No description available.

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / Diversas condiciones pueden producir estrés en el retículo endoplásmico, tales como la acción de compuestos, como la tapsigargina (TG) y la tunicamicina (TU) o distintas situaciones patológicas como la hipoxia, daño oxidativo o reductor, infecciones virales e hipoglicemia. Todas ellas generan una acumulación de proteínas mal plegadas en el retículo endoplásmico (RE), que conduce a la activación de una respuesta celular al estrés altamente conservada, evolutivamente conocida como respuesta a proteínas mal plegadas (UPR), la cual puede ser adaptativa, de alarma o muerte dependiendo de la intensidad y cronicidad del estímulo. La respuesta adaptativa está diseñada especialmente para restablecer la homeostasis de RE y su normal funcionamiento por medio de la inducción de genes que codifican a chaperonas, a la vía de degradación de proteínas asociada al RE (ERAD) y la degradación proteoasomal de proteínas, así como también a proteínas que aumentan la capacidad plegadora del RE. Si estas respuestas adaptativas no logran recobrar el equilibrio en el RE, se activa el programa de muerte celular de tipo apoptótico, necrótico o autofágico. Las respuestas adaptativas mencionadas operan principalmente por medio de tres vías transduccionales: IRE1, PERK y ATF6, siendo las vías IRE1 y ATF6 las involucradas en las etapas iniciales de la UPR, para restablecer la homeostasis del RE. Sin embargo al mantenerse el estímulo de estrés las tres vías se activan en conjunto para inducir genes de muerte celular como lo es GADD153/CHOP. La insulina participa en la regulación de diversos procesos celulares, entre los que se encuentran el metabolismo de la glucosa en el tejido muscular y adiposo, el de los ácidos grasos en el hígado y células grasas. Estas acciones están mediadas por medio de la activación de su receptor de membrana, el receptor de insulina (IR), el El modelo experimental utilizado fue cultivo primario de cardiomiocitos de ratas neonatas expuestos a dos tipos de estresores, TG y TU, por 24 hrs., e insulina por 15 minutos y 24 hrs. Los resultados obtenidos mostraron que, tanto TG como TU, indujeron estrés de RE en los cardiomiocitos y que activaron el programa de muerte celular de manera dosis-dependiente, esto determinado por la expresión de la proteína GADD153/CHOP. Sin embargo no se observaron cambios en los niveles de la chaperona Grp78/BIP. La inducción de estrés de RE afectó la viabilidad celular de manera dependiente de la concentración, esto determinado por los ensayos de exclusión de yoduro de propidio (IP) y azul de tripán. Además se observó que la muerte celular posee un componente importante de apoptosis. La insulina por sí sola no indujo estrés de RE en los cardiomiocitos, sin embargo disminuyó la expresión de GADD153/CHOP de los cardiomiocitos estimulados con TG y TU. Este efecto es parcial ya que la insulina no recuperó los niveles basales de GADD153/CHOP. La inducción del estrés de RE con TU o TG en los cardiomiocitos afectó la vía transduccional de la insulina, disminuyendo la activación del receptor de insulina y de PKB/Akt, sin afectar los niveles totales de Akt. Finalmente, los resultados permiten concluir que la insulina es un regulador negativo del estrés de RE en cardiomiocitos inducida por TG y TU / Conditions like thapsigargin (TG) and tunicamycin (TU), hypoxia, reductive and oxidative damage, viral infections and hypoglycemia may produce endoplasmic reticulum stress, leading to an accumulation of misfolded proteins in the ER, and the subsequent activation of a cell stress response knows as UPR. This response can leads to cell adaptation, alarm or cell death. The adaptive response is especially designed to reestablish ER homeostasis by the induction of genes that encode chaperones, the ERAD pathway and the proteoasomal proteins degradation, as well as proteins increasing the folding capacity of the ER. However, depending of the strength or exposure time, the cell death program can be activated leading to that apoptosis, necrosis and autophagy. The adaptive response above described, can signal three independent transductional pathways: IRE1, PERK and ATF6, being IRE1 and ATF6 pathway involved in the early stages of UPR, to reestablish ER homeostasis. However a chronic stress activates cell death signaling pathway, inducing genes like GADD153/CHOP. Insulin participates in different cell processes including the regulation of glucose metabolism in muscle and adipose tissue, fatty acids metabolism in the liver and adipocytes. These actions are mediated by the activation of its membrane receptor, insulin receptor (IR), wich has an intrinsic tyrosine kinase activity and allows the activation of the following signaling cascades PI3K/PKB/Akt and MAPK/ERK. Severeal evidences have shown that TG and TU induce ER stress. However the research made on the insulin activity in the regulation of the ER stress are only in neurons, in which the inhibition of PKB/Akt is capable of induce the GADD153/CHOP expression, but the mechanism involved in this process is not fully understood. Our working hypothesis state that “Insulin attenuates the endoplasmic reticulum stress in cultured cardiomyocytes”. The experimental model was primary cultures of neonatal rat cardiomyocytes exposed to the stressors, TG and TU, for 24 h and insulin for 15 minutes and 24 h. Our results showed that both, TG and TU, induced ER stress in cardiomyocytes activating the cell death program in concentration-dependent manner. This event was characterized by the expression of GADD153/CHOP. However any effect was observed in Grp78/BIP levels. ER stress induction affected the cell viability in concentration-dependent manner, was assessed by IP and tripán blue exclusion tests. We also observed that apoptosis was the type of cell death activated in our model of ER stress. Insulin itself did not induce ER strees in cultured cardiomyocytes, however decreased GADD153/CHOP expression triggered by TG and TU. This effect is partial because the insulin did not recover GADD153/CHOP basal levels. ER stress induction in cultured cardiomyocytes affected insulin signaling pathway characterized by decreased insulin receptor activation and phosphorylated PKB/Akt levels without any effect in total PKB/Akt levels. This effect was seen both with TG and TU. In summary, these results suggest that insulin receptor signaling pathway is negatively regulated by ER stressors in cultured cardiomyocytes

