Os extratos vegetais, em função de sua rica composição e propriedades medicinais têm tido grande interesse na área cosmética. Contudo, muitas vezes, o grande número de componentes químicos pode causar instabilidade às formulações, assim, a indústria cosmética também utiliza seus principais componentes isolados. Dentre esses extratos podemos destacar o de camomila, o qual vem sendo comumente utilizado em cosméticos. Este possui uma rica composição de flavonóides, terpenos, polissacarídeos, dentre outros, o que lhe confere propriedades anti-inflamatória, antioxidante e emoliente, as quais foram bastante estudadas quanto às suas aplicações farmacológicas em geral, porém pouco estudadas quanto a sua aplicação tópica. O objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento de formulações cosméticas estáveis contendo extrato glicólico de camomila (Matricaria chamomilla L.), ou os seus componentes isolados, alfa-bisabolol e apigenina, bem como a avaliação da eficácia clínica destas formulações na hidratação e proteção da pele. Visando avaliar potencial antioxidante in vitro do extrato de camomila e do seu componente isolado, apigenina, foram realizados estudos de quimioluminescência. Foram desenvolvidas cinco formulações à base de blend autoemulsificante, de copolímero de ácido sulfônico acriloildimetiltaurato e vinilpirrolidona (ASAV), blend autoemulsificante de polímero de celulose, copolímero de ASAV e polímero de poliacrilamida. Estas formulações foram acrescidas ou não (veículo) de 0,5% de alfa-bisabolol e de 5% de extrato de camomila. Realizou-se estudos preliminares de estabilidade e estudos de estabilidade física por determinação do comportamento reológico, bem como uma análise sensorial. A formulação composta copolímero ASAV apresentou melhor estabilidade e melhor sensorial e, assim, foi utilizada como veículo na avaliação da eficácia clínica a curto (efeitos imediatos) e longo prazo. Para a avaliação dos efeitos imediatos, analisou-se a hidratação, a perda transepidérmica de água, as propriedades viscoelásticas e o microrelevo da pele da região interna dos antebraços e da face, antes e após 2 horas da aplicação das formulações: veículo (F1), veículo + alfa-bisabolol (F2), veículo + extrato de camomila (F3) e veículo + apigenina (F4). Para analisar os efeitos a longo prazo, as voluntárias aplicaram as formulações duas vezes ao dia nos antebraços e na face sendo que, após 15 e 30 dias de aplicação, foram realizadas medidas dos parâmetros acima mencionados e das propriedades mecânicas da pele por determinação de suas características anisotrópicas. Os resultados mostraram que o extrato de camomila possui potencial antioxidante e que as formulações estudadas apresentaram efeitos hidratantes no estudo a curto prazo, porém somente as que continham extrato de camomila proporciono tal efeitos no estudo a longo prazo. Finalizando, de acordo com os resultados obtidos, pôde-se concluir que a formulação contendo extrato de camomila foi estável e apresentou propriedade hidratante, efeito esse evidenciado na avaliação da percepção da eficácia da referida formulação. Assim, o extrato de camomila pode ser sugerido para a aplicação em produtos cosméticos, visando a obtenção de efeitos hidratantes pronunciado e manutenção do equilíbrio fisiológico da pele. / Botanical extracts due to its rich composition and medicinal properties have attracted great interest in the cosmetic area. However, the large amount of chemicals compounds present in those extracts could cause instability to the formulations; thus, the cosmetic industry also uses its isolated major compounds. Among these extracts we can mention the Matricaria chamomilla L. extract, which has been commonly used in cosmetics. This extract has a rich composition in flavonoids, terpenes, polysaccharides, among others, which confers anti-inflammatory, antioxidant and emollient properties. M. chamomilla L. extract has had its use recognized and, in general, in terms of pharmacological applications, it has being well studied on its therapeutic properties. Although, there are only a few studies about its topical application. The aim of this study was to development of stable cosmetic formulations containing glycolic extract, or its isolated compounds, alpha-bisabolol and apigenin, as well as to evaluate the clinical efficacy of those formulations on skin hydration and skin protection. In order, to evaluate the in vitro antioxidant activity of the M. chamomilla L. and apigenin was applied the chemiluminescence assay. Five formulations were developed based on sclerotium gum, ammonium acryloyldimethyltaurate/ vinylpyrrolidone copolymer (A/VPC), hydroxietylcelulose, acrylate polymer and C13-14 Laureth-7 acrylamide polymer. Those formulations were supplemented or not (vehicle) with 0.5% of alpha-bisabolol and 5% of M. chamomilla L. extract. Afterwards, further studies were carried out to determine the formulations physical stability by analyzing the rheological behavior and also a sensorial analysis. The formulation containing A/VPC copolymer demonstrated the best physical stability and the best sensorial characteristics and thus it was used as the vehicle to evaluate the clinical efficacy in the immediate and long term effects. In order to evaluate the immediate effects, it was analyzed the skin hydration, transepidermal water loss, the viscoelastic properties and the skin microrelief on the region of the volunteers forearms and face, before and after 2 hours of the following formulations application: vehicle (F1), vehicle + alpha-bisabolol (F2), vehicle + M. chamomilla L. extract (F3) and vehicle + apigenin (F4). For the long-term study, the volunteers applied the formulations twice a day in the forearms and face; after 15 and 30 day-period of application, the parameters above mentioned were measured and the skin mechanical properties was also evaluated, by determining skin anisotropic characteristics. The results showed that M. chamomilla L.extract has antioxidant activity and the formulations studied demonstrated immediate moisturizing effects, but only the formulation containing M. chamomilla L. extract provides such effects in long-term study. Finally, according to the obtained results, it can be concluded that the formulation containing M. chamomilla L. extract was stable and showed moisturizing properties, it also was demonstrated by the efficacy perception assessment. Thus, M. chamomilla L. extract can be suggested for application in cosmetic product, in order to obtain pronounced hydration effect and keeping physiological balance of the skin.