Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / Está reportado que Angiotensina II (Ang II) conduce a hiperplasia en fibroblastos cardiacos y apoptosis sobre cardiomiocitos “in vitro”, sin embargo, estas respuestas son aún materia de controversia, siendo el bajo número de receptores para este péptido en estos tipos celulares, una de las principales limitaciones para la obtención de resultados concluyentes. Mediante la sobre-expresión con adenovirus de receptores de Ang II del subtipo AT1 y AT2, evaluamos los efectos de Ang II sobre cultivos primarios de fibroblastos cardiacos adultos (FCA). Sorprendentemente, Ang II condujo a la pérdida de viabilidad en FCA transducidos con AdAT1R, por otro lado, la viabilidad de FCA transducidos que sobre-expresaron GFP ó AT2R no fue alterada por Ang II. La muerte celular mediada por AT1 presentó características tipo apoptosis tales como compactación celular, “blebbing”, activación de caspasa 3 y DNA laddering. Se demostró que la estimulación por Ang II produce en estas células un rápido aumento en la concentración de calcio intracelular, y paralelamente la activación de la vía ERK aunque con distinta temporalidad. Interesantemente, solo se observó apoptosis de los FCA transducidos con AdAT1R y estimulados con Ang II en presencia de calcio externo. Por contraparte, la activación de ERK en ausencia de calcio en el medio de incubación, condujo a una mejora en la viabilidad celular. Por tanto, se concluye que en FCA transducidos AdAT1R, la Ang II activa un patrón de señales intracelulares asociados tanto a muerte como a sobreviva, y que dependiendo de las condiciones de cultivo ausencia/presencia de calcio externo será la manifestación celular que primará. / It is reported that Angiotensin II (Ang II) leads to hyperplasia in cardiac fibroblasts and apoptosis on cardiomyocytes "in vitro". Nevertheless, these answers are still controversy matter. Between the main argumentations for obtain definitive results, the low number of theses receptors for Ang II in these cells is a crucial step. By means of adenoviral transduction to over-express the receptors of Ang II subtype AT1 and AT2, we evaluated the Ang II effects on primary cultures of adult cardiac fibroblasts (ACF). Surprisingly, Ang II lead to the loss of viability in ACF transducted with AdAT1R, meanwhile, the viability of transducted ACF that over-expressed GFP or AT2 was not altered by Ang II. The cellular death mediated by AT1R displayed apoptotic characteristics such as cellular compaction, "blebbing", caspase-3 activation and DNA laddering. We demonstrated that Ang II stimulated in these cells cause a rapid intracellular calcium increase, and in a parallel manner the ERK pathway signaling activation, although with a distinct temporality. Interestingly, apoptosis was observed only in ACF transducted with AdAT1R in presence of external calcium in the medium culture. By contrast part, the activation of ERK in calcium absence in incubation medium, lead to an improvement in the cellular viability. Therefore, we conclude that ACF AdAT1R transducted, have capacity of answer to Ang II activating a pattern of signals associate to cellular death or survival, which will depend of presence or absence of calcium in the extracellular culture media

La práctica optativa se desarrolló en la Unidad de Registro Cosmético del Instituto de Salud Pública de Chile (ISP), unidad perteneciente al Departamento de Control Nacional. El tiempo comprendido en el desarrollo de la práctica fue de enero a junio de 2006. Durante ese tiempo se realizaron actividades tales como evaluación de solicitudes de registro cosmético (SRC), modificación de registro cosmético, evaluación de solicitudes de declaración de productos cosméticos de higiene, bajo riesgo y odorizantes. En cada caso fue necesario conocer y estudiar las normativas vigentes con los respectivos instructivos, para completar los formularios. La actividad específica encomendada por la unidad de registros cosméticos dice relación con la elaboración y proposición de dos documentos, la norma de buenas prácticas de manufactura para cosméticos y la guía de inspección para la industria cosmética chilena, que contribuirán al desarrollo de la fiscalización por parte del Instituto de Salud Pública e implementar mejoras en los procesos productivos a nivel de industria cosmética. Para la elaboración de estos documentos se recurrió a búsquedas y recopilación bibliográfica de información de otros documentos propuestos por distintos países latino americanos y comunidad europea. La idea para Chile, a través de la autoridad sanitaria representada por el Instituto de Salud Publica (ISP), es unificar criterios y crear una norma de buenas prácticas de manufactura de productos cosméticos, la que hasta ahora no existe. Posterior a la elaboración de dicha norma y con el objeto de asociarla a las visitas inspectivas, se elaboró el segundo documento, una guía de inspección para la industria cosmética chilena. Este último documento debe ser sometido a validación. Ambos documentos propuestos quedaron a disposición del departamento de Control Nacional del instituto de Salud Pública de Chile y el curso a seguir es someter los documentos a discusión por parte de la autoridad sanitaria, dejando sentadas las bases para la aprobación de normativas oficiales para productos cosméticos de la República de Chile.

