciclo celular y previenen de la apoptosis caspasa-dependiente. Además, inhiben la proliferación de las células de cáncer de colon a través de un efecto citostático, debido al bloqueo en la progresión del ciclo celular en la fase S, acompañado de un descenso en la expresión de las ciclinas B1 y D1. Por otra parte, se determina la influencia del consumo de las bebidas objeto de estudio sobre el estatus antioxidante de mujeres sanas en edad fértil. Tras el estudio de intervención, no se mejora de la capacidad antioxidante total sérica por el bajo estrés oxidativo endógeno y la ausencia de cambios drásticos en los hábitos alimentarios de la población de estudio, aunque se induce la actividad de la enzima superóxido dismutasa , la cual podría ejercer un efecto protector en forma de "tolerancia" frente a un daño oxidativo posterior. Finalmente, se determina la bioaccesibilidad de hierro y cinc tras el proceso de digestión gastrointestinal simulada, junto a la biodisponibilidad de hierro en células Caco-2 utilizando la síntesis de ferritina como criterio estimador de la misma. La interacción negativa del cinc sobre la bioaccesibilidad del hierro es contrarrestada en presencia de leche, posiblemente debido a los caseinofosfopéptidos formados durante el proceso de digestión, mientras que la síntesis de ferritina es 3 veces superior en las bebidas que contienen leche y hierro, poniendo de manifiesto que la presencia de caseinofosfopéptidos mejora la captación celular de hierro. / In last years food industry has focused its interest in the development of functional foods, being fortification of fruit beverages with vitamins and minerals one of the methods employed. However, more knowledge about interactions between bioactive compounds of fruit beverages and minerals is needed. To do this task, it was evaluated total antioxidant capacity (ORAC and TEAC methods), total soluble phenolic compounds and ascorbic acid content as influenced by cold storage (2-4 ºC) and an in vitro simulated gastrointestinal digestion in fruit beverages supplemented with/without iron and/or zinc and/or milk. Results showed that antioxidant properties did not diminish after cold storage and the digestion process. Likewise, biological effects such as cytoprotection against H2O2-induced oxidative stress and antiproliferative activity were determined using the bioaccesible fraction of fruit beverages upon cell cultures (Caco-2 and HT-29 cells). Fruit beverages with zinc and zinc-milk conferred the biggest effects against oxidative stress maintaining the functionality of cells and showing an antiproliferative activity due to a cytostatic mode of action. On the other hand, it was evaluated the impact of fruit beverage consumption upon antioxidant status in healthy woman of fertile age. After the intervention study, serum total antioxidant capacity was not improved but increase erythrocyte superoxide dismutase activity what could imply a protective effect in the form of “tolerance” to a subsequent larger challenge. Finally, iron and zinc bioaccessibility together with iron bioavailability determined by means ferritin synthesis in Caco-2 cells was assessed. The negative interaction of zinc on iron bioaccessibility was overcome in the presence of milk probably due to caseinophosphopeptides formed during the digestion process, while ferritin synthesis was 3-fold higher in fruit beverages with iron and milk, what implies that possibly caseinophosphopeptides could improve iron cellular uptake.

