El Toxoplasma gondii, agente causal de la toxoplasmosis, es un parásito importante en la salud animal, por ser una de las principales infecciones parasitarias que ocasiona problemas reproductivos, y también constituye una zoonosis muy importante alrededor del mundo. El objetivo del presente estudio fue determinar la seroprevalencia de Toxoplasma gondii en alpacas de la Unidad de Producción de Cochas de la SAIS Túpac Amaru, ubicada en el distrito de Canchayllo, Provincia de Jauja, Departamento de Junín. Para tal fin, se recolectaron sueros sanguíneos procedentes de 200 alpacas entre hembras y machos, en el mes de diciembre de año 2000, para la detección de anticuerpos mediante la técnica de Hemaglutinación Indirecta (HAI). Los resultados generales indicaron que el 21 ± 5.64 % (42/200) de las muestras de alpacas presentaron anticuerpos con títulos que variaron desde 1/16 hasta 1/1024. La seroprevalencia hallada en machos 26.47 10.49 % (18/68) fue mayor que en hembras 18.18 6.57 % (24/132), y por rangos de edad desde los 8 a 12 meses, de 12 hasta 36 meses y más de 36 meses las seroprevalencias fueron 33.33 16.08 %, 15.38 9.81, 20 7.31 respectivamente. Al realizar el análisis estadístico respectivo mediante la Prueba de regresión Logística no se encontró relación estadística significativa entre la presencia de anticuerpos contra T. gondii y el sexo de las alpacas, pero si entre la edad del animal y la infección por T. gondii, siendo las alpacas más jóvenes (8 a 12 meses) aproximadamente 2,9 veces más susceptibles que los otros dos grupos etéreos, este resultado podría deberse a la presencia de anticuerpos maternales, manejo de los animales, factores ambientales y frecuencia del hospedero definitivo. La prevalencia encontrada en el presente estudio fue moderada, por lo tanto, se hace necesario la realización de más estudios a fin de determinar el verdadero rol de este parásito en los problemas reproductivos de las alpacas. / --- Toxoplasma gondii, causative agent of toxoplasmosis, is an important parasite in animal health because it is one of the major parasitic infections that produce reproductive problems, and also it is an important zoonosis worldwide. The objective of this study was to determine the seroprevalence of antibodies against Toxoplasma gondii in alpacas from the Unit of Production of Cochas of the SAIS Tupac Amaru, located in the district of Canchayllo, Province of Jauja, Departament of Junin, Perú. To this end, sera from 200 alpacas among females and male were gathered in the month of December of 2000, for the detection of antibodies by using the method of Indirect Hemaglutination (IHA). 21 5.64 % (42/200) of the samples showed antibodies, with titles ranging from 1/16 up to 1/1024. The seroprevalence found in males was 26.47 (10.47% (18/64), and it was greater than in females, 18.18 6.57 % (24/132), and for age groups, from the birth until 1 year old, more than 1 up to 2 years old and more than 3 years old; the seroprevalence found was 33.33 16.08%, 15.38 9.8, 20 7.31 respectively. The analysis by using The Logistic regression found that the genus did not represent a risk factor. The age did represent a risk factor, being younger alpacas (8 to 12 months) more susceptible than other age groups. These results are coherent with other studies obtained in different parts of world, however, it is observed that there are differences with recent studies obtained in Peru; this, this could be due to environmental factors, frequency of the definitive host. Prevalence found in the present study was moderate, should be done further studies to determine the real importance of T. gondii in the occurrence of abortion in alpacas.

