A reconstrução anatômica de fraturas em ossos longos em equinos é um grande desafio para o Médico Veterinário. Na tentativa de melhorar os resultados da técnica, estabilizando e preenchendo áreas onde houve perda óssea, o uso de substitutos ósseos, entre eles os biomateriais, vêm apresentando bons resultados. Os polímeros podem ser uma opção viável, funcional e economicamente, de substituto ósseo para aplicação em ortopedia de equinos. O objetivo deste estudo foi avaliar o comportamento biológico do equino frente à implantação de polímero de poliuretana de mamona acrescido de carbonato de cálcio após implante em osso III metacarpiano. Seis equinos hígidos foram submetidos à ostectomias unicorticais de 13mm de diâmetro na região proximal da superfície dorsal do III metacarpiano. Em seguida, de forma randômica, foi implantado o polímero de mamona em um membro torácico. No membro contralateral, foi reproduzida a técnica, porém a falha foi mantida sem preenchimento, servindo como controle do remodelamento ósseo. Todos os animais foram submetidos à avaliação física, radiográfica, ultrassonográfica, termográfica e perfil bioquímico previamente a cirurgia para identificação dos parâmetros pré-cirúrgicos. No período pós-operatório, os animais foram avaliados através de exame físico diário durante os 120 dias de observação, exame radiográfico, exame ultrassonográfico, exame termográfico e monitoramento do perfil sérico da fosfatase alcalina, cálcio e fósforo nos momentos sete, 15, 30, 60, 90 e 120 dias de pós-operatório. Com 120 dias de pós-operatório, novamente sob anestesia geral, realizou-se biópsia óssea com trefina de 0,5cm de diâmetro na área de interface implante-osso (membro polímero) e osso-osso neoformado (membro controle). O material foi processado e desmineralizado para microscopia de luz sendo realizadas técnicas de coloração de Hematoxilina-Eosina e Tricrômico de Masson para análise descritiva e morfométrica. A avaliação física de cada animal demonstrou não haver desconforto relacionado ao procedimento e à presença do implante, baseando-se na análise de presença de claudicação e parâmetros físicos (frequência cardíaca, frequência respiratória e temperatura retal) ao longo dos 120 dias. A avaliação ultrassonográfica permitiu identificação da formação de tecido mineralizado e pico de neovascularização no 30º dia de pós-operatório. A partir da dosagem sérica de fosfatase alcalina foi possível identificar pico desta enzima também no trigésimo dia. A avaliação termográfica demonstrou não haver aumento de temperatura local, decorrente de resposta inflamatória, ao longo do tempo de observação, porém foi possível identificar resposta mais intensa no 7º dia no membro polímero, quando comparado ao membro controle. O estudo histológico demonstrou comportamento osteocondutor do polímero sem reação de cápsula fibrosa ou resposta inflamatória crônica. Esta pesquisa apresentou resultados que demonstram biocompatibilidade do polímero de poliuretana de mamona acrescido de carbonato de cálcio em tecido ósseo equino e conclui-se que este biomaterial apresenta potencial para uso como substituto ósseo em equinos. / Anatomical reconstruction of long bone fractures remains a challenge to the equine practitioner to date. Bone surrogate biomaterials have been developed to improve surgical outcomes in cases involving bone tissue loss, with promising results. Biopolymers may be a feasible, functional and economically viable alternative for bone substitution in horses. This study evaluated the biological behaviour of castor oil-calcium carbonate polymer following implantation in the equine third metacarpal bone. Six healthy horses were submitted to bilateral dorsal unicortical osteotomy (13 mm in diameter) on the proximal aspect of the third metacarpal bone. One front limb was randomly selected for castor oil polymer implantation while the contralateral limb was left untreated to serve as control for bone remodeling. Preoperative evaluation consisted of physical, radiographic, ultrasonographic and thermographic assessment, and serum biochemistry profile determination. Horses were submitted to daily physical examination during the 120-day follow-up period. Radiographic, ultrasonographic and thermographic reassessments were performed on postoperative days seven, 15, 30, 60, 90 and 120, along with determination of alkaline phosphatase, calcium and phosphorus serum levels. On postoperative day 120, horses were reoperated under general anesthesia and a 0.5 mm biopsy fragment collected from the bone-implant or bone-new bone interface. Biopsy specimens were processed, demineralized, stained with hematoxylin-eosin or Massons trichrome and submitted to descriptive and morphometric analysis under light microscopy. Horses showed no signs of pain (i.e. lameness or changes in rectal temperature, heart and respiratory rates) related to the surgical procedure or the presence of the implant during the 120-day follow-up period. Ultrasonographic reassessment revealed mineralized tissue formation and peak neovascularization on postoperative day 30. Peak alkaline phosphatase levels were also observed on the same day. Local temperature differed significantly between treated and control limbs on postoperative day 7, but not thereafter. Absence of encapsulation or signs of chronic inflammatory response on histology suggests osteoconductive behaviour of the Ricinus communis polymer. Based on the results of this study, castor oil-calcium carbonate polymer is biocompatible with the equine bone tissue and represents a potential surrogate biomaterial for bone substitution in horses.

