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Seleção genômica para a composição de ácidos graxos da carne em bovinos Nelore /Chiaia, Hermenegildo Lucas Justino. January 2017 (has links)
Orientador: Fernando Sebastián Baldi Rey / Banca: Raysildo Barbosa Lobo / Banca: Danisio Prado Munari / Banca: Fabyano Fonseca e Silva / Banca: Humberto Tonhati / Resumo: Existem diferentes métodos e pseudo-fenótipos utilizados em predições genômicas, sendo necessário determinar o ideal para a característica de interesse. Os ácidos graxos da carne que contribuem de forma prejudicial para a saúde humana têm recebido considerável atenção nos últimos anos. O objetivo desse estudo foi avaliar a acurácia de predição genômica de diferentes métodos (SNP-BLUP, BayesC, BayesCπ e Bayesian Lasso) e pseudo-fenótipos (fenótipo ajustado para os efeitos fixos, valor genético estimado via pedigree e valor genético genômico obtido pelo método single step GBLUP) em dados simulados e reais de perfil de ácidos graxos no músculo Longissimus thoracis da raça Nelore terminados em confinamento. A proposta de inclusão do GEBV obtido pelo método passo único genômico BLUP (ssGBLUP) como pseudofenótipo nesta pesquisa é inédita em predição genômica, para responder um dos problemas frequentes ao utilizar a matriz advinda da informação genealógica, pela maioria dos produtores de gado de corte utilizarem o sistema de acasalamento que utiliza reprodutores multiplos. Foram utilizados cerca de 963 bovinos machos inteiros da raça Nelore terminados em confinamento e genotipados com um painel de 777.962 SNPs do Ilumina BovineSNP BeadChip. A informação genômica pode servir para melhorar o perfil de ácidos graxos em animais do grupo Zebu, por ter-se observado valores genômicos preditos com com acurácia de baixa a moderada magnitude. Nenhum dos métodos foi melhor para todos os ácidos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: There are different methods and pseudo-phenotypes used in genomic predictions, being necessary to determine the ideal for each trait of interest. Beef fatty acids that contribute to human health have received considerable attention in the last years. Thus, the objective of this study was to evaluate genomic predition accuracy of different methodologies (SNP-BLUP, BayesCπ, BayesC and Bayesian Lasso) pseudo-phenotypes (adjusted phenotype, estimated breeding value and genomic estimated breeding value by ssGBLUP) in simulated and real data of fatty acid profile in the Longissimus thoracis muscle of Nelore cattle finished in feedlot. The inclusion of the GEBV obtained by single step genomic BLUP (ssGBLUP) method as pseudo-phenotype in this research is innovator in genomic prediction, to answer one of the frequent problems when using the matrix derived from pedigree, by the mating system that uses multiple sires for many cattle breeders. A total of 963 Nelore bulls with phenotype for fatty acid profiles, were genotyped using the Illumina Bovine HD Bead Chip with 777,962 SNPs. Genomic information can assist in improving fatty acid profile in Zebu animals, since the use of genomic information yielded genomic values for fatty acid profile with accuracies ranging from low to moderate. None of the methods excelled in terms of accuracy, however the SNP-BLUP method allows obtaining less biased genomic evaluations. The ssGBLUP model is an appropriate alternative to obtaining more reliable and less biased GEBVs as pseudo-phenotypes in situations of missing pedigree, due to high proportion of multiple sires, being more appropriate than the EBVs or adjusted phenotypes for fixed effect to predict direct genomic values. / Doutor
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Metodologia analítica para a determinação de ácidos graxos em óleo vegetalBöckel, Wolmir José January 2009 (has links)
A separação cromatográfica de misturas de compostos hidrofóbicos, com cadeias carbônicas longas, apresenta dificuldades como, por exemplo, o entupimento da coluna de separação. Assim, técnicas alternativas de separação e quantificação destes compostos têm sido investigadas. O aumento da cadeia carbônica diminui drasticamente a solubilidade dos ácidos graxos em meios solventes, porém esta limitação é contornada preparando a amostra de óleo na forma de microemulsão (ME), permitindo o emprego de técnicas eletroanalíticas em razão da elevada condutividade característica desses sistemas. Este trabalho teve por objetivo o desenvolvimento de metodologia analítica para a quantificação de ácidos graxos livres presentes em óleo de soja diretamente na amostra, sem a necessidade de extração prévia, empregando cromatografia eletrocinética capilar em microemulsões (MEEKC) e eletroforese capilar em solventes orgânicos, ambas com detecção oscilométrica. Foi investigado o comportamento eletroquímico de MEs constituídas de dodecil sulfato de sódio, SDS, pentanol e água, cujo diagrama de fases apresenta uma ampla região de miscibilidade, bem como de microemulsões contendo óleo de soja. Nessa região, para uma faixa de composições correspondendo a diferentes tipos de microemulsões, foram estudadas propriedades como o comportamento das fases e a influência da natureza do cosurfactante e quantificados parâmetros físico-químicos ainda desconhecidos nesses meios, por exemplo, sua condutividade, raio, carga elétrica e coeficiente de difusão das gotículas. Na caracterização das MEs foram empregadas as técnicas de espalhamento de luz dinâmico (DLS), espalhamento de raios-x a baixo ângulo (SAXS), voltametria potenciodinâmica, espectroscopia de impedância eletroquímica (EIS) e condutometria. A identificação dos ácidos oléico e palmítico foi realizada em corridas individuais, usando como eletrólito de corrida uma mistura de NaOH, DMF e butanol, com um tempo de análise em torno de 50 minutos, aproximadamente. Já para a ME utilizando como eletrólito de corrida octano, 1-butanol e SDS em tetraborato de sódio aquoso, não houve a separação dos ácidos mencionados. O eletrólito