Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 JailmaAL.pdf: 4054706 bytes, checksum: f46f1a4accf9845bb01d4688f7c0745c (MD5) Previous issue date: 2009-06-18 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Fucan is a term used to denominate a family of sulfated polysaccharides rich in L-fucose. They are extracted mainly from the extracellular matrix of brown algae and echinoderms. The brown alga Spatoglossum schr?ederi (Dictyotaceae) has three heterofucans named A, B and C. Our research group have been extracted non anticoagulant heterofucan from S. schr?ederi which possess antithrombotic activity in vivo. However, their toxicity in vitro and in vivo has not yet been determined. For the results in toxicity in vitro, we observed that the fucan A at 20, 500 and 1000 μg/plate showed no mutagenic activity in Kado test (Microsuspension), when the bacterial strains TA97a, TA98, TA100 and TA102, with and without S9 were used. The comet assay showed that fucan A (from 20 to 1000 μg/mL) did not cause any genotoxic effect on CHO cells. There was no damage to the DNA of these cells, as evidenced by the tail length and tail moment, which were similar to that found for the negative control. The fucan A from S. schr?ederi was administered at 20 μg/g of rat (dose which it showed high antithrombotic activity) during two months. After that, the animals were killed and examined. The data showed that fucan A did not cause any change in biochemistry and hematological parameters, as well as, in the morphology and size of the rat s organs analyzed. In conclusion, this study indicates that fucan is a compound with potential pharmacological that has no toxicity / Fucana ? um termo usado para denominar uma fam?lia de polissacar?deos sulfatados ricos em L-fucose. S?o extra?dos principalmente da matriz extracelular de algas marrons e equinodermas. A alga marrom Spatoglossum schr?ederi (Dictyotaceae) possui tr?s heterofucanas nomeadas de fucanas A, B e C. Tem sido proposto o uso de fucanas como alternativas para anticoagulantes. Nosso grupo de pesquisa extraiu uma heterofucana n?o anticoagulante da alga S. schr?ederi que tem uma elevada atividade antitromb?tica in vivo. No entanto, a sua toxicidade in vitro e in vivo ainda n?o foi determinada. Para os resultados obtidos na toxicidade in vitro, observou-se que a fucana A nas concentra??es de 20, 500 e 1000 μg/placa n?o mostram atividade mutag?nica em teste Kado (Microsuspens?o) utilizando a cepas bacterianas TA97a, TA98, TA100 e TA102, com e sem S9. No ensaio do cometa a presen?a da fucana A n?o provocou nenhum efeito genot?xico nas concentra??es testadas de 20, 500 e 1000 μg/mL. N?o houve dano no DNA dessas c?lulas, como evidenciado pelo tail lenght e tail moment, sendo semelhantes ao encontrado para o controle negativo. A fucana A da alga Spatoglossum schr?ederi quando administrada nos animais durante o per?odo de dois meses, n?o provocou altera??o dos par?metros hematol?gicos, bioqu?micos, morfologia e tamanho dos ?rg?os analisados. Esse teste n?o demonstrou que a fucana, na dose que apresenta atividade antitromb?tica, apresenta toxicidade. Os dados do trabalho indicam que esta fucana ? um composto com potencial farmacol?gico que n?o apresenta toxidade, esse fato da seguran?a para que testes futuros com esse pol?mero sejam realizados, inclusive testes em humanos

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CelinaMPGD_TESE.pdf: 1816885 bytes, checksum: 1e39ca48cae61af571d696fef8f71be4 (MD5) Previous issue date: 2012-10-15 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / The present study examines the chemical composition and their effects on free radicals, inflammation, angiogenesis, coagulation, VEGF effects and cellular proliferation of a polysaccharides from alga Sargassum vulgare. The sulfated polysaccharide was extracted from brown seaweed by proteolysis with enzymes maxataze. The presence of proteins and sugars were observed in crude polysaccharides. Fractionation of this crude extract was made with growing concentration of acetone (0.3-1.5 v) and produced four groups of polysaccharides. Anionic polysaccharides from brown seaweed Sargassum vulgare, SV1and PSV1 were fractionated (SV1) and purified (PSV1), and displayed with high total sugars and sulfate content and very low level of protein. This fucan SV1 contains low levels of protein and high carbohydrate and sulfate content. This polysaccharides prolonged activated partial thromboplastin time (aPTT) at 50 μg (>240 s). SV1 was found to have no effect on prothrombin time (PT), corresponding to the extrinsic pathway of coagulation. SV1 exhibits high antithrombotic action in vivo, with a concentration ten times higher than heparin. Polysaccharides from S. vulgare promoted direct inhibition enzymatic activity of thrombin and stimulated enzymatic activity of FXa. SV1 showed optimal inhibitory activity of thrombin (50.2?0.28%) at a concentration of 25 μg/mL. Its antioxidant action on scavenging radicals by DPPH was (22%), indicating the polymer has no cytotoxic action (hemolytic) on ABO and Rh blood types in different erythrocyte groups and displays strong anti-inflammatory action on all concentrations tested in the carrageenan-induced paw edema model, demonstrated by reduced edema and cellular infiltration. Angiogenesis is a dynamic process of proliferation and differentiation. It requires endothelial proliferation, migration, and tube formation. In this context, endothelial cells are a preferred target for several studies and therapies. The antiangiogenic efficacy of polysaccharides was examined in vivo in the chick chorioallantoic membrane (CAM) model by using fertilized eggs. Decreases in the density of the capillaries were assessed and scored. The results showed that SV1 and PSV1 