A utilização de biomateriais para os mais diversos destinos no corpo humano, tem tido uma ascensão considerável nessas últimas décadas, devido a inúmeras necessidades, como por exemplo, assistência às pessoas com patologias ósseas, acidentes automotivos, estética bucal entre outras. Ainda assim, existe a necessidade de se desenvolver novos materiais de aplicação biomédica, melhorando suas propriedades e permitindo o aperfeiçoamento de dispositivos. A biocompatibilidade é parte integrante dos processos de validação destes materiais, onde testes in vitro e in vivo são realizados. Esse trabalho avaliou a biocompatibilidade de ligas de titânio através dos testes de: hemocompatibilidade, citotoxicidade, toxicidade sistêmica e lavado peritoneal feito em ratos, que entraram em contato com extratos originados do eletrólito: saliva artificial mais associações com fluoreto de sódio, após contato com as ligas metálicas de Ti-6Al- 4V (parâmetro para os testes) e Ti- 10Mo (liga em teste). A liga Ti-10Mo e seus extratos demonstraram um comportamento de biocompatibilidade, sugerindo uma possível aplicação para a odontologia. / Biomaterial applications have increased in the last decade, since bone diseases, injury from accidents have reached an increasing number of people. In dentistic, biomaterials have also large use as to estetic application as well to recuperate the function. New biomaterials have been studied in order to get better mechanical properties allowing better performance of the biomedical device. Biocompatibility studies are part of the validation processes and in vivo testes and in vitro testes are carried out. The present work evaluated biocompatibility of Ti alloys through: haemocompatibility, cytotoxicity, systemic toxicity and washed peritoneal tests. Those tests were performed in rats which were in contact with extracts made from artificial salive plus NaF (low concentrations) with Ti-6Al-4V alloy (control test) and Ti-10Mo (under test). Alloy under test and its extracts shown biocompatible behavior suggesting for odontological applications.

O colágeno é a proteína mais abundante em mamíferos, sendo o tipo I a forma prevalente. Essa proteína possui propriedades interessantes, como baixa imunogenicidade e toxicidade, biocompatibilidade, além de promover o reconhecimento, adesão e diferenciação celular através de sequências RGD (arginina-glicina-aspartato). Por isso, o colágeno é utilizado na composição de diversos biomateriais. Contudo, após a implantação in vivo, a degradação do material por colagenases endógenas pode ocorrer rapidamente, limitando sua utilização. A funcionalização com plasma frio pode superar essa limitação, sendo capaz de adicionar uniformemente grupos funcionais na superfície de materiais e ser modulada para preservar ou alterar de maneira seletiva as propriedades do material. Este estudo buscou funcionalizar o pericárdio bovino (PB) – composto principalmente por colágeno tipo I – utilizando plasma frio a fim de obter um novo biomaterial. Para isso, amostras de PB foram tratadas com plasma de argônio e CO2 a 2,45GHz e 500 W em um intervalo tempo dede 0s (PBCT) a 240s (PB240) com incrementos de 30s. As amostras foram analisadas por espectroscopia de infravermelho e a validação da análise foi realizada através de modelagem molecular computacional. O material foi caracterizado por microscopia óptica e eletrônica de varredura, ângulo de contato e capacidade higroscópica. A biocompatibilidade do PB tratado foi verificada pela implantação do material na camada subcutânea de camundongos Balb/c durante 3, 7 15 e 30 dias. Os resultados mostraram que as modificações causadas pelo tratamento com plasma foram tempo dependente. Após 120s de tratamento (PB120) houve a adição de grupos éster na forma de ligações crosslink sem alterações à estrutura proteica. Entretanto, após 150s foi observado o início de um processo de etching e degradação do colágeno, acentuado aos 240s. Além disso, o tratamento provocou um aumento na hidrofobicidade da superfície do material. A implantação subcutânea mostrou que não houve perda na biocompatibilidade do nos grupos tratados quando comparado ao controle. Dessa forma, verificou-se que o tratamento com plasma pode ser modulado para modificar o colágeno sem que haja perdas em suas propriedades de interesse. Novos estudos são necessários para a adequação da funcionalização com plasma, direcionando-a para modificações desejadas e aplicações específicas do biomaterial. / Collagen is the most commonly found protein in mammals and Type I is its most prevalent type. This protein shows interesting properties as low immunogenicity and toxicity, biocompatibility, besides the ability to promote cell recognition, differentiation and induce cell attachment through RGD (arginine-glycine-aspartate) sequences. Due to these characteristics, collagen is used in many biomaterials. However, after in vivo implantation, the degradation of the material by endogenous collagenases can occur too soon, impairing its application. Cold plasma functionalization can overcome this limitation; it is able to add evenly new functional groups on materials’ surfaces and can be tailored to preserve or alter selectively the bulk properties of the material. Therefore, this study aimed the functionalization of bovine pericardium (PB) – material composed of collagen type I – using cold plasma in order to obtain a new biomaterial. PB was treated with argon (Ar) and carbon dioxide (CO2), microwave power source 2.45Hz, 500 W. The treatment was carried out from 0 (PBCT) up to 240s (PB240), with a 30s increment. The samples were analysed by FTIR-ATR and the analysis validation was done through computing molecular modelling. The material was characterized by optical microscopy, SEM, contact angle and swelling. PB biocompatibility was assessed through subcutaneous implantation of the material in mice Balb/c for 3, 7, 15 and 30 days. The results indicated the changes caused by plasma treatment were time-dependent. By 120s of treatment (PB120) ester groups were added in the material, forming crosslink bonds without modification within the protein structure while 150s of treatment caused the beginning of an etching process and collagen degradation, which was more distinct at 240s; there was also an increase in the hydrophobicity on the surface of the treated material. The subcutaneous implantation test showed there wasn’t biocompatibility loss of treated PB when compared to control. Therefore, it was verified that plasma treatment can be tailored to modify collagen without impairing its properties of interest. New studies are necessary to suit plasma functionalization according the desired modifications and specific applications of the biomaterial. / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior