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-04-20T11:29:02Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Diêgo de Melo - 2017.pdf: 12963482 bytes, checksum: 14979af9bcf3df3d1a038ba4bc54e354 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2017-04-20T12:38:31Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Diêgo de Melo - 2017.pdf: 12963482 bytes, checksum: 14979af9bcf3df3d1a038ba4bc54e354 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-20T12:38:31Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Diêgo de Melo - 2017.pdf: 12963482 bytes, checksum: 14979af9bcf3df3d1a038ba4bc54e354 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-03-07 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / This work describes a practical method for intramolecular heterocyclization of the (-)-α-bisabolol to obtain cyclic arylselenoethers and arylthioethers. The electrophilic cyclization addition is promoted by arylselenenyl bromide (ArSeBr) and arylsulfenyl chloride (ArSCl) through electrophilic addition across the terminally disubstituted double bond of the alfa-bisabolol. The cyclization reaction preceeded cleanly and smoothly under mild reaction conditions and provided the cyclic arylselenoethers and arylthioethers with 71% and 47% of yield respectively, employing pyridine as addictive under inert atmosphere. The methodology showed to be highly regioselective since the tetrahydrofuranes were obtained as unique products, presumably because of electronic and conformational factors. It is well known that cyclic ethers are present in the skeletons of several groups of natural compounds exhibiting important biological activities. / Este trabalho descreve um método simples para a heterociclização Intramolecular do (-)-α-bisabolol para obtenção de ariltioeteres e arilselenoeteres cíclicos. A ciclização eletrofílica é promovida por brometo de arilselenenila (ArSeBr) e cloreto de arilsulfenila (ArSCl) através da adição eletrofílica na dupla ligação terminal dissubstituída do (-)-α-bisabolol A reação de ciclização procedeu-se sob condições brandas fornecendo arilselenoeteres e ariltioeteres cíclicos com 71% e 47% de rendimento respectivamente, empregando piridina como aditivo, em atmosfera inerte. A metodologia mostrou-se altamente regiosseletiva, uma vez que se obteve como produto principal somente tetrahidrofuranos organocalcogeno funcionalizados em consequência de fatores eletrônicos e conformacionais. Adicionalmente, sabe-se que, os éteres cíclicos estão presentes nos esqueletos de vários grupos de compostos naturais, apresentando importantes atividades biológicas.

Os extratos vegetais, em função de sua rica composição e propriedades medicinais têm tido grande interesse na área cosmética. Contudo, muitas vezes, o grande número de componentes químicos pode causar instabilidade às formulações, assim, a indústria cosmética também utiliza seus principais componentes isolados. Dentre esses extratos podemos destacar o de camomila, o qual vem sendo comumente utilizado em cosméticos. Este possui uma rica composição de flavonóides, terpenos, polissacarídeos, dentre outros, o que lhe confere propriedades anti-inflamatória, antioxidante e emoliente, as quais foram bastante estudadas quanto às suas aplicações farmacológicas em geral, porém pouco estudadas quanto a sua aplicação tópica. O objetivo deste trabalho foi o desenvolvimento de formulações cosméticas estáveis contendo extrato glicólico de camomila (Matricaria chamomilla L.), ou os seus componentes isolados, alfa-bisabolol e apigenina, bem como a avaliação da eficácia clínica destas formulações na hidratação e proteção da pele. Visando avaliar potencial antioxidante in vitro do extrato de camomila e do seu componente isolado, apigenina, foram realizados estudos de quimioluminescência. Foram desenvolvidas cinco formulações à base de blend autoemulsificante, de copolímero de ácido sulfônico acriloildimetiltaurato e vinilpirrolidona (ASAV), blend autoemulsificante de polímero de celulose, copolímero de ASAV e polímero de poliacrilamida. Estas formulações foram acrescidas ou não (veículo) de 0,5% de alfa-bisabolol e de 5% de extrato de camomila. Realizou-se estudos preliminares de estabilidade e estudos de estabilidade física por determinação do comportamento reológico, bem como uma análise sensorial. A formulação composta copolímero ASAV apresentou melhor estabilidade e melhor sensorial e, assim, foi utilizada como veículo na avaliação da eficácia clínica a curto (efeitos imediatos) e longo prazo. Para a avaliação dos efeitos imediatos, analisou-se a hidratação, a perda transepidérmica de água, as propriedades viscoelásticas e o microrelevo da pele da região interna dos antebraços e da face, antes e após 2 horas da aplicação das formulações: veículo (F1), veículo + alfa-bisabolol (F2), veículo + extrato de camomila (F3) e veículo + apigenina (F4). Para analisar os efeitos a longo prazo, as voluntárias aplicaram as formulações duas vezes ao dia nos antebraços e na face sendo que, após 15 e 30 dias de aplicação, foram realizadas medidas dos parâmetros acima mencionados e das propriedades mecânicas da pele por determinação de suas características anisotrópicas. Os resultados mostraram que o extrato de camomila possui potencial antioxidante e que as formulações estudadas apresentaram efeitos hidratantes no estudo a curto prazo, porém somente as que continham extrato de camomila proporciono tal efeitos no estudo a longo prazo. Finalizando, de acordo com os resultados obtidos, pôde-se concluir que a formulação contendo extrato de camomila foi estável e apresentou propriedade hidratante, efeito esse evidenciado na avaliação da percepção da eficácia da referida formulação. Assim, o extrato de camomila pode ser sugerido para a aplicação em produtos cosméticos, visando a obtenção de efeitos hidratantes pronunciado e manutenção do equilíbrio fisiológico da pele. / Botanical extracts due to its rich composition and medicinal properties have attracted great interest in the cosmetic area. However, the large amount of chemicals compounds present in those extracts could cause instability to the formulations; thus, the cosmetic industry also uses its isolated major compounds. Among these extracts we can mention