Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2017-08-04T12:20:32Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Lara Cristina da Cunha Guimarães Silva - 2017.pdf: 4408470 bytes, checksum: 6bbee56618e12d99ddf92448eed174fb (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-08-07T15:44:14Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Lara Cristina da Cunha Guimarães Silva - 2017.pdf: 4408470 bytes, checksum: 6bbee56618e12d99ddf92448eed174fb (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-07T15:44:14Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Lara Cristina da Cunha Guimarães Silva - 2017.pdf: 4408470 bytes, checksum: 6bbee56618e12d99ddf92448eed174fb (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-07-06 / INTRODUCTION: Infection caused by hepatitis B virus (HBV) is considered a major public health problem in several countries, especially in less developed countries. It is estimated that 70% of new chronic infections occur in regions of low-income countries. OBJECTIVE: To evaluate the exposure profile to hepatitis B virus in a population living in poverty in the metropolitan region of Goiânia. METHOD: This is a serological survey of a low-income population. Data collection was performed between August and December 2016. Serological markers for hepatitis B virus (HBV), HBsAg, total anti-HBc, anti-HBc IgM and anti-HBs were investigated, and detected by enzymelinked immunosorbent assay. Continuous variables were presented in median and interquartile ranges (IQR), and categorical variables in absolute and relative frequencies. Bivariate analysis was performed to verify the potential factors associated with exposure to HBV. Variables with p < 0.20 were included in a Poisson regression model with robust variance. Variables with p < 0.05 were considered statistically significant in the multivariate analysis. RESULTS:This study included 378 individual participants from 217 residences. The global prevalence of HBV was 10.6% (95% CI: 7.86-14.09). Acute or chronic infection was identified in 0.8% (95% CI: 0.3-2.4); exposure to HBV confirmed by the presence of immunity markers occurred in 7.7% (95% CI: 5.4-10.9). Isolated Anti-HBc was found in 2.1% (95% CI: 1.1-4.2) of the population. Isolated positivity for anti-HBs was identified in 25.4% (95% CI: 21.3-30.0). In multivariate analysis, it was verified that age (adjusted PR [PRadj]: 1.04; 95% CI: 1.01-1.07), female sex (PRadj: 2.18; 95% CI: 1.01-4.73), sexual relations under the effects of alcohol (PRadj: 2.49; 95% CI: 1.09-5.67) and exposure to Treponema Pallidum (PRadj: 3.10; 95% CI: 1.36-7.06) were associated with exposure to HBV. CONCLUSIONS: These findings indicate significant viral circulation in the study population, aggravated by low serological evidence of immunization against hepatitis B, highlighting the challenge faced by Public Health Services in reaching marginal populations. This can contribute to the perpetuation of cycles of poverty and disease. / INTRODUÇÃO: A infecção causada pelo vírus da hepatite B (HBV), é considerada um importante problema de saúde pública em diversos países, especialmente em países menos desenvolvidos. Estima-se que 70% das novas infecções crônicas ocorrem em regiões de países de baixa renda. OBJETIVO: Avaliar o perfil de prevalência de exposição ao vírus da hepatite B em população vivendo em situação de pobreza na região metropolitana de Goiânia. METODOLOGIA: Trata-se de um inquérito sorológico, realizado com população em situação de pobreza. A coleta de dados ocorreu entre agosto a dezembro de 2016. Foram investigados os marcadores sorológicos para o HBV, HBsAg, anti-HBc total, anti-HBc IgM e anti-HBs, que foram detectados através de ensaio imunoenzimático. Variáveis contínuas foram apresentadas em mediana e intervalos interquartis (IIQ) e as categóricas em frequências absolutas e relativas. Análise bivariada foi realizada para verificar os potenciais fatores associados à exposição ao HBV. Variáveis com p < 0,20 foram incluídas no modelo de regressão de Poisson com variância robusta. Variáveis com p < 0,05 foram consideradas estatisticamente significantes na análise multivariada. RESULTADOS: Foram visitadas 217 residências e incluídas no estudo 378 pessoas. A prevalência global de HBV foi de 10,6% (IC 95%: 7,86-14,09). Infecção aguda ou crônica foi identificada em 0,8% (IC 95%: 0,3-2,4); exposição ao HBV com presença de marcador de imunidade ocorreu em 7,7% (IC 95%: 5,4-10,9). Anti-HBc isolado foi encontrado em 2,1% (IC 95%: 1,1-4,2) da população. A positividade isolada para o anti-HBs foi identificada em 25,4% (IC 95%: 21,3-30,0). Em análise multivariada, verificou-se que idade (RP ajustada [RPaj]: 1,04; IC 95%: 1,01-1,07), sexo feminino (RPaj: 2,18; IC 95%: 1,01-4,73), relação sexual sob efeito de álcool (RPaj: 2,49; IC 95%: 1,09-5,67) e exposição ao Treponema Pallidum (RPaj: 3,10; IC 95%: 1,36- 7,06) estavam associados a exposição ao HBV. CONCLUSÕES: Nossos achados indicam importante circulação viral na população do estudo, agravada por uma baixa evidência sorológica de imunização contra hepatite B, demonstrando fragilidade da rede pública de serviços de saúde em alcançar populações marginais. Dessa forma, contribuindo para a perpetuação do ciclo de pobreza e doença.

