Orientador: Gil Eduardo Serra / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-21T09:37:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CesareVidaurre_TeresaJacoba_D.pdf: 4896751 bytes, checksum: 36b2186bfac3b85207eac90811a5d618 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo o desenvolvimento e a otimização da produção de bioinseticida bacteriano a partir do isolamento e seleção de uma linhagem de Bacillus thuringiensis que apresentasse uma diferenciada e alta atividade inseticida contra larvas de mosquitos de importância na saúde pública. A partir de amostras de solo, isolou-se uma bactéria entomopatogênica, denominada SP-36. Este isolado apresentou uma atividade de 30.767 ITU/mg, contra larvas de Aedes aegypti quase duas vezes mais alta que a linhagem padrão B. thuringiensis israelensis IPS-82, e foi classificado taxonomicamente como sendo um Bacillus thuringiensis. Na sorotipagem do isolado, este foi classificado como uma cepa autoglutinante de B.t.. O perfil electroforético das proteínas que compõem os cristais do isolado (110, 68, 38 e 25 kDa) apresentou significativa diferenças com os polipeptídios produzidos pela linhagem padrão. A otimização das condições fermentativas foram planejadas através da Metodologia por Superfícies de Resposta (MSR) com um delineamento experimental 34. Os resultados experimentais demonstraram uma resposta de 1,37 x 108 para contagem de esporos, completa lise celular e atividade de 35.000 ITU/mg, utilizando-se meio basal em condições de 30°C, 350 rpm, 5 % de inóculo e 7,2 de pH inicial. Para seleção dos componentes de meio de cultura à base de sub-produtos agro-industriais, foram utilizados fatoriais fraccionários, permitindo a seleção das fontes de carbono, nitrogênio e suplementos minerais, assim como o ajuste preliminar das concentrações dos componentes. foram selecionados os seguintes componentes: melaço, água de maceração de milho, água de levedura e fosfato de potássio. Para a otimização da concentração dos componentes selecionados utilizou.:se de delineamento central composto 54 da metodologia por superfícies de resposta, obtendo-se contagem de 1,28 x 108 esporos/ml, em 24 horas com um meio otimizado: 3,5g/l de melaço, 7,O g/l de água de maceração de milho, 16g/l de água de levedura e 6,O g/l de fosfato de potássio. Foram realizados testes de escalamento, com 30 e 50 % de oxigênio dissolvido, obtendo-se velocidades específicas de crescimento de 0,25 e.0,51 h-1, e contagem de esporos de 1,76 e 1,96 x 109 esp/ml respectivamente, em 24 e 18 horas / Abstract: The purpose of this work was to develop and improve the production of bacterial bioinsecticide from a microbiological screening and selection of a Bacillus thuringiensis strain which presents a high and differentiated insecticide activity against mosquitoes larvae of public heath importance. The entomopathogenic bacteria B.t. strain SP-36, has been isolated from soil samples, according to serotyping it as an auto-agglutinated B.t. strain. This isolate presented an activity of 30.767 ITU/mg against Aedes aegypti larvae, almost twice as high as the B. thuringiensis israelensis IPS-82 standard strain. The electrophoretic pattern of the proteins, which constitute the isolate crystals (110, 68, 38 and 25 kDa), has presented significant differences as to the polypeptides produced by the standard strain. The improvement of the fermentative conditions has been planned through the Response Surfaces Methodology (MSR) with an experimental design 34. The experimental results have shown a response of 1,37 x 108 for the spore count, complete cellular lysis and an activity of 35.000 ITU/mg, using a basal medium at 30°C, 350 rpm, 5% inoculum and initial pH 7,2. In order to select the culture medium based on agroindustrial by-products, fractional fatorials have been used, so that the sources of carbon, nitrogen and mineral suplements could be selected, as well as the preliminary setting of the components concentration. The following components have been selected: sugarcane molasses, com-steep liquor, yeast liquor and potassium phosphate. In order to improve the selected components concentration a central composite design 54 of the response surfaces methodology was used, obtaining a count, of 1,28 x 108 spores/ml, in 24 hours, in an optimized medium: 3,5g/l of molasses, 7,0g/l of com-steep liquor, 16g/l of yeast liquor and 6,0g/l of potassium phosphate. Scale-up tests have been performed, with 30 and 50% dissolved oxygen, obtaining specific growth rate of 0,25 and 0,51 h-1 and spores count of 1,76 and 1,96 x 109 spores/ml, in 24 hours, respectively / Doutorado / Doutor em Tecnologia de Alimentos

