Objetivou-se realizar a caracterização física, química e funcional do fruto de camu-camu classificados nos estádios 2 (verde-avermelhado) e 4 (roxo), utilizando-se distintas doses de radiação gama (0; 0,5; 1 kGy) e acompanhar a atividade respiratória dos frutos, monitorados por um período de 25 dias em dois níveis de temperatura (5 e 25 oC). Os frutos foram avaliados quanto à cor instrumental da casca, firmeza, sólidos solúveis, acidez, ratio, pH, antocianinas, compostos fenólicos, atividade antioxidante, atividade respiratória e teor de ácido ascórbico. A irradiação com dose de 0,5 kGy teve influência positiva nos frutos no estádio 2 armazenados em temperatura ambiente, prolongando seu tempo de vida útil em dois dias, totalizando 9 dias. Os frutos tratados com 1 kGy tiveram seu tempo de vida útil reduzido em 6 dias. Em relação à firmeza, o ponto de maturação teve grande influência nas respostas; comportamento semelhante aconteceu com as antocianinas, onde os frutos no estádio 4 tiveram valores até 10 vezes superiores aos frutos verde-avermelhado (estádio 2), mas, de forma geral, as antocianinas se mantiveram estáveis em relação às doses testadas e ao tempo de armazenamento. A dose de 1 kGy influenciou nos compostos antioxidantes dos frutos refrigerados, diminuindo 83,4 e 67,46% do teor para os frutos nos estádios 2 e 4, respectivamente. O ácido ascórbico no camu-camu se mostrou altamente estável, mesmo quando o fruto já estava impróprio para o consumo, apresentando valores acima de 1000 mg de ácido ascórbico 100 g-1 de fruto. Exceção foi para os frutos refrigerados tratados com 1 kGy, que apresentaram valores de 263,67 mg 100 g-1 para os frutos no estádio 2 e 626,1 mg 100 g-1 para os frutos no estádio 4. De forma geral, a refrigeração teve maior influência na conservação do camu-camu, aumentando em média 18 dias o seu armazenamento, a radiação gama nas doses estudadas não se mostrou um tratamento vantajoso para aumentar a vida útil do camu-camu refrigerado. O fruto do camu-camu apresentou baixos valores de ratio (índice de palatabilidade), o que faz do fruto não palatável para o consumo in natura, elevados teores de antocianinas, compostos fenólicos, atividade antioxidante e ácido ascórbico / The objective of this work was to characterize physical, chemical and functional of the camu-camu fruit in its 2 stage (green- reddish) and 4 (purple), using different doses of gamma radiation (0, 0.5, 1 kGy) and to keep up with the respiratory activity over a period of 25 days in two temperature levels (5 and 25 ºC). The fruits were evaluated when the instrumental color of skin, firmness, soluble solids, acidity, ratio, pH, anthocyanins, phenolic compounds, antioxidant, respiratory activity and ascorbic acid content. Irradiation with 0,5 kGy had a positive influence on the 2 stage fruits stored at room temperature, extending its lifetime two days, totaling nine days. The fruit treated with 1 kGy had its lifetime reduced by 6 days. About the firmness, the maturation point had great influence on the answers; responses similar happened with anthocyanins, where the purple fruits had values up to 10 times higher than the green-reddish fruits, but, in general, anthocyanins were stable in relation to the doses tested and the storage time. There was a decrease of antioxidants in 83,4 and 67,46% for 2 and 4stages fruits, respectively. Ascorbic acid in camu-camu was highly stable even when the fruit was already unfit for consumption, with values above 1000 mg ascorbic acid 100 g-1 fruit. There was an exception with the refrigerated fruits treated with 1 kGy, which showed values of 263,67 mg 100 g-1 for the 4 stage fruits and 626.1 mg 100 g-1 for the 2 stage fruits. In general, the cooling had a greater influence on the conservation of camu-camu, increasing on average 18 days your storage, the gamma radiation doses studied did not prove advantageous treatment to extend the lifetime of the camu-camu in refrigeration. The camu-camu fruit showed low values of ratio (index of palatability), which makes the fruit unsuitable for fresh consumption, high levels of anthocyanins, phenolic compounds, antioxidant activity and ascorbic acid

Orientador: Elaine Minatel / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-13T07:56:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tonon_Erika_M.pdf: 1677236 bytes, checksum: e065259ff1028e91f63695538acbe0e8 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: A peroxidação lípidica causada pelo aumento de espécies reativas de oxigênio (EROs) no período que antecede o início da degeneração muscular no camundongo mdx, sugere que o estresse oxidativo pode ser um dos mecanismos primários da degeneração muscular distrófica, ao invés de ser um efeito secundário deste processo. No presente trabalho verificamos se o tratamento com ácido ascórbico antes que se iniciem os ciclos de degeneração/regeneração diminui a degeneração muscular em camundongos mdx. Camundongos mdx com 14 dias de vida pós-natal receberam por gavagem doses diárias de 0,1mg/kg de Ácido Ascórbico diluído em água por 7 (grupo mdx T7) e 14 dias (grupo mdx T14) e/ou dose de 200mg/kg por 14 dias (grupo mdx T14AA). Animais mdx controle receberam solução salina. Após este período, os músculos tibial anterior (TA), esternomastóide (STN) e diafragma (DIA) foram retirados. Na análise histológica, o ácido ascórbico diminuiu a degeneração muscular nos músculos TA do grupo mdx T7 e no DIA do grupo mdx T14AA (P<0,05, Student's t Test) quando comparados ao controle. Não houve diferença significativa nos níveis séricos de creatina quinase entre os grupos analisados (P>0,05, Student's t Test). Aumento significativo no conteúdo de TNF-", pela técnica de Western Blotting, foi observado nos músculos dos camundongos mdx tratados com ácido ascórbico. Os resultados indicam que o tratamento precoce de camundongos mdx com o ácido ascórbico diminuiu significativamente a mionecrose nos músculos tibial anterior e diafragma. O presente trabalho também sugere que o aumento do TNF-" não está necessariamente correlacionado ao aumento da mionecrose. / Abstract: Increased production of reactive oxygen species (ROS) can cause lipid peroxidation in the period preceding muscle necrosis in the mdx mice. This suggests that ROS may be involved as a primary, rather