Submitted by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-09-15T19:44:43Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Chelry Fernanda Alves de Jesus.pdf: 3412626 bytes, checksum: 196a769a0f857f15c408d233116a895b (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-09-15T19:45:11Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Chelry Fernanda Alves de Jesus.pdf: 3412626 bytes, checksum: 196a769a0f857f15c408d233116a895b (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-15T19:45:11Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Chelry Fernanda Alves de Jesus.pdf: 3412626 bytes, checksum: 196a769a0f857f15c408d233116a895b (MD5) Previous issue date: 2014-04-04 / In this study, maghemite nanoparticles associated to dextran were synthesized (crystallites with average diameters of 5.6 and 5.3 nm) from the precipitation of iron salts in an alkaline medium in the presence of dextran of molecular weights of 250 kDa and 75 kDa. Aqueous colloidal dispersions of maghemite/dextran reacted with different amounts of epichlorohydrin aiming at the crosslinking of dextran. The characteristics of the samples were evaluated by X-ray diffraction, high resolution electron microscopy, infrared spectroscopy, thermogravimetric analysis, iron determination, hydrodynamic diameter and zeta potential. One of the maghemite/dextran samples was treated with an ammonium hydroxide solution for different times, seeking the functionalization of dextran with NH2 groups, whose content was determined by potentiometric titration. The maghemite/dextran-NH2 system was conjugated to rhodamine B fluorophore (RodB) under different reaction conditions, being the content of RodB determined by absorption spectrophotometry in the visible region. Photoluminescent characteristics of maghemite/dextran-RodB systems were evaluated by fluorescence microscopy, fluorescence spectrometry and flow cytometry. The results of the analyses and experiments showed that the molecular mass and the crosslinking of dextran did not influence significantly the characteristics of the colloidal systems, since the hydrodynamic diameter values were in the range of 110 and 138 nm and zeta potential was of -4.54 the -10.76 mV. However, the profile of the thermogravimetric curves of the solids was influenced by the crosslinking of dextran, as well as by the presence of the polymer not associated to the nanoparticles. The treatment with ammonia was proved efficient, increasing the number of NH2 groups per particle from 45 to 71. The conjugation of RodB to the maghemite/dextran-NH2 system was more efficient at a pH of 8.5, using a greater amount of carbodiimide and N-hydroxysuccinimide. The maghemite/dextran-RodB system presented different photoluminescent properties according to the content of NH2 groups with in the sample used in the conjugation reaction. The sample treated with the ammonia solution, containing 71 NH2-groups/particle, although it presented less amount of conjugated RodB (2.2 RodB/particle) showed greater fluorescence intensity than the sample showing the highest amount of RodB (2.8 Rod/particle), but that was not treated with ammonia (45-NH2/particle). This result was interpreted considering that the system treated with ammonia favored the RodB conjugation via covalent bond, while the untreated system favored the formation of aggregates of RodB via electrostatic interactions. / Neste trabalho, foram sintetizadas nanopartículas de maghemita (cristalitos com diâmetros médios de 5,6 e 5,3 nm) associadas à dextrana a partir da precipitação de sais de ferro em meio alcalino na presença de dextrana de massas moleculares de 250 kDa e 75 kDa. As dispersões coloidais aquosas de maghemita/dextrana reagiram com diferentes quantidades de epicloridrina visando à reticulação da dextrana. As características das amostras obtidas foram avaliadas por difração de raios-x, microscopia eletrônica de alta resolução, espectroscopia no infravermelho, análises termogravimétricas e medidas de teor de ferro, diâmetro hidrodinâmico e potencial zeta. Uma das amostras de maghemita/dextrana foi tratada com solução de hidróxido de amônio por diferentes tempos, visando à funcionalização da dextrana com grupos -NH2, cujo teor foi determinado por titulação potenciométrica. O sistema maghemita/dextrana-NH2 foi conjugado ao fluoróforo rodamina B (RodB) em diferentes condições reacionais, sendo o teor de RodB determinado por espectrofotometria de absorção na região do visível. As características fotoluminescentes dos sistemas maghemita/dextrana-RodB foram avaliadas por microscopia de fluorescência, espectrometria de fluorescência e citometria de fluxo. Os resultados das análises e experimentos mostraram que a massa molecular e a reticulação da dextrana não influenciaram, significativamente, nas características dos sistemas coloidais, já que os valores de diâmetro hidrodinâmico ficaram na faixa de 110 a 138 nm e os de potencial zeta de -4,54 a -10,76 mV. Entretanto, o perfil das curvas termogravimétricas dos sólidos foi influenciado pela reticulação da dextrana, assim como pela presença de polímero não associado às nanopartículas. O tratamento com amônia mostrou-se eficiente, incrementando o número de grupos -NH2 por partícula de 45 para 71. A conjugação da RodB ao sistema maghemita/dextrana-NH2 foi mais eficiente em pH 8,5, empregando-se maior quantidade de carbodiimida e N-hidroxisuccinimida. O sistema maghemita/dextrana-RodB apresentou propriedades fotoluminescentes distintas em função do teor de grupos –NH2 superficiais na amostra empregada na reação de conjugação. A amostra tratada com solução de amônia, contendo 71 grupos NH2/partícula, embora tenha apresentado menor quantidade de RodB conjugada (2,2 RodB/partícula) mostrou maior intensidade de fluorescência do que a amostra com maior quantidade de RodB (2,8 Rod/partícula), mas que não foi tratada com amônia (45 –NH2/partícula). Este resultado foi interpretado considerando-se que o sistema tratado com amônia favoreceu a conjugação de RodB via ligação covalente, enquanto que o sistema não tratado favoreceu a formação de agregados de RodB via interações eletrostáticas.

