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Efeito do ácido jasmônico sobre lipoxigenases de folhas de soja / Effects of jasmonic acid on lipoxygenases in soybean leaves

Colombo, Lucinete Regina 10 March 1999 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-04-04T18:02:04Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 142225 bytes, checksum: a6e4a1b6e77b83fe6ab18a313b460e8a (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-04T18:02:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 142225 bytes, checksum: a6e4a1b6e77b83fe6ab18a313b460e8a (MD5) Previous issue date: 1999-03-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Este trabalho foi realizado com a variedade comercial de soja IAC-12 e a linha quase-isogênica dela derivada (IAC-12 TN), com ausência de lipoxige- nase (LOX) em suas sementes, com dois objetivos básicos: verificar o efeito do ácido jasmônico sobre as LOX foliares e analisar se a eliminação genética das LOX das sementes não alterou o pool de LOX das folhas. Foram determinados parâmetros cinético-bioquímicos do pool de LOX dos dois genótipos, nos tem- pos de 12, 24 e 48 horas após o tratamento com ácido jasmônico. O pH ótimo foi semelhante entre os dois genótipos, em torno de 6,0. Observou-se também um segundo pico de atividade, em torno de pH 4,5. As análises de temperatura indicaram maior atividade em torno de 25 0 C para o valor de pH 6,0. O parâme- tro cinético K M aparente (K M app) foi menor no tempo de 24 horas em ambos os genótipos, tratados ou não com ácido jasmônico. O genótipo IAC-12 exibiu maior K M app quando tratado com ácido jasmônico, ao passo que IAC-12 TN apresentou menor K M app quando tratado do que o controle, entretanto, em ambos os casos, as diferenças não foram acentuadas. Os dados obtidos indicaram que a remoção genética das LOX de semente de soja não influencia o pool de LOX foliares nem a sua resposta ao ácido jasmônico. / This work was carried out using the commercial soybean variety IAC-12 and a near isogenic line (NIL) derived from it (IAC-12 TN) and lacking seed lipoxygenases (LOX). This work had two main objectives: investigate the effect of jasmonic acid on the activity of soybean leaves LOX and analyze if the genetic elimination of seeds LOX caused any imbalance in the leaves LOX pool. Kinetic-biochemical parameters were evaluated for both genotypes, at 12, 24 and 48 hours after the jasmonic acid treatment. The optimum pH was similar for both genotypes, approximately 6.0. A second activity peak, around pH 4.5, was observed. Temperature analysis indicated a major activity at 25 0 C, at pH 6.0. The apparent kinetic parameter K M (K M app), was lower at 24 hours for both genotypes, treated or not with jasmonic acid. The IAC-12 genotype exhibited higher K M app when treated with jasmonic acid, conversely, IAC-12 TN showed lower K M app, compared with the control, however, on both cases, the differences detected were very slight. The data obtained indicate that the genetic removal of soybean seeds LOX did not influence the leaves LOX pool and their response to jasmonic acid. / Dissertação importada do Alexandria
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Caracterização bromatológica e digestibilidade in vitro e in vivo de proteínas de farinhas de soja

Cardoso, Luciana Resende 31 March 2003 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-10-03T18:44:25Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 536763 bytes, checksum: 235d2306a5e02f6ed9b9b2dfcdbe7b9f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-03T18:44:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 536763 bytes, checksum: 235d2306a5e02f6ed9b9b2dfcdbe7b9f (MD5) Previous issue date: 2003-03-31 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A soja é uma leguminosa de alta qualidade protéica, porém o elevado conteúdo de fatores antinutricionais no grão, sobretudo os inibidores de proteases KTI e BBI, reduz seu valor nutricional. Contudo com o avanço das pesquisas, linhagens de soja têm sido desenvolvidas de maneira a apresentar atividade reduzida e/ ou completa ausência dos inibidores de proteases e lipoxigenase. No presente estudo quatro variedades de soja, com ausência e/ou presença de KTI e LOX sendo derivadas em farinhas integrais foram submetidas às análises da composição centesimal, determinação da atividade inibitória de tripsina e quimiotripisina quando in natura e quando processada à temperatura de 120 oC por 9, 12, 15, e 18 minutos e determinação da qualidade protéica através de ensaios in vivo e in vitro. Estas análises tiveram como objetivo avaliar se o melhoramento genético afeta a qualidade nutricional das farinhas de soja. Os resultados obtidos quanto à análise bromatológica para as quatro linhagens foram os seguintes: cinzas variaram de 5,86 a 5,95%, proteínas de 42,49% a 44,07%, lipídeos de 23,53% a 25,30% e carboidratos de 14,65% a 17,33%. Para os minerais, os teores obtidos em mg/100 g de amostra foram: Fe variou de 4,41mg a 5,21mg, Zn de 4,43mg a 4,88mg, Mn de 1,99mg a 2,29mg, Mg de 223,46mg a 235,01mg, Ca de 168,01mg a 211,29mg e K de 2146,63mg a 2280,61mg. Demonstrando que as linhagens de soja modificadas geneticamente possuem em sua constituição nutrientes equivalentes em proporção ao grão de soja convencional, sem, contudo, apresentar os efeitos negativos da presença do KTI e LOX. A atividade inibitória de tripsina, em mg/g de proteína, obtida para as linhagens in natura foram bastante elevadas variando de 900 a 1300. Contudo, as farinhas de soja isentas de KTI foram as que apresentaram menor atividade inibitória. Com o processamento térmico a 120oC a atividade inibitória de tripsina reduziu bruscamente sendo que o tempo de 9 minutos foi suficiente para a completa inativação dos inibidores nas variedades isentas de KTI. Porém para as linhagens com KTI, a completa inativação dos inibidores só foi conseguida com o tempo de 18 minutos de autoclave. Em relação à qualidade protéica verifica-se, através de ensaio biológico com ratos, valores de PER variando de 1,83 a 2,75, NPR de 3,036 a 4,08 e a digestibilidade verdadeira de 79,02 a 83,17 para farinhas de soja processadas, sendo que não foi verificada diferença estatística entre as farinhas com KTI processadas por 18 minutos daquelas processadas por 12 minutos. Isto sugere, que a farinha de soja isenta em KTI necessita de um tempo menor de exposição ao calor, o que é bastante favorável em termos de qualidade nutricional. Quanto a digestibilidade in vitro os valores encontrados variaram de 5,28 a 36,43%, não tendo boa correlação com a digestibilidade in vivo. / Soybean is a leguminosae of high proteic quality but the high contents of anti-nutritional factors in the grain, especially the inhibitors of proteases KTI and BBI, reduces its nutritional value. With the advance of researchs, soy lineages have been developed in a way to show reduced activity and / or complete absense of proteasis inhibitors and lipoxigenases. In this study, four different varieties of soy, with absense and or presence of KTI and LOX, being derived from whole flours were taken to analyse the centesimal composition, determination of the inhibitor activity of trypsin and chymotrypsin when in natura and when processed under the temperature