de corrida que melhor atendeu aos requisitos necessários para a determinação da concentração do ácido oléico livre em óleo de soja foi uma mistura contendo 4 x 10-2 mol L-1 de KOH em metanol:propanol na proporção de 1:6, e 10 % em etilenoglicol, com um tempo de análise relativamente pequeno, comparativamente ao sistema hidroorgânico. / The chromatographic separation of hydrophobic compounds from mixtures presents some difficulties such as the occlusion of the column. Therefore, alternative techniques to separate and quantify these compounds have been investigated. Although the solubility of fatty acids in most solvents falls significantly with increasing carbon chain length this difficulty can be surmounted by preparing the oil sample as a microemulsion (ME) which allows carrying on electroanalytical measurements due to the higher conductivity these systems present as compared to oils and fats. The aim of this study is to develop analytical methodology in order to quantify free fatty acids in soybean oil, without previous extraction, by microemulsion electrokinetic capillary chromatography (MEEKC) and capillary electrophoresis, both with oscillometric detection. The electrochemical behavior of microemulsions (MEs) prepared with n-pentanol, SDS and water, the phase diagram of which presents a large miscibility region, as well as MEs containing soybean oil, have been investigated. In this region, for composition ranges corresponding to different types of MEs, the behaviour of the phases and the role of the cosurfactant nature have been investigated. Moreover, some physical-chemical parameters, up to now unknown in the studied media, such as conductivity, radii of the particles and their diffusion coefficient were quantified. Techniques such as dynamic light scattering (DLS) and small angle x-ray scattering (SAXS), linear voltammetry, electrochemical impedance spectroscopy and conductometry were employed in the characterization of the MEs. A carrier electrolyte prepared with a mixture of NaOH, DMF and butanol evidenced the presence of either oleic and palmitic acids in individual runs with a time analysis around 50 minutes. For a soybean oil ME using octane, 1-butanol and SDS in aqueous sodium tetraborate as carrier electrolyte there was no separation of the mentioned fatty acids. Finally, the carrier electrolyte prepared with 4 x 10-2 mol L-1 KOH in metanol:propanol 1:6 and, w/w, and 10 % ethileneglycol allowed the determination of the free oleic acid content in a soybean oil sample with a quite short time of analysis as compared to the previous system.
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Composição de ácidos graxos e de fitoesteróis em frutos de quatro variedades de abacate (Persea Americana MILLl)Rocha, Tatiana Evangelista da Silva January 2008 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Nutrição, 2008. / Submitted by wesley oliveira leite (leite.wesley@yahoo.com.br) on 2009-09-22T19:58:34Z
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Previous issue date: 2008 / Os fitosteróis, presentes na porção insaponificável das gorduras dietéticas,
têm sido apontados como fator protetor contra as doenças cardiovasculares e o
ácido graxo oléico tem sido estudado com evidências de efeitos positivos na
prevenção e tratamento de doenças crônicas. Devido à elevada riqueza nestes dois
componentes apresentada pelos frutos de abacate, este estudo teve como objetivo
avaliar quatro variedades desta fruta quanto ao seu conteúdo de ácidos graxos e de
fitosteróis. Dentre as variedades estudadas (Wagner, Fortuna, Fuerte e Hass),
Fuerte (20,09±3,16g/ 100g) e Wagner (20,99±1,43g/ 100g) foram as que
apresentaram maiores concentrações lipídico (p < 0,05), e Fuerte foi a variedade
mais rica em ácido oléico (63,16 ±0,11%). O perfil de fitoesteróis foi
significativamente diferente entre as quatro variedades analisadas. O -sitosterol foi
o mais abundante dos quatro esteróis identificados no estudo, e a variedade Fuerte
foi a mais rica nesta molécula (207,21±17,63mg/100g) (p < 0,05). Traços de
colesterol foram encontrados nas variedades Fortuna e Fuerte. O conteúdo lipídico e
de fitoesteróis elevaram-se com a evolução da maturação do fruto, porém o perfil
dos ácidos graxos permaneceu inalterado. Os conteúdos lipídico, de ácido oléico e
de -sitosterol foram maiores no período final da safra. Os resultados deste trabalho
indicam que, dentre as variedades estudadas, Fuerte é a mais indicada para
consumo visando os benefícios comprovados deste ácido graxo e dos fitoesteróis à
saúde. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The phytosterols, present in the non saponifiable portion of dietary fats have
been pointed out as protective against cardiovascular diseases. The oleic acid is
another compound with positive effects on the treatment and prevention of chronic
diseases. Therefore, this study has evaluated four varieties of avocado (Persea
americana Mill) for the composition of fatty acids and phytosterols. Among analyzed
varieties (Wagner, Fuerte, Fortuna and Hass) analysed, Fuerte (20.09±3.16g/ 100g)
and Wagner (20.99±1.43g/ 100g) presented the highest lipid content (p < 0.05).
Fuerte showed the highest content of oleic acid (63.16 ±0.11%). The amount of
phytosterols was significantly different among the four analyzed varieties, being -
sitosterol the most abundant out of the four sterols identified in the study, and Fuerte
the richest variety in this compound (207.21±17.63mg/100g) (p < 0.05). Traces of
cholesterol were found in the Fortuna and Fuerte varieties. The content of lipids and
phytosterols increased with the ripening of the fruit; however, the amount of the fatty
acid remained unchanged. The content of total lipids, oleic acids and -sitosterol
were higher at the end of the harvest period. The results of this study indicate that
the Fuerte variety may be the most appropriated fruit for consumption, aiming at the
proven benefits of fatty acid and the phytosterols to health.