As hepatites virais continuam sendo uma preocupação em nível de saúde pública no Brasil e no Mundo, tanto pelo número de indivíduos atingidos, como pela possibilidade de complicação das formas agudas e crônicas. Segundo a Organização Mundial de Saúde (OMS), 170 milhões de pessoas são portadoras crônicas de hepatite C e 350 milhões portadoras crônicas de hepatite B. No Brasil, a estimativa de portadores de hepatite B crônica é de aproximadamente 600 mil pessoas e de hepatite C crônica, 1,5 milhão. Quanto à hepatite aguda A foram confirmados no país, em 2010, 5943 casos. O objetivo deste estudo foi conhecer a prevalência de marcadores sorológicos dos vírus das hepatites A, B e C em crianças e adolescentes matriculados em creches e escolas de ensino infantil e fundamental da rede municipal na cidade de Santos; conhecer os aspectos moleculares dos vírus das hepatites B e C, identificando o genótipo dos dois agentes e estudar modo de aquisição nos casos com sorologias positivas. Tratou-se de um estudo transversal realizado no período de 28 de Junho a 14 de Dezembro de 2007 onde foram coletadas 4680 amostras de sangue colhidas através de punção capilar e ao mesmo tempo aplicado um questionário nos familiares das crianças e adolescentes. Os exames sorológicos foram realizados utilizando a técnica de ELISA. O estudo molecular foi realizado pela técnica de reação em cadeia de polimerase \"in House\". A idade da população estudada variou de 7 meses a 18 anos e 1 m. A prevalência geral do anti-HVA IgG reagente foi de 9,7% e desses 74,6% foi anti-HVA IgM reagente. A prevalência de anti-HVA IgG foi maior entre as crianças mais velhas, meninas, aquelas que brincavam em córregos, sem esgoto em sua moradia, de pais com baixa instrução, de baixa renda familiar e aquelas que não eram moradoras da Orla. A prevalência de anti-HVA IgM, não foi diferente entre as diferentes categorias, exceção feita à faixa etária (pico no primeiros anos e posterior queda) e morro e Zona Noroeste foi mais baixa. A prevalência geral do anti-HBc reagente foi de 0,1%, do AgHBs de 0,02% e do anti-HVC foi de 0,02%. Conclui-se que a prevalência geral em crianças dos marcadores sorológicos para hepatites A, B e C na cidade de Santos foi baixa, quando comparada com os dados de literatura. Apesar dos nossos dados confirmarem uma mudança no perfil epidemiológico da hepatite A, as medidas preventivas atuais quanto ao saneamento, grau de instrução, habitação, ainda permanece com uma deficiência em Santos, cidade balneária com o maior porto do Brasil. A vacinação para hepatite B foi altamente eficaz com a baixa prevalência encontrada dos marcadores sorológicos. A utilização do papel de filtro em estudos epidemiológicos para hepatite A foi eficaz. Entretanto para o vírus da hepatite C ainda necessita de estudos comparativos utilizando sangue venoso, uma vez que a prevalência de crianças infectadas com hepatite C foi muito baixa na cidade de Santos. / Viral hepatitis are still a concern in the public health level in Brazil and around the Word, due both to the number of affected subjects and the possibility of complication in the acute and chronic forms. According to the World Health organization (WHO), 170 million people are chronic carriers of hepatitis C and 350 million chronic carriers of hepatitis B. In Brasil, the estimate of people with chronic hepatitis B is approximately 600 thousand people and chronic hepatitis C, 1,5 million. It has been confirmed in the country, in 2010, 5943 cases of acute hepatitis A. The The aim of this study was to learn the prevalence of serological markers of hepatitis A, B and C virus in children and teenagers enrolled at the municipal education network in the city of Santos, to learn molecular aspects of hepatitis B and C, identifying the genotype of the two agents and to study the acquisition mode in cases with positive serology. Cross-sectional study carried out over the period from June 28 to December 14, 2007, in which 4680 fingerprick blood samples were collected; at the same time, a survey questionnaire was applied to the family members of the children and teenagers. The serological tests were performed using the ELISA technique. The molecular analysis was performed using the technique of polymerase chain reaction \"in House\". Age of the population studied ranged from 7 months to 18 years and 1 month. . The general prevalence of serological markers anti-HAV IgG reagent was 9.7% and between them 74,7% was anti-HAV IgM reagent. There was higher prevalence among older children, females, those who used to play in streams near their home, the absence of a sewage system in home, parents with low education, low household income and among those who did not live in the seashore. The prevalence of anti-HAV IgM was not different between the categories, except for the age (peak in the early years and subsequent fall) and lower on the Hills and Northweast Zone. The general prevalence of anti-HBc reagent was 0,1%, AgHBs was 0,02% and anti-HCV was 0,02%. It is concluded that, in children, the general prevalence of serological markers for hepatitis A, B and C in the city of Santos was low when compared with literature data. Although our data confirm a change in the epidemiological profile of hepatitis A, the current preventive measures regarding sanitation, education level and housing still remain with a deficiency in Santos, the coastal city with the largest harbor in Brazil. Vaccination for hepatitis B was highly effective because it found a low prevalence of serological markers. The use of filter paper in epidemiological studies for hepatitis A was effective. However for the vírus of hepatitis C still requires comparative studies using venous blood because the prevalence of infected children was very low in the city of Santos.