of 120°C for 9, 12, 15, and 18 minutes and the proteic quality through tests in vivo and in vitro. These analisis had as their objective evaluate if the genetic improvement affects the nutritional quality of the soy flours. The obtained results for the bromatologic analisis for the four lineages were the following: gray varied from 5,86 to 5,95%, proteins from 42,49% a 44,07% lipids from 23,53 to 25,30% and carbohydrates from 14,65% a 17,33%. To the minerals, the obtained contents in mg/100g of sample were: Fe varied from 4,41mg to 5,21 mg, Zn from 4,43 mg to 4,88 mg, Mn from 1,99 mg to 2,29 mg, Mg from 223,46 mg to 235,01 mg, Ca from 168,01 mg to 211,29 mg and K from 2146,63 mg to 2280,61 mg. Showing that the geneticaly modified soy lineages have in their constitution nutrients equivalent in proportion to the conventional soy grains, without showing negative effects of the KTI and LOX presence. The trypsin inhibitor activity, in mg/g of protein, obtained for the in natura lineages were highly elevated, varying from 900 to 1300. However, the soy flours free from KTI were the ones that showed a minor inhibitor activity. With the thermal processing at 120°C, the trypsin inhibitor activity reduced roughly, the time of 9 minutes was enough for the complete inativation of the inhibitors in the varieties free from KTI. However, for the lineages with KTI, the complete inativation of the inhibitors was only taken with the time of 18 minutes of autoclave. In relation to the proteic quality, it is found through the biologic test with rats, values of PER virying from 1,83 to 2,75, NPR from 3,036 to 4,08 and a true digestibility of 79,02 to 83,17 to the processed soy flours, but it wasn’t verified the statistical difference among the flours with KTI processed for 18 minutes from the ones processed for 12 minutes. It suggests that the soy flour free from KTI needs a shorter time of exposition to heat, what is highly favourable in terms of nutritional quality. About the digestibility in vitro, the obtained values varied from 5,28 to 36,43%, not having a good co-relaction with the digestibility in vivo. / Não foi localizado o cpf do autor. O autor não apresentou título em inglês.
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Qualidade fisiológica de sementes de soja com presença ou ausência de lipoxigenases, em diferentes épocas de colheita / Physiological quality of soybean seeds with the presence or absence of lipoxigenases, at different harvesting times

Gondim, Tânia Cristina de Oliveira 10 August 2001 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-07-19T17:13:17Z No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 436561 bytes, checksum: a52a9a50121c0ac401bc746897e6d8b6 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-19T17:13:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 436561 bytes, checksum: a52a9a50121c0ac401bc746897e6d8b6 (MD5) Previous issue date: 2001-08-10 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Avaliou-se o efeito da eliminação genética das três lipoxigenases de sementes de soja sobre sua qualidade fisiológica e sanitária. Sementes das variedades CAC-1, Cristalina, Doko-RC e UFV-16 e de suas respectivas linhagens sem lipoxigenases nas sementes (triplo-nulas) foram multiplicadas em campo e a colheita efetuada no estádio R 8 de maturação e aos 15, 30 e 45 dias após este estádio. A qualidade fisiológica das sementes foi avaliada pelos testes de germinação, primeira contagem do teste de germinação, emergência em leito de areia, envelhecimento acelerado, porcentagem de emergência de plântulas em campo e índice de velocidade de emergência de plântulas em campo. Foram realizados também o teste de sanidade e a determinação do teor de aldeídos totais pelo método colorimétrico do MBTH. A quarta época de colheita (R 8 + 45 dias) evidenciou as maiores diferenças entre os materiais com ou sem lipoxigenases. As sementes das linhagens sem lipoxigenases derivadas das variedades Doko-RC e UFV-16, apresentaram maior susceptibilidade à deterioração no campo, provocada pelo atraso da colheita. Não houve efeito da retirada de lipoxigenases sobre a qualidade de sementes das linhagens triplo-nulas derivadas das variedades CAC-1 e Cristalina. As características de germinação e vigor correlacionaram -se, significativamente, com a incidência de fungos, sugerindo ser este o motivo dos baixos valores obtidos nesses testes para as linhagens triplo-nulas de Doko-RC e UFV-16. Não foi possível estabelecer relação direta entre retirada de lipoxigenase e qualidade de sementes, nas linhagens estudadas. / The effect of genetic elimination of the three lipoxygenases from the seeds of soybean on their physiological and sanitary quality was evaluated. Seeds of varieties CAC-1, Cristalina, Doko-RC and UFV-16 and of their respective lines without lipoxygenases in the seeds (triple-null) were multiplied in the field and were harvested at the R8 stage and 15, 30 and 45 days latter. The physiological quality of the seeds was evaluated by the germination test, first counting on the germination test, emergence in sand bed, accelerated aging, and percentage and rate of emergence in the field. Data on sanitary quality of the seed and total aldehyde content evaluated by the MBTH method were also obtained. The largest differences between the materials with or without lipoxygenases were evidenced on the fourth harvesting time (R8+45 days). The seeds of the lines lacking lipoxygenases, derived from Doko-RC and UFV-16, presented greater susceptibilidade to field decay with harvest delaying. The genetic elimination of lipoxigenases from the seeds did not affect the quality of seeds of the triple-null lines derived from CAC-1 and Cristalina. Germination and vigour were significantly correlated to fungi incidence, suggesting that this was one of the reasons for the lower values observed for the seeds of triple-null lines of Doko-RC and UFV-16. It was not possible to establish a direct relationship between lipoxigenases elimination and seed physiological and sanitary quality of the studied lines. / Dissertação importada do Alexandria
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Estabilidade oxidativa e de isoflavonas de grãos de soja com ausência de lipoxigenases e com reduzido teor de ácido linolênico durante o armazenamento / Isoflavone and oxidative stability of soybean grains lacking lipoxygenases and with low linolenic acid content during storage

José, Inês Chamel 29 July 2005 (has links)
Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-05-31T08:52:53Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 643436 bytes, checksum: 4369afd4619e85d492eb60af165ae604 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-05-31T08:52:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 643436 bytes, checksum: 4369afd4619e85d492eb60af165ae604 (MD5) Previous issue date: 2005-07-29 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Para avaliar a estabilidade oxidativa e de isoflavonas de grãos de soja com ausência das isoenzimas lipoxigenases (LOX) e com reduzido teor de ácido linolênico, os grãos foram armazenados a 25 e 35 °C, por oito meses. Os efeitos das LOX e do teor de ácido linolênico na estabilidade oxidativa de grãos foram avaliados utilizando-se quatro genótipos de soja contrastantes quanto à presença ou ausência de LOX (LOX + ou LOX - ) e quanto ao teor de ácido linolênico normal (LNN N ) ou reduzido (LNN R ). Devido à alta porcentagem de grãos quebrados, normalmente utilizados para fins industriais, a soja foi armazenada nas formas de grãos inteiros e quebrados. Como as LOX atuam tanto sobre o ácido linoléico quanto sobre o linolênico, as determinações do teor de hexanal e do índice do ácido 2-tiobarbitúrico (TBA) foram utilizadas como índices de oxidação, por quantificarem produtos obtidos por rotas metabólicas distintas. As avaliações foram realizadas no início do armazenamento e após dois, quatro, seis e oito meses. O período de armazenamento considerado não foi suficiente para que as alterações nos teores de ácidos graxos apresentassem tendência definida. Os grãos dos genótipos LOX - , inteiros e quebrados, independentemente dos diferentes teores de ácido linolênico e da temperatura a que foram submetidos, apresentaram praticamente os mesmos teores médios de hexanal produzido, ao longo do período de armazenamento. Entretanto, os grãos dos genótipos LOX + , inteiros e quebrados, já mostravam, no início do armazenamento, produção de hexanal no mínimo duas vezes maior que a dos genótipos LOX - , havendo, no decorrer do tempo, aumento significativo desses teores. As maiores quantidades de hexanal produzido durante o armazenamento foram observadas para o genótipo LOX + LNN R , nas formas de grãos inteiros e quebrados, ocorrendo maior produção a 35 °C. Esse genótipo apresentou maior teor de ácido linoléico que o genótipo LOX + LNN N , podendo a maior produção desse aldeído em genótipos LOX + LNN R ser justificada pelo fato de o hexanal ser formado a partir do 13-hidroperóxido derivado do ácido linoléico. Os valores de índice de TBA de grãos dos genótipos LOX - , inteiros e quebrados, como verificado para os teores de hexanal, mostraram-se bem mais baixos que aqueles obtidos para grãos dos genótipos LOX + , durante todo o período de armazenamento, em ambas as temperaturas. Reafirma-se, assim, o envolvimento das LOX na oxidação de ácidos graxos poliinsaturados. Entre os genótipos LOX - , os grãos tanto inteiros quanto quebrados de LOX - LNN R apresentaram menores índices de TBA que os de LOX - LNN N . Porém, nos genótipos LOX - foi observado aumento no índice de TBA durante o armazenamento, nas duas condições de temperatura, o que pode ser explicado pela produção de aldeídos por vias oxidativas não-enzimáticas. Entre os genótipos LOX + , grãos inteiros e quebrados de LOX + LNN R apresentaram menores índices de TBA que os de LOX + LNN N , mantendo-se esses valores constantes ao longo do tempo. Substâncias reativas com TBA são produzidas em maiores quantidades a partir de ácidos graxos contendo três ou mais insaturações, justificando, assim, o fato de genótipos com baixos teores de ácido linolênico terem apresentado índices de TBA mais baixos, tanto na presença quanto na ausência de LOX. Para avaliar a estabilidade das diferentes isoflavonas de soja, foram utilizados grãos intactos dos genótipos LOX - LNN R e LOX + LNN N , sendo os teores de isoflavonas determinados no início do armazenamento e após dois, quatro e oito meses. A composição de isoflavonas dos grãos, de ambos os genótipos de soja, não se manteve estável nas duas condições de armazenamento consideradas. No processo de interconversão de formas, parece ocorrerem eventos simultâneos envolvendo descarboxilação dos malonilglicosídeos para acetilglicosídeos, desesterificação de malonil e acetilglicosídeos para β-glicosídeos, bem como uma possível transformação desses para as formas agliconas. Além desses eventos, processos de síntese podem estar envolvidos, pois ligeiro incremento no teor de isoflavonas foi observado. O aumento de malonilglicitina, ou das formas agliconas, talvez possa ser resultado de síntese, porém o envolvimento das isoenzimas β-glicosidases no aumento das isoflavonas agliconas também deve ser considerado. / To evaluate the isoflavone and oxidative stability in soybean lacking lipoxygenase (LOX) isoenzymes and low linolenic acid content, grains were stored at 25 and 35 °C, for eight months. The effects of LOX and linolenic acid content on oxidative stability were evaluated in four contrasting soybean genotypes for the presence or absence of LOX (LOX + or LOX - ) and for normal (LNN N ) or reduced (LNN R ) linolenic acid content. Due to the high percentage of broken grains, usually destined for processing industries, whole and broken grains were stored. Given that LOX affects linolenic as well as linoleic acids, the determinations of the hexanal content and the 2-thiobarbituric acid (TBA) value were used as oxidation indexes, since they quantify products obtained by different metabolic pathways. The assays were carried out at the beginning of the storage and after two, four, six and eight months. The storage period was not enough for the alterations in the fatty acid content to present a defined tendency. Whole and broken LOX - grains, independent of the different linolenic acid content and the storage temperature, had almost the same mean hexanal content along the storage period. However, whole and broken LOX + grains already shown, at the beginning of storage, at least twofold larger hexanal production than LOX - genotypes, occurring significant increase in hexanal content with time. The largest amounts of produced hexanal during the storage were found for whole and broken LOX + LNN R grains, occurring larger production at 35 °C. This genotype showed higher linoleic acid content than LOX + LNN N genotype. This is explained by the fact that hexanal is formed from 13- hydroperoxide derived from linoleic acid. During the whole storage period, TBA values for the whole and broken LOX - grains, as found for hexanal content, showed much lower values than those obtained for LOX + grains, in both temperatures. It is therefore confirmed the involvement of LOX in the oxidation of polyunsaturated fatty acids. Among the LOX - genotypes, both whole and broken LOX - LNN R grains had lower TBA values than LOX - LNN N . However, there was an increase in the TBA value during storage for LOX - genotypes, in both temperatures, which can be explained by the production of aldehydes via non-enzymatic oxidative pathways. Among LOX + genotypes, whole and broken LOX + LNN R grains had lower TBA values than LOX + LNN N , with constant TBA values along the time. TBA-reacting substances are produced in larger amounts only from fatty acids containing three or more unsaturations, which justify the fact that genotypes with low linolenic acid content showed lower TBA values in the presence and in the absence of LOX. Intact grains of genotypes LOX - LNN R and LOX + LNN N were used to evaluate the stability of the different soybean isoflavones. Isoflavone content was determined at the beginning of storage and after two, four and eight months. Composition of the grain isoflavones from both soybean genotypes was not stable under the two storage conditions. In the process of form interconversion, it seems that occur simultaneous events involving malonyl glycoside decarboxylation to acetyl glycosides, malonyl and acetylglycosides deesterification to β-glycosides, as well as their possible transformation to aglycones. Besides these events, synthesis processes may be involved, as a slight increase in isoflavone content was observed. The increase in malonyl glycitin or aglycones maybe the result of synthesis, however the involvement of β-glycosidase isoenzymes in the increase of aglycone isoflavones should also be considered. / Tese antiga, sem Termo de Autorização
