Orientador: Walter August Hadler / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-16T11:44:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vieira_RonanJose_M.pdf: 532499 bytes, checksum: d48e29a16f681c8aae6fc05c8fa32653 (MD5) Previous issue date: 1976 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed. / Mestrado / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Walter August Hadler / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T02:03:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tavares_DeboradeQueiroz_D.pdf: 4254655 bytes, checksum: 5383b0c8e0d44d675d7f4d0f79e53caa (MD5) Previous issue date: 1976 / Resumo: Não informado / Abstract: Not informed / Doutorado / Doutor em Ciências

Orientador : Antonio Sergio Ramalho / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-18T09:48:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gomes_RaquelRibeiro_D.pdf: 2248341 bytes, checksum: f6c2225e5acdb25b5e2949f22a3cd9ce (MD5) Previous issue date: 1993 / Doutorado / Genetica e Biologia Molecular / Doutor em Genetica e Microorganismos

O hemangiossarcoma é uma neoplasia maligna de origem endotelial vascular de ocorrência comum em cães. Nessa espécie, o órgão primário mais acometido é o baço. O hemangiossarcoma de partes moles em cães é caracterizado por ter um comportamento biológico muito agressivo e metástases, principalmente para o pulmão e fígado, são frequentes e ocorrem de maneira rápida no início do curso da doença. O óbito ocorre na maioria dos casos devido a hemorragia interna aguda secundária à ruptura do tumor e/ou devido ao processo metastástico. A cirurgia continua a ser o principal método de tratamento para quase todos os cães com hemangiossarcoma, mas a quimioterapia adjuvante é indicada em razão do alto índice metastático e do prognóstico ruim associado com o procedimento cirúrgico sozinho. Um estudo retrospectivo foi realizado para determinar o tempo de sobrevida e potenciais fatores de risco em cães diagnosticados com hemangiossarcoma visceral. Prontuários de 42 cães foram revisados. Dados como idade e peso no momento do diagnóstico, raça, sexo, localização do tumor, estágio clínico da doença, tipo de tratamento, e tempo mediano de sobrevida foram analisados. Vinte e três cães foram tratados apenas com cirurgia, enquanto que 19 cães foram tratados com cirurgia e quimioterapia adjuvante. Houve diferença estatística na sobrevida dos cães tratados com cirurgia e Doxorrubicina (274 dias) em comparação com cães tratados apenas com cirurgia (66 dias). Cães com hemangiossarcoma esplênico tiveram um tempo mediano de sobrevida mais longo do que os cães com hemangiossarcoma localizados em outros sítios primários e com metástase (274 versus 117 versus 38 dias, respectivamente, p = 0,013). O tempo mediano global de sobrevida para esses 42 cães foi de 237 dias, e a taxa de sobrevida de um ano foi estimada em 26,32%. Conclui-se que a localização primária do hemangiossarcoma teve associação com o prognóstico e que o uso da Doxorrubicina após o tratamento cirúrgico aumentou a sobrevida dos cães diagnosticados com essa doença. Neste estudo, o estadiamento clínico dos cães não influenciou o prognóstico / Hemangiosarcoma is a very common canine neoplasm of vascular endothelial origin. In the dog, the most frequent primary site for hemangiosarcoma is the spleen. Typically, canine hemangiosarcoma has a very aggressive biologic behavior with metastases, especially to lung and liver, occurring early in the course of the disease. In the majority of cases, death is related to acute hemoabdomen secondary to tumor rupture and/or metastases. Surgery remains the main method of treatment for most dogs with this type o cancer, but adjuvant chemotherapy is highly recommended due to the high risk of metastasis and the poor outcome associated with surgery alone. A retrospective study was performed to determine survival times and potential risk factors in dogs diagnosed with visceral hemangiosarcoma. Medical records of 42 dogs were reviewed. Age and baseline