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-10-19T12:54:16Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Sirley P. Almeida.pdf: 2582224 bytes, checksum: 619daa8290bd853bcd6681edd48defdf (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-10-19T12:54:30Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Sirley P. Almeida.pdf: 2582224 bytes, checksum: 619daa8290bd853bcd6681edd48defdf (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-19T12:54:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Tese - Sirley P. Almeida.pdf: 2582224 bytes, checksum: 619daa8290bd853bcd6681edd48defdf (MD5) Previous issue date: 2017-07-28 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / The species of the family Lamiaceae are known in Brazil for being very aromatic and for presenting bioactive properties as antioxidant, bactericide, fungicide and insecticide. In this work was analyzed Hyptis dilatata Benth, found in areas of cerrado in Brazil. The chemical components, the biological activity of the essential oil and extracts of leaves and flowers, considering dry and rainy periods, of specimens of the Serra do Tepequém, in Roraima-Brazil, were studied. The essential oils were extracted from the leaves collected at different times (morning, afternoon and night) and from the flowers in the dry and rainy periods. In relation to the hexane and ethanolic extracts from leaves and flowers, these were extracted from specimens collected during the dry and rainy season. The results of the phytochemical profile, derived from the analysis of the hexane and ethanolic extracts of leaves and flowers, presented different secondary metabolites, being identified coumarin, flavonoids, phenols, saponins, alkaloids, among others. The chemical characterization of the essential oils of leaves and flowers showed as main substances α-pinene, β-pinene, limonene, 3-carene, β-caryophyllene, fenchone and camphor. The essential oil extracted from the flowers in the rainy and dry period inhibited the enzyme acetylcholinesterase, respectively, 93.4% and 92.4%, whereas the essential oil extracted from the leaves, in the dry period and in the morning, showed greater inhibition (96.4%). In the analysis of the cytotoxicity activity performed with larvae of Artemia salina, the essential oil extracted from the leaf collected in the rainy period in the morning, and the essential oil extracted from the flower, collected in the rainy season, presented higher toxicity. The ethanolic extracts of the leaf and the hexane extracts of the flower, both collected during the rainy season, were also more toxic. In the antimicrobial assays, flower oils collected in the rainy and dry period demonstrated greater inhibition against the bacteria Staphylococcus aureus and Bacillus cereus. The Candida albicans yeast only showed inhibition with the essential oils of the flower collected in the dry period. In the rainy season only the essential oil extracted from the leaf collected in the morning and afternoon, showed inhibition against the bacteria S. aureus and B. cereus. Regarding the dry period, the essential oil that showed the highest inhibition in B. cereus bacteria was collected in the afternoon. The hexane extracts of the flower collected in the rainy season showed greater inhibition of S. aureus and in the leaves collected in the rainy season. This extract showed greater toxicity with the bacterium Salmonella typhymurium. In the test against yeast C. albicans, the most toxic hexanic extract was that of the leaf collected in the dry period. In this work the essential oils and extracts of H. dilatata were also tested in larvicidal activities of Aedes aegypti, Anopheles darlingi and adulticides with Ae. aegypti. The essential oil with higher toxicity in the larvicidal activities of Ae. aegypti were extracted from the leaf collected in the rainy season, at night time and from the flower in the rainy season. Only the hexane extracts extracted from the flowers showed toxic activity on the larvae of Ae. aegypti. In larvae of An. darlingi, toxicity predominated with the essential oils of the flowers extracted in the dry period and in the essential oil of the leaf extracted in the same period, in the morning. In the adulticidal assays of Ae. aegypti, leaf oil collected in the rainy season at night showed a mortality of 54.4% to 91.9%, at concentrations of 62.5 μg/mL -1 and 1000 μg/mL-1 respectively in the range of 90 minutes of exposure. The knockdown effect (mosquito immobility) was observed in the test for the development of the product prototype with leaf essential oil, collected in the rainy season and in the morning. For that, the insecticidal activity against the mosquito Ae. aegypti, in 20 minutes at the start of the test, with more than 50% of mosquitoes in knockdown state. / As espécies da família Lamiaceae são conhecidas no Brasil por serem bastante aromáticas e por apresentarem propriedades bioativas como antioxidante, bactericida, fungicida e inseticida. Neste trabalho foi analisada a espécie Hyptis dilatata Benth, encontrada em áreas de cerrado no Brasil. Estudou-se os componentes químicos, a atividade biológica do óleo essencial e dos