A técnica de transferência nuclear é uma ferramenta que possibilita a produção de embriões clones que podem ser utilizados tanto na clonagem reprodutiva, proporcionando o nascimento de produtos, como modelo para o estudo de diversos mecanismos fisiológicos durante o desenvolvimento embrionário. Este trabalho teve como objetivos a otimização da técnica de clonagem no Laboratório de Embriologia e Biotécnicas de Reprodução (FAVET, UFRGS), avaliar a taxa de sucesso da clonagem interespécie, e testar e eficiência da utilização de oócitos vitrificados como citoplasmas receptores para a reconstrução dos embriões clones, sendo realizado em três etapas. A primeira teve por objetivo o estabelecimento da técnica de clonagem, bem como sua otimização nas nossas condições, dando condições para que os experimentos subseqüentes pudessem ser realizados. Para isto foram realizados experimentos in vitro comparando diferentes meios de manipulação, sistemas de ativação química, meios de cultivo e fontes protéicas no cultivo dos embriões, e células oriundas de diferentes origens e animais como doadores de núcleo. Os resultados obtidos in vitro alcançaram taxas de 64,7% de clivagem e de 19,5% de blastocistos. Um grupo de embriões foi transferido para receptoras (n=24), e foram observadas 54,2% de prenhezes aos 35 dias, 8,3% de prenhezes aos 260 dias e 4,2% de nascimentos. Os resultados obtidos in vitro alcançaram taxas de 64,7% de clivagem e de 19,5% de blastocistos. Um grupo de embriões foi transferido para receptoras (n=24), e foram observadas 54,2% de prenhezes aos 35 dias, 8,3% de prenhezes aos 260 dias e 4,2% de nascimentos.A segunda parte dos experimentos teve por objetivo a produção de clones interespécies utilizando o citoplasma bovino como receptor para células ovinas, caprinas e suínas. As taxas de clivagem nos grupos NTSCi ovino (60,3%), caprino (68,4%) e suína (57,1%) não diferiram dos grupos controles NTSC bovino. A taxa de blastocisto observada nos embriões NTSCi ovinos (10,3%) foram semelhantes às taxas observadas no grupo NTSC bovino (12,7%). No grupo NTSCi caprino, 5,3% dos embriões chegaram ao estádio de blastocisto, enquanto que no grupo NTSCi suíno não houve desenvolvimento até o estádio de blastocisto. Na terceira parte do trabalho, experimentos visando a utilização de oócitos vitrificados imaturos com citoplasma receptor foram realizados. Foram submetidos a maturação 764 complexos cumuli-oócitos vitrificados, e 73,0% destes foram recuperados após o desnudamento e 46,8% apresentavam corpúsculo polar, taxas significativamente inferiores às observadas nos oócitos não vitrificados (91,4% e 65,8%, respectivamente). As taxas de sobrevivência após a micromanipulação (77,8%), taxa de fusão (82,1%) e de sobrevivência após a ativação (79,9%) do grupo vitrificado não apresentaram diferença significativa com o grupo controle não vitrificado. As taxas de blastocistos também não apresentaram diferença entre os grupos vitrificado e não vitrificado (16,7% e 23,4%) respectivamente. Em resumo, os resultados deste trabalho demonstraram que oócitos bovinos frescos ou vitrificados, nas nossas condições estabelecidas, foram capazes de suportar o desenvolvimento de embriões clones bovinos até o estádio de blastocisto ou a termo, e proporcionam citoplasmas compatíveis para o desenvolvimento de embriões clones interespécie até o estádio de blastócito. / Somatic cell nuclear transfer (NTCS) procedures is a valuable tool for the production of clone embryos for use in reproductive cloning, by providing the birth of live animals, and for use as a research model, allowing the study of physiologic mechanisms during the embryonic development. This work aimed to optimize cloning procedures at the Embryology and Reproductive Technology Laboratory (FAVET, UFRGS), to evaluate the success rate of interspecies cloning, and to test the effectiveness of vitrified oocytes as recipient cytoplasm for embryo reconstruction, being carried out in three stages. The first stage was focused on the establishment of the cloning technique and the optimization of procedures and conditions in the lab so that the subsequent experiments could be accomplished. Thus, in vitro experiments were performed to compare different manipulation media, chemical activation systems, manipulating media, source of protein supplementation to the embryo culture media, and distinct