weight at the time of diagnosis, breed, sex, tumor location, clinical stage of the disease, treatment type and median survival time were evaluated. Twenty-three dogs were treated with surgery alone, while 19 dogs were treated with surgery and adjuvant chemotherapy. There was significant difference in survival between dogs treated with surgery alone (66 days) and with surgery followed by Doxorubicin (274 days). Dogs with splenic hemangiosarcoma had a longer median survival time than dogs with hemangiosarcoma of other sites, and with metastasis (274 versus 117 versus 38 days, respectively, p = 0,013). The overall median survival time for these 42 dogs was 237 days, and the one-year survival rate was estimated to be 26.32%. In conclusion, primary tumor location was associated with prognosis and the addition of doxorubicin after surgery did improve survival. In this study, clinical stage had no association with prognosis

Foram utilizadas vinte tartarugas da espécie Trachemys scripta elegans, sendo duas fêmeas jovens, quatro fêmeas adultas, oito machos jovens e seis machos adultos. Inicialmente, retiramos o plastrão, isolamos o coração e, já na aorta descendente, introduzimos uma cânula antes da bifurcação da aorta para injeção de solução de látex corado com pigmento vermelho para identificarmos as artérias com maior precisão. Após a injeção, os animais foram colocados em solução aquosa de formaldeído 20% por período não inferior a 72 horas e, após esse período, dissecamos as artérias responsáveis pela irrigação do baço. Observamos em 30% dos casos, o baço posicionado caudalmente ao cólon transverso e, em 70%, cranialmente ao mesmo, mas sempre apoiado neste segmento intestinal. Com relação à irrigação do baço, observamos que em 95% dos casos, o maior aporte sangüíneo era proveniente da artéria mesentérica cranial, onde apenas 30% dos animais apresentavam irrigação somente pela artéria lienal; já em 40% apresentavam irrigação pela artéria lienal e pequenos ramos da artéria cólica esquerda. Em 5% dos casos era irrigado pela artéria lienal e por um único ramo emitido por uma das artérias jejunais, 5% eram irrigados pela artéria lienal e por um ramo da artéria pancreaticaduodenal cranial e por uma artéria que tinha origem no tronco comum das artérias jejunais; 15% dos animais tinham seu baço irrigado pela artéria lienal e por ramos da artéria pancreaticaduodenal cranial. Em 5% dos animais observamos o baço sendo irrigado apenas por ramificações da artéria cólica esquerda. / This study was conduct using 20 turtles specie Trachemys scripta elegans, which 2 young females, 4 adults females, 8 young males and 6 adults males. Initially, it was took the hoof belly and, isolating the heart to identify more precisely the arteries was injected latex solution with red pigment through aorta descendens with one thin tube before aorta\'s bifurcation. After the latex injection, all the animals were submerged in 20% formaldeid water solution by a period of more than 72 hours. After that period, the arteries responsible by spleen irrigation were dissected. It was found in 30% of the cases the spleen was positioned behind colon transversum; and in 70% in front of colon transversum. Regarding the spleen irrigation, it was observed in 100% of the cases that arteria lienalis had its origin in arteria mesenterica cranialis. Which 30% had irrigation only by arteria lienalis. In 40% the irrigation was done by arteria lienalis and small branches of arteria colica sinistra. In 5% of the cases it was irrigated by arteria lienalis and by na unique branch sent by one of arteriae jejunales. In 5% of the cases the irrigation through arteria lienalis and by one branch of arteria pancreaticaduodenalis cranialis, and also by one artery with origin in the common trunk from arteriae jejunales. In 15% from the animals, irrigation was done by arteria lienalis and by branches from arteria pancreaticaduodenalis cranialis. In 5% of the cases the spleen was irrigated just by ramifications of arteria colica sinistra.

