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Estudos estruturais por dinâmica molecular do peptídeo Polybia-MPI via Replica Exchange /

Silva, Diego Oliveira Nolasco da. January 2010 (has links)
Orientador: Jorge Chahine / Banca: Alexandre Suman de Araujo / Banca: Leandro Cristante de Oliveira / Banca: José Roberto Ruggiero / Banca: Sidney Jurado de Carvalho / Resumo: O Polybia-MPI é um peptídeo catiônico curto que tem toxicidade seletiva para as células cancerosas, mas nenhuma atividade hemolítica. Apresenta ação antimicrobiana potente tanto contra bactérias Gram-positivas quanto Gram-negativas. O peptídeo oferece ainda eficácia citotóxica e antiproliferativa pela formação de poros. Pode inibir seletivamente a proliferação de células de câncer de próstata e bexiga, mas tem menor citotoxicidade para fibroblastos murinos normais. Simulações foram realizadas fazendo uso do pacote computacional GROMACS 4.0 a partir do arquivo de coordenadas espaciais do peptídeo construído com base na estrutura primária, depositada no banco de dados ExPASy/SwissProt sob o código P0C1Q4. A dinâmica teve como estrutura inicial o peptídeo estendido imerso em 1831 moléculas de água e 250 moléculas de TriFluorEtanol (TFE), proporção volumétrica de 65% de água e 35% de TFE. Foi utilizado o Método de Troca de Réplicas (Replica Exchange Method) no intuito de evitar que o sistema ficasse preso em mínimos locais de energia, o que possibilitou uma visitação aleatória à possibilidades energéticas diferentes. A combinação dos histogramas provenientes da Análise de Componente Principal (PCA) de cada arquivo de trajetória permitiu o estudo estatístico da simulação. Os resultados e suas respectivas análises indicam a estabilidade da conformação com trechos em hélice α, o que acarreta na possibilidade de inferir que seja esta a estrutura do peptídeo Polybia-MPI. / Abstract: The Polybia-MPI is a short cationic peptide that has selective toxicity to cancer cells, but no hemolytic activity. It displays a potent antimicrobial action against Gram-positive and Gram-negative bacteria. The peptide also offers cytotoxic and antiproliferative efficiency for the formation of pores. It can selectively inhibit cell proliferation of prostate and bladder cancer, but shows less cytotoxicity to normal murine fibroblasts. Simulations were performed using the computational package GROMACS 4.0 with the spatial coordinates of the peptide constructed based on the primary structure, deposited in the ExPASy/SwissProt database under the code P0C1Q4. The molecular dynamic simulations had as initial structure the extended peptide immersed in 1831 water molecules and 250 TriFluoroEthanol (TFE) molecules, volumetric ratio of 65% water and 35% TFE. The Replica Exchange Method was used in order to prevent the system of getting stuck in energy local minima, which allowed random visits to different energy possibilities. The combination of the histograms from the Principal Component Analysis (PCA) of each trajectory file allowed the statistical study of the simulation. The results and their respective evaluations indicate stability of the α-helical conformation, resulting in the possibility of inferring that this is the structure of the peptide Polybia-MPI. / Doutor
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Bioecologia de Anastrepha fraterculus (Wiedemann, 1830) (Diptera: Tephritidae) em videira /

Zart, Marcelo. January 2008 (has links)
Resumo: A espécie de mosca-das-frutas Anastrepha fraterculus é uma das principais pragas da fruticultura brasileira, porém, quando associada à cultura da videira, poucas informações estão disponíveis. Neste trabalho foi avaliado o efeito da infestação artificial em diferentes cultivares e estádios fenológicos, a eficiência de atrativos alimentares para o monitoramento da praga e a flutuação populacional de adultos em diferentes cultivares na região da Serra Gaúcha, RS. No laboratório foi estudado o desenvolvimento pós-embrionário de A. fraterculus em diferentes cultivares. Não ocorre desenvolvimento de A. fraterculus na cultivar 'Niagara Rosada'. Na cultivar 'Itália' a espécie completa o desenvolvimento, mas a cultivar