Orientador: Paulo Eduardo Martins Ribolla / Banca: Edelberto Santo Dias / Banca: Eunice Aparecida Bianchi Galati / Resumo: A leishmaniose visceral americana (LVA) é, primariamente, uma zoonose crônica, tendo como agente etiológico, nas Américas, protozoários da espécie Leishmania chagasi. Sua transmissão, inicialmente silvestre ou concentrada em pequenas localidades rurais, já ocorre em centros urbanos. É um crescente problema de saúde pública no Brasil sendo uma endemia em franca expansão geográfica. Está distribuída em 19 dos 27 Estados da Federação, atingindo quatro das cinco regiões brasileiras. Entre 1985 e 2000, a leishmaniose atingiu no Brasil 422,5 mil pessoas. O contínuo crescimento antrópico desordenado vivenciado nas grandes áreas urbanas do Estado de São Paulo, ocasiona em um gradativo aumento de áreas onde as condições precárias de moradia contribuem para o aumento da população de flebotomíneos. A região oeste do Estado de São Paulo registrou em 1998, pela primeira vez, um caso de cão infectado. A doença em cães, desde o primeiro registro, já foi notificada em 45 municípios, ocorrendo em seis regiões administrativas: Araçatuba, Bauru, Marília, Presidente Prudente, São João da Boa Vista e Grande São Paulo. Em humanos, até junho de 2006, a doença já havia sido registrada em 34 municípios das regiões de Araçatuba. Bauru, Marília e Presidente Prudente. A espécie Lutzomyia longipalpis até junho de 2006 foi detectada em zona urbana de 68 municípios das regiões administrativas de Araçatuba, Bauru, Marília e Presidente Prudente, e mais recentemente na região de São João da Boa Vista, no município de Espírito Santo do Pinhal. Desde então, a sua expansão vem sendo verificada a partir da adaptação do vetor em municípios vulneráveis. A importância do estudo da população destes insetos é para potencializar o combate e a erradicação de tal moléstia, além de incentivar esforços no sentido preventivo quanto a atividades sanitárias... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: American visceral leishmaniasis (AVL) is a chronic zooanotic disease that can affect the humans and is caused by Leishmania chagasi. Its transmission first was in wild areas or small agricultural localities, but recently it occurs in urban centers. It is an increasing problem in the Public Health in Brazil. It is distributed in 19 of 27 states of this country. Between 1985 and 2000 the AVL reached 422, 5 thousand people. The continuous and disordered population growth in big urban centers at São Paulo state leads increase gradual areas where precarious conditions of habitation contribute to an increasing of vector population. The first register of AVL in this state was in 1998, an infected dog case. Since this first register, the disease was informed in 45 cities, divided in 6 administrative regions: Araçatuba, Bauru, Marília, Presidente Prudente, São João da Boa Vista e Grande São Paulo. In humans even 2006 June was registered in 34 cities around Araçatuba region. The specie Lutzomyia longipalpis was detected in urban areas of 68 cities of the: Araçatuba, Bauru, Marília e Presidente Prudente and more recently São João da Boa Vista region. Since then its expansion comes being noticed with a vector adaptation in vulnerable cities. The studies about population this insect is important to control and eradicate the AVL, beyond stimulating efforts to prevention in detriment of sanity providences actuality utilized that involve animals sacrifices. However evidences have been accumulated that Lutzomyia longipalpis isn't single specie but is species complex in the nature. The objective this study was to compare different Brazilian populations of Lutzomyia longipalpis by amplification and sequencing the12S rDNA mitochondrial to study intra-specifics variations to understand the history of introduction this disease in São Paulo state and control your vector in Brazil. / Mestre

