Submitted by Úrsula Aparecida Escalero Silva null (ursula_escalero@yahoo.com.br) on 2017-08-02T18:57:18Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Úrsula Ap.Escalero Silva.doc: 13796352 bytes, checksum: e2a920646451b977374b362f4919a2fb (MD5) / Rejected by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: A versão final da dissertação/tese deve ser submetida no formato PDF (Portable Document Format). O arquivo PDF não deve estar protegido e a dissertação/tese deve estar em um único arquivo, inclusive os apêndices e anexos, se houver. Por favor, corrija o formato do arquivo e realize uma nova submissão. Agradecemos a compreensão. on 2017-08-02T19:45:03Z (GMT) / Submitted by Úrsula Aparecida Escalero Silva null (ursula_escalero@yahoo.com.br) on 2017-08-02T19:46:57Z No. of bitstreams: 3 Dissertação_Úrsula Ap.Escalero Silva.doc: 13796352 bytes, checksum: e2a920646451b977374b362f4919a2fb (MD5) Dissertação_Úrsula Aparecida Escalero Silva.pdf: 2945525 bytes, checksum: e290e7a6e39c728875be5fc9f2337205 (MD5) Dissertação_Úrsula Aparecida Escalero Silva.pdf: 2945525 bytes, checksum: e290e7a6e39c728875be5fc9f2337205 (MD5) / Rejected by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo: - Foram submetidos 3 arquivos PDF’s, apenas 1 arquivo deve ser submetido Corrija estas informações e realize uma nova submissão contendo o arquivo correto. Agradecemos a compreensão. on 2017-08-02T19:50:31Z (GMT) / Submitted by Úrsula Aparecida Escalero Silva null (ursula_escalero@yahoo.com.br) on 2017-08-02T19:52:22Z No. of bitstreams: 1 Dissertação_Úrsula Aparecida Escalero Silva.pdf: 2945525 bytes, checksum: e290e7a6e39c728875be5fc9f2337205 (MD5) / Approved for entry into archive by LUIZA DE MENEZES ROMANETTO (luizamenezes@reitoria.unesp.br) on 2017-08-03T12:35:30Z (GMT) No. of bitstreams: 1 silva_uae_me_araca.pdf: 2945525 bytes, checksum: e290e7a6e39c728875be5fc9f2337205 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-03T12:35:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 silva_uae_me_araca.pdf: 2945525 bytes, checksum: e290e7a6e39c728875be5fc9f2337205 (MD5) Previous issue date: 2017-06-08 / Objetivo: O presente estudo teve como objetivo analisar a influência do modelo experimental e substrato nas alterações do esmalte dental decorrentes do tratamento clareador de consultório em diferentes tempos de análise. Materiais e Métodos: Um total de 140 discos contendo esmalte e dentina foram confeccionados, a dentina planificada e o esmalte polido e submetido ao teste de microdureza de superfície em KHN (MS) para padronização e seleção inicial dos espécimes (n= 80). A seguir, foram divididos em 8 grupos (n=10): G1- Controle in vitro em dentes humanos (VHC); G2- Clareamento in vitro utilizando agente clareador Pola Office a base de peróxido de hidrogênio a 35% (Pola PH 35%) em dentes humanos (VHP); G3- Controle in situ em dentes humanos (SHC); G4- Clareamento in situ com Pola PH 35% em dentes humanos (SHP); G5- Controle in vitro em dentes bovinos (VBC); G6- Clareamento in vitro com Pola PH 35% em dentes bovinos (VBP); G7- Controle in situ dentes bovinos (SBC); G8- Clareamento in situ com Pola PH 35% em dentes bovinos (SBP). O esmalte dental foi avaliado quantitativamente pelas análises de rugosidade, MS e microdureza longitudinal do esmalte em KHN (ML) e qualitativamente por microscopia eletrônica de varredura (MEV). As análises de rugosidade e MS foram realizadas antes do início do tratamento (T0), após a 3° semana de tratamento (T1) e 15 dias após o término do tratamento (T2). Já a análise de ML e as imagens de MEV foram realizadas apenas em T2. Os dados foram submetidos ao teste de homocedasticidade Shapiro-wilk, em seguida, foi realizada à análise de variância (ANOVA) dois fatores medidas-repetidas e pós-teste de Tukey ou Sidak (p<0,05) ou teste de Friedman, seguido pelo teste post hoc de Wilcoxon com correção de Bonferroni. Resultados: Na comparação entre os modelos in vitro e in situ, em todas as análises realisadas, pode-se notar diferença estatisticamente significante 15 dias após o término do tratamento clareador (p< 0,05), sendo evidente a recuperação do esmalte dentário no modelo in situ. Com relação aos substratos, estes apresentaram diferença estatística nas análises de MS e ML (p> 0,05). No tocante a análise dos grupos ao longo do tempo, nas variáveis rugosidade e MS, observou-se diferenças estatísticas (p<0,05), comprovando a ação negativa do tratamento clareador em T1, seguida em T2 pela manutenção dessas alterações no grupo in vitro e recuperação dessas superfícies nos grupos in situ. Conclui-se que: O modelo experimental foi decisivo para o estudo das alterações do esmalte dentário clareado, pois, o modelo in situ permite redução ou recomposição das alterações dentárias promovidas pelo tratamento clareador. - Em pesquisas sobre o clareamento dental, ambos os substratos empregados neste estudo podem ser utilizados, desde que, as diferenças existentes entre eles sejam consideradas no momento da interpretação dos dados. - Os diferentes tempos de análise foram determinantes para a observação da ação do agente clareador sobre a estrutura dental. / Objective: The objective of the present study was to analyze, influence, model, experimental, substrate, birth, treatment, repair, surgery, different times, analysis. Materials and Methods: a total of 140 discotheques containing enamel and dentin were made, a planned dentin and polished omalmalte and submitted to the surface microhardness test in KHN (MS) for standardization and initial selection of spagos (n = 80). They were divided into 8 groups (n = 10): G1- In vitro control in human teeth (VHC); G2- In vitro bleaching, for example, Pola Office whitening agent, 35% hydrogen peroxide base (Pola PH 35%) in human teeth (VHP); G3-In situ control in human teeth (SHC); G4- In situ bleaching with Pola PH 35% in human teeth (SHP); G5- In vitro control in bovine teeth (VBC); G6- In vitro whitening with PH Pola 35% in bovine teeth (VBP); G7- In situ control of bovine teeth (SBC); G8- In situ bleaching with Pola PH 35% in bovine teeth (SBP). The enamel was evaluated quantitatively