Orientador: Edvaldo Aparecido Amaral da Silva / Coorientador: Olivier Leprince / Banca : Henk W.M Hilhorst / Banca: José Márcio Rocha Faria / Banca: Julia Buitink / Banca: Olivier H.L.Leprince / Resumo: Soja é uma das mais culturas oleaginosas usadas para alimentação animal e humana bem como para uma larga aplicação industrial. Dada a sua capacidade de fixar nitrogênio atmsférico, é fundamental para o desenvolvimento de uma agricultura sustentável. Produzir sementes altamente vigorosas é a chave para aumentar a eficiência da produção da cultura. Longevidade de semente é a capacidade de sobreviver no estado seco por períodos prolongados e representa uma importante característica de qualidade da semente. Nesta pesquisa o objetivo foi obter insights sobre processos moleculares que regulam a aquisição de longevidade em sementes de soja. Com o sequenciamento de nova geração da Illumina, o RNA foi sequenciado a partir de sete estágios diferentes durante a aquisição de longevidade, gerando entre 14 e 38 milhões de reads. Estes reads foram alinhados com os modelos de genes de Glycine max Wm82.a2.v1 preditos no genoma de soja. Transcritos diferencialmente expressos (DET) foram correlacionados com o aumento da longevidade. Análise de enriquecimento da ontologia do gene daqueles DET revelaram uma siginificante sobre representação de termos associados com resposta a estresse e processamento e modificação de RNA. Processo biológico fotossíntese foi relacionado à baixa longevidade. Heat Shock Factors (HSF) e vários fatores de transcrição associados com resposta a estresse biótico (WRKY e NFXL1) são genes candidatos com possíveis papéis na longevidade de semente e merecem uma caracterizaçã... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Soybean is one of the most important oil crop species used for food and feed as well as a range of industrial applications. However, producing highly vigorous seeds is a key lever to increase crop production efficiency. Low physiological seed quality, which is more prone to occur under tropical environment, leads to poor stand establishment and decreased in yields. Seed longevity is the ability to survive the dry state for prolonged periods of time and represents an important trait for seed quality. Here, the objective was to obtain insights into the mechanisms regulating the progressive acquisition of longevity. Using Illumina high-throughput sequencing, RNA was sequenced from seven different stages during the acquisition of longevity, generating between 14 and 38 million of reads. These reads were aligned to the Glycine max Wm82.a2.v1 gene model. Differentially expressed transcripts (DET) were correlated with the increase in seed longevity. Transcriptome and GO enrichment analyses of these DET revealed a significant over-representation of terms associated with response to stress and RNA processing and modification. Photosynthesis biological process was related to low seed longevity. HSF and several TF associated with biotic defense (WRKY3 and NLFX1) are candidate genes whose putative role in seed longevity deserve further characterization. We also performed the determination of the content of non-reducing soluble sugars, and we observed that the accumulation of non-reducin... (Complete abstract click electronic access below) / Résumé: Le soja est l'une des plus importantes espèces de cultures d'huile utilisée aussi bien en nourriture que dans diverses gammes d'applications industrielles. C'est pourquoi produire des graines vigoureuses est un levier essentiel pour augmenter efficacement de la production de la récolte. La qualité de graine physiologiquement faible, qui est plus à même de se produire sous un environnement tropical, mène à un pauvre établissement des plantes ainsi qu'à une diminution du rendement. La longévité d'une graine est la capacité de celle-ci à survivre à la sécheresse durant de longues périodes et représente une caractéristique importante sur la qualité d'une graine. Ici, l'objectif était d'obtenir une idée sur les mécanismes en régulant l'acquisition progressive de la longévité. En utilisant le séquençage à haut-débit, ARN a été séquencé en sept différentes étapes durant l'acquisition de longévité, générant entre 14 et 38 millions de reads. Ces reads ont été alignés sur les modeles de gene de Glycine max Wm82.a2.v1. Les transcripts différentiellement exprimés (DET) sont corrélée avec l'augmentation de la longévité de la graine. L'analise d'enrichissement via GO de ces DET ont révélé une importante surreprésentation des termes associés à la réponse au stress et traitement et modification de l'ARN. Le processu biologique Photosynthèse était liée à une faible longévité des semences. HSF (heat shock factor) et plusieurs facteurs de transcription associés à la défense biotique (WRKY 3 et ... (Résumé complet accès életronique ci-dessous) / Doutor