El estudio tuvo como objetivos: determinar la asociación de T. gondii con abortos en el primer, segundo y tercer trimestre de gestación; así como la asociación de T. gondii con mortalidad perinatal. Se realizó un estudio prospectivo de 108 alpacas hembras del Centro de Investigación y Desarrollo de Camélidos Sudamericanos - Lachocc de la Universidad Nacional de Huancavelica, localizado a una altura promedio de 4,450 m.s.n.m., durante una campaña reproductiva-enero de 1999 hasta marzo de 2000-a través del monitoreo de anticuerpos de Toxoplasma gondii mediante la Técnica de Hemoaglutinación Indirecta (HAI). De las 332 muestras de suero de alpacas hembras, inicialmente analizadas, se obtuvo una seroprevalencia de T. gondii de 36.45% (121/332) y con las 108 alpacas hembras seronegativas se siguió su seroconversión durante toda la campaña reproductiva; obteniéndose una incidencia acumulada de T. gondii de 25.00% (27/108) a los 270 días después del empadre. La tasa de fertilidad total fue 70.37% (76/108); y de ella, estuvieron infectadas por T. gondii el 27.63% (21/76) mientras que el 72.36% (55/76) no presentaron seroconversión. A la prueba de X2, no existió diferencia significativa (p>0.05), estimando que la fertilidad fue independiente de la infección por T. gondii. Las tasas de aborto para los periodos de 90 a 180 y 181 a 270 y 271 a 330 días, fueron de 9.52% (2/21), 15.79% (3/19) y 12.50% (2/16) para infectadas por T. gondii; mientras que las seronegativas fueron de 5.45% (3/55), 1.92% (1/52) y 5.88% (3/51). La mortalidad perinatal fue 21.43% (3/14) para las infectadas por T. gondii y 4.17% (2/48) en las no infectadas. / The objective of the present study was to determine the relationship between T. gondii with the occurrence of abortions en the first, second and third trimester of gestation, as well as the association with perinatal mortality. It was conducted a prospective study using 108 female alpacas at the Centro de Investigación y Desarrollo de Camélidos Sudamericanos-Lachocc, Universidad Nacional de Huancavelica, located at 4,450 m.a.s.l., from January 1999 till March 2000, through the monitoring of antibodies against Toxoplasma gondii using the Indirect Haemagglutination Test (IHA). The initial seroprevalence of T. gondii was 36.5% (121/332). The follow-up of the 108 seronegative animals to evaluate serconversion resulted in an accumulate incidence of 25% (27/108) at 270 days after breeding. Fertility rate was 70.4% (76/108), and among them, 27.6% (21/76) were infected by T. gondii whereas 72.4% did not seroconverted. There was no statistical differences (p>0.05) using the X2 test, showing that fertility was independently of infection by T. gondii. Abortion rates for the periods 90-80, 181-270, and 271-330 days were 9.5% (2/21), 15.8% (3/19) and 12.5% (2/16).

La gastroenteritis verminosa es una enfermedad parasitaria que ocasiona grandes pérdidas económicas. Las investigaciones sobre carga parasitaria basadas en necropsias son escasas y hechas en explotaciones ganaderas grandes pero no en comunidades campesinas donde el sistema de crianza generalmente es mixta. El altiplano peruano presenta dos épocas bien marcadas, lluvia y seca, y estas influyen en el comportamiento de la carga parasitaria gastrointestinal. El presente estudio tuvo como objetivos estudiar la carga parasitaria gastrointestinal en épocas de lluvia y seca, frecuencia de lesiones histopatológicas ocasionadas por la carga parasitaria y el patrón de respuesta humoral de los principales parásitos en alpacas de comunidades campesinas. Se trabajó con 120 animales beneficiados en los domicilios, de 1 a 6 años de edad y de ambos sexos, todos ellos pertenecientes a una comunidad campesina de puna alta y seca del altiplano. Se emplearon los métodos de Travassos, cortes histopatológicos, electroforesis SDS-PAGE y EITB. Los machos presentaron 316.8 parásitos (64-858.7) y las hembras 197.4 (88.1-332.5). Se observaron cargas parasitarias significativamente altas (p< 0.05) en alpacas de 6 años de edad pero sólo en época de lluvias. En otras edades (tanto machos como hembras) no hubo variación significativa (p>0.05). Las alpacas machos mostraron mayor carga parasitaria que las hembras. Así mismo, hubo una carga parasitaria mayor en la época de lluvias (p < 0.05). Más del 90% de la carga parasitaria se encontraba localizada en el intestino delgado. Lamanema chavezi y Nematodirus sp. resultaron ser los parásitos más numerosos en épocas de lluvia y seca. La respuesta celular estuvo caracterizada por infiltración mixta de células inflamatorias (eosinófilos, neutrófilos, linfocitos y plasmocitos en algunos casos la presencia de células epiteliodes y células gigantes. El patrón de respuesta humoral al análisis mediante EITB para Lamanema chavezi determinó un total de 18 proteínas antigénicas con pesos moleculares de 20.1 a 193.1 kDa y para Nematodirus sp. 17 proteínas de 14.9 a 196.9 kDa. Las bandas de inmunorreactividad formadas entre las proteínas antigénicas de Lamanema chavezi y la IgG de sueros que tuvieron mayor frecuencia fueron las de 112.1, 162.7, 118.9, 65.1, 92.5, 193.1 y 29.5 kDa. Para Nematodirus sp. fueron las de 62.4, 59.5, y 196.9 kDa. / -- The aim of this work was to study the burden of gastro enteric parasites between two diferent season of the year; rain and dry; also to determine the rate of histopathologic lesions and the humoral response pattern caused by the principal parasites. There were 120 alpacas slaugthered between 1 and 6 years of age, both male and female, all of them belonging to a rural farmers comunity, of the dry higlands. The test used were Travasos, histopathologic sampling, SDS-PAGE and Western Blot. The male alpacas showed burden values of 316.8 parasites (64 – 858.7) and the female alpacas 197.4 (88.1 – 332.5). Significnatly high values (p> 0.05) were found in 6 years old age alpacas, but only in the rainy season. In the other age groups there were no significant variation (p< 0.05). The male alpacas demonstrate to have more parasites than the females and the time of the year with the gratest burden was the rainy season (p< 0.05). More than the 90 % of the parasitic burden was found in the small intestine because Lamanema chavezi and nematodirus sp. were numerous and caused infections in both rainy and dry season. The cellular responce was distinguished by inflamtory cells infiltration: eosinophils, neutrophils, limphocytes and plasmocitos in some occasions epitheloid cells and giant cells. The humoral response pattern to the electrophoretic test in SDS-PAGE ges and the immuno blot of the antigenic proteins of the soluble fraction of Lamanema chavezi showed a total of 18 antigenic proteins with a molecular weight of between 20.1 and 193.1 kDa, and for Nematodirus sp showed 17 proteins with molecular weight of between 14.9 and 196.9 kDa. The immune reactive proteic bands formed between antigenic proteins and the Ig G serum with more frequency; were those that corresponded to 112.1, 162.7, 118.9, 65.1, 92.5, 193.1 y 29.5 kDa. for Lamanema chavezi and 62.4, 59.5 and 196.9 kDa for Nematodirus sp. The study of inmune response against these parasite contribuyes in the developing of control methods for parasitic diseases.