in the analysis of roughness, MS and longitudinal microhardness of the enamel in KHN (ML) and qualitatively by scanning electron microscopy (SEM). The roughness and MS analyzes were performed before the start of treatment (T0), after one week of treatment (T1) and 15 days after treatment (T2). Already an ML analysis and as SEM images were performed only in T2. The data were submitted to the Shapiro-wilk homoscedasticity test, then performed in analysis of variance (ANOVA) of measures and Tukey or Sidak test repetitions (p <0.05) or Friedman's test, by the post test Hoc analysis of Wilcoxon with Bonferroni correction. Results: In the relativity of in vitro and in situ models, a statistically significant difference can be observed 15 days after the end of the bleaching treatment (p <0.05) in all analyzes, In situ. Regarding the substrates, these presented a statistical difference in the MS and ML analyzes (p> 0.05). Regarding the analysis of the groups over time, in the roughness and MS variables, statistical statistics (p <0.05) were observed, proving a negative action of the bleaching treatment in T1, instead of T2 through maintenance, there were no groups In vitro and surface recovery in in situ groups. It is concluded that: The experimental model was decisive for the study of the author's keywords, the in situ model allows to reduce or to reward the dental alternatives promoted by the bleaching treatment. - In research on dental bleaching of the substrates used in the study can be used, since, as residues between them, are not considered in the interpretation version of the data. - The different times of analysis were determinant for an observation of the action of the bleaching agent on a dental structure.

Orientador: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Iracilda Zeppone Carlos / Banca: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Banca: Cleni Maria Marzocchi Machado / Banca: Luciana Simon Pereira Crott / Banca: Beatriz Maria Machado de Medeiros / Resumo: Os receptores "toll-like" (TLR) são importantes no reconhecimento de patógenos por um hospedeiro e conseqüentemente para a ativação da resposta imune inata. Evidências clínicas e experimentais mostram que defeitos nesses receptores ou em suas vias de sinalização deixam o hospedeiro suscetível a vários tipos de infecção. Já foi demonstrado que o TLR2 e o TLR4 estão envolvidos no reconhecimento de vários fungos, como Candida albicans, Aspergillus niger, Aspergillus fumigatus e Saccharomyces cerevisiae, entretanto não há informações disponíveis sobre a participação dos TLRs no reconhecimento do Sporothrix schenckii. O S. schenckii é um fungo termodimórfico causador da esporotricose, uma infecção micótica caracterizada pelo comprometimento da pele e tecidos subcutâneos; em algumas ocasiões, como em pacientes imunocomprometidos, pode induzir lesões em órgãos. Os mecanismos de defesa, principalmente a imunidade mediada por células, são importantes na resistência à infecção. O objetivo deste trabalho foi verificar o papel do TLR4 na resposta dos macrófagos ao S. schenckii, empregando camundongos defectivos na expressão de TLR4 (C3H/HeJ) e camundongos controle (C3H/HePas), através da avaliação de mediadores imunológicos produzidos pelas células peritoneais dos camundongos, da expressão de proteínas acessórias ao TLR4 e da avaliação da apoptose destas células durante dez semanas. A produção dos intermediários reativos do oxigênio, determinada através da técnica de redução do vermelho de fenol, revelou que os camundongos defectivos na expressão do TLR4 produziram menores concentrações de H2O2 que os camundongos TLR4 normais. Nestes, as maiores concentrações de H2O2 foram induzidas pela presença do extrato lipídico da fase miceliar do S. schenckii. No entanto, a produção de óxido nítrico (NO) e das citocinas ocorreu... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Toll-like receptors (TLR) are important to pathogen recognition by a host and to the subsequent triggering of an innate immune response. Experimental and clinical evidence show that defects in TLR or in signaling pathways downstream from these receptors render hosts susceptible to various types of infection. TLR2 and TLR4 are involved in recognition of several fungi, such as Candida albicans, Aspergillus niger, Aspergillus fumigatus and Saccharomyces cerevisiae. However, no information is available about TLR recognition of Sporothrix schenckii. S. schenckii is a thermally dimorphic fungus, the causative agent of sporotrichosis, a mycotic infection characterized by frequent involvement of the skin and subcutaneous tissues; occasionally, it may also produce lesions of the internal organs mostly reported among immunocompromised hosts. Immune defense mechanisms, particularly cellmediated immunity have been reported to be important in infection resistance. The aim of this study was to assess the role of TLR4 in the response of macrophages to S. schenckii, using TLR4-deficient mice (C3H/HeJ) and control mice (C3H/HePas), evaluating immunological mediators produced by exudate peritoneal cells, TLR4 accessory protein expression, and apoptosis of these cells over a period of ten weeks. Reactive oxygen intermediates production was determined through phenol red oxidation method and has revealed that TLR4-defective mice produced lower levels of H2O2 than TLR4 normal mice. In these animals, higher H2O2 concentrations were seen when lipid extract obtained from S. schenckii mycelium was used. However, nitric oxide (NO) and cytokine production occurred in higher levels when cells were challenged with lipid extract from S. schenckii yeast cells, which is the morphotype found in the host during infection. NO and cytokines such as IL-1, TNF- and IL-10 production in culture supernatants were also lower... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Márcia Carneiro Valera / Banca: Antonio Carlos Bombana / Banca: Claudio Antonio Talge Carvalho / Resumo: Acredita-se que a penetração de peróxido de hidrogênio através do esmalte e dentina pode causar danos à polpa. A proposta deste trabalho foi avaliar a quantidade de peróxido de hidrogênio no interior da câmara pulpar de dentes bovinos e humanos com ou sem restauração, após clareamento pela técnica de consultório. Os dentes foram seccionados 3mm à junção amelo-cementária e divididos em dois grupos: A (setenta terceiros molares humanos) e B (setenta incisivos laterais bovinos) que foram subdivididos em: A1 e B1 restaurados com resina composta (Esthetic-X, Dentsply), A2 e B2 com CIV (Vidrion-R, SSWhite), A3 e B3 com CIV modificado por resina (CIV-MR) (Vitremer, 3M); A4, A5, B4 e B5 não foram restaurados. No interior da câmara pulpar de todos os dentes foi colocado tampão acetato. Os subgrupos A1 a A4 e B1 a B4 foram expostos ao peróxido de hidrogênio 38% (Opalescence XtraBoost, Ultradent) por 40 min. Os subgrupos A5 e B5 permaneceram em água deionizada por 40 min. O tampão acetato foi transferido a um tubo de ensaio reagindo com corante violeta leucocristal e peroxidase. A densidade óptica da solução foi avaliada em espectrofotômetro, os valores de absorbância convertidos em microgramas de peróxido e submetidos aos testes de Dunnett, Kruskal-Wallis, ANOVA e Tukey (5%). Verificou-se maior penetração de peróxido nos dentes bovinos (0,79l0,61æg) e humanos (2,27l0,41æg) restaurados com CIV-MR. A penetração do agente clareador foi maior em dentes humanos para qualquer situação experimental. Concluiu-se que a penetração de peróxido depende do material restaurador e que dentes humanos são mais susceptíveis à penetração do agente clareador para o interior da câmara pulpar do que dentes bovinos. / Abstract: It is believe that externally applied bleachings agents could penetrate into the pulp chamber.This study was conducted to evaluate pulp chamber penetration of peroxide bleaching agent in human and bovine teeh, after office bleach technique. All the teeth were sectioned 3mm apical of the cemento-enamel junction and were divided into 2 groups: A (70 third human molars) and B (70 bovine lateral incisor) that were subdivided in: A1 and B1 restored using composite resin (Esthetic-X, Dentsply), A2 and B2 using glass ionomer cement (Vidrion-R, SSWhite), A3 and B3 using resin-modified glass ionomer cement (Vitremer, 3M); A4, A5, B4 and B5 were not restored. Acetate buffer was placed in the pulp chamber and the treatment agent was applied for 40 min as follow: A1 to A4 and B1 to B4 38% hydrogen peroxide exposure and A5 and B5 immersion into distilled water. The buffer solution was transferred to a glass tube where leuco crystal violet and horseradish peroxidase were added, producing a blue solution. The optical density of the blue solution was determined determined by spectrophotometer and converted into microgram equivalents of hydrogen peroxide. Data were submitted to ANOVA and Dunnett, Kruskal-Wallis, and Tukey tests (5%). A higher level of hydrogen peroxide penetrated into the pulp chamber in resin-modified glass ionomer cements groups, bovine (0,79l0,61æg) and human (2,27l0,41æg). The bleaching agent penetration was higher in human teeth for any experimental situation. The penetration of the hydrogen peroxide depend on restorative materials and that human teeth are more susceptible to penetration of bleaching agent into the pulp chamber than bovine teeth. / Mestre

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O objetivo deste estudo in vivo foi avaliar comparativamente três técnicas de clareamento de dentes polpados quanto ao grau de cor final alcançado, sensibilidade dental e satisfação pessoal de operadores e pacientes. Indivíduos jovens de mesma faixa etária e padrão de higiene bucal foram selecionados e divididos aleatoriamente entre os grupos (G1; n=7) caseiro, com regime de uso de 8 h/dia/4 semanas; (G2; n=7) consultório, com regime de clareamento de 4 sessões semanais de 2 aplicações de 15 min cada e; (G3; n=6) associado, com caseiro e consultório combinados. Para as técnicas caseira e de consultório foram utilizados peróxido de carbamida a 16% (WhitegoldHome/Dentsply) e peróxido de hidrogênio a 35% (Whitegold Office/Dentsply), respectivamente. Os registros de cor foram obtidos por um único operador antes e após o emprego da cada técnica utilizando escala de cores Vita Bleachedguide 3D-Master e máquina fotográfica digital profissional (EOS Rebel XT Canon), com ajustes de iluminação, flash e distância focal padronizados. O nível de clareamento foi avaliado por unidades de mudança de cor (luminosidade) na escala de cores, além do número de tons alcançados nas imagens digitais e mudança de cor no sistema CIE L*a*b* por meio do software ScanWhite. Os dados foram tratados estatisticamente pelos testes não paramétricos de Kruskal Wallis e dos sinais (p&#8804;0,05). Os registros de sensibilidade dental trans e pós operatória e da satisfação pessoal dos operadores e pacientes foram preenchidos individualmente em questionário unidimensional ao final de cada sessão. Foram atribuídos escores para a avaliação final da sensibilidade dental, conforme: 0=ausente; 1=leve; 2=moderada e; 3=severa. Os dados foram tratados estatisticamente pelo teste Kruskal Wallis. As médias das variações de unidades de mudança de cor da escala Vita e do software foram, respectivamente: G1) 4,57 (IC1,34), 27,14 (IC12,03); G2) 2,86 (IC0,99), 21,29 (IC14,27); G3) 4 (IC1,82), 25,33 (IC10,70). Na comparação entre os métodos de avaliação de cor, os p-valores do teste dos sinais foram 0,453, 0,453 e 0,687 para os grupos 1, 2 e 3, respectivamente. As médias da variação total de cor (&#8710;E) foram, respectivamente: G1) 8,79(IC4,18), G2) 7,10(IC3,53) e G3) 9,74 (IC4,07). Não foi determinada diferença estatisticamente significante entre os grupos. Os postos médios do nível de sensibilidade foram: G1 = 9,64; G2 = 11,58; e G3 = 10,43, e o p-valor = 0,807. Não houve diferença estatisticamente significante entre grupos. Conclui-se que as técnicas caseiro, consultório e associada foram igualmente eficazes quanto ao nível de cor final, de acordo com os métodos objetivos e subjetivos utilizados. O nível de sensibilidade dental foi o mesmo independentemente da técnica utilizada. Todos os indivíduos registraram satisfação ao