O cateterismo vesical intermitente limpo é uma técnica terapêutica que vem sendo amplamente utilizada na prática urológica nos últimos trinta anos em pacientes com disfunção vesicoesfincteriana. Mesmo apresentando diversos benefícios, como: continência funcional, melhora da imagem corporal, diminuição do número de infecções do trato urinário, redução das complicações renais a longo prazo, promoção de um impacto positivo na qualidade de vida, é um procedimento que acarreta mudanças na vida dos pacientes e familiares e/ou cuidadores, podendo alterar sua qualidade de vida. O objetivo deste estudo foi identificar os fatores que interferem na qualidade de vida dos pacientes com disfunção vesicoesfincteriana em programa de cateterismo vesical intermitente limpo. Sessenta e seis pacientes foram incluídos no estudo e responderam um formulário com dados sociodemográficos e clínicos, o questionário de avaliação de qualidade de vida WHOQOL-bref e o Inventário de Depressão de Beck. Não há relação entre tempo de cateterismo e gênero, faixa etária, anos de estudo, situação conjugal, renda familiar, etiologia da disfunção vesicoesfincteriana, comorbidades, locomoção, agente que executa o procedimento e continência nos intervalos do procedimento. Baixa escolaridade reflete negativamente na percepção de qualidade de vida (p=0,040). A qualidade de vida afeta negativamente o domínio psicológico tanto quando há coexistência de comorbidades (p=0,011) como na doença adquirida (p=0,020). Pacientes vítimas de trauma e doença adquirida têm o domínio relações sociais prejudicado (p=0,032), e pacientes com doença congênita apresentam melhores escores neste domínio. Pacientes cadeirantes apresentam transtornos no domínio físico em sua qualidade de vida (p=0,001). A dependência na realização do procedimento afeta negativamente a qualidade de vida nos domínios físico (p<0,001), psicológico (p=0,022) e na percepção de qualidade de vida (p=0,042). Infecções urinárias sintomáticas acarretam transtornos no domínio meio ambiente (p=0,029). 71,9% dos pacientes que reutilizam o cateter após o uso não relataram infecções urinárias sintomáticas múltiplas (p=0,006). Sintomas depressivos não estão associados a gênero, anos de estudo, renda familiar, etiologia da disfunção vesicoesfincteriana, tempo no programa de cateterismo, locomoção, agente que executa o procedimento, continência nos intervalos do cateterismo e frequência. Adultos de 41 a 60 anos apresentam mais sintomas depressivos do que idosos (p=0,038), assim como aqueles que vivem com companheiro(a) (p=0,014) e os que apresentam comorbidades (p=0,006). Pacientes com sintomas depressivos apresentam todos os domínios de qualidade de vida piores do que aqueles sem sintomas depressivos, principalmente no domínio psicológico (p<0,001), relações sociais (p=0,001) e na percepção de qualidade de vida (p=0,001). Na análise multivariada, encontrou-se que a presença de sintomas depressivos, a necessidade de um cuidador para a realização do cateterismo vesical intermitente limpo, o fato de ser incontinente e cadeirante, estar há mais tempo no programa e ter uma baixa renda familiar, são preditores de uma pior qualidade de vida. Entendemos que a avaliação das condições sociais e clínicas, além da presença de sintomas depressivos é importante e necessário para se assegurar uma adequada adesão ao tratamento e acompanhamento dos pacientes em programa de cateterismo vesical intermitente limpo / Clean intermittent catheterization is a therapeutic technique that has been widely used in urological practice in the past thirty years in patients with bladder dysfunction. Despite presenting a number of benefits as: functional continence, improved corporal image, decreased level of urinary tract infections, reduction of renal complications in the long term, promotion of a positive tracks impact on quality of life, it is a procedure that entails changes in the lives of patients, family members and/or caretakers and it may impair his/her quality of life. The objective of this study was to identify factors that affect quality of life of patients with bladder dysfunction on program of clean intermittent catheterization. Sixty-six patients included in this study fulfilled a social-demographic and clinical form, and they answered questionnaires on quality of life WHOQOL-bref and Beck Depression Inventory. There is no relationship among time of catheterization, gender, age range, years of study, marital status, income family, etiology of bladder dysfunction, clinical illness, and locomotion, agent that performs the procedure and the intervals of continence procedure. Low education reflects negatively on the perception of quality of life (p=0.040). The quality of life negatively affects both the psychological domain well when there is clinical illness coexistence (p=0.011) as the disease acquired (p=0.020). Patients suffering from trauma and disease acquired have the social relationship domain harmed (p=0.032), and patients with congenital disease present the best scores in this domain. Wheelchair patients have disorders in the physical domain in their quality of life (p=0.001). The accomplishments dependence on the procedure negatively affects his/her quality of life in physical (p<0.001) and psychological domains (p=0.022) and perception of quality of life (p=0.042). Symptomatic urinary infections lead to disorders in environment domain (p=0.029). 71.9% of patients after using the catheter did not present a multiple symptomatic urinary infection (p=0.006). Depressive symptoms are not associated to gender, years of study, income family, etiology of bladder dysfunction, time in program of clean intermittent catheterization, locomotion, agent that performs the procedure, continence in intervals of the catheterization and frequency. Adults 41 to 60 years have more depressives symptoms than elders (p=0.038), just as those living with a partner (p=0.014) and those with clinical illness (p=0.006). Patients with depressive symptoms have all domains of quality of life worse than those who do not have depressive symptoms, mainly in the psychological domain (p<0.001), social relationships (p=0.001) and perception of quality of life (p=0.001). The multivariate analysis the presence of depressive symptoms, a caretaker\'s need for the accomplishment of the clean intermittent catheterization, the fact of being incontinent and wheelchair patients, to be there is more time in the program and to have a low family income, they are predictors of a worse life quality. It is believable that the evaluation of social and clinical conditions, besides the presence of depressive symptoms, is important and necessary to assure an appropriate adhesion to the treatment and patients\' attendance in program of clean intermittent catheterization