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Caracterização da “via das lipoxigenases” em plantas de soja submetidas ao ataque de insetos-praga / Caracterization of lipoxygenases pathway of soybean plants submitted to insect attack

Silva, Francine Barbosa 05 March 1999 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-09-15T16:50:45Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 352086 bytes, checksum: 780138ccdd58a5ce9ed73d763e9618b5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-15T16:50:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 352086 bytes, checksum: 780138ccdd58a5ce9ed73d763e9618b5 (MD5) Previous issue date: 1999-03-05 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Lipoxigenases (EC: 1.13.11.12) são enzimas que catalisam a dioxigenação estereoespecífica de ácidos graxos polinsaturados que contêm o sistema cis,cis-1,4-pentadieno, formando hidroperóxidos que são posterior- mente metabolizados e produzem substâncias com atividades fisiológicas pronunciadas. As LOXs são responsáveis pela formação de compostos orgânicos responsáveis pelo “beany flavor” das sementes de soja, que reduz drasticamente a utilização desta oleaginosa na alimentação humana. Uma estratégia na eliminação deste sabor indesejável é a retirada, através de manipulação genética, das LOXs de semente. Além disso, é descrito o envolvimento dessas isoenzimas no crescimento e desenvolvimento, na senescência e na biossíntese de moléculas regulatórias. Este trabalho avaliou a capacidade da planta em responder ao ataque de insetos-praga (um mastigador e outro sugador) pela “via das lipoxigenases”, tendo sido realizadas análises bioquímicas e cinéticas do “pool” de lipoxigenases foliares e dos possíveis produtos finais da via. Foram utilizados dois genótipos de soja: um normal (variedade IAC-100) e outro com ausência completa de lipoxigenases nas sementes (linhagem IAC-100 TN). As plantas foram submetidas a uma população de insetos-praga (lagarta da soja ou mosca-branca) em gaiolas de filó. Para lagarta da soja, o primeiro trifolíolo da planta, no estádio V3 de desenvolvimento, foi coletado 6, 12 e 24 horas após o ataque da planta pelo inseto. A seguir o inseto foi retirado e o primeiro trifolíolo coletado após 6, 12, 24 e 48 horas. No caso da mosca-branca, o primeiro trifolíolo da planta, no estádio V3 de desenvolvimento, foi coletado 12, 24, 48 e 72 horas após o ataque da planta pelo inseto. Em seguida o inseto foi retirado e o primeiro trifolíolo coletado após 6, 12, 24 e 48 horas. Os resultados das análises bioquímico-cinéticas revelaram dois picos mais acentuados de atividade e atividade específica de lipoxigenases a pH 4,5 e 6,0 nos dois tratamentos, com temperatura ótima de atividade e atividade específica a 25 oC. Para ambos os genótipos, as atividades foram maiores nos tratamentos do que nos respectivos controles. Para a lagarta da soja, os valores de KM aparente, determinados no “pool” de lipoxigenases foliares de plantas de soja dos dois genótipos analisados, diminuíram a partir de 6 até 24 horas, em presença do inseto, e de 6 até 48 horas, após remoção do inseto. Para a mosca-branca, os valores de KM aparente no “pool” de lipoxigenases foliares de plantas de soja dos dois genótipos analisados decresceram com o tempo de ataque, ou seja, de 12 até 72 horas, em presença do inseto; após a remoção do inseto, estes valores voltaram a aumentar. A variação no valor de KM aparente para ambos os genótipos sugere uma alteração do “pool” de lipoxigenases em resposta ao ataque de insetos. Tanto no experimento com lagarta da soja (Anticarsia gemmatalis Hübner) quanto naquele com mosca-branca (Bemisia argentifolii), observou-se aumento significativo na produção de inibidores de proteases após a remoção dos insetos, para ambos os genótipos analisados. Esses resultados, aliados aos dados obtidos para as constantes cinéticas, reforçam a hipótese de que as isoenzimas lipoxigenases são enzimas-chave no sistema de defesa de plantas de soja contra herbívoros e que o acúmulo de inibidores de proteases é, provavelmente, um mecanismo de defesa da planta. As análises dos níveis de hexanal e aldeídos totais nos dois experimentos revelaram aumento significativo nos níveis de aldeídos totais após a remoção dos insetos, para os dois genótipos, no tratamento com lagarta; e aumento mais significativo para mosca-branca antes da remoção, para a linhagem IAC- 100 TN. Uma produção significativa de hexanal só ocorreu para a variedade IAC-100, no tratamento com mosca-branca. Esses resultados sugerem que o mecanismo de defesa de plantas de soja submetidas ao ataque de insetos- praga, pela via das lipoxigenases, também pode seguir o caminho de produção de aldeídos. / Soybeans are the major oil and protein crop producer. Their grains have a high protein products, but they are less acceptable by the human consumer because of the “beany flavor” whick are caused by small compounds organic produced by lipoxygenase(EC: 1.13.11.12) acting upon polinsatured fatty acid. One strategy for eliminating the “beany flavor” is the removal of lipoxygenase isoenzymes (LOXs) from the seeds by genetic manipulation. However LOXs to be associated with the growth, development, senescence, temporary nitrogen storage, biosynthesis of regulatory molecules and protection against attack by insects and pathogens. This work evaluated the capacity of the plant to respond to the attack of the whitefly (sucking insect) and of the soybean caterpillar (Anticarsia gemmatalis Hübner) via the lipoxygenases pathway. The kinetic characterization of the “pool” of lipoxygenases and the final products of the pathway were determined. Two genotypes of soybean were used: one normal (cultivar IAC-100) and the other devoid of LOXs in the seeds (cultivar IAC-100 TN). The plants were placed in contact with the insects and the first trifoliate leaf was collected for the analysis. The results of the biochemical and kinetic studies showed two pronounced peaks of lipoxygenase activity at pH 4.5 and pH 6.0 with temperature optimum at 25 oC. The KMapp values decreased until 24 hours after removing the whitefly from the soybean and decreased until 48 hours after removing the soybean caterpillar, suggesting a change in the “pool” of LOX in response to the attack of the insects. Significant increase in the aldehydes after removing insects was observed. There was a noticeable increase in protease inhibitors for cultivar IAC-100 and IAC-100 TN after removing insects. This suggest that the production of protease inhibitors and aldehydes are involved in the defense mechanism of soybean plant against whitefly and soybean caterpillar injury. Genetic removal of LOX from the seeds has not changed the expression of LOX in the leaves which act on the defense mechanism of the soybean plant. / Não foi encontrado o cpf do autor.