have an inhibitory effect on angiogenesis. These results were also confirmed by inhibition tubulogenesis in rabbit aorta endothelial cell (RAEC) in matrigel. These compounds were assessed in Apoptosis assay (Annexin V - FITC / PI) and cell viability by MTT assay of RAEC. These polysaccharides do not affect the viability and do not have apoptotic or necrotic action. RAEC cell when incubated with SV1 and PSV1showed inhibition of VEGF secretion, observed when compounds were incubated at 25, 50 and 100 μg/μL. The VEGF secretion with the RAEC cell line for 24 h, was more effective for PSV1 at 50 μg/μL(71.4%) than SV1 100 μg/μL (75.9%). SV1 and PSV1 had an antiproliferative action (47%) against tumor cell line HeLa. Our results indicate that these sulfated polysaccharides have antiangiogenic and antitumoral actions / O presente estudo analisa a composi??o qu?mica e seus efeitos sobre os radicais livres, inflama??o, angiog?nese, coagula??o, VEGF e prolifera??o celular dos polissacar?deos de uma alga Sargassum vulgare. O polissac?rido sulfatado foi extra?do a partir de algas marrons por prote?lise com a enzima maxataze. A presen?a de prote?nas e a??cares foram observados no cru de polissacarideos. Fracionamento do o extrato bruto foi feito com concentra??es crescente de acetona (0,3-1,5 v), produzindo quatro grupos de polissacarideos. Estes compostos ani?nicos da alga S. vulgare, foram fracionados (SV1) e purificados (PSV1) exibindo com alta a??cares totais e sulfatecontent e n?vel muito baixo de prote?nas.A fucana SV1 cont?m baixos n?veis de prote?na e de hidratos de carbono e alto teor de sulfato. Este polissacar?deos prolongou o tempo de tromboplastina parcial activada (aPTT) a 50 ug (>240 s). n?o foi observado qualquer efeito de SV1 sobre o tempo de protrombina (PT), que corresponde a via extr?nseca da coagula??o. SV1 exibiu alta a??o antitromb?tica in vivo, com uma concentra??o 10 vezes maior do que a heparina. SV1 promoveu a actividade de inibi??o enzim?tica direta da trombina e estimulou a atividade enzim?tica do FXa. Mostrou tamb?m, atividade inibidora optima de trombina (50,2 ? 0,28%) a uma concentra??o de 25 ug / mL. A sua ac??o anti-oxidante de radicais scavenging por DPPH foi de (22%), indicando que o pol?mero n?o tem qualquer a??o citot?xica (hemol?tica) em tipos de sangue ABO e Rh, em diferentes grupos de eritr?citos e exibindo alta a??o anti-inflamat?ria em edema de pata de ratos Wistar em todas as concentra??es testadas induzida por carragenina. Tal processo foi demonstrado por edema e infiltra??o celular. A angiogenese ? um processo din?mico de prolifera??o e diferencia??o. Ele requer prolifera??o endotelial, migra??o, e a forma??o do tubo. Neste contexto, as c?lulas endoteliais s?o um alvo preferido para muitos estudos e terapias. A efic?cia antiangiogenico de polissacar?deos foi examinada in vivo na membrana corioalant?ica pinto (CAM) usando-se ovos fertilizados. Diminui??es na densidade dos capilares foram avaliados e pontuados. Os resultados mostraram que SV1 e PSV1 tem um efeito inibidor da angiogenese. Estes resultados foram tamb?m confirmados por tubulogenesis inibi??o na c?lula endotelial da aorta de coelho (RAEC) em matrigel. C?lulas RAEC quando foram incubadas com SV1and PSV1 demonstraram inibi??o da secre??o de VEGF, a 25, 50 e 100 ug/mL. A secre??o de VEGF com a linha de c?lulas RAEC durante 24 h, foi mais eficaz para PSV1 a 50 ug / mL (71,4%) do que SV1 100 ug / mL (75,9%). SV1 e PSV1 posuiram uma ac??o antiproliferativa (47%) contra as c?lulas tumorais tipo HeLa. Estes compostos foram avaliados tamb?m, no ensaio de apoptose (anexina V - FITC / PI) e a viabilidade celular pelo ensaio de MTT de RAEC. Estes polissacar?deos n?o afetaram a viabilidade e n?o tiveram a??o apopt?tica ou necr?tica. Nossos resultados indicam que estes polissacar?deos sulfatados t?m a??es antiangiog?nica e antitumoral e constituem um importante alvo biol?gico e farmacol?gico

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 EdjaneMAB.pdf: 131472 bytes, checksum: fa624d7510ee901925a2df6063e51778 (MD5) Previous issue date: 2008-07-30 / Fucan is a term used to denominate a family of sulfated L-fucose-rich polysaccharides. The brown alga Spatoglossum schr?ederi (Dictyotaceae) has three heterofucans namely fucan A, B and C. The 21 kDa fucan A is composed of a core of β (1-3) glucuronic acid-containing oligosaccharide of 4.5 kDa with branches at C4 of fucose chains α (1-3) linked. The fucose is mostly substituted at C4 with a sulfate group and at C2 with chains of β (1-4) xylose. This fucan has neither anticoagulant (from from 0.1 to 100?g) nor hemorrhagic activities (from 50 to 800 ?g/mL). The antithrombotic test in vivo showed the fucan A has no activity in any of the concentrations (from 0.2 to 20?g/g/day) tested 1h after polysaccharide administration. However, when fucan A was injected endovenously 24h before the ligature of the venae cavae, we observed a dose-dependent effect, reaching saturation at around 20g/g of rat weight. In addition, this effect is also time-dependent, reaching saturation around 16h after fucan administration. In addition, regardless of administration pathway, fucan A displayed antithrombotic action. The exception was the oral pathway. Of particular importance was the finding that fucan A stimulates the synthesis of an antithrombotic heparan sulfate from endothelial cells like heparin. The hypothesis has been raised that in vivo antithrombotic activity of fucan A is related to the increased production this heparan. Taken together with the fact that the compound is practically devoid of anticoagulant and hemorrhagic activity suggests that it may be an ideal antithrombotic agent in vivo / Fucanas ? um termo utilizado para denominar a fam?lia de polissacar?deos sulfatados