A produção farmacêutica de preparações estéreis, em especial de Nutrição Parenteral Total (NTP), atinge atualmente graus de importância devido ao grande volume de produção em escala de bancada. Tais características produtivas induzem os operadores a assumirem posturas desfavoráveis do ponto de vista músculo-esquelético, associadas a uma repetitividade importante. Desta forma, este estudo aborda, através de um estudo de caso, a melhoria das condições de trabalho e o resprojeto de uma linha de produção de NPT. Para tal, foi empregada uma metodologia abrangente do ponto de vista de análise postural para melhorar o processo produtivo. esta permitiu a comparação de indicadores anteriores e posteriores à transformação do processo, assegurando a visualização das boas práticas realizadas durante o estudo de melhorias. Como resultados principais, houve uma sensível diminuição das queixas de desconforto e dor de origem postural. Porém, no que concerne à repetitividade são necessários ainda ajustes relacionados com um melhor dimensionamento do processo.

Resumo: Fatores de crescimento são proteínas, que entre outras funções biológicas são responsáveis pela cicatrização de tecidos através do estímulo à síntese de DNA e divisão celular. São rapidamente degradados in vivo, principalmente por proteases. Seu revestimento em nanopartículas pode ser uma alternativa para protegê-los da degradação, mantendo um estímulo constante de cicatrização através da liberação sustentada dos fatores de crescimento a partir destas. Neste trabalho os fatores de crescimento foram incorporados em lipossomas catiônicos revestidos com os biopolímeros xantana e galactomanana através da técnica de layer-by-layer (LbL). O revestimento foi proposto pois lipossomas tendem a coalescer e podem ser reconhecidos por macrófagos devido à sua carga superficial positiva. A interação natural entre os polímeros xantana e galactomanana comprovou ser forte o suficiente para estruturar até 8 camadas de LbL, por análises de microbalança de cristal de quartzo (QCM) e potencial zeta. A interação entre o tensoativo brometo de dimetil-dioctadecil amônio (DDAB) e a xantana, foi comprovada através da diminuição da concentração micelar crítica (CMC) do surfactante na presença de xantana, determinada por tensiometria, turbidimetria e fluorimetria com sonda de pireno. Também foi comprovada através de análises de microcalorimetria exploratória diferencial (?-DSC) e pelos parâmetros termodinâmicos: entalpia padrão de micelização, entropia padrão de micelização, energia livre padrão de micelização, energia livre padrão de adsorção, área mínima ocupada por uma molécula de tensoativo na interface e excesso superficial máximo na interface ar/solução devido à interação tensoativo-polímero. Esta interação possibilitou o revestimento polimérico com xantana dos lipossomas catiônicos e posteriormente com a galactomanana. Os lipossomas revestidos pelos biopolímeros formaram nanopartículas com diâmetro de 165 (± 15) nm, medido por espalhamento de luz dinâmico (DLS), e com potencial zeta (?) de - 4 (± 13) mV, e foram capazes de aumentar em 10 vezes a liberação sustentada de fator de crescimento epidermal (EGF), comparado a lipossomas não revestidos, a uma taxa de 4,7x10-3 min-1. Assim, a utilização de biopolímeros xantana e galactomanana, possibilitou a formação lipossomas revestidos, capazes de sustentar a liberação de fatores de crescimento permitindo maior tempo de ação no sítio. Palavras chave: DDAB. Xantana. Galactomanana. EGF. Lipossomas Catiônicos. Layer-by-layer.