Orientador: Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima / Coorientador: Lúcia Galvão de Albuquerque / Coorientador: Maria Cristina Thomas / Coorientador: Robson Carlos Antunes / Banca: Simone Cristina Méo Niciura / Banca: Beatriz da Costa Aguiar Alves Reis / Banca: Jeffrey Frederico Lui / Banca: Janete Apparecida Desidério / Resumo: A suplementação de vitaminas e minerais pode melhorar a fertilidade do sêmen de suínos. No entanto, os resultados têm se mostrado contraditórios, pois as avaliações do sêmen normalmente são subjetivas. A avaliação mais precisa poderia ser obtida pela análise de transcritos relacionados a fertilidade dos espermatozoides. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito de suplementação intramuscular de vitaminas e minerais sobre a qualidade de sêmen e analisar a expressão de alguns transcritos pelo método de qPCR. Para tal, coletas de sêmen de nove machos foram avaliadas segundo a motilidade, concentração e resistência ao resfriamento e submetidas à extração do RNA. Após 60 dias, seis machos sofreram a aplicação de suplementos minerais-vitamínicos comerciais (Selenphós® e Zimag®). Outros três machos não receberam a suplementação e foram utilizados como controle. Os 60 dias foram considerados para respeitar o ciclo espermatogênico. Após este período, outras coletas de sêmen de cada macho foram realizadas e submetidas aos mesmos procedimentos. Os genes alvo escolhidos para acessar a qualidade dos espermatozoides foram: Bcl-2l que é um gene anti apoptótico; gene ativador da proteína de proteção ao choque térmico (HSP 90); gene da enzima peroxiredoxina 5, protetora contra danos oxidativos e gene inibidor da acrosina, relacionado a capacitação espermática. Os resultados mostraram aumento do número de dias em que as amostras de sêmen diluídas com diluente comercial, resfriadas a 15-18ºC, permaneciam com motilidade acima de 70% após a suplementação com vitaminas e minerais. A concentração dos espermatozoides e volume dos ejaculados, após a suplementação, também melhorou, atingindo taxas de 52 e 57%, respectivamente. Porém, os transcritos para os genes estudados não apresentaram diferença de expressão antes e depois do tratamento com as vitaminas e minerais / Abstract: Vitamin and mineral supplementation could improve the swine semen fertility. However, the results, until now, are controversial because of the subjectivity of the analyses. A precise evaluation could be achieved by the analyses of the spermatozoa transcripts important for the boar fertility. The present work proposes to evaluate the effect of intramuscular vitamin and mineral supplementation on semen quality by analyzing some spermatozoa transcripts, using qPCR methodology. The semen collection of nine boars were evaluated for motility, concentration and resistance to cold, and then, submitted to RNA extraction. After this period, six of these boars received an intramuscular supplement of vitamins and minerals (Zimag® and Selenphos®). Another three animals did not receive the supplementation for control. After 60 days, other semen collections were done and submitted to the same processes of analyses and RNA extraction. The target genes to access spermatozoa quality was:: Bcl-2l, an ant apoptotic gene; gene that active the heat shock protein (HSP 90), a protein related to the capacity of the spermatozoa to react to heat stress; the gene for the ant oxidant enzyme PRDX5; the gene of acrosin inhibition, related to sperm capacitation. There was a improvement on the number of days that the semen samples, diluted on BTS and stored at the 15-18o C temperature, showed an acceptable motility above 70% after the treatment with vitamins an minerals. The concentration of the spermatozoids and volume of the ejaculation increased about 52 and 57 %, respectively, but there was no difference on transcripts expression for the studied genes after the vitamin and mineral treatment / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:53Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-09-27Bitstream added on 2014-06-13T18:41:03Z : No. of bitstreams: 1 silvajunior_aj_dr_rcla.pdf: 313486 bytes, checksum: 5ec52aab0c75f69f16caef3fc2aa1c15 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O exercício resistido desperta bastante interesse devido à magnitude de suas respostas metabólicas, hormonais e também com o gasto calórico total. Objetivos: estudar o comportamento da lactacidemia e parâmetros gasométricos arterializado através de uma técnica pouco invasiva (aparelho Abbott i-STAT Portable Clinical Analyser); estudar os ajustes hormonais (cortisol, GH e insulina) e quantificar o gasto calórico total durante exercício de leg press (LP) e supino reto (SR). Métodos: 10 estudantes do curso de educação física da UFSCar, idade 20,3 ± 4,2 anos, estatura 177,2 ± 4,6 cm, peso corporal de 74 ± 10 kg e IMC 23,8 ± 3,2 kg/m2 realizaram 4 séries de 10 repetições a 70% de 1RM com 3 minutos de intervalo em LP e SR. Foram analisados lactacidemia e escalas subjetiva de esforço (Borg e Omni) em repouso (Pré) e ao final de cada série. Os parâmetros gasométricos arterializados (paO2, paCO2, pH, HCO3 - e BE) foram analisados Pré e imediatamente após o término do esforço (Rec. 0’). Os hormônios cortisol, GH e insulina foram analisados em Pré e em diferentes momentos durante a recuperação (Rec.0’, Rec. 30’ e Rec. 90’). Os parâmetros ventilatórios (VO2, CO2 e VE) foram analisados durante toda a sessão. Resultados: Ocorreram elevações (P<0,05) nas concentrações médias (±DP entre Pré e 4a série) de lactato sanguíneo (LP 1,4±1,9mmol/l para 6,6±1,5mmol/l e SR 1,1±0,5mmol/l para 6,5±1,3 mmol/l); Borg (LP 10,6±2,2 para 15,5±2,1 e SR 9,7±2,3 para 15,1±1,9); Omni (LP 3,6±1,8 para 6,8±2,4 e SR 3,0±1,4 para 7,5±1,5) e paO2 (LP 80,5±6,4mmHg para 94,5±5,3mmHg e SR 80,5±6,4mmHg para 84,7±8,6mmHg). E reduções (P<0,05) em