Son muchos los estudios que se han realizado para determinar la absorción intestinal de fármacos y cada grupo de trabajo utiliza su propia técnica experimental adaptada a sus condiciones de laboratorio y para las que se ha establecido previamente su capacidad predictiva sobre el resultado final in vivo en humanos. En el modelado de procesos cinéticos, como la absorción, para establecer correlaciones estructura actividad es frecuente combinar y comparar datos obtenidos en la misma especie animal o cultivos celulares en diferentes laboratorios a fin de incrementar la significación del modelo y su ámbito de aplicación a mayor número de moléculas. No obstante es frecuente observar disparidad en los valores obtenidos para un mismo fármaco en distintos laboratorios a pesar de utilizar técnicas experimentales similares. Este trabajo es parte de un proyecto en el que se pretende caracterizar la variabilidad asociada a los experimentos de perfusión in situ en rata y modelos de cálculo de permeabilidad en cultivos celulares en distintos laboratorios y estimar cuales son los factores principales responsables de la misma y de que modo pueden estandarizarse y/o ponderarse los distintos resultados si se dispone de información sobre el protocolo experimental. Con este fin en este trabajo se ha caracterizado la permeabilidad intestinal de dos fármacos modelo: Metoprolol y Verapamilo en cinco razas de rata utilizando en ambas machos y hembras y en 4 líneas celulares utilizando distintos pases, es decir monocapas celulares formadas en un rango de generaciones entre 10 y 80. Se seleccionó Metoprolol porque es el patrón utilizado para clasificar los compuestos en alta o baja permeabilidad y Verapamilo como conocido sustrato de glicoproteina-P. El objetivo principal es caracterizar la variabilidad asociada a los experimentos de perfusión in situ en rata y modelos de cálculo de permeabilidad en cultivos celulares en distintos laboratorios y estimando cuales son los factores principales responsables de dicha variabilidad y de qué modo pueden estandarizarse y/o ponderarse los distintos resultados si se dispone de información sobre el protocolo experimental. / Absorption of drugs from the gastrointestinal (GI) tract is very complex and is influenced by many factors, which fall into three classes. The first class of factors comprises physicochemical properties of drugs, including pKa, solubility, stability, diffusivity, and lipophilicity. The second class comprises physiological factors such as GI pH, gastric emptying, intestinal transit, gut wall metabolism, and active transport including drug efflux. Finally, the third class includes the formulation factors such as surface area, drug particle size and crystal form, and type of dosage form. In any animal model to predict human absorption it is important to take into account the factors that can add variability to the results in order to standardize the protocols and to obtain more predictive and accurate parameters. Nowadays, mathematical analysis of kinetics and dynamics of these processes in the GI tract try to establish a correlation between clinical and pre-clinical data. These studies use data obtained in different laboratories and different breeds. However, it is very common to observe statistical differences in permeability results obtained in different laboratories or different breed using the same drug. This work is part of a bigger project, which tries to characterize the variability included in experimental techniques, like in situ closed loop technique in rats, due to breed and gender in rats. Two standard drugs, metoprolol and verapamil, were selected to determine intestinal permeability in five breed of rats and in both sexes. metoprolol was selected because it is the standard reference compound (for high-low permability classification) and the other one, verapamil was chosen as a known P-glycoprotein substrate.

INTRODUCCIÓN: El cáncer de mama adquiere cada vez mayor relevancia por ser la enfermedad maligna que afecta a mujeres más común del mundo desarrollado. Aunque la mortalidad por cáncer de mama ha descendido, en los últimos años la incidencia de cáncer de mama se ha mantenido estancada. Se vuelve, por tanto, fundamental realizar esfuerzos encaminados a la prevención de esta enfermedad, siendo necesario para ello conocer el perfil de la paciente diagnosticada de cáncer de mama en la actualidad para valorar los posibles cambios producidos en este perfil en los últimos tiempos. Este estudio pretende obtener el perfil actual de las pacientes diagnosticadas de cáncer de mama en el momento de la detección, en el que se ponga de manifiesto la relación, si la hubiera, entre una serie de factores a estudiar y el desarrollo de cáncer de mama, con el fin de poder diseñar un programa de prevención de cáncer de mama. Se pretende, también, comprobar si el método definido por Gail