não é considerada um hospedeiro multiplicador da praga devido a baixa viabilidade larval. No que se refere à caracterização de danos, houve queda significativa de bagas nas cultivares 'Cabernet Sauvignon', 'Moscato Embrapa' e 'Isabel' quando a infestação ocorreu na fase inicial de desenvolvimento do cacho (fase de grão ervilha). Na cultivar 'Niagara Rosada' não houve queda significativa e deformação das bagas e nem viabilidade no desenvolvimento larval. Atrativos alimentares foram testados em vinhedos e a formulação BioAnastrepha, à base de proteína hidrolisada, foi a mais eficaz. A flutuação populacional foi avaliada em áreas das cultivares 'Cabernet Sauvignon', 'Moscato Embrapa', 'Niagara Rosada', 'Itália' (apenas 2005/06) e 'Isabel' (apenas safra 2006/07). Utilizou-se armadilhas McPhail contendo o atrativo BioAnastrepha a 5%. As maiores capturas de A. fraterculus foram observadas na cultivar 'Moscato Embrapa', com o pico populacional ocorrendo durante a fase de maturação de bagas. / Abstract: The South American fruit fly, Anastrepha fraterculus, is a major pest of Brazilian fruit trees. However, little information is available about it in association to grape. In this work it was evaluated the effect of artificial infestation in different cultivars and phenological stages, the efficacy of different food attractants for pest sampling and adult population fluctuation in different cultivars in southern Brazil. A. fraterculus postembryonic development was evaluated in different cultivars. A. fraterculus did not develop in 'Niagara Rosada' although it did in the 'Italia' cultivar. However, this cultivar was not considered a multiplying host due to low larval viability of the pest. In relation to damage, there was significant berry injury in the cultivars 'Cabernet Sauvignon', 'Moscato Embrapa', and 'Isabel ' when the infestation occurred in the initial stage of fruit development. The 'Niagara Rosada' berries did not present significant injury and malformation. The fruit fly larvae did not develop in this cultivar. Several food attractants were tested in vineyards and hydrolyzed protein (BioAnastrepha) was the most attractive. The population fluctuation was evaluated in several areas of 'Cabernet Sauvignon', 'Moscato Embrapa', 'Niagara Rosada', 'Italia' (only in 2005/06) and 'Isabel ' (only in 2006/07) cultivars. McPhails traps with BioAnastrepha at 5% were used. Most of the flies were caught in 'Moscato Embrapa' cultivar during berry ripening stage. / Orientador: Odair Aparecido Fernandes / Coorientador: Marcos Botton / Banca: Sergio Antonio de Bortoli / Banca: Adalton Raga / Mestre
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Sentidos sobre o ensino de biologia e sobre a trajetória formativa : as vozes dos licenciandos sob a égide da perspectiva crítica /

Soares, Moisés Nascimento. January 2009 (has links)
Orientador: Renato Eugênio da Silva Diniz / Banca: Antonio Fernando Gouveia da Silva / Banca: Washington Luiz Pacheco de Carvalho / Resumo: O presente estudo teve como problemática investigar os sentidos educativos, que os formandos dos cursos de Licenciatura de Ciências Biológicas de duas universidades públicas, possuem sobre o ensino de Biologia e sobre a trajetória formativa obtida na graduação. Bem como os possíveis porquês destes sentidos, com vistas à obtenção de subsídios para se repensar a formação inicial de professores à luz da perspectiva crítica. Para tanto, num primeiro momento da pesquisa, balizados metodologicamente pela abordagem da pesquisa qualitativa, de tipo estudo exploratório, aplicamos questionários e, em seguida, num segundo momento, realizamos algumas entrevistas com alguns formatos previamente selecionados, com base nas dimensões constituídas a partir das análises mais gerais de nosso primeiro instrumento de pesquisa. As contribuições filosófico-educacionais do pensamento freireano e frankfurtiano, principalmente de Theodor Adorno, bem como os pressupostos do modelo docente dos intelectuais críticos de Giroux (1997) e as considerações críticas sobre o currículo, como as de Appel (2006), balizaram nossas análises e discussões. Delas, constatamos, dentre outras