Orientador: Valéria Marçal Felix de Lima / Banca: Rosangela Zacarias Machado / Banca: Alexandre Barbosa Reis / Resumo: O cão é o principal reservatório da Leishmania (Leishmania) chagasi, o parasita responsável pela Leishmaniose Visceral (LV) nas Américas. Na (LV) estudos em modelos experimentais, têm mostrado diferenças na resposta imunológica entre macho e fêmea. Na (L VC) tais estudos, não foram realizados. Este trabalho investigou em cães assintomáticos machos e fêmeas, naturalmente infectados por Leishmania (L.) chagasi, os níveis séricos de IgG contra antígenos totais de Leishmania, o nível de IL-10 e IFN-y, no sobrenadante do extrato do baço e fígado, e a citocina regulatória TGF-j3 no sobrenadante do extrato do baço e fígado, e sua produção natural no sobrenadante de cultura de células esplênicas. Os níveis de anticorpos anti-L. (L.) chagasi da classe IgG nos cães assintomáticos machos e fêmeas, não apresentaram diferença significativa entre o sexo. O nível de IL-10 mostrou-se elevado, no sobrenadante do extrato do fígado em cães infectados machos e fêmeas assintomáticos e apresentou dominância marcante em relação às outras citocinas. O nível do TGF-j3 mostrou-se aumentado no extrato do baço. O nível de IFN-y no baço dos grupos avaliados foi quantitativamente menor que as citocinas IL-10 e TGF-B. diferindo do observado no fígado onde foi observado uma baixa produção de TGF-j3 em relação ao IFN-y. No baço, o IFN-y apresentou diferença significativa em fêmeas assintomáticas quando comparadas com os machos assintomáticos. A observação da predominância das citocinas TGF-j3 no baço, e IL-10 no baço e fígado, em modelo ex vivo, sugere uma polarização da resposta imunológica para o padrão Th2 em cães naturalmente infectados por Leishmania (L.) chagasi. / Abstract: The dog is the main reservoir of Leíshmanía (Leíshmanía) chagasí, the parasite responsible for Visceral Leishmaniasis (VL) in the Americas. Experimental studies on VL have shown differences in the immune response of males and females. Such studies have not been carried out on canine visceral leishmaniasis. This study investigated the seric levei of IgG against Leíshmanía total antigens, the levels of IL-10 and IFN-y in the supernatant of spleen and liver extracts, the regulatory cytokine TGF-131 in the supernatant of spleen and liver extracts, and its natural production in the supernatant of spleen cell culture, in male and female asymptomatic dogs naturally infected by Leíshmanía (L.) chagasi. The levels of anti-L. (L.) chagasí IgG antibodies in male and female asymptomatic dogs did not differ significantly between the sexes. IL-10 levei was high in the supernatant of the liver extract of male and female asymptomatic infected dogs and predominated over the other cytokines. TGF-131 levei was increased in the spleen extract. The levei of IFN-y in the spleen of the group evaluated was quantitatively lower than the IL-10 and TGF-131 cytokine levels, different from what was observed in the liver, where a low productíon of TGF-131 was observed when compared to IFN-y. In the spleen, IFN-y presented a significant difference in the asymptomatic females when compared to the asymptomatic males. The observation of a predominance of TGF-131 cytokines in the spleen and of IL-10 in the spleen and liver of an ex vívo model suggests a polarization of the immune response towards the Th2 pattern in dogs naturally infected by Leíshmanía (L.) chagasí. / Mestre

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Embora as ações de vigilância e controle da leishmaniose visceral (LV) preconizadas pelo Ministério da Saúde venham sendo realizadas nas mais variadas áreas endêmicas do país, seus resultados não tem sido satisfatórios. Para conter a expansão da doença, tendo em vista o seu aumento em centros urbanos, a estratégia de controle da leishmaniose visceral utilizada no Brasil atualmente merece reavaliação. Neste estudo, foram analisados os dados das ações do Programa de Controle da Leishmaniose Visceral (PCL) desenvolvidas no período de 2006 a 2008 em 38 dos 113 bairros que compõe o município de Teresina, no Estado do Piauí. As ações do PCL (borrifação domiciliar com inseticidas e eliminação de cães sororreagentes) foram avaliadas trimestralmente, sendo a variável dependente o número de casos de LV ocorridos um ano após a execução das ações. Foram incluídas nas análises o ano de implementação destas ações e variáveis sócio-econômicas. A regressão de Poisson foi realizada para verificar o grau de associação entre a ocorrência do agravo em relação às diferentes combinações de medidas de controle implementadas pelo