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / Los fibroblastos cardiacos son células que cumplen un rol fundamental en el mantenimiento de la homeostasis de la matriz extracelular del corazón. Luego de un daño al miocardio, además, participan activamente del remodelado cardiaco como tal o diferenciándose a miofibroblasto, un fenotipo celular que presenta características que lo hacen apto para funciones de cicatrización. Se ha observado que luego de un daño al miocardio, el corazón está expuesto a un mayor tono adrenérgico con la finalidad de compensar la disfunción adquirida por la injuria del tejido. Estudios de nuestro laboratorio han demostrado que la estimulación β2-adrenérgica por Isoproterenol induce autofagia en fibroblastos cardiacos de rata adulta, un proceso degradativo que se ha reportado capaz de perder su equilibrio en diversas patologías cardiovasculares. Por esto, se vuelve interesante determinar si estos mismos estímulos son capaces de inducir autofagia en miofibroblastos cardiacos, células que aparecen sólo cuando hay daño al miocardio. Los resultados muestran que tanto fibroblastos como miofibroblastos cardiacos presentan receptores adrenérgicos sólo del subtipo β2. Miofibroblastos cardiacos presentaron mayor número de receptores β2-adrenérgicos y con mayor afinidad por sus ligandos que fibroblastos cardiacos. En ambos fenotipos celulares los receptores mencionados se encuentran funcionales. En cuanto a la autofagia, los estímulos clásicos inductores de autofagia (rapamicina y/o privación de nutrientes) y la estimulación β2-adrenérgica por Isoproterenol inducen autofagia en fibroblastos. De modo distinto, estos inductores no fueron capaces de inducir autofagia en miofibroblastos cardiacos de rata adulta, aunque se encontró que en condiciones basales presentaban mayor nivel de autofagia que los fibroblastos. Los resultados demuestran que los miofibroblastos cardiacos son resistentes a la inducción de autofagia por estimulación β2-adrenérgica, lo que puede abrir una puerta para el entendimiento del rol de este proceso en estados patológicos del corazón.