questões, que os sentidos educativos relacionados às compreensões que os licenciandos possuem sobre o ensino de Biologia, sobre os papéis dos educadores e da trajetória formativa se aproximam, tanto de uma visão crítica, progressista e transformadora, quanto de seu contrário, isto é, de uma perspectiva mais ingênua, pragmática, pendendo mais para a adaptação. O modelo da racionalidade técnica e instrumental na formação docente, embora hegemônico, não é único e exclusivo, concorrendo com outros espaços dentro e fora da universidade que oportunizam vivências contra-hegemônicas, como por exemplo, no movimento estudantil da biologia. A partir de uma reflexão das vozes dos licenciandos entrevistados... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present study had as problem to investigate educative meaning that pre-services of Biology Science of two public universities in Brazil has about teaching Biology and trajectory formative obtained in the graduate course, and the possible reasons of these meanings to subsidize to rethinking the pre-service teaching education supported by critical perspective. Thus, in a first moment of the research, according with qualitative research methodology, as exploratory study, we applied questionnaires for all. In the second moment, we realized some interviews with some previously pre-services selected in base on some dimensions constituted according general analysis of our first instrumental. The philosophical-educational constributions of Freire's approach and Adorno's approach as well as the base of the Giroux's thinking about teachers as intellectual and the considerations of Appel concerning curriculum subsidized our discussions and analysis. It's become possible to uncover that educative meanings presents in understanding of pre-services about teaching Biology, roles of educators, and trajectory formative experimented in the graduate course are, in on hand, critical, pregressives, and linked with transformation's perspectives of education, and in the other hand are more innocent and pragmatic, linked with adaptation's perspectives of educations. The model of instrumental and technical rationality in the teaching education, although hegemonic, it's isn't unique and exclusive. There are other spaces inside and out of university where pre-services has living resisting-experiences, for example, students movements in Biology. Based on reflection of voices of pre-services interviewed, we constituted five groups of suggestions as indicators to rethink, in future proposes in teaching education under focuses of critical curriculum... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre
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Biologia molecular - técnica PCR : monitoração do efeito de curativos de demora à base de hidróxido de cálcio na microbiota de canais radiculares em dentes de humanos portadores de lesão periapical crônica /

Jacobovitz, Marcos. January 2003 (has links)
Orientador: Izabel Yoko Ito / Banca: Mario Roberto Leonardo / Banca: Lea Assed Bezerra da Silva / Banca: Reginaldo Bruno Gonçalves / Banca: Brenda Paula Figueiredo de Almeida Gomes / Resumo: No presente estudo foi monitorada a microbiota do canal radicular de 30 dentes de humanos portadores de lesão periapical crônica. Foram utilizados curativos de demora à base de hidróxido de cálcio entre sessões: Calen (Grupo I), Calen PMCC (Grupo II) e Calasept (Grupo III), que foram mantidos nos canais radiculares por aproximadamente 30 dias. O material colhido dos canais radiculares, antes e após a realização da terapêutica endodôntica, foi submetido a teste laboratorial baseado na biologia molecular: Reação em Cadeia da Polimerase (PCR). Como controle positivo da presença bacteriana, foi utilizado primer 16S rDNA. As seguintes espécies bacterianas foram monitoradas: Porphyromonas endodontalis, Porphyromonas gingivalis, Prevotella intermedia, Prevotella nigrescens (bacilos pigmentados de negro), e Bacteroides forsythus, microrganismos marcantes na patologia de processos infecciosos dos tecidos pulpoperiapicais. Os resultados evidenciaram diminuição das espécies microbianas, aqui monitoradas de