Unidad de práctica para optar al título de Químico Farmacéutico / No autorizada por el autor para ser publicada a texto completo en el Portal de Tesis Electrónicas / El profesional químico farmacéutico está apto para desempeñarse en un amplio campo laboral, ya que posee una rigurosa formación en distintos ámbitos de la ciencia, pudiendo hacerlo tanto en el área pública como privada, así también como entregador de servicio o fiscalizador. Una de las áreas en que puede desempeñarse es en la Farmacia Asistencial, ya sea pública o privada y, dentro de la misma, en distintas subáreas. La práctica prolongada para optar al título de químico farmacéutico se realizó en el Servicio de Farmacia de Clínica Dávila y se dividió en dos etapas: a) La primera de ellas, estuvo destinada a conocer el quehacer profesional en todo lo que abarca la farmacia propiamente tal, a saber, compras y gestión con proveedores, recepción e ingreso de compras de medicamentos y otros, recepción y dispensación de medicamentos a los servicios, elaboración de papelillos y dosis unitaria, dilución de drogas oncológicas y preparación de nutriciones parenterales y, finalmente, asistencia al comité de farmacia de la clínica. b) La segunda, se centró en analizar el consumo de antimicrobianos en el período enerodiciembre del año 2006 y elaborar un manual de utilización racional de antibióticos de uso restringido, de acuerdo a los fármacos seleccionados por los infectólogos de la clínica. El manual de utilización racional de antibióticos de uso restringido abarcó diez agentes antimicrobianos: anfotericina B, cefepima, cefoperazona-sulbactam, colistina, ertapenem, imipenem-cilastatina, linezolid, meropenem, piperacilina-tazobactam y vancomicina. El estudio de consumo y la elaboración del manual, se realizó con el objetivo de entregar información farmacológica a los profesionales de la salud y la posibilidad de generar pautas, a futuro, respecto de una mejor utilización de estos agentes y disminuir la aparición de resistencia bacteriana

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / Jatobà (Hymenaea courbaril l.) has an extensive history of use by natives of tropical forests, its fruits are composed of essential oils, tannins, bitter substances, resinous materials and pectic, starch and sugars. The objective of this study was to evaluate the antimicrobial activity of the essential oil extracted from the peel of fruits of Hymenaea courbaril l. (OEHc) and its mechanism of action on OSSA reference strains S. aureus (S. aureus ATCC 6538P and S. aureus 14458). For the evaluation of antimicrobial activity antimicrobial potential were determined from OEHc Inhibitory Concentrations (MIC) and Minimum Lethal (CLM) from OEHc, the effect of time of exposure to OEHc, OXA and OEHc associations-OXA, OEHc modulator effect on activity of antibiotics (ATB) for clinical use, and the OEHc action on exponential and stationary phases of growth and in growth stationary phase in the presence of chloramphenicol. The OEHc action mechanism was verified by crystal violet uptake, release of genetic material, determination of potassium ion efflux and for assessing the microbial morphology by atomic force microscopy. It was also evaluated the action of sub-inibitÃrias concentrations of OEHc on expression of virulence factors (catalase, coagulase, DNAse, lipase, and hemolysin) and stability of antimicrobial activity of OEHc at different pH. OEHc inhibited the growth of S. aureus strains ATCC 6538P (CIM = CLM = 2.5 mg/mL) and S. aureus ATCC 14458 (CIM = 2.5 mg/mL; CLM = 5 mg/mL). The CLM from OEHc was able to derail the OSSA strains tested in 8 (S. aureus ATCC 6538P) and 24 hours (S. aureus ATCC 14458) and the CIM inhibited the growth of S. aureus ATCC 14458 until 48 hours of exposure. The modulatory action of the antibiotic activity of OEHc clinical use ranged with the ATB and with the strain tested. OEHc associations-OXA tested was found a predominance of synergistic effects and indifferent to the OSSA strains tested. The OEHc was able to reduce the number of viable cells