than secondary, cause of degeneration. In the present study, we verified whether ascorbic acid treatment before the cycles of muscle degeneration-regeneration decreases muscular degeneration in mdx mice. Mdx mice at 14 days of age received 0.1mg/kg of acid ascorbic daily in the water for 7 (group mdx T7) or 14 days (group mdx T14) and/or 200mg/kg for 14 days (group mdx T14AA). Control mdx mice received saline. After this period the tibialis anterior (TA), sternomastoid (STN) and diaphragm (DIA) muscles were removed. Hislogical analysis showed that ascorbic acid significantly decreased muscle degeneration in the TA of mdx T7 group and in the DIA of mdx T14AA group (P<0,05, Student's t Test) compared to control. There were no changes in serum CK activity in the ascorbic acid-treated mice compared to control (P>0,05, Student's t Test). Immunoblots showed a significant increase in the content of TNF-" in the muscles of the treated mdx mice. The present results indicate that ascorbic acid treatment before the cycles of muscle fiber degeneration-regeneration significantly decreases myonecrosis in TA and DIA dystrophic muscles. The present findings also sugest that increase TNF-" not necessarily correlates with increased myonecrosis. / Mestrado / Anatomia / Mestre em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Wilson de Figueiredo Jardim / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Quimica / Made available in DSpace on 2018-08-13T19:05:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Guedes_NiveaCristinadeCarvalho_D.pdf: 4953955 bytes, checksum: 1152bc5a0e4999e2d110490ec6abbb2c (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Um protocolo para avaliar o mercúrio potencialmente tóxico em águas naturais foi proposto de acordo com as seguintes etapas: (i) investigação de um redutor seletivo para espécies de mercúrio potencialmente tóxicas presentes em sistemas aquáticos; (ii) otimização do método; (iii) calibração experimental do método realizada com soluções contendo 50 mg L de Hg e diferentes ligantes em diferentes razões metal:ligante, utilizando-se ácido húmico (AH), cisteina (Cys), histidina (Hys) e ácido nitrilotriacético (NTA); (iv) aplicação do método em amostras de águas naturais, provenientes de sistemas aquáticos distintos (naturais e impactados), enriquecidas com diferentes concentrações de Hg (5, 10, 25 e 50 mg L), baseado na titulação das amostras de águas com concentrações conhecidas de Hg, seguida da determinação do metal pela técnica proposta; (v) para inferir o potencial tóxico do Hg determinado a partir do metodo proposto, a relação entre os resultados analíticos e respostas dos testes de toxicidade aguda com a bactéria Escherichia coli e o microcrustaceo Daphnia similis foram avaliados. Foi utilizado um espectrofotômetro de absorção atômica do vapor frio acoplado a um sistema FIA com amostragem discreta (o reagente é adicionado na amostra e não em fluxo). Os resultados mostraram que a utilização do ácido ascórbico (AA) como redutor do Hg (HgAA), em proporções definidas em relação a quantidade da amostra, em pH 6,4 ± 0,1 (tampão fosfato), com detecção após 60 ± 10 min, apresentou LQ = 0,5 mg L, desvio padrão relativo (n= 6) em 50 mg L de Hg de 4%, para uma faixa de trabalho de 0,5 - 60,0 mg L e fator de linearidade da curva de 97,3%. Os valores de HgAA determinados nas soluções com os ligantes foram diretamente influenciados pela natureza e pela proporcao molar dos complexos formados, sendo Cys > Hys > AH > NTA. Nas amostras de águas naturais o HgAA apresentou relação direta com o material particulado e carbono orgânico total e inorgânico. Uma significativa correlação foi determinada entre os resultados analíticos e a resposta bacteriana (ANOVA, teste F95%), sendo, r = 0,97 para as soluções com os ligantes e r = 0,94 para as amostras naturais. A correlação com os resultados da D. similis nas amostras naturais em relação ao HgAA obtido, foi r = 0,65, essa correlação não foi significativa pelo teste F95%, mas pode ser considerada expressiva visto o diferente mecanismo de interação deste organismo aquático e o Hg. Considerando que o método apresentou sensibilidade na faixa de trabalho, repetibilidade analítica e significativa correlação com os resultados biológicos, essa nova proposta de determinação de Hg pode ser útil para gerar informações relacionadas com a toxicidade aguda do Hg em águas naturais / Abstract: A protocol for the assessment of potentially toxic mercury in natural waters has been developed in accordance to the following stages: (i) research for a selective reductant of potentially toxic mercury species present in natural water samples; (ii) method optimization; (iii) experimental calibration carried out with solutions containing 50 mg L of Hg and different organic ligands at different ratios metal:ligand, including humic acid (HA), cysteine (Cys), histidine (Hys) and nitrilotriacetic acid (NTA); (iv) method application in samples from distinct aquatic ecosystems (natural and impacted) were carried out using different concentrations of Hg (5, 10, 25 e 50 mg L) based on titration of water samples with known Hg concentrations and followed by the metal determination using the purposed method; (v) to infer the Hg toxic potential determined with the proposed method, the relationship between analytical results and acute toxicity test with the bacterium Escherichia coli and the microcrustacean Daphnia similis was evaluated. A cold vapor atomic absorption spectrophotometer coupled to flow injection (FIA) system with stop-flow sampling was used. The results showed that the use of ascorbic acid (AA) as a reductant (HgAA), in specifc ratios sample:reductant, at pH 6.4 ± 0.1 (phosphates buffer), with detection after 60 ± 10 min, presented a limit of quantification (LOQ) of 0.5 mg L, with a relative standard deviation (n=6) at 50 mg L of Hg of 4%, linear range of 0.5 ¿ 60.0 mg L and linearity factor of 97.3%. The values of HgAA determinated in the presence of ligands were directly dependent with the ligand nature and concentration, being Cys > Hys > HA > NTA. In natural water samples, HgAA was directly related to particulate matter, total organic and inorganic carbon. A significant correlation (ANOVA, F95% test) was observed between analytical results and bacteria response, being r = 0.97 for the synthetic solutions with ligands and r = 0.94 for natural samples. The correlation with Daphnia results and HgAA in natural samples was r = 0.65, not significance at F95%, but it can be expressive, once accepted the different mechanisms of interaction of this aquatic organism. Considering that the method has adequate sensitivity, analytical repeatability and significant correlation with biological results, this new protocol for the determination of Hg can be useful in generating information concerning the Hg acute toxicity in natural water / Doutorado / Quimica Analitica / Doutor em Ciencias Quimicas