the Matricaria chamomilla L. extract, which has been commonly used in cosmetics. This extract has a rich composition in flavonoids, terpenes, polysaccharides, among others, which confers anti-inflammatory, antioxidant and emollient properties. M. chamomilla L. extract has had its use recognized and, in general, in terms of pharmacological applications, it has being well studied on its therapeutic properties. Although, there are only a few studies about its topical application. The aim of this study was to development of stable cosmetic formulations containing glycolic extract, or its isolated compounds, alpha-bisabolol and apigenin, as well as to evaluate the clinical efficacy of those formulations on skin hydration and skin protection. In order, to evaluate the in vitro antioxidant activity of the M. chamomilla L. and apigenin was applied the chemiluminescence assay. Five formulations were developed based on sclerotium gum, ammonium acryloyldimethyltaurate/ vinylpyrrolidone copolymer (A/VPC), hydroxietylcelulose, acrylate polymer and C13-14 Laureth-7 acrylamide polymer. Those formulations were supplemented or not (vehicle) with 0.5% of alpha-bisabolol and 5% of M. chamomilla L. extract. Afterwards, further studies were carried out to determine the formulations physical stability by analyzing the rheological behavior and also a sensorial analysis. The formulation containing A/VPC copolymer demonstrated the best physical stability and the best sensorial characteristics and thus it was used as the vehicle to evaluate the clinical efficacy in the immediate and long term effects. In order to evaluate the immediate effects, it was analyzed the skin hydration, transepidermal water loss, the viscoelastic properties and the skin microrelief on the region of the volunteers forearms and face, before and after 2 hours of the following formulations application: vehicle (F1), vehicle + alpha-bisabolol (F2), vehicle + M. chamomilla L. extract (F3) and vehicle + apigenin (F4). For the long-term study, the volunteers applied the formulations twice a day in the forearms and face; after 15 and 30 day-period of application, the parameters above mentioned were measured and the skin mechanical properties was also evaluated, by determining skin anisotropic characteristics. The results showed that M. chamomilla L.extract has antioxidant activity and the formulations studied demonstrated immediate moisturizing effects, but only the formulation containing M. chamomilla L. extract provides such effects in long-term study. Finally, according to the obtained results, it can be concluded that the formulation containing M. chamomilla L. extract was stable and showed moisturizing properties, it also was demonstrated by the efficacy perception assessment. Thus, M. chamomilla L. extract can be suggested for application in cosmetic product, in order to obtain pronounced hydration effect and keeping physiological balance of the skin.

Orientador: Lúcia Helena Brito Baptistella / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Química / Made available in DSpace on 2018-08-25T19:38:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Avanzi_ClaudiadeJesusAguiar_M.pdf: 7514328 bytes, checksum: 45b623664e84c807b0d4d3a0a9b9b5b2 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: A natureza é uma rica fonte de moléculas estruturalmente diversas, capa-zes de exercer os mais variados efeitos biológicos, e por isso, de grande valor farmacológico, que têm inspirado a confecção de novas drogas não-naturais, potencialmente mais efetivas que as de origem. Num contexto mais amplo, o estudo visou a utilização de moléculas simples e abundantes na natureza, como os terpenos R-(-)-linalol (1) e a-(-)-bisabolol (2), para a síntese de outras mais elaboradas, como o acetato do (1S)-1-hidróxi-óxido de bisabolol A (3), sesquiterpeno com conhecida atividade antimalária, e de derivados análogos. Na maioria dos casos, a etapa principal seria o preparo de sistemas tetraidropiranos (THP's) 2,2,3,6,6-pentassubstituídos, idênticos ou análogos ao anel THP de 3, inicialmente utilizando reações de cicloeterificação da cadeia lateral hidroxílica ?,d-insaturada desses terpenos, ativada como um epóxido, sob catálise de ácidos de Lewis impedidos. Em estudos com o linalol R-(-)-1, os éteres cíclicos THP's foram obtidos em bons rendimentos e em alta regios-seletividade quando a epoxidação da olefina em posição ?,d em relação à hidroxila foi feita com reagente de Shi e a cicloeterificação dos álcoois bisho-moepóxidos com triflato de triisopropilsilil (TIPSOTf). Aplicada ao bisabolol (-)-a-2, em oposição às nossas expectativas, a metodologia não alcançou resul-tados satisfatórios, sendo verificada a formação de diversos produtos, principalmente derivados tetraidrofuranos (THF's), onde se observou o efeito do grupo volumoso p-mentânico de (-)-a-2 na seletividade para produtos de ciclização 5-exo-tet. Em menor extensão, comparativamente às reações do linalol, foi também possível a obtenção de anéis THP's do bisabolol com o uso de triflatos de silício impedidos na etapa de ciclização. Após estas constações, alguns métodos alternativos testados sobre (-)-a-2 foram conduzidos, visando o preparo estereosseletivo de intermediários epóxi-álcoois, mas não foram bem sucedidos, fato atribuido à baixa seletividade dos agentes oxidantes e/ou ineficiência de tamponamento, com ciclizações espontâneas para sistemas THF's. Uma série de outros produtos puderam ser isolados e identificados. Teste de oxidação alílica sobre o derivado THP de (-)-a-2 com o complexo CrO3/3,5-dimetilpirazol forneceu indícios de produto regioisomérico ao desejado. Paralelamente, de posse dos derivados THP's de R-(-)-1, estudos em reações de cicloadição [4+2] foram conduzidos, utilizando-os como dienófilos em presença de silil ceteno acetais conjugados como dienos. Infelizmente, tanto os estudos efetuados nesses casos quanto com outros dienos ricos em elétrons foram insuficientes para se chegar ao cicloadutos de Diels-Alder desejados. Alguns resultados permitiram sugestões, mas que ainda necessitam de melhor investigação. Adicionalmente, foram efetuadas análises biológicas de alguns dos com-postos sintetizados, sendo que dois deles exibiram promissora atividade de inibição de proteínas tirosina fosfatases (PTPs) / Abstract: Nature is a rich source of structurally diverse molecules, able to exercise the most varied biological