forma indireta à partir da presença de bandas, ou amplicons (produtos do PCR), quando do uso de curativos de demora à base de hidróxido de cálcio. Com relação à eficácia particular a cada material, os Grupos I, II e III não demonstraram entre si diferenças estatisticamente significantes. / Abstract: In the present study the root canal flora of 30 human teeth with chronic periapical lesion was monitored. Dressing pastes based on calcium hydroxide were used, among sessions namely: Calen (Group I), Calen/PMCC (Group II) and Calasept (Group III) that were used as a temporary dressings in root canals for approximately 30 days. The microbial material was colected from root canals, before and after the root canal treatment and submitted to laboratorial test based on molecular biology assay: Polymerase Chain Reaction (PCR). As a positive control of bacterial presence, a primer 16S rDNA was utilized. The following bacterial strains were monitored: Porphyromonas endodontalis, P. gingivalis, P. intermedia, P. nigrescens (black pigmented rods) and B. forsythus, a microorganism with an important role on pulpoperiapical pathosis. The results showed a decrease of bacterial strains population indirectly, based on bands presence (amplicons) where the calcium hydroxide dressing pastes were applied. Concerning the intrinsic efficacy of each material, the Groups I, II and III didn't show significant statistical differences among them. / Doutor
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Estudo da biologia reprodutiva, diversidade genética e química de populações de Ocimum selloi Benth /

Facanali, Roselaine, 1975- January 2008 (has links)
Resumo: O presente trabalho teve por objetivo geral o estudo de populações de Ocimum selloi Benth. sob o ponto de vista da biologia reprodutiva, da variabilidade genética e química dos óleos essenciais, visando fornecer informações para seu uso inequívoco como planta medicinal e aromática em estudos futuros de melhoramento genético vegetal, cultivo e preservação da espécie. O material vegetal utilizado foi coletado na região de Piquete e Apiaí, estado de São Paulo, em Colombo, estado do Paraná e em Camanducaia, estado de Minas Gerais. O estudo da variabilidade populacional foi realizado pela análise de polimorfismo do DNA do tipo RAPD e a química por meio da análise da composição química dos óleos essenciais das folhas das populações naturais e cultivadas por cromatografia gasosa acoplada a espectrometria de massas. Os resultados revelaram uma forte estrutura genética entre as populações avaliadas, que também pôde ser verificada pelas diferenças observadas nos perfis químicos das plantas. O estudo da biologia reprodutiva revelou a existência predominante de autopolinização explicando o fato das análises da variabilidade genética das quatro populações (Apiaí/SP; Piquete/SP; Colombo/SP e Camanducaia/MG), demonstrarem que a diversidade está localizada entre as populações (variabilidade interpopulacional). A composição química dos óleos essenciais revelou divergências na proporção relativa das substâncias mais abundantes, onde para a população nativa de Piquete/SP, a substância mais abundante foi o germacreno D (26,22%), enquanto que plantas da mesma região cultivadas em Campinas/SP apresentaram elemicina (38,70%, 35,46% e 26,22%) na 1ª, 3ª e 4ª colheita, respectivamente, e transbergamoteno (21,13%) na 2ª colheita como principal composto. Para a população nativa de Apiaí/SP e para as plantas cultivadas em Campinas/SP ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The general goal of the present study was to investigate Ocimum selloi Benth. populations from the standpoints of reproductive biology, genetic and essential oil chemical variability; in order to provide information for its safe use as medicinal and aromatic plant, for future breeding studies, the species cultivation and its preservation. Plant material was collected from the regions of Piquete and Apiaí, in the state of São Paulo; Colombo, state of Paraná and Camanducaia, state of Minas Gerais. The population variabiliy was studied by DNA polymorphism analysis using RAPD markers and the chemical diversity was