Estima-se que aproximadamente 400 milhões de indivíduos sejam portadores crônicos do vírus da hepatite B no mundo. Quando incide em adultos, a doença apresenta elevada proporção de evolução para a cura, ao passo que na ocorrência de transmissão vertical, o risco de cronificação chega a 90%, aumentando muito a possibilidade de graves conseqüências para a criança, entre as quais cirrose e hepatocarcinoma primário. A possibilidade de triagem para a identificação das gestantes portadoras do vírus da hepatite B e a conseqüente adoção de medidas profiláticas – imunização ativa e passiva – permite a prevenção segura da transmissão vertical. Em 1999, o Programa do Pré-Natal da Secretaria Municipal da Saúde de Ribeirão Preto introduziu em sua rotina o screening para o HBsAg, com a finalidade de identificar as gestantes portadoras do vírus. Este trabalho objetiva estudar alguns aspectos referentes à hepatite B entre as gestantes atendidas pela Rede Municipal de Saúde, bem como realizar uma avaliação sistematizada do Programa do Pré-Natal. Para este trabalho foram criados dois grupos de gestantes. O primeiro formado pelas pacientes com primeira avaliação sorológica do Pré-Natal para aquela gestação, realizada no período de 01 de novembro de 2001 a 31 de outubro de 2002, com a finalidade de estimar a prevalência do HBsAg e também verificar a proporção de recém-nascidos, filhos de mães portadoras deste marcador, que receberam os cuidados preconizados para tal situação. Já o segundo grupo foi formado pelas pacientes, na mesma condição, avaliadas no período de 01 de julho de 2002 a 30 de junho de 2003, com a finalidade de também estimar a prevalência do HBsAg, bem como a proporção de portadoras do HbeAg e anti-Hbe. Os valores de prevalência do HBsAg encontrados foram os seguintes: para o primeiro grupo 0,5 (IC 95% : 0,3 – 0,7) e, 0,4 (IC 95%: 0,2 – 0,6) para o segundo. Verificou-se que em 25,0% dos 24 partos realizados no município não foram realizados os procedimentos de profilaxia preconizados como ideais, no que diz respeito à rapidez da solicitação de vacina e imunoglobulina. Isso foi devido, parcialmente, a deficiências na qualidade de registro das informações em diferentes instâncias. As proporções de portadoras do HBeAg e anti-HBe foram respectivamente 5,9% (IC 95%: 0 – 17,1) e 90,5% (IC 95%: 77,9 – 100). Este trabalho procura apresentar informações que sirvam de base para reflexões a respeito do fluxo de procedimentos do Programa do Pré-Natal, visando elevar sua efetividade e superar os obstáculos encontrados. / It is estimated that about 400 million persons are chronic carriers of the hepatitis B virus worldwide. When it occurs in adults, the disease shows high proportions of benign evolution, meanwhile in vertical transmission the risk of becoming a chronic carrier approaches 90%, elevating the possibilities of serious consequences to the child, including cirrhosis and primary hepatocellular carcinoma. The possibility of performing screening tests for the identification of pregnant women carriers of the hepatitis B virus and the consequent adoption of prophylactic measures – active and passive immunization – allow safe prevention of the vertical transmission. In 1999, the Pre-Natal Program of the Municipal Secretary of Health of Ribeirão Preto, SP, Brasil, included in its routine services the screening for the HBsAg, towards the identification of pregnant carriers of the virus. This study aims to look into some aspects referring to hepatitis B among the pregnants being attended by the Municipal Health Network, as well as perform a careful systematic evaluation of the Pre-Natal Program. In order to perform this study, two groups of pregnants were selected. The first one formed by those patients having had their first pre-natal serological evaluation done for that pregnancy during the period of November 1, 2001 until October 31, 2002, with the purpose of estimating the HBsAg prevalence and also to verify the proportion of the new-borns of HBsAg carriers that received the recommended care for that situation. The second group was formed by those patients on the same condition, evaluated during the period of July 1, 2002 until June 30, 2003, with the purpose of also estimating the HBsAg prevalence, as well as estimating the proportion of HBeAg and anti-HBe carriers. The HBsAg prevalences were the following: for the first group of pregnants 0,5 (CI 95% : 0,3 – 0,7) and 0,4 (CI 95%: 0,2 – 0,6) for the second one. It was verified that in 25,0% of the 24 births that happened in the city, the recommended care were not taken, when it comes to the prompt request of the specific vaccine and immunoglobulin. This fact was, partially, due to deficiency in the data files quality of the different institutions. The proportions of HBeAg and anti-HBe carriers found were, respectively, 5,9% (CI 95%: 0 – 17,1) and 90,5% (CI 95%: 77,9 – 100). This study intends to present data that can be the starting point towards reflections on the established procedures of the Pre-Natal Program, in order to increase its effectiveness and surpass the found obstacles.