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / El corazón está constituido por numerosos tipos celulares, de los cuales el 90% corresponde a cardiomiocitos y fibroblastos. Los fibroblastos representan dos tercios de la población celular del corazón y están encargados principalmente del recambio de las proteínas de la matriz extracelular. Estas células tienen la capacidad de responder a una variedad de citoquinas, factores de crecimiento y expresan sus receptores indicando que pueden responder de manera autocrina; y por la acción de TGF-1, se diferencian a miofibroblastos, un fenotipo celular altamente secretor de colágeno y principal encargado del proceso de cicatrización. Por otro lado, existen numerosos antecedentes que demuestran que en fibroblastos cardiacos, la activación de las vías de transducción que conducen al aumento del AMPc contribuye a la reducción de la fibrosis cardiaca, por regular procesos antifibróticos entre ellos disminuir la adhesión, migración y la diferenciación a miofibroblasto. Recientemente se ha descrito en la literatura a la proteína EPAC-1 (del acrónimo exchange protein activated directly by cAMP), quien a través de las GTPasas pequeñas Rap 1 y Rap 2 modula secreción de colágeno y migración. Sin embargo, no existen antecedentes de si EPAC-1 regula en fibroblastos y miofibroblastos cardiacos la adhesión y migración celular; y la contracción de geles de colágeno. Por lo anterior, en este trabajo se estudió los niveles de expresión de EPAC-1 en fibroblastos y miofibroblastos cardiacos, y si EPAC-1 regula los procesos antes mencionados. Para ello, se utilizaron estímulos que aumentan el AMPc (forskolina e isoproterenol) y el agonista directo de EPAC-1 Me-AMPc. Nuestros resultados mostraron que en fibroblastos cardiacos forskolina y Me-AMPc aumentaron la adhesión celular, y este efecto fue menor con isoproterenol; mientras que en miofibroblastos se observó un aumento en la adhesión sólo con el agonista de la EPAC-1. Por otro lado, forskolina, isoproterenol y Me-AMPc, inducen una mayor migración de fibroblastos, mientras que en miofibroblastos no se observaron efectos con esos estímulos. Finalmente, en fibroblastos cardiacos no se observaron efectos sobre la contracción de geles de colágeno. Conclusión: EPAC regula diferencialmente la adhesión y migración de fibroblastos y miofibroblastos cardiacos, indicando que participa de manera muy importante en procesos asociados al remodelamiento cardiaco / The heart is composed of many cell types, of which 90% were cardiomyocytes and fibroblasts. Fibroblasts represent two thirds of the heart cell population and are mainly responsible for the turnover of extracellular matrix proteins. These cells have the capacity to respond to a variety of cytokines, growth factors and express their receptors indicating that they can respond in an autocrine manner; and by the action of TGF-1, they are differentiated into myofibroblasts, a cellular phenotype highly secreting of collagen and main cell involved of the healing process. On the other hand, there are numerous reports that show that in cardiac fibroblasts, the activation of signal transduction pathways leading to increased cAMP levels contributes to the reduction of cardiac fibrosis by regulating profibrotic processes including adhesion, migration and myofibroblastic differentiation. Recently has been described the protein EPAC-1 (exchange protein activated by cAMP), who through the small GTPases Rap 1 and 2, modulates secretion of collagen and migration. However, there is no data on whether EPAC-1 regulates cardiac fibroblasts and myofibroblasts adhesion and migration, and contraction of collagen gels. Therefore, in this work we studied in cardiac fibroblasts and myofibroblasts the expression levels of EPAC-1, and if EPAC-1 regulates the above mentioned processes. To do this, we used stimuli that increase cAMP (forskolin and isoproterenol) and direct agonist of EPAC-1 (Me-cAMP). Our results showed that in cardiac fibroblasts Me-cAMP and forskolin increased cell adhesion, and this effect was less with isoproterenol, while in myofibroblasts showed an increased adhesion only with the agonist of EPAC-1. Furthermore, forskolin, isoproterenol and Me-cAMP, induced an increased migration of fibroblasts, myofibroblasts whereas no effects were observed with these stimuli. Finally, cardiac fibroblasts showed no effects on collagen gel contraction. Conclusion: EPAC differentially regulates adhesion and migration of cardiac fibroblasts and myofibroblasts, indicating that it play an important role in processes associated with cardiac remodeling