PCL sob intensidades de prevalência canina maiores ou menores que 10%. Após a regressão multivariada, constatou-se que, quando não se estratifica pelo nível de prevalência de infecção canina, os resultados apontam para uma não efetividade das ações de controle. Todavia, quando se estratifica pela prevalência canina, observa-se que, em locais onde ela é baixa, o controle do reservatório canino, executado de maneira independente das outras ações de controle, esteve associado com uma redução de 37% nas taxas de ocorrência de LV um ano após a implementação da ação (Razão de taxas de incidência = 0,63, p=0.05). A borrifação com inseticida executada de maneira independente das demais ações de controle, bem como a execução conjunta do controle do vetor alado e do reservatório canino, em ambos os cenários de prevalência canina, não apresentaram associação significativa com a incidência da doença nos anos posteriores a sua implementação. Estes achados constituem material relevante para discussão da efetividade das ações de controle da Leishmaniose Visceral. / Although visceral leishmaniasis (VL) surveillance and control activities as recommended by the Brazilian Ministry of Health have been implemented in different endemic areas of the country, their results have not been satisfactory. To contain the spread of the disease, particularly considering its recent increase in transmission in urban centers, the strategy currently in use in Brazil for controlling VL deserves reassessment. This study analyzed data concerning the control actions of the Program for the Control of Visceral Leishmaniasis (PCL) developed between the years 2006 to 2008 in 38 of the 113 districts that make up the city of Teresina, Piauí State, Brazil. The PCL control actions (household insecticide spraying and culling of infected dogs) were evaluated at each three months and the outcome variable was the number of cases of VL occurring one year after. In te analysis were included also the year in which the PCL actions were performed and socio-economic variables. of their implementation. Poisson regression models were performed to verify the degree of association between the occurrence of VL and different combinations of control measures implemented by PCL in different canine prevalence scenarios (higher or lower than 10%). Results from multivariate analysis suggest non-effectiveness of control measures when not stratifying by canine prevalence. However, when stratifying by canine prevalence it is observed that in places where the prevalence is low (<10%), culling infected dogs was associated with a decrease of 37% in the incidence of VL (Incidence rate ratio = 0.63, p=0.05). Indoor household spraying with insecticides in both canine prevalence scenarios and culling dogs in higher prevalence settings were not significantly associated with the occurrence of VL cases. These findings constitute relevant material to the discussion of the effectiveness of control measures of Visceral Leishmaniasis.

Herein 47 2,4-disubstituted quinazolines were synthesized and tested against Leishmania donovani intracellular amastigotes. A structure-activity relationship was conducted and lead to the identification of quinazolines with EC50s in the single digit and high nanomolar range with favorable antileishmanial selectivity indexes. Quinazoline 2.6 and 2.31 underwent in vivo efficacy studies in murine models of visceral leishmaniasis, reducing liver parasitemia by 12 % and 24 %, respectively, when given by the intraperitoneal route at 15 mg/kg/day x 5 days. The antileishmanial efficacy and easy of synthesis make the 2,4-disubstituted quinazoline compound series a suitable platform for the future development of antileishmanial agents. A similar series of 50 N2,N4-disubstituted quinazoline-2,4-diamines has also been synthesized and tested against multi-drug resistant strains of Acinetobacter baumannii. Quinazolines with MICs in the single digit micromolar range were identified within the structure-activity relationship. The observed potencies of the top compounds and the easy of synthesis lend to the further investigation of in vivo efficacy studies and could be considered a suitable platform for the future development of anti-bacterial agents against A. baumannii.