effects, and therefore of pharmacological value, which have inspired the design of new non-natural drugs, potentially more effective than those of origin. In a broader context, this investigation aimed at the use of simple molecules, abundant in nature, such as the terpenes R-(-)-linalool (1) and a-(-)-bisabolol (2), for the synthesis of other more elaborated, such as the (1S)-1-hydroxy-bisabolol oxide A acetate (3), a sesquiterpene with well-known antimalarial activity, and similar derivatives. In most cases, the key step was the preparation of the 2,2,3,6,6-pentasubstituted tetrahydropiran systems (THP's), identical or similar to the THP ring of 3, using regioselective cyclization reactions of the hydroxylic ?,d-unsaturated portion of these terpenes, activated as an epoxide and catalysed by hindered Lewis acids. THP's cyclic ethers from linalool R-(-)-1 were obtained in good yields and high regioselectivity when the ?,d-hydroxy olefin was submitted to the Shi epoxidation and cycloetherification of the corresponding bishomoepoxy alcohols with triisopropylsilyl triflate (TIPSOTf). Applied to the (-)-a-2, in contrast to our expectations, the methodology has not achieved satisfactory results, leading to several sesquiterpene analogues, with tetrahydrofuran derivatives (THF's) as major products, where it was recognized the effect of the bulky p-menthane group of (-)-a-2 on the selectivity for 5-exo-tet cyclization products. At small extention, when compared to linalool reactions, cyclization with sterically bulkier silyl triflates leads to desired THP's rings of bisabolol. Some alternative methods were also performed envisaging the preparation of hydroxy-epoxide intermediates from (-)-a-2 in a stereoselective manner, but they have not been successful, and it was attributed to low selectivity of the oxidizing agents and/or buffer inefficacy, leading to THF's systems by spontaneous cyclization reactions. A number of others products could be isolated and identified. Allylic oxidation essays on the THP derivatives of (-)-a-2 performed with CrO3/3,5-dimethylpyrazole complex provided evidences to afford a regioisomeric product of the expected one. At the same time, studies on [4+2] cycloaddition reactions with the THP's derivatives of R-(-)-1 were conducted, employing then as dienophiles in the presence of conjugated silyl ketene acetals as dienes. Unfortunately, all our efforts were not sufficient to provide the Diels-Alder cycloadducts, neither then other electron rich dienes were used. A better investigation of these cycloaddition reactions is still necessary. Additionally, biological enzymatic essays of two compounds obtained in this research project displayed promising inhibitory activity against protein tyrosine phosphatases (PTPs) / Mestrado / Quimica Organica / Mestra em Química

CoordenaÃÃo de AperfeÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O (-)-α-bisabolol, em doses de 100 e 200 mg/Kg, Ã um Ãlcool sesquiterpÃnico comumente obtido de Matricaria chamomilla e de espÃcies do gÃnero (Vanillosmopsis), foi testado no modelo de lesÃo gÃstrica induzida por etanol para a investigaÃÃo microscÃpica do efeito gastroprotetor dessa droga, da influÃncia da migraÃÃo de neutrÃfilos neste efeito, assim como envolvimento das enzimas SuperÃxido dismutase (SOD) e Catalase (Cat). Foram quantificadas tambÃm a peroxidaÃÃo lipÃdica (Substancias Reativas ao Ãcido TiobarbitÃrico-TBARS), e o produto do metabolismo do Ãxido nÃtrico (NO), o Ãnion nitrito. O (-)-α-bisabolol foi capaz de diminuir o dano gÃstrico induzido pelo etanol, parÃmetro analisado microscopicamente. O (-)-α-bisabolol diminuiu a migraÃÃo de neutrÃfilos na mucosa gÃstrica em modelo de Ãlcera induzida por etanol absoluto em camundongos, quantificado atravÃs da enzima mieloperoxidase (MPO), presente nos neutrÃfilos. O (-)-α-bisabolol interagiu com o sistema enzimÃtico anti-oxidante diminuindo a atividade da enzima catalase na mucosa gÃstrica, nos animais tratados com etanol absoluto, diminuiu a peroxidaÃÃo lipÃdica (TBARS) no tecido gÃstrico em animais submetidos a aplicaÃÃo de etanol absoluto e foi capaz de aumentar a atividade da enzima superÃxido dismutase no mesmo tecido. O (-)-α-bisabolol nÃo alterou significativamente a quantidade de nitrito no estÃmago dos animais ulcerados. Desta forma, o (-)-α-bisabolol nas doses testadas reduz as lesÃes gÃstrica associadas a administraÃÃo de etanol, provavelmente pela reduÃÃo do estresse oxidativo no estomago, alÃm de reduzir a atividade da MPO, contudo se explica a aÃÃo gastroprotetora dessa droga, no entanto a reduÃÃo da atividade enzimÃtica da Catalase seria um achado menos importante para explicar a atividade antiulcerogÃnica verificada. / The (-)-α-bisabolol, at doses of 100 and 200 mg / kg, is an alcohol commonly obtained from Matricaria chamomilla and species of the genus (Vanillosmopsis), it was tested in ethanol-induced gastric injury model for research gastroprotective effect microscopically of this drug, the influence of neutrophil migration in this effect, as well as THE involvement of superoxide dismutase (SOD) and catalase (Cat) enzymes. It was also quantified the lipid peroxidation (Thiobarbituric Acid Reactive Substances-TBARS), and the nitric oxide metabolism product (NO), the anion nitrite. The (-)-α-bisabolol was able to decrease ethanol-induced gastric damage, parameter microscopically analyzed. The (-)-α-bisabolol decreased neutrophils migration to the gastric mucosa in absolute ethanol-induced ulcer model in mice, quantified by the myeloperoxidase enzyme (MPO), present in neutrophils. The (-)-α-bisabolol interacted with the anti-oxidant enzyme system decreasing the catalase enzyme activity in the gastric mucosa in animals treated with absolut ethanol, decreased lipid peroxidation (TBARS) in gastric tissue in rats exposed to ethanol and it was able to increase the superoxide dismutase activity in the same tissue. The (-)-α-bisabolol did not significantly alter the amount of nitrite in the ulcerated animals stomach. Thus, the (-)-α-bisabolol in the doses tested reduced the gastric lesions associated with administration of ethanol, probably by reducing oxidative stress in the stomach while reducing the activity of MPO, it being explained the gastroprotective action of this drug, however the reduction of enzymatic activity of Catalase would be a less important finding to explain the antiulcer activity observed it.