pH (LP e SR de 7,5 para 7,4); paCO2 (LP 34,1±3,1mmHg para 33±8,8mmHg e SR 34,1±3,1 mmHg para 32,3±3,1mmHg); HCO3 - (LP 27,7±1,5mmol/l para 19,5±2,9mmol/l e SR 27,7±1,5mmol/l... / Resistance exercise arouses great interest because of the magnitude of their responses metabolic, hormonal, and also with the total caloric expenditure. Objectives: To study the behavior of lactate and arterial blood gas parameters through a minimally invasive technique (Abbott i-STAT Portable Clinical Analyzer), to study the adjustments hormone (cortisol, GH and insulin) and quantify the energy expenditure total during exercise leg press (LP) and bench press (BP). Methods: 10 students of physical education UFSCar, age 20.3 ± 4.2 years, height 177.2 ± 4.6 cm, weight 74 ± 10 kg and BMI 23.8 ± 3.2 kg/m2 performed 4 sets of 10 repetitions at 70% 1RM with 3 minutes apart in LP and SR. Were analyzed blood lactate and ratings of perceived exertion (Borg and Omni) at rest (Pre) and at the end of each set. Arterial gasometric parameters (PaO2, PaCO2, pH, HCO3 - and BE) were analyzed pre and immediately after the exercise (Rec 0'). Hormones cortisol, GH, and insulin were analyzed at different times pre-and during recovery (Rec.0', Rec 30' and Rec 90'). The ventilatory parameters (VO2, CO2 and VE) were measured throughout the session. Results: There were increases (P<0.05) in mean (± SD between Pre and 4th set) concentrations blood lactate (LP 1.4±1.9mmol/l to 6.6±1.5mmol/l and BP 1.1±0.5mmol/l to 6.5±1.3 mmol/l), Borg (LP 10.6±2.2 to 15.5±2.1 and BP 9.7±2.3 for 15.1±1.9), Omni (LP 3.6±1.8 to 6.8±2.4 and BP 3.0±1.4 to 7.5±1.5) and paO2 (LP 80.5±6.4 mmHg to 94.5±5.3mmHg and BP 80.5±6.4mmHg to 84.7±8.6mmHg). And reductions (P<0.05) in pH (LP and BP from 7.5 to 7.4), PaCO2 (LP 34.1±3.1mmHg to 33±8.8 mmHg and BP 34.1±3.1 to 32.3±3.1 mmHg); HCO3- (LP 27.7±1.5mmol/l to 19.5±2.9mmol/l and BP 27.7±1.5mmol/l to 20.7±3,0mmol/l) and BE (LP 4.8 to- 5.3 and BP 4.8 to -4.0), with no difference between LP and BP. Cortisol... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Marco Eustáquio de Sá / Banca: Orivaldo Arf / Banca: Ronaldo da Silva Viana / Resumo: Os fertilizantes tem a finalidade de nutrir, estimular o desenvolvimento e proteger a planta contra microrganismos, por aplicações via foliar, via solo ou via semente, podendo-se ser ótimo complemento da adubação principal. Assim o presente estudo foi desenvolvido com objetivo de se verificar o efeito da aplicação do produto contendo ácido salicílico e Nitrogênio (10%) aplicado via foliar, em duas cultivares de feijão e em três estádios fenológicos. O experimento foi realizado na Fazenda de Ensino Pesquisa e Extensão da UNESP, localizada no município de Selvíria, MS, em 2012 e 2013. Os tratamentos foram dispostos em delineamento de blocos casualizados, em esquema fatorial (5x3x2) com quatro repetições, constituídos por cinco doses do produto foliar (0; 1,0; 1,5; 2,0 e 2,5 L ha-1), com formulação de ácido salicílico com 10% de nitrogênio em três estádios (V4-3, V4-6 e R5) de duas cultivares de feijão (IAC-Alvorada e Verde-ISA). Foi avaliado o aspecto sanitário da cultura, matéria fresca, número de vagens granadas e chochas por planta, índice de clorofila total, teor de nitrogênio foliar, produtividade de grãos, germinação, condutividade elétrica, envelhecimento acelerado, deterioração controlada e qualidade sanitária das sementes. As cultivares IAC-Alvorada e Verde-ISA apresentaram produtividade semelhante; O produto foliar contendo indutor de resistência não influenciou a produtividade das cultivares IAC-Alvorada e Verde-ISA. Em caso de aplicação do produto, quando realizado durante os estádios vegetativos (V4-3 e V4-6) se mostrou mais eficiente em relação à aplicação em R5. A germinação não diferiu entre as cultivares, entretanto, para análise do vigor a cv. IAC Alvorada apresentou melhores características. Devido a baixa incidência de patógenos nas sementes provenientes das safras 2012 e 2013 das cultivares, não sendo possível verificar a potencialidade do produto foliar contendo ... / Abstract: Fertilizers has the purpose of nutrition, stimulate development and protection of plants against microorganisms, by foliar applications, soil applications or by seed applications. Thus, the present study was developed aiming to verify the effect of the application of the product containing salicylic acid and nitrogen (10%) foliar applications in both cultivars and in three phenological stages. The experiment was performed on Education Farm Research and Extension UNESP, located in Selvíria, MS, in 2012 and 2013. The treatments were arranged in a randomized complete blocks, factorial (5x3x2) with four replications, composed of five rates of leaf product (0 , 1.0, 1.5, 2.0 and 2.5 L ha-1) with formulation of salicylic acid with 10% nitrogen in three stages (V4-3, V4-6 e R5) of both cultivars beans (IAC-Alvorada e Verde-ISA). Considering the sanitary aspect of culture were assessed, fresh weight, number of grenades and empty pods per plant, total chlorophyll content, leaf N content, grain yield, germination, electric conductivity, accelerated aging, controlled deterioration and sanitary quality of seeds. The IAC-Alvorada and Green-ISA cultivars had similar productivity. The leaf product containing inducer of resistance did not affect yield of the cultivars IAC-Alvorada and Green-ISA. In case of application of the product, when performed during the vegetative stages (V4-3 and V4-6) was more efficient for the application in R5. Germination did not differ between cultivars, however, to analyze the effect cv. IAC Dawn presented better features. Due to the low incidence of pathogens in seeds from harvests of 2012 and 2013 cultivars, it is not possible to verify the capability of the leaf containing product inducer of resistance. Fertilizers is intended to nourish, stimulate development and protect the plant against microorganisms, for foliar applications, the soil or via seed, and we can be great addition to the main fertilizer. Thus, the present ... / Mestre