Os exames laboratoriais são fundamentais como ferramentas para elucidar o diagnóstico e avaliar prognóstico na prática médica. Novos exames são constantemente adicionados ao elenco já existente na clínica, o que pode resultar em elevação dos custos, nem sempre com o retorno esperado. A padronização da solicitação de exames tem sido estimulada, tanto na saúde pública quanto na saúde suplementar considerando os impactos clínicos, financeiros e ambientais de solicitações desnecessárias. O Hospital das Clínicas de Ribeirão Preto (HCRP) tem revisto protocolos e criado uma hierarquização para solicitação de testes complementares. Este estudo justifica-se por avaliar uma ação que visou adequar a solicitação de marcadores sorológicos de hepatite B, ajustando-os às normas preconizadas por resolução da Secretaria da Saúde do Estado de São Paulo. Objetivo: Avaliar a adequação das requisições médicas dos marcadores sorológicos para hepatite B enviadas ao laboratório de sorologia do HCRP e o impacto da triagem (\"reflective testing\"/\"reflex testing\") instituída pelo laboratório. Métodos: Estudo retrospectivo, de caráter descritivo, com dados coletados através de 24.649 solicitações médicas de marcadores de hepatite B recebidas em dois períodos: Fase 1 - sete meses entre 2012 e 2013; Fase 2 - nove meses entre 2014 e 2015. Avaliamos os marcadores solicitados e a hipótese diagnóstica informada pelo médico. Foram consideradas adequadas as solicitações de rastreio para HBV com os marcadores HBsAg e Anti-HBcAg Ig-total isolados ou em conjunto. A rotina de adequação incluiu a exclusão de marcadores inadequados ou a complementação dos marcadores sorológicos indicados, sempre que o HBsAg era positivo, independente da solicitação médica. Uma análise de custos foi realizada, considerando os exames solicitados e aqueles que foram efetivamente realizados. Resultados: Fase 1 - das 11.167 solicitações avaliadas, 1.143 (10,23%) foram consideradas inadequadas. Fase 2 - das 13.482 solicitações analisadas, 251 (1,86%) foram consideradas inadequadas. Com o processo de triagem realizado pelo laboratório foi possível economizar respectivamente R$ 19.617,25 e R$ 1.683,80 nos dois períodos analisados. Estas informações servirão de base para estruturação de uma proposta de orientação para solicitação dos marcadores sorológicos da hepatite B, junto às equipes onde identificamos maior frequencia de inadequação. Conclusão: Os processos de triagem manual (\"reflective testing\") e eletrônico (\"reflex testing\") realizados pelo laboratório demonstraram ser custo-efetivos e aceleram a liberação de resultados relevantes para a tomada de decisão clínica / Laboratory tests are critical as tools to elucidate the diagnosis and assess prognosis in medical practice. New tests are constantly added to the list already exists in the clinic, which can result in higher costs, not always with the expected return. The standardization of test ordering has been stimulated both in public health and in health insurance considering the clinical, financial and environmental impacts of unnecessary requests. The Hospital of the Faculty of Medicine of Ribeirão Preto (HCRP) has revised protocols and created a hierarchy to request additional tests. This study is justified by assessing an action that aimed to suit the request of serological markers of hepatitis B, adjusting them to the standards established by resolution of the São Paulo State Health Department. Objective: To evaluate the adequacy of medical requests of serological markers for hepatitis B sent to the serology lab HCRP and the impact of screening (\"reflective testing\" / \"reflex testing\") established by the laboratory. Methods: Retrospective study of a descriptive nature, with data collected through 24,649 medical claims of hepatitis B markers received in two periods: Phase 1 - seven months between 2012 and 2013; Phase 2 - nine months between 2014 and 2015. We evaluated the requested markers and the diagnosis reported by the physician. Tracing requests for HBV with HBsAg and anti-HBcAg alone or together were considered adequate. The adjustment routine includes the exclusion of inappropriate markers or serological markers of the indicated complementation, where the HBsAg was positive, whether for medical application. A cost analysis was performed, considering the requested examinations and those who have been realized. Results: Phase 1 - 11,167 of assessed requests, 1,143 (10.23%) were considered inadequate. Phase 2 - the 13,482 requests analyzed, 251 (1.86%) were considered inadequate. With the screening process carried out by the laboratory was possible to save respectively R $ 19,617.25 and R $ 1,683.80 in both periods analyzed. This information will form the basis for structuring a proposal to request guidance of serological markers of hepatitis B, with teams where we identify higher frequency of inadequacy. Conclusion: The manual sorting processes (\"reflective testing\") and electronic (\"reflex testing\") performed by the laboratory have shown to be cost-effective and accelerate the release of relevant results for clinical decision making

A imunização por via nasal pode representar uma alternativa as imunizações intramusculares, pois a aplicação por essa rota não é invasiva e há fácil acesso da vacina à mucosa. Além disso, a mucosa nasal apresenta diversas características que podem favorecer a imunização, por exemplo, há uma grande área superficial altamente vascularizado disponível para a absorção dos antígenos. Outra característica fundamental é a capacidade da mucosa de responder a antígenos, através das células imunocompetentes presentes, como as células M e dendríticas. Apesar disso, outros métodos podem ser empregados para melhorar absorção e disponibilidade dos antígenos pela mucosa, como a utilização de polímeros biodegradáveis. Entre estes, a quitosana é um biopolímero, derivado da desacetilação da quitina, que tem como principal característica, a possibilidade de estrutura-los em nanopartículas. Outra característica importante é sua propriedade catiônica a qual possibilita a sua ligação a proteínas e também à mucosa, que provoca maiores taxas de retenção de antígenos pela mucosa. Assim, neste trabalho, foi avaliado a imunogenicidade da inoculação do antígeno de superfície da hepatite B (HBsAg), via mucosa nasal em camundongos, os quais produziram anticorpos IgG contra HBsAg, apresentaram aumento da secreção de IgA pela mucosa nasal, e também ao avaliar a resposta de citocinas em células RAW 264.7, houve secreção de TNF-&#945; . / The nasal vaccination is not invasive since its do not require needles for your application and your administration for is easy, thus the immunization via nasal route could be an alternative to intramuscular immunizations. Furthermore, the nasal mucosa has several characteristics like highly vascularized surface area available for absorption of antigen that could elicited the mucosal immune response caused by the competents cell available on the mucosal tissue. Nevertheless, other methods can be employed to improve absorption and availability of antigens to the mucosa, such as the use of nanoparticles of chitosan. Chitosan is a biopolymer product of deacetylation reaction of chitin, that has as main characteristic, the moldability, which enables the production of nanoparticles and its cationic property which allows its binding to proteins and also to the mucosa, which would lead to higher rates of absorption of antigens through the nasal mucosa. Thus, this work investigated the immunogenicity of the administration nanoparticles of chitosan with the surface anti-gen of hepatitis B (HBsAg) via the nasal mucosa in mice, which show levels of IgA in nasal lavages and serum IgG, as well as cytokines such as TNF-&#945; released by RAW 264.7 cells of mice.