final do clareamento. / The aim of this in vivo study was to evaluated three techniques of vital teeth bleaching on the degree of final color achieved, tooth sensitivity and personal satisfaction of operators and patients. Young individuals of the same age were randomly divided into groups (G1; n=7) at-home: 8h/day/week; (G2; n=7) in-office: 4 weekly sessions of 2 applications of 15 min each one and; (G3; n=6) associated: home/office simultaneously. For at-home and in-office techniques were used carbamide peroxide 16% (WhiteGold Home/Dentsply) and hydrogen peroxide 35 % (Whitegold Office/Dentsply), respectively. The records of color were obtained by a single operator before and after bleaching using the scale Vita Bleachedguide 3D Master and digital camera Canon Rebel XT, with lighting, flash and focal distance standardized. The level of bleaching was evaluated by unit change in color scale and the number of tones achieved and change of color in the CIE L*a*b* by using the software ScanWhite. The data were treated statistically by the nonparametric Kruskal Wallis and signs (p<0,05). The records of tooth sensitivity during and after bleaching and personal satisfaction of operators and patients were filled out in one-dimensional questionnaires at the end of each session, individually. Scores for the final evaluation of tooth sensitivity were assigned: 0=absent, 1=mild, 2=moderate and 3=severe. The data were treated statistically by Kruskal Wallis. The average variation of unit change in color scale Vita and software were: G1) 4.57 (CI 1.34), 27.14 (CI 12.03); G2) 2.86 (CI 0.99), 21.29 (CI 14.27); G3) 4 (CI 1.82), 25.33 (CI 10.70). The p-values of the signal test were 0.453, 0.453 and 0.687 for the 1, 2 and 3 groups, respectively. The average of the total variation in color (&#8710;E) were, respectively: G1) 8.79(CI4.18), G2) 7.10(CI3.53) and G3) 9.74(CI4,07). No statistically significant difference was determined between the groups. The mid-rank of sensitivity of the groups were: G1=9.64, G2=11.58, G3=10.43; and p-valor=0,807. No statistically difference was determined between the groups. All subjects reported satisfaction at the end of the bleaching. We conclude that objective methods (ScanWhite) and subjective (Vita scale) to determine the level of color bleaching were equally effective and no difference between them. The level of tooth sensitivity was the same regardless of the technique.

O objetivo desse trabalho foi avaliar in vitro a diferença da força de cisalhamento da dentina quando submetida a ação de algumas substâncias utilizadas como clareadores dentais e posteriormente restaurados com cimento de ionômero de vidro e resina composta. Utilizou-se 152 terceiros molares superiores hígidos que tiveram suas superfícies palatinas desgastadas e preparadas para receber os materiais restauradores após o tratamento com os agentes clareadores.Os dentes foram divididos aleatoriamente em 12 grupos de acordo com as condições em teste a saber: G1: Soro+Resina, G2: Soro+Ionônero de vidro, G3: Perborato de Sódio+Soro+Resina, G4: Perborato de Sódio+Soro+Ionônero de vidro, G5: Perborato de Sódio+Peróxido de hidrogênio 6%+Resina, G6: Perborato de Sódio+Peróxido de hidrogênio 6%+ Ionônero de vidro, G7: Perborato de Sódio+ Peróxido de hidrogênio 35%+Resina, G8: Perborato de Sódio+Peróxido de hidrogênio 35%+ Ionônero de vidro, G9: Peróxido de hidrogênio 6%+Resina, G10: Peróxido de hidrogênio 6%+ Ionônero de vidro, G11: Peróxido de hidrogênio 35%+Resina, G12: Peróxido de hidrogênio 35%+ Ionônero de vidro.Ao término das restaurações os corpos de prova foram levados à máquina de ensaio universal (EMIC) e os resultados obtidos foram analisados através do teste de ANOVA a um critério e Tukey para comprovação de possíveis diferenças estatísticas .Por essas análises podemos concluir que os materiais restauradores tiveram um comportamento equivalente em todos os grupos e as diferenças significantes ocorreram mais por conta do agente clareador, sendo os grupos G1 e G2 aqueles que tiveram melhores resultados ao teste de adesividade, onde podese observar resultados significantes do grupo G1,em relação aos G5, G9, G10 e G11.O peróxido de hidrogênio a 6% ou 35% gerou os piores resultados de adesividade, melhorados com a associação ao perborato de sódio, revelando significância estatística do grupo G7 em relação aos grupos G9, G10 e G11. / The aim of this study was to evaluate \"in vitro the difference of shear bond strength of dentin when subjected to action of some substances used as dental bleaching and then restored with glass-ionomer cements and composite resin. We used 152 healthy third molars that had their palatal surfaces worn and ready to receive the restorative materials after treatment with bleaching agents. The teeth were randomly divided into 12 groups according to the conditions in testing are: G1: Serum + resin, G2: Serum + glass ionomer , G3: sodium perborate + Serum + Resin, G4: sodium perborate + Serum + glass ionomer , G5: sodium perborate + Hydrogen Peroxide 6% + Resin, G6: perborate of Sodium Hydrogen peroxide 6 +% + glass ionomer , G7: sodium perborate + 35% hydrogen peroxide + Resin, G8: sodium perborate + 35% hydrogen peroxide + glass ionomer, G9: Hydrogen peroxide 6% + Resin , G10: Hydrogen peroxide 6% + glass ionomer , G11: Hydrogen peroxide 35% + Resin, G12: Hydrogen peroxide 35% + glass ionomer .Finely finish the restorations of the bodies of evidence were brought to universal testing machine (EMIC) and results obtained and the results were analyzed using the Anova test and a Tukey test for evidence of possible statistical differences. For this analysis we can conclude that the restorative materials had an equivalent behavior in all groups, significant differences occurred due to the bleaching agent, and the G1 and G2 who fared better adhesion to the test, we can observe results significant in the G1, for the G5, G9, G10 and G11.The hydrogen peroxide 6% or 35% yielded the worst results of adhesiveness, enhanced with the combination of sodium perborate, showing statistical significance in the G7 the groups G9, G10 and G11.