es aplicable y predictivo en la población de mujeres valencianas, y por último, conocer la influencia que sobre la supervivencia global de los pacientes con cáncer de mama tienen ciertas variables de estudio. PACIENTES Y MÉTODOS: Se realizó un estudio retrospectivo mediante revisión de la información obtenida por el facultativo en la primera visita a casos incidentes de cáncer de mama, que habían sido atendidos en el Hospital Clínic Universitari de Valencia y en la Fundación Instituto Valenciano de Oncología durante el periodo comprendido entre enero de 2000 y diciembre de 2001. Se realizó un estudio de casos y controles, un análisis multivariante y, por último, se evaluó la supervivencia global de los pacientes con cáncer de mama, así como la supervivencia obtenida en función de determinados factores. Además, se realizó un estudio sobre la aplicación del método de Gail de cálculo de riesgo en la población de estudio. RESULTADOS: Los resultados obtenidos demuestran que las patologías benignas de mama, particularmente las lesiones calificadas como proliferativas, incrementan el riesgo de desarrollar cáncer de mama. Se corroboró la importancia del autoexamen mamario en la mujer. Se obtuvo una disminución del riesgo para aquellas mujeres con menos un hijo. Y la menopausia>55 años aumentó significativamente el riesgo. El método de Gail sólo habría detectado al 41% de las pacientes que han desarrollado un cáncer de mama. CONCLUSIONES: Sería recomendable incorporar la variable patología mamaria previa en los criterios de selección de mujeres para el cribado del cáncer de mama. Se confirma la paridad como un importante factor protector El método de Gail no parece adaptarse a la población valenciana. En nuestra población sería útil para mujeres de edades avanzadas con antecedentes de cáncer de mama. / INTRODUCTION: Breast cancer is the most common malignant disease affecting women in the developed world. It seems essential to make efforts at the prevention of breast cancer, being necessary to know the profile of the patient diagnosed with breast cancer nowadays to assess possible changes. This study seeks to obtain a current profile of patients diagnosed with breast cancer at the time of detection, to highlight the relationship between a number of factors and breast cancer, in order to improve the prevention programs for breast cancer. It is to check whether the method defined by Gail is applicable and predictive in Valencian women and know the influence on overall survival of certain variables. PATIENTS AND METHODS: A retrospective method was carried out by a review of information obtained at the first sight of incident cases treated at the University Hospital of Valencia and the Valencian Institute of Oncology Foundation between January 2000 and December 2001. It realized a case-control study, a multivariate analysis and assessed the overall survival of patients, the survival obtained in certain factors. Besides, it examined the application of the method of Gail risk calculation. RESULTS: Breast benign pathologies, particularly those classified as proliferative lesions, increase the risk of developing breast cancer. It confirmed the importance of breast self-examination in women. It was obtained a reduction of risk for women with at least one child and menopause > 55 years old significantly increased the risk. I would only have detected 41% of patients who have developed breast cancer using the Gail method. CONCLUSIONS: It would be advisable to incorporate the variable previous breast disease screening criteria for breast cancer. Parity is confirmed as an important protective factor. The method of Gail does not seem to fit in the population of Valencia. It would be useful in our population for older women with a history of breast cancer.

INTRODUCCIÓN Los anestésicos locales (AL) son empleados en las técnicas de anestesia locoregional por su capacidad de bloquear la conducción de impulsos nerviosos, de modo que la función sensitiva o motora de las fibras nerviosas queda inhibida transitoriamente. Estas técnicas locoregionales pueden utilizarse como técnica única o en combinación con anestesia general. El bloqueo combinado del plexo lumbar (PL) y del nervio ciático (NC) para cirugía ortotraumática de miembros inferiores es la modalidad de elección frente a la anestesia espinal y general. Existen pocos estudios referentes a la administración de mezclas de AL de acción prolongada. Para el adecuado desarrollo de la técnica anestésica debe garantizarse, la compatibilidad fisico-química de la mezcla de bupivacaína con ropivacaína. Además, la eficacia y seguridad del procedimiento anestésico depende del comportamiento cinético de la solución anestésica administrada. OBJETIVOS La hipótesis que se pretende demostrar, es que mediante la administración de bupivacaína y ropivacaína en PL y NC, las concentraciones plasmáticas