extratos de folhas e flores, considerando os períodos seco e chuvoso, de espécimes da Serra do Tepequém, em Roraima-Brasil. Os óleos essenciais foram extraídos das folhas coletadas em diferentes horários (manhã, tarde e noite) e das flores nos períodos seco e chuvoso. Em relação aos extratos hexânicos e etanólicos, oriundos das folhas e flores, estes foram extraídos de exemplares coletados nos períodos seco e chuvoso. Os resultados do perfil fitoquímico, originados a partir da análise dos extratos hexânicos e etanólicos das folhas e flores, apresentaram diferentes metabólitos secundários, sendo identificados cumarina, flavonóides, fenóis, saponinas, alcalóides, entre outros. A caracterização química dos óleos essenciais das folhas e flores mostrou como substâncias majoritárias α-pineno, β-pineno, limoneno, 3-careno, β-cariofileno, fenchona e cânfora. O óleo essencial extraído das flores, no período chuvoso e seco, inibiu a enzima acetilcolinesterase, respectivamente, 93,4% e 92,4%, enquanto que o óleo essencial extraído das folhas, no período seco e pela manhã, apresentou maior inibição (96,4%). Na análise da atividade de citotoxidade, realizadas com larvas de Artemia salina, o óleo essencial extraído da folha coletada no período chuvoso, pela manhã, e o óleo essencial extraído da flor, coletada no período chuvoso, apresentaram maior toxicidade. Apresentaram também maior toxicidade os extratos etanólicos da folha e os extratos hexânicos da flor, ambas coletadas no período chuvoso. Nos ensaios antimicrobianos, os óleos das flores coletadas no período chuvoso e seco demonstraram maior inibição contra as bactérias Staphylococcus aureus e Bacillus cereus. A levedura Candida albicans só apresentou inibição com os óleos essênciais da flor coletada no período seco. No período chuvoso, somente o óleo essencial extraído das folhas coletadas no horário da manhã e tarde, mostraram inibição contra as bactérias S. aureus e B. cereus. Em relação ao período seco, o óleo essencial que apresentou maior inibição contra bactérias B. cereus foi coletado no horário da tarde. Os extratos hexânicos da flor coletada no período chuvoso mostraram maior inibição contra S. aureus e nas folhas coletadas no período chuvoso. Este extrato demonstrou maior toxicidade com a bactéria Salmonella typhymurium. No teste contra a levedura C. albicans, o extrato mais tóxico foi o hexânico da folha coletada no período seco. Neste trabalho também foram testados os óleos essenciais e extratos de H. dilatata em atividades larvicidas de Aedes aegypti, Anopheles darlingi e teste adulticidas com Ae. aegypti. O óleo essencial com maior toxicidade nas atividades larvicidas de Ae. aegypti foram extraídos da folha coletada no período chuvoso, no horário da noite e da flor no período chuvoso. Somente os extratos hexânicos extraídos das flores apresentaram atividade tóxica sobre as larvas de Ae. aegypti. Nas larvas de An. darlingi, a toxicidade predominou com os óleos essenciais das flores extraídas no período seco e no óleo essencial da folha extraído no mesmo período, no horário da manhã. Nos ensaios adulticida de Ae. aegypti, o óleo das folhas coletadas no período chuvoso, no horário da noite, apresentou mortalidade entre 54,4% a 91,9%, nas concentrações de 62,5 μg mL-1 e 1000 μg mL-1, respectivamente, no intervalo de 90 minutos de exposição. No teste para o desenvolvimento do protótipo do produto com o óleo essencial da folha, coletada no período chuvoso e no horário da manhã, foi observada a ação do efeito knockdown (imobilidade do mosquito). Para tanto, considerou-se a atividade inseticida contra o mosquito Ae. aegypti, em 20 minutos no início do teste, com mais de 50% dos mosquitos em estado de knockdown.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-02-16T17:19:45Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Leandro Pereira França.pdf: 3150633 bytes, checksum: 8826767a3427a3422b7430b1330c09d0 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-02-16T17:20:35Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Leandro Pereira França.pdf: 3150633 bytes, checksum: 8826767a3427a3422b7430b1330c09d0 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-02-16T17:20:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Leandro Pereira França.pdf: 3150633 bytes, checksum: 8826767a3427a3422b7430b1330c09d0 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-02-16T17:20:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Leandro Pereira França.pdf: 3150633 bytes, checksum: 8826767a3427a3422b7430b1330c09d0 (MD5) Previous issue date: 2015-09-04 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Mosquitoes are responsible for serious problems of global public health. The Aedes aegypti and Anopheles are important vectors in the transmission of dengue and malaria in Brazil. As there is no vaccine available, the main way to reduce dengue indices and malaria is controlling the proliferation