que apresentam em sua constitui??o α-L-fucose sulfatada. A alga marrom Spatoglossum schr?ederi da fam?lia Dictyotaceae, apresenta tr?s heterofucanas denominadas de fucana A, B, e C. A fucana A (21kDa) ? composta por um n?cleo central formado por ?cido glucur?nico, β 1→3 ligado, substitu?dos em C4 por L-fucoses α (1→3) ligados. A fucose ainda ? substitu?da no C4 por grupos sulfatos e no C2 por cadeias de β (1→4) xilose. Esta fucana n?o apresentou atividade anticoagulante entre 0,1 e 100?g/mL e nenhuma atividade hemorr?gica entre 50 e 800?g /mL. Os testes antitromb?tico in vivo mostraram que a fucana A n?o apresentou atividade nas concentra??es (0,2 a 20?g/g) testadas 1 hora ap?s a administra??o do polissacar?deo. No entanto, quando a fucana A foi administrada endovenosamente, 24h antes da ligadura da veia cava, observou-se um efeito dose-dependente, alcan?ando a sua satura??o em torno de 20?g/g de massa do animal. Al?m disso, o efeito se mostrou tempo-dependente, atingindo satura??o em 16h ap?s a administra??o da fucana. Em todas as vias em que foi administratada (SC, IM, IP, e IV), a fucana A demonstrou a??o antitromb?tica. Exce??o apenas para a via oral. A import?ncia dos resultados obtidos foi o fato da fucana A estimular a s?ntese de um heparam sulfato com caracter?sticas antitromb?tica semelhante ? heparina pelas c?lulas endoteliais. Esta descoberta levou a hip?tese de que a atividade antitromb?tica da fucana A est? relacionada com o aumento na produ??o deste heparam sulfato. Devido as suas caracter?sticas e por ser um composto praticamente desprovido de atividade anticoagulante e hemorr?gico sugere-se que a fucana A possa vir a ser um agente antitromb?tico in vivo . A realiza??o deste estudo teve car?ter multidisciplinar, envolvendo pesquisadores da Bioqu?mica, Morfologia, Hematologia, Bot?nica e Veterin?ria. Este aspecto preencheu os requisitos da multidisciplinaridade do Programa de P?s-Gradua??o em Ci?ncias da Sa?de

As algas marrons do gênero Sargassum têm sido estudadas como potenciais candidatas ao processo de biossorção, objetivando tratar efluentes contaminados com metais pesados. A estrutura celular deste gênero de alga apresenta moléculas carregadas, como o ácido algínico, capazes de atrair e captar cátions metálicos. A proposta deste trabalho foi avaliar a capacidade de captação dos íons cobre e chumbo pela alga marinha Sargassum através de ensaios cinéticos e de acumulação com modelagem cinética e das isotermas para sistemas monocomponente e binário. O equilíbrio de captação foi atingido em 30 minutos e a cinética do processo foi representada por um modelo de segunda ordem. No sistema monocomponente, onde as soluções continham inicialmente 10 mg/L de cada íon metálico a captação no equilíbrio foi 0,06 mmol/g de íons Cu (II) e 0,02 mmol/g de íons Pb (II). Para as soluções contendo 50 mg/L a captação no equilíbrio foi 0,37 mmol/g de íons Cu (II) e 0,11 mmol/g de íons Pb (II), individualmente. A capacidade de biossorção foi reduzida no sistema binário mostrando que a presença de um segundo metal afeta a captação dos íons. Os valores de qmax para íons Pb (II) no sistema binário foi 0,6 mmol/g contra 1,2 mmol/g no sistema monocomponente; para íons Cu (II) a captação foi 0,7 mmol/g contra 1,8 mmol/g. Na biossorção binária a captação de íons Pb (II) manteve o percentual de remoção mesmo em soluções com elevadas concentrações de íons Cu (II); o contrário não foi observado para o Pb(II), indicando que íons Pb (II) interferem mais na captação de íons Cu (II). Para o estudo do equilíbrio monocomponente foram utilizados os modelos de Langmuir e Freundlich; para o sistema binário, o Langmuir competitivo, Langmuir modificado, Langmuir-Freundlich e Freundlich estendido. Os modelos não foram conclusivos, porém elucidaram aspectos relacionados ao mecanismo, apresentando alto grau de dispersão entre a captação experimental e as teóricas. / Brown seaweeds from the genus Sargassum are widely studied for use as potential candidates for biosorption purposes, particularly in the treatment of heavy-metals contaminated effluents. The cellular structure of this seaweed presents charged molecules, such as alginic acid, able to attract and recover metal cation ions. The objective of this work was to study the uptake capacity of copper and lead by the seaweed Sargassum, through kinetic and isotherm studies with the help of kinetic and isotherm models for monocomponent and binary solutions. Equilibrium uptake was reached in 30 minutes and the kinetic behavior of the process followed a second-order model. In monocomponent systems, at 10 mg/L metal concentration, equilibrium uptake indicated a recovery of 0.06 mmol Cu(II)/g biomass and 0.02mmol/g Pb(II)/g biomass. When a 50 mg/L solution was used, the individual uptake was equal to 0.37 mmol Cu(II)/g biomass and 0.11 mmol Pb(II)/g biomass. Uptake was markedly reduced by the presence of the second metal in solution indicating the interference in biosorption in a multi-ion solution. Values of qmax for Pb(II) in the binary system was equal to 0.6 mmol/g biomass, against 1.2 mmol/g biomass in the monocomponent situation; for Cu(II) the uptake was equal to 0.7 mmol/g biomass against 1.8 mmol/g biomass, in the monocomponent solution. In the binary solution, Pb(II) uptake kept the same percent removal, even in the presence of high concentrations of Cu(II); an opposite behavior was observed for Cu(II), indicating that Pb(II) interfere in the uptake of Cu(II) more than the opposite situation. In the monocomponent equilibrium models such as Langmuir and Freundlich were used to fit experimental data. In binary systems, Competitive Langmuir, Modified Langmuir, Langmuir-Freundlich and Extended Freundlich Extented were used. All the models were not conclusive to fit experimental results, however they contributed for a better understanding of the mechanism involved in biosorption, because a high level of dispersion between actual biosorption and theoretical prediction was observed.