Orientador: Edson Luis Maistro / Resumo: Embora a medicina moderna esteja bem desenvolvida, de acordo com a Organização Mundial da Saúde, cerca de 75 à 95% da população utiliza a medicina popular para alívio de alguma sintomatologia desagradável. A grande preocupação é que mesmo as plantas medicinais sendo muito utilizadas, não se tem um conhecimento completo sobre sua ação no organismo. A planta Crataegus oxyacantha, também conhecida como espinheiro branco ou Hawthorn, é originária da Europa, América do Norte e Ásia, foi levada para outros continentes e vem sendo muito utilizada devido a seus potenciais efeitos farmacológicos, como agente cardiotônico, antioxidante, hipolipidêmico, anti-inflamatório, sedativo, entre outros. Considerando a importância da planta C. oxyacantha como medicamento alternativo natural e a inexistência de estudos envolvendo a toxicidade celular da mesma; o presente estudo teve como objetivo analisar os efeitos morfo-histológicos do extrato de frutos de C. oxyacantha em três grupos de tratamento I (50mg/Kg), II (100 mg/Kg), e III (200 mg/Kg) em células do fígado e baço de camundongos, a fim de avaliar os efeitos citotóxicos do extrato. O fígado dos indivíduos do grupo I não apresentou dano. Os indivíduos do grupo II apresentaram fígado em estágios iniciais de desorganização tissular e citoplasática. Já aqueles do grupo III sofreram maiores alterações histológicas como extensa desorganização citoplasmática, surgimento de vacúolos e capilares sinusóides aumentados e grande quantidade de célula... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Although modern medicine is well developed, according to the World Health Organization, about 75 to 95% of the population uses tradicional medicine to relieve some unpleasant symptoms. The major concern is that even medicinal plants being heavily used, there is no complete knowledge about their action in the body. The plant Crataegus oxyacantha, also known as white hawthorn or Hawthorn, is native to Europe, North America and Asia, was taken to other continents and has been widely used due to its potential pharmacological effects, such as cardiotonic, antioxidant, hypolipidemic, anti-inflammatory, sedative, among others. Considering the importance of the C. oxyacantha plant as a natural alternative medicine and the lack of studies involving its cellular toxicity; the objective of this study was to analyze the morpho-histological effects of C. oxyacantha fruit extract in three treatment groups I (50 mg / kg), II (100 mg / kg) and III (200 mg / kg) in liver and spleen cells of mice, in order to evaluate the cytotoxic effects of the extract. The liver of the individuals in group I showed no damage. Individuals in group II presented liver in the early stages of tissue and cytoplasmic disorganization. Already those of group III suffered major histological alterations such as extensive cytoplasmic disorganization, emergence of vacuoles and increased sinusoidal capillaries and large amount of Kupffer cells. On the other hand, the spleen was not histologically modified after the treat... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Nos últimos anos, a utilização da laparoscopia em Medicina Veterinária vem expandindo, e consequentemente a necessidade de pesquisas que determinem as vantagens, desvantagens e possíveis complicações de cada procedimento. O presente estudo tem como objetivo descrever uma técnica de esplenectomia laparoscópica, assim como as alterações decorrentes deste acesso, e compará-la ao procedimento convencional em cães. Foram utilizadas 15 cadelas hígidas, sem raça definida, com peso médio de 17,4 ±2,5kg. Os animais foram distribuídos em três grupos: grupo I - acesso convencional (por laparotomia) utilizando ligadura com ácido poliglicólico no selamento vascular do hilo esplênico, grupo II - acesso convencional (por laparotomia) com eletrocoagulador bipolar do hilo esplênico, e grupo III - acesso laparoscópico com eletrocoagulador bipolar para selamento vascular dos ramos esplênicos. Estes grupos foram avaliados em relação ao tempo cirúrgico, à perda de sangue, ao tamanho das incisões e às complicações durante e após a cirurgia. Também foram comparadas as avaliações da escala de dor e as alterações no leucograma e nas concentrações séricas da alanina aminotransferase (ALT), da fosfatase alcalina (FA), da creatina quinase (CK), da proteína C-reativa (PCR), da glicose e do cortisol no pós-operatório. Os acessos convencionais não diferiram entre si nos parâmetros avaliados. O acesso laparoscópico apresentou diferenças significativas (p<0,05) quando comparado ao convencional: maior tempo cirúrgico, menor acesso abdominal, diminuição na perda de sangue, menores concentrações de