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Efeito do ácido jasmônico na síntese de lipoxigenase e de inibidores de proteases em sementes de explantes de soja / Effect of jasmonic acid in the synthesis of lipoxygenases and inhibitors of proteases in soybean seeds explants

Carli, Alessandra de Paula 20 October 1999 (has links)
Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-09-15T17:31:34Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 741877 bytes, checksum: 36895b207473017c916cda2d5d6d284d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-15T17:31:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 741877 bytes, checksum: 36895b207473017c916cda2d5d6d284d (MD5) Previous issue date: 1999-10-20 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Este trabalho consistiu em utilizar o sistema de cultivo de explantes de soja para estudar o efeito do ácido jasmônico, no sistema “in vitro”, em sementes de linhagens normais e com ausência de lipoxigenases, derivados das variedades CAC-1, Itamarati e Cristalina na síntese de lipoxigenases (LOX) e do inibidor de protease Kunitz (KTI). Ácido jasmônico foi adicionado aos meios de cultivo em que os explantes foram cultivados. As avaliações basearam-se nos efeitos do ácido jasmônico sobre o conteúdo do inibidor de tripsina Kunitz (KTI) e da atividade específica de LOX1 e LOX 2 e 3. Os explantes foram cultivados em meios de cultura líquidos, sob condições semi- assépticas, os quais continham nutrientes minerais, glutamina e sacarose. O pH da solução nutritiva foi mantido em torno de 5,0. Cada explante constou de uma vagem completamente expandida, com duas sementes de, aproximadamente, 100 mg, conectada a um segmento de caule de 45 mm de comprimento. Os explantes foram excisados a partir do quinto nó, da base para o ápice. Os tratamentos testados foram: A = 0, B = 200 e C = 400 μM de ácido jasmônico. O experimento foi conduzido sob irradiância de 80 umol de fótons m-2s-1 a 25oC, por 8 dias. O delineamento experimental adotado foi o inteiramente casualizado, com quatro repetições. Os resultados obtidos evidenciaram que nos tratamentos que receberam ácido jasmônico notou-se um aumento significativo da atividade específica de LOX e no conteúdo de KTI em sementes de variedades normais. No entanto, em explantes de linhagens triplo-nulas (desprovidas de LOX), o ácido jasmônico não aumentou o conteúdo de KTI. Estes resultados sugerem, fortemente, que a síntese de inibidores de proteases em sementes de soja é induzida por ácido jasmônico via indução da síntese de lipoxigenases e que, em sementes triplo nulas esse efeito não é observado devido à ausência completa de lipoxigenases. / This work consited in utilizing a soybean explant culture system to study the effect of jasmonic acid, in vitro system, in normal lineages and in absence of lipoxygenases, derived from varieties, CAC-1 Itamarati and Cristlina in the lipoxygenases synthesis and of proteases inhibitors. The explants were cultured in liquid medium, under semi-asseptic conditions containing mineral nutrients, glutamine and sucrose. The pH of the nutritive solution was maintained about 5.0. Each explant includs a completly expanded bean, with two seeds of approximately 100 mg each one, connected to a stem segment of 45 mm length. The explants were excized off from the fifth node to the base to apex. The evaluations were based on the effects of Jasmonic Acid, added to the culture medium on the level of tripsine inhibitor and in the specific activity of Lipoxygenase 1,2 and 3. Tested treatments were 0, 200 and 400 μM of jasmonic acid. The experiment was conducted under irradiance of 80 mmol of fotons m-2s-1 at 250C, during 8 days. The entirely randomized experimental design was used with four repetitions. The results that were obtained showed that jasmonic acid caused a significative increase of the specific activity of lipoxygenases and in the level of proteases inhibitors in seeds of normal genotypes. However, in explants of triple-null lineages (without lipoxygenases), the jamonic acid did not provocate increase in the level of proteases inhibitors. These results suggest that the synthesis of protase inhibitors in soybean seeds is inducted by jasmonic acid through the synthesis induction of lipoxygenases. / Não foi localizado o cpf do autor.
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Mucosite oral induzida por 5-fluorouracil em hamsters persiste após o bloqueio farmacológico da via dos leucotrienos / Oral mucosite induced by 5-fluorouracilil in hamsters persists after pharmacological lock of the leukotrienes via

Silva, Viviane Carvalho 28 July 2017 (has links)
FREITAS, M. R. Mucosite oral induzida por 5-fluorouracil em hamsters persiste após o bloqueio farmacológico da via dos leucotrienos. 2017. 116 f. Tese (Doutorado em Ciências Médico-Cirúrgicas) - Faculdade de Medicina, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Luciene Oliveira (luciene@ufc.br) on 2017-08-22T14:00:20Z No. of bitstreams: 1 2017_tese_vcs.pdf: 6067321 bytes, checksum: 7dd2869c70a8517aaae8b4dc434bbd98 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Fernandes (erikaleitefernandes@gmail.com) on 2017-08-22T15:20:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_tese_vcs.pdf: 6067321 bytes, checksum: 7dd2869c70a8517aaae8b4dc434bbd98 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-22T15:20:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_tese_vcs.pdf: 6067321 bytes, checksum: 7dd2869c70a8517aaae8b4dc434bbd98 (MD5) Previous issue date: 2017-07-28 / Oral mucositis (OM) is an important adverse effect in patients undergoing cancer treatment. Its pathophysiology is still not fully understood and causes discomfort and treatment