Orientador: Antonio Nader Filho / Banca: Ruben-Pablo Schocken-Iturrino / Banca: José Jurandir Fagliari / Banca: Luiz Francisco Zafalon / Banca: Nilson Roberti Benites / Resumo: Com o objetivo de avaliar a eficácia do ácido lático frente ao iodo na anti-sepsia após a ordenha na prevenção da mastite bovina, foram estudados 668 quartos mamários de vacas holandesas em dois rebanhos leiteiros, sendo um experimental e outro comercial. Para tanto adotou-se o delineamento experimental tipo split-herd baseado na redução da ocorrência natural de novos casos de infecções intramamárias (recomendado pelo protocolo do National Mastistis Council). Os resultados obtidos evidenciaram que o ácido lático apresentou uma eficácia de 57,4% na redução do número de novos casos de IIM causados por Corynebacterium spp., Staphylococcus spp. e Streptococcus spp. entre as vacas estudadas no rebanho experimental. No rebanho comercial a eficácia foi de 42,9% entre os casos de IIM determinados por Staphylococcus spp., porém não mostrou eficácia entre os casos de IIM determinados por Corynebacterium spp. e Streptococcus spp.. Tanto o ácido lático quanto o iodo não interferiram nas taxas de cura espontânea, persistência de IIM e na ocorrência de casos clínicos de mastite entre as vacas estudadas nos rebanhos experimental e comercial. A utilização do ácido lático na anti-sepsia dos tetos de vacas após a ordenha, mostrou-se eficaz na redução do número de novos casos de IIM, desde que acompanhada por outras medidas de controle. / Abstract: With the objective of evaluate the efficacy of a lactic acid against an iodine postmilking teat dip in preventing bovine mastitis, 668 mammary quarters from Holsteins cows in two dairy herds, one experimental and other commercial, were studied. The National Mastitis Council recommended protocol for determining efficacy of a postmilking barrier teat dip based on reduction of naturally occurring new intramammary infections was used, in a split-herd experimental design. Results demonstrated that lactic acid showed an efficacy of 57.4% in reducing new intramammary infections caused by Corynebacterium spp., Staphylococcus spp. and Streptococcus spp., among the experimental herd cows. In the commercial herd, the efficacy was 42.9%, but only in reducing the number of new cases of intramammary infections caused by Staphylococcus spp., and not for new cases of intramammary infections caused by Corynebacterium spp., and Streptococcus spp. Both, lactic acid and iodine didn't interfere in spontaneous cure, intramammary infections persistence and clinical mastitis rates in experimental and commercial herds. The use of a lactic acid teat dip antisepsis after each milking was effective in reducing new cases of IMI, as part of a mastitis control program. / Doutor

Quefír é uma bebida láctea originada do Cáucaso, produzida a partir da fermentação alcoólica e ácido-lática dos grãos de quefír, que são microrganismos que vivem em perfeita simbiose. Assemelhando-se ao iogurte natural quanto ao sabor, aroma, consistência, o quefír é um alimento muito rico e por isso indicado para crianças e idosos. Possui inúmeras indicações terapêuticas, mas ainda é pouco conhecido no país. Quefír foi durante muito tempo conhecido apenas pelos povos montanheses da região Caucásica, onde é preparado com leite de ovelha ou de cabra e recebe também o nome de "milho do profeta", em alusão a Maomé, no referencial islâmico. Com base nos resultados apresentados em diversos trabalhos, comprovando a ação antimicrobiana dos grãos de quefír, prosseguiram-se os estudos pesquisando a ação antibacteriana do filtrado esterilizado de quefír artesanal, frente a diversas situações problemas. Estudou-se a possibilidade de utilizar o filtrado de quefir tradicional (artesanal ou não industrializado), previamente esterilizado, como antisséptico/desinfetante em agroindústria familiar ou produção animal; forma alternativa aos desinfetantes químicos convencionais, considerando sua eficácia (benefício esperado/ benefício obtido), através da determinação de sua atividade antibacteriana. Foi determinada as concentrações inibitórias mínimas (CIMs) e concentrações bactericidas mínimas (CBMs) do filtrado de quefir tradicional frente a duas bactérias Gram-positivas {Staphylococcus aureus ATCC 25923, e Enterococcus faecalis ATCC 19433) e duas bactérias Gram-negativas {Escherichia coli ATCC 11229 e Salmonella enteritidis ATCC 11076 ), levando em consideração três técnicas diferentes de esterilização do filtrado, no sentido de avahar a ação antibacteriana qtianto ao tempo de exposição (cinco, quinze, trinta e sessenta minutos), presença ou ausência de suporte (aço inoxidável e