Made available in DSpace on 2015-05-14T13:00:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1079221 bytes, checksum: 376f65c598b6d04c65a13973ab5a3407 (MD5) Previous issue date: 2009-07-28 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / (-)-Bisabolol is a sesquiterpene alcohol found as the major constituent of the essential oil from German chamomile (Chamomilla recutita (L.) Rauschert), a plant used for centuries mostly for its medicinal properties. Previous studies stated that extracts of (-)- bisabolol-rich plants showed significant antinociceptive activity in experimental models of pain. Until this moment no literature reports concerning the activity of (-)-bisabolol on nociception nor on the sciatic nerve of rodents were found, therefore, the present work proposes to investigate the potential of this terrene as an antinociceptive agent in experimental models in vivo and its relation towards nerve excitability reduction by using the single sucrose gap model adapted for mice sciatic nerve. In the acetic acid-induced writhing test it was observed that mice showed a significant decrease in the number of writhes when 25 mg/kg and 50 mg/kg of (-)bisabolol were administered (i.p.). It was also demonstrated that (-)-bisabolol inhibited the nociceptive response in mice treated with a dose of 50 mg/kg on the first phase of the formalin test and in mice treated with doses of 25 mg/kg and 50 mg/kg (i.p.) on the second phase of this test. In the electrophysiological assays it was verified that (-)-bisabolol acts on peripheral nervous system reducing the compound action potential (CAP) amplitude in a time-incubation and concentration-dependent manners, showing an IC50 of 8,2 mM. It was also observed that (-)-bisabolol promoted alterations in the evaluated CAP depolarization parameters amplitude (VPAC) and depolarization velocity (DVPAC) similarly to lidocaine, a standard voltage-gated sodium channels (Nav) blocker. Moreover, this sesquiterpene did not induce significant changes on the CAP repolarization phase, dissimilarly from 4-aminopyridine, a voltage-gated potassium channels (Kv) blocker. These results allow us to suggest a possible Nav blocker-like effect of (-)-bisabolol. Therefore, the presented results in this study have evidenced a promising antinociceptive-like effect of (-)-bisabolol, which might be associated, at least in part, with decreased peripheral neuronal excitability. / O (-)-bisabolol é um álcool sesquiterpênico encontrado como constituinte principal do óleo essencial da camomila (Chamomilla recutita (L.) Rauschert), uma planta utilizada por séculos devido às suas propriedades medicinais. Estudos prévios relataram que os extratos de plantas ricas em (-)-bisabolol apresentam atividade antinociceptiva em modelos experimentais para avaliação da resposta nociceptiva. Até o momento não encontramos relatos na literatura a respeito da atividade do (-)-bisabolol, como composto isolado, sobre a nocicepção nem sobre o nervo isquiático isolado de camundongos, portanto, o presente trabalho se propõe a investigar o potencial desse terpeno como agente antinociceptivo em modelos experimentais in vivo e sua relação com a redução da excitabilidade neuronal utilizando a técnica de single sucrose-gap adaptada para nervo isquiático de camundongos. No teste das contorções abdominais induzidas pela injeção intraperitoneal de ácido acético foi observado que os camundongos apresentaram uma redução significativa no número de contorções quando foram previamente tratados com as doses de 25 mg/kg e 50 mg/kg (i.p.). Também foi verificado que o (-)-bisabolol inibiu a resposta nociceptiva nos camundongos tratados com a dose de 50 mg/kg (i.p.) na primeira fase do teste da formalina e nos camundongos tratados com as doses de 25 mg/kg e 50 mg/kg (i.p.) na segunda fase desse teste. Nos ensaios eletrofisiológicos foi verificado que o (-)-bisabolol atuou sobre o sistema nervoso periférico reduzindo a amplitude do potencial de ação composto (PAC) de modo dependente do tempo de incubação e da sua concentração, apresentando uma IC50 de 8,9 mM. Foi observado ainda que o (-)-bisabolol promoveu alterações nos parâmetros de despolarização do PAC avaliados amplitude (VPAC) e velocidade de despolarização do PAC (VDPAC) de forma semelhante à lidocaína, um bloqueador padrão de canais para Na+ dependentes de voltagem (Nav). Além disso, este composto não induziu variações significativas sobre a fase de repolarização do PAC, contrariamente à 4-aminopiridina, um bloqueador de canais para K+ dependentes de voltagem (Kv). Esses resultados permitiram sugerir um possível efeito bloqueador do (-)-bisabolol sobre os canais do tipo Nav. Portanto, conclui-se que esse terpeno apresentou efeito promissor como substância antinociceptiva que pode estar associado, pelo menos em parte, com a redução da excitabilidade neuronal periférica.