investigated through composition analyses of the essential oils from leaves of natural and theis corresponding cultivated populations, using gas chromatography-mass spectrometry. The results revealed a strong genetic structure among the populations, so that it agrees with the differences in the chemical profile of the plants. Reproductive biology studies revealed the predominance of self-pollination, in accordance to the genetic variation data from the four populations (Apiaí/SP; Piquete/SP; Colombo/SP e Camanducaia/MG); therefore demonstrating that the diversity is among the populations (interpopulation variability). The chemical composition of the essential oils was divergent in the relative proportion of the major compounds; the native population in Piquete/SP exhibited germacrene D (26.22%) as the most abundant component, whereas its corresponding individuals grown in Campinas/SP presented elemicine (38.70%, 35.46% and 26.22%) at the 1st, 3rd and 4th harvesting season and trans- - bergamotene (21.13%) at the 2nd harvesting season as main compounds. The native population from Apiaí/SP and its corresponding cultivated plants in Campinas/SP presented elemicine (22.68%, 28.70% and 32.90%, respectively) as the ...(Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Márcia Ortiz Mayo Marques / Coorientador: Carlos Augusto Colombo / Banca: Carmen Silvia Fernandes Boaro / Banca: Vera Maria Quecini / Banca: Maria Imaculada Zucchi / Banca: Maria das Graças Cardoso / Doutor
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Aspectos bioecológicos do pulgão-gigante-do-pinus, Cinara atlantica (Wilson, 1919) (Hemiptera: Aphididae), em Pinus spp. (Pinaceae)/

Ottati, Angelo Luiz Tadeu. January 2004 (has links)
Orientador: Carlos Frederico Wilcken / Banca: Carlos Alberto Hector Flechtmann / Banca: Célia Regina Lopes Zimback / Banca: Sonia Maria Noemberg Lazzari / Banca: Carlos Alberto Fleichmann / Banca: Edson Tadeu Iede / Resumo: Os afídeos são um dos grupos de pragas amplamente distribuídos, causando perdas consideráveis em sistemas agrícolas e florestais. O pulgão-gigante-do-pinus, Cinara atlantica, é atualmente a espécie de pulgão mais disseminada nos plantios de Pinus no Brasil. Devido à sua importância econômica, esse trabalho objetivou avaliar o efeito de diferentes temperaturas e da espécie hospedeira no desenvolvimento de ninfas e na longevidade e capacidade reprodutiva de adultos de C. atlantica, sob condições de laboratório, e determinar a flutuação populacional, a estrutura etária e a caracterização da estrutura espacial do afídeo em áreas florestadas com Pinus taeda e P. caribaea var. caribaea. A determinação do efeito de diferentes temperaturas (18o C, 22o C, 26o C e 30o C) e de hospedeiros (P. taeda e P. caribaea var. hondurensis) no desenvolvimento de C. atlantica foi conduzida sob fotofase de 12 h e umidade relativa do ar de 70 10%. Utilizaram-se 20 insetos (repetições) para cada combinação dos fatores temperatura e hospedeiro e obtiveram-se resultados para variáveis nos estágios ninfal e adulto e ciclo de vida. A determinação da flutuação populacional e da caracterização espacial (50 árvores/avaliação) e da estrutura etária (cinco colônias/avaliação) de C. atlantica foi realizada em áreas de 1 ha com P. taeda e P. caribaea var. caribaea nos municípios de Buri e Nova Campina/SP em 21 avaliações entre julho de 2001 e agosto de 2002. Concluiu-se que o desenvolvimento de ninfas e a longevidade e potencial reprodutivo dos adultos de C. atlantica não foram influenciados pelos hospedeiros P. taeda e P. caribaea var. hondurensis. Entretanto, as temperaturas constantes de 18o C e 22o C conferem as melhores condições, enquanto a de 30o C as piores condições de desenvolvimento aos insetos mantidos em P. taeda e P. caribaea var. hondurensis. C. atlantica... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: Aphids are one of the most widespread groups of pests, causing severe damages on agricultural and forestry systems. Nowadays, the giant conifer aphid, C. atlantica, is widely distributed on pine forests in Brazil. Due to its economic importance, this study aimed to evaluate the effects of different constant temperatures and host plants on the development of nymphs and adults and reproductive capacity in adult of C. atlantica in laboratory, monitoring the populational fluctuation, the age structure and to characterize spatial pattern of C. atlantica in Pinus taeda and P. caribaea var. caribaea plantations. The effect of constant temperatures (18o C, 22o C, 26o C e 30o C) and host plants (P. taeda and P. caribaea var. hondurensis) on the development of C. atlantica was carried out at 12 h of photophase (12 h) and 70 + 10% relative humidity. Twenty nymphs (replications) were tested for each treatment (temperature x host plant) to estimated biological variables of nymph and adult stages and life span. The study of the populational fluctuation, the spatial characterization (50 trees sampled per sampling date) and the age structure (5 aphid colonies per sampling date) of C. atlantica was carried out on P. taeda and P. caribaea var. caribaea plantations in 1 ha area in Buri and Nova Campina municipalities (SP, Brazil), between July 2001 and August 2002 (21 sampling dates). This research indicated that nymph and adult development and reproductive capacity of C. atlantica were not affected by host plants. However, temperatures of 18o C and 22o C provided better conditions for aphid development than 30o C when reared on P. taeda and P. caribaea var. hondurensis. In the field, C. atlantica had highest peaks of abundance in the winter and spring and lowest during the summer. The age structure study can give support to predict population peaks and the occurrence of stable populations indicates a low... (Complete abstract, click electronic address below). / Doutor
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Abordagens bio-inspiradas aplicadas ao estudo da cognição : um encontro entre biologia, psicologia e filosofia /

Junqueira, Luís Henrique Féres. January 2006 (has links)
Orientador: Maria Candida Soares Del-Masso / Banca: Alfredo Pereira Júnior / Banca: Gustavo Maia Souza / Resumo: É antiga a preocupação do ser humano com as questões relacionadas ao conhecimento, incluindo as discussões sobre a sua origem, seu aprendizado, sobre a nossa capacidade de utiliza-lo e sobre as características específicas da cognição humana. Essa preocupação remonta aos antigos filósofos gregos (2.500 A.C.), desenvolvendo-se posteriormente a partir da abordagem da Epistemologia, originária da Filosofia ocidental, e mais recentemente a partir do Funcionalismo, pertencente aos estudos em Filosofia da Mente e em Ciência Cognitiva. Essa última abordagem, em particular, contribuiu para o surgimento de programas de pesquisas que procuram entender o funcionamento da mente humana com a ajuda do computador. A Ciência Cognitiva possui fortes ligações com as pesquisas em Inteligência Artificial, e ambas vem se desenvolvendo desde a década de 1950. Mais recentemente, a partir da década de 1980, uma nova área de estudos surgiu, formada por pesquisas em Vida Artificial, que trabalha com a possibilidade de síntese de entidades vivas, por meios artificiais, e desde então vem chamando a atenção de pesquisadores interessados no estudo da cognição. Enquanto a Ciência Cognitiva tem ligações estreitas com a Filosofia e a Psicologia, a Vida Artificial tem uma forte inspiração na Biologia. Neste trabalho, procuramos investigar o encontro entre essas disciplinas, e seus programas de pesquisas, considerando as possibilidades de contribuição para o estudo da cognição humana, a partir de uma abordagem conjunta entre essas áreas. / Abstract: It is na old thing the human concern about knowledge related questions, including discussions on its origin, its learning, about our capacity to utilize it and about specific characteristics of the human cognition. That concern remounts to the ancient greek philosophers (2.500 B.C.), developing itself later from the approach of Epistemology, originated in the occidental Philosophy, and more recently from the Functionalism, that makes part of the studies of Philosophy of Mind and of Cognitive Science. This last approach, particularly, contributed to appearing of research programs that try to understand the