O exercício físico intenso altera o sistema antioxidante, aumentando a geração de radicais livres e/ou diminuindo a concentração de antioxidantes. Assim o objetivo deste estudo foi verificar os efeitos da oferta de vitamina C através de um suplemento alimentar e dieta rica em ácido ascórbico no estresse oxidativo induzido pelo exercício. A amostra foi composta por 13 nadadores de elite (6 homens e 7 mulheres), com idades entre 18 e 26 anos, IMC médio 21,8kg/m², que treinavam em média 19,4h semanais. Os atletas foram submetidos à carga de exercício aguda em 3 fases, controle (C), dieta rica em vitamina C (D) e suplemento de vitamina C (S), nas quais amostras de sangue foram colhidas antes, imediatamente após e 24 horas depois do exercício, para determinação bioquímica e do estresse oxidativo. O uso de suplementos alimentares foi feito pela maioria dos nadadores (92,3%), e os suplementos mais usados eram Maltodextrina, associação de proteína e carboidrato, enquanto o relato do consumo de antioxidantes não foi muito freqüente (25%). Em relação ao consumo de antioxidantes, os nadadores apresentavam consumo alimentar variável de vitamina C, sendo que muitos deles apenas adequaram o consumo devido à adição feita pelo estudo. O consumo de vitamina E foi inadequado para todos os atletas, já o consumo de selênio, retinol e zinco tiveram uma grande oscilação. Durante as fases o único antioxidante que apresentou flutuações foi o ácido ascórbico, que foi menor na fase C em relação às outras fases. Para a maioria dos indivíduos o consumo de carboidrato e fibras se mostrou insuficiente, e o de lipídeos e calorias adequados, enquanto o consumo de proteínas variou bastante. O uso de dieta rica em vitamina C favoreceu uma menor peroxidação lipídica em nadadores de alto rendimento, já que apresentou menores valores de FOX, e diminuição da peroxidação lipídica após exercício, pela diminuição dos valores de TBARS, enquanto tiveram aumento dos níveis de vitamina C no plasma logo após o exercício. Enquanto o uso de suplemento de vitamina C, que também conteve a peroxidação lipídica após exercício, aumentou o poder antioxidante nos mesmos nadadores, devido maiores níveis do antioxidante GSH. Os quais sem uso de nenhuma adição de vitamina C tiveram um maior dano hepático e tecidual, pois apresentaram maiores níveis de TGO, menores níveis de antioxidantes, devido aos baixos níveis de vitamina C e GSH, e um aumento do ácido úrico, um antioxidante que aumenta em situações onde há grande quantidade de radicais livres presentes. Ainda pode-se verificar que, antes do exercício, quanto mais ácido ascórbico na dieta mais vitamina C, menos TGO e menos ácido úrico no sangue; e ainda logo após o exercício e 24 horas depois quanto mais ácido ascórbico menos TGO e menos ácido úrico séricos. Sendo assim as mudanças observadas com a adição de vitamina C à dieta de nadadores de alto rendimento sugere um importante papel do ácido ascórbico plasmático e da suplementação alimentar na defesa contra o estresse oxidativo induzido pelo exercício / The strenuous exercise alters the antioxidant system by increasing the generation of free radicals and / or decreasing the concentration of antioxidants. Then the aim of this study was to investigate the effects of supply of vitamin C through a dietary supplement and diet rich in ascorbic acid in the exercise-induced oxidative stress. The sample was compound of 13 elite swimmers (6 men and 7 women) aged between 18 and 26 years, average BMI 21.8 kg / m², who trained on average 19.4 hours per week. The athletes were submitted to acute exercise load in three phases: control (C), diet rich in vitamin C (D) and supplement vitamin C (S), in which blood samples were collected before, immediately after and 24 hours after exercise to biochemical determination and oxidative stress. The use of dietary supplements is done by most of the swimmers (92.3%), and supplements most used were maltodextrin, association of protein and carbohydrate, while the report of consumption of antioxidants was not very frequent (25%). Regarding the consumption of antioxidants, the swimmers had dietary vitamin C variable, and many of them just adjusted consumption due to addition made by the study. The consumption of vitamin E was inadequate for all athletes, while the consumption of selenium, retinol and zinc had a great oscillation. During the phases the only antioxidant that showed fluctuations was ascorbic acid, which was lower in phases C when compared to other phases. For most individuals the consumption of carbohydrates and fibers were insufficient, and lipid and calories adequate, while protein intake varied widely. The use of diet rich in vitamin C favored a lower lipid peroxidation in swimmers high performance, then showed lower values of FOX, and decreased lipid peroxidation after exercise by the decrease in TBARS values, while they had increased levels of vitamin C plasma immediately after exercise. While the use of supplement vitamin C, which also contained the lipid peroxidation after exercise, increased the antioxidant power of the same swimmers, due higher levels of the antioxidant GSH. This without use addition of vitamin C had a greater damage liver and tissue, because they showed higher levels of TGO, lower levels of antioxidants, due lower levels of vitamin C and GSH, and increased uric acid, an antioxidant that increases in situations where there are lots amount the free radicals presents. Further can be seen that, before exercise, the more ascorbic acid in vitamin C diet, less TGO and less uric acid in blood, and even after exercise and 24 hours after the more ascorbic acid less serum TGO and uric acid. Thus the observed change with the addition of vitamin C to the diet of high-performance swimmers suggests an important role of ascorbic acid and dietary supplementation in protecting against exercise-induced oxidative stress.