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nÃo hà / As Leishmanioses sÃo protozooses determinadas por protozoÃrios de diferentes espÃcies do gÃnero Leishmania Ross 1903. A Leishmaniose Tegumentar Americana-LTA tem largo espectro de manifestaÃÃes. A LTA no Brasil mostra-se com um padrÃo nÃo mais predominantemente rural, resultado do contato Ãntimo do homem com o ambiente silvestre onde a doenÃa existe naturalmente como zoonose. Atualmente a urbanizaÃÃo da LTA tem mostrado freqÃentemente um aumento da distribuiÃÃo periurbana. A forma cutÃnea à a mais comum dentre as manifestaÃÃes da LTA, as lesÃes produzidas sÃo em geral indolores, podendo apresentar-se de forma assintomÃtica ou sub-clÃnica. Este estudo teve como objetivo geral descrever os principais aspectos clÃnicos e epidemiolÃgicos da LTA nos municÃpios de Crato, Juazeiro do Norte e Barbalha a partir das fichas de investigaÃÃo do Sistema Nacional de Agravos de NotificaÃÃo (SINAN), geradas no perÃodo de 2003 a 2005. Desse perÃodo, selecionamos 300 fichas de pacientes segundo critÃrios de inclusÃo e exclusÃo definidos na metodologia, sendo 136 do municÃpio do Crato, 98 do municÃpio de Barbalha e 66 do municÃpio de Juazeiro do Norte. A maioria, 53,7 % (137/300) era procedente da zona Rural, porÃm quando analisados isoladamente o municÃpio de Juazeiro do Norte mostrou somente12,2 % ( 8/66 ) dos casos na zona rural. Nessa pesquisa os casos autÃctones foram 99 % (295/300). Prevaleceu o sexo masculino, 51 % (153/300), novamente, de forma isolada o municÃpio de Juazeiro do Norte apresentou uma inversÃo dessa relaÃÃo. A ocupaÃÃo/ramo de atividade dominante em 23 % (69/300) foi de estudantes, seguido de aposentados e agricultores com 16 % (48/300) cada um. A forma clÃnica em destaque foi a cutÃnea com 97 % (291/300). Registramos 69 ocorrÃncias do vetor, dessas, 51 foram no intradomicilio. Para diagnÃstico foram utilizados os exames: parasitolÃgico direto da lesÃo, a intradermorreaÃÃo de Montenegro (IDR) e o histopatolÃgico. O exame parasitolÃgico direto apresentou-se positivo em 19 % (57/300), negativo em 2 % (6/300). A IDR foi reativa em 41 % (123/300), e nÃo reativa em 2 % (6/300). O histopatolÃgico 16 % (49/300) mostrou-se positivo, 3,3 %(10/300) dos casos eram compatÃveis com LTA. ConcluÃmos que a LTA à uma patologia importante no Cariri, comportando-se de forma endÃmica e com caracterÃsticas. / Leishmaniasis is a protozoal disease caused by different species of Leishmania ROSS 1903. In Brazil, American Tegumentary Leishmaniasis (ATL) is no longer predominantly a rural phenomenon, due to the proximity of man to nature, where the disease occurs naturally as a zoonosis, but is now spreading to periurban areas. ATl occurs frequently in the cutaneous form with mostly painless soresor may be asymptomatic or subclinical. The objective of the present study was to describe the main clinical and epidemiological aspects of ATL, in three municipalities in Northeastern Brazil on records of the SINAN disease reporting system covering the period 2003 â 2005. The records of 300 patients were included in the study ( Crato n=136; Juazeiro do Norte n=66; Barbalha n=98). On the average, 53,7% ( 137/300) of the cases Were from the rural zone, with only 12,2% (8/66) registered for Juazeiro do Norte. Autochthonous cases accounted for 99% (295/300). Fifty-one percent (153/300) of the patients were male. Overall, 23% (69/300) were students, 16% (48/300) were formers and 16% (48/300) were retirees. The most common clinical presentations was cutaneous (97%; 291/300), sixty-nine records registered the vector, 51 of wich collected in patients home. In conclusion, ATL is a important endemie pathology in the region.

Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-07-10T18:42:14Z No. of bitstreams: 1 Tese - Luanda de Paula Figueira.pdf: 3791426 bytes, checksum: 6f2542b45b7f04f417269be63181b507 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-10T19:16:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Luanda de Paula Figueira.pdf: 3791426 bytes, checksum: 6f2542b45b7f04f417269be63181b507 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-10T19:56:29Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese - Luanda de Paula Figueira.pdf: 3791426 bytes, checksum: 6f2542b45b7f04f417269be63181b507 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-10T19:56:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese - Luanda de Paula Figueira.pdf: 3791426 bytes, checksum: 6f2542b45b7f04f417269be63181b507 (MD5) Previous issue date: 2013-08-22 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The American Cutaneous Leishmaniasis is a group of diseases with clinical, immunological and pathological distinct, whose expression depends on factors related to the host and the parasite, including the nature of the infecting Leishmania species and host genetic factors. The state of Amazonas is an endemic region for cutaneous leishmaniasis (CL). In this study, we analyzed the clinical and epidemiological aspects of 90 patients with CL in Rio Preto da Eva, third in number of cases in the state, which were identified three species circulating by isoenzyme electrophoresis: Leishmania (Viannia) guyanensis (89 %), L. (V.) naiffi (3.33%) and L. (Leishmania) amazonensis (7.77%). 12 new cases were also described as L. (V.) naiffi, especially the cases occurred in experimental stations of the National Institute for Amazon Research. By combining the technique of two-dimensional electrophoresis with ESI-QTof mass spectrometry, we analyzed the differentially expressed proteins in plasma of patients infected by L. (V.) guyanensis before and after treatment with pentavalent antimony, volunteer donors not infected by this pathogen that is prevalent in the region. It was found that patients infected by this species showed higher expression in the disease of acute phase proteins of infection, such as Factor B and H of the alternative Complement pathway, Haptoglobin protein related (HPR), Fibrinogen alpha chain and a lower expression of Serotrasferrina. These proteins are involved in the inflammatory process of the disease, being necessary to the body's homeostasis. The involvement of these proteins in infection by L. (V.) guyanensis needs to be further investigated. / A Leishmaniose Tegumentar Americana representa um conjunto de doenças com características clínicas, imunológicas e patológicas distintas, cuja expressão depende de fatores relacionados ao hospedeiro e ao parasito, incluindo a natureza da espécie de Leishmania infectante e fatores genéticos do hospedeiro. O estado do Amazonas é uma região endêmica para a Leishmaniose cutânea (LC). Neste estudo, foram analisados os aspectos clínicos e epidemiológicos de 90 pacientes com LC no município de Rio Preto da Eva, terceiro em número de casos no estado, onde foram identificadas por eletroforese de isoenzimas três espécies circulantes: Leishmania (Viannia) guyanensis (89%), L. (V.) naiffi (3,33%) e L. (Leishmania) amazonensis (7,77%). Também foram descritos 12 novos casos de L. (V.) naiffi, com destaque para os casos ocorridos em Estações Experimentais do Instituto Nacional de Pesquisas da Amazônia. Através da combinação da técnica de eletroforese bidimensional com espectrometria de massas ESI-QTof, foram analisadas as proteínas expressas diferencialmente em plasmas de pacientes infectados por L. (V.) guyanensis antes e pós tratamento com antimonial pentavalente e de doadores voluntários não infectados por esta espécie de patógeno, que é predominante na região. Verificou-se que pacientes infectados por esta espécie, apresentaram durante a doença maior expressão de proteínas da fase aguda de infecção, tais como fator B e H da via alternativa do Complemento, Proteína relacionada à Haptoglobina (HPR), Cadeia alfa do Fibrinogênio e uma menor expressão de Serotrasferrina. Essas proteínas estão envolvidas no processo inflamatório da doença, sendo necessárias para a homeostase do organismo. O envolvimento destas proteínas na infecção por L. (V.) guyanensis necessita ser mais bem investigado.