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 HugoWBA_DISSERT.pdf: 1563778 bytes, checksum: ea0b3bf4e13c36f81c11450e423c8df4 (MD5) Previous issue date: 2014-02-28 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The alginic acid or alginates are acidic polysaccharides found in brown seaweed widely used in food, cosmetic, medical and pharmaceutical industry. This paper proposes the extraction, chemical characterization and verification of the pharmacological activities of brown seaweed variegata Lobophora . The alginate was extracted from the seaweed Lobophora variegata and part was sulphated for comparative purposes. The native extract showed 42% total sugar, 65% uronic acid, 0,36 % protein and 0% of sulfate, while the sulfate showed 39% , 60%, 0.36% and 27,92 % respectively. The presence of a sulfate group may be observed by the metachromasia with toluidine blue in electrophoresis system and characteristic vibration 1262,34 cm-1 in infrared spectroscopy connections assigned to S = O. We observed the formation of films and beads of native alginate, where more concentrated solution 6% resulted in a thicker and more consistent film. Native alginate showed proliferative activity at concentrations (25 and 50 mcg), (50 mg) and (100 mg) in 3T3 cell line in 24h, 48h and 72h, respectively , as the sulfated (100 mg) in 24 . Also showed antiproliferative or cytotoxic activity in HeLa cells of strain, (25 and 100 mg), (25 and 100 mg) and (25, 50 and 100 mg), to native, now for the sulfate concentrations (100 mg) in 24 (25, 50 and 100 mg) in 48 hours, and (50 and 100 mg ) 72h. For their antioxidant activity, the sulfated alginates have better total antioxidant activity reaching 29 % of the native activity while 7.5 % of activity . For the hydroxyl radical AS showed high inhibition ( between 77-83 % ) in concentrations, but the AN surpassed these numbers in the order of 78-92 % inhibition. The reducing power of AN and AS ranged between 39-82 % . In the method of ferric chelation NA reached 100 % chelating while the AS remained at a plateau oscillating 6.5%. However, in this study , we found alginates with promising pharmacological activities, to use in various industries as an antioxidant / anti-tumor compound / Os ?cidos alg?nicos ou alginatos s?o polissacar?deos ?cidos presentes em algas marrons amplamente utilizadas na ind?stria de alimentos, est?tica, m?dica e farmac?utica. Este trabalho prop?e a extra??o, caracteriza??o qu?mica e verifica??o das atividades farmacol?gicas da alga marinha marrom Lobophora variegata. O alginato foi extra?do da alga Lobophora variegata e parte foi sulfatado para fins comparativos. O extrato nativo apresentou 42% de a??car total, 65% de ?cido ur?nico, 0,36% de prote?na e 0% de sulfato, enquanto a sulfatada apresentou 39%, 60%, 0,36% e 27,92% respectivamente. A presen?a do grupo sulfato pode ser verificada atrav?s da metacromasia com o corante azul de toluidina no sistema de eletroforese e vibra??o caracter?stica em 1262,34 cm-1 na espectroscopia de infravermelho, atribu?do a liga??es S=O. Observou-se a forma??o de filmes e esferas de alginato nativo, onde a solu??o mais concentrada 6%, resultou em um filme mais espesso e consistente. O alginato nativo apresentou atividade proliferativa nas concentra??es (25 e 50?g), (50 ?g) e (100 ?g) em linhagem celular 3T3 em 24h, 48h e 72h, respectivamente, j? o sulfatado em (100 ?g) em 24h. Apresentou tamb?m atividade antiproliferativa ou citot?xica em c?lulas da linhagem HeLa, com (25 e 100 ?g), (25 e 100 ?g) e (25, 50 e 100 ?g), para o nativo, j? para a sulfatada nas concentra??es (100 ?g) em 24h, (25, 50 e 100 ?g) em 48h, e (50 e 100 ?g) 72h. Quanto a atividade antioxidante, os alginatos sulfatados apresentam melhor atividade antioxidante total chegando a 29% de atividade enquanto o nativo 7,5% de atividade. Para o radical hidroxila o AS apresentou alta inibi??o (entre 77-83%) nas concentra??es testadas, por?m o AN superou estes n?meros na ordem de 78-92% de inibi??o. O poder redutor de AN e AS variou entre 39-82%. Na metodologia de quela??o f?rrica, o NA chegou a 100% de quela??o, enquanto o AS permaneceu em um plat? oscilando em 6,5%. Contudo, neste trabalho, pudemos constatar alginatos com promissoras atividades farmacol?gicas, com uso nas diversas ind?strias como um composto antioxidante/antitumoral

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:13:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 KalineDM_DISSERT.pdf: 984274 bytes, checksum: 8150a2011f0eac140bc8113ffa4bc1ea (MD5) Previous issue date: 2011-12-02 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / In the present study, six families of sulfated polysaccharides were obtained from seaweed Dictyopteris delicatula (Lamouroux, 1809) and their anticoagulant, antioxidant and antitumor activities were evaluated. All fractions showed anticoagulant activity on aPTT assay, but not on PT assay. Fractions also exhibited total antioxidant activity, superoxide radical scavenging capacity and ferric chelating property. Thus, six fractions (F0.5v, F0.7v, F1.0v, F1.3v, F1.5v e F2.0v) we obtained by proteolytic digestion, followed by acetone fractionation and molecular sieving on Sephadex G-100. Chemical analyses demonstrated that all polysaccharides contain heterofucans composed mainly of fucose, xylose, glucose, galactose, uronic acid, and sulfate. Any fractions changed the PT. However, all fractions were able on double the aPPT on a dose-dependent manner. The heterofucans F0.7v and F1.0v showed low anticoagulant activity while