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / O objetivo principal desse trabalho foi avaliar o efeito da aplicaÃÃo exÃgena do Ãcido ascÃrbico na reduÃÃo dos danos ocasionados pelo envelhecimento e salinidade em sementes de feijÃo-de-corda. Foram realizados trÃs experimentos, sendo o material vegetal utilizado como modelo nestes experimentos sementes de feijÃo-de-corda [Vigna unguiculata (L.) Walp.], cultivar EPACE 10, disponÃveis do Banco de Germoplasma de FeijÃo-de-corda da UFC. No primeiro experimento foram feitos testes preliminares para obtenÃÃo da melhor metodologia de aplicaÃÃo do Ãcido ascÃrbico em sementes de feijÃo-de-corda. As sementes foram incubadas com 0,42 e 0,85 mM de Ãcido ascÃrbico em diferentes tempos de exposiÃÃo (4h, 8h e 24h) atravÃs de dois diferentes mÃtodos: I - EmbebiÃÃo em papel germitest na placa de petri e II - SubmersÃo em soluÃÃo no Erlenmeyer. ApÃs a aplicaÃÃo dos tratamentos foi quantificado nas sementes o teor de Ãcido ascÃrbico (AsA) e posteriormente comparado com o teor padrÃo de Ãcido ascÃrbico endÃgeno jà existente nas sementes controle (0h). Foi observado que em todos os tratamentos analisados o teor de AsA endÃgeno das sementes de feijÃo-de-corda, foi maior que o das sementes controle, que nÃo sofreram tratamento. à medida que foi aumentando o tempo de exposiÃÃo das sementes, houve um aumento crescente no teor de Ãcido ascÃrbico das sementes, com diferenÃa estatÃstica significativa entre os tempos de exposiÃÃo analisados, sendo o mais eficiente o de 24 h. Houve diferenÃa significativa tambÃm nas concentraÃÃes exÃgenas utilizadas, sendo a de 0,85 mM a mais eficiente. Houve diferenÃa significativa entre os mÃtodos aplicados somente na concentraÃÃo de 0,85 mM. No tempo de 24 h de exposiÃÃo foi verificado que, apesar do valor numÃrico do mÃtodo II ser superior ao do mÃtodo I, nÃo foi constatada diferenÃa significativa entre os mÃtodos de aplicaÃÃo nesse tempo Podemos entÃo concluir a partir dos resultados apresentados que tanto o mÃtodo de aplicaÃÃo I como o II, com a concentraÃÃo de 0,85 mM de Ãcido ascÃrbico por um perÃodo de 24 h foi à metodologia mais eficiente para a aplicaÃÃo exÃgena de Ãcido ascÃrbico em sementes de feijÃo-de-corda, cultivar EPACE 10. No segundo experimento, tendo jà definido a metodologia de aplicaÃÃo exÃgena, foi feita entÃo a investigaÃÃo do possÃvel efeito do prà ou pÃs-tratamento com Ãcido ascÃrbico na atenuaÃÃo dos efeitos danosos provocados pelo envelhecimento nas sementes de feijÃo-de-corda, atravÃs de parÃmetros fisiolÃgicos e bioquÃmicos. As sementes foram submetidas a quatro tratamentos: T1 - sementes nÃo envelhecidas e nÃo tratadas com Ãcido ascÃrbico (AsA), tratamento controle (SNE); T2 - sementes envelhecidas (45ÂC, 99% U.R., no escuro) e nÃo-tratadas com AsA (SE); T3 - as sementes, antes do envelhecimento foram submetidas a um prÃ-tratamento com 0,85 mM de AsA (SE-PrÃ-T); T4 - as sementes, apÃs o envelhecimento, foram submetidas a um pÃs-tratamento com 0,85 mM de AsA (SE-PÃs-T). As sementes do T4 apresentaram massa fresca maior que as do controle (T1). Houve uma reduÃÃo de quase 15% na germinaÃÃo das sementes apÃs o envelhecimento, evidenciado no tratamento T2. PorÃm, quando as sementes foram tratadas com a soluÃÃo de Ãcido ascÃrbico apÃs o envelhecimento T4 a porcentagem de germinaÃÃo foi maior que o do controle (T1) em quase 13%. As sementes dos tratamentos T2 e T3 apresentaram um maior percentual de danos de membrana (35,16 e 36,82 Âs cm-1g-1semente respectivamente), avaliado pelo maior vazamento de eletrÃlitos (C.E), quando comparado com o controle T1 (17,84 Âs cm-1g-1semente). As sementes envelhecidas do tratamento T2 apresentaram um menor vigor, avaliado pelo vazamento de eletrÃlitos, que o controle T1. O T3 provocou resultados negativos nas sementes de feijÃo-de-corda, em todas as variÃveis relacionadas com o vigor e a germinaÃÃo. Entretanto, a aplicaÃÃo exÃgena de soluÃÃo de Ãcido ascÃrbico a 0,85 mM apÃs o envelhecimento por 72 h nas sementes de feijÃo-de-corda (T4) amenizou os efeitos deletÃrios provocados pelo envelhecimento no vigor e na germinaÃÃo dessas sementes. Estas melhorias observadas em T4 foram evidenciadas por um maior conteÃdo de matÃria fresca e seca, maior integridade de membranas, menor peroxidaÃÃo de lipÃdios, maior porcentagem de germinaÃÃo, porcentagem de emergÃncia de plÃntulas no campo, conteÃdo de ascorbato e atividade da peroxidase do ascorbato (APX), quando comparado com o T3. Os resultados sugerem que a aplicaÃÃo exÃgena de Ãcido ascÃrbico 0,85 mM nas sementes de feijÃo-de-corda apÃs o envelhecimento artificial (pÃs-tratamento), pode atenuar seus efeitos deletÃrios provocados sobre o vigor e germinaÃÃo dessas sementes. Finalmente, no terceiro experimento, foi investigado tambÃm o efeito da aplicaÃÃo exÃgena de Ãcido ascÃrbico na aclimataÃÃo de sementes envelhecidas de feijÃo-de-corda ao estresse salino, tambÃm atravÃs de parÃmetros fisiolÃgicos e bioquÃmicos. As sementes foram envelhecidas por 72 h em cÃmara de envelhecimento acelerado (45 ÂC, 99% U.R., no escuro) e posteriormente foram semeadas em papel germitest embebido com: Ãgua desionizada (T2); NaCl a 100 Mm (T3); Ãcido ascÃrbico a 0,85 Mm (T4); NaCl a 100 mM + Ac. AscÃrbico a 0,85 mM (T5) e o tratamento controle consiste de sementes nÃo envelhecidas, embebidas com Ãgua desionizada (T1). Foram feitas coletas em trÃs estÃdios morfofisiolÃgicos, sendo avaliadas variÃveis fisiolÃgicas relacionadas ao vigor. O T2 e o T3 afetaram o vigor das sementes com reduÃÃes na massa, na integridade das membranas e na germinaÃÃo. O T4 atenuou os efeitos provocados pelo envelhecimento na germinaÃÃo e no vigor, apresentando um maior Ãndice de velocidade de emergÃncia (IVE) e menor tempo mÃdio de emergÃncia (TME) e maior teor de Ãgua. O T3 e T5 atrasaram a mobilizaÃÃo de reservas quando comparado com o T1 e T4. O T5 reduziu a massa fresca, aumentou o vazamento de eletrÃlitos e retardou a germinaÃÃo com um menor IVE e maior TME. A aplicaÃÃo de Ãcido ascÃrbico, foi capaz de atenuar os efeitos provocados pelo