Diez microsatélites para alpacas y llamas fueron usados para evaluar parentesco en 47 alpacas registradas de la Estación Experimental IVITA - Maranganí, provenientes de la provincia de Canchis (Cusco - Perú). El análisis se llevo a cabo utilizando dos metodologías: secuenciador automático (ABI 377 DNA sequencersâ) y técnica de tinción con nitrato de plata. Los microsatélites fueron amplificados en tres reacciones de PCR múltiple y diez reacciones de PCR simple. Los 10 microsatélites fueron polimórficos para ambas metodologías. El número de alelos vario entre 4 y 20, las frecuencias alélicas y probabilidad de exclusión (PE) fueron calculadas utilizando el software Cervus 2.0. Todos los loci, a excepción de dos, se encontraron dentro de los rangos publicados por Lang et al. (1996) y Penedo et al. (1998). La probabilidad de exclusión acumulada para los 10 loci de 0.9999. La probabilidad de exclusión acumulada para cada reacción de PCR múltiple fue mayor a 0.90. Ambas metodologías obtuvieron los mismos resultados. Los resultados confirmaron la paternidad en 17 casos, sin embargo, en más de un 22% de los casos, padres alternativos fueron identificados como padres comparando con los registros. / Ten microsatellites for alpacas and llamas were used to evaluate paternity in 47 alpacas registered at IVITA Research Station Maranganí, Canchis Province (Cusco – Perú). Analysis was carried out using both methodologies: Automatic Sequencer (ABI 377 DNA sequencersâ) and silver staining techniques. Microsatellites were amplified in three multiplex reactions and ten single PCR reactions. They were polymorphic for all alpaca samples using both methodologies. The number of alleles varied between 4 and 20, the allelic frequencies and the exclusion probability were calculated using Cervus 2.0. All loci, except for two, were within the range published by Lang et al. (1996) and Penedo et al. (1998). The accumulated exclusion probability for the ten loci was 0.9999. For each multiplex reaction the accumulated exclusion probability was more than 0.90. Both methodologies yielded the same results. It was possible obtain the same results using both methodologies. The results confirmed paternity in 17 cases of parent-offspring pairs, however in a further 22% of cases alternative adults were identified as parents compared with the register.