A busca contínua por tecnologias de esterilização a baixa temperatura deve-se à necessidade de adequação dos agentes esterilizantes às características físicoquímicas dos produtos, à conveniência de maior rapidez no processamento, além dos apelos ambientais, em comparação, por exemplo, com o método de esterilização por óxido de etileno. Desta forma surgiu interesse pelo ozônio (O3), o qual pode ser considerado o mais potente germicida natural que existe, sendo capaz de eliminar microrganimos (na forma vegetativa e esporulada) com alta eficiência e rapidez, graças a sua atividade altamente oxidante. O presente trabalho teve por objetivo proceder estudos para a determinação de parâmetros para o processo de esterilização empregando ozônio, além de avaliar a eficácia do agente esterilizante em questão. O processo de esterilização foi desafiado com esporos de Geobacillus stearothermophilus ATCC 7953 o qual se caracteriza frente as mesmas com elevada resistência. A eficácia esterilizante do ozônio foi avaliada através de carreadores inoculados com 106 do esporo, introduzidos em seringas de 3 mL e tubos com diferentes comprimentos e diâmetros, simulando produtos médico hospitalares. Tais dispositivos foram submetidos a meio ciclo e ciclo completo do processo de esterilização por ozônio. A validação do processo foi comprovada através dos resultados satisfatórios para meio ciclo, obtidos com os testes efetuados. Desta forma, foi possível constatar a eficácia do processo de esterilização por ozônio. Adicionalmente, foram objeto de investigação materiais termossensíveis distintos obtidos de produtos médico-hospitalares, a fim de estudar a influência do ozônio sobre as características intrínsecas desses materiais. As amostras foram submetidas ao ciclo completo de esterilização e analisadas pelo teste de citotoxicidade in vitro e avaliação da superfície dos materiais por espectrofotometria com transformadas de Fourier com acessório de refletância atenuada (ATR-FTIR) para esclarecer eventuais efeitos do processo sobre a biocompatibilidade das mesmas. Embora os materiais estudados não demonstraram efeito citotóxico após serem submetidos à esterilização por ozônio, a superfície do derivado de polietileno (PE) demonstrou uma banda de oxidação em consequência da ação do agente esterilizante. / Ozone (O3) can be considered the most potent natural germicide against microorganisms (in vegetative and spore forms) with high efficiency and speed, because of its highly oxidizing activity. Despite this, there are a few studies describing the application of ozone as a sterilizing agent of medical devices. The aim of this paper was to describe the development and validation of a sterilization cycle applied to medical devices. The sterilization process was challenged with Geobacillus stearothermophilus ATCC 7953 spores, which have shown great resistance. The sterilizing effect of ozone was measured using carriers inoculated with 106 spores, introduced into a 3 mL syringe and lumens of tubes of different sizes and diameters simulating hospital medical products, which have undergone a half-cycle or complete cycle. The validation process was confirmed by the satisfactory results for the half cycle, which indicate an appropriate sterility assurance level. Thus, one can consider the ozone sterilization process effective for medical devices. On the other hand, there was a need to evaluate the safety of ozone sterilization in terms of medical device materials in order to clarify the influence of ozone on the intrinsic characteristics of these materials. The samples were submitted to the complete cycle of sterilization and analysis by the \"in vitro\" cytotoxicity test and evaluation of the surface of the materials using ATR-FTIR spectrometry to clarify eventual of the process on a biocompatibility. Although the materials studied did not demonstrate a cytotoxic effect after being subjected to ozone sterilization, the surface of the polyethylene (PE) derivative demonstrated an oxidation band as a consequence of the action of the sterilizing agent.

Os biomateriais podem ser definidos como substâncias de origem natural ou sintética que são tolerados de forma transitória ou permanente pelos diversos tecidos que constituem os órgãos dos seres vivos. Dentre esses biomateriais podemos citar o Agregado de Trióxido Mineral (ATM), que foi desenvolvido na Universidade de Loma Linda na década de 90. Desde então, não cessaram trabalhos de pesquisa envolvendo esse material e o Cimento Portland (CP); que embora não seja um material de uso odontológico direto, pode-se afirmar que possui basicamente os mesmos componentes químicos do ATM. O objetivo da presente pesquisa foi avaliar a biocompatibilidade do cimento Portland comum (CP-I) e do cimento Portland branco (CPB) não estrutural, incluídos na calvária de ratos. Foram selecionados vinte ratos, dois foram previamente utilizados como grupo piloto; os dezoito restantes foram distribuídos em três grupos de seis ratos que avaliados nos tempos experimentais de 30, 60, 90 dias foram mortos para análise histopatológica. Cada animal recebeu um implante, sendo três de Cimento Portland Comum (CP-I) e três de Cimento Portland Branco (CPB). Os resultados mostraram que não houve conseqüências de uma proliferação microbiológica em nenhum dos cimentos e tempos pesquisados. Observou-se tecido conjuntivo denso, celular e ricamente vascularizado. Também foi visualizado uma matriz óssea recém formada, adjacente aos osteoblastos ativos e que não estava ainda calcificada; apresentava-se menos mineralizada e com ausência de lamelas. Durantes os tempos histológicos de 30, 60 e 90 dias, o infiltrado inflamatório disperso no tecido apresentou-se: intenso, moderado e discreto. Sugerindo a mudança do processo inflamatório de agudo a crônico respectivamente / The biomaterials can be defined as substances of natural or synthetic origin that are tolerated on a temporary or permanent by the various tissues that make up the organs of living beings. Among these biomaterials can quote the mineral trioxide aggregate (MTA), which was developed at the University of Loma Linda, in the 90s. Since then, it stopped work on research involving this material and Portland cement (PC), which although not a dental material to use direct, one can say that basically has the same chemical components of the ATM. The purpose of this study was to evaluate the biocompatibility of common Portland cement (PC-I) and the white Portland cement (CPB) no structural, included in the skull of rats. Twenty rats were selected, two were previously used as a pilot group and the eighteen others were divided into three groups of six rats that were killed and evaluated in experimental stroke, 30, 60, and 90 days. Each animal received an implant, three of Common Portland Cement (PC-I) and three of White Portland Cement (CPB). The results show that there were no consequences of a microbial proliferation in any of cement and times searched. There was also the formation of bone tissue with characteristics of immaturity, showing gaps in some areas without osteocytes; presence of moderate and cell tissue, richly vascularized, showing characteristics of biocompatibility, and the potential for bone and cell differentiation.