alcanzadas no son tóxicas, y que dicha técnica consigue un intraoperatorio y un postoperatorio satisfactorio. MÉTODOS El presente estudio es observacional, de una única cohorte, en el contexto de la rutina clínica asistencial, de pacientes sometidos a una técnica anestésica en PL y NC, e intervenidos de prótesis de rodilla o de cadera La técnica anestésica empleada es la descrita por Winnie para el bloqueo del PL y por Labat para el bloqueo del NC. Se administra una dosis única, previamente a la intervención quirúrgica, de ropivacaina 7,5 mg/ml y bupivacaína 5 mg/ml con adrenalina 0,005 mg/ml en PL y en NC. La técnica de valoración utilizada ha sido la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). RESULTADOS El tiempo de retención para la ropivacaína fue de 2.49min. y para la bupivacaína de 4.06min. Se incluyeron 32 pacientes (60% mujeres). El estudio ha supuesto la monitorización de 88 concentraciones plasmáticas. El modelo farmacocinético base ha sido un modelo monocompartimental con cinética de incorporación de orden 1 para ropivacaína y bicompartimental con cinética de incorporación de orden 1 para bupivacaína, y eliminación de orden 1 para los dos fármacos. El modelo farmacocinético con covariables seleccionado ha sido un modelo en el que los parámetros farmacocinéticos de la ropivacaína, no dependen de ninguna de las covariables probadas, mientras que el Vd de la bupivacaína depende de la variable peso, y la Ka depende de la covariable edad. Los parámetros farmacocinéticos obtenidos, para la ropivacaína son Vd 63,2L y Cl 3,61L/h. Para la bupivacaína el Vd es de 417,2L, y Cl de 4,42 L/h. La constante de transferencia del plexo al torrente sanguíneo es de Ka 2,21 h-1 para la ropivacaína y de Ka 1,36 h-1 para la bupivacaína. Los dos lugares de administración de los AL, se comportan cinéticamente como un único compartimento El modelo farmacodinámico, ha sido un modelo en el que la probabilidad de dolor depende del efecto basal y de la cantidad de bupivacaína de manera lineal. En el análisis de supervivencia global, a las 6 horas el 93,8% de los pacientes no requieren de analgesia tras la intervención quirúrgica. Cuando realizamos un análisis de supervivencia, estratificado por sexo, se observa que a las 24h el 66,7% de las mujeres y el 92,3% de los hombres no requieren analgesia (p=0,096). CONCLUSIONES La mezcla de los dos anestésicos locales se considera una opción adecuada para realizar el bloqueo en pacientes sometidos a cirugías ortotraumáticas, debido a que se combina la mayor rapidez del inicio del bloqueo inducido por la ropivacaína y la analgesia más duradera provocada por la bupivacaína. / Background Lumbar-plexus (LP) and sciatic-nerve (SN) blocks are commonly combined for lower extremity anesthesia using local anesthetics (LA). Limited information is available about the pharmacokinetics of this practice and about the administration of mixtures of long-acting LA. We analyzed plasma ropivacaine and bupivacaine concentrations after single-injection LP blocks and SN blocks. The hypothesis that seeks to demonstrate is that the plasma concentrations achieved are not toxic, and that the technique achieves a satisfactory intraoperative and postoperative course. Methods A prospective cohort study was performed in patients undergoing an anesthetic technique in LP and SN, and treated for knee or hip replacement. A single dose prior to surgery, of ropivacaine 7.5 mg/ml and bupivacaine 5 mg/ml with adrenaline 0.005 mg/ml in LP and SN was administered. Results 32 patients (60% women) were enrolled. The base pharmacokinetic model was one compartment model for ropivacaine and two compartment model for bupivacaine, with first order elimination for both drugs. In the covariate selection, pharmacokinetic parameters of ropivacaine, not dependent on any of the covariates tested, while the Vd of bupivacaine depends on the weight, and the Ka depends on the age . The pharmacokinetic parameters for ropivacaine are Vd 63.2L and CL3.61 L/h. For bupivacaine, Vd is 417.2L, and Cl of 4.42 L/h. The transfer constant plexus into the bloodstream is Ka 2.21h-1 for ropivacaine and Ka 1.36h-1 for bupivacaine. The two sites of administration of the AL, kinetically behave as a single compartment. The pharmacodynamic model has been a model in which the probability of pain depends on the baseline effect and the amount of bupivacaine. In the analysis of overall survival at 6 hours, 93.8% of patients required no analgesia after surgery. When we conducted a survival analysis, stratified by gender shows that at 24h 66.7% of women and 92.3% of men do not require analgesia (p = 0.096). Conclusion The mixture of the two LA is considered an appropriate option for LP and SN blocks in patients undergoing orthopaedic surgery, because it combines the faster onset of block induced by ropivacaine and more prolonged analgesia produced by bupivacaine.