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Validação e reprodutibilidade de um questionário de freqüência alimentar para adultos, com enfoque em lipídeos, para uso em estudos sobre fatores de risco para doenças crônicas não transmissíveisVasconcelos, Tatiana França de January 2008 (has links)
Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Nutrição, 2008. / Submitted by wesley oliveira leite (leite.wesley@yahoo.com.br) on 2009-09-22T20:26:28Z
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Previous issue date: 2008 / Objetivo: Validar e testar a reprodutibilidade de um questionário de freqüência
alimentar (QFA), com enfoque no consumo de lipídios e de ácidos graxos (AG), para uma
população adulta do Distrito Federal, e testar a validade do consumo de frutas e hortaliças como
instrumento indicador de ingestão nutricional desta população. Método: Foram aplicados quatro
recordatórios de 24 horas (R24) e dois QFA, em entrevistas domiciliares. Participaram da pesquisa
homens e mulheres com idade igual ou maior que 18 anos e que já tinham respondido ao
questionário do projeto piloto do VIVA saúde DF, no qual perguntou-se a freqüência de consumo
de frutas e hortaliças. O QFA foi elaborado com base no primeiro R24 e para a validação foram
analisadas as seguintes variáveis: energia, carboidrato, proteína, lipídios totais, fibras, colesterol,
totais de ácidos graxos saturados, monoinsaturados, poliinsaturados e trans e os AG 12:0, 16:0,
18:1n-9, 18:2n-6, 18:3n-3, 20:4n-6, 22:6n-3, 20:5n-3, 16:1t, 18:1t, 18:2t. Resultados: 112 adultos
responderam a pelo menos um dos inquéritos alimentares. As médias de ingestão pelo QFA foram
superiores que as médias analisadas pelos R24, com significância estatística para energia,
carboidrato, proteína, fibra, colesterol, AG 16:0 e AG 16:1t. Em relação à validação, para os 11 AG
analisados, 7 apresentaram correlações significativas e os melhores resultados foram para 18:1n-9,
18:2n-6, 18:3n-3, 18:1t e 18:2t (r > 0,4). Para a reprodutibilidade, todas as correlações foram
significativas para os 17 nutrientes analisados e, destes, 82% apresentaram correlações superiores a
0,4. Para a validação do consumo de frutas e hortaliças como indicador de ingestão nutricional, as
melhores correlações foram obtidas entre o somatório do consumo de frutas e hortaliças e a ingestão
energética e de lipídio dos R24 (p < 0,01). Estes resultados sugerem que há uma relação entre o
maior consumo de frutas e hortaliças e menor ingestão de energia e lipídio. Conclusão: O QFA
elaborado apresentou boa validade e reprodutibilidade. Os AG que apresentaram melhor coeficiente
de validação foram 18:1n-9, 18:2n-6, 18:3n-3, 18:1t e 18:2t. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Objective: To validate and test the reproducibility of a food frequency questionnaire (FFQ),
focused on lipids and fatty acids (FA), for an adult population of Distrito Federal, and to test the
validity of a fruit and vegetable intake questionnaire as an indicator of nutrient intake of this
population. Methods: Four 24-hour dietary recalls (24DR) and two FFQ were applied in a home
interview. Subjects of this study were men and women of 18 years of age or older, participants of a
pilot study of the VIVA saúde DF project and had answered a questionnaire about fruits and
vegetable frequencies of intake. The FFQ were developed based on the first 24DR and following
nutrients were the validation variables: energy, carbohydrate, protein, lipids, fiber, cholesterol,
saturated FA, monounsaturated FA, polyunsaturated FA, trans FA and the FA 12:0, 16:0, 18:1n-9,
18:2n-6, 18:3n-3, 20:4n-6, 22:6n-3, 20:5n-3, 16:1t, 18:1t, 18:2t. Results: 112 adults answered at
least one questionnaire. The mean nutrient intake using FFQ were generally higher than those
obtained from 24DR, with statistical significance to energy, carbohydrate, protein, fiber,
cholesterol, and the FA 16:0 and 16:1t. For the validity analyses, of the eleven FA, seven were
significantly correlated and the best results were for the FA 18:1n-9, 18:2n-6, 18:3n-3, 18:1t and
18:2t (r > 0.4). For the reproducibility analyses, all seventeen nutrients evaluated were significantly
correlated and 82% of them had correlations above 0.4. For the validation of fruit and vegetable
consumptions as indicators of nutrient intake, the best correlations were obtained between the sum
of fruit and vegetable intake and the energy and lipid ingested in the 24DR (p < 0.01). These results
suggest the existence of a negative relationship between energy and lipid consumptions and the
intake of fruits and vegetables. Conclusions: The FFQ developed in this study has good validity
and reproducibility. The FA with the highest validities were 18:1n-9, 18:2n-6, 18:3n-3, 18:1t, 18:2t.
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Alterações dos ácidos biliares na diarreia aguda e persistente e enteropatia ambiental assintomáticaCruz, Aristides Schier da [UNIFESP] January 1997 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2015-12-06T22:59:14Z (GMT). No. of bitstreams: 0
Previous issue date: 1997 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A proliferacao de enterobacterias no intestino delgado (ID), especialmente anaerobias, promove reacoes enzimaticas que modificam a estrutura dos acidos biliares conjugados. Atraves de desconjugacao e 7α-desidroxilacao, formam-se acidos biliares capazes de provocar alteracoes funcionais e morfologicas na mucosa intestinal.Foram colhidas amostras de aspirado duodenal de 74 lactentes: 23 com diarreia aguda (Grupo I), 17 com diarreia persistente (Grupo II) e 34 com enteropatia ambiental assintomatica (Grupo III). As amostras foram submetidas a cultura e contagem de colonias de enterobacterias e cromatografia de camada delgada para acidos biliares. Nos 3 grupos a incidencia de proliferacao de enterobacterias no ID foi muito alta. Dos 74 lactentes estudados, 19 (25,7%) apresentavam acidos biliares desconjugados no intestino delgado: 4 (17,4%) no Grupo I, 5 (29,4%) no Grupo II e 10 (29,4%) no Grupo III, sem haver diferenca significante entre os 3 grupos. Os acidos biliares desconjugados encontrados foram: acido colico (14 casos); acido quenodeoxicolico (4 casos); acido deoxicolico (1 caso); acido litocolico (5 casos). Nao houve correlacao entre os isolamentos bacterianos no ID e presenca de acidos biliares desconjugados. Conclui-se que acidos biliares desconjugados e 7α-desidroxilados por enterobacterias frequentemente estao presentes no duodeno em grupos de lactentes com alta incidencia de proliferacao bacteriana no ID. Notavelmente, este fenomeno ocorreu mesmo em lactentes assintomaticos portadores de enteropatia ambiental, sendo este um dos provaveis mecanismos responsaveis pela desnutricao infantil nas comunidades carentes / Small-bowel (SB) bacterial overgrowth, mainly when anaerobes
are present, leads to enzymatic reactions that modify the structure of conjugated
primary bile acids. By deconjugation and 7-dehydroxylation, bile acids capable of
promoting functional and morphological derangements in the intestinal mucosa are
formed.