Conselho Nacional de Desenvolvimento CientÃfico e TecnolÃgico / Colletotrichum gloeosporioides à um importante patÃgeno hemibiotrÃfico com uma ampla gama de hospedeiros que causa perdas substanciais de colheitas. Dados recentes mostraram que a resposta hipersensitiva (HR) à um evento envolvido na resistÃncia do feijÃo-de-corda (V.unguiculata) genÃtipo BR-3 contra C.gloeosporioides (isolado LPVD-1). VÃrios estudos tÃm sido realizados sobre os mecanismos de defesa de plantas a patÃgenos hemibiotrÃficos, mas em geral eles continuam a ser mal compreendidos. Anteriormente, comparamos mudanÃas na expressÃo de proteÃnas induzidas em genÃtipos resistentes de feijÃo-de-corda apÃs a infecÃÃo com C. gloeosporioides utilizando uma abordagem proteÃmica. Com base nesses resultados, no presente estudo, avaliamos as respostas de defesa induzidas por C.gloeosporioides em V.unguiculata associadas com a explosÃo oxidativa, o acÃmulo de espÃcies reativas de oxigÃnio (EROs), como o Ãnion superÃxido (O2â-), e o perÃxido de hidrogÃnio (H2O2), bem como a expressÃo de genes antioxidantes, utilizando anÃlise por RT-qPCR. Ao mesmo tempo foi analisada a cinÃtica de infecÃÃo de C.gloeosporioides por microscopia Ãptica (MO) e microscopia eletrÃnica de varredura (MEV). O aumento de O2â- e H2O2 foi detectado em feijÃo-de-corda, 2 horas apÃs a inoculaÃÃo (hai) utilizando coloraÃÃo por NBT e DAB, respectivamente. A quantificaÃÃo espectrofotomÃtrica demonstrou dois picos de produÃÃo de H2O2, 2 e 12 hai, mostrando uma cinÃtica bifÃsica. O aumento de H2O2 foi acompanhado por peroxidaÃÃo lipÃdica 2 e 48 hai. As anÃlises de MO e MEV mostraram que C.gloeosporioides foi capaz de gerar estruturas tais como tubos germinativos e apressÃrios e se desenvolver sob a superfÃcie das folhas. No entanto, apesar do desenvolvimento e tentativa de infecÃÃo, alteraÃÃes ultra-estruturais foram observadas na superfÃcie de conÃdios e hifas 8 hai levando a nÃo infecÃÃo de cÃlulas hospedeiras. AnÃlise por RT-qPCR demonstrou que os genes VuFeSODI e VuCuZnSODII apresentaram aumento de expressÃo 4 hai, enquanto que o gene VuCuZnSODI foi bem expresso 12 hai. Em relaÃÃo aos genes associados à regulaÃÃo de H2O2, VuPrxIIBCD mostrou uma forte aumento de transcristos em 2 hai enquanto que, VuAPXI mostrou aumento de expressÃo apenas 12 hai. VuCATI e VuCATII mostram aumento de expressÃo quantitativa dos transcritos 12 hai, indicando que eles sÃo associados a manutenÃÃo de H2O2 em peroxissomos. Contrariamente, a expressÃo dos transcritos de VuPrxIIE foi reprimida nas primeiras horas apÃs a inoculaÃÃo, contudo, apresentaram nÃveis aumentados de expressÃo em 48 hai, sugerindo participar na regulaÃÃo de H2O2 nos cloroplastos. O presente estudo indica que H2O2 tem um papel importante nas estratÃgias de defesa iniciais de feijÃo-de-corda, agindo contra C.gloeosporioides e funcionando como uma molÃcula sinalizadora. AlÃm disso, os genes associados com defesas antioxidantes estudados parecem estar envolvidos, em combinaÃÃo com outras molÃculas, na regulaÃÃo dos nÃveis de H2O2 para prevenir a morte celular e regular a homeostase redox, eventos importantes nos mecanismos de resistÃncia de plantas a patÃgenos. / Colletotrichum gloeosporioides is an important hemibiotrophic pathogen with a broad host range that causes substantial crop losses. Recent data have shown that the hypersensitive response (HR) is one event involved in the resistance of cowpea (V.unguiculata) genotype BR-3 against C.gloeosporioides (LPVD-1 isolate). Several studies have been undertaken on the defense mechanism of plant to hemibiotrophic pathogen, but overall they remain poorly understood. Previously, we have compared changes in protein expression induced in resistant cowpea genotype after infection with C.gloeosporioides using a proteomic approach. Based on these results, in the present study, we evaluated the defense responses induced by C.gloeosporioides in V.unguiculata associated with oxidative burst, accumulation of reactive oxygen species (ROS) such as superoxide anion (O2â-), hydrogen peroxide (H2O2) as well expression of antioxidant genes using RT-qPCR analysis. At the same time, we analyzed the C.gloeosporioides infection kinetics by optical microscopy (OM) and scanning electron microscopy (SEM). Increased O2â- and H2O2 was detected in cowpea 2 hours after inoculation (hai) using NBT and DAB staining, respectively. Spectrophotometric measurements showed two peaks H2O2 production, 2 and 12 hai, showing a biphasic kinetics. The increase of H2O2 was accompanied by lipid peroxidation 2 and 48 hai. OM and SEM analyzes showed that C.gloeosporioides was able to generate germ tubes and structures such as apressoria and develop under the surface of the leaves. However, despite of the development and attempt to infection, ultra-structural changes were observed on the surface of conidia and hyphae, 8 hai led to no infection of host cells. Analysis by RT-qPCR demonstrated that the genes VuFeSODI and VuCuZnSODII are up- regulated in chloroplasts at 4 hai, while the gene VuCuZnSODI was well up-regulated 12 hai. In relation to genes associated to scavenging of H2O2, VuPrxIIBCD showed a strong up-regulated of transcript at 2 hai while that VuAPXI showed up-regulated only 12 hai. VuCATI and VuCATII showed that the quantitative level of transcript expression was up- regulated 12 hai, indicating that they are important in the maintenance of H2O2 in peroxisomes. Contrarily, VuPrxIIE transcript was down-regulated in the early hours after inoculation, but showed increased expression levels at 48 hai suggesting participate in the regulation of H2O2 in chloroplasts. The present study indicates that H2O2 has an important role in the initial defense strategies of cowpea acting against C.gloeosporioides and functioning as a signaling molecule. Furthermore, genes associated with antioxidant defenses studied here seem to be involved, in combination with other molecules, in the regulation of H2O2 levels toward preventing cell death and regulating the cell redox homeostasis, important events in the resistance mechanisms of plants to pathogens.