Made available in DSpace on 2015-04-20T12:31:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 thais tibery.pdf: 4504254 bytes, checksum: a80d65e77dee7ec1a7763c37d5698623 (MD5) Previous issue date: 2013-08-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The installation process of leishmaniasis in the host is determined by a complex association between factors related to virulence of the parasite and the host immune response. Factors such as parasite species, its virulence and tropism, besides the genetic condition and host immune trigger different clinical forms in American cutaneous leishmaniasis (ACL). As a result, it is of paramount importance to understand the mechanisms of the immune response against the parasite, cell types, cytokines and response profile involved in this process, since these factors may confer some resistance to the parasite and/or prevent the development reinfection. 33 patients with ACL caused by Leishmania (Viannia) guyanensis, L. (V.) naiffi and L. (Leishmania) amazonensis. The predominant species found was L. (V.) guyanensis representing 73% of cases. The comparative analysis of the cellular and cytokine profile evaluated by the techniques of flow cytometry and ELISA in infected patients was significantly higher than in individuals without infection (control). Apparently, the infection caused by L. (V.) guyanensis induces a higher concentration of pro-inflammatory cytokines (IL-2 and INF-γ) than infection caused by L. (L.) amazonensis, what was not observed in infection by L. (V.) naiffi. There was variation in the concentration of cytokines and cell percentage in samples from infected patients before initiating treatment with pentavalent antimony compared to the control group and after treatment. The percentage of CD4+ T cells prior to treatment was greater than CD8+ T cells. Lower percentage of regulatory T cells was observed before treatment. These results indicate that there is influence of immune response modulation on Leishmania infection and infections caused by L. (V.) guyanensis have exacerbated the response to infection caused by the other species studied here. / O processo de instalação da leishmaniose no hospedeiro é determinado por uma complexa associação entre fatores relacionados à virulência do parasito e a resposta imune do hospedeiro. Fatores como a espécie parasitária, sua virulência e tropismo, além da condição genética e imunológica do hospedeiro desencadeiam diferentes formas clínicas na Leishmaniose tegumentar Americana (LTA). Em decorrência disso, é de suma importância compreender os mecanismos da resposta imune contra o protozoário, os tipos celulares, as citocinas e o perfil da resposta envolvida nesse processo, uma vez que, esses fatores podem conferir certa resistência ao parasito e/ou impedir o desenvolvimento de nova infecção. Foram avaliados 33 pacientes com LTA, causada por Leishmania (Viannia) guyanensis, L. (V.) naiffi e L. (Leishmania) amazonensis. A espécie predominante encontrada foi L. (V.) guyanensis representando 73% dos casos. A análise comparativa do perfil celular e das citocinas avaliadas pelas técnicas da Citometria de fluxo e ELISA nos pacientes infectados foi significativamente maior do que nos indivíduos sem infecção (controle). Aparentemente, a infecção causada por L. (V.) guyanensis, induz maior concentração de citocinas pró-inflamatórias (IL-2 e INF-γ) do que infecção causada por L. (L.) amazonensis, o mesmo não foi observado na infecção por L. (V.) naiffi. Verificou-se variação na concentração das citocinas e no percentual celular nas amostras dos pacientes infectados antes do início do tratamento com antimonial pentavalente quando comparado ao grupo controle e ao término do tratamento. O percentual de linfócitos T CD4+ antes do tratamento foi maior do que linfócitos T CD8+. Menor porcentagem de células T regulatórias foi observada antes do tratamento. Esses resultados indicam que existe influência da resposte imune na modulação da infecção por Leishmania e que infecções causadas por L. (V.) guyanensis apresentam resposta mais exacerbada do que a infecção causada pelas outras espécies aqui estudadas.