Submitted by JÚLIO HEBER SILVA (julioheber@yahoo.com.br) on 2018-07-09T18:58:27Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ana Paula Lopes Lima - 2018.pdf: 2335802 bytes, checksum: 2f6ce764d8628ef3ceadc17fda527b72 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-07-10T11:27:45Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ana Paula Lopes Lima - 2018.pdf: 2335802 bytes, checksum: 2f6ce764d8628ef3ceadc17fda527b72 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-10T11:27:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Ana Paula Lopes Lima - 2018.pdf: 2335802 bytes, checksum: 2f6ce764d8628ef3ceadc17fda527b72 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-06-22 / Leishmaniasis is a disease transmitted by protozoan-infected sandflies of the genus Leishmania, whose cutaneous form is the most common with 50 to 75% of new cases reported. It is a non-contagious disease of chronic evolution, considered stigmatizing and neglected, affecting about 500,000 people in the world. Most drugs used in pharmacological treatment are potentially toxic and require patient hospitalization for administration, which raises costs and discourages the needy population from adhering to treatment. In this scenario, herbal medicines are inserted as an alternative because of their proven efficacy and because they cause fewer undesirable effects. The objective of the present study was to evaluate the leishmanicidal potential and the in vitro cell viability of Siparuna guianensis (SG) and α- Bisabolol (AB) isolated essential oils of Siparuna guianensis (SG) on Vero cells and Leishmania amazonensis promastigotes using the method colorimetric resazurin salt (Alamar Blue®) as an indicator of cellular metabolism. Cell invasion was also performed with the parasites previously treated with the IC50 obtained for AB and SG obtained in the cell viability test, in order to test the effect of the compounds on the infection capacity of the parasites. The results were analyzed using the program GraphPad Prism version 6.01. For analysis of the IC50, the non-linear regression tests were used. The tested compounds demonstrated viability on Vero basal cells and leishmanicidal activity: SG IC50 131.5 μg/mL and 2.59 μg/mL respectively. For α-Bisabolol the concentrations obtained were 103.8 μg/mL and 6.394 μg/mL and for SG were 94.61 μg/mL and 7.84 μg/mL, respectively. This is the first report of a cell invasion assay made with S. guianensis and α-Bisabolol alone, in which inhibition of 98.4% infective capacity of L. amazonensis promastigotes treated with SG at 131,5 μg/mL and inhibition of 95.4% of the infective capacity of the same AB-treated parasite at a concentration of 95.4 μg/mL, which are close to the value obtained by the conventional drug in a similar in vitro assay. which suggests a refinement of the technique and in vivo assays to determine the action of S. guianensis and α-Bisabolol from the concentrations obtained in this research. / A leishmaniose é uma doença transmitida por insetos do tipo flebotomíneos infectados por protozoários do gênero Leishmania, cuja forma cutânea é a mais comum com 50 a 75% de casos novos relatados. É uma doença não contagiosa, de evolução crônica, considerada estigmatizante e negligenciada, afetando cerca de 500.000 pessoas no mundo. A maioria das drogas utilizadas no tratamento farmacológico é potencialmente tóxica e requer hospitalização do paciente para sua administração, o que eleva os custos e desestimula a população carente a aderir ao tratamento. Neste cenário, os medicamentos fitoterápicos inserem-se como uma alternativa devido a sua eficácia comprovada e por causarem menos efeitos indesejáveis. O objetivo do presente estudo foi avaliar o potencial leishmanicida e a viabilidade celular in vitro do óleo essencial de Siparuna guianensis (SG) e do α-Bisabolol (AB) isolado de S. guianensis sobre células Vero e promastigotas de Leishmania amazonensis, utilizando o método colorimétrico sal de resazurina (Alamar Blue®) como indicador de metabolismo celular. Foi realizado também ensaio de invasão celular com os parasitos previamente tratados com o IC50 obtido para AB e SG obtido no teste de viabilidade celular, afim de testar o efeito dos compostos na capacidade de infecção dos parasitos. Os resultados foram analisados utilizando o programa GraphPad Prism versão 6.01. Para análise do IC50 foi utilizado os testes de regressão não linear. Os compostos testados demonstraram viabilidade sobre células basais Vero e atividade leishmanicida: SG IC50 131,5 µg/mL e 2,59 µg/mL respectivamente. Para α-Bisabolol as concentrações obtidas foram 103,8 µg/mL e 6,394 µg/mL e para SG foram 94,61 µg/mL e 7,84 µg/mL, respectivamente. Este é o primeiro relato de um ensaio de invasão celular feito com S. guianensis e α-Bisabolol isolado, no qual pode ser observado a inibição de 98,4% de capacidade infectiva de promastigotas de L. amazonensis tratadas com SG na concentração de 131,5 µg/mL e inibição de 95,4 % da capacidade infectiva do mesmo parasito tratado com AB na concentração de 95,4 µg/mL, resultados estes que se aproximam do valor obtido pelo medicamento convencional em um ensaio semelhante in vitro, o que sugere um refinamento da técnica e ensaios in vivo para determinar a ação da S. guianensis e do α-Bisabolol a partir das concentrações obtidas nesta pesquisa.