F1.5v presented the most prominent anticoagulant activity .When compared to Clexane?, a low molecular weight heparin, at same concentration F1.5v presented similar anticoagulant activity. The fucans F0.5v and F0.7v at 1.0 mg/mL showed high ferric chelating activity (~45%), whereas fucans F1.3v (0.5 mg/mL) showed considerable reducing power, about 53.2% of the activity of vitamin C. The fucan F1.5v presented the most prominent anticoagulant activity. The best antiproliferative activity was found with fucans F1.3v and F0.7v. However, F1.3v activity was much higher than F0.7v inhibiting almost 100% of HeLa cell proliferation. These fucans have been selected for further studies on structural characterization as well as in vivo experiments, which are already in progress / No presente estudo, seis popula??es de polissacar?deos sulfatados foram obtidas a partir da alga Dictyopteris delicatula (Lamouroux, 1809) e suas atividades anticoagulante, antioxidante e antitumoral avaliadas. Deste modo, as seis fra??es (F0.5v, F0.7v, F1.0v, F1.3v, F1.5v e F2.0v) foram obtidas por prote?lise seguida por fracionamento de acetona e gel filtra??o molecular Sephadex G-100. Todas as fra??es apresentaram atividade anticoagulante frente ao ensaio de aPTT, mas n?o sobre o ensaio de PT. As heterofucanas exibiram atividade antioxidante total, capacidade em sequestrar radicais super?xido e propriedade de quelar ferro. As an?lises qu?micas demonstraram que todos os polissacar?deos cont?m heterofucanas composta principalmente por fucose, xilose, glicose, galactose, ?cido ur?nico, e sulfato. Nenhuma das fra??es alterou o PT. Entretanto, todas as fra??es foram capazes de dobrar o aPTT de uma maneira dose dependente. As heterofucanas F0.7v e F1.0v demonstraram baixa atividade anticoagulante, enquanto a F1.5v apresentou a maior atividade anticoagulante e quando comparada com Clexane?, uma heparina de baixo peso molecular, em mesma concentra??o, apresentou antividade anticoagulante semelhante. As fucanas F0.5v e F0.7v a 1,0 mg/mL mostraram alta atividade de quela??o ferica (~ 45%), enquanto a fucana F1.3v (0,5 mg/mL) mostrou consider?vel potencial redutor, cerca de 53,2% da atividade da vitamina C. A melhor atividade antitumoral foi encontrada nas fucanas F1.3v e F0.7v. No entanto, a atividade F1.3v foi muito superior a F0,7v, quase 100% de inibi??o da prolifera??o de c?lulas HeLa (c?lula de c?ncer de colo de ?tero). Estas fucanas foram selecionadas para novos estudos sobre caracteriza??o estrutural, bem como em experimentos in vivo, que j? est?o em andamento / 2020-01-01

Made available in DSpace on 2015-03-03T13:58:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CybelleTM.pdf: 889951 bytes, checksum: bcf6eb5adb7011fa19c2ab4cd178326c (MD5) Previous issue date: 2007-09-05 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / ?Fucans, sulfated polysaccharides extracted from brown algae and some echinoderms, have been extensively studied for its diverse biological activities and because of its interference with molecular mechanisms of cell to cell recognition, including leukocyte trafficking from blood vessels into sites of inflammation mediated by selectin, a family of adhesion molecules. In the present study, we examined structural features of a heterofucan extracted from brown algae Padina gymnospora and its effect on the leukocyte migration to the peritoneum. The sulfated polysaccharides were extracted from the brown seaweed by proteolysis with the proteolytic enzyme maxatase. The presence of protein and uronic acid contamination was detected in the crude polysaccharide extract. Fractionation of the crude extract with growing concentrations of acetone produced five fractions with different concentrations of fucose, xylose, uronic acid, galactose, glucose and sulfate. The fraction precipitated with 1.5 volumes of acetone was characterized by infrared and nuclear magnetic resonance, through which can be observed the presence of sulfate groups in the C4 of -L-fucose. The anti-inflammatory action of this composite was assessed by a sodium thioglycollate-induced peritonitis assay and through nitric oxide production by the peritoneal macrophages using Griess reagent. Fraction F1.5 was efficient in reducing leukocyte influx into the peritoneal cavity when 10 mg/kg and 25mg/kg were used, resulting in a decrease of 56 and 39%, respectively. A decrease of nitric oxide production occurred when high concentrations of fucana were used. The cytotoxicity of the composite was also assessed using the reduction of 3-(4,5 dimethylthiazol-2-yl) 2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT). Fraction F1.5 had no cytotoxicity when 500 ?g/mL of the fraction was used. This study suggests the use of fraction F1.5 (heterofucan) as an anti-inflammatory / Fucanas, polissacar?deos sulfatados extra?dos de alga marrom e alguns equinodermos, t?m sido extensivamente estudadas devido as suas diversas atividades biol?gicas e pela sua interfer?ncia com mecanismos moleculares de reconhecimento celular, incluindo o tr?fego de leuc?citos dos vasos sangu?neos para o interior de s?tios inflamat?rios mediado pela fam?lia das mol?culas de ades?o denominada selectinas. Neste presente estudo, n?s examinamos a estrutura de uma heterofucana extra?da da alga marrom Padina gymnospora e seu efeito sobre a migra??o de leuc?citos para o perit?nio. Os polissacar?deos sulfatados foram extra?dos da alga marrom por prote?lise com a enzima proteol?tica maxatase. A presen?a de contamina??o por prote?nas e ?cido ur?nico foi detectada no extrato bruto dos polissacar?deos. Fracionamento do extrato bruto com concentra??es crescentes de acetona produziu cinco fra??es com diferentes concentra??es de fucose, xilose, ?cido ur?nico, galactose, glicose e sulfato. A