Introdução: O carcinoma urotelial de bexiga (CUB) é o segundo tumor mais frequente do trato urinário. A perda da função do p53 é a alteração mais conhecida do carcinoma urotelial de alto grau invasivo. Prima-1 é uma pequena molécula, a qual restaura a função do p53 mutado promovendo a morte celular em vários tipos celulares. O objetivo do nosso estudo foi analisar o efeito do Prima-1 na indução da apoptose mediada por p53 após indução do dano ao DNA em linhagens de CUB. Material e métodos: O mecanismo de ação do Prima-1 foi avaliado em duas linhagens celulares de câncer de bexiga, T24 que tem como característica a mutação do p53 e RT4 que possui p53 intacto. Características morfológicas da apoptose, alterações no potencial de membrana mitocondrial e análise da expressão de treze genes envolvidos na apoptose mediada por p53 foram avaliados através de observação microscópica e reação em cadeia da polimerase em tempo real quantitativa (qRT-PCR). Resultados: Prima-1 foi capaz de reativar a função da P53 na linhagem de câncer de bexiga com p53 mt, promovendo a apoptose através da expressão de Bax e Puma, ativação da cascata das caspases e ruptura da membrana mitocondrial, independente de Bax, na linhagem celular T24 (p53 mt). Conclusão: Prima-1 foi capaz de restaurar a atividade transcricional de p53. Estudos experimentais in vivo poderiam ser conduzidos no intuito de testar essa molécula como um novo agente terapêutico do CUB de alto grau, invasivo, que apresenta caracteristicamente mutação de p53 / Introduction: Urothelial carcinoma of the bladder is the second most common tumor of the urinary tract. Loss of p53 function is the main genetic alteration related to the development of high-grade muscle-invasive disease. Prima-1 is a small molecule that restores tumor suppressor function to mutant p53 and induces cell death in various cancer types. Our aim is to investigate the ability of Prima-1 to induce apoptosis after DNA damage in BC cancer cell lines. Material and Methods: The therapeutic effect of Prima-1 was studied in two BC cell lines, T24, characterized by p53 mutation, and RT4, with no mutation in the p53 gene. Morphological features of apoptosis, mitochondrial membrane potential changes and expression of thirteen genes involved in p53-induced apoptosis were assessed by microscopic observation and quantitative real-time PCR (qRT-PCR) Results: Prima-1 is able to reactivate P53 function in p53-mutated bladder cancer cell line promote apoptosis through the induction of Bax and Puma expression, activating the caspase cascade and disruption of mitochondrial membrane, independent of Bak, in T24 cell line (p53 mt). Conclusion: Prima-1 is able to restore the transcriptional activity of p53. Experimental studies in vivo could be conducted in order to test this molecule as a new therapeutic agent of the urothelial carcinoma of the bladder, which characteristically presents p53 mutation

Objetivo: Identificar os principais fatores prognósticos patológicos do carcinoma urotelial tratado com cistectomia radical e linfadenectomia pélvica, analisar o impacto desses na sobrevida livre de doença (RFS), câncer específico (CSS), geral (OS) e propor um conjunto de fatores que possa prever a evolução. Métodos: Realizamos levantamento dos casos de cistectomia radical e linfadenectomia no período de 2006 a 2009 no Hospital das Clinicas da FMUSP. Correlacionamos fatores prognósticos patológicos estádio (pT), grau tumoral, presença de metástase linfática (pN), invasão linfovascular (LVI), perineural (PNI) e presença de CIS com RFS, CSS e OS. Consideramos significante quando p > 0,05. Resultados: Avaliamos 128 casos que obedeceram aos critérios sendo 20 (15,6%) femininos e 108 (84,4%) masculinos, idades variando de 41 a 84 anos e média de 67 anos. Constatamos associação de recidiva com estádio >pT2 (p=0,032) e pN+ (p=0,003). Os fatores estádio >pT2 (p=0,001), pN+ (p=0,034) LVI+ (p=0,038), e PNI+ (p=0,024) tiveram associação com óbito pela doença e a morte geral com estádio >pT2 (p=0,001), pN+ (p=0,038) e PNI+ (p=0,01). A análise multivariada demonstrou que apenas estádio >pT2 e pN+ são os fatores prognósticos independentes na RFS, CSS e OS. Conclusão: A análise dos fatores patológicos após cistectomia radical e linfadenectomia demonstrou que estádio >pT2 e pN+ são os fatores prognósticos mais importantes no CaB / Objective: To identify the most important pathologic prognostic factors for urothelial bladder cancer treated by cystectomy and pelvic lymphadenectomy, analyze the impact of these on recurrence and mortality and suggest a group of factors that can predict the outcome after surgery. Method: We review all radical cystectomy and lymphadenectomy cases at the Clinical Hospital of São Paulo Medical School from 2006 to 2009. We correlate the following pathologic prognostic factors tumor stage (pT), tumor grade, lymphonodal metastasis (pN), lymphovascular invasion (LVI), perineural invasion (PNI), presence of CIS with RFS, CSS and OS. We considered a significant association p<0.05. Results: We selected 128 cases for this study. There were 20 (15.6%) females and 108 (84.4%) males, ages ranging from 41 years to 84 years and an average 67 years old. The tumor recurrence was associated with stage >pT2 (0,032) and pN+ (p=0.003). Stage >pT2 (p=0.001), pN+ (p=0.034), LVI+ (p=0.038) and PNI+ (p=0.024) was associated with death by cancer and overall death with stage >pT2 (p=0.001), N+ (p=0.038) and PNI (p=0.01). The multivariate analysis found that only stage >pT2 and pN+ were independent prognostic variable for RFS, CSS and OS. Conclusion: The analysis of pathologic prognostic factors after radical cystectomy and pelvic lymphadenectomy show that stage >pT2 and pN+ has strong association with RFS, CSS and OS