cell types and genotypes. The mean cleavage and blastocyst rates obtained after conditions were optimized were 64.7% and 9.5%, respectively. Pregnancy rates on Days 35 and 260 of gestation and calving rate at term following the transfer of a group of embryos to synchronous recipient cows (n=24) were 54.2%, 8.3% and 4.2%, respectively. The second stage of the study evaluated the success rate of the production of interspecies clones (NTSCi) using the bovine oocyte as recipient cytoplasm for transferred nuclei from ovine, caprine or porcine cells. Cleavage rates using ovine (60.3%), caprine (68.4%) and porcine (57.1%) nuclei did not differ from controls (bovine nuclei). Blastocyst rates observed for NTSCi embryos using ovine nuclei (10.3%) were similar to those observed in the bovine NTSC group (12.7%). The NTSCi-caprine group reached a 5.3% blastocyst rate, whereas no development to the blastocyst stage was observed when using porcine cells as nucleus donor. In the third stage of this work, experiments evaluated the efficiency of vitrified bovine oocytes as recipient cytoplasms for cloning by TNCS. Following vitrification and warming, 764 cumulus-oocyte complexes were in vitro-matured. A total of 73.0% was recovered after cumulus removal, with 46.8% presenting visible polar bodies, which were significantly lower than rates observed in non-vitrified oocytes (91.4% and 65.8%, respectively). However, survival rates following micromanipulation (77.8%), fusion rates (82.1%) and survival after activation (79.9%) of oocytes were not different from the control group (non-vitrified oocytes). In addition, blastocyst rates did not differ between vitrified and non-vitrified groups (16.7% and 23.4%, respectively). In summary, results from this study demonstrated that fresh or vitrified bovine oocytes, under our optimized conditions, were able to support development of bovine clone embryos to the blastocyst stage or to term, and provided a compatible cytoplasm for the development of interspecies clone embryos to the blastocyst stage.

Os herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) e tipo 5 (BoHV-5) são responsáveis por uma série de patologias em bovinos. A diferenciação entre tipos e subtipos desses vírus é importante para a compreensão da epidemiologia das infecções associadas a eles, assim como para permitir a tomada de medidas de controle adequadas. No presente estudo foram efetuadas análises antigênicas utilizando anticorpos monoclonais (AcMs) preparados contra antígenos específicos de herpesvírus bovinos. Quarenta e cinco amostras virais foram examinadas com um painel de 36 AcMs previamente preparados, em testes de imunoperoxidase em monocamada. Quatro amostras virais, sendo três BoHV-1 e uma BoHV-5, não apresentaram reatividade frente a nenhum dos AcMs avaliados. Oito dos 36 AcMs reagiram com todas as demais 41 amostras de herpesvírus bovinos. Por outro lado, oito amostras virais (três BoHV-5 e cinco BoHV-1) reagiram com todos os AcMs testados. Um AcM foi capaz de diferenciar o subtipo “c” do BoHV- 5 das demais amostras. Os demais resultados obtidos sugerem que não há uma clara correlação entre tipos e subtipos genomicamente determinados de herpesvírus bovinos e os AcMs aqui avaliados. / Bovine herpesvirus 1(BoHV-1) and 5 (BoHV-5) are associated to different clinical conditions of cattle. The differentiation between types and subtypes of these viruses maybe important for a better understanding of the epidemiology of bovine herpesvirus infections, as well as to provide support for adequate control measures. In the present study, antigenic analyses were performed with monoclonal antibodies (Mabs) prepared to bovine herpesviruses specific antigens. Fourty five virus isolates/strains were examined with a panel of 36 previously prepared Mabs, immunoperoxidase monolayer assays. Four virus isolates, of which three BoHV-1 and one BoHV-5, did not react with any of the Mabs tested. Eight of the 36 Mabs reacted with all other 41 bovine herpeviruses. On the other hand, eight viruses (three BoHV-5 and five BoHV-1) reacted with all Mabs tested. One Mab was capable of distinguishing BoHV-5 subtype “c” from the other subtypes. Additional results revealed that no clearcut correlation could be established between bovine herpesviruses types and subtypes determinated by molecular methods and the Mabs here evaluated.