Diversas neoplasias podem atingir o sistema nervoso central e dentre elas, os tumores cerebrais são os mais prevalentes. Dentre todos os tumores cerebrais, dois merecem especial atenção: gliomas e meduloblastomas, por serem os mais recorrentes em adultos e crianças, respectivamente. O alfa-bisabolol é um pequeno álcool sesquiterpeno oleoso, que apresenta diversas atividades biológicas dentre elas, citotoxicidade. Apesar dos diversos estudos com essa molécula, pouco se sabe das atividades biológicas de seu análogo natural, o óxido de bisabolol A. Além disso, o sistema purinérgico tem sido relacionado com progressão e desenvolvimento tumoral. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de dois promissores novos agentes quimioterápicos (alfa-bisabolol e óxido de bisabolol A) e correlacionar esses efeitos com possíveis modulações do sistema purinérgico, que é considerado um novo alvo terapêutico em linhagens de glioma e meduloblastoma. Nós observamos que a atividade da ecto-5’-nucleotidase, importante enzima do sistema purinérgico, é aumentada tanto em linhagens de glioma quanto de meduloblastoma quando estas são tratadas com alfa-bisabolol. Vimos também que esse aumento na atividade deu-se por um efeito direto do tratamento sob a enzima, com uma redução da expressão do mRNA da ecto-5’-nucleotidase em linhagem de glioma e sem alteração no imunoconteúdo dessa enzima em linhagens de meduloblastoma. Em linhagens de glioma, adicionalmente, a atividade citotóxica do alfa-bisabolol foi correlacionada com estímulo ao receptor de adenosina A3. Ainda, as linhagens estudadas foram sensíveis aos tratamentos com alfa-bisabolol e óxido de bisabolol A. Em conclusão, os dados obtidos nesse trabalho demonstram que tanto o alfabisabolol quanto o óxido de bisabolol A são interesseantes novas possibilidades terapêuticas para os tumores cerebrais e que a atividade citotóxica do primeiro composto envolve modulação do sistema purinérgico. Mais estudos são necessários para entender a efetividade desses tratamentos in vivo e se o tratamento com o óxido de bisabolol A também modula o sistema purinérgico. / Among all the cancers that can affect the central nervous system, the brais tumors are the most prevalent. Two of this tumors deserve special attention: glioma and medulloblastoma once they are the most prevalent in adults and children respectively. Alpha-bisabolol is a small oily sesquiterphene alcohol that presents diverse biological activities, among them, citotoxicity. In despite of the diverse studies using this molecule, little is known about the biological activities of its natural analogue bisabolol oxide A. Besides, the purinergic system has been related to tumor development and progression. Therefore, the objective of this work was to evaluate the effect of two new promising chemotherapic agents (alpha-bisabolol and bisabolol oxide A) and correlate this effects with possible modulations of the purinergic system which is considered an interesting therapeutical target to glioma and medulloblastomas. We observed that the activity of ecto-5’-nucleotidase, an important enzyme of the purinergic system, is increased in both glioma and medulloblastoma cell lines when the cells are treated with alpha-bisabolol. It was also observed that this increase on activity was due to and direct effect of this treatment in the enzyme. Also, the treatment lead to a reduction on mRNA level of ecto-5’- nucleotidase on glioma cell line and no alterations on the imunocontent of the enzyme was observed on medulloblastoma cell lines. Additionally, the citotoxic activity of alpha-bisabolol on glioma cell line was correlated with modulation on A3 adenosine receptor. Moreover, the cell lines used in this work were sensible to the treatments with alpha-bisabolol and bisabolol oxide A. In a conclusion, the data obtained in this work demonstrate that alpha-bisabolol and bisabolol oxide A are both interesting new therapeutical possibilities to brain tumors and the citotoxic activity of the first compound is related with modulations on the purinergic system. More studies are needed to better understand the effectiveness of these treatments in vivo and if the compound bisabolol oxide A also promotes a modulation on the purinergic system.

Diversas neoplasias podem atingir o sistema nervoso central e dentre elas, os tumores cerebrais são os mais prevalentes. Dentre todos os tumores cerebrais, dois merecem especial atenção: gliomas e meduloblastomas, por serem os mais recorrentes em adultos e crianças, respectivamente. O alfa-bisabolol é um pequeno álcool sesquiterpeno oleoso, que apresenta diversas atividades biológicas dentre elas, citotoxicidade. Apesar dos diversos estudos com essa molécula, pouco se sabe das atividades biológicas de seu análogo natural, o óxido de bisabolol A. Além disso, o sistema purinérgico tem sido relacionado com progressão e desenvolvimento tumoral. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos de dois promissores novos agentes quimioterápicos (alfa-bisabolol e óxido de bisabolol A) e correlacionar esses efeitos com possíveis modulações do sistema purinérgico, que é considerado um novo alvo terapêutico em linhagens de glioma e meduloblastoma. Nós observamos que a atividade da ecto-5’-nucleotidase, importante enzima do sistema purinérgico, é aumentada tanto em linhagens de glioma quanto de meduloblastoma quando estas são tratadas com alfa-bisabolol. Vimos também que esse aumento na atividade deu-se por um efeito direto do tratamento sob a enzima, com uma redução da expressão do mRNA da ecto-5’-nucleotidase em linhagem de glioma e sem alteração no imunoconteúdo dessa enzima em linhagens de meduloblastoma. Em linhagens de glioma, adicionalmente, a atividade citotóxica do alfa-bisabolol foi correlacionada com estímulo ao receptor de adenosina A3. Ainda, as linhagens estudadas foram sensíveis aos tratamentos com alfa-bisabolol e óxido de bisabolol A. Em conclusão, os dados obtidos nesse trabalho demonstram que tanto o alfabisabolol quanto o óxido de bisabolol A são interesseantes novas possibilidades terapêuticas para os tumores cerebrais e que a atividade citotóxica do primeiro composto envolve modulação do sistema purinérgico. Mais estudos são necessários para entender a efetividade desses tratamentos in vivo e se o tratamento com o óxido de bisabolol A também modula o sistema purinérgico. / Among all the cancers that can affect the central nervous system, the brais tumors are the most prevalent. Two of this tumors deserve special attention: glioma and medulloblastoma once they are the most prevalent in adults and children respectively. Alpha-bisabolol is a small oily sesquiterphene alcohol that presents diverse biological activities, among them, citotoxicity. In despite of the diverse studies using this molecule, little is known about the biological activities of its natural analogue bisabolol oxide A. Besides, the purinergic system has been related to tumor development and progression. Therefore, the objective of this work was to evaluate the effect of two new promising chemotherapic agents (alpha-bisabolol and bisabolol oxide A) and correlate this effects with possible modulations of the purinergic