Câncer de bexiga (CB) é a segunda doença mais prevalente do trato urinário. Atualmente as principais terapias para o CB apresentam baixa eficácia, altas taxas de recorrência e vários efeitos adversos. Assim, avalia-se o potencial de novas moléculas para a terapia do CB. Quercetina (QT) é um flavonóide com propriedades inibidora da proliferação celular e apoptótica que são interessantes para o tratamento do câncer, porém é um composto instável e fotossensível, o que inviabiliza sua administração na forma livre. Desta forma, o encapsulamento da QT em carreadores lipídicos nanoestruturados (CLN) funcionalizados com folato (CLN-F) pode ser um sistema efetivo de entrega de QT em células de CB que poderá superar os desafios da terapia intravesical do CB. O encapsulamento da QT pode aumentar a estabilidade da QT, sua permeação pelo urotélio, internalização em células tumorais, seu tempo de residência na bexiga e sua eficácia farmacológica. Os objetivos deste trabalho foram preparar, caracterizar e avaliar a citotoxicidade de QT livre e encapsulada em CLN e CLN-F em células de CB. O CLN e CLN-F foram preparados pelo método de emulsão e sonicação. A funcionalização do CLN foi realizada pela reação do estabilizante Pluronic F68 com folato (PF68F). Esta funcionalização foi avaliada por espectroscopia de ressonância magnética Nuclear (RMN) unidimensional de 1H. Os CLNs foram caracterizados quanto ao diâmetro, índice de polidispersão (PdI), potencial zeta (PZ), cristalinidade, eficiência de encapsulamento (EE) e morfologia. Além disso, foi avaliado o perfil de liberação da QT, a atividade antioxidante e a citotoxicidade da QT livre e encapsulada. A funcionalização foi confirmada pelos espectros de RMN que apresentaram sinais atribuídos ao PF68 e ao folato. O diâmetro, PdI e o PZ dos CLN foram 176,5 nm, 0,124 e -11,4 mV, respectivamente. O CLN-F apresentou 197,9 nm de diâmetro, 0,160 de PdI e -17,5mV de PZ. O encapsulamento da QT não alterou significativamente estes parâmetros para ambas as partículas. Obteve-se uma alta eficiência de encapsulamento da QT, para os dois carreadores (~98%), devido, provavelmente, ao baixo valor de índice de recristalização (~28) dos CLNs. Os CLN apresentam forma esférica, estabilidade por 330 dias e um perfil de liberação sustentada da QT. O IC50 do CLN-F-QT (83,4 ?g/mL) foi menor que o IC50 do CLN-QT (94,9 ?g/mL) provavelmente devido ao aumento da internalização causada pela funcionalização das partículas com folato. Os CLN-QT e CLN-F-QT apresentaram alta atividade antioxidante. Os resultados obtidos sugerem que o CLN-F-Q é um sistema com potencial para a futura terapia do CB, pois apresenta tamanho menor que 200 nm, baixo PdI, alta estabilidade, EE e atividade antioxidante, liberação sustentada além de ser citotóxico para as células RT4. / Bladder cancer (BC) is the second most prevalent tumor of urinary tract. Currently the main BC therapies have low effectiveness, high recurrence rate and several adverse effects. Thus, new molecule have been investigate to CB therapy. Quercetin (QT) is a flavonoid with interesting properties for cancer therapy such as inhibition of cancer cell proliferation and apoptosis. However, QT is an unstable and photosensitive compound. Therefore, QT encapsulated in nanostructure lipid carriers (NLC) functionalized with folate (F-NLC) might be an alternative targeting system of QT for tumor cell and can be strategy to overcome intravesical CB therapy challenges. The QT encapsulation can improve QT stability, increase its permeation in the urothelium and uptake in tumor cells, increase retention time in the bladder and enhancing its pharmacological efficacy. Aims of this study were preparation, characterization of NLC-QT and F-NLC-QT and cytotoxic evaluation of these particles in BC cells. NLC and F-NLC were prepared by ultrasonication method. NLC were funcionalized by conjugated between surfactant Pluronic and folate (PL68F). This conjugation was characterized by proton nuclear magnetic resonance spectroscopy (NMR). The particles were characterized regarding to size, polydispersity index (PdI), zeta potential (ZP), crystallinity, encapsulation efficiency (EE) and morphology. Furthermore, stability, release profile, cytotoxicity and antioxidant activity of QT encapsulated or not in NLC, were evaluated. RMN spectrums confirmed the PF68 functionalization, exhibiting peaks attributed to PF68 and folate. Size, PdI and ZP of NCL were respectively 176.5 nm, 0.124 and -11.4, whereas F-NLC showed 197.9 nm of size, 0.160 of PdI and ZP of -17.5mV. The QT encapsulation did not affect these physical parameters. Low values of crystalization index (~28) might promote high EE of quercetin (~98%). NLC shows spherical shape, sustained release profile of QT and were stable for 330 days. IC50 of NLC-QT (87.4 ?g/mL) was smaller thanthe IC50 of F-NLC-QT (94.9 ?g/mL). This difference might be explained by the increase of NLC uptake by endocytosis mediated by folate receptor. NLC-QT and F-NLC-QT showed high antioxidant activity. Therefore, our results suggest that QT-F-NLC is a carry system with potential for future BC therapy that show size smaller than 200 nm, low PdI, high long-term stability, high EE and antioxidant activity, sustained release and cytotoxic to CB cells (RT4).