pano de algodão), presença ou ausência de matéria orgânica (albumina sérica bovina, simulando sujidades de uma agroindústria). Utilizou-se a diluição serial com a técnica de sistema de tubos múltiplos e a técnica de suspensão do inóculo. Para esterilizar o filtrado de quefir utiHzaram-se três diferentes técnicas: fervura convencional por quinze minutos, tindalização durante cinco minutos, por três dias consecutivos e autoclave por quinze minutos. Estas três técnicas de esterilização não apresentaram diferenças significativas entre elas. Os resultados demonstram um maior efeito bacteriostático frente a bactérias Gram-negativas e um melhor efeito bactericida frente a bactérias Gram-positivas. Staphylococcus aureus foi a bactéria que demonstrou maior resistência para a inibição (bacteriostasia); porém após sessenta minutos exposta ao quefir (75%), a inativação (bactericidia) ocorreu em 100 UFC/mL. Enquanto que a Salmonella demonstrou sensibilidade à inibição, mas nas mesmas condições, ou seja, aos sessenta minutos exposta ao quefir (75%), a inativação ocorreu em somente 10 UFC/mL. Nas primeiras vinte e quatro horas houve diferença muito significativa no desempenho do filtrado de quefir entre as linhas com e sem desinibidores bacterianos. Eis a importância do uso de desinibidores na técnica para evitar interpretações errôneas de resultados "falsos-negativos", ou seja, evitar uma leitura de morte bacteriana, quando na verdade o que ocorreu foi inibição bacteriana. Estes resultados despertam o interesse em prosseguir a avaliação de desinfetantes biológicos a serem usados na agroindústria, na saúde e na produção animal, visando à desinfecção como um controle direcionado aos microrganismos indesejáveis em situações problemas específicos, dificultando a transmissão ou a redução da dose infectante. / Kefir is a milky beverage originated of Caucasu, made by lacteo-acid and alcoholic fermentation ofkefir grams which are microorganisms that live tn perfect symbiosis. It seems like natural yogurt as taste, smell, consistence, kefir is a food very rich and that 's because it 's indicated for children and old ages. It has countless therapeutical indications, but it '5 still unknown in Brazil. Kefir was, during a very long time, known only by montainese people from the Caucasus' region, where is made with sheep or she-goat milk and it also recives the name of "prophet com in Maome allusion, on the Islamic reference. Throughout the shown results in several works, proving kefir grains' antimicrobian action, the studies went on searching the artisan kefir sterilized filtered's antibacterial action, front the several situations problems. Showed the possibility of use the tradicional kefir's filtered (artisan or not industrialized), previous sterilized, as antiseptic/disinfectant in familiar agroindustrial or animal production; alternative from to the conventional chemical desinfectants, considering its efficíency (expect benefit/gotten benefit), throughout the determination of its antibacterial activity. The Minimum Concentrations Inhibitions (CIMs) were determined and the Minimum Concentrations Bactericide (CBMs) of the tradicional kefir 's filtered front the two positives-Gram bactérias (Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Enterococcus faecalis ATCC 19433), and two negatives-Gram bactérias (Escherichia coli ATCC 11229 and Salmonella enteritidis ATCC 11076), taking into consideration three different technics to sterilize the kefir 's filtered, in perceive of evaluate the antimicrobian action as to in the exposition of time (five, fifteen, thirty and sixty minutes), presence or absence of support (stainless steel and cotton of cloth), presence or absence of organic material (albumin bovine in simulation dirts of one agroindustrial). The utilized methodology was the serial dilution with the multiple tube system technic and the tnocul suspension technic. To sterilize the kefir 's filtered was used three different technics: the convencional effervescence by fifteen minutes, the tindalization during five minutes, by three days successives and the autoclave by flfteen minutes. These three technics of sterilization didn 't show differences significatives among them. The results shown in a bigger bacteriostatic effect into negatives-Gram bactérias and a better bactericid effect in to positives-Gram bactérias. Staphylococcus aureus demonstrated the bigger resistance bactéria of inhibition, but qfíer the sixty minutes exposed in the kefir (75%), inactived in 100 UFC/mL. While Salmonella showed sensitivity of inhibition, but equal condition, or then, for the sixty minutes exposed in the kefir (75%), inactived just in 10 UFC/mL. At the first twenty-four hours there was very significative difference in performance of kefir's filtered among the Unes with and without bacterial desinhibition. It is the importance to use desinhibition in technic to avoid false tnterpretation of results, or then, to avoid readmg of dead bacterial, when actually what happened was bacterial inhibition. These results awake the interesting to go on the biologics disinfectants valuation to use in agroindustrial, in health and animal production, looking at disinfection how a control in to conduce undesirable microorganisms on specific situations problems, to make difftcult the transmission or the reduction of infect dose.