Made available in DSpace on 2017-07-24T19:22:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fabio Goiris.pdf: 7029571 bytes, checksum: 63e1790a8a36324e4ac324716fcd8ddd (MD5) Previous issue date: 2017-02-15 / The objective of this study was to evaluate in vivo two new biomaterials for bone substitution – pure hydroxyapatite and collagen hydroxyapatite – aiming at determining their biocompatibility in soft tissues and their ability to enable bone neoformation in critical size defects in rats’ calvaria. Both types of synthetic hydroxyapatite were developed by the Chemistry department of the State University of Ponta Grossa – Pure hydroxyapatite (HaP) and Hydroxyapatite with collagen (HCol). The third synthetic hydroxyapatite used as a comparing element was the commercial hydroxyapatite Alobone® (HaAl), which is available in the Brazilian market. Experiment 1 was carried out with the animals’ dorsal connective tissue and used 45 Wistar female rats, divided randomly into three groups of 15 animals each (HaP, HaCol and HaAl) which were euthanized after 7, 15 and 30 days of operation.The histomorphometric exam after 30 days revealed the absence of inflammatory cell characteristic infiltrates and the presence of non-inflammatory collagen fibers. These results show the biocompatibility of the material implanted. Experiment 2 used 60 Wistar rats divided randomly into 4 groups (Group 1, HaP; Group 2, HaCol; Group 3, HaAl and Group 4, Control). Critical size defects of 8mm were performed in the calvaria and the three biomaterials were implanted. All groups also received collagen membrane. On day 30, inflammatory response on the defect was practically absent in all groups, mainly when compared to the period of 7 days. Some areas of bone neoformation were seen. There was predominance of osteoblasts, osteocytes and macrophages in lower amount. Regarding the radiographic aspect, after 30 days our study confirmed a marked biodegradation of the hydroxyapatite and signs of bone neoformation. The histomorphometric results of the synthetic hydroxyapatite implant demonstrated the probable occurrence of intramembranous ossification from the granulation tissue with the presence of bone-resident macrophages. It was possible to conclude that the results of our study in vivo can be used as a preliminary source of information about biocompatibility, biodegradability and bone neoformation from the implant of new biomaterials in vivo. / O objetivo desta pesquisa foi avaliar in vivo dois novos biomateriais de substituição óssea - hidroxiapatita pura e hidroxiapatita com colágeno - visando determinar a sua biocompatibilidade em tecidos moles e a sua capacidade de possibilitar a neoformação óssea em defeitos críticos em calvária de ratas. As duas formas de hidroxiapatitas sintéticas – Hidroxiapatita pura (HaP) e Hidroxiapatita com colágeno (HACol) - foram desenvolvidas pelo departamento de Química da Universidade Estadual de Ponta Grossa. A terceira hidroxiapatita sintética utilizada como elemento de comparação foi a hidroxiapatita comercial Alobone® (HaAl), disponível no mercado brasileiro. O experimento 1 realizado em conjuntivo de dorso de animais, utilizou 45 ratas fêmeas da espécie Wistar, divididos aleatoriamente em três grupos de 15 (HaP, HaCol e HaAl) e que sofreram eutanásia aos 7, 15 e 30 dias do pósoperatório. O exame histomorfométrico aos 30 dias verificou-se ausência do infiltrado característico de células inflamatórias e presença de fibras colágenas não inflamatórias. Estes resultados significam biocompatibilidade dos materiais implantados. O Experimento 2 utilizou 60 ratas Wistar divididos aleatoriamente em 4 grupos (Grupo 1, HaP; Grupo 2 HaCol, Grupo 3 HaAl) e Grupo 4, Controle). Realizaram-se defeitos críticos de 8 mm em calvária e a seguir colocaram-se os três tipos de biomateriais. Todos os grupos receberam também membrana de colágeno. Aos 30 dias, observou-se praticamente uma ausência da resposta inflamatória no local do defeito em todos os grupos, especialmente quando comparado ao período de 7 dias. Verificaram-se áreas de neoformação óssea. Houve predominância de osteoblastos, osteócitos e macrófagos em menor quantidade. No aspecto radiográfico, em 30 dias, a nossa pesquisa confirmou uma marcada biodegradação das hidroxiapatitas e sinais de neoformação óssea. Os resultados histomorfométricos da implantação de hidroxiapatitas sintéticas demonstraram a ocorrência de uma ossificação intramembranosa a partir do tecido de granulação com a participação de macrófagos ósseo-residentes. É possível concluir que os resultados dessa pesquisa podem ser utilizados como recurso preliminar de informações sobre biocompatibilidade, biodegradabilidade e neoformação óssea a partir da implantação de novos biomateriais in vivo.