O processo de reparo em alvéolo infectado de ratos foi avaliado após a utilização de três tipos de tratamento: (1) curetagem e irrigação com soro fisiológico seguida do preenchimento com uma pasta à base de metronidazol a 10%, lidocaína a 2%, menta e carboximetilcelulose, (2) irrigação única com solução de iodeto de sódio a 2% e peróxido de hidrogênio a 3% na proporção 1:1 e (3) irrigação diária, por 3 dias, com solução de iodeto sódio a 2% e peróxido de hidrogênio a 3% na proporção 1:1. Foram utilizados 75 ratos que constituíram os seguintes grupos: Grupo I: alvéolo não infectado (grupo controle positivo); Grupo II: alvéolo infectado sem nenhum tratamento; Grupo III: alvéolo infectado tratado com irrigação única de solução de iodeto de sódio a 2 % e peróxido de hidrogênio a 3% na proporção 1:1; Grupo IV: alvéolo infectado tratado com irrigação diária, por 3 dias, de solução de iodeto de sódio a 2 % e peróxido de hidrogênio a 3% na proporção 1:1; Grupo V: alvéolo infectado submetido à curetagem, irrigação com soro fisiológico e preenchimento com pasta à base de metronidazol a 10% e lidocaína a 2%, carboximetilcelulose e menta. Os animais, em número de 5 em cada grupo foram sacrificados aos 6, 15 e 28 dias após a exodontia do incisivo superior e as peças obtidas analisadas em microscopia óptica. Os resultados foram submetidos à análise qualitativa e quantitativa e evidenciaram melhor reparo nos grupos tratados em relação ao grupo sem tratamento. Com base nos resultados foi possível concluir que: os grupos III, IV e V apresentaram melhores condições de reparo frente ao grupo II, porém diferentes significantemente ao grupo I; o grupo V apresentou os melhores resultados quanto à neoformação óssea nos períodos de 15 e 28 dias, sendo uma opção interessante a ser considerada para o tratamento da alveolite. / The healing process in infected tooth sockets was evaluated after application of three types of treatment.: (1) surgical cleaning of the socket with alveolar curettes, saline solution irrigation and complete filling of the socket with a 10% metronidazole, 2% lidocaine, carboxymethylcelullose and mint as flavoring, (2) Single irrigation with 2% sodium iodide and 3% hydrogen peroxide solution (1:1) and (3) Daily irrigation, for three days, with 2% sodium iodide and 3% hydrogen peroxide solution (1:1). Seventy-five rats were randomly assigned to the following groups: Group I: Non-infected tooth socket (positive control group); Group II: Infected tooth socket without treatment; Group III: Infected tooth socket treated with single irrigation of 2% sodium iodide and 3% hydrogen peroxide solution (1:1); Group IV: Infected tooth socket treated daily, for three days, with irrigation of 2% sodium iodide and 3% hydrogen peroxide solution (1:1); Group V: Infected tooth socket treated with surgical cleaning of the socket with alveolar curettes, saline solution irrigation and complete filling of the socket with a 10% metronidazole, 2% lidocaine, carboxymethylcelullose and mint as flavoring. The rats were killed in number of five at each group after 6, 15 e 28 days of superior incisor extraction. The histological findings were measured by qualitative and quantitative methods. The results demostrated better results of tooth socket healing in treated groups. Based on the results it was possible to conclude that groups III, IV and V exhibited better conditions of alveolar healing, compared to group II, although significant difference was observed with group I. Group V showed the best results in bone formation at 15 and 28 days, consisting in an interesting option for dry socket treatment.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-06-14T15:47:03Z No. of bitstreams: 1 Andre Luis de Franca Dias.pdf: 1058700 bytes, checksum: 0141cbefc140d89e9bd8891c383caa9b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-14T15:47:03Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andre Luis de Franca Dias.pdf: 1058700 bytes, checksum: 0141cbefc140d89e9bd8891c383caa9b (MD5) Previous issue date: 2014-02-14 / The cultivation of sugarcane in Brazil has notoriety for contributing significantly to the economy. The micropropagation is a tool for tissue culture plants to produce on a large scale genetically identical to the mother plant in a relatively short time compared with the conventional spread, environmental, and controlled aseptic conditions. The acclimatization stage is considered critical by large losses of micropropagated material, caused by the changing environment of the laboratory plants for greenhouses. Objective was to evaluate plants of varieties sugarcane RB931011 , RB92579 and RB98710 in different acclimatization conditions. These varieties were micropropagated in temporary immersion bioreactor (BIT) and acclimatized in a greenhouse whose structural roofing material consisted of milky plastic (PL), half of the area covered in association with black mesh shade (MS) (70% shading ). The plants were subjected to full sun (SP), after 30 days in the greenhouse. The acclimatization period under PL and MS was 15 days. The three varieties were planted in the substrate Carolina Soil® in volumes of 55 cm3 and 95 cm3, establishing the following treatments : T1 (RB931011 - 55 cm3), T2 (RB931011 - 95 cm3), T3 (RB92579 - 55 cm3), T4 (RB92579 - 95 cm3), T5 (RB98710 - 55 cm3) and T6 (RB98710 - 95 cm3). Every 15 days were evaluated: number of leaves (NF), plant height (AP) and percentage of plants with tillers (% P). At the end of the experimental period were determined: dry shoot weight (MSa) and roots (MSr), percentage of survival (S%), leaf area (AF), high water content (CHR), stomatal density, activity of superoxide dismutase (SOD), ascorbate peroxidase (APX) and catalase (CAT), content of malondialdehyde (MDA) and hydrogen peroxide. The experimental design was completely randomized