Orientador: Dalton Muller Pessoa Filho / Banca: Marcelo Papoti / Banca: Alessandro Moura Zagatto / Resumo: Está bem estabelecido que a contribuição glicolítica anaeróbia é predominante nos eventos próximos a 50 e 100 metros, e que a contribuição aláctica alcança sua maior capacidade de contribuição próximos aos 50 metros. Todavia, pode-se questionar se a taxa de ajuste do metabolismo anaeróbio não seria mais apropriada para analisar os desempenhos de curta duração (50 e 100 metros), ao invés da demanda total. Bem como, pouco se sabe se AOD e as demandas de cada metabolismo (láctico vs. aláctico vs aeróbio) tendem a apresentar respostas diferentes entre sexos. Assim, o objetivo do presente estudo foi analisar o déficit acumulado de oxigênio (AOD) nos desempenhos do crawl em distâncias de 50, 100 e 200 metros, comparando-o pelo método da variação da resposta lactacidêmica e perfil aláctico da curva de débito oxigênio. Participaram deste estudo 12 (doze) nadadores homens (16,8 ± 2,2 anos, 179,3 ± 7,0 cm e 69,4 ± 7,8 kg) e 10 (dez) nadadoras (15,5 ± 3 anos, 161,8 ± 6,2 cm e 55,5 ± 6,8 kg). Todos realizaram o desempenho máximo para as distâncias de 50, 100 e 200 metros para a determinação do O2 acumulado. Após 24 horas, os nadadores desempenharam um teste incremental escalonado máximo e descontínuo (TIE: 6x250m e 1x200m, 50 a 100% da v200m) para a avaliação do V̇O2max e obtenção da relação V̇O2 vs. velocidade de nado em intensidades submáximas. A partir desta relação, projetou-se a demanda de O2 nas velocidades correspondentes ao 50, 100 e 200m foi estimada. Em seguida, a permuta gasos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: It is well established that the anaerobic glycolytic contribution is predominant in events close to 50 and 100 meters, and that the alactic contribution reaches its greatest capacity of contribution close to 50 meters. However, one question that needs to be asked is whether a rate of anaerobic metabolism adjustment is no longer useful for analyzing short-term performance (50 and 100 meters), as opposed to total demand. As well as, little is known if AOD and the demands of each metabolism (lactic vs. alactic vs aerobic) tend to present different responses between genders. Thus, the objective of the present study was to analyze the accumulated oxygen deficit (AOD) in crawl performance at distances of 50, 100 and 200 meters, comparing it by the lactacidemic response and alactic profile of the recovery curve Twelve (12) male swimmers (16.8 ± 2.2 years, 179.3 ± 7.0 cm and 69.4 ± 7.8 kg) and 10 (ten) female swimmers (15.5 ± 3 years old, 161.8 ± 6.2 cm and 55.5 ± 6.8 kg)) participated in this study. All participants were performed a maximal effort at 3 distances (50, 100 and 200 meters) for the determination of accumulated O2 After 24 hours, swimmers performed a maximum and discontinuous step incremental test (TIE: 6x250m and 1x200m, 50 to 100% of v200m) for an evaluation of V̇O2max and obtaining the VO2 vs. swimming speed relationship. From this relation, the demand for O2 at the velocities corresponding to 50, 100 and 200m was estimated. Then, gas exchange was also analyzed during... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Cleslei Fernando Zanelli / Co-orientador: Sandro Roberto Valentini / Banca: Maria Célia Bertolini / Banca: Otavio Henrique Thiemann / Banca: Rafael Victorio Carvalho Guido / Banca: Mario Henrique Bengtson / Resumo: eIF5A é uma proteína altamente conservada entre arqueas e eucariotos e apresenta uma modificação pós-­‐traducional única e essencial para sua função, chamada de hipusinação. eIF5A foi inicialmente identificado como um fator de início de tradução (eukaryotic translation Initiation Factor 5A) porém foi demonstrado que eIF5A atua na elongação da tradução. Recentemente foi demonstrado que eIF5A seja mais importante na tradução específica de proteínas contendo resíduos consecutivos de prolina. No intuito de aprofundar o conhecimento da participação de eIF5A no processo de tradução, o presente trabalho de doutorado estudou a relação funcional entre eIF5A e o tRNA de alanina (tRNAAla), revelada como uma interação genética em Saccharomyces cerevisiae, assim como avaliou a relação de eIF5A com eventos da síntese proteica como Programmed Ribosomal Frameshifting (PRF), misincorporation e readthrough, utilizando repórteres de duas luciferases. Primeiramente, foi analisada a especificidade alélica da supressão em alto número de cópias ocasionada por tRNAAla e a capacidade de tRNAs para outros aminoácidos suprimirem o fenótipo de crescimento de mutantes de eIF5A, e os resultados mostraram que esta supressão não se dá de maneira alelo específica e curiosamente, dentre os outros tRNAs testados, apenas o tRNAiMet é capaz de suprimir o fenótipo de crescimento do mutante tif51AK56A de eIF5A. A supressão observada por estes tRNAs não reflete na melhora do defeito no perfil