Made available in DSpace on 2017-07-24T19:22:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 CAMILAMAIA.pdf: 8374902 bytes, checksum: 212930917cb97231aed01c002e3154e7 (MD5) Previous issue date: 2008-02-27 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The purpose of this study was evaluate the biocompatibility of four root canal sealers, Epiphany, AH Plus, Pulp Canal Sealer, Sealapex. Sterile polyethylene tubes containing freshly mixed test materials were inserted into the connective tissues of the sixty rats. The animals were divided into four groups. After anesthesia, the dorsal skin was shaved, disinfected, incisioned and two pocket were carefully prepared by blunt dissection and each animal received two implantations in opposite sides, one containing the material nd another as control (empty polyethylene tube). After periods of 7, 15 and 30 days, the implants were removed with the surrounding tissue and immersed in 10% formalin solution for 48 hours. After fixing the tissue it was processed for paraffin embedding which were cut in serial sections with the microtome set at 4 μm, stained with hematoxylin and eosin and assessed by light microscopy. The descriptive analysis was conducted by a pathologist who was blinded to which group and experimental period the glass slides pertained to, following the criteria: A) the thickness of the fibrous capsule: thin, intermediate or thick; B) Connective tissue composition: fibrous or loose, necrosis, nerve, blood vessels; C) the severity of the inflammatory reaction: mild, moderate, severe; D) presence of giant cells. The results revealed that after a period of 7 days all the sealers induced moderate-to-severe inflammatory reaction and Sealapex presented mild inflammatory reaction. At the 15-day, Epiphany and AH Plus sealers conducted to moderate inflammatory reaction, Pulp Canal Sealer severe inflammatory reaction, and Sealapex had the same intensity. After 30 days of the implantation of the sealers, mild inflammatory reactions were observed for the Epiphany, AH Plus and Sealapex, and moderate inflammatory reaction for the Pulp Canal Sealer. The results of this study revealed that Sealapex presented lowest level of inflammatory reaction in all the observed periods, yet all the sealers induced acceptable biological compatibility. More extensive experiments will be necessary to fully predict the clinical behavior of the sealers in patients undergoing endodontic therapy. / O objetivo deste estudo foi avaliar a biocompatibilidade de quatro cimentos endodônticos: Epiphany, AH Plus, Pulp Canal Sealer EWT e Sealapex. Tubos de polietileno contendo os materiais prontamente manipulados foram introduzidos no tecido conjuntivo subcutâneo de 60 ratos. Os animais foram divididos em 4 grupos. Após anestesia, tricotomia, desinfecção, incisão e divulsão tecidual, cada animal recebeu dois implantes contralaterais: um implante contendo o material e um controle (tubo vazio). Após os períodos de sete, 15 e 30 dias os implantes foram removidos com margem de tecido e fixados em solução de formol a 10% por 48 horas. Após a fixação das amostras, procedeu-se a remoção dos tubos, inclusão em blocos de parafina e cortes seriados de 4μm, que foram corados com Hematoxilina e Eosina e examinados por microscopia óptica de luz comum. A análise descritiva das lâminas foi realizada por um Patologista, que desconhecia a que grupo e período experimental as lâminas pertenciam, seguindo os seguintes critérios; A) Espessura da cápsula: delgada, intermediária ou espessa; B) Constituição do tecido conjuntivo: fibroso ou frouxo; presença de necrose; feixes vásculo-nervosos; eventos vasculares; C) Severidade do infiltrado inflamatório: discreto, moderado ou intenso; D) Presença de células gigantes multinucleadas inflamatórias (CGMI). Os resultados mostraram que depois de sete dias todos os cimentos apresentaram uma resposta inflamatória de moderada a intensa e o Sealapex mostrou-se com resposta inflamatória discreta. Com 15 dias os cimentos Epiphany e AH Plus apresentaram resposta moderada; para o Pulp Canal Sealer EWT a resposta foi severa e o Sealapex manteve-se com infiltrado inflamatório discreto. No final do período de avaliação, 30 dias, as reações teciduais apresentaram-se discretas para os cimentos AH Plus, Epiphany, Sealapex e moderada para o Pulp Canal Sealer EWT. Os resultados deste estudo revelaram que o cimento Sealapex foi o que apresentou menor resposta inflamatória em todos os períodos, ainda que todos os cimentos tenham demonstrado compatibilidade biológica aceitável. Contudo mais experimentos serão necessários para o total conhecimento do comportamento clínico dos cimentos em dentes submetidos a terapia endodôntica.