La enterotoxemia, causada por el Clostridium perfringens, es la enfermedad infecciosa más importante que afecta a las alpacas, debido a que ocasiona elevadas tasas de mortalidad neonatal de hasta 70%. Recientes estudios han sugerido la participación de la Cp-PLC (C. perfringens fosfolipasa C) como factor de virulencia responsable del cuadro enterotoxemico en alpacas y otras especies domesticas. El presente estudio evaluó las características toxigénicas de la Cp-PLC y de sobrenadantes de diferentes aislados de C. perfringens obtenidos de casos de enterotoxemia en alpacas relacionándolos con sus niveles de producción de Cp-PLC. El protocolo de purificación de Cp-PLC mostró ser exitoso, mostrando su comportamiento como una enterotoxina incapaz de generar lesiones entéricas. Asimismo, los aislados de C. perfringens analizados evidenciaron distintas características toxigénicas independientes de la presencia de Cp-PLC. Al parecer, la Cp-PLC no seria un factor esencial del C. perfringens en la producción de lesiones entéricas en casos de enterotoxemias en alpacas. Palabras Claves: Cp-PLC, Clostridium perfringens, enterotoxigenico / --- Enterotoxemia caused by Clostridium perfringens, causes a mortality neonatal rate up to 70%, this is why it is considered as the most important infections disease. Recent studies has suggested that Cp-PLC (Clostridium perfringens phospholipase C) is a main virulence factor responsible of the enterotoxemic lesions found in alpacas and other domestic animals. This study evaluated the toxigenic characteristics of Cp-PLC and of supercultures of C. perfringens isolates from enterotoxemia in alpacas associated with their levels of Cp-PLC production. The Cp-PLC purification protocol used was successful, showing that Cp-PLC as an enterotoxin enteric unable to cause injury. Similarly, C. perfringens isolates analyzed showed different toxigenic characteristics independently of the Cp-PLC production. Apparently, Cp-PLC does not be a essential factor from C. perfringens in the production of enteric lesions in cases of enterotoxemia in alpacas. Key Word: Cp-PLC, Clostridium perfringens, enterotoxigenic.

El presente estudio tuvo por objetivo determinar la correlación entre el número de microquistes de S. lamacanis en miocardio (N°Mq) y los niveles de CK-MB, AST y LDH en sangre de alpacas, a fin de usarlos como predictores de salud o grado de infección por sarcocistiosis. Se utilizaron 41 alpacas de raza Huacaya de 3-5 años de edad del matadero Municipal de Huancavelica- Provincia de Huancavelica-Perú, las muestras de sangre se colectaron ante-mortem y las de miocardio post-mortem. El 100 % de los animales presentaron microquistes de S. lamacanis, y los coeficientes de correlación entre el N°Mq y CK-MB fue de 0.17, AST 0.04 y para LDH 0.06. Se concluye que la correlación es muy baja o casi nula, por lo que, las enzimas evaluadas, no podrían ser utilizadas como predictores de daño muscular por infección de microquistes de S. lamacanis en alpacas. Palabras clave: Biomarcadores cardíacos, CK –MB, AST, LDH, microquistes S. lamacanis, alpaca. / --- This study was as objetic to determine the correlation between the number of microcysts S. lamacanis in myocardium (NoMq) and blood levels of CK-MB, AST and LDH enzymes in alpacas, to know if you can to serve as predictors of health or sarcocystiosis degree. Performed in 41Huacaya alpacas of 3-5 year old from Municipal Slaughterhouse Huancavelica – Province of Huancavelica-Perú. Blood samples and myocardium were collected ante-mortem and post-mortem, respectively. 100% of the animals showed S. lamacanis microcysts, and correlation coefficients between the NoMq and CK-MB 0.17, with AST 0.04 and with LDH 0.06. We conclude that the correlation found was very low or almost zero, so the enzymes tested, could not be used as predictors of muscle damage from infection of S. lamacanis microcysts in alpacas. Keywords: Cardiac biomarkers, CK-MB, AST, LDH, S. lamacanis microcysts, alpaca.

Identifica grupos filogenéticos de Escherichia coli aislados a partir de hisopados rectales de neonatos alpacas (Vicugna pacos) con diarrea. El muestreo se realiza con hisopos estériles y es transportado en medio Stuard, el aislamiento en agar Mc Conkey y la identificación por pruebas bioquímicas convencionales. E. coli es aislada de 119 muestras de un total 150 colectadas. La determinación de los grupos filogenéticos se realiza mediante la utilización del método de PCR triplex descrito por Clermont et al. (2000), para clasificar a E. coli en 4 grupos filogenéticos A, B1, B2 y D, basándose en 3 marcadores genéticos chuA, yjaA y TSPE4.C2. Determina que los grupos filogenéticos B1 y D tienen mayor frecuencia con 65.55% y 19.33 %, respectivamente; el grupo filogenético menos frecuente es el B2 con 1.68%. Cabe resaltar que esta es la primera investigación realizada en el Perú para agrupar cepas patógenas de E. coli basado en la agrupación filogenética.