Samples of duodenal fluid were colected from 74 infants: 23
with acute diarrhea (group I), 17 with persistent diarrhea (group II), and 34 with
asymptomathic environmental enteropathy (group III). All samples were submited to
culture and colony counting for enterobacteriaceae, and bile acid thin-layer
chromatography.
The incidence of overgrowth of enterobacteriaceae in the SB
was very high in the 3 groups. Unconjugated bile acids were found in the SB in 19
(25,7%) of the 74 infants studied: 4 (17,4%) in group I, 5 (29,4%) in group II, and 10
(29,4%) in group III. The unconjugated bile acids found were: cholic acid (14 cases);
chenodeoxycholic acid (4 cases); deoxycholic acid (1 case); lithocholic acid (5
cases). There was no correlation between bacterial isolates in the SB and the
presence of unconjugated bile acids.
In conclusion, deconjugated and 7-dehydroxylated bile acids
are frequently present in duodenum of groups of infants with high incidence of SB
bacterial overgrowth. Interestingly, this situation was present even in asymptomathic
environmental enteropathic infants, and probably this is one of the mechanisms
responsible by the poor nutritional state of children living in developing countries. / BV UNIFESP: Teses e dissertações
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Estudo físico-químico de uma mistura de biossurfactantes e a associação com poli(oxietileno)Eising, Renato January 2009 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química / Made available in DSpace on 2012-10-24T17:47:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1
264149.pdf: 921946 bytes, checksum: fd949c53f368e84965f588fe1b9096a3 (MD5) / Investigou-se as propriedades da mistura de surfactantes SDoD-NaC na ausência e em presença de PEO em tampão Tris/HCl 20mmol L-1 a 25,0 oC e pH 9,00 por meio de medidas de condutividade elétrica, viscosidade, fluorescência do pireno e cinéticas de reação do PNPA e 5-NBI. As medidas dos parâmetros de associação, cmc, cac, psp e outras características como a inclinação nos perfis de condutividade, o efeito da concentração do polímero no parâmetro cac, e microambientes micelares foram aqui investigadas. Os resultados foram expressos em termos de gráficos de condutividade específica, condutividade equivalente, ?rel e I1/I3 vs. a concentração de surfactante. Teorias baseadas em conceitos de micelização de mistura de surfactantes foram aplicadas para simular a variação da cmc em função da mistura. Através das técnicas utilizadas neste trabalho não se observou diferença no resultados na ausência e em presença de PEO em concentrações abaixo de 30mmolL-1 de NaC, onde há predomínio de micelas primárias. Acima de 30mmolL-1, com formação de micelas secundarias, há interação NaC e PEO. Com a adição de SDoD à mistura conclui-se que independente da concentração de PEO a formação dos complexos mistos SDoD-NaC-PEO ocorre somente em frações molares acima de 0,9 de SDoD. As cinéticas de reação de ambos os substratos utilizados mostraram sensibilidade aos diferentes agregados micelares SDoD-NaC.
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Síntesis y caracterización de resinas alquídicas a partir del ácido graso vegetal proveniente del sacha inchi (plukenetia volubilis)Flores Lima, Artemio 15 January 2018 (has links)
El presente trabajo de investigación tuvo como finalidad el estudio de la síntesis y caracterización de las resinas alquídicas a partir del ácido graso vegetal, proveniente del sacha inchi (plukenetia volubilis). En la actualidad, el aceite de mayor uso y de gran demanda para aplicaciones industriales es el aceite de linaza, debido a que presenta un elevado grado de ácidos poliinsaturados, brindándole buenas propiedades secantes a las resinas por ello se busca alternativas con alta eficiencia tal como el aceite de sacha inchi, que presenta en su composición un elevado grado de ácidos poliinsaturados, reportando un valor de índice de iodo de 189, considerado como aceite secante y capaz de formar películas secas y duras. Para la formulación de estas resinas alquídicas se determinó el
punto gel, mediante el método de funcionalidad del sistema y el cálculo del número ácido. Se sintetizaron dos tipos de resina: una de cadena corta, con un 40% en peso de aceite y otra, de cadena mediana, con un 54% en peso del aceite. Para ambos casos se compararon sus propiedades con resinas alquídicas sintetizadas con aceite de linaza. Las resinas alquídicas en base al aceite de sacha inchi presentaron una mejor retención de color (valores menores a 3 en la escala Gardner), además de tener menor tiempo de secado y una dureza de película similar a las resinas alquídicas sintetizadas con el aceite de linaza. Las resinas de sacha inchi tuvieron modificaciones de un máximo de 4% en peso del
anhídrido ftálico por el anhídrido maleico. Esta modificación le dio a la resina una mayor reactividad, debido a los enlaces insaturados, obteniendo mejores tiempos de secado. Los ensayos realizados por espectroscopía infrarroja con transformada de Fourier (FTIR), mostraron enlaces esteres que demostraron la formación del poliéster tanto para las resinas alquídicas de sacha inchi como para las de linaza. Los ensayos de termogravimetría (TGA) y el análisis térmico diferencial (DTG), determinaron sus propiedades térmicas, sobresaliendo las resinas que contenían en su formulación anhídrido maleico; esto debido a que le brindó un aumento de su densidad de reticulación. Por lo tanto, se demostró que las resinas alquídicas sintetizadas con el aceite de sacha inchi tienen propiedades muy similares a las resinas sintetizadas con el aceite de linaza, incluso mejorando la retención de color, tiempo de secado y estabilidad térmica. / Tesis