Este trabalho teve como objetivo avaliar as propriedades biológicas de cimentos experimentais a base de resina metacrilato contendo α-tricálcio fosfato (α-TCP) ou hidroxiapatita nanoparticulada (HAp) in vitro e in vivo. Para isto, os cimentos experimentais foram avaliados e comparados com AH Plus (AHP). Na etapa in vitro, os materiais foram mantidos em contato com meio de cultura por 24 horas, coletados e avaliados na concentração de 10%. Células-tronco da papila apical humana (SCAPs) foram submetidas aos ensaios de viabilidade brometo de 3-(4,5-dimetiltiazólio)-2,5-difenil tetrazólio (MTT) e sulfurodamina B (SRB) no período de 24 horas; e a bioatividade foi avaliada pela atividade da enzima fosfatase alcalina (ALP) e deposição de nódulos mineralizados pelo corante vermelho de Alizarina (AR), nos períodos de 1, 5, 10 e 15 dias. Na etapa in vivo, os materiais foram inseridos em tubos de polietileno e colocados no tecido subcutâneo de ratos para avaliação da reação inflamatória, sendo utilizado um tubo vazio como controle e avaliados os períodos de 7, 30 e 90 dias; para avaliação da deposição óssea, os cimentos α-TCP e AHP foram inseridos em cavidades confeccionadas no fêmur de ratos, sendo utilizada uma cavidade vazia como controle e avaliados os períodos de 30 e 90 dias. Para o ensaio de viabilidade e ensaios in vivo, foram utilizados os testes de Kruskal-Wallis e post hoc de Dunn; para avaliação da bioatividade in vitro foram utilizados os testes ANOVA e post hoc de Tukey (P < 0.05). HAp e AHP não apresentaram diferenças estatísticas entre si em ambos os ensaios de citotoxicidade (P> 0,05) e o α-TCP apresentou menor resultado de viabilidade no teste MTT, sendo estatisticamente diferente dos outros (P <0,05). Os ensaios de bioatividade demonstraram aumento na atividade da ALP em todos os grupos (P < 0.05). Observou-se semelhança entre os grupos no primeiro período (P > 0.05), AHP apresentou menores valores em 5 dias (P < 0.05), α-TCP apresentou os maiores valores em 10 dias (P < 0.05), e em 15 dias este cimento foi superior ao AHP (P < 0.05). AR mostrou aumento na quantidade de depósitos mineralizados após 5 dias (P < 0.05). Não houve diferença entre os grupos em 1 dia (P > 0.05), α-TCP, HAp e controle foram semelhantes aos 5 dias (P > 0.05), e em 10 e 15 dias, α-TCP apresentou os maiores valores, sendo diferente dos outros cimentos (P > 0.05). Na avaliação da resposta inflamatória in vivo, observou-se diminuição da inflamação e aumento de fibras colágenas em todos os grupos. Em 7 dias, α-TCP e HAp mostraram resultados semelhantes ao controle CT (P>0.05) e diferentes do AHP (P < 0.05), que foi o único grupo a apresentar células-gigantes neste período. Na avaliação da deposição óssea, houve aumento na deposição de 30 para 90 dias nos grupos α-TCP e controle (P < 0.05), e estes grupos apresentaram resultados semelhantes em 90 dias (P > 0.05), diferindo do AHP (P < 0.05). Conclui-se que a associação de fosfatos de cálcio à resina metacrilato apresentou bons resultados de biocompatibilidade e bioatividade in vitro e in vivo, apresentando potencial para serem utilizados como cimentos obturadores na prática clínica. / This study aimed to evaluate the biological properties of experimental sealers containing α-tricalcium phosphate (α-TCP) or nanoparticulate hydroxyapatite (HAp) in a methacrylate resin-base in vitro and in vivo. For this, the experimental sealers were evaluated and compared with AH Plus (AHP). At the in vitro assays, the materials were kept in contact with culture medium for 24 hours, collected and evaluated at concentrations of 100% and 10%. Stem cells from human apical papilla (SCAPs) were submitted to 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) and sulfurodamine B (SRB) viability assays for 24 hour; and bioactivity was evaluated by alkaline phosphatase enzyme activity (ALP) and deposition of mineralized nodules by Alizarin Red staining (AR), for 1, 5, 10 and 15 days. At in vivo assays, the materials were inserted in polyethylene tubes and placed in subcutaneous tissue of rats to evaluate the inflammatory reaction, using an empty tube as control and evaluating the periods of 7, 30 and 90 days; to evaluate bone deposition, α-TCP and AHP cements were inserted into cavities made in the femur of rats, using an empty cavity as control and evaluating the periods of 30 and 90 days. For viability and in vivo assays, Kruskal-Wallis and Dunn’s post hoc tests were used; for bioactivity, ANOVA and Tukey's post hoc tests were used (P < 0.05). HAp and AHP did not presented statistical differences from each other in both citotoxicity assays (P > 0.05), and α-TCP presented a lower viability result in MTT assay, being statistically different from the other sealers (P < 0.05). The bioactivity assays showed an increase in ALP activity for all groups (P < 0.05). Similar results were found between the groups at the first period (P > 0.05), AHP had the lowest values at 5 days (P < 0.05), α-TCP presented the highest values at 10 days (P < 0.05), and at 15 days, this sealer’s values were higher than AHP (P < 0.05). AR showed an increase in the amount of mineralized deposits after 5 days for all sealers (P < 0.05). No difference between groups were found at 1 day (P > 0.05), α-TCP, HAp and control were similar at 5 days (P > 0.05), and at 10 and 15 days, α-TCP presented the highest values, being different of the other sealers (P > 0.05). Regarding the evaluation of the inflammatory response in vivo, there was a decrease in inflammation and increase of collagen fibers in all groups. At 7 days, α-TCP and HAp showed similar results to the control (P > 0.05) and different from AHP (P < 0.05), which was the only group to present giant cells in this period. In the evaluation of bone deposition, there was an increase in deposition from 30 to 90 days for α-TCP and control groups (P < 0.05), and these groups presented similar results in 90 days (P > 0.05), differing from the AHP (P < 0.05). It was concluded that the association of calcium phosphates and methacrylate resin showed good biocompatibility and bioactivity results in vitro and in vivo, presenting potential to be used as endodontic sealers in clinical practice.