A leishmaniose visceral (LV) à um sÃrio problema de saÃde pÃblica na AmÃrica Latina e vem apresentando uma letalidade crescente no Brasil. à uma doenÃa infecciosa sistÃmica que envolve a medula Ãssea, causando vÃrias manifestaÃÃes hematolÃgicas. Objetivos: Descrever as caracterÃsticas da medula Ãssea na LV e correlacionar os achados citomorfolÃgicos com parÃmetros do sangue perifÃrico e com os sinais de gravidade da doenÃa. Metodologia: Trata-se de um estudo retrospectivo, com levantamento dos dados clÃnicos e laboratoriais de pacientes atendidos em trÃs hospitais de referÃncia no Estado do CearÃ, entre junho de 2001 a agosto 2010. Foram incluÃdos 126 pacientes com diagnÃstico de LV, confirmado pela detecÃÃo do parasito na medula Ãssea e/ou pela sorologia positiva, atravÃs do rK39. As lÃminas dos mielogramas de todos os pacientes foram avaliadas e a carga parasitÃria e os parÃmetros hematolÃgicos foram determinados. A gravidade foi determinada pelo risco de Ãbito, utilizando sistema de escores. Resultados: A idade variou de 5 meses a 79 anos e 74% eram do gÃnero masculino. Os pacientes residentes em regiÃo urbana representaram 68,2% da casuÃstica. Comorbidades estavam associadas em 31,7% dos pacientes. Os achados mais frequentes da medula Ãssea foram carga parasitÃria moderada/alta (57,2%), displasia com predomÃnio de diseritropoese (80,9%), hemofagocitose (30,1%) e granuloma (22,2%). Houve uma associaÃÃo positiva entre a carga parasitÃria com neutropenia grave, neutrÃfilos <500/mm3 (p=0,04) e hemofagocitose (p=0,05). No presente trabalho, utilizando o modelo de prognÃstico baseado em escores, foi observado que 23,8% foram classificados como pacientes com alto risco de Ãbito (&#8805; 3). A maioria dos pacientes com escore considerado de alto risco de Ãbito apresentou medula Ãssea normocelular, carga parasitÃria moderada/alta, diseritropoese e disgranulopoese. Em relaÃÃo à presenÃa de granuloma, houve uma associaÃÃo negativa, estatisticamente significante, nos pacientes com alto risco de Ãbito (p=0,02). O estudo aponta para possÃveis indicadores diagnÃsticos e de prognÃsticos identificÃveis na medula Ãssea de pacientes com LV / The visceral leishmaniasis (VL) is a serious problem of public health in the Latin America and has shown an increase mortality in the Brazil. This is a systemic infectious disease involving the bone marrow, causing many hematologic manifestations. Objetives: to describe LV bone marrow features and correlate cytomorphological findings with peripheral blood parameters and the disease severity: Methodology: It is a retrospective study with gathering clinical and laboratory data of patients attended at three references hospital of Cearà State between june 2001 and August 2010. Were included 126 patients with a LV diagnosis confirmed by detection of the parasite in bone marrow and/or by positive sorology, by rK39. The slides of bone marrow aspiration of all patients were evaluated and the parasite load and the hematologic parameters were determined.The gravity was determined by the risk of death using the scoring system. Results: The age ranged from 5 months to 79 years and 74% were male. The patients from urban area accounted 68,2%. Comorbidities were associated in 31,7% patients. The more frequently finding of bone marrow were moderate/high parasite load (57,2%), dysplasia with predominance of dyserythropoiesis (80,9%), hemophagocytosis (30,1%) and granuloma (22,2%).There was one positive association between parasite load and serious neutropenia, neutrophil <500/mm3 (p=0,04), and hemophagocytosis (p=0,05). In this present study, using the model predictions based on scores was observed that 23,8% were classified as high risk of death. Most patients with a score considered with high risk of death had normocelular bone marrow, parasite load moderate/high, dyserythropoiese and dysgranulopoiese. In relation to the presence of granuloma there was a negative association statistically significant in the patients with high risk of death (p=0,02). The study points to possible diagnostic and prognostic indicators identified in the bone marrow of patients with VL