O presente estudo é uma coorte não concorrente em 63 pacientes (66 quadris) submetidos à revisão de artroplastia total de quadril (RATQ), com enxerto ósseo liofilizado moído e impactado. Foi realizado no Serviço de Ortopedia e Traumatologia do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), no período de maio de 1997 a setembro de 2003. O objetivo do estudo foi comparar clínica, radiográfica e cintilograficamente a capacidade de osteointegração dos enxertos ósseos liofilizados humano e bovino impactados em RATQs cimentadas e não-cimentadas. Os pacientes foram divididos em dois grupos: o Grupo 1 (n=35) foi composto pelos que receberam enxerto ósseo liofilizado de origem humana e o Grupo 2 (n=31) por aqueles que receberam enxerto de origem bovina. O tempo médio de seguimento foi de 33 meses. Os enxertos ósseos purificados e liofilizados foram produzidos pelo Banco de Tecidos do HCPA. A análise clínica baseou-se no escore de Merle, d’Aubigné e Postel; a radiográfica, nos critérios de radioluscência, densidade, formação de trabeculado ósseo, migração dos componentes e floculação, formulando-se um escore radiográfico de osteointegração (EROI). Foram escolhidos, aleatoriamente, como forma complementar de análise por imagem, 35 (53%) pacientes assintomáticos para realizarem cintilografia óssea com Tecnécio, sendo 17 (48,5%) do Grupo 1 e 18 (51,5%) do Grupo 2. Não foram encontradas diferenças clínicas, radiográficas ou cintilográficas relevantes entre os grupos, obtendo-se em torno de 85% de integração do enxerto, tanto no componente acetabular quanto femoral. Estes resultados são comparáveis aos relatados na literatura com o uso de enxerto alogênico congelado e confirmam a adequacidade do uso de enxertos liofilizados de origem bovina e humana em RATQ. / This is a non-concurrent cohort trial of 63 patients (66 hips) submitted to revision total hip arthroplasty (RTHA) using impacted freeze-dried cancellous bone grafts. The study was carried out in the Orthopedics and Traumatology Unit of Hospital de Clinicas de Porto Alegre (HCPA) from May 1997 to September 2003. The main purpose of the study was to compare clinical, radiographic and scintigraphic graft incorporation capability between human and bovine freeze-dried bone grafts. Patients were divided into two groups: Group 1 (n=35) was composed of those receiving human grafts and Group 2 (n=31) of those receiving grafts of bovine source. The median follow-up was 33 months and no death or major complications occurred in this series. The grafts were purified and freeze-dried at the Tissue Bank of the HCPA. The clinical analysis was based on the score of Merle, d’Aubigné and Postel; and the radiographic analysis on the criteria of radiolucency, density, trabecula formation, migration and “cotton flock” appearance by using these parameters, isolated or combined in an established score for radiographic bone incorporation (SCORBI). Thirty-five (53%) asymptomatic patients, 18 (51%) and 17 (49%) from Groups 1 and 2 respectively, were randomly selected to be assessed by 99mTc scintigraphy, as a complementary form of image analysis. No clinical, radiographic or scintigraphic differences were observed between the groups and both groups showed around 85% of graft integration both in the acetabular and in the femoral component. These results are comparable to those reported in the literature with the use of deep-frozen grafts. Therefore, bovine and human freeze-dried grafts can be safely and adequately used in RTHA.

O experimento avaliou o uso do meio TCM-199 suplementado com: SVE, SEE e SFB (meio indefinido); BSA (meio semi-definido) e PVA (meio definido); na presença ou ausência de hormônios (FSH e hCG) na maturação in vitro de oócitos bovinos nas condições do Laboratório de Embriologia e Biotécnicas de Reprodução da UFRGS. Complexos cumuli-oophorus (CCOs), em número total de 1458, foram aleatoriamente distribuídos em doze tratamentos, maturados por 24 h em atmosfera de 5% CO2, em ar e 100% umidade relativa em estufa a 39°C. A fecundação nos doze tratamentos foi realizada mediante exposição dos CCOs maturados aos espermatozóides (1x106/mL), previamente capacitados, durante 20 h. O cultivo foi realizado em fluído sintético de oviduto modificado (SOFaa) acrescido de 10% SVE a 39°C, 100% de umidade relativa do ar e 5% CO2, 5% O2 e 90% N2. Na presença de hormônios os meios indefinidos (SVE: 63,6%, 70/110; SEE: 53,4%, 70/131 e SFB: 56,0%, 75/134) apresentaram maior eficiência em proporcionar suporte à primeira divisão embrionária, em comparação ao meio definido (PVP: 50,6%, 45/89). Os CCOs maturados em meio indefinido suplementado com SVE e hormônios apresentaram maior competência em fecundar e suportar o desenvolvimento embrionário até o estádio de blastocisto após sete dias de cultivo (27,3%, 30/110).