O objetivo desse trabalho foi avaliar a biocompatibilidade de diferentes agentes cimentantes (Ketac Cem Easy Mix 3M ESPE e RelyX Unicem 3M ESPE) microscopicamente, por meio de implantes em tecido conjuntivo subcutâneo de camundongos isogênicos; microscópica e radiograficamente, após aplicação em cavidades profundas, próximas à polpa, em dentes de cães. No estudo em tecido conjuntivo subcutâneo foram utilizados quarenta camundongos isogênicos da linhagem BALB/c divididos em 9 grupos com 3 períodos experimentais: Grupo I: Ketac Cem Easy Mix (7 dias), Grupo II: RelyX Unicem (7 dias), Grupo III: tubo de polietileno vazio (7 dias), Grupo IV: Ketac Cem Easy Mix (21 dias) Grupo V: RelyX Unicem (21 dias), Grupo VI: tubo de polietileno vazio (21 dias), Grupo VII: Ketac Cem Easy Mix (63 dias), Grupo VIII: RelyX Unicem (63 dias), Grupo IX: tubo de polietileno vazio (63 dias). No estudo em dentes de cães foram utilizados quarenta dentes (80 raízes) de 4 cães, distribuídos em 6 grupos: Grupo I: Ketac Cem Easy Mix (7 dias), Grupo II: RelyX Unicem (7 dias), Grupo III: Cimento de óxido de zinco e eugenol (7 dias), Grupo IV: Ketac Cem Easy Mix (70 dias) Grupo V: RelyX Unicem (70 dias), Grupo VI: Cimento de óxido de zinco e eugenol (70 dias). A análise microscópica no tecido conjuntivo subcutâneo foi realizada em microscópio de luz comum, baseada nos seguintes parâmetros: infiltrado inflamatório (celularidade e tipo de célula) e reparo tecidual. Na análise microscópica em dentes de cães, foi registrada a descrição completa das características da dentina, polpa e tecidos periapicais de acordo com os seguintes aspectos: Presença de polpa normal; Presença de dentina reacional; Presença de ulceração; Pulpite e Presença de necrose pulpar, sendo os resultados submetidos à análise estatística utilizando-se o teste exato de Fisher (p<0,05). A avaliação radiográfica foi realizada por meio de radiografias periapicais obtidas previamente à execução dos atos operatórios e após os períodos experimentais, com relação à integridade da lâmina dura, presença ou ausência de reabsorções radiculares e áreas de rarefação óssea periapical. Os resultados da análise microscópica evidenciaram que, quando empregados sobre a dentina, ambos os cimentos não ocasionaram reações pulpares insatisfatórias. No entanto, quando colocados diretamente sobre o tecido pulpar, desencadearam reação inflamatória intensa, com necrose pulpar e desenvolvimento de reação periapical. No tecido conjuntivo subcutâneo de camundongos, o Ketac Cem Easymix apresentou resposta inflamatória e fenômenos reacionais intensos em todos os períodos analisados. Já o RelyX Unicem apresentou resposta inflamatória discreta com reparo tecidual nos períodos mais tardios. Podemos concluir que os cimentos RelyX Unicem e Ketac Cem Easymix apresentaram resultados satisfatórios, quando empregados na dentina de cavidades profundas, sem exposição pulpar. No entanto, quando em contato com o tecido conjuntivo subcutâneo e com o tecido pulpar em microexposições apresentaram resultados insatisfatórios. / The purpose of this study was to evaluate the biocompatibility of different luting agents (Ketac Cem Easy Mix 3M ESPE and RelyX Unicem 3M ESPE), microscopically, by means of implants in the subcutaneous connective tissue of isogenic mice; microscopically and radiographically, after application to deep cavities, close to the pulp, in dogs teeth. In the study in subcutaneous connective tissue, 40 isogenic BALB/c mice were allocated in 9 groups with 3 experimental periods: Group I: Ketac Cem Easy Mix® (7 days), Group II: RelyX Unicem (7 days), Group III: empty polyethylene tube (7 days), Group IV: Ketac Cem Easy Mix (21 days) Group V: RelyX? Unicem (21 days), Group VI: empty polyethylene tube (21 days), Group VII: Ketac Cem Easy Mix (63 days), Group VIII: RelyX Unicem (63 days), Group IX: empty polyethylene tube (63 days). In the study in the pulp tissue of dogs teeth, 40 teeth (80 roots) of 4 dogs were used and assigned to 6 groups: Group I: Ketac Cem Easy Mix (7 days), Group II: RelyX Unicem (7 days), Group III: zinc oxide and eugenol cement (7 days), Group IV: Ketac Cem Easy Mix (70 days) Group V: RelyX Unicem (70 days), Group VI: zinc oxide and eugenol cement (70 days). The microscopic analysis of the subcutaneous connective tissue was performed under standard ligth microscopy, according to the following parameters: presence of inflammatory infiltrate (cellularity and cell type) and tissue repair. In the microscopic analysis in dogs teeth, a comprehensive description of dentin, pulp and periapical tissue characteristics was undertaken, based on the following aspects: presence of normal pulp; presence of reparative dentin; presence of ulceration; presence of pulpitis; and presence of pulp necrosis. The radiographic evaluation was performed by means of the analysis of periapical radiographs taken before the operative procedures and at the experimental periods, with respect to the integrity of the lamina dura, presence or absence of root resorptions and areas of periapical bone rarefaction. The results of the microscopic analysis demonstrated that, when applied to dentin, both cements did not cause adverse pulp reactions. Nevertheless, when applied directly to the pulp tissue, the luting agents triggered an intense inflammatory response, with pulp necrosis and development of periapical reaction. In the subcutaneous connective tissue of mice, Ketac Cem Easymix induced an inflammatory response and intense reactive phenomena at all analyzed periods. On the other hand, RelyX Unicem induced a discrete inflammatory response with tissue repair at the later periods. It may be concluded that RelyX Unicem and Ketac Cem Easymix luting agents presented satisfactory results when applied to the dentin of deep cavities without pulp exposure. However, when placed in contact with the subcutaneous connective tissue and pulp tissue in areas of micro-exposures, these materials presented unsatisfactory results.