La Enfermedad Pulmonar Obstructiva Crónica (EPOC) es una patología caracterizada por una obstrucción progresiva irreversible de las vías aéreas cuya causa principal es el humo de tabaco. Una característica distintiva de esta enfermedad es la hipersecreción mucosa; además, el estrés oxidativo está implicado en este proceso. En dicho estés oxidativo juega un papel muy importante el complejo NADPH oxidasa. En esta tesis, se planteó el caracterizar los mecanismos por los que la activación del complejo NADPH oxidasa mediada por tabaco conducían a la hipersecreción mucosa, estudiando la implicación del AMPc en dicho proceso. Los resultados muestran que el tabaco activa el complejo NADPH oxidasa, el cual genera un estrés oxidativo que conduce a la activación del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR), y que dicha activación conduce a una sobreexpresión de mucinas en un proceso dependiente del descenso de los niveles de AMPc. Tanto el bloqueo de la actividad NADPH oxidasa con un inhibidor no específico del sistema, el difenileneidonio (DPI), con el antioxidante N- acetilcisteína (NAC), así como con el inhibidor selectivo de la fosfodiesterasa (PDE)4 piclamilast vía un aumento de los niveles de AMPc, inhiben a diferentes niveles la inducción de la expresión génica de mucinas en respuesta a la activación del complejo NADPH oxidasa por extracto de humo de tabaco. / Chronic Obstructive Pulmonary Disease (COPD) is a pathological state characterised by an irreversible and progressive airway obstruction where tobacco smoke is the main cause of disease progression. Mucus hypersecretion is a distinctive feature in COPD patients; moreover oxidative stress plays a key role in the pathology. NADPH oxidase system is involved in this oxidative stress. Currently, selective inhibition of phosphodiesterase (PDE) 4 appears to be promising in COPD management, due to PDE4 are expressed in distinct cellular types involved in inflammatory and immunomodulatory responses. Intracellular cyclic AMP (cAMP) levels are augmented as a consequence of PDE4 inhibition. In the present thesis we aimed to study the characterisation of mechanisms by which NADPH oxidase system activation is induced in response to cigarette smoke extract, studying further AMPc involvement in the process. Results shown that NADPH oxidase system was induced in response to cigarrete smoke extract, which generates an oxidative stress that leads to activation of epidermal growth factor receptor (EGFR) , and mucin overexpression was produced in a reduced AMPc levels dependent process in consequence. Blocking NADPH oxidase activity using a nonspecific inhibitor of the system, diphenileneidonium (DPI), N-acetylcisteine (NAC) as antioxidant, as well as piclamilast as a PDE4 selective inhibitor (via a cAMP level increase), inhibited mucin expression induction at different levels in response to NADPH oxidase system activation dependent by cigarette smoke extract.