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / El presente estudio consistió en un seguimiento farmacoterapéutico a pacientes ambulatorios atendidos en la consulta de Medicina del Dolor del Hospital del Trabajador de Santiago (HTS). El seguimiento incluyó la detección, resolución y prevención de problemas relacionados con los medicamentos (PRMs), cumplimiento a la terapia, y la caracterización de pacientes y medicamentos. El instrumento utilizado para el registro de todos los antecedentes fue la ficha de recolección de datos, en donde igualmente se registraron distintos antecedentes clínicos, resultados del cuestionario de evaluación de cumplimiento SMAQ y resultados de la medición del dolor mediante la escala visual análoga (EVA). El seguimiento farmacoterapéutico se realizó prospectivamente, de manera descriptiva y transversal con intervenciones a 114 pacientes seleccionados de un total de 144 pacientes de acuerdo a los criterios de selección adoptados para este estudio. Durante las entrevistas (al menos 2), los pacientes fueron educados en todos los aspectos relacionados a su terapia farmacológica. Durante el tiempo de seguimiento farmacoterapéutico, a los pacientes se les aplicó el cuestionario SMAQ en la 1° y 3° entrevista. También, en cada una de las entrevistas se procuraba registrar el valor de la medición del dolor mediante EVA. En relación a los estilos de vida, al comienzo del seguimiento se registró que los pacientes que participaron en el estudio refirieron consumo negativo de tabaco (65,8%), que no consumían alcohol (75,4%) y que no presentaban antecedentes de alergia (61,4%). El principal diagnóstico de los pacientes de la consulta de Medicina del Dolor fue dolor crónico (43,9%). Los pacientes consumían un promedio de 5,2±1,6 medicamentos indicados en la consulta de Medicina del Dolor; y para otros medicamentos usados (otras consultas y uso personal) el promedio fue 2,8±2,7. Se detectaron 196 PRMs, los que fueron clasificados según PCNE classification for drug related problems V5.01. Del total de los PRMs, el 38,3% correspondió al P1.1 Efecto secundario no alérgico. La principal causa identificada fue la C1.8 Efecto secundario sin otra causa (25,0%). Se propusieron 520 intervenciones posibles, y la principal intervención fue la I1.1 Sólo informar al médico tratante (23,3%). El 27,3% de las intervenciones fueron aceptadas, principalmente dirigidas directamente al paciente. El 41,3% de los PRMs tuvo un resultado desconocido y el 28,1% fue totalmente solucionado. La clasificación PCNE no fue totalmente adecuada para algunos PRMs, ya que algunos no calzaban en las descripciones propuestas por ella. Entre ellos: pacientes que según sus respuestas al cuestionario SMAQ eran considerados adherentes, pero que durante el transcurso de las entrevistas confesaban dejar de tomar sus medicamentos para experimentar con la resistencia a su dolor. Algunos pacientes con múltiples y repetidos despachos en farmacia que no eran detectados por el sistema computacional utilizado y que durante la revisión de fichas clínicas se logró evidenciar. La polifarmacia en la gran mayoría de los pacientes debido a las múltiples consultas a los distintos servicios del HTS. Y pacientes provenientes del servicio de Salud Mental, muy complicados, los que proporcionaban datos que muchas veces eran confusos y contradictorios. En conclusión, a pesar de las limitaciones del estudio, se puede decir que la realización del seguimiento farmacoterapéutico fue beneficiosa para los pacientes incluidos, promoviendo el correcto uso de los medicamentos; y además que la inclusión de un farmacéutico clínico en el equipo de salud contribuiría a mejorar el bienestar de los pacientes

Memoria para optar al título de Químico Farmacéutico / En las últimas décadas ha habido un aumento explosivo del número de cirugías bariátricas, entre ellas la de mayor importancia ha sido el bypass gástrico en Y de Roux. A pesar de que estos pacientes son sometidos a una dieta suplementada con hierro, estos pacientes a largo plazo (un año después), padecen de déficit de hierro y/o anemia. Por lo tanto, en esta memoria se estudió si existe correlación entre la anemia y el nivel del transportador de hierro a nivel del yeyuno proximal, porción del intestino delgado que en esta cirugía, queda inmediatamente después del estómago. En este estudio se analizaron muestras de yeyuno proximal de pacientes sometidos a cirugía bariátrica al tiempo de la cirugía y seis meses después, con el fin de evaluar: a) cambios histológicos, b) cambios en expresión y en la localización tisular del transportador de hierro-1 (DMT-1), y c) exámenes de sangre para evaluar presencia de anemia. La cirugía bariátrica disminuyó el peso de pacientes obesos, en al menos un 54% del exceso de peso; sin embargo, a los seis meses estos pacientes no presentaron anemia ferropénica. La cirugía de bypass gástrico produjo cambios histológicos en el yeyuno proximal, entre ellos una atrofia parcial de las vellosidades de la mucosa yeyunal proximal, y un aumento en las células caliciformes, El análisis de DMT-1 tanto por inmunowesternblot como inmunohistoquímica, mostró que a los seis meses de la cirugía hubo una disminución en los niveles de expresión y cambios en su localización en las vellosidades del yeyuno proximal. Conclusión: Estos resultados sugieren que el déficit de hierro y/o anemia que presentan los pacientes después de un año de la cirugía bariátrica, podrían deberse a los cambios histológicos y de expresión observados después de los seis meses, los cuales podrían explicar la anemia tardía que en ellos se presenta / In recent decades there has been an explosive increase in the number of bariatric surgeries, the most important has been the gastric bypass Roux. Although the patients are subjected to a diet supplemented with iron, these patients long-term (one year later), suffer from iron deficiency and / or anemia. Therefore, in this thesis, we examined whether there is a correlation between anemia and iron transporter levels at the proximal jejunum of the small intestine, which in this surgery is immediately after the stomach. This study analyzed samples of proximal jejunum of patients undergoing bariatric surgery at the time of surgery and six months later to assess: a) histological changes, b) changes in expression and tissue localization of iron transporter -1 (DMT-1), and c) blood tests to assess anemia. Bariatric surgery reduces the weight of obese patients, at least 54% of excess weight, but after six months these patients did not have iron deficiency or anemia. Gastric bypass surgery produced histological changes in the proximal jejunum, including a partial atrophy of the villi of the proximal jejunal mucosa, and increased goblet cells. The analysis of DMT-1 both inmunowesternblot as immunohistochemistry, showed that six months after surgery there was a decrease in expression levels and changes in its location in the villi of the jejunum. Conclusion: These results suggest that iron deficiency or anemia after a year of bariatric surgery may be due to the histological and expression levels changes observed after six months, which could explain the late anemia