Submitted by JÚLIO HEBER SILVA (julioheber@yahoo.com.br) on 2017-05-02T18:25:08Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ana Carolina Vieira da Costa - 2017.pdf: 14344522 bytes, checksum: b31bb0d6ea37eec29c70d7d93855498f (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-05-03T11:56:23Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ana Carolina Vieira da Costa - 2017.pdf: 14344522 bytes, checksum: b31bb0d6ea37eec29c70d7d93855498f (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-03T11:56:23Z (GMT). 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Peripheral blood from patients with active lesions and no treatment, and from healthy blood donors paired by sex and age, was diluted into culture medium and incubated with lipopolysaccharide (LPS), TLR4 agonist; lipopeptide Pam3Cys (Pam), TLR2 agonist; muramyldipeptide (MDP), NOD2 agonist or Leishmania (V.) braziliensis antigen (Ag). After incubation, supernatants were collected to measure IL-6 and TNF (6 h) and IL-10 (24 h) by ELISA. There was production of IL-6, TNF and IL-10 in cultures from patients and controls after stimulation with all agonists and Ag (p < 0.05, medium vs stimulus, n = 29). No differences were detected between concentrations of TNF and IL-10, but IL-6 was higher produced in non-stimulated cultures from patients than controls (p < 0.05, n = 29) or when the stimulus was MDP (p < 0.05, n = 19). The combination Pam/MDP increased the production of IL-6, TNF and IL-10 in cultures from patients and controls when compared with each stimulus isolated (p < 0.05, n = 13 - 14); similarly, Ag and MDP together induced higher concentrations of IL-6, TNF and IL-10 (IL-6 and IL-10, especially in cultures from patients) in comparison with each stimulus (p < 0.05, n = 11 - 14). There was no correlation between the number, size or time of lesions and levels of IL-6, TNF or IL-10. Patients with more than one cycle of treatment to obtain clinical cure showed higher levels of MDP-induced IL-6 than those cured with one cycle of treatment (p < 0.05, n = 17 cured with one cycle vs 8 cured with more than one cycle). Data suggest that LCL patient monocytes can be activated via TLR2, TLR4 or NOD2 to produce pro-inflammatory (IL-6, TNF) and anti-inflammatory (IL-10) cytokines and IL-6 can be associated with tissue lesion and delay of lesion healing indicating an immunopathogenic role in LCL. / A Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA) é causada por protozoários do gênero Leishmania, que acomete a pele e/ou mucosas. Os monócitos são precursores de macrófagos, células hospedeiras do parasito, e pouco se sabe sobre seu nível de ativação durante a LTA. O presente estudo teve como objetivo avaliar o perfil de resposta de citocinas produzidas por monócitos de pacientes com leishmaniose cutânea localizada (LCL) em hemoculturas, após ativação com agonistas de receptores similares a toll (TLRs) e de receptor NOD2. O sangue periférico de pacientes com LCL, com lesões ativas e sem tratamento, e de indivíduos controles, pareados por sexo e idade, foi diluído em meio de cultura e incubado com lipopolissacarídeo (LPS), agonista de TLR4; lipopeptídeo Pam3Cys (Pam), agonista de TLR2; muramildipeptídeo (MDP), agonista de NOD2 ou antígenos de Leishmania (V.) braziliensis (Ag). Após incubação, os sobrenadantes foram colhidos para dosagem de IL6 e TNF (6 h) e IL-10 (24 h), por ELISA. Nas hemoculturas dos pacientes e dos controles, houve produção de IL-6, TNF e IL-10, após incubação com todos os estímulos (p < 0,05, Meio vs estímulos, n = 29). Ao comparar pacientes e controles, não houve diferença quanto à produção de TNF e IL-10, mas a produção de IL-6 foi maior nas hemoculturas não estimuladas dos pacientes (p < 0,05, n = 29) e na presença do MDP (p < 0,05, n = 19). A combinação Pam/MDP aumentou a produção de IL-6, TNF e IL-10 nas hemoculturas dos pacientes e controles, em relação a cada estímulo sozinho (p < 0,05, n = 13 - 14); de maneira similar, Ag e MDP juntos aumentaram a concentração de IL-6, TNF e IL-10 (IL-6 e IL-10, especialmente nas hemoculturas dos pacientes) (p < 0,05, n = 11 - 14). Não houve correlação significante entre o número, o tamanho e o tempo das lesões dos pacientes com LCL e as concentrações de IL-6, TNF e IL-10 nas hemoculturas dos mesmos. Quando comparados os pacientes clinicamente curados após um ciclo de medicamento e aqueles clinicamente curados após mais de um ciclo de medicamento em relação às concentrações de TNF e IL-10 não foram detectadas diferenças significantes entre os grupos, porém, em relação à produção de IL-6, foi observado que esta foi mais elevada nos pacientes curados com mais de um ciclo de medicamento, após o estímulo MDP (p < 0,05, n = 17 curados com 1 ciclo vs 8 xv curados com mais de 1 ciclo). Os dados sugerem que os monócitos de pacientes com LCL podem ser ativados via TLR2, TLR4 e NOD2, induzindo a produção de citocinas pró-inflamatórias (IL-6, TNF) e anti-inflamatória (IL-10) e a IL-6 pode estar associada ao dano tecidual e a demora na cura dos pacientes, possuindo um papel imunopatogênico na LCL humana.