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Composição dos ácidos graxos séricos em pacientes com diabete melito tipo 2 e microalbuminúriaPerassolo, Magda Susana January 2002 (has links)
A hipercolesterolemia é um importante fator de risco para o desenvolvimento da nefropatia diabética em pacientes com diabete melito tipo 2 (DM2). Têm sido descritas alterações na composição dos ácidos graxos (aumento na proporção de ácidos graxos saturados e monoinsaturados e redução da família n-6) em pacientes com DM2 e hiperlipidemia. No entanto, a composição de ácidos graxos nas lipoproteínas de pacientes DM2, particularmente naqueles com microalbuminúria, não é conhecida. O objetivo deste trabalho foi analisar a composição dos ácidos graxos séricos nas frações fosfolipídeos, triglicerídeos e ésteres de colesterol, e o perfil lipídico sérico de pacientes DM2 micro- e normoalbuminúricos. Foi realizado um estudo caso-controle com 72 pacientes DM2: 37 normoalbuminúricos (excreção urinária de albumina [EUA] < 20μg/min: imunoturbidimetria) e 35 microalbuminúricos (EUA entre 20 e 200μg/min). Os pacientes receberam orientação nutricional de acordo com as recomendações da Associação Americana de Diabete e foram acompanhados por 4 semanas. Após este período foi analisada a composição dos ácidos graxos nas frações fosfolipídeo, triglicerídeo e ésteres de colesterol, determinada por cromatografia gasosa. O colesterol total e triglicerídeos séricos foram dosados por método enzimático colorimétrico; o colesterol HDL e frações HDL2 e HDL3 por dupla precipitação com heparina, MnCl2 e sulfato de dextran; a apolipoproteína B por imunoturbidimetria; e o colesterol LDL foi calculado pela fórmula de Friedewald. A aderência à orientação da dieta foi avaliada por registro alimentar com pesagem de alimentos e dosagem de uréia urinária de 24h (método cinético) para cálculo da ingestão protéica. Nos pacientes microalbuminúricos, a proporção de ácidos graxos poliinsaturados na fração triglicerídeo (24,8 ± 11,0%) foi menor do que nos pacientes normoalbuminúricos (34,1 ± 11,3%; P = 0,001), principalmente na família n-6 (21,7 ± 10,5 vs. 31,4 ± 11,5%; P < 0,001). Pacientes com microalbuminúria também apresentaram níveis maiores de ácidos graxos saturados na fração triglicerídeo (43,4 ± 18,0%, vs. 34,7 ± 13,1%; P = 0,022). Feita a regressão logística múltipla, somente a proporção de ácidos graxos poliinsaturados na fração triglicerídeo permaneceu significativa quando associada com microalbuminúria (OR = 0,92; 95% IC = 0,85-0,98; P = 0,019). Na fração ésteres de colesterol, os pacientes microalbuminúricos apresentaram menor proporção de ácidos graxos poliinsaturados n-3 (3,44 ± 3,39% vs. 5,98 ± 6,56%; P = 0,044). Não se observou diferença na composição de ácidos graxos na fração fosfolipídeo entre os dois grupos de pacientes. Os níveis de colesterol total, colesterol HDL, colesterol LDL, triglicerídeos e apolipoproteína B não foram diferentes entre os pacientes normo- e microalbuminúricos. Pacientes com DM2 e microalbuminúria apresentam níveis menores de ácidos graxos poliinsaturados, principalmente na família n-6 na fração triglicerídeo. Esta associação pode representar um fator de risco para a doença cardiovascular e pode contribuir para a progressão da nefropatia diabética.
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Determinação de ácidos graxos trans e modulação da expressão de receptores ativadores da proliferação de peroxissomos (PPARs) em tecido adiposo de obesos e não obesosBortolotto, Josiane Woutheres January 2007 (has links)
A obesidade é uma síndrome metabólica complexa de etiologia multifatorial, que afeta um número progressivo de indivíduos. Estudos epidemiológicos confirmam que a síndrome metabólica está relacionada com obesidade abdominal, resistência à insulina, diabetes e outros fatores de risco metabólicos para doenças cardíacas. O tipo de alimentação, em especial os ácidos graxos (AG) consumidos, podem estar relacionados com os distúrbios da obesidade. Os ácidos graxos trans (AG trans) são obtidos pela dieta, em produtos contendo gorduras hidrogenadas e derivados dos animais ruminantes. Estes AG são bem absorvidos pelo organismo, e a composição destes no tecido adiposo (TA) reflete o consumo a longo prazo. Na obesidade, o metabolismo do TA é alterado e o restabelecimento da homeostase energética requer a identificação e regulação de genes envolvidos no metabolismo de lipídeos e carboidratos. Os receptores ativadores da proliferação de peroxissomos (PPARs) estão envolvidos na modulação do metabolismo e são ativados por AG. Os objetivos deste trabalho foram determinar o conteúdo total de AG trans no TA subcutâneo (TAS), retroperitoneal (TAR) e visceral (TAV) de obesos e não obesos submetidos à cirurgia bariátrica ou cirurgia abdominal; analisar o padrão de expressão do PPARb/d e PPARg1-3 nos diferentes depósitos destes TA; e comparar a expressão destes receptores em obesos e não obesos. Os TA foram obtidos por cirurgia. Para quantificar os AG trans, os lipídeos foram extraídos, saponificados e esterificados. Os níveis de AG trans foram medidos por FTIR-ATR. Para quantificar o mRNA, o RNA total foi extraído com TRIzol, foi reverso transcrito e determinado quantitativamente pela reação em cadeia da polimerase (qRT-PR). A média de AG trans em