function of the human mind with the help of the computer. The Cognitive Science has strong relation with research in Artificial Intelligence, and both areas have been growing since the 1950 decade. More recently, from the decade 1980 on, a new area of atudies appeared, formed by researches in Artificial Life, that work with the possibility of synthesis of alive entities, by artificial means, and sice then has been attracting the attention of researchers interested in the study of Cognition. While Cognitive Science has strict relations with the Philosophy and the Psychology, Artifiical life has a strong inspiration in the Biology. In this work, we tried to investigate the meeting between these subjects, and their research programs, considering the possibilities of the contribution to the study of the human cognition, by means of an integrated approach of these areas. / Mestre
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Análise comparativa de métodos de diagnóstico para linfadenite caseosa em ovinos sintomáticos e assintomáticos /

Ribeiro, Dayana. January 2009 (has links)
Resumo: A Linfadenite Caseosa (LC) é uma doença crônica contagiosa, causada pela Corynebacterium pseudotuberculosis que acomete ovinos e caprinos acarretando perdas econômicas importantes. O diagnóstico é baseado no cultivo e identificação bioquímica, no entanto a fase subclínica e/ou visceral requerem métodos alternativos para sua detecção. Apesar dos métodos de diagnóstico já existentes, raramente pesquisas investigaram a utilização de material proveniente de punção aspirativa por agulha fina (PAAF) de linfonodo de ovinos aplicadas a outras técnicas de diagnóstico. O presente trabalho objetivou avaliar a sensibilidade e especificidade de métodos de diagnóstico para LC em ovinos sintomáticos (n=26) e assintomáticos (n=129), utilizando material colhido através de PAAF de linfonodo. As técnicas basearam-se na amplificação por PCR do gene alvo pld (fosfolipase D), no cultivo bacteriano associado a identificação bioquímica, no citodiagnóstico, bem como na pesquisa do agente etiológico. O teste sorológico por ELISA indireto foi adaptado para a espécie ovina. As amostras clínicas recuperadas da PAAF forneceram material adequado e suficiente para realização dos testes propostos, implementando a rotina do diagnóstico para LC. Dentre os métodos testados, o ELISA e a PCR foram os que apresentaram maior sensibilidade (92%). A maior especificidade foi verificada no cultivo bacteriano (98%), seguido do exame citológico (94%). / Abstract: Caseous Lymphadenitis (CL) is considered a cronic contagious disease caused by Corynebacterium pseudotuberculosis affecting sheep and goats causing economical losses. The diagnostic is based on microorganism culture and respective identification. However no clinical and/ or visceral cases need alternative methods for detection. In spite of a range of diagnostic methods, few studies demonstrate the usefulness of fine-needle aspiration biopsy (FNAB) method. The aim of this study was to evaluate the sensitivity and specificity of diagnostic methods for CL in symptomatic (n=26) and asymptomatic (n=129) sheeps, using specimes collected from lymph nodes by FNAB assay. These techniques were performed using PCR targeting the pld gene (phospholipase D), on biochemical identification and culture, cytodiagnostic searching the aetiological agent. The serologic test of ELISA method was also applied in all ovine sera. Clinical samples recovered in FNAB given suitable and enough samples to perform the identification of C. pseudotuberculosis, implementing CL diagnostics. Among all techniques used here, ELISA and PCR demonstrated higher sensitivity (92%), whereas microorganism culture (98%) and cytodiagnostic (94%) presented higher specificity. / Orientador: Maria Cecília Rui Luvizotto / Coorientador: Vasco Ariston de Carvalho Azevedo / Banca: Márcio Garcia Ribeiro / Banca: Tereza Cristina Cardoso da Silva / Mestre
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Estudo filogenético de populações de Ceratobasidium noxium, agente causal do mal-do-fio do caqui (Diospyrus kaki) e do chá (Camellia sinensis) no Estado de São Paulo, patogenicidade cruzada e reação de variedades de caqui ao patógeno /