fra??o precipitada com 1,5 volume de acetona foi caracterizada por infravermelho e resson?ncia magn?tica nuclear, atrav?s das quais se p?de constatar a presen?a de grupos sulfato no C4 da -L-fucose. A a??o antiinflamat?ria deste composto foi avaliada atrav?s do ensaio de peritonite induzida por tioglicolato de s?dio e atrav?s da produ??o de ?xido n?trico por macr?fagos peritoneais utilizando-se o reagente de Griess. A fra??o F1,5 mostrou-se eficiente na redu??o do influxo leucocit?rio para a cavidade peritoneal quando utilizados 10 mg/Kg e 25 mg/Kg resultando em uma diminui??o na ordem de 56 e 39 %, respectivamente. Uma diminui??o na produ??o de ?xido n?trico ocorreu quando altas concentra??es de fucana foram usadas. A citotoxicidade do composto tamb?m foi avaliada utilizando-se como par?metro a redu??o do 3-(4,5- dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT). A fra??o F1,5 n?o apresentou citotoxicidade quando utilizados 500 ?g/ml da fra??o. Este estudo sugere o uso da fra??o F1,5 (heterofucana) como um antiinflamat?rio

Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-08-09T23:35:50Z No. of bitstreams: 1 RuthMedeirosDeOliveira_TESE.pdf: 4171784 bytes, checksum: 9097e00661c5b8a82a6f4a4f71850657 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-08-15T22:18:44Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RuthMedeirosDeOliveira_TESE.pdf: 4171784 bytes, checksum: 9097e00661c5b8a82a6f4a4f71850657 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-15T22:18:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RuthMedeirosDeOliveira_TESE.pdf: 4171784 bytes, checksum: 9097e00661c5b8a82a6f4a4f71850657 (MD5) Previous issue date: 2015-12-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico (CNPq) / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Fucoidan ? um termo usado para definir polissacar?deos pertencentes ao grupo das heterofucanas que apresentam na sua constitui??o menos de 90% de L-fucose. Uma exce??o a esta regra ? o fucoidan obtido da alga Fucus vesiculosus. Este fucoidan ? comercializado pela empresa SIGMA-ALDRICH Co. e tem sido utilizado em v?rias pesquisas para avalia??o de suas atividades farmacol?gicas. No entanto, este produto n?o ? uma mol?cula pura, sendo na verdade uma mistura de diferentes fucoidans. Neste trabalho foram obtidos, a partir de precipita??o com acetona, quatro fucoidans a partir do extrato bruto do fucoidan de F. vesiculosus comercializado pela SIGMA-ALDRICH Co. para avalia??o de suas atividades anticoagulante, antioxidante, antiadipog?nica, imunomodulat?ria e antiurol?tica. Na atividade anticoagulante, avaliada pelo teste de TTPa, destacaram-se os fucoidans F0.9, F1.1 e F2.0 que induziram um aumento de oito vezes no tempo de coagula??o, quando comparado ao controle, quando uma massa de 10 ?g foi aplicada. J? para o teste de TP, apenas o fucoidan F0.9 foi capaz de aumentar o tempo de coagula??o em compara??o ao controle. Na capacidade antioxidante total (CAT), a atividade do fucoidan F2.0 correspondeu a aproximadamente 400 equivalentes de ?cido asc?rbico, enquanto que o fucoidan F0.5 foi o menos efetivo, com atividade referente a aproximadamente 38 equivalentes. Com rela??o ao efeito sobre a adipog?nese de c?lulas pr?-adipocit?rias (3T3-L1), foi observado que alguns fucoidans causaram uma redu??o da adipog?nese, como foi o caso de F1.1 e F2.0 e este efeito foi associado ? redu??o na express?o das prote?nas reguladoras C/EBP?, C/EBP? e PPAR?. Por outro lado, os fucoidans F0.5 e F0.9 induziram a adipog?nese pelo aumento da express?o desses reguladores proteicos. Al?m disso, o fucoidan F2.0 foi capaz de induzir a hidr?lise de triglicer?deos presentes no interior dos adip?citos. O efeito imunomodulador foi avaliado e foi observado que a presen?a dos fucoidans F0.5, F1.1 e F2.0 reduziram significativamente a produ??o de ?xido n?trico por macr?fagos ativados com LPS, com destaque para o fucoidan F2.0 que, na concentra??o de 100 ?g/mL, conseguiu reduzir, em aproximadamente, 55% o efeito causado pelo LPS. J? com rela??o ao efeito dos fucoidans sobre a forma??o de cristais de oxalato de c?lcio, foi observado que o fucoidan F0.5 interferiu, mais efetivamente, sobre a agrega??o desses cristais e tal efeito n?o foi significativamente diferente com rela??o ao efeito causado pelo extrato bruto. Al?m disso, o fucoidan F0.5 promoveu a forma??o apenas de cristais do tipo dihidratados (COD), enquanto que os fucoidans F1.1 e F2.0 n?o interferiram significativamente sobre a forma??o dos cristais, quando comparados ao controle. Os resultados obtidos neste trabalho indicam que o extrato bruto do fucoidan de Fucus vesiculosus comercializado ?, na verdade, uma mistura de diferentes fucoidans que, por sua vez, possuem composi??es qu?micas diferentes al?m de possu?rem atividades farmacol?gicas diferenciadas e que o uso desses fucoidans ? indicado de acordo com a atividade farmacol?gica a ser avaliada. / Fucoidan is a term used to define heteropolysaccharides that are composed of less than 90% L-fucose. The exception to this rule is the homofucoidan obtained from the seaweed Fucus vesiculosus. This fucoidan can be purchased from SIGMA Co. and have been used in various research for evaluation of their pharmacological activities. However, it is not a pure molecule. In fact, it is a mix of several fucoidan molecules. In this work, were obtained, from acetone precipitation, and biochemically characterized, four fucoidan molecules from SIGMA-ALDRICH Co. fucoidan to evaluate their anticoagulant, antioxidant, antiadipogenic, immunomodulatory and antiurolithiatic activities. In anticoagulant activity, evaluated by aPTT assay, fucoidans F0.9, F1.1 and F2.0 increased eightfold the coagulation time, compared to the control, when a mass of 10 ?g was used. To PT