pacientes obesos foi de 6.3% no TAR e 8.7% no TAV. Nos pacientes não obesos, os resultados foram 6.9% no TAS e 9.3% no TAV. Não houve diferença estatística entre os grupos. No entanto, o depósito de AG trans no TAV foi maior nos pacientes obesos mórbidos (P<0.001) e nos não obesos (P<0.05). Por outro lado, a quantidade de mRNA do PPARb/d nos diferentes depósitos de TA de obesos mórbidos mostrou uma diminuição significativa no TAV (p<0.05). No grupo de não obesos, os níveis de PPARb/d foram mais altos no TAS (p<0.05). Os níveis de PPARg1-3 não diferiram estatisticamente entre os depósitos de TA tanto de obesos quanto não obesos. Quando obesos e não obesos foram comparados, os resultados revelaram uma diminuída expressão de PPARb/d no TAS (p=0.058) e TAV (p=0.094) de obesos mórbidos. A expressão de PPARg1-3 foi significantemente aumentada no TAS (p=0.022) e diminuída no TAR (p=0.034) nos obesos mórbidos. A expressão de PPARb/d no TAS e TAV correlacionou negativamente com a medida do quadril e com os níveis de insulina, respectivamente. Os níveis de mRNA PPARg1-3 no TAR correlacionaram negativamente com a medida da cintura e do quadril e no TAV correlacionou positivamente com a medida da cintura. Os valores encontrados de AG trans em todos os TA analisados são maiores do que os reportados em outros países. Nós encontramos maior depósito destes AG no TAV do que nos outros estoques. Os níveis elevados no TAV preocupam devido à alta taxa de lipólise deste tecido e sua forte associação com alterações metabólicas. Os altos níveis de AG trans encontrados refletem, ainda, o alto consumo destes na dieta dos brasileiros. Os resultados da expressão de PPARs demonstram que PPARb/d e PPARg1-3 são quantitativamente diferentes nos depósitos de TA de obesos mórbidos comparados a não obesos e que o padrão de expressão do PPARb/d é característico de cada depósito de TA. Os dados de correlação reforçam a relação destes receptores com a obesidade. / Obesity is a complex metabolic syndrome of multifactorial etiology affecting a progressively increasing number of individuals globally. Epidemiological studies have confirmed that this metabolic syndrome is related to abdominal obesity and insulin resistance, diabetes and other metabolic risk factors for coronary heart disease. The dietary intake, in special intake of specific fatty acids, could be related with the disturbance of obesity. Trans fatty acids (TFAs) are present in solid fats produced by partial hydrogenation of oils, and are naturally found in products originating from ruminants. They are well-absorbed by the body, and long-term intake is reflected in the fatty acid composition of adipose tissue (AT). In obesity, the AT metabolism is altered in obese subjects and the reestablishment of energy homeostasis requires the identification and regulation of genes with altered in lipid and glucose metabolism. The peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs), are involved in metabolism modulation and presented FA like ligand. The purpose of this study was to determine the total content of TFAs in subcutaneous (SAT), retroperitoneal (RAT) and visceral (VAT) adipose tissue of morbidly obese and non-obese patients submitted to bariatric surgery or abdominal surgery; analysed the expression pattern of PPARb/d and PPARg1-3 in different depots of AT; and, compare mRNA expression of these receptors in morbidly obese and non-obese patients. The Ats were obtained surgery. To quantify the TFAs, lipids were extracted, saponified and esterified. TFA were measured by FTIR-ATR spectroscopy. To measure the mRNA, total RNAs were extracted using TRIzol, and PPARs reverse transcripts were determined by quantitative polymerase chain reaction (qRT-PCR). The TFA average in obese patients was 6.3% for RAT and 8.7% for VAT. For non-obese patients, the figures were 6.9% SAT and 9.3% VAT. There was no difference between the groups. However, the TFA depot in VAT was higher than other fatty tissues for morbidly obese (P<0.001) and non-obese (P<0.05) patients. The amounts of PPARb/d mRNA in different depots of morbidly obese AT showed a significant decrease in VAT (p<0.05). In the non-obese group, the level of PPARb/d was higher in SAT (p<0.05). The levels of PPARg1-3 was not differentially expressed in obese and non-obese depots. When comparing obese and non-obese, the results revealed a decrease in PPARb/d expression in SAT (p=0.058) and VAT (p=0.094) of the morbidly obese. PPARg1-3 mRNA expression was increased significantly in SAT (p=0.022) and decreased in RAT (p=0.034) in morbidly obese subjects. PPARb/d expression in SAT and VAT correlated negatively with hip size and insulin serum respectively. PPARg1-3 expression in RAT correlated negatively with waist and hip size and in VAT correlated positively with waist size. Our values for TFA content in all adipose tissues analyzed are higher than reported in other countries. We showed more TFA in VAT than in other abdominal fat. The VAT level is worrisome because the higher rate of lipolysis in this tissue appears to be an important indicator of metabolic alterations. The levels of TFA found in AT presumably reflect the higher dietary intake of TFA by Brazilians. In PPARS expression the results demonstrates that PPARb/d and PPARg1-3 mRNAs are quantitatively different in AT of morbidly obese individuals compared to non-obese and that PPARb/d mRNA levels are characteristic for each AT depot. Correlation data stregthen the relationship with this receptors and obesity.