PCR, maiores níveis de CK e FA, além de pontução menor na escala de dor. A cirurgia laparoscópica apresentou menor número de complicações das feridas cirúrgicas. A ALT, cortisol, glicemia, leucograma, temperatura retal, freqüência cardíaca e freqüência respiratória pós-operatórias não diferiram significativamente entre os acessos convencional e laparoscópico. Conclui-se que a cirurgia laparoscópica é viável para esplenectomia em cães, apresentando vantagem em relação à perda de sangue, ao estresse cirúrgico e às feridas cirúrgicas, embora apresente maior tempo cirúrgico e cause aumento transitório de enzimas hepáticas e muscular. / In the last years, the use of laparoscopy in Veterinary Medicine have been expanded, and consequently the need of studies that establish advantage, disadvantage and possible complications of each procedure. The purpose of the current study is to describe a laparoscopic splenectomy technique, as well as their alterations due to this access, and to compare this to the open procedure in dogs. A total of 15 healthy female mongrel dogs were used, with mean weight 17,4 ±2,5kg. The animals were distributed in three groups: group I - conventional access (for laparotomy) using double ligation of the vessels with poliglicolic acid in the vascular sealing of the splenic hilus, group II - conventional access (for laparotomy) with bipolar electrocoagulation of the splenic hilus, and group III - laparoscopic access with bipolar electrocoagulation for vascular sealing of the splenic branches. These groups were evaluated in relation to: operative time, blood loss, size of the incisions, complications during and after the surgery. It also were compared the pain scores and the white blood cells (WBC) and the postoperative serum concentrations of the alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), creatine kinase (CK), C-reactive protein (CRP), glucose and cortisol. Conventional accesses did not differ to each other in the evaluate parameters. Laparoscopic access presented significant differences (p <0,05) when compared to the open surgery: longer operative time, smaller abdominal acess, decrease in the blood loss, lower concentrations of CRP, higher levels of CK and ALP, besides lower scores in the pain scale. Laparoscopic surgery presented smaller number of the surgical wounds complications. No significant differences were observed between groups in the postoperative temperature, heart rate, respiratory rate, WBC, ALT, cortisol and glucose concentrations. In conclusion, the laparoscopic technique is viable for splenectomy in dogs, presenting advantage in relation to the blood loss, surgical stress and surgical wounds, however they expend more operative time and cause transitory increase in the liver and muscular enzymes.

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2013-10-25T18:00:25Z No. of bitstreams: 1 Manuela da Silva Solcà. Uso do PCR...pdf: 11332317 bytes, checksum: 657938584a2c80bcdcc02a52c2d8fa4d (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-25T18:00:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Manuela da Silva Solcà. Uso do PCR...pdf: 11332317 bytes, checksum: 657938584a2c80bcdcc02a52c2d8fa4d (MD5) Previous issue date: 2012 / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina da Bahia. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / No Brasil, os cães são considerados como o principal reservatório doméstico para Leishmania infantum (sin. L. chagasi). Desta forma, o diagnóstico da leishmaniose visceral canina (LVC) deve ser rápido e preciso. Este trabalho visa comparar a performance da reação em cadeia da polimerase (PCR) em detectar o DNA do parasito em diferentes tecidos para diagnóstico da LVC. Com este intuito, na primeira parte do estudo, foi padronizado um protocolo de PCR convencional (cPCR), para detecção do DNA do minicírculo do cinetoplasto (kDNA) de Leishmania sp., em 45 fragmentos esplênicos caninos. As mesmas amostras foram avaliadas utilizando-se um protocolo de PCR quantitativa (qPCR) tendo como alvo o gene da subunidade do RNA ribossomal (SSU rRNA) de Leishmania sp. Também foi comparada a eficácia do diagnóstico para LVC pelas técnicas moleculares e convencionais como a cultura e o ELISA. A cPCR apresentou sensibilidade mais elevada para detecção de DNA de Leishmania sp. (88,9%), comparada à qPCR (83,3%). Possivelmente o melhor desempenho da cPCR foi devido ao maior números de cópias do kDNA no genoma da Leishmania sp. Diante dos promissores resultados apresentados pela cPCR tendo o kDNA como alvo, na segunda parte do estudo foi padronizado um novo protocolo de qPCR com este mesmo alvo, objetivando-se aumentar a sensibilidade da técnica. Foram selecionados aleatoriamente 61 cães