INTRODUÇÃO: A avaliação da Qualidade de Vida tem se destacado de modo crescente em pesquisas clínicas de pacientes com transplante renal. O WHOQOLAbreviado é um dos instrumentos usados para avaliar a Qualidade de Vida em várias populações. O objetivo deste estudo foi avaliar e comparar a Qualidade de Vida nos pacientes transplantados renais submetidos à ampliação vesical e transplantados renais utilizando o WHOQOL-Abreviado e verificar a co-interferência de outros fatores sua Qualidade de Vida desses grupos. MÉTODOS: este é um estudo caso-controle e foi realizado na Unidade de Transplante Renal da Divisão de Clínica Urológica do Instituto Central da Faculdade de Medicina da Universidade de São Paulo, de julho a novembro de 2007. Foram incluídos no estudo todos os pacientes transplantados renais submetidos à Ampliação Vesical entre 1972 e 2004 com enxerto funcionante (Grupo Caso) e seus respectivos pares (Grupo Controle). Participaram 15 pacientes no Grupo Caso e 27 no Grupo Controle. Através do prontuário médico e de uma ficha de caracterização foram coletados os dados demográficos, sociais e econômicos. A Qualidade de Vida foi avaliada apenas uma vez durante a entrevista com a pesquisadora. RESULTADOS: Os grupos foram muito semelhantes entre si na maioria das variáveis analisadas. No Grupo Caso observou-se menor renda pessoal (p=0,013) e menor IMC (p=0,022). A avaliação da Qualidade de Vida foi semelhante em quase todos os domínios do WHOQOLAbreviado, a única diferença ocorreu no Domínio Relações Sociais, onde o Grupo Caso teve um escore menor que o Grupo Controle (p=0,058). Houve uma integração significativa entre o Domínio Relações Sociais e a faceta suporte (apoio) social (r=0,703; p=0,004). CONCLUSÃO: A Qualidade de Vida foi muito semelhante entre os dois grupos de transplantados renais. O Grupo Caso apresentou menor resultado no Domínio Relações Sociais, sendo que esse resultado parece estar diretamente ligado à particularidade da patologia urológica do grupo / The evaluation of health-related Quality of Life is fundamental when searching for better treatment in renal transplantation. The WHOQOL-Bref is used questionnaire to assessment for many population. The purpose of this study was evaluated and compared the Quality of Life of renal transplant patients with bladder augmentation using WHOQOL-Bref and check the co-interference of other factors their Quality of Life of these groups. METHODS: This is case-control study, performed in a Unit of Renal Transplant of the Division of Urology of the Central Institute of the Hospital of the Clinics of the College of Medicine of the University of São Paulo. Were included in the study all patients of the renal transplant with bladder augmentation between 1972 and 2004 with functioning graft (Case Group) and their peers (Control Group). Fifteen Case Group and 27 Control Group patients were enrolled. Through the medical records and a form of characterization data were collected demographic, social and economic. The Quality of Life was assessed once an interview with one of the authors. RESULTS: Both groups were very similar in most of the analyzed domains. In Case Group if it was observed lower personal income (p = 0,013) and lower BMI (p = 0,022). The assessment of Quality of Life was similar in almost all areas of WHOQOL-Bref, the only difference occurred in Social Relations Domains, where the Case Group if had a score lower than the Control Group (p=0,058). There was a significant integration between the Social Relations Domains facet support social (r = 0,703 and p = 0,004). CONCLUSION: The Quality of Life was very similar between the two groups of renal transplant. The Case Group presented result in lower Social Relations Domains, and that outcome appears to be directly connected to the peculiarity of urological pathology of the group

Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2016-04-27T13:52:13Z No. of bitstreams: 1 lidyanneilidiadasilvadepaula.pdf: 1449976 bytes, checksum: 106047368ce623ea5be34f11095b712f (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2016-06-02T15:18:46Z (GMT) No. of bitstreams: 1 lidyanneilidiadasilvadepaula.pdf: 1449976 bytes, checksum: 106047368ce623ea5be34f11095b712f (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-02T15:18:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lidyanneilidiadasilvadepaula.pdf: 1449976 bytes, checksum: 106047368ce623ea5be34f11095b712f (MD5) Previous issue date: 2016-02-04 / Introdução: A bexiga hiperativa é o distúrbio miccional mais prevalente na infância, tendo como principal manifestação a urgência miccional. Geralmente, a uroterapia é a primeira linha de tratamento, que pode ser associada ou não a anticolinérgicos. A Estimulação Elétrica Transcutânea Parassacral (EETP) foi introduzida como uma alternativa para o tratamento de crianças com hiperatividade do detrusor, porém os protocolos de tratamentos descritos exigem várias sessões semanais, o que dificulta a adesão da criança ao tratamento. Assim, esse estudo tem o objetivo de avaliar a eficácia da EETP em sessões únicas semanais no tratamento da bexiga hiperativa em crianças. Métodos: Estudo prospectivo, controlado e randomizado, no qual 16 crianças foram divididas em dois grupos: GC (uroterapia e estimulação elétrica placebo) e GE (uroterapia e EETP). Em ambos os grupos, foram realizadas 20 sessões, uma vez por semana, durante vinte minutos cada. As crianças foram reavaliadas ao final das 20 sessões e 60 dias após o término do tratamento com diário miccional diurno e noturno, escala visual analógica, critérios de Roma III e escala de Bristol. Resultados: Os grupos foram semelhantes quanto à idade, gênero e etnia. Não foram encontradas diferenças entre os grupos quanto, as medições volumétricas feitas no diário miccional, a frequência miccional e a constipação intestinal avaliada através dos critérios de Roma III e da escala de Bristol. Sessenta dias após o tratamento, notou-se melhora significativa no GE da urgência miccional (p=0,030) e, naqueles com