polissomal, para ambos os casos. Foi testada também a interação física direta entre eIF5A e o tRNAAla, utilizando o sistema de triplo-­‐híbrido, no entanto, nenhuma interação foi detectada, sugerindo que a interação observada entre eIF5A e o tRNA em complexo com 80S seja dependente do ribossomo. Os experimentos de Programmed Ribosomal Frameshifting (PRF) revelaram um aumento na taxa de PRF para... / Abstract: eIF5A is highly conserved between archaea and eukaryotes and has a unique and essential postranslational modification, called hypusination. eIF5A was initially described as a translation initiation factor (eukaryotic Initiation Factor 5A) but it was shown that eIF5A engaged in translation elongation. Recently findings demonstrated that eIF5A is most important for specific translation of proteins containing consecutive proline residues. In order to deepen the knowledge of function of eIF5A during the translation process, this research studied the functional correlation between eIF5A and the alanine tRNA (tRNAAla), revealed as a genetic interaction in Saccharomyces cerevisiae, and also evaluated the effect of eIF5A in events of protein synthesis as Programmed Ribosomal frameshifting (PRF), misincorporation and readthrough using dual luciferase reporters. First, the allele specificity of the high copy suppression caused by tRNAAla and the ability of tRNAs for other amino acids to suppress the growth of eIF5A mutants were analyzed, and the results showed that this deletion does not occur in an allele specific manner and interestingly, among other tRNAs tested, only tRNAiMet is able to suppress the growth phenotype of the eIF5A mutant tif51AK56A. The suppression induced by these tRNAs does not reflect in improvement of the mutant defect in polysomal profile, for both cases. It was also tested direct physical interaction between eIF5A and tRNAAla using three-­‐hybrid system, however, no interaction was detected, suggesting that the interaction observed between eIF5A and tRNA in the 80S complex is dependent on the ribosome. The Programmed Ribosomal frameshifting (PRF) experiments showed an increase in PRF numbers for the signals of the virus LA and HIV-­‐1 in eIF5A mutant strains, demonstrating that eIF5A function interferes with mRNA recoding events. Furthermore, the same mutants showed an increase... / Doutor

Orientador: Valéria Nobre Leal de Souza Oliva / Banca: Paulo Sérgio Patto dos Santos / Banca: Newton Nunes / Resumo: Objetivou-se com este estudo avaliar os efeitos do isofluorano e tempo de anestesia com o mesmo sobre a perfusão tecidual de cães sob duas diferentes concentrações. Oito cães da raça Beagle foram anestesiados em múltiplos de CAM correspondentes a 1,5 (G1,5) e 2,0 (G2,0) CAM por duas horas, sendo mensuradas a cada 20 minutos as variáveis frequência cardíaca (FC), pressão sistólica (PAS), média (PAM) e diastólica (PAD), pressão da artéria pulmonar média (PAPm), pressão capilar pulmonar média (PCPm), pressão venosa central (PVC), índice cardíaco (IC), índice sistólico (IS), índice de trabalho ventricular esquerdo (ITVE), índice de resistência periférica total (IRPT), índice de resistência vascular pulmonar (IRVP), índice de oferta de oxigênio (IDO2), índice de consumo de oxigênio (IVO2), taxa de extração de oxigênio (TeO2), saturação venosa mista de oxigênio (SvO2) e lactato sanguíneo arterial. As médias de PAM, IC, IS e ITVE, diferiram significativamente entre os grupos, o que não foi observado nas variáveis IRPT e IRVP, as quais apresentaram diferença somente entre momentos de um mesmo grupo. Da mesma forma, houve diminuição progressiva da IRPT em G1,5, mas não em G2,0. Houve redução de IDO2 em G2,0 quando comparada a G1,5, mas não de IVO2. O lactato apresentou valores acima dos limites de referência, não diferindo entre grupos e reduzindo-se ao longo do tempo, enquanto que SvO2 foi menor em G2,0, acompanhada de maior TeO2 neste grupo. Concluiu-se que a perfusão global é prejudicada por concentrações maiores de isofluorano, ao passo que a perfusão periférica é mantida. Existe um limite para o grau de vasodilatação periférica causada pelo isofluorano em cães e o tempo de exposição ao anestésico interfere com a dinâmica cardiovascular tanto quanto sua concentração / Abstract: The aim of this study was to evaluate the effects of isoflurane and anesthetic time period on tissue perfusion of dogs under two different concentrations. Eight beagle dogs were anesthetized in MAC multiples correspondent to 1.5 (G1.5) e 2.0 (G2.0) MAC for two hours, being the following variables collected every 20 minutes: heart rate (HR), arterial systolic (SAP), mean (MAP) and diastolic (DAP) pressures, pulmonary artery mean pressure (PAPm), pulmonary artery wedge pressure (PAWP), central venous pressure (CVP), cardiac index (CI), systolic index (SI), left ventricle work index (LVWI), total peripheral resistance index (TPRI), pulmonary