O objetivo do trabalho foi avaliar a biocompatibilidade em tecido conjuntivo de ratos do NeoMTA Plus (NMP) e comparar com o Agregado Trióxido Mineral (MTA) e Biodentine (BD). Foram utilizados 18 ratos divididos em 3 grupos (n=6) para cada período experimental (7, 30 e 90 dias). Tubos de polietileno contendo os materiais, tendo como controle o tubo vazio foram implantados. Decorridos os períodos experimentais e após processamento histológico, observou-se as características do componente celular inflamatório, da condensação fibrosa e da formação de abscesso. A análise estatística entre os grupos foi realizada através do teste de Friedman, complementado pelo teste de Dunn. As comparações entre os períodos experimentais foram realizadas através do teste de Kruskall-Wallis complementado pelo teste de Dunn (P≤0,05%). Não houve diferença estatística significante quando se avaliou os diferentes materiais no mesmo período experimental para todos os eventos inflamatórios (P>0,05). Em relação à presença de infiltrado inflamatório, foi encontrada diferença significante entre os períodos experimentais de 7 e 90 dias nos grupos NeoMTA Plus, Biodentine e controle, havendo diminuição da inflamação. Foi encontrada predominância de infiltrado linfoplasmocitário em todos materiais no período de 7 dias, havendo diminuição significante desse componente no período de 90 dias. O NeoMTA Plus e o grupo controle apresentaram diminuição de linfócitos e plasmócitos entre os períodos de 30 e 90 dias (P≤0,05). Apenas o Biodentine, aos 7 dias, apresentou escore 2 (leve) de neutrófilo com diminuição do primeiro período para os períodos de 30 e 90 dias (P≤0,05). Com exceção do MTA, houve diminuição do macrófago ao longo do tempo, porém, foi encontrado diferença estatística nos grupos NeoMTA Plus e controle entre os períodos de 7 e 90 dias (P≤0,05). No que diz respeito à presença de célula gigante, não foi constatada diferença entre os períodos em nenhum dos materiais testados (P>0,05). Houve ausência desse componente para os grupos NeoMTA plus e controle, e escore leve para o Biodentine e MTA. Foi encontrada presença de condensação fibrosa e evolução no espessamento estatisticamente significante entre os períodos 7 e 90 dias em todos materiais (P≤0,05). Considerando este resultados, os materiais testados no estudo podem ser considerados biocompatíveis. / The objective of this study was to evaluate the biocompatibility in connective tissue of rats of NeoMTA Plus (NMP) and to compare it to Mineral Trioxide Aggregate (MTA) and Biodentine (BD). Eighteen rats were divided into three groups (n = 6) for each experimental period (7, 30 and 90 days). Polyethylene tubes containing the materials and empty tubes (control) were implanted. After the experimental periods and histological processing, observations were made of the cellular inflammatory component, the fibrous condensation, and the abscess formation. Statistical analysis among groups was performed using the Friedman and Dunn test. The comparisons among experimental periods were performed using the Kruskall-Wallis and Dunn test (P≤0.05%). There was no statistically significant difference when the different materials were evaluated in the same experimental period for all inflammatory events (P> 0.05). In relation to the presence of inflammatory infiltrate, a significant difference was found among 7 and 90 days to NeoMTA Plus, Biodentine and control groups, with a decrease in inflammation. It was found predominance of lymphoplasmacytic infiltrate in all materials in the period of 7 days, with a significant decrease of this component in 90 days. NeoMTA Plus and control group showed decreased lymphocytes and plasmocytes among 30 and 90 days (P≤0.05). Only Biodentine, at 7 days, presented score 2 (light) to neutrophil with a decrease in the first period for the periods of 30 and 90 days (P≤0.05). With the exception of MTA, there was a decrease in macrophage over time, but a statistical difference was found in the NeoMTA Plus and control groups among 7 and 90 days (P≤0.05). Regarding the presence of giant cells, no difference was found among the periods in any of the tested materials (P> 0.05). There was absence of this component for NeoMTA plus and control groups, and light score for Biodentine and MTA. It was found fibrous condensation and evolution in thickening among 7 and 90 days in all materials (P≤0.05). Considering these results, the materials tested in the study can be considered biocompatible.