Submitted by Rosivalda Pereira (mrs.pereira@ufma.br) on 2017-06-14T19:01:30Z No. of bitstreams: 1 MarinildeSouza.pdf: 1783855 bytes, checksum: bc20000b025261af153ffc4f6418fad7 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-14T19:01:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MarinildeSouza.pdf: 1783855 bytes, checksum: bc20000b025261af153ffc4f6418fad7 (MD5) Previous issue date: 2016-05-20 / Introduction: The hepatitis B virus (HBV) present diversity of its genome, which is to be classified in different genotypes and subgenotypes (A-J). It has been demonstrated that different genotypes are related to the natural history of infection. The maintenance of viral replication could be one of the factors related to genotypes. Objectives: To identify the viral replication status of HBV carriers among the subgenótipos A1 and D4. Materials and methods: HBV carriers identified have been studied in two studies involving individuals from the state of Maranhão, northeast,Brazil, which had genotyping and subgenotypes, serology for HBeAg and anti-HBe and certain viral loads. Serological tests were performed by ELISA, HBV – DNA quantification real time PCR and genotyping performed by sequencing. Results: We identified 146 patients. Among these, 136 were subgenotype A1 or D4. It is 85 - A1 (62.5%) and 51 - D4 (37.5%). No difference was found between groups when age was evaluated (42 ± 12 vs 38 ± 17 p=0.11) or gender (male 48.5% vs 51.5% p=00.18). Among the D4 subgenotype carriers had more patients with HBeAg positive (23.5% vs 9.4%, p=0.02) and a higher proportion of patients with viral loads above 20.000 IU / ml (43.1% vs 12.9 % p <0.0001), even when only those with negative HBeAg (25.6% vs 6.5%, p=0.007) when compared with the A1 subgenotype. Conclusion: HBV carriers, subgenotype D4, compared to A1 subgenotype have delayed HBeAg seroconversion and higher levels of HBV – DNA, suggesting that this subgenotype is possibly related to / Introdução: O vírus da hepatite B (VHB) apresenta diversidade do seu genoma, o que o faz ser classificado em diferentes genótipos e subgenótipos (A-J). Tem sido demonstrado que os diversos genótipos estão relacionados com a história natural da infecção. A manutenção da replicação viral pode ser um dos fatores relacionado aos genótipos. Objetivos: Identificar o estado de replicação viral do VHB entre portadores dos subgenótipos A1 e D4. Materiais e métodos: Foram estudados portadores do VHB identificados em dois estudos que envolveram indivíduos provenientes do estado do Maranhão, nordeste do Brasil, que tinham determinação de genótipos e subgenótipos, sorologias para o HBeAg e anti-HBe e cargas virais determinadas. Sorologias foram realizadas por ELISA, VHB–DNA quantificado por PCR em tempo real e genotipagem realizada por sequenciamento. Resultados: Foram identificados 146 portadores. Dentre estes, 136 eram subgenótipo A1 ou D4. Sendo 85 - A1 (62,5%) e 51 - D4 (37,5%). Não houve diferença entre os grupos quando foi avaliado idade (42±12 vs 38±17 p=0,11) ou gênero (masculino 48,5% vs 51,5% p=0,18). Entre os portadores do subgenótipo D4 havia mais indivíduos com HBeAg positivo (23,5% vs 9,4%, p=0.02) e maior proporção de portadores de cargas virais acima de 20.000 UI/ml (43,1% vs 12,9% p<0,0001), mesmo quando avaliados apenas aqueles com HBeAg negativos (25,6% vs 6,5% p=0,007), quando comparados com os de subgenótipo A1. Conclusão: Portadores do VHB, subgenótipo D4, quando comparados com subgenótipo A1 apresentam soroconversão mais tardia do HBeAg e maiores níveis de VHB–DNA, sugerindo que esse subgenótipo possivelmente está relacionado com potencial para doença mais grave e maior facilidade de transmissão da infecção.

Opções terapêuticas para tratar infecções por Pseudomonas aeruginosa são limitadas por seus diversos mecanismos de resistência, que podem ou não ser detectados no laboratório clínico. Um fenótipo observado na rotina laboratorial é o surgimento de subpopulações resistentes a partir de uma população sensível aos antimicrobianos – heteroresistência. Em P. aeruginosa esse fenômeno já foi investigado para carbapenêmicos, porém, em relação à polimixina B, não há dados literários. Objetivamos avaliar a heteroresistência à polimixina B em dois grupos de P. aeruginosa, um sensível e outro resistente aos carbapenêmicos. Cento e vinte e quatro isolados de P. aeruginosa foram obtidos, aleatoriamente, no Hospital de Clínicas de Porto Alegre em 2011. O perfil de susceptibilidade aos antimicrobianos, disco difusão e microdiluição em caldo – CIM (determinação da concentração inibitória mínima) para polimixina B, foi realizada conforme o Clinical Laboratory Standard Institute (CLSI) 2011. Isolados resistentes aos carbapenêmicos foram avaliados para CIM dos carbapenêmicos e cefalosporinas, e para pesquisa fenotípica e genotípica de metalo-β-lactamase (MβL). Um total de 24/124 isolados foi separado em dois grupos, um sensível (grupo S) e outro resistente (grupo R) aos carbapenêmicos (imipenem e/ou meropenem) para investigação da heteroresistência a polimixina B. Realizou-se ensaio de heteroresistência em duplicata através de diluições seriadas, partindo de uma suspensão de 0,5 de MacFarland e inoculadas em Agar Mueller Hinton com concentrações crescentes de polimixina B (0; 0,5; 1; 2; 4 e 8μg/mL). Após 5 