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Desenvolvimento e avaliação in vitro e in vivo de sistemas de liberação nanoemulsionados contendo a fração diclorometano de Jatropha isabellei Müll. Arg. para o tratamento da artriteFröhlich, Janaina Kieling January 2016 (has links)
Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2016. / Made available in DSpace on 2017-04-18T04:19:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2016 / As partes subterrâneas de Jatropha isabellei Müll. Arg. (Euphorbiaceae) têm sido utilizadas popularmente para o tratamento de diferentes tipos de doenças reumáticas, especialmente a artrite. O extrato hidroalcoólico apresentou atividade anti-inflamatória e antinociceptiva em modelo de artrite gotosa, em ratos e presume-se que estas atividades possam ocorrer devido à presença de terpenos neste extrato. Assim, uma fração diclorometano, que concentra os compostos terpênicos, foi preparada a partir das partes subterrâneas de J. isabellei para ser testada em modelo de artrite aguda em ratos. As atividades antinociceptiva e anti-inflamatória da fração diclorometano de J. isabellei (FDJi) foram avaliadas através do tempo de elevação de pata (TEP) e do diâmetro articular (DA) de ratos sensibilizados com a injeção intra-articular de carragenina (300 µg). Quando administrada pela via oral, a FDJi (100 e 200 mg/kg) exibiu uma redução significativa do TEP. O efeito da dose de 200 mg/kg foi similar ao apresentado pela dexametasona (10 mg/kg) e indometacina (5 mg/kg). A administração intravenosa da FDJi (10, 25 e 50 mg/kg) também exibiu uma redução significativa do TEP. A FDJi preveniu parcialmente a formação do edema após os tratamentos pelas vias oral (50, 100 e 200 mg/kg) ou intravenosa (10 mg/kg). A eficácia terapêutica observada após a administração intravenosa indica que os constituintes da FDJi apresentam uma absorção oral limitada, a qual pode ser explicada, em parte, pela baixa solubilidade dos compostos terpênicos nos fluídos biológicos. Ambas as atividades antinociceptiva e anti-inflamatória foram atribuídas ao diterpeno jatrofona. Este diterpeno foi isolado e sua estrutura elucidada através dos deslocamentos de RMN H1 e NoE, bem como pelas técnicas de correlação heteronuclear bidimensionais (HSQC e HMBC) e espectroscopia de massas. Um método rápido e simples de cromatografia líquida ultra-rápida de fase reversa, acoplado a detector de arranjo diodos, foi desenvolvido e validado para a quantificação de jatrofona na FDJi. O método foi considerado linear, específico, preciso e exato. O diterpeno jatrofona foi encontrado na concentração de 89,68 ± 1,56 µg por miligrama de fração, sendo proposto como um marcador químico desta fração. A análise por cromatografia gasosa acoplado a detector de ionização de chama (CG-FID) evidenciou a presença majoritária dos ácidos graxos aráquico ou eicosanóico (C20:0), linoleico (C18:2), oleico (C18:1), e heneicosanóico (C21:0). Com a finalidade de superar a baixa solubilidade aquosa da FDJi e visando aumentar sua absorção oral, carreadores lipídicos nanoestruturados (CLN) com e sem a fração diclorometano (CLNJi e CLNbranco) foram desenvolvidos. Os CLN apresentaram formato esférico e uma distribuição monodispersa, com tamanhos médios variando de 180 até 200 nm e valores de potencial zeta em torno de -18 mV. A eficiência de encapsulação foi de 90,4 % para a jatrofona. Os CLNJi e CLNbranco armazenados à 4 °C não apresentaram alteração do tamanho médio de partícula e do potencial zeta durante 120 dias e o conteúdo de jatrofona permaneceu inalterado durante 60 dias. A estabilidade dos CLNJi e CLNbranco armazenados à 4 °C também foi confirmada pelos estudos de estabilidade acelerada utilizando o LUMiSizer e apresentaram valores médios de índice de estabilidade de 0,083 e 0,536, respectivamente. No fluido gástrico que simula o estado de jejum (FaSSGF) a liberação da jatrofona a partir dos CLNJi alcançou 38,81% em duas horas, enquanto que a fração livre liberou apenas 23,4% no mesmo período. A liberação da jatrofona a partir dos CLNJi também foi mais rápida do que a resultante da FDJi livre no fluido intestinal que simula o estado alimentado (FeSSIF-old) após 8 horas, alcançando 104,2% e 61,0%, respectivamente. No fluido intestinal que simula o estado de jejum (FaSSIF-V2) a liberação da jatrofona a partir dos CLNJi e da FDJi livre foi similar, apresentando valores médios de 86,6% e 69,3%, respectivamente. Quando testados em modelo de artrite aguda em ratos, o tratamento com os CLNJi apresentou propriedades antinociceptivas após a administração oral na dose de 50 mg/kg, enquanto que para a FDJi livre este efeito não foi observado. Estes resultados sugerem um aumento na absorção oral dos constituintes da FDJi devido a sua incorporação em CLN, melhorando a sua atividade farmacológica. Além disso, neste estudo foram desenvolvidos CLNJi peguilados, para serem administrados pela via intravenosa, com a finalidade de obter um sistema de liberação de fármacos que libere os constituintes terpênicos nas articulações inflamadas. A peguilação foi obtida com a incorporação do polímero DSPE-PEG2000 em diferentes concentrações (15, 30, 60 e 90 mg). CLNbranco apresentaram tamanho médio de partícula entre 174,7 e 185,9 nm, enquanto que os CLNJi exibiram uma diminuição do tamanho de partícula com a adição do DSPE-PEG2000 de 185,2 (sem polímero) para 158,3; 144,6; 148,9 e 147,1 nm (com 15, 30, 60 3 90 mg do polímero, respectivamente). Todos os CLN apresentaram distribuição monodispersa e forma esférica. O potencial zeta dos CLNbranco e CLNJi variou de -24,7 até -53,9 mV e de -25,1 até -48,0 mV, respectivamente, aumentando (em módulo) com o aumento da quantidade do DSPE-PEG2000. A eficiência de encapsulação da jatrofona foi maior que 89,2 % para todas as formulações. O estudo de estabilidade foi realizado usando o equipamento LUMiSizer e demonstrou que o aumento da quantidade de DSPE-PEG2000 e a presença da FDJi tornaram as formulações mais estáveis. O ensaio de hemocompatibilidade dos CLN mostrou que os CLNbranco não foram hemolíticos em nenhuma das concentrações testadas enquanto que os CLNJi causaram a lise das hemácias somente nas concentrações mais altas testadas. Os CLN não apresentaram efeito citotóxico contra macrófagos J774 e as formulações contendo 60 e 90 mg de DSPE-PEG2000 exibiram uma significativa redução da captação fagocítica. O perfil de liberação da jatrofona a partir dos CLNJi contendo 90 mg de DSPE-PEG2000 foi similar ao apresentado pelos CLNJi sem o polímero. As atividades antinociceptiva e antiedematogênica dos CLNJi foram demonstradas por um modelo de artrite induzida pela carragenina em ratos e os efeitos comparados com o apresentado pela FDJi livre quando ambos foram administrados pela via intravenosa na dose de 10 mg/kg. Em especial, o efeito antiedematogênico dos CLNJi contendo 90 mg de DSPE-PEG2000 foram melhores do que os apresentados pela fração livre, provavelmente devido a uma modificação no perfil farmacocinético dos constituintes terpênicos da FDJi.