interruptions, contributing to a worse prognosis. The relationship of the cyclooxygenase-2 (COX-2) pathway with the MO to chemotherapeutic agents is known, but the role of leukotrienes (another arachidonic acid metabolite and one of the actors in inflammatory processes of the gastrointestinal mucosa) is not determined. An experimental study of 5-fluorouracil induced OM in hamsters was conducted to investigate the participation of cysteinyl leukotrienes (cys-LT) in their pathophysiology. The study had two parts: 1st experiment: four control groups 1) 5-FU: animals submitted to oral mucositis; 2) SAL: animals not submitted to oral mucositis or normal control; 4) CLX (standard treatment group): animals with OM who received celecoxib (7.5 mg/kg/day, intraperitoneal) 1 hour before the administration of 5-fluorouracil, and daily until the tenth day) and three treatment groups: animals with OM and montelukast (MTK) cys-LT blockade (10 or 20 or 40 mg/kg/day/10 days; orally by gavage). The controls groups used were the same as those of the 1st experiment, except for the CLX group and the treatment group had blocked the leukotriene synthesis cascade by MK886 (inhibitor of 5-lipoxygenase synthesis) (3mg/kg/day; intraperitoneal) for 4 days, given 1 hour before 5-fluorouracil administrations and daily until the 4th experimental day. In both experiments the animals were euthanized on the 10th day and macroscopic analysis of the jugal mucosa was performed, as well as histopathological evaluation for hematoxylin-eosin, immunohistochemical evaluation for iNOS2, COX-2, IL1-β, TNF-α and IL10 for all experimental groups and dosage of myeloperoxidase for the animals of the 2nd experiment. Montelukast presented partial protection at a dose of 40mg/kg/day in the macroscopic evaluation, but in the other doses administered there was no protection. MK886 did not macroscopically protect the progression of OM by 5-fluorouracil. Myeloperoxidase activity was not reduced by the use of MK886 for four days. Montelukast or MK886 were unable to protect the animals from OM in the histopathological evaluation by hematoxylin-eosin, and unable to reduce the expression of iNOS2, COX-2 and IL1-β. But montelukast and MK886 decreased TNF-α expression at all doses used. Montelukast promotes a decrease in IL-10 expression at a dose of 40mg/kg/day. COX-2 blockade reduced the expression of iNOS2, COX-2, IL-1β and TNF-α, but was unable to induce decreased expression of IL10. Differing from the COX-2 pathway, the leukotriene pathway is not relevant in the pathophysiology of the 5-fluorouracil induced oral mucositis model. However, its effect on TNF-α suggests a modulating action specifically on this cytokine. / A mucosite oral (MO) é um importante efeito adverso em pacientes submetidos ao tratamento do câncer. Sua fisiopatologia ainda não está totalmente esclarecida e causa desconforto e interrupções do tratamento contribuindo para um pior prognóstico. A relação da via da cicloxigenase-2 (COX-2) com a MO por quimioterápicos é conhecida, mas o papel dos leucotrienos (outro metabólito do ácido araquidônico e um dos atores nos processos inflamatórios da mucosa gastrointestinal) não está determinado. Foi realizado estudo experimental de MO induzida por 5-fluorouracil (5-FU), em hamsters, para investigar a participação, dos cisteinil leucotrienos (cys-LT) na sua fisiopatologia. O estudo teve duas partes: 1° experimento: quatro grupos controles 1) 5-FU: animais submetidos à mucosite oral; 2) SAL: animais não submetidos à mucosite oral ou controle normal; 3) TM: animais submetidos apenas trauma mecânico (escoriações nas mucosas jugais) e 4) CLX (grupo tratamento padrão): animais com MO que receberam celecoxibe (7,5 mg/kg/dia; intra peritoneal) 1 hora antes das administrações de 5-FU e, diariamente até o décimo dia do experimento) e três grupos tratamento: animais submetidos a MO e bloqueio dos cys-LT por montelucaste (MTK) (10 ou 20 ou 40 mg/Kg/dia/10 dias; via oral por gavagem). 2o experimento: os grupos controles utilizados foram os mesmos do 1° experimento, com exceção do grupo CLX e grupo tratamento com bloqueio da cascata de síntese de leucotrienos por MK886 (inibidor da síntese da 5-lipoxigenase) (3mg/kg/dia; intraperitoneal) por 4 dias, administrado 1 hora antes das administrações de 5-fluorouracil e, diariamente, até o 4° dia experimental. Em ambos experimentos os animais foram eutanasiados no 10° dia e realizadas análises macroscópicas das mucosas jugais, além de avaliação histopatológica para hematoxilina-eosina, avaliação imunoistoquímica para iNOS2, COX-2, IL1-β, TNF-α e IL10 para todos os grupos experimentais e dosagem de mieloperoxidade para os animais do 2° experimento. Montelucaste apresentou uma proteção parcial na dose de 40mg/kg/dia na avaliação macroscópica, mas nas demais doses administradas não houve proteção. O MK886 não protegeu macroscopicamente a evolução da MO por 5-fluorouracil. A atividade da mieloperoxidase não foi reduzida pelo uso de MK886 por quatro dias. Montelucaste ou MK886 foram incapazes de proteger os animais da MO na avaliação histopatológica por hematoxilina-eosina, e incapaz de reduzir a expressão de iNOS2, COX-2 e IL1-β. Mas montelucaste e MK886 diminuíram a expressão de TNF-α em todas as doses utilizadas. Montelucaste promoveu a diminuição da expressão de IL10 na dose 40mg/kg/dia. O bloqueio da COX-2 reduziu a expressão de iNOS2, COX-2, IL1-β e TNF-α, mas foi incapaz de promover diminuição da expressão de IL10. Diferindo da via da COX-2, a via dos leucotrienos não é relevante na fisiopatologia no modelo de mucosite oral induzida por 5-flourouracil. Entretanto, o seu efeito sobre o TNF-α sugere uma ação moduladora especificamente sobre esta citocina.