Unidad de práctica para optar al título de Químico Farmacéutico / No autorizada por el autor para ser publicada a texto completo en el Portal de Tesis Electrónicas / Durante la unidad de práctica realizada en el laboratorio Diapo, se evaluó la posibilidad de desarrollar aerosoles a partir de una formulación base dispuesta por el laboratorio y sus consecuentes modificaciones a fin de lograr un producto óptimo en cuanto al propelente, concentrado y envase. Para tal propósito, se realizó una búsqueda de antecedentes relacionados con los sistemas en aerosol farmacéuticos, adaptando los criterios para los productos formulados en este estudio. De las preformulaciones se eligieron las que se ajustaron a los criterios de diseño impuestos y se sometieron a pruebas para evaluar su compatibilidad con el envase. Seleccionadas las muestras en esta última etapa se sometieron a controles de calidad como producto terminado, logrando establecer de este modo las pautas para las especificaciones técnicas, los controles de calidad y etapas críticas de la investigación que se esperarían en caso de desarrollar productos similares en el futuro

Hoy en día la industria farmacéutica posee estándares de calidad bastante exigentes y cada día se hace más necesario conocerlos y manejarlos para el profesional Químico Farmacéutico. El período de práctica prolongada se constituye de esta manera en una herramienta fundamental para profundizar los conocimientos en el tema y comenzar a aplicarlos. Pfizer Chile S.A. es una empresa líder en el mercado farmacéutico y sus estándares de calidad cumplen con las normas vigentes hoy en el país. Para conocer y manejar estas normas fue necesario involucrarse directamente en cada una de las áreas que permiten conseguir un producto garantizado y eficaz. Con este fin, se realizaron una serie de actividades durante los seis meses de práctica profesional, estas fueron: Revisión de material de empaque: el material de empaque es de gran importancia para que un producto cumpla satisfactoriamente con las exigencias actuales, ya que, es la cara visible de este y la carta de presentación del fármaco al cuerpo médico, químico farmacéutico y pacientes. En esta área se revisó un gran número de materiales de empaque (etiquetas, cajas, blister, folletos informativos, etc.) con el fin de asegurar el cumplimiento de las características de calidad y contenido (registros). Este proceso se realiza dentro del laboratorio para productos acondicionados de manera local y en las dependencias del importador y distribuidor para aquellos productos que ingresan al país terminados. Análisis de medicamentos: Se realizó un acucioso análisis de todos los parámetros exigidos para cada producto (identificación y valoración de los principios activos, identificación de los principios activos, control de peso, control de contenido, viscosidad, dureza, tiempo de disolución, etc.) según corresponda. Durante el período de práctica se realizó un gran número de análisis y se logró adquirir la experiencia necesaria en la aplicación de distintos métodos analíticos tanto para productos terminados como para materias primas, así como también los requisitos necesarios para que estos sean aprobados. Desarrollo, implementación y validación de metodología analítica para la identificación y cuantificación por HPLC de Oxitetraciclina Clorhidrato e Hidrocortisona Micronizada en suspensión para Spray: esta etapa constituye el objetivo final de la práctica profesional por lo que las etapas y estudios realizados se encuentran detallados en este trabajo. Aseguramiento de calidad: involucra el estudio y ejecución de los criterios y actividades desarrolladas en este ámbito por el profesional Químico Farmacéutico. Se implementó el POS (Procedimiento Operativo Estándar) de validación para Pfizer Chile SA basándose en las exigencias de Pfizer internacional y los parámetros más actuales referentes a este tema. Luego se desarrolló un estudio de mantenimiento de la cadena de frío en el transporte de materiales y productos refrigerados, además se diseño un instructivo y un POS. Se realizó una revisión exhaustiva del material de los artes de productos farmacéutico con el fin de establecer una línea de tiempo que permitiese adelantar posibles problemas con materiales importados y la ley actualmente vigente en el país

Unidad de Práctica Prolongada para optar al título profesional de Químico Farmacéutico / No autorizada por el autor para ser publicada a texto completo en el Portal de Tesis Electrónicas

No description available.