envelhecimento, mÃs nÃo foi capaz de atenuar os efeitos do NaCl nas sementes envelhecidas de feijÃo-de-corda. O estudo da relaÃÃo entre o uso de antioxidantes naturais, com um possÃvel revigoramento de sementes envelhecidas, utilizando o feijÃo-de-corda como modelo experimental, pode gerar estratÃgias de meios de potencializar as defesas antioxidativas e amenizar os efeitos de estresse em ambientes de armazenamento de sementes sob condiÃÃes nÃo controladas, principalmente em pequenas e mÃdias propriedades rurais. / The main objective of this study was to evaluate the effect of exogenous application of ascorbic acid in reducing the damage caused by aging and salinity in cowpea seeds. Three experiments were conducted, and the plant material used as a template in these experiments, seeds of cowpea [Vigna unguiculata (L.) Walp.], cultivate EPACE 10, available from the Germplasm Bank of cowpea of UFC. In the first experiment, preliminary tests were made to obtain the best methodology for the application of ascorbic acid in cowpea seeds. The seeds were incubated with 0.42 and 0.85 mM ascorbic acid at different exposure times (4h, 8h and 24h) using two different methods: (I) - Soaking in germitest paper in a petri dish and (II) - Drowning in solution in the Erlenmeyer. After applying the treatments were quantified in seeds, the ascorbic acid content and then compared to the standard content of endogenous ascorbic acid existing in the control seeds (0 h). It was observed that in all treatments examined, the endogenous AsA content of the seeds of cowpea was greater than that of control seeds, which have not undergone treatment. As has been increasing the exposure time of seeds, there was a steady increase in the ascorbic acid content of seeds, with a statistically significant difference between the exposure times examined, the most efficient of 24 h. There was a significant difference in the concentrations used exogenous, being 0.85 mM of the most efficient. There was no significant difference between the methods applied at a concentration of 0.42 mM, at a concentration of 0.85 mM. At 24 h of exposure, we observed that despite the numerical value of the method (II) is superior to the method (I), we found no statistically significant difference between application methods at that time then we can conclude from the results presented that both the method of application (I) or (II) with the concentration of 0.85 mM ascorbic acid for a period of 24 h was the most efficient methodology for the application of exogenous ascorbic acid in cowpea seeds, cultivate EPACE 10. In the second experiment, as defined the methodology of exogenous application was then made to investigate the possible effect of pre-or post-treatment with ascorbic acid in reducing the harmful effects caused by aging in the cowpea seeds, through physiological and biochemists. Seeds of cowpea rope were placed in accelerated aging chamber (45 ÂC, 99% RH in the dark). The seeds were subjected to four treatments: (T1) and aging seeds were not treated with ascorbic acid (AsA), control (SNE); (T2) and non-aged seeds treated with AsA (SE); (T3) seeds Before aging were subjected to a pretreatment with 0.85 mM AsA (SE-Pre-T); (T4) seeds, after aging, were subjected to a post-treatment with 0.85 mM AsA (Post-SE-T). The seeds of T4 showed higher fresh weight than the control (T1). There was a reduction of almost 15% seed germination after aging for 72 h, evidenced by the treatment (T2). However, when seeds were treated with ascorbic acid solution treatment (T4) the% germination was higher than in the control (T1) in almost 13%. Seed treatment (T2) and (T3) had a higher% of membrane damage (35.16 and 36.82), respectively, measured by increased electrolyte leakage (EC) when compared with the control (T1) (17.84). The aged seeds of treatment (T2) showed a smaller force, measured by electrolyte leakage, the control (T1). T3 caused negative results in the cowpea seeds with aging for 72 h in all variables related to the vigor and germination. However, exogenous application of ascorbic acid solution 0.85 mM after aging for 72 h in the cowpea seeds alleviated the harmful effects caused by aging vigor and germination of seeds. Evidenced by a higher content of fresh and dry weight, integrity of membranes, reduced lipid peroxidation, higher percentage germination, higher percentage of seedling emergence in the field, the higher content of ascorbate and APX activity increased when compared with the T3. The results suggest that exogenous application of 0.85 mM ascorbic acid in the cowpea seeds after artificial aging (after treatment), can mitigate their damaging effects on vigor and germination of these seeds. Finally, the third experiment, we investigated the effect of exogenous application of ascorbic acid in acclimation of aged seeds of cowpea to salt stress also through physiological and biochemical parameters. Seeds were aged for 72 h in the accelerated aging chamber (45 ÂC, 99% RH in the dark). After germitest were sown on paper soaked with (T2) deionized water (T3) 100 mM NaCl, (T4) and 0.85 mM ascorbic acid, (T5) at 100 mM NaCl + Ac. The 0.85 mM ascorbic acid and the control (T1), aging seeds with deionized water. Sampling was done in three stages morph physiologic, when variables related physiological effect. The T2 and T3 affect the vigor with mass reduction in membrane integrity and germination. The T4 attenuated effects caused by aging on the germination and vigor, presenting a higher emergence rate index (ESI) and lower mean emergence time (MET) and higher water content. The T3 and T5 delayed the mobilization of reserves compared with the T1 and T4. The T5 has reduced the fresh weight, increased electrolyte leakage and delayed germination with a largest ESI and smallest MET. The application of ascorbic acid, was able to mitigate the effects caused by aging, but was not able to mitigate the effects of NaCl in the aged seeds of cowpea. The study of the relationship between the use of natural antioxidants, with a possible revival of aged seeds, using the cowpea as a model, can generate media strategies to enhance antioxidative defenses and mitigating the effects of stress in storage environments seed under uncontrolled conditions, mainly in small and medium-sized farms.