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Atividades biológicas de terpenos de óleos de copaíba (Copaifera spp. – Fabaceae)

Vargas, Fabiano de Sousa 30 August 2013 (has links)
Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-07-21T20:23:22Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Fabiano de Sousa Vargas.pdf: 3768449 bytes, checksum: fcc3a57e9e6cbb1e79933d1feba3250c (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-23T18:52:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Fabiano de Sousa Vargas.pdf: 3768449 bytes, checksum: fcc3a57e9e6cbb1e79933d1feba3250c (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-23T18:56:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Fabiano de Sousa Vargas.pdf: 3768449 bytes, checksum: fcc3a57e9e6cbb1e79933d1feba3250c (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-23T18:56:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Fabiano de Sousa Vargas.pdf: 3768449 bytes, checksum: fcc3a57e9e6cbb1e79933d1feba3250c (MD5) Previous issue date: 2013-08-30 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Copaíba ( Copaifera L. ) is one of the best known and Amazonian plants used by traditional populations in natural medicine . The oleoresin of copaiba is a source of terpene compounds. The previous fractionation of terpene acids contained copaiba oil for the isolation of metabolites of interest is a useful method in dispatch processes phytochemicals later. The use of ion exchange chromatography is an alternative that minimizes the inconvenience of the formation of emulsions difficult separation. This paper proposes the use of methodology by ion exchange chromatography silica treated with aqueous KOH in order to re-isolate constituent terpenoids acids present in oleoresin gender Copaifera L quantity that allows making various biological assays. Aspects of the anti-inflammatory activity and antitumor activity via biological assays, enzymatic assays being developed tests (inhibition of tyrosinase and lipoxygenase) of cytokine and cytotoxicity in model cell culture in order to get a new bioactive compound that can be used in the preparation of a phytochemical or phyto, such as bleaching or skin protectors. Were obtained and identified by spectroscopic and spectrometric methods six (06) diterpene acids: copalic, 3-hydroxy-copalic, 3-acetoxy-copalic, hardwíckiico, colávico-15-methyl ester and kaurenoic. The acid 3-hydroxy-copalic was capable of inhibiting tyrosinase enzyme with IC50=255.53 ±18.59 μM . The colávico-15-methyl ester showed a higher capacity to inhibit lipoxygenase enzyme (IC50=157.82 ±17.69 μM ) . The cytotoxic activity of the substances was evaluated in healthy cells by strains of human lymphocytes , fibroblasts and 3T3L1 murine J774 macrophages , which poisonous substances only at concentrations above 250 μM . Was also made of the APPRAISAL hemolytic potential of the compounds , and found that none had significant hemolytic activity at concentrations up to 50 mM . For lines AGP - 1 ( gastric cancer ) , HCT -116 (colon cancer) , MCF - 7 ( breast cancer) , NIHOVCAR ( ovarian cancer ) , SKAMELL - 4 ( melanoma ) and SF -295 ( human glioblastoma ) , tested at a single concentration of 20 μM , showed no significant changes in cell viability . The antiinflammatory activity of the compounds was evaluated as inhibition of NO production in murine J774 macrophage lineage stimulated with LPS where the copalic acid ( 98.48 ± 1.30 % ) and hardwickiico acid ( 92.73 ± 4.97% ) had activity equivalent to that of standard indomethacin ( 96.58 ± 1.7 % ) at concentration of 100 μM . Was investigated first the effect of compounds isolated diterpene acids on the production of TNF - α , IL -6 and IL-10. The compounds did not inhibit the production of TNF - α . The acid 3-acetoxy-copalic, kaurenoic , colávico-15-methyl ester and copalic inhibited the production of IL -6 23.84 ± 8.17 %, 11.21 ± 5.74 %, 17.34 ± 4 18 ± 1.86 % and 4.19 %, respectively, at a single concentration of 50 μM . The kaurenoic acid , 3- acetoxy - copalic copalic and induced the production of IL-10 at concentrations of 12.5 μM and 25 μM , but there was a decrease in this induction when tested at a concentration of 50 μM . The kolávic-15-methyl ester and hardwickiic acid no changes of IL -10. Thus, these diterpenes may be considered components responsible for contributing to combat inflammation, however it is necessary to develop a pharmaceutical probably topical, to conduct clinical trials aimed to demonstrate its application in the treatment of injuries acute and chronic skin. / A copaíba (Copaifera L.) é uma das plantas amazônicas mais conhecidas e utilizadas por populações tradicionais como medicamento natural. O óleo-resina de copaíba é fonte de compostos terpênicos. O fracionamento prévio dos ácidos terpênicos contidos óleo de copaíba para o isolamento de metabólitos de interesse é um método útil na celeridade dos processos fitoquímicos posteriores. A utilização da cromatografia de troca iônica é uma alternativa que minimiza o inconveniente da formação de emulsões de difícil separação. O presente trabalho propõe o uso de metodologia de cromatografia por troca iônica por sílica tratada com solução aquosa de KOH com o objetivo de re-isolar constituintes ácidos terpenoides presentes em óleo-resinas do gênero Copaifera L em quantidade que permita a realização de diversos ensaios biológicos. Foram abordados aspectos da atividade anti-inflamatória e antitumoral, por meio de ensaios biológicos, sendo desenvolvidos ensaios enzimáticos (testes de inibição da tirosinase e lipoxigenase), de dosagem de citocinas e de modelo de citotoxicidade em cultura de células, a fim de obter-se um novo composto bioativo que poderá ser utilizado na elaboração de um fitofármaco ou fitocosmético, tais como clareadores ou protetores de pele. Foram obtidos e identificados por métodos de espectroscopia e espectrometria, seis (06) ácidos diterpênicos: os ácidos copálico, 3-hidróxi-copálico, 3-acetóxi-copálico, hardwíckiico, colávico-15-metil éster e o caurenóico. Apenas o ácido 3-OH-copálico apresentou capacidade de inibição da enzima tirosinase com CI50 de 255,53 ±18,59 μM. O colávico-15-metil éster apresentou maior capacidade de inibição da enzima lipoxigenase (CI50 = 157,82 ±17,69 μM). As atividades citotoxicas das substâncias foram avaliadas em células saudáveis por linhagens de linfócitos humanos, fibroblastos murinos 3T3L1 e macrófagos J774, sendo as substancias tóxicas apenas em concentrações acima de 250 μM. Foi feita também a avalição do potencial hemolítico dos compostos, sendo verificado que nenhum apresentou atividade hemolítica significativa em concentrações de até 50 mM. Para as linhagens AGP-1 (câncer gástrico), HCT-116 (cólon retal), MCF-7 (câncer de mama), NIHOVCAR (câncer de ovário), SKAMELL-4 (melanona) e SF-295 (glioblastoma humano), testadas em concentração única de 20 μM, não apresentaram alterações significativas da viabilidade celular. A atividade antiinflamatoria dos compostos foi avaliada quanto à inibição da produção de NO na linhagem de macrófagos murinos J774 estimulados com LPS, onde o ácido copálico (98,48±1,30%) e o ácido hardwickiico (92,73±4,97%) tiveram atividade equivalente ao do padrão indometacina (96,58±1,7%), todos na concentração de 100 μM. Foi investigada pela primeira vez a influência de compostos ácidos diterpênicos isolados sobre a produção de citocina TNF-α, IL-6 e IL-10. Os compostos não inibiram a produção de TNF-α. Os ácidos 3-acetóxi-copálico, caurenóico, colávico-15-metil éster e o copálico inibiram a produção de IL-6 em 23,84±8,17%; 11,21±5,74%; 17,34±4,18% e 4,19±1,86%, respectivamente, na concentração única de 50 μM. Os ácidos caurenóico, 3-acetóxi-copálico e copálico induziram a produção de IL-10 em concentrações entre 12,5 μM e 25 μM, porém houve uma diminuição nessa indução quando testados na concentração de 50 μM. Para os ácidos colávico-15-metil éster e o hardwickiico não houve alterações da produção de IL-10. Com isso, esses diterpenos podem ser considerados componentes responsáveis por contribuir no combate ao processo inflamatório, no entanto faz-se necessário o desenvolvimento de uma formulação farmacêutica, provavelmente de uso tópico, para realização de ensaios clínicos visando comprovar a sua aplicação no tratamento de lesões de pele agudas e crônicas.