test, only fucoidan F0.9 was capable of increase the coagulation time, compared to control. In the total antioxidant capacity assay (TAC), the fucoidan F2.0 showed 400 ascorbic acid equivalents, while fucoidan F0.5, the lest effective, 38 equivalents. In respect to the effect on pre-adipocyte cell lines (3T3-L1) adipogenesis, was observed that fucoidan F1.1 and F2.0 reduced the adipogenesis and this effect was associated to the reduction in the expression of regulatoy proteins C/EBP?, C/EBP? and PPAR?. On the other hand, fucoidans F0.5 and F0.9 induced increased expression of these regulatory proteins. Furthermore, fucoidan F2.0 induced hydrolysis of triglycerides present in the interior of adipocytes. The immunomodulatory effect was evaluated and observed that the presence of fucoidans F0.5 , F1.1 and F2.0 significantly reduced the production of nitric oxide by activated macrophages with LPS specially fucoidan F2.0 that in 100 ?g/mL, reduced about 55% the effect caused by LPS. Relative to the effect upon the formation of calcium oxalate crystals, fucoidan F0.5 was more effective in reduce the aggregation of the crystals and this effect it was not significantly different regarding the effect caused by the crude. Besides, fucoidan F0.5 only promoted the formation of COD type crystals, while fucoidans F1.1 and F2.0 did not influence the formation of crystals compared with the control. The results described in this study indicate that the commercial crude fucoidan of Fucus vesiculosus it?s a mix of several fucoidan which, in turn, have different chemical compositions besides having different pharmacological activities. The use of these fucoidans it?s indicated according the pharmacological activity to be evaluated.

As algas marrons do gênero Sargassum têm sido estudadas como potenciais candidatas ao processo de biossorção, objetivando tratar efluentes contaminados com metais pesados. A estrutura celular deste gênero de alga apresenta moléculas carregadas, como o ácido algínico, capazes de atrair e captar cátions metálicos. A proposta deste trabalho foi avaliar a capacidade de captação dos íons cobre e chumbo pela alga marinha Sargassum através de ensaios cinéticos e de acumulação com modelagem cinética e das isotermas para sistemas monocomponente e binário. O equilíbrio de captação foi atingido em 30 minutos e a cinética do processo foi representada por um modelo de segunda ordem. No sistema monocomponente, onde as soluções continham inicialmente 10 mg/L de cada íon metálico a captação no equilíbrio foi 0,06 mmol/g de íons Cu (II) e 0,02 mmol/g de íons Pb (II). Para as soluções contendo 50 mg/L a captação no equilíbrio foi 0,37 mmol/g de íons Cu (II) e 0,11 mmol/g de íons Pb (II), individualmente. A capacidade de biossorção foi reduzida no sistema binário mostrando que a presença de um segundo metal afeta a captação dos íons. Os valores de qmax para íons Pb (II) no sistema binário foi 0,6 mmol/g contra 1,2 mmol/g no sistema monocomponente; para íons Cu (II) a captação foi 0,7 mmol/g contra 1,8 mmol/g. Na biossorção binária a captação de íons Pb (II) manteve o percentual de remoção mesmo em soluções com elevadas concentrações de íons Cu (II); o contrário não foi observado para o Pb(II), indicando que íons Pb (II) interferem mais na captação de íons Cu (II). Para o estudo do equilíbrio monocomponente foram utilizados os modelos de Langmuir e Freundlich; para o sistema binário, o Langmuir competitivo, Langmuir modificado, Langmuir-Freundlich e Freundlich estendido. Os modelos não foram conclusivos, porém elucidaram aspectos relacionados ao mecanismo, apresentando alto grau de dispersão entre a captação experimental e as teóricas. / Brown seaweeds from the genus Sargassum are widely studied for use as potential candidates for biosorption purposes, particularly in the treatment of heavy-metals contaminated effluents. The cellular structure of this seaweed presents charged molecules, such as alginic acid, able to attract and recover metal cation ions. The objective of this work was to study the uptake capacity of copper and lead by the seaweed Sargassum, through kinetic and isotherm studies with the help of kinetic and isotherm models for monocomponent and binary solutions. Equilibrium uptake was reached in 30 minutes and the kinetic behavior of the process followed a second-order model. In monocomponent systems, at 10 mg/L metal concentration, equilibrium uptake indicated a recovery of 0.06 mmol Cu(II)/g biomass and 0.02mmol/g Pb(II)/g biomass. When a 50 mg/L solution was used, the individual uptake was equal to 0.37 mmol Cu(II)/g biomass and 0.11 mmol Pb(II)/g biomass. Uptake was markedly reduced by the presence of the second metal in solution indicating the interference in biosorption in a multi-ion solution. Values of qmax for Pb(II) in the binary system was equal to 0.6 mmol/g biomass, against 1.2 mmol/g biomass in the monocomponent situation; for Cu(II) the uptake was equal to 0.7 mmol/g biomass against 1.8 mmol/g biomass, in the monocomponent solution. In the binary solution, Pb(II) uptake kept the same percent removal, even in the presence of high concentrations of Cu(II); an opposite behavior was observed for Cu(II), indicating that Pb(II) interfere in the uptake of Cu(II) more than the opposite situation. In the monocomponent equilibrium models such as Langmuir and Freundlich were used to fit experimental data. In binary systems, Competitive Langmuir, Modified Langmuir, Langmuir-Freundlich and Extended Freundlich Extented were used. All the models were not conclusive to fit experimental results, however they contributed for a better understanding of the mechanism involved in biosorption, because a high level of dispersion between actual biosorption and theoretical prediction was observed.

Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ThiagoGC_DISSERT.pdf: 2736665 bytes, checksum: 120a3ba44fefe1ccd9373aeb0ff1629f (MD5) Previous issue date: 2014-02-06 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Seaweeds are a major source of biologically active compounds . In the extracellular matrix of these organisms are sulfated polysaccharides that functions as structural components preventing it against dehydration. The fraction 0.9 (FucB) rich in sulfated fucans obtained from brown seaweed Dictyota menstrualis was chemical characterized and evaluated for pharmacological activity by testing anticoagulant activity, stimulatory action on the synthesis of an antithrombotic heparan sulfate, antioxidant activity and its effects in cell proliferation. The main components were FucB carbohydrates (49.80 ? 0.10 %) and sulfate (42.30 ? 0.015 %), with phenolic compounds ( 3.86 ? 0.016 %) and low protein contamination ( 0.58 ? 0.001 % ) . FucB showed polydisperse profile and analysis of signals in the infrared at 1262, 1074 and 930 cm -1 and 840 assigned to S = O bonds sulfate esters , CO bond presence of 3,6- anhydrogalactose , β -D- galactose non- sulfated sulfate and the axial position of fucose C4 , respectively. FucB exhibited moderate anticoagulant activity , the polysaccharides prolonged time (aPTT ) 200 ug ( > 90s ) partial thromboplastin FucB no effect on prothrombin time (PT), which corresponds to the extrinsic pathway of coagulation was observed. This stimulation promoted fraction of about 3.6 times the synthesis of heparan sulfate (HS) by endothelial cells of the rabbit aorta ( RAEC ) in culture compared with cells not treated with FucB . This has also been shown to compete for the binding site with heparin. The rich fraction sulfated fucans exhibited strong antioxidant activity assays on total antioxidant (109.7 and 89.5 % compared with BHT and ascorbic acid standards ) , reducing power ( 71 % compared to ascorbic acid ) and ferric chelation ( 71 , comparing with 5 % ascorbic acid). The fraction of algae showed cytostatic activity on the RAEC cells revealed that the increase of the synthesis of heparan sulfate is not related to proliferation. FucB showed antiproliferative action on cell lines modified as Hela and Hep G2 by MTT assay . These results suggest that FucB Dictyota menstrualis have anticoagulant , antithrombotic , antioxidant potential as well as a possible antitumor action, promoting the stimulation of the synthesis of antithrombotic HS by endothelial cells and is useful in the prevention of thrombosis, also due to its inhibitory action on species reactive oxygen ( ROS ) in some in vitro systems , being involved in promoting a hypercoagulable state / Algas marinhas s?o uma das principais fontes de compostos biologicamente ativos. Na matriz extracelular desses organismos existem os polissacar?deos sulfatados que funcionam como componente estrutural prevenindo-a contra desidrata??o. A fra??o 0,9 (FucB) rica em fucanas sulfatadas obtida da alga marrom Dictyota menstrualis foi caracterizada quimicamente e avaliada quanto a atividade farmacol?gica por meio de ensaios de atividade anticoagulante, a??o estimulat?ria sobre a s?ntese de heparam sulfato antitromb?tico, atividade antioxidante e seus efeitos na prolifera??o celular. Os principais componentes da FucB foram carboidratos (49,80 ? 0,10%) e sulfato (42,30 ? 0,015%), apresentando compostos fen?licos (3,86 ? 0,016%) e baixa contamina??o prot?ica (0,58 ? 0,001%). FucB mostrou perfil polidisperso e sinais na an?lise de infravermelho em 1262, 1074 e 930 e 840 cm-1 atribu?dos a liga??es S=O de ?steres de sulfato, presen?a de liga??o C-O de 3,6-anidrogalactose, β-D-galactose n?o sulfatada e sulfato na posi??o axial do C4 da fucose, respectivamente. FucB exibiu moderada atividade anticoagulante, este polissacar?deo prolongou o tempo de tromboplastina parcial activada (aPTT) a 200 ug (>90s) n?o foi observado qualquer efeito de FucB sobre o tempo de protrombina (PT), que corresponde a via extr?nseca da coagula??o. Esta fra??o promoveu estimula??o cerca de 3,6 vezes na s?ntese de heparam sulfato (HS) pelas c?lulas endoteliais da aorta de coelho (RAEC), em cultura, quando comparadas com as c?lulas n?o tratadas com FucB. Esta tamb?m demonstrou competir pelo s?tio de liga??o com a heparina. A fra??o rica em fucanas sulfatadas exibiu forte a??o antioxidante sobre os ensaios de antioxidante total (109,7 e 89,5% comparados com padr?es BHT e ?cido asc?rbico), poder redutor (71% comparado ao ?cido asc?rbico) e quela??o f?rrica (71,5% comparando com ?cido asc?rbico). A fra??o dessa alga mostrou atividade citost?tica sobre as c?lulas RAEC revelando que o aumento da s?ntese de heparan sulfato n?o est? relacionado ? prolifera??o. FucB apresentou a??o antiproliferativa sobre linhagens celulares modificadas como Hela e Hep G2 pelo ensaio de MTT. Esses resultados sugerem que FucB de Dictyota menstrualis tem potencial anticoagulante, antitromb?tico, antioxidante bem como uma poss?vel a??o antitumoral, promovendo a estimula??o da s?ntese de HS antitromb?tico pelas c?lulas endoteliais, sendo ?til na preven??o da trombose, devido tamb?m a sua a??o inibit?ria sobre as esp?cies reativas do oxig?nio (ROS) em alguns sistemas in vitro, estando envolvidos na promo??o de estado de hipercoagulabilidade