Una de las principales áreas de interés de la química orgánica es la búsqueda de nuevos compuestos con actividad biológica. En este sentido cabe destacar el especial interés que despiertan los compuestos nitrogenados debido a que constituyen una de las familias más numerosas entre las biomoléculas y que están implicados en múltiples procesos a nivel metabólico y estructural. Un ejemplo representativo los constituyen los compuestos de tipo etanolamina, ampliamente estudiados por sus variadas y numerosas aplicaciones. Por una parte han servido como modelo para el diseño de peptidomiméticos derivados de hidroxietilamina, que resultan interesantes como inhibidores de proteasas. Algunos de ellos presentan actividad como antiretrovirales o antiparasitarios debido a la inhibición de la proteasa del ácido aspártico, esencial en procesos como la replicación del VIH-1 o la proliferación del parásito P. Falciparum (responsable de la malaria). Otros han encontrado aplicación como inhibidores de -secretasas, enzimas hidrolíticas implicadas en el desarrollo del Alzheimer. Por otra parte, la agrupación etanolamina puede encontrarse también en el etambutol, un aminoalcohol sintético que actúa como agente bacteriostático contra la mayoría de las cepas de Mycobacterium. El mecanismo de acción todavía no está completamente definido, aunque parece que interfiere en la biosíntesis de proteínas y ácidos nucleicos, actuando como antimetabolito. Su habilidad para formar complejos también contribuye a su actividad bacteriostática, aumentando la permeabilidad de la pared celular. De hecho el diseño de sustratos capaces de comportarse de este modo representaría un paso importante en la generación de nuevos antibacterianos. Asimismo, las imidazolinas se han convertido recientemente en candidatos interesantes como ligandos en catálisis y en química médica, y juegan un papel importante en el diseño de fármacos por su actividad como antivirales, antitumorales, antihipertensivos, antiinflamatorios, analgésicos, antidepresivos y neuroprotectores. Paralelamente, es importante mencionar el reciente impulso que la química de los compuestos organofluorados ha experimentado en la industria farmacéutica, la agroquímica, o la ciencia de los materiales. debido en gran parte a las peculiares propiedades que la introducción de átomos de flúor es capaz de conferir a las moléculas orgánicas, modificando sus propiedades físicas, químicas y biológicas. Por todo lo expuesto, el primer objetivo del trabajo consiste en la preparación estereoselectiva de una nueva familia de peptidomiméticos fluorados derivados de etanolamina con potencial actividad biológica. La estrategia propuesta implica la utilización de sulfiniminas fluoradas como intermedio sintético quiral para la obtención estereoselectiva de alilaminas fluoradas, precursoras del fragmento hidroxietilamina. A continuación se realizarán los correspondientes ensayos enzimáticos in vitro para determinar la capacidad inhibitoria de estos peptidomiméticos frente a -secretasas. Complementariamente se evaluará la actividad antibacteriana de los compuestos preparados, especialmente su actividad contra especies de los géneros Mycobacterium y Nocardia, con el fin de establecer una correlación estructura-actividad. El segundo objetivo propuesto en este trabajo consiste en la preparación de una familia de imidazolinas bicíclicas, partiendo de compuestos carbonílicos y diaminas. Como etapa clave del proceso se utilizará una reacción de metátesis con cierre de anillo (RCM) dado que, según nuestro conocimiento, este tipo de reacción no ha sido utilizada en la literatura para la obtención de amidinas bicíclicas y existen pocos ejemplos de preparación de estos esqueletos. / One of the main goals of Organic Chemistry is the search of new compounds with interesting biological activity. Nitrogenated compounds embrace most of the biomolecules and are very attractive due to their important role in many metabolic and structural processes. Introduction of fluorine atoms in organic compounds often lead to products with an improved pharmacokinetic and pharmacodynamic profile. Considering this statements, the main objective of this work is the synthesis of new fluorinated nitrogen-containing molecules with a potential biological application and the evaluation of their in vitro activity. In Chapter 1, a new methodology for the synthesis of α-fluorinated allylic amines through alquilation of imines with 2-trimethylsilylethyl sulfones, as vinyl anion equivalentes, followed by β-elimination, has been developed. This methodology has been applied to the asymmetric version, using chiral 2-trimethylsilylethyl substituted sulfoxides. In this case, a tandem addition-β-elimination process provided the corresponding allylic amines, altought with low enantioselectivity. The tandem addition-β-elimination process has been extended to the synthesis of racemic fluorinated quaternary aminoacid derivatives with an allylic amine moiety. The first achievement of Chapter 2 has been the utilization of chiral sulfinimines as starting materials for the preparation of chiral fluorinated allylic amines holding a 1,1-difluoro-1-phenyl substituent, with good yields and diastereoselectivity. Functional modification of the aforementioned chiral allylic amines has led to a series of difluorophenylmethylated analogues of β-secretase inhibitors with a central 1,3-diamino-4,4-difluoro-4-phenyl-2-butanol core, that have been submitted to biological evaluation. A family of fluorinated and non-fluorinated ethanolamines have been evaluated as antimicrobial agents, showing a noteworthy selective inhibitory activity of the growth of Mycobacterium and Nocardia species. In the third Chapter, the preparation of fluorinated and non-fluorinated 2-imidazolines bearing an olefinic chain has been achieved by reaction of ethyl esters derived from 2,2-difluoro-4-phenyl-3-butenoic acid, 2,2-difluoro-4-pentenoic acid and 4-pentenoic acid with comercially available diamines in the presence of trimethylaluminium as catalyst. Subsequent N-allylation in Barbier conditions led to dienic systems suitable for cyclisation. Dienic imidazolines afforded, after ring-closing metathesis reaction, the corresponding bi(tri)cyclic amidines. The fluorinated and non-fluorinated products with 3,5,8,9-tetrahydro-2H-imidazo[1,2-a]azepine backbone were isolated with high yield while the synthesis of the imidazo[1,2-a]pyridine-pattern was not as favourable.