in a 2x3 factorial design with 20 replications. Each replicate was represented by one plant per pot. The RB92579 and RB98710 varieties showed more robustness reaching the largest biometric medium and higher survival rate in the acclimatization. The largest volume of substrate provided better average height, dry weight, leaf area and lower SOD activity after 45 days of acclimatization, highlighting the influence of stress reduction and balance in plants. The substrate volume of 95 cm3 is the most suitable for acclimatization and plant production of sugarcane. / A cultura da cana-de-açúcar tem destaque no Brasil por contribuir consideravelmente com a economia. A micropropagação é uma ferramenta da cultura de tecidos de plantas para produção de plantas em larga escala geneticamente idênticas à planta mãe, em um tempo relativamente curto em comparação com a propagação convencional, em condições ambientais, assépticas e controladas. A fase de aclimatização é considerada crítica pelas grandes perdas do material micropropagado, causada pela mudança de ambiente das plantas do laboratório para as estufas e casas de vegetação. Objetivou-se avaliar mudas de cana-de-açúcar das variedades RB931011, RB92579 e RB98710 em diferentes condições de aclimatização. Essas variedades foram micropropagadas em biorreator de imersão temporária (BIT) e aclimatizadas em estufa cujo material estrutural de cobertura era constituído de plástico leitoso (PL), sendo metade da área coberta em associação à malha de sombreamento (MS) preta (70% de sombreamento). As plantas foram submetidas a sol pleno (SP), após 30 dias em estufa. O período de aclimatização sob PL e MS foi de 15 dias. As três variedades foram plantadas no substrato Carolina Soil® nos volumes de 55 cm3 e 95 cm3, estabelecendo-se os seguintes tratamentos: T1 (RB931011 – 55 cm3), T2 (RB931011 – 95 cm3), T3 (RB92579 – 55 cm3), T4 (RB92579 – 95 cm3), T5 (RB98710 – 55 cm3) e T6 (RB98710 – 95 cm3). A cada 15 dias foram avaliados: número de folhas (NF), altura da planta (AP) e porcentagem de plantas com perfilhos (% P). Ao final do período experimental determinaram-se: massa seca da parte aérea (MSa) e das raízes (MSr), porcentagem de sobrevivência (S%), área foliar (AF), teor relativo de água (CHR), densidade estomática, atividade das enzimas superóxido dismutase (SOD), ascorbato peroxidase (APX) e catalase (CAT), teor do aldeído malônico (MDA) e de peróxido de hidrogênio. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, em um fatorial 2x3, com 20 repetições. Cada repetição foi representada por uma planta por tubete. As variedades RB92579 e RB98710 apresentaram mais robustez atingindo as maiores médias biométricas e maior taxa de sobrevivência na aclimatização. O maior volume de substrato proporcionou maior média de altura, peso da matéria seca, área foliar e menor atividade da SOD aos 45 dias de aclimatação, destacando-se na influência da redução e equilíbrio do estresse nas mudas. O volume de substrato de 95 cm3 é o mais indicado para a aclimatização e produção de mudas de cana-de-açúcar.

Orientadores: Marcos Roberto de Vasconcelos Lanza, Rodnei Bertazzoli / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Mecânica / Made available in DSpace on 2018-08-16T20:01:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Beati_AndreAugustoGutierrezFernandes_D.pdf: 4569837 bytes, checksum: 6c1637bdb8e9ad2c61b0b69c8e02f7a1 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Neste trabalho foram estudados a identificação de produtos de degradação da ametrina (AME), agrotóxico utilizado em larga escala na agroindústria canavieira. A melhora no tratamento das condições ambientais é de suma importância para as regiões agrícolas, já que a contaminação do solo e das águas subterrâneas é quase inevitável. Em relação às indústrias que produzem/formulam os agrotóxicos, um tratamento alternativo é interessante, pois os Processos Oxidativos Avançados (POAs), e dentre esses, o emprego da Tecnologia Eletroquímica. Uma vez os parâmetros definidos podem gerar a combustão total da carga orgânica, ou geral produtos de degradação, que podem ser identificados, e assim, entender melhor o processo de degradação da AME. Desta maneira foram realizadas reações de oxidação parcial do herbicida utilizando a adição de H2O2 em uma solução contendo 100 mg L-1 de AME e catalisadas com Fe2+ em diferentes pH e temperatura. Os produtos foram identificados por um espectrômetro de massa, Ion-Trap com ionização por electrospray (ESI). O produto 4-amino-6-(metilamina)-1,3,5-triazin-2-ol (m/z 141) fora identificado, praticamente em todos os ensaios realizados. A melhor condição experimental para oxidar quimicamente a AME, ocorreu na proporção de 20 % (v/v) de H2O2, pH 7 e temperatura de 65 °C. Outra maneira de estudar a degradação da AME foi controlar a geração do H2O2 eletrogerado, desta maneira as degradações eletroquímicas do herbicida foram realizadas utilizando 200 mg L-1 do principio ativo a partir de uma solução comercial (Herbipak®). Eletrólises a potencial constante foram realizadas de -0,7 V ? E ? -1,2 V vs Ag/AgCl para geração de H2O2, alcançando o máximo da concentração de 508 mg L-1 para o potencial de -0,9 V vs. Ag/AgCl. O monitoramento da AME analisadas por CLAE, apresentou uma taxa de decaimento da concentração de 55% via geração de H2O2, com redução de 45% do COT quando utilizado a eletrossíntese H2O2/Fe2+. Estes ensaios de degradação também monitoraram a degradação da AME via CI, identificando a formação de íons NO3- e NO2-. A identificação da formação dos produtos de degradação da AME foi realizada por CG-EM/EM. / Abstract: In this study the identification of degradation products ametrina (AME), pesticides used on a large scale in the sugar industry. The improvement in the treatment of environmental conditions is of paramount importance to the agricultural