Submitted by MARCOS LEANDRO TEIXEIRA DE OLIVEIRA (marcosteixeira@ufv.br) on 2018-08-08T13:19:39Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4149329 bytes, checksum: c3cfb7e4f8632c910c1c375a4e9a0f54 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-08T13:19:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 4149329 bytes, checksum: c3cfb7e4f8632c910c1c375a4e9a0f54 (MD5) Previous issue date: 2018-03-09 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O presente trabalho consiste de quatro manuscritos desenvolvidos usando os mesmos animais. O objetivo do primeiro estudo foi avaliar o efeito de castração sobre as características de carcaça e qualidade da carne de Nelore abatidos em diferentes pesos corporais (PC). Trinta e seis bezerros Nelore (Bos taurus indicus) com média inicial de 256,1 ± 3,05 kg de PC e 8,2 ± 0,07 meses de idade foram utilizados, sendo que a metade foi aleatoriamente selecionada para a castração cirúrgica uma semana antes do desmame. Os bezerros desmamados foram confinados recebendo uma mesma dieta, e seis bezerros de cada condição sexual foram distribuídos aleatoriamente para serem abatidos quando a média do PC atingisse 280, 380 e 480 kg. Portanto, este estudo foi realizado seguindo delineamento inteiramente casualizado com tratamentos arranchados em esquema fatorial com 2 condições sexuais (castrado vs. inteiro) e 3 pesos de abate (280, 380, e 480 kg). As características de qualidade da carne foram avaliadas aos 1, 7 e 14 dias postmortem. O efeito de interação foi encontrado (P <0,01) para a gordura intramuscular e para a gordura renal, pélvica e cardíaca. A carcaça de boi inteiro foi mais pesada (P <0,05) do que de castrados. A carcaça do boi inteiro teve maior (P <0,05) espessura de cobertura. Castração reduziu a força de cisalhamento e aumentou o índice de fragmentação miofibrilar aos 14 dias postmortem. As carcaças do abate aos 480 kg apresentaram um resfriamento mais lento, um sarcômero mais longo e uma menor força de cisalhamento quando avaliada a 1 dia postmortem. A redução na força de cisalhamento de 1 para 14 dias post-mortem foi reduzida (P <0,05) à medida que se aumentou o peso corporal ao abate. Conclui-se que, excetuando a gordura da carcaça, a castração e o peso corporal na colheita afetam as características de carcaça e carne independentemente. O segundo estudo teve como objetivo avaliar a sensibilidade à glicose de bovinos Nelore castrados e inteiros ao longo do desenvolvimento corporal. Além disso, foram avaliadas a expressão gênica de biomarcadores relacionados ao metabolismo da glicose, crescimento muscular e tal, enquanto o pesodeposição de lipídios. Para tanto, os mesmos animais do primeiro estudo foram utilizados, e este estudo foi realizado seguindo delineamento inteiramente casualizado com tratamentos arranchados em esquema fatorial com 2 condições sexuais (castrado vs. inteiro) e 3 pesos de abate (280, 380, e 480 kg). Dois testes de tolerância à glicose (TTG) foram realizados aos 380 e 480 kg de PC. Longissimus dorsi (LD) foi amostrado logo após a sangria para a expressão gênica. A composição da carcaça e o desempenho animal foram avaliados. Animais não castrados tiveram maior PC final (P = 0,02) e tendência para aumentar a eficiência alimentar (P = 0,08) em relação aos castrados. Os bovinos inteiros tiveram maior rendimento de carne magra (P = 0,02) e proteína (P = 0,01) do que os castrados. Efeito de interação foi encontrado para o ganho de gordura de carcaça (P = 0,01), e os castrados ganharam mais gordura de carcaça do que os inteiros apenas de 380 a 480 kg de PC. A taxa fracional de acumulação de proteína da carcaça (FAR) diminuiu à medida que os bovinos aumentaram o PC (P <0,01). Nem o nível basal da glicose nem a área sob a curva (AUC) pós-infusão foram afetados pela castração ou PC dos bovinos (P > 0,05). A expressão de genes relacionados ao metabolismo da glicose no LD não foi afetada pela castração ou PC dos bovinos (P> 0,05). Foi observada uma tendência de aumento na expressão de LD de acetil-CoA carboxilase alfa (ACACA) pela castração (P = 0,086). Efeitos de interação (P <0,05) foram encontrados para a expressão do receptor de IGF-1 (IGF1R) e da proteína F-box 32 (FBXO32) no LD, e para ambos os genes, os novilhos apresentaram a maior abundância de mRNA aos 380 kg de PC, enquanto