at all stages microbial growth. Its greater efficiency in the presence of CLO suggests a mechanism of action independent of the cellular metabolism. The OEHc was able to promote the increased uptake of crystal violet, the release of genetic material and the efflux of potassium ions, causing also changes in bacterial morphology, suggesting that its target of action is the cell wrap. However, the inhibition of the expression of virulence factors can indicate the participation of other targets on OEHc action, as the synthesis of macromolecules. The antimicrobial activity of OEHc about strains OSSA is potentized in alkaline pH. The results show that the OEHc has a good antimicrobial activity on the species Gram-positive S. aureus, with action mechanisms mediated by the occurrence of damage in microbial wrap with loss of intracellular material and inhibition of the synthesis of macromolecules, revealing its synergistic modulator effect when associated with oxacillin and other antibiotics of clinical use. / O Jatobà (Hymenaea courbaril L.) possui um amplo histÃrico de utilizaÃÃo pelos indÃgenas de florestas tropicais, seus frutos sÃo compostos por Ãleos essenciais, taninos, substÃncias amargas, matÃrias resinosas e pÃcticas, amido e aÃÃcares. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana do Ãleo essencial extraÃdo da casca de frutos da Hymenaea courbaril L. (OEHc) e o seu mecanismo de aÃÃo sobre cepas OSSA de referÃncia de S. aureus (S. aureus ATCC 6538P e S. aureus 14458). Para a avaliaÃÃo da atividade antimicrobiana foram determinados o potencial antimicrobiano do OEHc, as ConcentraÃÃes InibitÃria (CIM) e Letal MÃnimas (CLM) do OEHc, o efeito do tempo de exposiÃÃo ao OEHc, a OXA e as associaÃÃes OEHc-OXA, o efeito modulador do OEHc na atividade de antibiÃticos (ATB) de uso clÃnico, e a aÃÃo do OEHc na fases de crescimento exponencial e estacionÃrio e na fase de crescimento estacionÃrio na presenÃa de cloranfenicol. O mecanismo de aÃÃo do OEHc foi verificado por captaÃÃo do cristal violeta, liberaÃÃo de material genÃtico, dosagem do efluxo de Ãons potÃssio e pela avaliaÃÃo da morfologia microbiana por microscopia de forca atÃmica. TambÃm foi avaliada a aÃÃo de concentraÃÃes sub-inibitÃrias do OEHc na expressÃo de fatores de virulÃncia (catalase, coagulase, hemolisina, lipase e DNAse) e a estabilidade da atividade antimicrobiana do OEHc em diferentes pH. OEHc inibiu o crescimento das cepas de S. aureus ATCC 6538P (CIM = CLM = 2,5 mg/mL) e S. aureus ATCC 14458 (CIM = 2,5 mg/mL; CLM = 5 mg/mL). A CLM do OEHc foi capaz de inviabilizar as cepas OSSA testadas em 8 horas (S. aureus ATCC 6538P) e 24 horas (S. aureus ATCC 14458) e a CIM inibiu o crescimento de S. aureus ATCC 14458 atà 48h de exposiÃÃo. A aÃÃo moduladora do OEHc na atividade de antibiÃticos de uso clÃnico variou com o ATB e com a cepa testada. Para as associaÃÃes OEHc-OXA testadas foi encontrada uma predominÃncia de efeitos sinÃrgicos e indiferentes para as cepas OSSA testadas. O OEHc foi capaz de reduzir o nÃmero de cÃlulas viÃveis em todas as fases crescimento microbiano. Sua maior eficiÃncia na presenÃa de CLO sugere um mecanismo de aÃÃo independente do metabolismo celular. O OEHc foi capaz de promover o aumento da captaÃÃo do cristal violeta, da liberaÃÃo de material genÃtico e do efluxo de Ãons potÃssio, provocando tambÃm alteraÃÃes na morfologia bacteriana, sugerindo que seu alvo de aÃÃo seja o envoltÃrio celular. No entanto, a inibiÃÃo da expressÃo de fatores de virulÃncia pode indicar a participaÃÃo de outros alvos na aÃÃo do OEHc, como a sÃntese de macromolÃculas. A atividade antimicrobiana do OEHc sobre cepas OSSA à potencializada em pH alcalino. Os resultados encontrados mostram que o OEHc possui uma boa atividade antimicrobiana sobre a espÃcie Gram-positivo S. aureus, com mecanismos de aÃÃo mediados pela ocorrÃncia de danos no envoltÃrio microbiano com perda de material intracelular e inibiÃÃo da sÃntese de macromolÃculas, revelando seu efeito modulador sinÃrgico quando associados a oxacilina e outros antibiÃticos de uso clÃnico.

CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de NÃvel Superior / O epitÃlio intestinal à formado e mantido por uma populaÃÃo de cÃlulas-tronco capaz de gerar diferentes linhagens celulares, mantendo a pluripotÃncia e a capacidade de auto-renovaÃÃo. A glutamina à um aminoÃcido essencial condicional importante para a manutenÃÃo do epitÃlio do intestino. No entanto, poucos estudos tÃm explorado o papel da glutamina na regulaÃÃo fina do turnover celular da cripta intestinal. Com o propÃsito de avaliar o papel da glutamina n o turnover de cÃlulas da cripta, foi utilizado um modelo in vitro de enteroide, onde as cÃlulas-tronco sÃo capazes de gerar um epitÃlio contendo as principais linhagens de cÃlulas secretoras intestinais (cÃlula de Paneth, cÃlula caliciforme e cÃlula enteroendÃcrina), alÃm dos enterÃcitos absortivos, com a formaÃÃo de uma estrutura tipo vilosidade-cripta. Este modelo foi usado para testar o efeito de 24 horas de privaÃÃo de glutamina (meio padrÃo com glutamina a 2 mM vs meio livre de glutamina) no turnover epitelial atravÃs da contagem de cÃlulas marcadas por Edu/nÃmero total por secÃÃo e ainda na apoptose celular, atravÃs da contagem de cÃlulas marcadas para caspase 3-clivada/nÃmero total por secÃÃo. A fim de avaliar a funÃÃo secretora das criptas, as razÃes das cÃlulas de Paneth e caliciformes por cripta (cÃlula alvo/nÃmero total de cÃlulas secretoras por cripta) foram medidas. O nÃmero de cÃlulas de Paneth e caliciformes foi obtido com o auxÃlio da microscopia confocal e imunomarcaÃÃo para lisozima e mucina-2. AlÃm disso, os transcritos dos produtos das cÃlulas de Paneth e caliciformes (lisozima e mucina, respectivamente) foram analisados utilizando o mÃtodo de PCR quantitativo em tempo real. Com intuito de avaliar o potencial papel imunomodulador da glutamina, transcritos de elementos da imunidade inata, receptor de tipo Toll e sua proteÃna acessÃria MD-2, e citocinas, a saber: TNF-α, IL-1β e CXCL-1, foram medidos. A privaÃÃo de glutamina reduziu o nÃmero de cÃlulas Edu positivas, em comparaÃÃo com o enteroide sob meio padrÃo (p=0,006). NÃo houve diferenÃa significativa em relaÃÃo Ãs razÃes das cÃlulas de Paneth e cÃlulas caliciformes entre os grupos apÃs privaÃÃo de glutamina. A privaÃÃo da glutamina diminuiu significativamente os transcritos de lisozima, em comparaÃÃo com o enteroide sob meio padrÃo (p = 0,007), mas nÃo para mucina-2, transcriÃÃo relacionada com a funÃÃo das cÃlulas caliciformes. Uma transcriÃÃo reduzida para TNF- α e MD-2 (p=0,005 e p=0,016, respectivamente) foi observada apÃs a privaÃÃo de glutamina. Ao todo, nossos achados reforÃam o papel positivo da glutamina sobre o turnover do epitÃlio intestinal e, alÃm disso, sugerem um importante efeito regulador da glutamina sobre as cÃlulas de Paneth e resposta imune inata. O modelo enteroide fornece uma ferramenta importante para dissecar os mecanismos de proteÃÃo pela glutamina e guiar estudos futuros. / The intestinal epithelium is formed and sustained by a population of stem cells capable of generating different cell lines while maintaining pluripotent and self-renewal capacity. Glutamine is a conditional essential amino acid important for the maintenance of the intestinal epithelium. However, few studies to date have explored the role of glutamine in the fine