errantes e classificados de acordo com o número de sinais clínicos associados à LVC apresentados. Todos os cães foram eutanasiados, e durante a necropsia, foram coletados fragmentos de linfonodo, aspirado esplênico, medula óssea e sangue. Também foram realizadas culturas esplênicas e ELISA. A qPCR foi empregada para a avalição da taxa de detecção do DNA do parasito e carga parasitária nos diferentes tecidos. As diferenças entre a carga parasitária de cada tecido foram avaliadas pelo teste de Friedman (p ≤ 0,05). Para inclusão dos tecidos nas análises dos resultados de qPCR, foi avaliada a integridade do material genético de cada amostra. Desta forma, 52 animais apresentaram resultados que atendiam aos critérios de seleção para baço, sangue e linfonodo, e destes, 24 animais também atendiam aos critérios para medula óssea. Utilizando-se a qPCR e considerando pelo menos um dos tecidos avaliados, foi detectado o DNA do parasito em todos os cães. A qPCR detectou DNA do parasito em 98,1% dos aspirados esplênicos, 80,8% das amostras sanguíneas, 53,8% dos linfonodos e 41,7% dos aspirados de medula óssea. A carga parasitária foi melhor detectada nos aspirados esplênicos, em relação ao linfonodo, nos animais oligossintomáticos e polissintomáticos (p ≤ 0,05). O aspirado esplênico foi o tecido com maior taxa de detecção do DNA de Leishmania sp. pela qPCR. No entanto, não foi achada diferença estatística entre a carga parasitária do aspirado esplênico e do sangue. Desta forma, a amostra sanguínea, por ser a segunda amostra de melhor taxa de detecção, e por necessitar uma coleta menos invasiva, foi considerada como uma amostra alternativa válida para a detecção do DNA de Leishmania sp. em cães sintomáticos, utilizando a qPCR. / Because infected dogs are widely considered to be the main domestic reservoir for Leishmania infantum (syn. L. chagasi) parasites in Brazil, the diagnosis of canine visceral leishmaniasis (CVL) must be made both accurately and promptly. The aim of the present study was to compare the performance of the Polymerase Chain Reaction (PCR) to detect parasite DNA in different clinical sample for CVL diagnosis. For this purpose, in the first stage of the study, a conventional PCR (cPCR) protocol was standardize to detect the presence of Leishmania sp. kinetoplast minicircle DNA (kDNA) in 45 canine spleen fragments. The same samples were evaluated using a quantitative PCR (qPCR) technique targeting the Leishmania sp. sub-unit of the ribossomal RNA (SSU rRNA) gene. A comparison was made between the efficacies of these molecular diagnostic techniques and conventional parasitological and serological methods. The cPCR presented the highest sensitivity for Leishmania sp. DNA detection (88,9%), when compared to qPCR was (83.3%). Possibly the cPCR best performance was due to a higher copies number of the kDNA in the Leishmania sp. genome. Given the promising results presented by the cPCR targeting the kDNA, a new qPCR protocol with the same target was standardized in the second stage of the study, aiming increase the technique sensitivity. Sixty-one stray dogs were randomly selected and classified according to the number of clinical signs of CVL. All dogs were euthanized and lymph node fragments and splenic, bone marrow and blood aspirates were obtained during necropsies. ELISA and parasite culture of spleen aspirates were performed to confirm parasite infection. The qPCR was used to determine the parasite DNA detection rate and the parasite load in the clinical samples. Differences between parasite loads of each tissue were evaluated using Friedman test (p ≤ 0.05). In order to include the samples in the qPCR data analysis, the DNA integrity of each sample was analyzed. This way, 52 dogs fulfilled the selection criteria for DNA results for spleen, blood and lymph nodes, with 24 of these dogs also fulfilling the criteria for bone marrow results. Using qPCR, all the 52 dogs showed positivity, considering at least one of the tissues evaluated. Positivity in qPCR was detected in 98.1%8 of the splenic aspirates, 80.8% of blood samples, 53.8% of lymph node fragments and 41.7% of bone marrow samples. Using qPCR, parasite DNA was better detected in splenic aspirates in comparison with lymph node in both polysymptomatic and oligosymptomatic (p ≤ 0.05) dogs. Splenic aspirates have shown to be the tissue with highest Leishmania sp. DNA detection rate using qPCR, however no statistical difference was found between blood and splenic aspirate to detect. Thus, the blood sample, being the second sample with best DNA detection rate and requiring a less invasive collection, was considered a valid alternative sample for Leishmania sp. DNA detection in symptomatic dogs using the qPCR.

Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2013-10-10T16:05:16Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23599 bytes, checksum: 9e2b7f6edbd693264102b96ece20428a (MD5) DISSERTAÇÃO_DetecçãoLeishmaniaPCR.pdf: 1009268 bytes, checksum: f3643332a0889fcb5d973bed29de784f (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2013-10-21T14:45:17Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23599 bytes, checksum: 9e2b7f6edbd693264102b96ece20428a (MD5) DISSERTAÇÃO_DetecçãoLeishmaniaPCR.pdf: 1009268 bytes, checksum: f3643332a0889fcb5d973bed29de784f (MD5) / Made available in DSpace on 2013-10-21T14:46:00Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23599 bytes, checksum: 9e2b7f6edbd693264102b96ece20428a (MD5) DISSERTAÇÃO_DetecçãoLeishmaniaPCR.pdf: 1009268 bytes, checksum: f3643332a0889fcb5d973bed29de784f (MD5) Previous issue date: 2013 / A detecção do DNA de Leishmania spp, pela Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) e suas variações, surgem como alternativas para o diagnóstico da LVC, por serem métodos altamente sensíveis e específicos. O objetivo deste trabalho foi comparar a PCR e suas variações (Seminested PCR e PCR em tempo real) utilizando amostras de pele e de baço de 60 cães soropositivos (RIFI e ELISA). Os animais foram agrupados considerando a forma clínica, sendo classificados como assintomáticos (CA; n=20), oligossintomáticos (CO; n= 22) e sintomáticos (CS; n= 18). Como controle negativo, foram utilizados fragmentos de três cães não infectados provenientes do canil da UFOP. O diagnóstico parasitológico, utilizado como padrão ouro, foi realizado por meio de duas metodologias: cultivo de aspirado medular em meio de cultura NNN/LIT e pela visualização direta de formas amastigotas do parasito em lâminas com imprints de pele e de baço. As análises moleculares foram realizadas utilizando iniciadores direcionados para a região conservada do minicírculo do kDNA de Leishmania – L150/L152 e LINR4/LIN17/LIN19 para as técnicas de PCRc e snPCR, respectivamente. Na qPCR foram utilizados iniciadores que amplificam o gene da DNA polimerase (DNA pol α) de L. infantum. De acordo com os testes parasitológicos 61,7% das amostras foram positivas. Nos fragmentos de pele, a sensibilidade da PCRc foi de 89,2%, já para a snPCR e qPCR foi de 86,5% e 97,3% respectivamente. VPP para a PCRc foi de 36,0%, snPCR de 35,3% e da qPCR foi 38,1%. O VPN foi de 93,6%, 92,1% e 98,3% pelas técnicas de PCRc, snPCR e qPCR respectivamente. Em amostras de baço, a sensibilidade da PCRc foi 81,1%, snPCR de 94,6% e de 100,0% pela qPCR. O VPP para a PCRc foi 33,9%, snPCR 37,4% e qPCR 38,7%. O VPN da PCRc foi de 89,3%, snPCR 96,7% e qPCR 100,0%. A positividade nos testes moleculares aumentou de acordo com a gravidade dos sinais clínicos. Foi observado que a qPCR apresentou os melhores resultados na pele e no baço devido a maior sensibilidade, VPP e VPN, em comparação as outras técnicas moleculares. Sendo assim, concluímos que a melhor técnica e tecido para o diagnóstico molecular da LVC é a qPCR de pele, devido à elevada sensibilidade e fácil obtenção da amostra biológica. ____________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: The detection of Leishmania DNA based on polymerase chain reaction (PCR) and its variations represent alternatives for CVL diagnosis with highly sensitive and specific methods. The aim of this work was to compare the PCR and its variations (Seminested PCR and quantitative PCR) in samples of skin and spleen of 60 seropositive dogs (IFAT and ELISA). The animals were divided according to their clinical presentation and were classified as asymptomatic (CA, n = 20), oligosymptomatic (CO, n = 22) and symptomatic (CS, n = 18). As a negative control, we used fragments of three uninfected dogs from the kennel of UFOP. The parasitological diagnosis used as gold standard was performed by two methods: culture of bone marrow aspirate in culture medium NNN/LIT and direct visualization of amastigotes of the parasite on slides with imprints of skin and spleen. The primers L150/L152 and LINR4/LIN17/LIN19 were used to amplify the conserved region of the Leishmania kDNA minicircle in the cPCR and snPCR and qPCR were performed out using the DNA polymerase gene (DNA pol α) primers from L. infantum. According to the parasitological test 61.7% the samples were positive. In skin samples, the sensitivity of cPCR was 89.2%, snPCR was 86.5% and qPCR was 97.3%. PPV for cPCR was 36.0%, snPCR was 35.3% and qPCR was 38.1%. The NPV was 93.6%, 92.1% and 98.3% by the techniques of cPCR, snPCR and qPCR. In spleen samples, the sensitivity of cPCR was 81.1%, snPCR was 94.6% and qPCR was 100.0%. PPV for cPCR was 33.9%, snPCR was 37.4% and qPCR was 38.7%. NPV for cPCR was 89.3%, snPCR was 96.7% and qPCR was 100.0%. Positivity in molecular tests increased with the progression of clinical signs. It was observed that the qPCR showed the best results in skin and spleen due to higher sensitivity, PPV and NPV compared to other molecular techniques. Thus, we conclude that the best technique and tissue for molecular diagnosis of CVL is the qPCR skin due to the high sensitivity and easy obtaining the biological sample.