Souza, Elaine Costa. January 2006 (has links)
Resumo: O mal-do-fio (ou queima-do-fio) é uma doença causada pelo fungo Basidiomiceto Ceratobasidium sp., que afeta diversas plantas frutíferas nativas ou cultivadas. A doença ocorre com mais freqüência em zonas de alta precipitação e temperaturas elevadas, típicas de regiões de florestas tropicais como a Amazônia e a Mata Atlântica. Em São Paulo, recentemente detectou-se a ocorrência do mal-do-fio, em caquizeiro na região de Mogi das Cruzes. Essa doença pode- se tornar importante com a expansão do cultivo de fruteiras no Estado. A maioria das pesquisas sobre o patossistema focalizou a epidemiologia e o controle do fungo. Entretanto a etiologia do patógeno ainda não está totalmente definida, especialmente para populações do fungo infectando caqui e chá no Estado de São Paulo. Há também pouca informação sobre a divergência genética entre populações do patógeno de hospedeiros distintos como caqui e chá. O primeiro objetivo deste trabalho foi determinar o posicionamento filogenético global de populações de Ceratobasidium sp. do caqui e do chá, em relação a espécies de Ceratobasidium sp. descritas no mundo. Foram analisadas seqüências de DNA da região ITS-5.8S do rDNA, inferindo-se a história dos alelos ou haplótipos deste lócus, por meio de métodos filogenéticos, cladísticos e coalescentes. Observou-se que uso de C. noxium é apropriado para denominar espécies associadas ao mal-do- fio em caqui e chá, apesar de C. noxium do caqui e do chá constituírem populações filogeneticamente independentes, as quais denominamos de Grupo Diospyrus e Grupo Camellia. Este estudo trouxe uma contribuição importante para a compreensão das relações filogenéticas e biologia de populações de C. noxium em caqui e chá. Uma vez esclarecidas as questões filogenéticas, o segundo objetivo deste trabalho foi testar a patogenicidade cruzada de... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The white-thread blight is a disease caused by the Basidiomycete fungus Ceratobasidium sp. that affects several native or cropped tree fruits. This disease frequently occurs in zones of high precipitation and high temperatures typical of the tropical forest regions such as the Amazon and the Atlantic Forest. In São Paulo, the occurrence of the white-thread blight was detected only recently on kaki orchards closer to Mogi das Cruzes. That disease can become important with the expansion of the fruit trees cropping areas in the State. Most of the researches about the pathosystem has focused on the epidemiology and control of fungus. However the etiology of the pathogen is not totally defined yet, especially for the fungus populations infecting kaki and tea in São Paulo State. There is also little information available about the biological and genetic divergence between pathogen populations from distinct hosts, such as kaki and tea. The first objective of this research was to determine the global phylogenetic placement of populations of Ceratobasidium from kaki and tea, considering the species of Ceratobasidium described throughout the world. Sequences of the ITS-5.8S region of the rDNA were analyzed, inferring the alleles or haplotypes history for this locus, by phylogenetics, cladistisc and coalescent methods. We observed that the use of C. noxium is appropriate to denominate the fungus species associate with the white-thread blight on kaki and tea, despite the fact that C. noxium from kaki and tea constitutes phylogenetically independent populations, which we denominate Diospyrus and Camellia groups. This study brought an important contribution for the understanding of the phylogenetics and population biology of C. noxium infecting kaki and tea. Once the phylogenetics subjects have been cleared, the second objective of this work was to test the cross-pathogenicity... (Complete abstract, access electronic address below) / Orientador: Paulo Cezar Ceresini / Coorientador: Alcebíades Ribeiro Campos / Banca: Adriana Zanin Kronka / Banca: Cézar Junior Bueno / Mestre

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