enurese, no percentual de noites secas (0,039). Ao final das 20 sessões e após 60 dias de tratamento os responsáveis pelas crianças do GE perceberam uma maior melhora em relação aos responsáveis pelas crianças do GC (p=0,052 e 0,046 respectivamente) avaliado pela EVA. Conclusões: A EETP realizada com sessões únicas semanais se mostrou eficaz no tratamento da bexiga quanto aos sintomas de urgência urinária, enurese e na percepção dos responsáveis, porém novos estudos com populações maiores se faz necessários para assegurar estes resultados. / Introduction: The overactive bladder is the voiding disorder most prevalent in childhood, and its main manifestation is urinary urgency. In general, urotherapy is the first choice of treatment. It may be associated with anticholinergics or not. Parasacral Transcutaneous Electrical Neural Stimulation (PTENS) was introduced as an alternative for the treatment of children with detrusor overactivity, but the treatment protocols described require several sessions per week, making it difficult for the child to adhere to the treatment. Thus, this study aims to evaluate the effectiveness of PTENS in single weekly sessions in the treatment of overactive bladder in children. Methods: Prospective, controlled and randomized study in which 16 children were divided into two groups: CG (urotherapy and electrical stimulation placebo) and SG (urotherapy and PTENS). In both groups, 20 weekly sessions, with duration of twenty minutes each, were carried out. The children were reassessed at the end of the 20 sessions, and 60 days after the completion of treatment, with both a daily daytime and a voiding diary, visual analog scale, Rome III diagnostic criteria and the Bristol Scale. Results: The groups were similar in age, gender and ethnicity. No differences were found between the groups regarding the volumetric measurements made in the voiding diary, urinary frequency and constipation evaluated by the Rome III criteria and the Bristol Scale. Sixty days after treatment, a significant improvement was found in the SG group (p = 0.030) regarding urgency, as well as in those with enuresis, regarding the percentage of dry nights (0.039). At the end of 20 sessions and after 60 days of treatment, those responsible for the children in the SG perceived greater improvement over those responsible for children in the CG (p = 0.052 and 0.046 respectively), measured by the VAS. Conclusions: The PTENS performed with single weekly sessions proved effective in treating the bladder for symptoms of urinary urgency, enuresis and in the perception of those responsible for the children, but further studies with larger populations are needed to corroborate these results.

Orientadores: Wagner José Fávaro, Patrick Vianna Garcia / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-24T14:25:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Carniato_AmandaPocol_M.pdf: 2911906 bytes, checksum: 77e9b9f70f794e03c6fff7075745bfb0 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Introdução: A alta recorrência do câncer de bexiga não-músculo invasivo (CBNMI) pode estar relacionada aos baixos efeitos das atuais terapias sobre os receptores Toll-like (TLRs) e a angiogênese. Atualmente, a terapia utilizada contra o CBNMI é a imunoterapia com BCG (Bacillus Calmette-Guerin) associada com a ressecção transuretral. Entretanto, a utilização do BCG está associada a efeitos colaterais, desde sintomas irritativos leves até reação sistêmica grave. Nesse contexto, uma nova perspectiva é representada pelo imunomodulador P-MAPA (agregado polimérico anidrídico fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio). Objetivos: Os objetivos deste estudo foram caracterizar os efeitos da ativação dos mediadores das vias de sinalização dos TLRs 2, 4 (MyD88, IKK?, NF-kB, TNF-?, IL-6, TRIF, IRF-3, IFN-?), INOS e p53 na regulação do processo de angiogênese (VEGF e endostatina) e apoptose (BAX) frente ao uso do P-MAPA e BCG no CBNMI. Materiais e Métodos: Para a indução do CBNMI, 30 animais Fischer 344 induzidos quimicamente com uma dose intravesical de 1,5 mg/kg de N-metil-N-nitrosouréia (MNU) a cada 15 dias, totalizando 4 doses. Outros 10 animais Fischer 344 que não receberam MNU foram considerados como Grupo Controle. Duas semanas após a indução, os animais foram divididos em 3 grupos e tratados semanalmente por 6 semanas consecutivas via intravesical: Grupo Controle: 0,3 mL de solução fisiológica 0,9% ; Grupo MNU (Câncer): mesmo tratamento que o grupo Controle; Grupo MNU-BCG: 106 UFC ¿ 40 mg de BCG; Grupo MNU-P-MAPA: 5 mg/Kg de P-MAPA. Após tratamento os animais foram eutanasiados e as bexigas urinárias coletadas e submetidas às análises histopatológicas, imunohistoquímicas e Western Blotting. Resultados: O MNU demonstrou-se efetivo na indução do CBNMI, caracterizando carcinoma com invasão da lâmina própria (pT1), carcinoma papilífero (pTa), carcinoma in situ (pTis) e metaplasia escamosa. O grupo MNU-P-MAPA apresentou recuperação histopatológica em 100% dos animais, não apresentando alterações neoplásicas, enquanto que o grupo MNU-BCG recuperou apenas 60% dos animais. Os níveis proteicos para TLR2 e TLR4, dos intermediários da via de sinalização não-canônica (TRIF, IRF-3, IFN-?), p53 e BAX foram significativamente maiores no grupo MNU-P-MAPA em relação aos demais grupos experimentais. Sendo que para os intermediários da via de sinalização canônica (MyD88, IKK?, NF-kB, TNF-?, IL-6) foram maiores no grupo MNU-BCG. Os níveis proteicos de iNOS estiveram aumentados em ambos os tratamentos MNU-BCG e MNU-P-MAPA. E para VEGF, os níveis foram significativamente aumentados nos grupos MNU e MNU-BCG em relação aos demais grupos experimentais. Em contraste, a endostatina mostrou-se reduzida no grupo MNU e aumentada no grupo MNU-P-MAPA. Conclusão: Assim, pode-se concluir que a imunoterapia com P-MAPA promoveu distinta ativação do sistema imune inato mediada por TLRs 2 e 4 em relação ao BCG, resultando no aumento da via de sinalização para interferons, morte celular imunogênica, além