Nesse trabalho são apresentados resultados sobre o desenvolvimento de microeletrodos por desgaste eletroquímico de microfibras de dimensões da ordem de 100 µm de diferentes materiais (platina, ouro e fibra de carbono) visando à utilização em micro-ambientes. Na grande maioria dos casos esse processo foi realizado utilizando transformadores AC. Arranjo de microeletrodos construídos a partir de técnicas litográficas também foram construídos. A aplicabilidade de microeletrodos de Pt construídos por desgaste eletroquímico foi avaliada para monitorar a concentração \"in-situ\" de ácido ascórbico em diferentes frutas. O sensor foi capaz de avaliar a distribuição espacial da concentração de ácido ascórbico \"in-situ\" em laranjas. A partir desses resultados, mapas para a concentração de ácido ascórbico foram construídos. A correlação entre o estado de maturação e a concentração de ácido ascorbico também foi observada a partir das medições realizadas e concentrações maiores foram encontradas em frutas mais maduras. O arranjo de microeletrodos foi utilizado para avaliar a concentração de iodato em amostra de sal de cozinha utilizado pequenos volumes de amostra (500 µL). Verificada a possibilidade de fabricação de microeletrodos de diferentes geometrias e dimensões, estudos visando ao monitoramento e à detecção de DNA e ácido ascórbico foram efetuados. Superfícies eletródicas modificadas com filmes de óxido de rutênio hexacianoferrato (RuOHCF) foram utilizadas para a detecção amperométrica de 2\'-deoxiguanosina (dG) e ácido ascórbico por análise por injeção em fluxo (FIA). O método para detecção de dG apresentou um resposta linear de 3,8 a 252 µmol L-1, com um limite de detecção de 94 nmol L-1. Aplicações em amostras de DNA também foram realizadas, e os resultados para determinação da dG concordaram com os obtidos pelo método padrão (HPLC). Estudos sobre o processo eletrocatalítico de oxidação da dG em meio ácido em filmes de RuOHCF foram investigados utilizando eletrodo rotativo. Sobre esse mesma superfície modificada, o processo eletrocatalítico permitiu a determinação de ácido ascórbico em pH = 6,9 a 0,0 V vs Ag/AgCl em FIA, com um limite de detecção de 2,2 µmol L-1. Estudos sobre o processo eletrocatalítico de oxidação do ácido ascórbico também foram avaliados com eletrodo rotativo. O método foi aplicado para a determinação de ácido ascórbico em urina, obtendo-se bons valores de recuperação (96 - 104 %). Microeletrodos contendo filmes eletrodepositados de RuOHCF foram utilizados para monitorar o consumo de ácido ascórbico em 3 diferentes tipos de células neuronais (SH-SY5Y, células transfectadas com SOD humana e mutante típica da doença de Esclerose Lateral Amiotrófica (ALS)). Os resultados do consumo de ácido ascórbico para essas células estão de acordo com os níveis de estresse oxidativo induzido pela SOD mutante. Experimentos visando a aplicabilidade de microeletrodos inseridos em células também foram efetuados. / Results on the development of microelectrodes fabricated by electrochemical etching using fibers of different materials (platinum, gold and carbon fiber) and dimensions (starting from 100 µm) for the application in micronenvironments are presented. In almost all cases this procedure was carried out using AC transformer. Array of microelectrodes were also fabricated by using litographic techniques. The applicability of Pt microelectrodes fabricated by electrochemical etching was evaluated in the in-situ monitoring of the ascorbic acid concentration in different fruits. The sensor allowed spatial distribution of ascorbic acid concentration in oranges to be found and concentration maps were constructed. A correlation between the ripening stage and the ascorbic acid concentration was also observed from electrochemical measurements, the ascorbic acid content being higher in mature fruits. Studies on the detection of species involved in the oxidative stress process, such as DNA and ascorbic acid, were also performed. Ruthenium oxide hexacyanoferrate (RuOHCF) modified electrode surfaces were used as amperometric detectors for 2\'-deoxyguanosine (dG) and ascorbic acid determinations in FIA apparatus. The method exhibited a linear response range to 2\'-deoxyguanosine from 3.8 to 252 µmol L-1 dG with detection limit of 94 nmol L-1. Applications in DNA samples were examined, and the results for determination of 2\'-deoxyguanosine were in good agreement with those obtained by HPLC analysis. The dG electrocatalytic oxidation at a RuOHCF glassy carbon (GC) modified electrode was investigated in acid medium by using rotating disc electrode (RDE) voltammetry. On this modified surface, the electrocatalytic process allowed the determination of ascorbic acid to be performed at 0.0 V and pH = 6.9 with a limit of detection of 2.2 µmol L-1 in a flow injection configuration. The usefulness of the method was demonstrated by an addition-recovery experiment with urine samples and the recovered values were in the 96 to 104 % range. Investigations on the mechanism of the electrocatalytic oxidation of ascorbic acid was also investigated at pH = 6.9 by using RDE voltammetry. The RuOHCF carbon fiber modified microelectrode was used to monitor the ascorbate uptake by control SH-SY5Y cells, and cells transfected with wild-type Cu,Zn-Superoxide Dismutase (SOD) or with a mutant SOD (SOD G93A) typical of familial Amyotrophic Lateral Sclerosis (ALS). Data on the rate of ascorbate uptake by these cells were in agreement with the level of oxidative stress induced by the mutant SOD. Attemps to use the microelectrodes inside single cells were also performed