Nos últimos anos, a utilização da laparoscopia em Medicina Veterinária vem expandindo, e consequentemente a necessidade de pesquisas que determinem as vantagens, desvantagens e possíveis complicações de cada procedimento. O presente estudo tem como objetivo descrever uma técnica de esplenectomia laparoscópica, assim como as alterações decorrentes deste acesso, e compará-la ao procedimento convencional em cães. Foram utilizadas 15 cadelas hígidas, sem raça definida, com peso médio de 17,4 ±2,5kg. Os animais foram distribuídos em três grupos: grupo I - acesso convencional (por laparotomia) utilizando ligadura com ácido poliglicólico no selamento vascular do hilo esplênico, grupo II - acesso convencional (por laparotomia) com eletrocoagulador bipolar do hilo esplênico, e grupo III - acesso laparoscópico com eletrocoagulador bipolar para selamento vascular dos ramos esplênicos. Estes grupos foram avaliados em relação ao tempo cirúrgico, à perda de sangue, ao tamanho das incisões e às complicações durante e após a cirurgia. Também foram comparadas as avaliações da escala de dor e as alterações no leucograma e nas concentrações séricas da alanina aminotransferase (ALT), da fosfatase alcalina (FA), da creatina quinase (CK), da proteína C-reativa (PCR), da glicose e do cortisol no pós-operatório. Os acessos convencionais não diferiram entre si nos parâmetros avaliados. O acesso laparoscópico apresentou diferenças significativas (p<0,05) quando comparado ao convencional: maior tempo cirúrgico, menor acesso abdominal, diminuição na perda de sangue, menores concentrações de PCR, maiores níveis de CK e FA, além de pontução menor na escala de dor. A cirurgia laparoscópica apresentou menor número de complicações das feridas cirúrgicas. A ALT, cortisol, glicemia, leucograma, temperatura retal, freqüência cardíaca e freqüência respiratória pós-operatórias não diferiram significativamente entre os acessos convencional e laparoscópico. Conclui-se que a cirurgia laparoscópica é viável para esplenectomia em cães, apresentando vantagem em relação à perda de sangue, ao estresse cirúrgico e às feridas cirúrgicas, embora apresente maior tempo cirúrgico e cause aumento transitório de enzimas hepáticas e muscular. / In the last years, the use of laparoscopy in Veterinary Medicine have been expanded, and consequently the need of studies that establish advantage, disadvantage and possible complications of each procedure. The purpose of the current study is to describe a laparoscopic splenectomy technique, as well as their alterations due to this access, and to compare this to the open procedure in dogs. A total of 15 healthy female mongrel dogs were used, with mean weight 17,4 ±2,5kg. The animals were distributed in three groups: group I - conventional access (for laparotomy) using double ligation of the vessels with poliglicolic acid in the vascular sealing of the splenic hilus, group II - conventional access (for laparotomy) with bipolar electrocoagulation of the splenic hilus, and group III - laparoscopic access with bipolar electrocoagulation for vascular sealing of the splenic branches. These groups were evaluated in relation to: operative time, blood loss, size of the incisions, complications during and after the surgery. It also were compared the pain scores and the white blood cells (WBC) and the postoperative serum concentrations of the alanine aminotransferase (ALT), alkaline phosphatase (ALP), creatine kinase (CK), C-reactive protein (CRP), glucose and cortisol. Conventional accesses did not differ to each other in the evaluate parameters. Laparoscopic access presented significant differences (p <0,05) when compared to the open surgery: longer operative time, smaller abdominal acess, decrease in the blood loss, lower concentrations of CRP, higher levels of CK and ALP, besides lower scores in the pain scale. Laparoscopic surgery presented smaller number of the surgical wounds complications. No significant differences were observed between groups in the postoperative temperature, heart rate, respiratory rate, WBC, ALT, cortisol and glucose concentrations. In conclusion, the laparoscopic technique is viable for splenectomy in dogs, presenting advantage in relation to the blood loss, surgical stress and surgical wounds, however they expend more operative time and cause transitory increase in the liver and muscular enzymes.