da restauração dos níveis proteicos de p53 induzindo a apoptose e desaceleração do processo de angiogênese. A ativação da via de sinalização para interferons se correlacionou com a significativa melhora do CBNMI e ocorrência de apoptose / Abstract: Introduction: The high recurrence of non-muscle invasive bladder cancer (NMIBC) may be related to the low effect of the current therapies about receptors Toll-like (TLRs) and angiogenesis. Currently, the therapy used against the NMICB is the immunotherapy with BCG (Bacillus Calmette-Guerin) associated with the transurethral resection. However, the use of BCG is associated to side effects, since symptoms irritative mild to severe systemic reaction In this context, a new perspective is represented by the immunomodulatory P-MAPA (polymeric aggregate anidrídico phospholinoleate-palmitoleate ammonium and magnesium). Aims: The aims of this study were characterize the effects of activation of mediators of signaling pathways of TLRs 2, 4 (MyD88, IKK?, TNF-?, IL-6, TRIF, IRF-3, IFN-?, iNOS) and p53 in regulating the process of angiogenesis (VEGF, HIF, Endostatin) and apoptosis (BAX) compared to using P-MAPA and BCG in the NMIBC. Materials and Methods: For NMIBC induction, 30 Fischer 344 animals were chemically induced with intravesical dose of 1.5 mg / kg of N-methyl-N-nitrosourea (MNU) every 15 days, totaling 4 doses. Another 10 Fischer 344 animals that not received MNU were considered as Control Group. Two weeks after induction, the animals were divided into 3 groups and treated intravesically for 6 consecutive weeks: Control Group: 0.3 ml of 0.9% saline; MNU Group (Cancer): same treatment as the Control group; BCG-MNU Group: 106 UFC - 40 mg of BCG; MNU-P-MAPA group: 5 mg/kg P-MAPA. After treatment, the animals were euthanized and the urinary bladders collected and subjected to histopathological, immunohistochemical and Western blotting analyzes. Results: The MNU demonstrated to be effective in inducing NMIBC, presenting undifferentiated tumor, featuring carcinoma with invasion of the lamina propria (pT1), papillary (pTa), carcinoma in situ (PTis) and squamous metaplasia. The MNU-P-MAPA group presented histopathological recovery in 100% of animals showing no neoplasic alterations, while MNU-BCG group recovered only 60% of animals. Protein levels of TLR2 and TLR4, the intermediary of non-canonical signaling pathway (TRIF, IRF-3, IFN-?), p53 and BAX were significantly higher in MNU-P-MAPA group compared to other experimental groups. Whereas the intermediate canonical signaling pathway of TLRs (MyD88, IKK?, TNF-?, IL-6) were higher in MNU-BCG group. Protein levels of iNOS were high in both MNU-BCG and MNU-P-MAPA treatment groups. Protein levels for VEGF and HIF were significantly increased in MNU and MNU-BCG group compared to the other experimental groups. In contrast, endostatin was reduced in MNU group and increased in the MNU-P-MAPA group. Conclusion: Thus, it can be concluded that immunotherapy with P-MAPA promoted distinct activation of the innate immune system mediated by TLRs 2 and 4 compared to BCG, resulting in increased signaling pathway for interferon, immunogenic cell death, in addition to restoration of p53 protein levels that leads to apoptosis and slowing the process of angiogenesis. The activation of the signaling pathway for interferon correlated with significant improvement NMIBC and the occurrence of apoptosis / Mestrado / Biologia Tecidual / Mestra em Biologia Celular e Estrutural

Orientador: Edson Antunes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-25T08:33:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alexandre_EduardoCosta_M.pdf: 1619659 bytes, checksum: 6844ca6a5644be1025879f062b675420 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Estudos clínicos vêm relacionando a síndrome metabólica / obesidade a sintomas do trato urinário inferior, também referidos como LUTS (da sigla Lower Urinary Tract Symptoms), os quais compreendem diversas queixas relacionadas a problemas de armazenamento e/ou esvaziamento da bexiga urinária. Estes sintomas acometem milhares de pessoas em todo o mundo, estando relacionados à frequência, urgência e noctúria, e frequentemente associados à bexiga hiperativa, que pode evoluir para incontinência urinária. O trato urinário inferior (TUI) é composto basicamente pela bexiga e uretra. A dinâmica vesicoesfincteriana compreende duas fases: Fase de armazenamento e Fase de eliminação. Estes processos envolvem uma sincronia de ações do músculo liso detrusor e uretra para um correto ciclo miccional. A despeito dos estudos epidemiológicos apontarem para uma correlação positiva entre síndrome metabólica/obesidade e LUTS, os mecanismos fisiopatológicos envolvidos permanecem pouco compreendidos. Portando, utilizando um modelo animal de obesidade associada à bexiga hiperativa, procuramos analisar as alterações causadas pela obesidade no trato urinário inferior antes e após o tratamento com o ativador da GCs, BAY 60-2770. O BAY 60-2770 faz parte de uma nova classe de drogas, denominadas ativadores da GCs. Essas drogas são capazes de ativar a GCs de maneira independente do NO e/ou grupamento heme, e apresentam uma potência aumentada quando o ferro se encontra em sua forma oxidada (Fe3+). Especificamente, realizamos os seguintes experimentos em camundongos controles e obesos: 1) cistometria; 2) curvas concentração-resposta a diferentes agentes contráteis e relaxantes na bexiga e/ou uretra; 3) determinação dos níveis de GMPc; 4) expressão das subunidades de ?1 e/ou ?1 da GCs; 5) medida das espécies reativas de oxigênio. O camundongo obeso apresentou um padrão miccional irregular caracterizado pelo aumento do número de contrações miccionais e de contrações involuntárias, alterações normalizadas após o tratamento com BAY 60-2770. Na bexiga, o carbacol, KCl e CaCl2 produziram contrações de forma concentração-dependente em tiras isoladas de bexiga, contrações que foram maiores em animais obesos quando comparado aos controles. O tratamento com BAY 60-2770 