of the insect vector that is based on vector control through the application of chemical insecticides that allow contamination of the environment and resistance selection in populations of mosquitoes as a result of intense application. The use of plant extracts has been gaining attention as an alternative in vector control, especially in the Amazon environment, since the plant employees have chemical compounds with larvicidal activity and insecticide. This study aimed to carry out phytochemical prospecting and evaluation of larvicidal activity of essential extracts and oil P. capitarianum for controlling A. aegypti and Anopheles sp. under laboratory conditions. A. aegypti eggs were collected in two neighborhoods of Manaus, and the larvae of Anopheles were obtained in the breeding of Puraquequera neighborhood. Bioassays were prepared with the extracts, oil and distilled water at the following concentrations: 500, 250, 100, 50, 25 mg / ml, positive control (temephos) and negative control (DMSO, H2O and Tween), tested at Rockefeller A. aegypti and Anopheles which were evaluated by observing the mortality of larvae at 24, 48 and 72 hours of exposure. The hexane extracts, methanolic and aqueous were prepared by Soxhlet system, infusion method and the essential oil was extracted by hydrodistillation and analyzed by GC-MS. The extracts were submitted to phytochemical screening, which was analyzed by thin layer chromatography (TLC), using specific developers. The phytochemical study of the extracts revealed the presence of chemical classes anthraquinones, flavonoids, terpenes, alkaloids and steroids. In the essential oil were identified as major constituents, the β-caryophyllene (34.08%), β-myrcene (13.77%) and α-humulene (13.32%), respectively. Hexane and methanolic extracts of the flowers and essential oil of P. capitarianum showed larvicidal activity in the two higher concentrations (500 and 250 mg / mL), with 100% mortality of A. aegypti and Anopheles sp, After 72 hours exposure, It is proving to be a viable alternative for the control of vectors. / Os mosquitos são responsáveis por sérios problemas de saúde pública mundial. O Aedes aegypti e Anopheles são importantes vetores na transmissão da dengue e malária no Brasil. Como não existe vacina disponível, a principal forma de reduzir os índices de dengue e malária é controlando a proliferação dos insetos vetores que se baseia no controle vetorial através da aplicação de inseticidas químicos que possibilitam a contaminação ao meio ambiente e seleção de resistência em populações de mosquitos em decorrência da intensa aplicação. O uso de extrato de plantas vem ganhando destaque como alternativa no controle de vetores, especialmente no ambiente amazônico, já que os vegetais empregados apresentam compostos químicos com atividade larvicida e inseticida. Este trabalho tem como objetivo realizar a prospecção fitoquímica e avaliar a atividade larvicida dos extratos e do óleo essencial de P. capitarianum para o controle de A. aegypti e Anopheles sp em condições de laboratório. Os ovos de A. aegypti foram coletados em dois bairros de Manaus, e as larvas de anofelinos foram obtidas nos criadouros do bairro Puraquequera. Os bioensaios foram preparados com os extratos, óleo e água destilada nas seguintes concentrações: 500, 250, 100, 50, 25 mg/mL, controle positivo (temefós) e o controle negativo (DMSO, H2O e Tween), testados com Rockfeller, A. aegypti e Anopheles que foram avaliada através da observação da mortalidade das larvas em 24 , 48 e 72 horas de exposição. Os extratos hexânicos, metanólicos e aquoso foram preparados pelo sistema Soxhlet, método de infusão e o óleo essencial foi extraído por hidrodestilação e analisados em CG-EM. Os extratos foram submetidos à prospecção fitoquímica, onde foi analisada em cromatografia camada delgada (CCD), utilizando reveladores específicos. O estudo fitoquímico dos extratos revelou a presença das classes químicas antraquinonas, flavonóides, terpenos, alcalóides e esteróides. No óleo essencial foram identificados como constituintes majoritários, o β-cariofileno (34,08%), β-mirceno (13,77%) e o α-humuleno (13,32%), respectivamente. Os extratos hexânicos e metanólicos das inflorescências e óleo essencial de P. capitarianum, apresentaram atividade larvicida nas duas maiores concentrações (500 e 250 μg /mL), com mortalidade de 100% sobre A. aegypti e Anopheles sp, após 72 horas exposição, demonstrando ser uma alternativa viável no controle dos vetores.