<br> / Abstract : The underground parts of Jatropha isabellei Müll. Arg. (Euphorbiaceae) have been used popularly to treat different types of rheumatic diseases, especially arthritis. The hidroalcoholic extract showed anti-inflamatory and antinociceptive activities in a rat model of gouty arthritis and this activity is supposed to be due the presence of terpenes in this extract. So, a dichloromethane fraction, which concentrates the terpenic compounds, was prepared from the underground parts of J. isabellei (DFJi) to be tested in an acute arthritis model in rats. The anti-inflammatory and antinociceptive activities of the J. isabellei dichloromethane fraction (DFJi) were evaluated through assessment of paw elevation time (PET) and articular diameter (AD) of rats stimulated with an intra-articular injection of carrageenan (300 µg). Given by oral route DFJi (100 and 200 mg/kg) produced significant reduction of PET. The effect produced by 200 mg/kg dose was similar to dexamethasone (10 mg/kg) and indomethacin (5 mg/kg). DFJi (10, 25 and 50 mg/kg) administered intravenously also produced a significant reduction of PET. DFJi partially prevented the edema formation either after oral (50, 100 and 200 mg/kg) or intravenous (10 mg/kg) treatments. The higher therapeutic effectiveness observed after intravenous administration indicated that the DFJi constituents display limited oral absorption, which may be explained, in part, by the low solubility of the terpenic compounds in the biological fluids. Both antinociceptive and anti-inflammatory activities were discussed to be due to the diterpene jatrophone. This diterpene was isolated and its structure was elucidated by 1H NMR shifts and NoE as well as 2D long-range heteronuclear correlations (HSQC and HMBC) and mass spectroscopy. A fast and simple reverse phase UFLC-DAD method was developed and validated for the determination of jatrophone in the DFJi The method was considered linear, specific, precise, and accurate. The diterpene jatrophone was found at a concentration of 89.68 ± 1.56 µg per milligram of fraction being proposed as a chemical marker of this one. The analysis of gas-chromatography coupled with flame ionization detector (GC-FID) of the DFJi evidenced the presence of arachidic acid (C20:0), linoleic acid (C18:2), oleic acid (C18:1), and heneicosanoic acid (C21:0), as major fatty acids. In order to overcome the poor water solubility of the DFJi and considering increase its absorption by oral route, unloaded and loaded DFJi-lipid nanocarriers were developed (LNCJi and LNCblank).The developed lipid nanocarriers displayed spherical shape and monodisperse size distribution, with mean sizes ranging from 180 to 200 nm and zeta potential values of around ?18 mV. The entrapment efficiency was 90.4% for jatrophone. LNCJi and LNCblank stored at 4 °C did not exhibit mean size and zeta potential changes during 120 days and the jatrophone content of LNCJi was unchanged during 60 days. The stability of the LNCJi and LNCblank stored at 4°C was also confirmed by the accelerated stability studies using LUMiSizer and presented mean values of 0.083 and 0.536 of instability index, respectively. In fasted state simulate gastric fluid (FaSSGF), the release of jatrophone from LNCJi reached 38.81% in two hours, while the free fraction released only 23.4% in the same period. The release of jatrophone from LNCJi was also faster than that obtained for the free DFJi in fed state simulate intestinal fluid (FeSSIF-old) after 8 hours, reaching 104.2% and 61.0%, respectively. In the fasted state simulate intestinal fluid (FaSSIF-V2) the release of jatrophone from LNCJi and the free DFJi was similar exhibiting mean values of 86.6% and 69.3%, respectively. When tested in an acute arthritis model the LNCJi, but not the free fraction, exhibited antinociceptive properties after the oral administration at dose of 50 mg/kg. These results suggested that an increase in the oral absorption of the DFJi constituents occurred by carrying it in the LNC, improving its pharmacological activity. In this study, DFJi-loaded pegylated lipid nanocarriers intended for intravenous administration were developed aiming to obtain drug delivery systems that could release the terpenic constituents preferentially into the inflamed joints. The pegylation was obtained with the addition of the polymer DSPE-PEG2000 at different concentrations (15, 30, 60 e 90 mg). LNCblank presented a mean particle size between 174.7 e 185.9 nm, while the LNCJi exhibited a decrease in the mean particle size with the DSPE-PEG2000 addition from 185.2 (without polymer) to 158.3; 144.6; 148.9 and 147.1 nm (with 15, 30, 60 and 90 mg of polymer, respectively). All the LNC presented a monodisperse distribution and spherical shape. The zeta potential of LNCblank and LNCJi changed from -24.7 to -53.9 mV and from -25.1 to -48.0 mV respectively, increasing (in module) with the amount of DSPE-PEG2000. The entrapment efficiency was higher than 89.2 % for all the developed formulations. The stability study was performed using the LUMiSizer equipment and revealed that the increase in DSPE-PEG2000 amount and the presence of the DFJi, making the formulations more stable. The hemocompatibility assay showed that the LNCblank were not hemolytic at any tested concentrations, while the LNCJi provoked the lysis only at higher tested concentrations. The LNC did not present cytotoxic effects against J774 macrophages and the formulations containing 60 and 90 mg of DSPE-PEG2000 exhibited a significant reduction of the phagocytic uptake. The jatrophone released profile from LNCJi containing 90 mg of DSPE-PEG2000 was similar to that presented by LNCJi without the polymer. The antinociceptive and antiedematogenic effects from LNCJi were demonstrated in a carrageenan-induced acute arthritis model in rats with the effects compared to that presented by free DFJi when both were administered intravenously at dose of 10 mg/kg. In special, the antiedematogenic effect of LNCJi containing 90 mg of DSPE-PEG2000 was better than the free fraction, probably due to a modification in the pharmacokinetic profile of terpenic constituents of DFJi.
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