normalizou as contrações da bexiga em animais obesos. Um aumento de 78% nas espécies reativas de oxigênio foi observado em bexigas de animais obesos, resultado não alterado pelo BAY 60-2770. O tratamento com BAY 60-2770 gerou um aumento de 10 vezes nos níveis de GMPc em bexiga de animais obesos, sem afetar a produção desse nucleotídeo cíclico nos animais controles. A expressão protéica das subunidades ?1 e ?1 da GCs estava 40% diminuída em bexiga de animais obesos, esse resultado foi normalizado após o tratamento com BAY 60-2770. Em uretra, relaxamentos induzidos por NO (nitrito de sódio acidificado), doadores de NO (s-nitrosoglutationa e nitroglicerina) e BAY 41-2272 (estimulador da GCs) se apresentaram reduzidos em obeso quando comparado ao grupo controle. O relaxamento uretral por BAY 60-2770 apresentou um padrão diferente e foi 43% maior em camundongos obesos, resultado acompanhado pelo aumento nos níveis de GMPc. A oxidação da GCs potencializou o relaxamento uretral induzido por BAY 60-2770. O tratamento crônico reverteu completamente as disfunções uretrais dos animais obesos. A produção de espécies reativas de oxigênio estava aumentada e a expressão da subunidade ?1 da GCs diminuída na uretra do animal obeso, ambas as alterações foram revertidas pelo tratamento com BAY 60-2770. Concluímos então que as contrações aumentadas da bexiga e a disfunção no relaxamento uretral estão associadas com a produção de espécies reativas de oxigênio e "downregulation" da sinalização GCs ¿ GMPc. A prevenção da degradação da GCs pelo tratamento crônico com BAY 60-2770 melhora as disfunções miccionais de camundongos obesos. Portanto, o BAY 60-2770 pode ser de grande valor terapêutico no tratamento de complicações urológicas associadas à obesidade / Abstract: Clinical studies have shown an association between metabolic syndrome / obesity and lower urinary tract symptoms (LUTS), name given to a group of symptoms affecting the bladder during urine storage and voiding. These symptoms affect thousands of people throughout the world and are related with frequency, urgency, nocturia and often associated with overactive bladder (OAB), which may result in urinary incontinence. The low urinary tract consists of the bladder and urethra. Vesical sphincter dynamics is divided into two phases: storage and voiding phase. Each phase requires a coordinated interaction between urethra and bladder to allow a healthy urinary function. Despite epidemiological studies suggest a positive correlation between metabolic syndrome / obesity and LUTS, its pathophysiological mechanisms are still poorly studied. Therefore, using an animal model of obesity associated OAB we studied low urinary tract before and after treatment with the sGC activator BAY 60-2770. BAY 60-2770 is a novel class of drugs, classified as soluble guanylyl cyclase (sGC) activators. This class of drugs acts by NO- and heme-independent mechanisms and present a higher potency to oxidated form of sGC heme iron (Fe3+). More specifically we conducted the fallowing experiments: 1) cystomettry; 2) concentration ¿ response curves to contractile and relaxing agents in bladder and/or urethra; 3) determination of cGMP levels; 4) evaluated expressions of ?1 and/or ?1 sGC subunits; 5) measurement of reactive oxygen species. Obese mice displayed an irregular micturition pattern characterized by significant increases in voiding and non-voiding contractions, both of wich were normalized by BAY 60-2770 treatment. In the bladder, carbachol, KCl and CaCl2 produced concentration-dependent contractions in isolated bladder strips that were markedly greater in obese compared with control group. BAY 60-2770 treatment normalized the bladder contractions in obese group. A 78% increase in reactive-oxygen species (ROS) generation in bladder tissues of obese mice was observed, and that was unaffected by BAY 60-2770. Treatment with BAY 60-2770 generated a 10-fold increase in GMPc levels in bladder from obese mice, without affecting this nucleotide level in lean group. Protein expression of ?1 and ?1 subunits of sGC was decreased by 40% in bladder tissues of obese animals, which was restored by BAY 60-2770. In the urethra, relaxations induced by NO (acidified sodium nitrite), NO-donors (S-nitrosolutathione and glyceryl trinitrate) and BAY 41-2272 (sGC stimulator) were markedly reduced in obese compared with control mice. As opposed, urethral relaxations induced by BAY 60-2770 were 43% greater in obese mice, which was accompanied by increases in cGMP levels. Oxidation of sGC with potentiated BAY 60-2770-induced USM responses in control group. Long-term oral BAY 60-2770 administration fully prevented the impairment of urethral relaxations in obese mice. Reactive-oxygen species (ROS) production was enhanced, whereas protein expression of ?1 sGC subunit was reduced in USM from obese mice, both of which were restored by BAY 60-2770 treatment. In conclusion, enhanced bladder contractions and impaired urethral relaxations in obese mice are associated with ROS generation and downregulation of sGC- cGMP signaling. Prevention of sGC degradation by long-term BAY 60-2770 administration ameliorates the micturition dysfunction in obese mice. Therefore, BAY 60-2770 could be of great therapeutic value in the treatment of urological complications associated with obesity / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Orientador: Gustavo Pereira Fraga / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-21T03:01:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Pereira_BrunoMonteiroTavares_M.pdf: 4626301 bytes, checksum: 9451595a344efa48b56d290e6bb08e5d (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: Objetivos: este estudo revisa o estado atual e as implicações do trauma de bexiga nas últimas duas décadas e traz à tona o significado do uso de escores de trauma como uma ferramenta neste cenário, bem como expõe o impacto pouco explorado das lesões associadas ao trauma de bexiga, principalmente lesões do reto, sobre a morbidade e sobrevida. Métodos: gênero, idade, mecanismo / localização dalesão, lesões associadas, pressão arterial sistólica (PAS), Escore de Trauma Revisado (Revised Trauma Score - RTS), Escore de Gravidadade da Lesão (InjurySeverity Score - ISS), Escore de Severidade da Lesão no Trauma (Trauma InjurySeverity Score - TRISS), complicações e tempo de permanência hospitalar, foram analisados em estudo prospectivo de lesões vesicais coletados no período entre 1990 a 2009 em um centro de referência para trauma. Resultados: Entre 2.575 pacientes que foram submetidos à laparotomia após trauma, 111 (4,3%) apresentaram lesões de bexiga grau II ou maior, sendo 83,8% (n = 93) homens, idade média de 31,5 anos (± 11,2). Mecanismo contuso foi responsável por 50,5% (n = 56) - acidentes com veículos automotores (47,3%) e atropelamentos (29,1%). Ferimentos causados por projétil de arma de fogo representaram 87,3% dos casos de mecanismo penetrante. A lesão mais freqüente foi grau IV (51 pacientes, 46%) de acordo com a classificação da Associação Americana para Cirurgia do Trauma (AAST - OIS). A média do ISS foi de 23,8 (± 11,2), TRISS 0,90 (± 0,24), e RTS 7,26 (± 1,48). Gravidade da lesão da bexiga, mecanismo, localização da lesão da bexiga, e nem lesão do reto concomitantemente foram associadas a complicações, maior tempo de permanência hospitalar ou morte. A taxa de mortalidade foi de 10,8%. ISS > 25 (p = 0,0001), PAS <90 mmHg (p = 0,0001), RTS <7,84 (p = 0,0001) e fratura pélvica (p = 0,0011) foram altamente associados com o prognóstico sombrio e morte com razão de risco de 5,46, 2,70, 2,22, e 2,06, respectivamente. Conclusões: Escores de trauma e fratura pélvica demonstraram impacto na sobrevida no trauma de bexiga. A taxa de mortalidade manteve-se estável durante as últimas duas décadas / Abstract: Objectives: this study reviews the current status and implications of bladder trauma in the past two decades and brings out the significance of using trauma scores as a tool in this scenario as well as exposes the unexplored impact of injuries associated with trauma to the bladder, especially lesions of the rectum, on morbidity and survival Methods Gender, age, mechanism/location of damage, associated injuries, systolic blood pressure (SBP), Revised Trauma Score (RTS), Injury Severity Score (ISS), Trauma Injury Severity Score (TRISS), complications, and length of stay (LOS) were analyzed in a prospective collected bladder injuries AAST-OIS grade II database (American Association for the Surgery of Trauma Organ Injury Scaling) from 1990 to 2009 in a trauma reference center. Results Among 2,575 patients experiencing laparotomy for trauma, 111 (4.3 %) presented bladder ruptures grade II, being 83.8 % (n = 93) males, mean age 31.5 years old (±11.2). Blunt mechanism accounted for 50.5 % (n = 56)- motor vehicle crashes 47.3 % (n = 26), pedestrians hit by a car (29.1 %). Gunshot wounds represented 87.3 % of penetrating mechanism. The most frequent injury was grade IV (51 patients, 46 %). The mean ISS was 23.8 (±11.2), TRISS 0.90 (±0.24), and RTS 7.26 (±1.48). Severity (AAST-OIS), mechanism (blunt/penetrating), localization of the bladder injury (intra/extraperitoneal, associated), and neither concomitant rectum lesion were related to complications, LOS, or death. Mortality rate was 10.8 %. ISS > 25 (p = 0.0001), SBP < 90 mmHg (p = 0.0001), RTS < 7.84 (p = 0.0001), and pelvic fracture (p = 0.0011) were highly associated with grim prognosis and death with hazard ratios of 5.46, 2.70, 2.22, and 2.06, respectively. Conclusions Trauma scores and pelvic fractures impact survival in bladder trauma. The mortality rate has remained stable for the last two decades / Mestrado / Fisiopatologia Cirúrgica / Mestre em Ciências da Cirurgia

Abstract This study examined the role of tumor suppressor neurofibromin and Protein kinase C (PKC) in urinary bladder cancer, and the effect of PKC inhibitors on cancer cell behaviour. Tumor suppressor protein neurofibromin is a product of the NF1 gene, a mutation of which causes the most common hereditary tumor syndrome, type 1 neurofibromatosis. NF1 gene mutations and changes in expression have been demonstrated in malignancies, unrelated to type 1 neurofibromatosis. The best known function of neurofibromin is its Ras GTPase accelerating function. Thus, it functions as a Ras inactivator. This study demonstrated for the first time that the NF1 gene is expressed in normal and malignant urinary bladder epithelium and in cultured bladder carcinoma cells in mRNA and at the protein level. Furthermore, neurofibromin expression is decreased during bladder carcinogenesis. It can be speculated that this may lead to increased Ras activity in urinary bladder cancer. The PKC family is composed of several different isoenzymes which are responsible for a number of important intracellular events and cellular functions. Many of these are also important in cancer development and progression. The results demonstrate changes in expression of PKC α and βI isoenzymes in urinary bladder carcinoma. Furthermore, the results relate the increased expression of isoenzymes to increased PKC enzyme activity and the high proliferation rate of the cancer cells. In addition, this study utilizes small molecular inhibitors of PKC isoenzymes in order to study the effect of the inhibition of these isoenzymes on cancer cell behaviour in vitro and in vivo. The study mainly focuses on the function of PKC α and βI isoenzymes and on the effects of inhibition of these by using Go6976. The results show that Go6976 inhibits cancer cell growth, migration and invasion in vitro, and tumor growth in a mouse model. The use of Go6976 induces changes in desmosomes and adherens junctions, and in focal adhesions and hemidesmosomes. The results also show that Go6976 functions as a cell cycle checkpoint abrogator and increases the cytotoxicity of two classical chemotherapeutic agents, doxorubicin and paclitaxel. In the future, it may be possible that Go6976 or related drugs could be used in clinical cancer treatments.