Made available in DSpace on 2015-09-25T12:21:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PDF - Rafael Aguiar Marinho.pdf: 1740934 bytes, checksum: 32ef124b6cbea3bf0a46085a4359df0c (MD5) Previous issue date: 2013-05-14 / The Aedes (Stegomyia) aegypti is considered the most important vector in the transmission of arboviruses worldwide. This study aimed to understand how climatic factors (temperature, precipitation and relative humidity) influence oviposition patterns, distribution and development of populations of Aedes aegypti in the field and in the laboratory. Monthly collections were performed in 12 cities of Campina Grande, João Pessoa and Patos in neighborhoods with the highest incidence vector. The eggs collected were brought to the laboratory, quantified, established colonies and identified to species based on larval characters. Climate trends for the three study areas were estimated, and from these set temperatures of 16, 22, 28, 33, 36 and 39 º C, for biological studies and thermal requirements of the vector. A total of 27,888 Aedes aegypti eggs were removed from the three selected neighborhoods. The results indicated that the city of Patos, showed significant interaction between IDO and rainfall (r = 0.83287, p = 0.0008) and relative humidity (r = 0.60140, p = 0.0386) and João Pessoa presented positive correlation (r = 0.66900, p = 0.0174) between the IDO and the IPO. Tendencies of increasing maximum temperature were 0.073 º C / year, 0.044 ° C / year and 0.061 ° C / year for João Pessoa, Campina Grande and Patos, respectively. The temperature influenced the life cycle of the vector. The incubation period of eggs populations of A. aegypti ranged from 13.46 days at 16 ° C for the population of Campina Grande to 2.59 days at 36 ° C to A. aegypti Patos. Considering the general average, the duration of development for the larval, pupal and egg to adult emergence was observed for the shorter periods the population of João Pessoa. The lowest number of eggs / female (1.46 eggs / female) was recorded at 16 ° C for samples of Patos, while the highest (262.3 eggs / female) was recorded at 28 ° C for females whose João Pessoa. The number of generations per year were 23.6 to 25.9 ° C, 24.7 at 27 ° C and 28.0 ° C for the 30 municipalities of Campina Grande, João Pessoa and Patos, respectively. Thermal constants obtained for the phases of egg, larval and pupal stages were 74.6, 139.8, 38.2 degree-days for the populations of A. aegypti Campina Grande; 90.9; 140.8, 49.8 for the population of John Person and 73.3, 156.9, 35.4 for Patos. Based on the development time and thermal requirements of the egg, larva and pupa and fecundity, it was found that the temperature favorable to the vector is between 22 ° C and 36 ° C. / O Aedes (Stegomyia) aegypti é considerado o vetor mais importante na transmissão de arboviroses pelo mundo. Objetivou-se compreender como os fatores climáticos (temperatura, precipitação e umidade relativa) influenciam os padrões de oviposição, distribuição e desenvolvimento das populações de A. aegypti em campo e em laboratório. Foram realizadas 12 coletas mensais nos municípios de Campina Grande, João Pessoa e Patos, em bairros de maior incidência do vetor. Os ovos coletados utilizando-se ovitraps foram trazidos para o laboratório, quantificados, estabelecidas as colônias e identificada à espécie com base nos caracteres larvais. As tendências climáticas para as três regiões de estudo foram estimadas, e a partir destas definidas as temperaturas de 16, 22, 28, 33, 36 e 39 ºC, para os estudos biológicos e de exigências térmicas do vetor. Um total de 27.888 ovos de Aedes aegypti foram retirados dos três bairros selecionados. Os resultados indicaram que o município de Patos, apresentou interação significativa entre o IDO e a precipitação (r = 0,83287; p = 0,0008) e umidade relativa (r = 0,60140; p = 0,0386) enquanto João Pessoa apresentou correlação positiva (r = 0,66900; p = 0,0174) entre o IDO e o IPO. As Tendências de aumento de temperatura máxima foram de 0,073 ºC/ano, 0,044 °C/ano e 0,061 ºC/ano para os municípios de João Pessoa, Campina Grande e Patos, respectivamente. A temperatura influenciou o ciclo de vida do vetor. O período de incubação dos ovos das populações de A. aegypti variou de 13,46 dias à 16 °C para a população de Campina Grande a 2,59 dias à 36 °C para A. aegypti de Patos. Considerando as médias gerais, a duração do desenvolvimento para as fases de larva, pupa e ovo à emergência do adulto teve os menores períodos observados para a população de João Pessoa. O menor número de ovos/fêmea (1,46 ovos/fêmea) foi registrado à 16 °C para amostras de Patos, enquanto o maior (262,3 ovos/fêmea) foi registrado à 28°C para fêmeas oriundas de João Pessoa. O número de gerações anuais foram de 23,6 à 25,9 °C, 24,7 à 27 °C e 28,0 à 30 °C para os municípios de Campina Grande, João Pessoa e Patos, respectivamente. As constantes térmicas obtidas para as fases de ovo, larva e pupa foram de 74,6; 139,8; 38,2 graus-dia para as populações de A. aegypti de Campina Grande; 90,9; 140,8; 49,8 para as populações de João Pessoa e 73,3; 156,9; 35,4 para Patos. Com base no tempo de desenvolvimento e necessidades térmicas das fases de ovo, larva e pupa e na fecundidade dos adultos, constatou-se que a temperatura favorável ao vetor encontra-se entre 22 °C e 36 °C.