dias de passagem em meio sem antibiótico, foi determinada a CIM dos isolados que cresceram na concentração mais alta de polimixina B. O perfil de análise populacional (PAP) foi definido pela razão do número de unidades formadoras de colônia (UFC) da placa com maior concentração de polimixina B onde houve crescimento bacteriano, pelo número de UFC da placa sem antibiótico. Foram consideradas heteroresistentes amostras que apresentaram subpopulações com crescimento em concentração de polimixina B ≥ 2 μg/mL. Amostras com subpopulações com crescimento em concentração de polimixina B superiores duas vezes ao CIM original, mas < 2 μg/mL, foram classificadas como heterogêneas. O resultado do disco difusão indicou heterogeneidade de suscetibilidade, sendo que gentamicina e imipenem foram os antibióticos com maior percentual de resistência e aztreonam e ciprofloxacino apresentaram os maiores perfis de sensibilidade. Todos os isolados foram sensíveis à polimixina B, com CIM50 e CIM90 de 1μg/mL e 2μg/mL, respectivamente. Trinta e sete isolados (30%; 37/124) apresentaram resistência aos carbapenêmicos. Quatro amostras foram positivas para MβL no teste fenotípico, sendo que o gene blaIMP foi idenficado nestas amostras. O grupo S não apresentou subpopulação heteroresistente, porém 3 isolados apresentaram subpopulação heterogênea. A freqüência do PAP no grupo S variou entre 2,1x10-4 a 4,0x10-7. O grupo R apresentou uma amostra heteroresistente e 6 isolados apresentaram subpopulação heterogênea, a freqüência do PAP variou entre 2,6x10-4 a 2,0x10-7. Os resultados deste estudo indicam baixa ocorrência de heteroresistência à polimixina B em amostras de P. aeruginosa tanto resistentes quanto sensíveis aos carbapenêmicos. No entanto, diversas amostras apresentaram subpopulações heterogêneas (CIM aumentada para a polimixina B), o que poderia explicar eventuais falhas terapêuticas durante o tratamento. / Therapeutic options to treat infections caused by Pseudomonas aeruginosa are limited because of their different resistance mechanisms that can be or don't be detected in the clinical laboratory. A phenotype that has been observed in our laboratory is the emergence of resistant subpopulations from a population sensitive to antibiotics - a phenomenon named heteroresistance. In P. aeruginosa this phenomenon has been investigated for carbapenems, however, in relation to the polymyxin B no data in the literature. We investigate the heteroresistance and polymyxin B into two groups P. aeruginosa, one sensitive and second resistant to carbapenems. One hundred twenty-four strains of P. aeruginosa were obtained randomly at the Hospital de Clinicas de Porto Alegre in 2011. The Antimicrobial Susceptibility Testing (Disk-difusion and the microdiluition broth, with determination of minimum inhibitory concentration (MIC) for polymyxin B, was performed according the Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI), 2011. Isolates resistant to carbapenems were evaluated for MIC of carbapenems and cephalosporins, also for phenotypic and genotypic metallo-β-lactamase (MβL). A total of 24/124 strains were separated in two groups, one sensitive (S group) and other resistant (R group) to carbapenems (imipenem and / or meropenem) for investigation of heteroresistance polymyxin B. The assay was performed in duplicate heteroresistance through serial dilutions, starting from a 0.5 MacFarland suspension and inoculated into Mueller Hinton Agar with increasing concentrations of polymyxin B (0; 0,5; 1; 2; 4 e 8μg/mL). After 5 days of passage in medium without antibiotics, was determined the MIC of the isolates that grew at the highest concentration of polymyxin B. The population analysis profile (PAP) was defined as the ratio of the number of colony forming units (CFU) on the card with the highest concentration of polymyxin B in which bacterial growth, the number of CFU plate without antibiotic. We considered heteroresistant samples that showed subpopulations with growth in concentration of polymyxin B ≥ 2 mg / mL. Samples with subpopulations growing at higher concentration of polymyxin B twice CIM original, but <2 mg / mL were classified as heterogeneous. The result of AST indicated heterogeneity of susceptibility, and gentamicin and imipenem were the highest percentage with antibiotic resistance and aztreonam and norfloxacin showed the highest sensitivity profiles. All isolates were susceptible to polymyxin B, with CIM50 and CIM90 of 1μg/mL and 2μg/mL, respectively. Thirty-seven isolates (30%; 37/124) were resistant to carbapenems. Four samples were positive for the phenotypic test to MβL and the blaIMP gene was indentificated in this samples. The S group showed no subpopulation heteroresistente, but 3 isolates showed heterogeneous subpopulation. The frequency of PAP in group S varied between 2,0x10-4 to 4,0x10-7. The group R provided a sample heteroresistant and 6 isolates showed heterogeneous subpopulation, the frequency of PAP varied between 2,6x10- 4 a 2,0x10-7. The results of this study indicate a low occurrence of heteroresistance to polymyxin B in samples of P. aeruginosa so resistant assensitive to carbapenems. However, several samples showed heterogeneous subpopulations (MIC increased to polymyxin B) which could explain possible treatment failure during treatment.