regulation of the intestinal crypt cell turnover. In order to evaluate the role of glutamine in the crypt cell turnover, an in vitro enteroid model was used, where stem cells are capable of generating an epithelium containing the main intestinal secretory cell lines (Paneth, goblet, and enteroendocrine cells) and absorptive enterocytes as well, while forming a villus-crypt like structure. This model was used to test the effect of 24h of glutamine deprivation (standard media with 2mM glutamine vs glutamine-free media) on epithelial turnover by counting EdU- labeled cells/total number per section and cell apoptosis by counting cleavage-caspase 3- labeled cells/total number per section. In order to assess crypt secretory function, Paneth and goblet crypt cell ratios (target secretory cell/total cell number per crypt) were measured. The number of Paneth and goblet cells was measured with the aid of confocal microscopy and lysozyme and mucin-2 immunostainning. In addition, Paneth and globet cell product transcripts (lysozyme and mucin, respectively) were measured using quantitative Real-time PCR. In order to assess the potential immunomodulatory role of glutamine, innate immune element transcripts, Toll like receptor and their accessory protein MD-2, and cytokines, as follows: TNF-α, IL-1β and CXCL-1, were measured. Glutamine deprivation reduced the number of EdU positive cell ratio as compared with the enteroid under the standard media (p=0.006). No significant differences regarding Paneth and goblet cell ratios were seen between groups following glutamine deprivation. Glutamine deprivation significantly decreased lysozyme transcripts as compared with the enteroid under the standard media (p=0.007), but not for mucin-2 transcripts, related to goblet cell function. Decreased TNF-α and MD-2 transcription (p=0.005 and p=0.016, respectively) were found following glutamine deprivation. Altogether, our findings reinforce the glutamine positive role on the intestinal epithelial turnover and furthermore suggest an important glutamine regulatory effect over Paneth cells and the innate immune system. The enteroid model provides an important tool the dissect the mechanisms of glutamine protection and shed light for future studies.

A produção farmacêutica de preparações estéreis, em especial de Nutrição Parenteral Total (NTP), atinge atualmente graus de importância devido ao grande volume de produção em escala de bancada. Tais características produtivas induzem os operadores a assumirem posturas desfavoráveis do ponto de vista músculo-esquelético, associadas a uma repetitividade importante. Desta forma, este estudo aborda, através de um estudo de caso, a melhoria das condições de trabalho e o resprojeto de uma linha de produção de NPT. Para tal, foi empregada uma metodologia abrangente do ponto de vista de análise postural para melhorar o processo produtivo. esta permitiu a comparação de indicadores anteriores e posteriores à transformação do processo, assegurando a visualização das boas práticas realizadas durante o estudo de melhorias. Como resultados principais, houve uma sensível diminuição das queixas de desconforto e dor de origem postural. Porém, no que concerne à repetitividade são necessários ainda ajustes relacionados com um melhor dimensionamento do processo.