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:06:20Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6297_1.pdf: 1280422 bytes, checksum: 6dbf4fac7abd5986311944cbb4ed97fd (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2005 / Aedes aegypti e Aedes albopictus são espécies invasivas, considerada importante do ponto de vista médico, porque eles são vetores de arboviroses muitos. Uma pesquisa de doze meses de variação sazonal na freqüência de alelos em populações destas espécies foi realizado para verificar as possíveis alterações na estrutura genética e sua relação com as condições ambientais. Padrões de diversidade genética foram examinadas usando Random Amplified Polymorphic DNA e haplótipos de Citochrome c oxidase subunidade II do mtDNA. Amostras de Ae. aegypti e Ae. albopictus foram coletados entre dezembro de 2003 a novembro de 2004 em duas áreas do Recife. Evidência de diferenciação genética significativa foi detectada ao longo do ano para ambas as espécies, sem perdas de diversidade genética dentro das populações (heterozigosidade e polimorfismo). Amostras de Ae. albopictus em áreas silvestres e urbanas mostrou fluxo gênico intensiva (Nm = 4.2 e 22), durante dois momentos distintos. Os dados obtidos podem ser muito úteis para melhorar as estratégias de controle de vetores

Made available in DSpace on 2014-06-12T23:15:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo921_1.pdf: 3383343 bytes, checksum: 9ec1654b1e7212a7c70d94a44b53d0dd (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2009 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Hymenaea stigonocarpa é conhecida popularmente como jatobá-do-cerrado, jataíba ou jitaí. É tradicionalmente utilizada no tratamento de bronquites e como antiinflamatório, contudo, é mais conhecida por sua madeira ser resistente ao apodrecimento e ao ataque de térmitas, sobressaindo-se entre as chamadas madeiras de lei . Este estudo visa contribuir para o conhecimento fitoquímico e biológico do cerne obtido do tronco de H. stigonocarpa. Para a realização deste estudo, o espécime foi coletado em Caxias/MA. Com o cerne deste espécime foram preparados três extratos utilizando-se três solventes de diferentes polaridades: cicloexano, acetato de etila e metanol. Estes extratos foram utilizados para a realização dos estudos fitoquímico e biológico desta madeira de lei. Do extrato em cicloexano foram separados e identificados diversos ácidos: palmítico, mirístico, oléico e linoléico, através do uso de cromatografia clássica e gasosa acoplada ao espectrômetro de massas. O extrato obtido com o solvente acetato de etila foi fracionado através de cromatografia em coluna, utilizando como fases estacionárias sílica e sephadex, obtendo-se quatro flavonóides: 7-metóxi-catequina, quercetina, taxifolina e 3-metóxi-3 ,4 ,5,7-tetraidróxiflavanona. A identificação estrutural destes flavonóides foi realizada através de RMN de 1H e de 13C (uni e bidimensionais) e pela comparação dos dados aqui obtidos com dados espectrais disponibilizados na literatura. Foram realizados ensaios para a avaliação do potencial biológico dos três extratos da madeira de lei estudada. Primeiramente, os extratos da madeira de H. stigonocarpa foram avaliados quanto à sua atividade antitermítica e, neste ensaio, todos os extratos apresentaram atividade contra Nasutitermes corniger. Em seguida, foram avaliadas as atividades antimicrobiana e larvicida para larvas de Aedes aegypti dos três extratos e de dois flavonóides isolados (3-metóxi-3 ,4 ,5,7- tetraidróxiflavanona e 7-metóxi-catequina). Os extratos obtidos com os solventes acetato de etila e metanol apresentaram atividade significativa frente aos microorganismos Staphylococcus aureus, Bacillus subtilis e Mycobacterium smegmatis. Dois flavonóides isolados apresentaram atividade frente a S. aureus. Nos ensaios biológicos para a verificação da atividade larvicida, apenas o extrato em cicloexano e a 3-metóxi-3 ,4 ,5,7-tetraidróxiflavanona tiveram potencial larvicida estatisticamente significativo. Em seguida, os extratos da madeira de H. stigonocarpa foram avaliados frente ao crescimento do fitopatógeno Fusarium moniliforme, apenas o extrato em cicloexano apresentou atividade. Finalmente, foram realizados estudos frente ao crescimento do fungo apodrecedor de madeira Phanerochaete chrysosporium. O pó da madeira de lei estudada mostrou-se resistente à proliferação deste microorganismo

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2015-11-23T15:50:47Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 28606307 bytes, checksum: 86f96165df54d75c9fd92683b3346e19 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-11-23T15:50:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 28606307 bytes, checksum: 86f96165df54d75c9fd92683b3346e19 (MD5) Previous issue date: 2015-07-28 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / O Aedes aegypti é o principal vetor dos vírus causadores da Dengue. Uma das formas de se controlar a transmissão da doença é o combate desse vetor através do uso de inseticidas. Um dos mecanismos de resistência pode estar ligado ao metabolismo de inseticidas por diferente órgãos ou células, incluindo os enócitos. Os enócitos são células de origem ectodérmica ricas em retículo endoplasmático liso e responsáveis pelos processos de metabolismo de lipídeos e desintoxicação. Nosso trabalho teve como objetivo geral avaliar os efeitos subletais da deltametrina no comportamento larval e nos enócitos pupais e do inseto em duas populações diferentes, susceptível e resistente, de A. aegypti. Para isso foram utilizados larvas de quarto instar (L4) e pupas de populações resistente e susceptível a deltametrina. L4 das duas populações foram submetidas a diferentes concentrações do inseticida: 0,001; 0,003; 0,005; 0,007 ppm e a sobrevivência foi aferida. Após a exposição