A doença de Chagas possui uma importante relevância clínica, sendo uma das principais causas de mortalidade e morbidade na América Latina. As relações entre a lesão tecidual miocárdica e os defeitos na inervação autonômica na doença de Chagas são pouco conhecidas. Este trabalho descreve o desenvolvimento e aplicação de métodos de segmentação, corregistro e análise de imagens capazes de prover uma análise integrada das lesões teciduais através do imageamento de ressonância magnética (MRI), perfusão miocárdica e inervação autonômica, disponíveis através da tomografia de emissão de fótons (SPECT). O método proposto é baseado na segmentação e corregistro entre as imagens MRI e imagens SPECT usando 99mTc-MIBI e 123I-MIBG. Para realizar a segmentação do miocárdio, foi utilizada a técnica de Contorno Ativo Geodésico. A segmentação de fibrose em imagens MRI foi realizada com base na maximização da entropia de Tsallis. O corregistro não-rígido foi realizado através do método B-Spline. Os resultados de quantificação indicam correlações entre a presença de fibrose, desnervação e isquemia, além de mostrar a presença de regiões de miocárdio vivo, isquêmico e desnervado. Assim, a ferramenta desenvolvida fornece uma análise integrada de informação, permitindo uma melhor compreensão da relação entre o dano ao tecido do miocárdio e defeitos de inervação autonômica causadas pela doença de Chagas. / Chagas disease is of major clinical relevance, and a major cause of morbidity and mortality in Latin America. The relations between the myocardial tissue damage, myocardial perfusion and defects in autonomic innervations are poorly understood. This study proposes the development and application of image analysis methods capable of providing an integrated visualization and analysis of tissue injuries through enhanced magnetic resonance imaging (MRI), autonomic innervations and myocardial perfusion, available through photon emission tomography (SPECT). The proposed method is based on segmentation and registration between MRI images and SPECT images using 99mTc-MIBI and 123I-MIBG. To perform the segmentation of myocardium, we used Geodesic Active Contour. Fibrosis segmentation in MRI images was performed based on the algorithm of maximum Tsallis entropy. Nonrigid registrations was performed based on B-Spline method. The quantification results showed correlations between the presence of fibrosis, denervation and ischemia, as well as showing the regarded presence of regions of healthy myocardium, ischemic and denervated. Thus, the developed tool provides an integrated analysis of information contributing to a better understanding of the relationship between myocardial tissue damage and autonomic innervations injuries caused by Chagas disease.

As estrelas Be compreendem uma grande faixa de massas e temperaturas. Por definição, são objetos de tipo B com classe de luminosidade entre V e III que apresentam, ou apresentaram alguma vez, linhas de Balmer em emissão (eventualmente metais uma vez ionizados) e/ou linhas com padrões de absorção shell, possivelmente formadas em um envelope circunstelar. Embora se saiba há muito tempo que esses objetos são rodadores rápidos e que giram pelo menos 1,5 a 2 vezes mais rápido do que as estrelas B normais, ainda é incerto se esses objetos são ou não em média rodadores crticos, não obstante as recentes observações interferométricas de HD 10144 (Achernar) (uma estrela Be tpica) indicarem se tratar de um rodador crtico. Devido às suas altas taxas de rotação, as quais originam distorções geométricas e distribuições não uniformes de temperatura dependentes da latitude estelar, os valores de velocidade de rotação derivados por métodos clássicos são sistematicamente subestimados. Além disso, os efeitos da rotação, aliados à presença do envelope circunstelar, mascaram as condições fsicas desses objetos, resultando em diferenças significativas em seus estágios evolutivos na seqüência principal. Neste trabalho apresentamos os resultados do estudo espectroscópico de estrelas Be em duas vertentes. Na primeira tratamos o tema da formação e estrutura do envelope circunstelar de estrelas Be, através das análises de duas estrelas, HD 127972 ( Cen) e HD 10144 (Achernar). Nesse estudo identificamos e caracterizamos seus modos de pulsação, os quais se constituem em um possvel mecanismo de perda de massa e formação do envelope. Além disso, estudamos a estrutura de seus envelopes circunstelares através da modelagem de perfis de Balmer em emissão. Na segunda vertente quantificamos as condições fsicas de 141 estrelas de campo, onde 114 são de tipo Be e 27 estrelas são B normais. Nesse estudo, comparamos os estágios evolutivos desses objetos obtidos através de métodos clássicos com os estágios evolutivos corrigidos dos efeitos da rotação elevada. Concluimos que o \"fenômeno Be\" pode ocorrer em todas as fases da evolução estelar na seqüência principal. / Be stars encompass a large mass and temperature range. By definition, they are B-type objects with luminosity classes V to III that have, or have shown at least once, Balmer lines in emission (eventually single-ionized metals) and/or lines with shell absorption patterns possibly formed in a circumstellar envelope. Though it has long been known that these objects are fast rotators and that they rotate at least 1.5 to 2 times faster than normal B stars, it is still uncertain whether or not these objects are in average critical rotators, although recent interferometric observations on Achernar (a typical Be star) pointed it out to be a critical rotator. Due to their high rotation rates which originate geometrical distortions and non-uniform temperature distributions dependent on the stellar latitude, the rotation velocity values derived from classical methods are systematically underestimated. Moreover, the rotation effects allied to the continuum emission due to the presence of a circumstellar envelope disguise the physical conditions of these objects, resulting in significative differences of their main-sequence evolutionary stages. In this work we present the results of the spectroscopic study of Be stars in two approaches. In the first one we treat the subject of formation and structure of the circumstellar envelope of Be stars through the analyses of two stars, HD 127972 ( Cen) and HD 10144 (Achernar). In this study we identify and characterize their pulsation modes, which constitute in a possible mechanism of mass loss and envelope formation. Moreover we study the structure of their circumstellar envelopes through the modeling of Balmer profiles in emission. In the second approach we quantify the physical conditions of 141 field stars, where 114 are Be-type stars and 27 stars are normal B stars. In this study, we compared the evolutionary stages of these objects obtained through classical methods with evolutionary stages corrected for high rotation effects. We conclude that the \"Be phenomenon\" can occur at whatever stage of the stellar evolution on the main sequence.