Memoria para optar al Título de Químico Farmacéutico / Phytolacca dioica(ombú) proviene de una familia que consta de árboles, arbustos o hierbas leñosas, principalmente de climas tropicales y subtropicales, con una gran presencia en Argentina, Uruguay y Chile. Análisis fitoquímicos en varias especies del género Phytolacca muestran que son ricas en saponinas. Dichas especies además han sido descritas por poseer una importante actividad biológica molusquicida, antiinflamatoria y antifúngica (Escalante y col., 2002). Desde los frutos (bayas) de ombú se obtuvieron tres extractos: EDCM, EM y EB, ocupados para evaluar una posible actividad analgésica debido a que se usa tradicionalmente por su actividad antiinflamatoria y se sabe que ambas propiedades están estrechamente relacionadas. Los ensayos preliminares mostraron que el EDCM contiene principalmente sustancias triterpénicas, el EM flavonoides y el EB mayoritariamente saponinas triterpénicas además de flavonoides glicosilados. Para evaluar analgesia aguda se ocupó el ensayo retirada de la cola (Tail-Flick), probando tópicamente 6, 3, 1 y 0,5 %p/v (g/ml) por peso de ratón obteniendo EC505,2 ± 0,9; 2,9 ± 0,2 y 2,2 ± 0,1 para el EDCM, EM y EB respectivamente. Otro ensayo realizado para evaluar analgesia aguda fue la placa caliente (Hot-Plate) probando dosis intraperitonealmente de 600, 300, 100 y 50 mg/kg por peso de ratón obteniendo ED50 para el EDCM 548,4 ± 93,9 y para EM 217,8 ± 21,6. La administración ip de 600 mg/kg del extracto butanólico resultó ser tóxica entonces se probaron 300, 200, 100 y 50 mg/kg intraperitonealmente para dicho extracto obteniendo como ED50123,3 ± 4,2. Al obtener las respectivas ED50 (en la placa caliente) se las evaluó en presencia de CFA (complete Freund’s adjuvant) a las 24 hrs y a los 7 días, además se incluyó la tinción con Evan`s blue para evaluar progresión del edema generado en la pata derecha del ratón. En el HP/CFA de 24 hrs al probar 123 mg/kg ip del extracto butanólico hubo signos de intoxicación entonces se probó en este caso la ED25 45 mg/kg obteniendo %MPE 68,9 ± 12,5. Para los EDCM y EM se obtuvo 68,9 ± 10,7 y 65,9 ± 9,9 %MPE respectivamente. En el HP/CFA de 7 días los %MPE fueron 46,0 ± 7,7; 42,9 ± 7,3 y 80 ± 12,3 para EDCM, EM y EB respectivamente. La extravasación a las 24 hrs no mostró ser menor que la del control negativo para ninguno de los extractos y al comparar a los 7 días se obtuvo una discreta disminución con los extractos metanólico y butanólico. Según los resultados obtenidos de los distintos ensayos (TF, HP y CFA/HP) fue el extracto butanólico quien tendría la mayor actividad analgésica. Dicha actividad fue mucho menor al compararla con el efecto del fármaco de referencia (ibuprofeno) en cada ensayo. Mediante el ensayo de decoloración con DPPH se evaluó la capacidad antiradicalaria de los EM y EB obteniendo IC50 197 y 30 µg/ml respectivamente, lo que refleja una discreta actividad antioxidante / Phytolacca dioica (ombú) come from family consist of trees , shrubs or woody herbs, most of tropical and subtropical climate. With abundant presence in Argentine, Uruguay and Chile. Fitochemestry analisis in various Phytolacca genus species show are rich in saponins. Such species have been describes to have an important biological activity molusquicide, anti inflamatory and fungicide too (Escalante y col., 2002). Three extracts (EDCM, EM and EB) were obtained from ombú fruits (berries), used for evaluate possible analgesic activity because ombú is traditionally used due to antinflamatory activity and is know that both of propierties are closely related. The preliminary assays show EDCM contain triterpenic substances, EM flavonoids and EB most of triterpenic saponins apart from glicosilates flavonoids. For testing acute analgesia it used Tail-Flick assay , testing topical dose: 6, 3, 1 y 0,5 %w/v mouse weight obtaining EC50 5,2 ± 0,9; 2,9 ± 0,2 y 2,2 ± 0,1 for EDCM, EM y EB respectively. Other assay realized for acute analgesia evaluate was Hot- Plate testing intraperitonaly dose: 600, 300, 100 y 50 mg/kg mouse weight obtaining ED50 for DCM 548,4 ± 93,9 and for EM 217,8 ± 21,6. The intraperitonaly administration of 600 mg/kg butanolic extract result to be toxic then was testing 300, 200, 100 y 50 mg/kg intraperitonaly obtaining ED50 123,3 ± 4,2 for such extract. At obtaining the respectives ED50 (in Hot-Plate assay) was evaluated in presence of CFA (complete Freund’s adjuvant) at 24 hours and 7 days, was included Evan`s blue tintion for evaluate progress of generated edema in the