ao inseticida, L4 foram submetidas a bioensaios comportamentais. Pupas com dois dias de idade após a pupação foram dissecadas e os grupos de enócitos processados para microscopia eletrônica de transmissão (MET) e reação de TUNEL de insetos expostos a 0,003 e 0,005 ppm de inseticida. A 0,007 ppm a deltametrina apresentou efeitos letais sobre as L4 susceptível, enquanto que as resistentes sobreviveram a todas as concentrações testadas. L4 susceptíveis apresentaram um comportamento letárgico e taxa de atividade e natação bem menor do que o controle. Provavelmente, isso ocorreu devido a ação neurotóxica do inseticida. Já nas L4 resistentes observou-se hiperexcitação a 0,005 ppm de deltametrina. Não foram observados efeitos subletais e morte celular significativos tanto em enócitos da população susceptível quanto da resistente expostas à deltametrina. Nossos resultados contribuem para o melhor entendimento das diferentes respostas à exposição subletal à deltametrina em populações susceptíveis e resistentes de A. aegypti e sua relação com o comportamento das formas aquáticas e a estrutura dos enócitos nessa espécie. / The mosquito Aedes aegypti is the main vector of Dengue virus. One strategy to control the transmission of these pathogens by this vector is by means insecticide use. The maj or problems related to this strategy is the emergence of resistance. The mechanisms of resistance may be linked to the metabolism of insecticides by different cells, including oenocytes. The oenocytes are ectodermal cells rich in smooth endoplasmic reticulum and responsible for lipid metabolism and detoxification. This work aimed at evaluating the sublethal effects of deltamethrin on the behavior and structure of oenocytes in immature mosquitoes, of susceptible and resistant A. aegyptistrains. Fourth instar larvae (L4) of both strains were exposed to different concentrations of deltamethrin: 0.001; 0.003; 0.005; 0.007 ppm, and the survival rate was measured. After exposition, L4 of both populations were subjected to behavioral bioassays with the aid of the program View Point Application Manager-Video Track. To study the effects of insecticide in the ultrastructure and cell integrity after insecticide exposure (0.003 and 0.005 ppm), two-days old pupae after pupation were dissected and their oenocytes were processed for transmission electron microscopy (TEM) and TUNEL. The concentration of 0.007 ppm had lethal effects on susceptible L4, while the resistant L4 survived under all the tested concentrations. Susceptible L4 are lethargic and had the swimming activity much lower than control. This probably was due to neurotoxic action of the insecticide. On the other hand, the resistant L4 were hyperexcitated under the treatment With 0.005 ppm. This might result from the inhibitory action of the insecticide on the neurotransmitter GABA. There were no sublethal effects and significant cell death in both susceptible and resistant oenocytes exposed to deltamethrin. Our results revealed the different responses of susceptible and resistant strains of A. aegypti under deltamethrin sublethal exposures, and how these two different strains differs in terms of immature stage behaviors and the structure of oenocytes under exposures. / Arquivo não criptografado, pois as páginas ficam em branco após o processo.

Juvenile hormone (JH) is the central hormonal regulator of life-history trade-offs in many insects. In Aedes aegypti, JH regulates reproductive development after emergence. Little is known about JH’s physiological functions after reproductive development is complete or JH’s role in mediating life-history trade-offs. By examining the effect of hormones, nutrition, and mating on ovarian physiology during the previtellogenic resting stage, critical roles were determined for these factors in mediating life-history trade-offs and reproductive output. The extent of follicular resorption during the previtellogenic resting stage is dependent on nutritional quality. Feeding females a low quality diet during the resting stage causes the rate of follicular resorption to increase and reproductive output to decrease. Conversely, feeding females a high quality diet causes resorption to remain low. The extent of resorption can be increased by separating the ovaries from a source of JH or decreased by exogenous application of methoprene. Active caspases were localized to resorbing follicles indicating that an apoptosis-like mechanism participates in follicular resorption. Accumulations of neutral lipids and the accumulation of mRNA’s integral to endocytosis and oocyte development such as the vitellogenin receptor (AaVgR), lipophorin receptor (AaLpRov), heavy-chain clathrin (AaCHC), and ribosomal protein L32 (rpL32) were also examined under various nutritional and hormonal conditions. The abundance of mRNA's and neutral lipid content increased within the previtellogenic ovary as mosquitoes were offered increasing sucrose concentrations or were treated with methoprene. These same nutritional and hormonal manipulations altered the extent of resorption after a blood meal indicating that the fate of follicles and overall fecundity depends, in part, on nutritional and hormonal status during the previtellogenic resting stage. Mating female mosquitoes also altered follicle quality and resorption similarly to nutrition or hormonal application and demonstrates that male accessory gland substances such as JH III passed to the female during copulation have a strong effect on ovarian physiology during the previtellogenic resting stage and can influence reproductive output. Taken together these results demonstrate that the previtellogenic resting stage is not an inactive period but is instead a period marked by extensive life-history and fitness trade-offs in response to nutrition, hormones and mating stimuli.