Este trabalho consta de uma avaliação da qualidade intrínseca e da qualidade percebida por potenciais consumidores espanhóis de polpa de camu-camu [Myrciaria dubia (H.B.K.) McVaugh] submetida a quatro diferentes tratamentos: congelamento, pasteurização, pressurização (alta pressão hidrostática) e liofilização, armazenada congelada por quatro meses. A avaliação da qualidade intrínseca foi realizada por meio de análises dos parâmetros pH, sólidos solúveis, acidez, coloração, teores de ácido ascórbico, de compostos fenólicos e de antocianinas, e a avaliação da qualidade percebida por meio de testes sensoriais para os parâmetros aparência, cor, aroma e sabor. Este estudo justifica-se pelo reduzido consumo de camu-camu, uma fruta nativa da Amazônia com o mais elevado teor de vitamina C observado em estudos científicos (entre 1.721 e 2.900 mg de ácido ascórbico.100 g-1), e que contém outros importantes compostos com atividade antioxidante como compostos fenólicos e carotenoides. Uma das razões do baixo consumo da fruta fresca é sua elevada acidez (entre 2,31 e 3,08 g de ácido cítrico.100 g-1), portanto, é importante a apresentação de alternativas de consumo que preservem sua principal característica nutricional (elevado teor de vitamina C) e demais atividades biológicas, ainda pouco exploradas, enquanto enriquece seus valores sensoriais. Neste trabalho os valores dos parâmetros físicos e químicos encontrados para as polpas de camu-camu ao longo do armazenamento permaneceram estáveis. Foram observados diferentes efeitos dos tratamentos sobre os teores de ácido ascórbico, compostos fenólicos e antocianinas, sendo que a pasteurização foi o tratamento que causou maior impacto negativo. Sensorialmente a polpa reconstituída de liofilizado de camu-camu apresentou resultados inferiores às polpas submetidas aos demais tratamentos. Os teores de ácido ascórbico das polpas de camu-camu após 125 dias de armazenamento estiveram entre 1.200 e 1.796 mg por 100 g de polpa, valores relativamente inferiores aos apresentados em publicações sobre camu-camu nos últimos anos, entretanto, comparáveis aos apresentados para acerola (entre 1.191 e 1.921 mg.100 g-1) e kakadu (1.240 mg.100 g-1) e superiores ao apresentado para rosehip (1.141 mg.100 g-1) outras fontes destacadas deste nutriente. Os néctares de camu-camu são uma alternativa para o consumo, visto que a fruta e suas polpas por serem destacadamente ácidas sofrem rejeição por potenciais consumidores / The purpose of this work is to present an assessment of the intrinsic quality and the quality perceived by potential Spanish consumers of camu-camu [Myrciaria dubia (H.B.K.) McVaugh] pulp submitted to four different treatments: freezing, pasteurization, pressurization (high hydrostatic pressure) and lyophilization, stored frozen for four months. The intrinsic quality assessment was performed by analysis of pH, soluble solids, acidity, color, contents of ascorbic acid, phenolic compounds and anthocyanins, and assessment of the quality perceived by sensory tests for the parameters of appearance, color, aroma and flavor. This study is justified by the low consumption of camu-camu, an Amazon native fruit with the highest vitamin C content observed in scientific studies (between 1,721 and 2,900 mg of ascorbic acid .100 g-1), and contains other important compounds with antioxidant activity such as phenolics compounds and carotenoids. One reason for the low consumption of fresh fruit is its high acidity (between 2.31 and 3.08 g of citric acid.100 g-1), so it is important to introduce consumption alternatives that preserve their main nutritional characteristic (high vitamin C content) and other biological activities, yet little explored, while enriching their sensory values. In this study, it was detected that the values of physical and chemical parameters found for the camu-camu pulp throughout the storage period remained stable. It was observed that different effects of treatments on ascorbic acid, phenolic compounds and anthocyanins; and that pasteurization was the treatment that caused major negative impact. Sensorially reconstituted freeze-dried camu-camu pulp showed results lower than those subjected to other treatments. The ascorbic acid content of camu-camu pulp after 125 days of storage was between 1,200 and 1,796 mg per 100 g of pulp, relatively lower than the values presented in publications on camu-camu in recent years; however, they were closely comparable to those for acerola fruit (between 1,191 and 1,921 mg.100 g-1) and kakadu fruit (1,240 g.100 g-1) and superior to that presented to rosehip fruit (1,141 mg.100 g-1) other highlighted sources of this nutrient. The camu-camu nectars are an alternative way for the consumer, since the fruit and its pulp, by being prominently acidic, suffer rejection by potential consumers

A neuropatia autonômica que se manifesta em animais portadores de diabetes mellitus (DM) compromete vários órgãos. A nível gastrointestinal pode acarretar diarréia, constipação, estase e dilatação gástrica, levando a anorexia, perda de peso e vômito. Embora os mecanismos que desencadeiam esses distúrbios não estejam totalmente esclarecidos, parece que alterações do plexo mioentérico estão envolvidas. O estresse oxidativo juntamente com o aumento do sorbitol resultante das alterações metabólicas presentes no DM resultam em edema e lesão neuronal e, entre as conseqüências desta lesão, tem sido descrita alterações nos neurônios mioentéricos. O ácido ascórbico (AA) além da ação antioxidante pode reduzir a concentração de sorbitol atuando, desse modo, como neuroprotetor. O presente trabalho teve como objetivos investigar possíveis alterações no número e no tamanho dos neurônios mioentéricos NADH-diaforase reativos (NADH-dr) do estômago de ratos diabéticos e o efeito da suplementação com AA (1g/L de água) nos referidos parâmetros. Para tanto, 15 ratos (Rattus norvegicus) foram separados em três grupos (n = 5): controle (C); diabético (D); e diabético suplementado com AA (DS). O DM foi induzido por estreptozootocina (35 mg/kg de peso corporal). Após 120 dias de experimento, os animais foram anestesiados, sacrificados e seus estômagos retirados. Os neurônios mioentéricos foram evidenciados pelo método da NADH-diaforase. Por meio de microscópio de luz foram contados os neurônios NADH-dr e, pelo programa computadorizado para análise de imagens, foi mensurado o perfil do corpo celular (PCC) desses neurônios. As regiões aglandular e glandular do estômago foram analisadas separadamente. O