mouse right foot. In the 24 hours HP/CFA at testing 123 mg/kg ip of butanolic extract had intoxications signs then testing in this case ED25 45 mg/kg obtaining %MPE 68,9 ± 12,5. For EDCM y EM was obtain 68,9 ± 10,7 and 65,9 ± 9,9 %MPE respectively. In the 7 days the %MPE were 46,0 ± 7,7; 42,9 ± 7,3 y 80 ± 12,3 for EDCM, EM and EB respectively. The extravasation to 24 hours are not show less that negative control for none extracts and matching to 7 days was obtain moderate decrease with metanolic and butanolic extracts. According to obtained results of different assays (TF, HP y CFA/HP) was butanolic extract that would have greater analgesic activity. Such activity was lesser than matching with reference drug (Ibuprofen) in each assay. Decoloration assay with DPPH was evaluated to determine the antiradical activity of EM and EB obtaining IC50 197 y 30 μg/ml respectivly, it account for a moderate antioxidant activity

No autorizada por el autor para ser publicada a texto completo en el Portal de Tesis Electrónicas / Unidad de práctica para optar al título de Químico Farmacéutico / El desarrollo de la práctica prolongada fue realizado en el Laboratorio Cosmética Nacional S.A. en los distintos departamentos del laboratorio: Departamento de Control de Calidad, Departamento de Producción y Departamento de Investigación y Desarrollo. El trabajo desempeñado en el Departamento de Control de Calidad fue realizar análisis de materias primas, producto terminado y envases de los productos fabricados en dicho laboratorio. La estadía en estos departamentos permitió obtener los conocimientos necesarios para ser un integrante más dentro del equipo técnico y profesional de la industria cosmética y en este caso de Cosmética Nacional. El objetivo principal de la realización de esta práctica profesional prolongada, fue desarrollar una línea de ocho productos cosméticos para uso masculino, siendo estos productos los siguientes: “After Shave” Balsámico, Crema Exfoliante y Limpieza Profunda, Hidratante Corporal, Revitalizador Antiojeras, Hidratante Control Brillo, Anti-líneas de Expresión, Hidratante Facial Preventivo para hombres menores de 30 años y Crema Hidratante Facial Antiedad para hombres mayores de 30 años. Para la realización de esta línea de productos se efectuó una amplia búsqueda bibliográfica sobre ingredientes activos y productos ya existentes en el mercado, junto con contactar y solicitar información a diferentes proveedores de activos y materias primas. Al momento de elegir los activos para formular estos productos se consideraron los siguientes parámetros: - Cumplimiento acerca de las expectativas propuestas para cada producto, es decir, que cada activo cumpliera con el efecto deseado. - Poseer un mecanismo de acción simple y claro. - Estudios anteriores que avalaran la calidad y efectividad de los activos escogidos. - Costo de estos activos. Elegidos los activos que cumplieron con los requisitos mencionados anteriormente se realizó la evaluación de la efectividad de los productos terminados, mediante un panel de voluntarios homosexuales, elegidos por el mismo laboratorio, junto con voluntarios de sexo masculino que aceptaron participar de este proyecto. Esta evaluación se realizó en 10 voluntarios sanos, a los cuales se les decía cómo debían aplicarse los ocho productos, en forma separada. Junto con esto se les entregó una planilla de evaluación, donde los voluntarios debían responder en conformidad a las facultades de los productos, tales como grasitud, viscosidad y aroma entre otros. El tiempo para medir dicha evaluación fue de una semana, es decir, dentro de esta semana los voluntarios debían no sólo aplicarse los productos, sino que también debían contestar la planilla de evaluación correspondiente. Cabe destacar que cada voluntario comparó las facultades de los productos a evaluar con un producto ya existente en el mercado y cuyas características cumplían las expectativas esperadas por los voluntarios con respecto a las propiedades y efectos deseados. Los resultados de la evaluación fueron positivos, luego de probar numerosas formulaciones para la elaboración de esta línea masculina constituida por los ocho productos mencionados, finalmente se aprobó para cada producto una fórmula que dio conformidad a los voluntarios en cuanto a las expectativas que estos requerían para dicha línea de productos. Finalmente se registraron los productos en el Instituto de Salud Pública de Chile. Dichos productos cuentan actualmente con la aprobación para ser comercializados en el mercado cosmético