Aedes aegypti (Ae. aegypti) is one of the most important vectors of dengue, chikungunya and yellow fever viruses. The use of chemical control strategies such as insecticides is associated with problems including the development of insecticide resistance, side effects on animal and human health, and environmental concerns. Because current methods have not proven sufficient to control these diseases, developing novel, genetics-based, control strategies to limit the transmission of disease is urgently needed. Increased knowledge about mosquito-pathogen relationships and the molecular biology of mosquitoes now makes it possible to generate transgenic mosquito strains that are unable to transmit various parasites or viruses. Ae. aegypti genetic experiments are enabled, and limited by, the catalog of promoter elements available to drive transgene expression. To find a promoter able to drive robust expression of firefly (FF) luciferase in Ae. aegypti embryos, an experiment was designed to compare Ae. aegypti endogenous and exogenous promoters. The PUb promoter was found to be extremely robust in expression of FF luciferase in different stages of embryonic development from 2-72 hours after injection. In subsequent experiments, transformation frequency was calculated using four different promoters (IE1, UbL40, hsp82 and PUb) to express the Mos1 transposase open reading frame in Mos1-mediated transgenesis. Germline transformation efficiency and size of transgenic cluster were not significantly different when using endogenous Ae. aegypti PUb or the commonly used exogenous Drosophila hsp82 promoter to express Mos1 transposase. This study also describes the development of new tools for gene editing in the Ae. aegypti mosquito genome and the use of these tools to design an efficient gene drive system in this mosquito. Homing endonucleases (HEs) are selfish elements which catalyze double-stranded DNA (dsDNA) breaks in a sequence-specific manner. The activities of four HEs (Y2-I-AniI, I-CreI, I-PpoI, and I-SceI) were investigated for their ability to catalyze the excision of genomic segments from the Ae. aegypti genome. All four enzymes were found to be active in Ae. aegypti; however, the activity of Y2-I-AniI was higher compared to the other three enzymes. Single-strand annealing (SSA) and non-homologous end-joining (NHEJ) pathways were identified as mechanisms to repair HE-induced dsDNA breaks. TALE nucleases (TALENs) are a group of artificial enzymes capable of generating site-specific DNA lesions. To examine the ability of TALENs for gene editing in Ae. aegypti, a pair of TALENs targeted to the kmo gene were expressed from a plasmid following embryonic injection. Twenty to forty percent of fertile G0 produced white-eyed progeny which resulted from disruption of the kmo gene. Most of these individuals produced more than 20% white-eyed progeny, with some producing up to 75%. A small deletion of one to seven bp occurred at the TALEN recognition site. These results show that TALEN and HEs are highly active in the Ae. aegypti germline and can be used for gene editing and gene drive strategies in Ae. aegypti. / Ph. D.

This dissertation examines the nineteenth- and early twentieth-century history of the Aedes aegypti mosquito and the viral illnesses chikungunya and dengue from the Indian Ocean port town of Durban, South Africa. Histories of Ae. aegypti and yellow fever in the Atlantic World occupy an unmistakable niche in medical and environmental historiographies. Studies of this mosquito at home in Africa and abroad in the Indian Ocean World are lacking. This dissertation addresses that lacunae. A globally integrated industrial economy, mushrooming urban growth in tropical and subtropical regions, absent or overwhelmed municipal water supplies, faster forms of transportation, and rising levels of interconnection increase the likelihood of epidemics of viral illness transmitted by Ae. aegypti. Durban offers a vantage point to examine these transformations during the era of the New Imperialism. The Ae. aegypti mosquito casts Durban as the southwest corner of the Indian Ocean rimlands; East Africa’s southernmost urban center; and a humid subtropical settler society port and sugar region perched on the edge of ‘Neo-Europe.’ Facing the Indian Ocean World, I argue that explosive pandemics during the mid-1820s and early 1870s—traditionally attributed to dengue—were more likely chikungunya. Further, the absence of similar pandemics attributable to dengue suggests that virus was already endemic in the region’s leading ports, an indirect indication of Ae. aegypti’s presence in the region. This contests hypotheses suggesting this mosquito reached Asia via the Suez Canal. In Durban, epidemics of chikungunya and dengue during the 1870s reflect the port town’s connection to the Indian Ocean World and signal the presence of human-biting Ae. aegypti. I argue that clearing coastal forest for sugar production and town-building destroyed the ecological niche of indigenous sylvatic Ae. aegypti, while the agroecology of sugar and built environment of early Durban encouraged vector domestication and abundance in intimate proximity to people. Durban’s chikungunya and dengue past is largely forgotten. A study of the city’s history with Ae. aegypti is, therefore, timely. In an era marked by zoonoses and emerging and reemerging infectious diseases environmental histories must grapple with the entangled agencies of human and nonhuman actors—pests, pathogens, and people. / 2023-06-08T00:00:00Z