regions, since the contamination of soil and groundwater contamination is almost inevitable. In relation to industries producing/formulate pesticides, an alternative treatment is interesting because the Advanced Oxidation Processes (AOPs), and among these, the use of Electrochemical Technology. Once the parameters set can generate combustion total organic content, or general degradation products, which can be identified, and thus better understand the degradation process of AME. Thus were partial oxidation reactions of the herbicide using the addition of H2O2 in a solution containing 100 mg L-1 of AME and catalyzed with Fe2+ at different pH and temperature. The products were identified by mass spectrometry, Ion-Trap electrospray ionization (ESI.) The product 4-amino-6-(methylamine)-1,3,5-triazine-2-ol (m/z 141) was identified, almost all trials. The best experimental condition to oxidize chemically AME, occurred at a rate of 20% (v/v) H2O2, pH 7 and temperature of 65°C. Another way to study the degradation of AME was controlling the generation of electrogenerated H2O2, thus the electrochemical degradation of the herbicide were performed using 200 mg L-1 of the active principle from a commercial solution (Herbipak®). Constant potential electrolyses were performed from -0.7 V ? E ? -1.2 V vs. Ag / AgCl for generation of H2O2, reaching the maximum concentration of 508 mg L-1 for the potential of -0.9 V vs Ag/AgCl. The monitoring of AME analyzed by HPLC, showed a rate of decay of the concentration of 55% via H2O2 generation, with 45% reduction of TOC when used at eletrossíntese H2O2/Fe2+. These tests also monitored the degradation via AME IC, identifying the formation of NO3- and NO2-. The identification of the formation of degradation products was performed by AME CG-MS/MS. / Doutorado / Materiais e Processos de Fabricação / Doutor em Engenharia Mecânica

Orientador: Antonio Carlos Boschero / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-06T10:55:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Stoppiglia_LuizFabrizio_D.pdf: 2405428 bytes, checksum: 6387a533bea2ca65f3826092e2220b39 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: No diabetes mellitus, radicais de oxigênio estão associados com perda de sensibilidade à glicose ou destruição das células b. Nesse trabalho, investigamos a tolerância de ilhotas de Langerhans de ratos neonatos ao estresse provocado por H2O2, seus mecanismos antioxidantes de defesa e os fatores que promovem manutenção da sensibilidade à glicose. Cultivadas com 1 mM de H2O2, as ilhotas aumentaram até 6' seu consumo de glicose e resistiram ao estresse induzido por H2O2 quando em meio contendo 20 mM de glicose. A expressão da enzima catalase em resposta à glicose se mostrou necessária a essa resistência, mas não suficiente. Em concentrações baixas de H2O2, quando a catalase tem sua atividade modulada por NADPH, observamos que mesmo proteínas sem atividade catalítica adquiriam capacidade antioxidante e eram regeneradas por NADPH. Mapeando a distribuição de atividade peroxidase na ilhota, observamos sensibilidade ao NADPH nas frações nuclear e citossólica. As ilhotas cultivadas em 20 mM de glicose e as que resistem ao H2O2 possuem em comum uma maior atividade da via das pentoses, que gera NADPH citossólico. Nessas ilhotas, verificamos que a produção citossólica de NAD(P)H limita a secreção de insulina. Tais ilhotas produzem NAD(P)H principalmente da oxidação de substratos endógenos no citossol e nas mitocôndrias, ao invés de localizarem seu uso somente no citossol, como se dá nas ilhotas mais sensíveis ao H2O2. A cultura com 20 mM de glicose produziu ilhotas com alta expressão da lançadeira de NADH glicerol-fosfato, enquanto o H2O2 selecionou ilhotas com alta expressão da lançadeira mal/asp. Como ambas as lançadeiras promovem a comunicação entre citossol e mitocôndrias, concluímos que o sistema de lançadeiras e a geração de NADPH sejam fatores críticos para a manutenção da sensibilidade à glicose nas ilhotas / Abstract: In diabetes mellitus, oxygen radicals are associated with loss of glucose-sensibility and destruction of b-cells. In this work, we investigated the tolerance of neonatal rat islets to stress induced by H2O2, the islets antioxidant defense mechanism and factors maintaining islet glucoseresponsiveness. Islets cultured with 1 mM of H2O2 increased 6 fold the glucose uptake and resisted H2O2-induced stress when cultured in media containing 20 mM of glucose. Glucose-induced catalase expression was shown to be necessary to islet cell-survival, although not sufficient. In low H2O2 concentrations, the activity of catalase is dependent on NADPH and we observed that even proteins with no catalytic activity could be antioxidants regenerated by NADPH. Mapping the peroxidase activity in islets, we observed sensibility to NADPH in nuclear and cytossolic fractions. Islets cultured with 20 mM of glucose and islets that survived after culture with H2O2 both showed increased activity of the pentose phosphate pathway, which generate cytossolic NADPH. Is theses islets, we verified that cytossolic production of NAD(P)H limits insulin secretion. Such islets generate NAD(P)H principally from oxidation of endogenous fuels in cytossol and mitochondria, in contrary of the most H2O2-sensible islets which use endogenous fuels exclusively in cytossol. Culture with 20 mM of glucose produced islets with high expression of the glycerol-phosphate NADH shuttle, where as culture with H2O2 selected islets with high expression of the mal/asp shuttle. Since both shuttles promote interchange between cytossol and mitochondria, we have concluded that the shuttle system together with NAD(P)H generation ability are critical factors in maintaining islet glucoseresponsiveness / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia Funcional e Molecular