Evalúa a la ciclina A1 (CCNA1) cuya expresión ha sido reportada casi exclusivamente en testículos de otros animales incluyendo el hombre y se le atribuye una función crítica en el control del ciclo celular durante la espermatogénesis. Se evalua la expresión del mRNA de CCNA1, mediante RTqPCR, en testículos de alpacas provenientes del Camal Municipal de Huancavelica en edad fértil (n = 35). Estos resultados son correlacionados con parámetros fisiológicos evaluados in vitro. Se encuentra que la expresión de mRNA de CCNA1 en testículos de alpacas con regiones conservadas a nivel nucleotídico. A diferencia de lo que sucede en humanos y otros animales, el mRNA de CCNA1 mostró una baja, pero significativa asociación, con la concentración espermática (p<0.05).

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Compara los genomas de las cepas que infectan bovinos y alpacas (36950 y UNMSM, respectivamente) para conocer la genómica estructural de la cepa aislada de alpacas y dilucidar qué proteínas podrían estar relacionadas en la patogénesis en ambos hospederos (bovinos y alpacas). Por ello se secuencia el genoma de P. multocida que infecta alpaca; se realiza el análisis genómico estructural y funcional y posteriormente el análisis comparativo con P. multocida 36950. / Tesis

Se aplica la técnica del ADN polimorfico Amplificado al Azar (RAPD) se aplica al estudio molecular de Lama pacos (alpaca), esta metodología se propone debido a que las técnicas de microsatélites y ADN mitocondrial, que actualmente se utilizan, no tienen un uso práctico cuando se trata de analizar gran cantidad de muestras. Para la estandarización del RAPD se utilizo ADN genómico a partir de sangre total y cebadores de 10 nucleotidos siguiendo los protocolos estandarizados modificando básicamente la concentración de MgCl2 a 2.5 mM permitiendo aumentar la intensidad de las bandas y una mejor visualización. Se prosiguió con la identificación de cebadores informativos, de 23 cebadores fueron seleccionados 7 (OPF-05, OPI-04, OPB-03, OPI-18, OPB-11, OPA-18 y OPI-14) por generar numerosas bandas por muestras analizadas. Estos cebadores permitieron obtener perfiles diferentes entre alpacas híbridas y puras; en la muestra poblacional estudiadas no se encontraron alpacas que tuvieran un perfil de bandas similares a los presentados por los animales puros, esto explicaría el grado de hibridación que existe debido a un inadecuado cuidado en el cruce, esto trae como consecuencia, por ejemplo, una baja calidad en la producción de fibra por las alpacas y llamas híbridas disminuyendo el ingreso económico para las familias campesinas. En 8 alpacas los cebadores OPB-03 y OPA-18 mostraron bandas polimorficas de 650 pb y 1000 pb respectivamente, este polimorfismo nos podría indicar alguna mutación o variabilidad intraespecífica, ya que estos animales no presentan diferencias fenotípicas evidentes. / -- The Random Amplified Polymorphic DNA (RAPD) is applied on the molecular study of Lama pacos (Alpaca), this methodology is proposed because the microsatellites and DNA mitochondrial techniques, which are used commonly, don't have a practical utility when is necessary to analyze great quantity of samples. Genomic DNA obtained from total blood and primers of 10 nucleotides were used to standardize the RAPD technique following the standardized protocols, and concentration of MgCl2 was modified at 2.5 mM which allowed an increase at the intensity and a better visualization of the bands. After the standardization, the identification of informative primers was realized, beginning with 23 primers, selecting only 7 (OPF 05, OPI 04, OPB 03, OPI 18, OPB 11, OPA 18 and OPI 14), because the presence of several bands for the analyzed samples. These primers let obtain different profiles between hybrid and pure alapacas; in the sample were not found alpacas with a similar bands profiles to those presented by the pure animals, this would explain the hybridization grade that exists due to an inadequate care in the crossing, this results in, for example a low quality in the fiber production from the hybrid alpacas and llamas, diminishing the economic entrance for the rural families. In 8 alpacas the primers OPB-03 and OPA-18 showed polymorphic bands of 650 pb and 1000 pb respectively, this polymorphism could indicate some mutation or intraespecific variability, since these animals don't present evident phenotypic differences. / Tesis