vascular resistance index (PVRI), oxygen delivery index (IDO2), oxygen consumption index (IVO2), oxygen extraction (TeO2), mixed venous oxygen saturation (SvO2) and arterial blood lactate. Mean values of MAP, CI, SI and LVWI were different between groups, and such differences were not observed in TPRI and PVRI, which differences were only significant between time points in each group. In addition, there was progressive reduction of TPRI in G1.5, but not G2.0. There was a reduction of IDO2 in G2.0 when compared to G1.5, but not IVO2. Lactate levels were above reference limits, with no difference between groups and decreasing over time, whereas SvO2 was lower in G2.0, accompanied by higher TeO2 in that group. We conclude that global perfusion is impaired by higher concentrations of isoflurane, while peripheral perfusion is maintained. There is a limit to the degree of vasodilation caused by isoflurane in dogs and the time of exposure to the anesthetic interferes with cardiovascular dynamics as much as its concentrations / Mestre

Orientador: Edivaldo Aparecido Amaral da Silva / Banca: Juliana Pereira Bravo / Banca: João Nakagawa / Banca: Ana Dionísia da Luz Coelho Novembre / Resumo: A planta de Solanum paniculatum pertence à família Solanaceae e apresenta crescimento e desenvolvimento em condições ambientais desfavoráveis, tais como estresse hídrico e salino, solos ácidos e solos com deficiência em nutrientes. Por tanto, o objetivo deste trabalho foi estudar o transcriptoma de sementes de S. paniculatum L induzidas a tolerar déficit hídrico. As sementes secas foram acondicionadas em tubos contendo 15 mL de solução de PEG 8000 com potencial osmótico de -0,4; -0,8; -1,0 e - 1,2MPa e mantidas à temperatura de 15 °C durante 15 dias. Em seguida, as sementes foram colocadas para germinar em condições de déficit hídrico, que foi realizado pelo uso de meio germinativo contendo soluções de PEG 8000 nos potenciais de 0,0, -0,2, - 0,4, -0,6, -0,8 e -1.0 MPa na temperatura de 25 °C e luz constante. Após a conclusão dessa etapa, o melhor tratamento (-1,0 MPa) foi utilizado para os estudos moleculares. Posteriormente, foi extraído o RNA total das sementes condicionadas e não condicionadas (NC). Em seguida a integridade do RNA foi verificada em Bioanalyzer e as bibliotecas foram preparadas utilizando o protocolo TruSeq RNA sample prep v2. O sequenciamento foi realizado no HiScanSQ (Illumina) e os dados gerados analisados pela plataforma CLC Genomics Workbench versão 6.0.2 (CLC bio, Denmark). Os contigs foram anotados usando o programa Blast2go e o enriquecimento funcional pelo GO e Bingo. Os genes diferencialmente obtidos foram validados via RT-qPCR. Observou-se aumento na porcentagem de germinação total das sementes condicionadas (-1,0 MPa) em relação às não condicionadas (NC). Foram gerados 34.640 transcritos, onde 208 transcritos foram diferencialmente expressos, porém, 23 apresentaram respostas a estresse em sementes de S. paniculatum L, associados com estresse abiótico (déficit hídrico, estresse térmico e... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Solanum paniculatum L belongs to the Solanaceae family and presents growth and development in unfavorable environmental conditions such as drought and salt stress, acid soils and soils poor in nutrients. Therefore, the objective of this work was to study the S. paniculatum L seed transcriptome induced to tolerate drought stress. The dried seeds were placed in tubes containing 15 mL of PEG 8000 solution with osmotic potential of -0.4; -0.8; -1.0 and -1.2MPa followed by incubation at 15° C for 15 days. Then the seeds were subjected to germinate under drought conditions, which was generated by the use of germination medium containing PEG 8000 solutions at potentials of 0,0, -0,2, -0,4, -0,6, -0, 8 and -1,0 MPa at 25° C under constant light. Following, RNA was extracted and had the quality verified in Bioanalyzer and libraries were prepared using the TruSeq RNA sample prep protocol v2. Sequencing was performed on HiScanSQ (Illumina) and the data generated were analyzed in CLC Genomics Workbench platform version 6.0.2 (CLC bio, Denmark). The contigs were recorded using Blast2go program and functional enrichment for GO and Bingo. We observed an increase in the percentage of germination under drought stress of seeds previously subjected to PEG treatment (-1,0MPa) in comparison with seeds that were not treated. There were generated 34.640 transcripts, where 208 were differentially expressed but only 102 transcripts where associated with stress. However, only twenty three transcripts have known function which are associated with response to stress (drought, heat and oxidative stress). Among those, thirteen genes had the expression validated by qPCR. Here, we discuss the possible involvement on these genes on stress tolerance in Solanum paniculatum seeds during germination. / Doutor