número de neurônios NADH-dr foi maior (P<0,05) na região glandular do grupo DS quando comparado com o grupo D. A média dos PCCs foi maior (P<0,05) para os neurônios dos grupos D e DS do que para o grupo C. Ocorreu aumento na incidência de neurônios com PCC superior a 200 &micro;m2 no grupo D quando comparada aos grupos DS e C. Os resultados sugerem que a suplementação com AA teve efeito neuroprotetor sobre os neurônios mioentéricos NADH-dr representado pelo aumento no número de neurônios e diminuição de neurônios grandes na região glandular do grupo DS. / The autonomous neuropathy present in animals with diabetes mellitus (DM) compromises several organic systems. On the gastrointestinal tract it may provoke diarrhea, constipation, estase and gastric dilation, leading to anorexia, weight loss and vomit. Although the triggering mechanisms of these disturbances are not completely clear, it seems that alterations of the myenteric plexus may be involved. The oxidizing stress - together with the sorbitol increase resulting from the metabolic alterations due to dm - results in an edema and in a neuronal lesion. Among the consequences of this lesion, alterations in the myenteric neurons have been described. The ascorbic acid (AA), besides its antioxidant effect, may also reduce the sorbitol concentration working as a neuroprotector. The aims of the present work were to investigate the possible alterations in the number and size of nadh-dr stained myenteric neurons of the stomach of diabetic rats and the effect of the aa-supplementation (1g/l of water). In order to do so, 15 rats (rattus norvegicus) were divided into three groups (n = 5): controls (C); diabetic (D); and diabetic supplemented with AA (DS). DM was induced by streptozotocin (35 mg/kg of body weight). 120 days later, the animals were sacrificed for obtaining their stomachs. The myentric neurons were stained employing the nadh-diaforase method. We counted the nadh-dr neurons employing the light microscope and we measured the cellular body profile (CBP) using an image analysis software. The aglandular and glandular areas of the stomach were analyzed separately. The number of neurons nadh-dr was larger (p <0,05) in the glandular area of group ds when compared to group d. The average of cbps was larger (p <0,05) for neurons of groups d and ds than for group c. There was an increase in the incidence of neurons with cbps over 200 mm2 in group D when compared to groups DS and C. The results suggest that the AA supplementation had a neuroprotetor effect on the nadh-dr myenteric neurons represented by the increase in the number of neurons and the decrease of big neurons in the glandular area of group DS.

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A enzima lipoxigenase através da farinha integral de soja é amplamente utilizada na panificação com objetivos de branqueamento e melhora da reologia. Com base nesse pressuposto, o objetivo inicial deste estudo foi de observar a ação oxidante dessa enzima na presença de dois outros oxidantes (ácido ascórbico e peróxido de benzoíla) nas propriedades reológicas e sensoriais de pães. Sete misturas com diferentes combinações dos três compostos foram elaboradas utilizando-se um delineamento experimental do tipo \"centroide-simplex\", sendo aplicadas à farinha de trigo para o preparo de pães. A enzima apresentou sinergia com o ácido ascórbico na elasticidade da massa, sugerindo uma inter-relação bioquímica entre os dois compostos no fortalecimento da matriz protéica do glúten. A mesma sinergia entre a lipoxigenase da soja e o acido ascórbico foi observada na redução da tonalidade amarela dos pães medida instrumentalmente. A partir desses resultados, buscou-se avaliar a ação da enzima frente a variações tanto na força da farinha como no tempo de fermentação, reproduzindo as condições reais de processamento. Desta vez, um planejamento experimental do tipo Box-Behnken com três fatores (atividade da enzima, força da farinha e tempo de fermentação) em três níveis de variação, foi aplicado no preparo das amostras. Os resultados mostraram que a lipoxigenase da soja (fração 1) é uma enzima oxidante de ação rápida e seu efeito no branqueamento dos carotenóides da farinha de trigo exibiu interação positiva tanto com a força da farinha como o tempo de fermentação. Respostas reológicas e sensoriais decorrentes da ação conjunta de diferentes oxidantes e condições de processamento em pães foram pela primeira vez descritas através de modelos polinomiais com capacidade preditiva. / Soy lipoxygenase enzyme through soy flour is widely used in breadmaking for bleaching and rheological improvement. Based on this fact, the initial objective of this study was to observe the enzymes\' action in the presence of two other oxidants (ascorbic acid and benzoyl peroxide) in the rheological and sensory properties of breads. Seven mixtures with different combinations of the three compounds were prepared using a \"centroid-simplex\" design and applied to wheat flour for breadmaking. The enzyme showed synergism with ascorbic acid in the dough elasticity suggesting a biochemical interrelation between the two compounds in strengthening the gluten protein matrix. The same synergy between soy lipoxygenase and ascorbic acid was observed with the yellow hue reduction of breads measured instrumentally. From these results, the enzyme action was evaluated with wheat strength and proofing time variations reproducing real processing conditions. This time, a Box-Behnken experimental design with three factors (enzyme activity, wheat strength and proofing time), and three variation levels were applied in the sample preparation. The results showed that soy lipoxygenase (type 1) is a fast-acting oxidizing enzyme and its bleaching effect on wheat flour carotenoid exhibited a positive interaction with wheat strength and proofing time. Rheological and sensory results attributed to the combined action of the different oxidants and breadmaking conditions were for the first time described through polynomial models with predictive capacity.