system which is considered an interesting therapeutical target to glioma and medulloblastomas. We observed that the activity of ecto-5’-nucleotidase, an important enzyme of the purinergic system, is increased in both glioma and medulloblastoma cell lines when the cells are treated with alpha-bisabolol. It was also observed that this increase on activity was due to and direct effect of this treatment in the enzyme. Also, the treatment lead to a reduction on mRNA level of ecto-5’- nucleotidase on glioma cell line and no alterations on the imunocontent of the enzyme was observed on medulloblastoma cell lines. Additionally, the citotoxic activity of alpha-bisabolol on glioma cell line was correlated with modulation on A3 adenosine receptor. Moreover, the cell lines used in this work were sensible to the treatments with alpha-bisabolol and bisabolol oxide A. In a conclusion, the data obtained in this work demonstrate that alpha-bisabolol and bisabolol oxide A are both interesting new therapeutical possibilities to brain tumors and the citotoxic activity of the first compound is related with modulations on the purinergic system. More studies are needed to better understand the effectiveness of these treatments in vivo and if the compound bisabolol oxide A also promotes a modulation on the purinergic system.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-08-09T11:48:32Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Laura Vilela Souza - 2018.pdf: 1478023 bytes, checksum: 1f2124fc71f19fdff9f4fdd49de82f46 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2018-08-09T12:21:08Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Laura Vilela Souza - 2018.pdf: 1478023 bytes, checksum: 1f2124fc71f19fdff9f4fdd49de82f46 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-09T12:21:08Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Laura Vilela Souza - 2018.pdf: 1478023 bytes, checksum: 1f2124fc71f19fdff9f4fdd49de82f46 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2018-06-26 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Goiás - FAPEG / Toxoplasmosis, a result of the obligate intracellular protozoan Toxoplasma gondii, is a cosmopolitan disease that affects the character of the world population. Typically T. gondii infection is asymptomatic in immunocompetent examples, however, several manifestations could be more severe, immunocompromised and infected congenitally, leading to fatal consequences, the major public health problem. The treatment of toxoplasmosis is the treatment of toxoplasmosis, the effects of toxoplasmosis, such as stuff based on the density lipids, making essential profile for security. This study evaluates in vitro the anti-toxoplasmic potential of the ethanolic extract, ethyl acetate and aquatic fractions, essential oil and bisabolol isolated from Siparuna guianensis. Cell viability tests using NIH/3T3 murine fibroblasts were performed by the MTT colorimetric method. Anti-toxoplasmatics were evaluated using the β-galactosidase assay in two experimental conditions using T. gondii strain RH-2F1. Samples were tested in different variables of 15 to 500 μg/mL, while the testosterone assayed in the test ranged from 15 to 500 μg/mL. It was verified that ethanolic extract and a fraction of euphyl acetate of cytometic activity against the fibroblasts in the highest concentrations analyzed (250 and 500 μg/mL) and the essential oil in the concentration of 500 μg/mL. For the other calories, some have a significant cytotoxic effect, suggesting that the plant is well tolerated by the body. In the intracellular proliferation of the parasite when the treatment was carried out after the cellular activation, the control of the progesterone control and the parasitism was observed, being that only a fraction of standard of acetate demonstrated capacity of relevant toxoplasmosis, presenting IC 50 value of 77,21 μg/ml. In contrast, the aqueous fraction and theessential effect, the thermal effect against the parasite, are not a therapeutic alternative. It was verified that the inhibitory effect of the parasitism was more significant in the pre-treatment of the parasites before the cellular infection, evidencing a direct effect on the parasite. According to protocol specifications, in order to allow the use of data, according to their implications, in vivo parasitic infection models and identification of the major plant components are required. / A toxoplasmose, causada pelo protozoário intracelular obrigatório Toxoplasma gondii, é uma doença cosmopolita que atinge um terço da população mundial. Tipicamente a infecção pelo T. gondii é assintomática em indivíduos imunocompetentes, no entanto, várias manifestações clínicas podem acometer, sobretudo indivíduos imunocomprometidos e infectados congenitamente, levando a consequências fatais, o que torna essa doença um importante problema de saúde pública. Embora existam medicamentos para o tratamento da toxoplasmose, estes apresentam eficácia limitada e graves efeitos colaterais, tornando essencial a busca de novas terapias, com melhor perfil de segurança. Neste contexto, o objetivo do estudo foi avaliar in vitro o potencial anti-toxoplásmico do extrato etanólico, frações acetato de etila e aquosa, óleo essencial e do α-bisabolol isolado de Siparuna guianensis. Foi realizado teste de viabilidade celular utilizando fibroblastos murinos NIH/3T3, pelo método colorimétrico de MTT. A atividade anti-toxoplásmica foi avaliada por meio do ensaio da β-galactosidase em duas condições experimentais diferentes, utilizando parasitos da cepa RH-2F1 de T. gondii. As amostras foram testadas em diferentes concentrações variando de 15 a 500 μg/mL, sendo utilizado como controle negativo meio RPMI e como controle positivo a enrofloxacina. Verificou-se que o extrato etanólico e a fração acetato de etila apresentaram atividade citotóxica frente aos fibroblastos nas maiores concentrações analisadas (250 e 500 μg/mL) e o óleo essencial na concentração de 500 μg/mL. Para as demais concentrações, nenhuma apresentou efeito citotóxico significativo, sugerindo que a planta seja bem tolerada pelo organismo. Na avaliação da proliferação intracelular do parasito quando o tratamento foi realizado após a infecção celular, observou-se que os compostos da S. guianensis controlaram parcialmente o parasitismo, sendo que apenas a fração acetato de etila demonstrou capacidade toxoplasmicida relevante, apresentando valor de IC 50 de 77,21 μg/mL. Em contraste, a fração aquosa e o óleo essencial, apresentaram nenhum efeito tóxico contra o parasito, indicando que estes não são uma boa alternativa terapêutica. Verificou-se que o efeito inibitório do parasitismo foi mais significativo no pré- tratamento dos parasitos antes da infecção celular, evidenciando um efeito direto sobre o parasito. Em conclusão, os resultados indicam utilização favorável da S. guianensis, especialmente da fração acetato de etila como terapia alternativa da toxoplasmose, devido a sua baixa citotoxidade, sua ação direta contra o parasito, além do seu efeito concentração-dependente, porém estudos futuros utilizando modelos de infecção parasitária in vivo e identificação dos princípios ativos da planta são necessários.