In the last decade have appeared in the Spanish market new products based on mixtures of fruit juices and milk as well as beverages mixtures of fruit and/or vegetables, which have a good acceptance by consumers and with a high nutritional value largely due to its high content in bioactive compounds as well as antioxidant capacity. Traditionally, liquid food such as fruit and/or vegetables juices, as well as milk, have been preserved by thermal treatment such as pasteurization and sterilization. However these processes can cause loss of compounds responsible for the organoleptic and nutritional quality of food. Currently there is a growing demand by the consumer for minimally processed food and which in turn are safe from the microbiological point of view, a fact that is driving the development of new conservation methods. Nonthermal processes such as high hydrostatic pressure, pulsed electric fields and ultrasound, which can be used with this goal without affecting the quality of food. Although the effectiveness of these treatments is known for safe food, is now when is possible to produce the greater technological advances for it to marketing. In the present doctoral thesis, the main objective is to establish the conditions of nonthermal processing to obtain beverages with a high content in bioactive compounds as well as antioxidant capacity. In addition it is important to compare the effects of these treatments on the organoleptic and nutritional characteristics, with those occurring after the implementation of a traditional heat treatment. Subsequently, also it was studied the degree of permeability of the cell membranes of blueberries using the extent of the impedance, to optimize the parameters of processing and use thermal and nonthermal processing in the extraction of bioactive compounds with antioxidant capacity. / En la última década han aparecido en el mercado español nuevos productos basados en mezclas de zumos de frutas y leche así como bebidas mezclas de vegetales, que presentan una buena aceptación por parte del consumidor y con un gran valor nutricional, debido en gran parte a su alto contenido en compuestos bioactivos así como capacidad antioxidante. Tradicionalmente los alimentos líquidos como zumos de fruta y/o vegetales, así como la leche, han sido conservados mediante técnicas por calor como la esterilización. Sin embargo estos procesos pueden provocar una pérdida de compuestos responsables de la calidad organoléptica y nutricional de los alimentos. Actualmente existe una demanda creciente por parte del consumidor de alimentos mínimamente procesados y que a la vez sean seguros desde el punto de vista microbiológico, hecho que está impulsando el desarrollo de nuevos métodos de conservación. Procesos no térmicos como las altas presiones hidrostáticas, pulsos eléctricos de alta intensidad y ultrasonidos, pueden utilizarse con este objetivo sin que se vea afectada la calidad de los alimentos. Aunque la eficacia de estos tratamientos se conoce para obtener alimentos seguros, es ahora cuando se están produciendo los mayores avances tecnológicos para hacer posible su comercialización. En la presente tesis doctoral, el objetivo principal es establecer las condiciones de procesado no térmico para obtener bebidas con un alto contenido en compuestos bioactivos así como capacidad antioxidante. Además se comparan los efectos de estos tratamientos sobre las características nutricionales y organolépticas con los que se producen tras la aplicación de un tratamiento térmico tradicional. Posteriormente, se estudia el grado de permeabilidad de las membranas celulares de arándanos utilizando la medida de la impedancia, para optimizar los parámetros del procesamiento y poder utilizar los tratamientos térmicos y no térmicos en la extracción de compuestos bioactivos con capacidad antioxidante.