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Estudo da interação entre lipoxigenase da soja e ácido ascórbico nas propriedades reológicas e sensoriais de pães / Study of the interaction between soy lipoxygenase and ascorbic acid in the rheological and sensory properties of bread

Junqueira Junior, Roberto de Moraes 15 May 2007 (has links)
A enzima lipoxigenase através da farinha integral de soja é amplamente utilizada na panificação com objetivos de branqueamento e melhora da reologia. Com base nesse pressuposto, o objetivo inicial deste estudo foi de observar a ação oxidante dessa enzima na presença de dois outros oxidantes (ácido ascórbico e peróxido de benzoíla) nas propriedades reológicas e sensoriais de pães. Sete misturas com diferentes combinações dos três compostos foram elaboradas utilizando-se um delineamento experimental do tipo \"centroide-simplex\", sendo aplicadas à farinha de trigo para o preparo de pães. A enzima apresentou sinergia com o ácido ascórbico na elasticidade da massa, sugerindo uma inter-relação bioquímica entre os dois compostos no fortalecimento da matriz protéica do glúten. A mesma sinergia entre a lipoxigenase da soja e o acido ascórbico foi observada na redução da tonalidade amarela dos pães medida instrumentalmente. A partir desses resultados, buscou-se avaliar a ação da enzima frente a variações tanto na força da farinha como no tempo de fermentação, reproduzindo as condições reais de processamento. Desta vez, um planejamento experimental do tipo Box-Behnken com três fatores (atividade da enzima, força da farinha e tempo de fermentação) em três níveis de variação, foi aplicado no preparo das amostras. Os resultados mostraram que a lipoxigenase da soja (fração 1) é uma enzima oxidante de ação rápida e seu efeito no branqueamento dos carotenóides da farinha de trigo exibiu interação positiva tanto com a força da farinha como o tempo de fermentação. Respostas reológicas e sensoriais decorrentes da ação conjunta de diferentes oxidantes e condições de processamento em pães foram pela primeira vez descritas através de modelos polinomiais com capacidade preditiva. / Soy lipoxygenase enzyme through soy flour is widely used in breadmaking for bleaching and rheological improvement. Based on this fact, the initial objective of this study was to observe the enzymes\' action in the presence of two other oxidants (ascorbic acid and benzoyl peroxide) in the rheological and sensory properties of breads. Seven mixtures with different combinations of the three compounds were prepared using a \"centroid-simplex\" design and applied to wheat flour for breadmaking. The enzyme showed synergism with ascorbic acid in the dough elasticity suggesting a biochemical interrelation between the two compounds in strengthening the gluten protein matrix. The same synergy between soy lipoxygenase and ascorbic acid was observed with the yellow hue reduction of breads measured instrumentally. From these results, the enzyme action was evaluated with wheat strength and proofing time variations reproducing real processing conditions. This time, a Box-Behnken experimental design with three factors (enzyme activity, wheat strength and proofing time), and three variation levels were applied in the sample preparation. The results showed that soy lipoxygenase (type 1) is a fast-acting oxidizing enzyme and its bleaching effect on wheat flour carotenoid exhibited a positive interaction with wheat strength and proofing time. Rheological and sensory results attributed to the combined action of the different oxidants and breadmaking conditions were for the first time described through polynomial models with predictive capacity.
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Estudo de lipoxigenases em extrato hidrossolúvel de soja (Glycine max (L.) Merr.) submetido a diferentes tratamentos /

Barros, Érica Amanda de, 1987. January 2012 (has links)
Orientador: Fernando Broetto / Banca: José Pedro Serra Valente / Banca: Marcelo Alvares de Oliveira / Resumo: O extrato hidrossolúvel de soja-EHS ("leite de soja") é considerado uma bebida importante devido as suas características funcionais. No entanto, a bebida sofre restrições sensoriais pela população ocidental, devido ao sabor adstringente resultante da ação da enzima lipoxigenase (LOX) ativada no processo de extração. O objetivo dessa pesquisa foi estudar o efeito de tratamentos físicos e antioxidantes sobre a atividade da LOX em EHS de diferentes cultivares de soja. Para este estudo utilizou-se tratamentos físicos (Irradiação e Térmico) e antioxidantes (Tocoferol e TBHQ) visando à inativação da LOX (fase 1). A partir da seleção dos melhores tratamentos desta fase, foram conduzidos novos ensaios associando-se tratamentos físicos ao tratamento antioxidante (fase 2). Para acompanhar os resultados da atividade enzimática nos grãos de soja e no EHS (controle), foram realizadas as concentrações centesimais de umidade, proteína, lipídios, cinzas, fibra-bruta, carboidratos, minerais e valor energético. Nos EHS produzidos na fase 1 analisou-se o teor de proteína e atividade específica de LOX. Nos grãos irradiados e no EHS produzido na fase 2 determinou-se a composição química centesimal e a atividade específica de LOX. A irradiação induziu a redução do teor de proteína em grãos de soja, porém os teores protéicos avaliados nos EHS produzidos a partir desses não sofreram alteração, comparados ao controle. Os tratamentos da fase 1 que se destacaram com a redução da atividade específica de LOX em EHS foram o térmico (80 °C), irradiação (5 kGy) e tocoferol (adicionado na quantidade máxima). Na fase 2 o tratamento térmico (80 °C) suplementado com tocoferol inibiu 100 % a atividade específica de LOX em EHS. Concluiu-se que os tratamentos físicos + tocoferol não alteraram os nutrientes do EHS, e que o tratamento térmico + tocoferol foi o único que inibiu totalmente a atividade específica de LOX / Abstract: The soluble extract of soybean ("soymilk") is considered an important beverage because of its functional characteristics. However, the beverage suffers sensory restrictions by the western population, due to the astringent flavor resulting from the action of the enzyme lipoxygenase (LOX) activated the extraction process. The aim of this search was to study the effect of physical and antioxidant treatments on the activity of the LOX in soymilk of different soybean cultivars. For this study we used physical treatments (irradiation and thermal) and antioxidants (Tocopherol and TBHQ) aimed at inactivation of the LOX (phase 1). From the selection of the best treatments of this phase, new tests were conducted associating physical treatments to antioxidant treatments (phase 2). To follow the results of enzymatic activity in soybeans and soymilk (control), centesimals chemical concentrations were performed of moisture, protein, fat, ash, crude fiber, carbohydrates, minerals and energy value. In soymilks produced in phase 1 analyzed the protein content and specific activity of the LOX. In irradiated grains and soymilk produced in phase 2 it was determined the centesimal chemical composition and specific activity of the LOX. The irradiation induced a reduction in protein content in soybeans, but the protein levels measured in soymilks produced from soybeans irradiated did not change compared to control. The treatments of phase 1 that stood out to reduce the specific activity of the LOX in soymilk were thermal (80 °C), 4 irradiation (5 kGy) and tocopherol (added in the maximum). In phase 2 the thermal treatment (80 °C) supplemented with tocopherol inhibited 100% specific activity of the LOX in soymilk. It was concluded that physical treatments + tocopherol did not alter the nutrients in soymilk, and the treatment thermal + tocopherol was the only one that completely inhibited the specific activity of the LOX / Mestre

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