os inteiros tiveram a maior abundância aos 480 kg de PC. A expressão de serpin A3-6 no LD tendeu (P = 0,08) a reduzir com aumento do PC de 280 para 480 kg. Em conclusão, apesar do aumento na gordura da carcaça pela castração e aumento do PC, a sensibilidade corporal de bovinos Nelore à glicose não muda. Para o terceiro estudo, as amostras de LD coletadas no momento do abate foram utilizadas para comparar o proteoma e o fosfoproteoma de bovinos Nelore castrados ou não durante os diferentes estádios de crescimento. A proteína muscular extraída foi separada em 2D-PAGE e corada sequencialmente com Pro-Q Diamond e Coomassie coloidal. Posteriormente, realizou-se uma análise comparativa do perfil protéico, e os spots diferencialmente abundantes foram excisados para identificação de proteínas por MALDI-TOF/TOF. A castração afetou (P <0,05) a abundância de 6 fosfoproteínas e 10 spots de proteína total, enquanto o peso corporal afetou (P <0,05) abundância de 34 fosfoproteínas e 29 spots de proteína total. A castração diminuiu (P <0,05) a abundância de duas enzimas glicolíticas da fase de produção de energia, sugerindo que o aumentou na via da glicólise promove síntese de glicerol-3P para dar suporte a uma maior deposição de gordura em novilhos. Em relação ao estágio de crescimento, além das proteínas estruturais da cadeia leve reguladora de miosina 2 (MYLPF) e da actina alfa 1 (ACTA1), a maioria das proteínas identificadas estão relacionada ao metabolismo energético, incluindo o metabolismo do glicogênio, glicólise, fosforilação oxidativa, metabolismo da creatina-fosfato, e metabolismo citosólico de NADH. Esses resultados sugerem que a diminuição da taxa de crescimento muscular reduz a glicólise e a geração de ATP no músculo. No quarto estudo utilizou-se apenas os doze bovinos Nelore abatidos aos 480 kg de PC. O objetivo deste estudo foi avaliar as diferenças no proteoma e fosfoproteoma entre bovinos Nelore castrados e inteiros durante a conversão do músculo em carne, bem como após 14 dias de maturação. Foram utilizados 12 bezerros machos Nelore (247 kg e 8 meses) e seis bezerros foram selecionados aleatoriamente para a castração cirúrgica uma semana antes do desmame. Os bezerros desmamados foram alimentados com a mesma dieta e foram abatidos após 230 dias de confinamento. O músculo Longissimus foi amostrado logo após a sangria (0d pós- morte), na desossa (1d pós-morte) e após a maturação (14d pós-morte) para análise de proteoma. As características de carcaça foram avaliadas na desossa e a força de cisalhamento da carne foi medida ao 1, 7 e 14 dias postmortem. O extrato de proteína muscular foi separado por 2D-PAGE e corado sequencialmente para fosfoproteína (Pro- Q Diamond) e para proteína total (Coomassie coloidal). Os spots diferencialmente abundantes entre a condição sexual ou entre os tempo pós-morte foram excisados para identificação de proteínas por MALDI-TOF/TOF. A castração aumentou (P <0,05) a abundância de enzimas glicolíticas, enquanto que a proteína da fosforilação oxidativa ATP5B foi reduzida (P <0,05). Além disso, a abundância de troposina T isoforma rápida (TNNT3) foi aumentada pela castração (P <0,05), enquanto a isoforma lenta (TNNT1) tendeu a diminuir (P <0,10). A creatina quinase tipo-M foi marcadamente fragmentada no postmortem. A abundância de PGM1 fosforilada aumentou durante as primeiras 24 horas pós-morte e foi altamente correlacionada com o pH da carcaça. A abundância de uma proteína de choque termico 71 kDa (HSC70) aumentou marcadamente após a maturação. Além disso, a abundância das proteínas miofibrilares fosforiladas ACTA1 e MYLPF foram positivamente correlacionadas com o encurtamento do sarcômero. Em conclusão, nossos dados demonstraram que a abundância e a fosforilação das enzimas glicolíticas afetam a qualidade da carne durante a conversão do músculo em carne. No geral, a castração aumentou acentuadamente a gordura da carcaça e a gordura intramuscular, enquanto que a sensibilidade corporal à glicose e a conversão do músculo na carne parecem ser semelhantes entre bovinos castrados e não castrados. / The current work consists of four manuscripts developed using the same animals.The objective of the first study aimed to evaluate the castration effect on carcass and meat traits of Nellore cattle harvested at different body weights (BW). Thirty-six Nellore (Bos taurus indicus) calves averaging 256.1 ± 3.05 kg of BW and 8.2 ± 0.07 months old were used, within then half was randomly selected for surgical castration one-week prior weaning. Weaned calves were fed with the same diet, and then six calves from each sex condition were randomly assigned to be harvested when the average BW of both sex conditions reaches 280, 380, and 480 kg. Therefore, this study was carried out as a complete randomized design following a 2 (sex condition) by 3 (weight at harvest) factorial arrangement of treatments. Beef traits were evaluated at 1, 7, and 14 d postmortem. Interaction effect was found (P < 0.01) for intramuscular fat and for kidney, pelvic and heart fat. Bull carcass was heavier (P < 0.05) than steer. Steer carcass had greater (P < 0.05) backfat thickness. Castration reduced shear force and increased myofibrillar fragmentation index at 14 d postmortem. Carcasses from cattle harvested at 480 kg had slower chilling, longer sarcomere, and lower shear force at 1 d postmortem. Shear force change from 1 d to 14 d postmortem reduced (P < 0.05) as harvest body weight increased. In conclusion, despite of carcass fatness, castration and body weight at harvest affect carcass and meat traits independently. The second study aimed to evaluate the glucose sensitivity of bulls and steers throughout body development. In addition, it was evaluated gene expression of biomarkers related to glucose metabolism, muscle growth and lipid deposition. Therefore, the same animals from the first study were used, and this study was carried out as a complete randomized design following a 2 (sex condition) by 3 (weight at harvest) factorial arrangement of treatments. Two glucose tolerance tests (GTT) were performed at 380 and 480 kg. Longissimus dorsi (LD) was sampled just after stunning for gene expression. Carcass composition and animal performance were evaluated. Bulls had greater final BW (P = 0.02) and tended to increase G:F ratio (P = 0.08) compared with steers. Bulls had greater carcass yield of lean (P = 0.02) and protein (P = 0.01) than steers. An interaction effect was found for carcass fat gain (P = 0.01), and steers gained more carcass fat than bulls only from 380 to 480 kg of BW. Carcass protein fractional accretion rate (FAR) decreased as cattle BW increased (P < 0.01). Neither glucose basal level nor area under the curve (AUC) post-infusion were affected by castration or cattle BW (P > 0.05). Expression of genes related to glucose metabolism in the LD were not affected by castration or cattle BW (P > 0.05). Castration tended (P = 0.086) to upregulate LD expression of Acetyl-CoA carboxylase alpha (ACACA). Interaction effects (P < 0.05) were found for LD expression of IGF-1 receptor (IGF1R) and F-box protein 32 (FBXO32), and for both genes steers had the greatest mRNA abundance at 380 kg while bulls had the greatest abundance at 480 kg of BW. The LD expression of serpin A3-6 tended (P = 0.08) to be downregulated as cattle BW increased from 280 to 480 kg. In conclusion, despite of the carcass fatness enhancement by castration and increasing BW, Nellore cattle whole-body sensitivity to glucose does not change. For the third study, the LD sampled at the harvest were used to compare the proteome and phosphoproteome of Nellore bulls and steers during different growth stages. Extracted muscle protein was separated in a 2D-PAGE and stained sequentially with Pro- Q Diamond and Colloidal Coomassie. Afterward, a comparative analysis of protein profile was performed, and differentially abundant protein spots were excised for protein identification by MALDI-TOF/TOF. Castration affected (P < 0.05) abundance of 6 phosphoproteins and 10 protein spots, while body weight affected (P < 0.05) abundance of 34 phosphoproteins and 29 protein spots. Castration decreased (P < 0.05) the abundance of two glycolytic enzymes of the energy-yielding phase, suggesting that glycolysis pathway enhanced glycerol-3P supply for a greater fat deposition on steers. Regarding the growth stage, despite the structural proteins myosin regulatory light chain 2 (MYLPF), and actin alpha 1 (ACTA1), most of identified proteins were related to energy metabolism, including glycogen metabolism, glycolysis, oxidative phosphorylation, creatine- phosphate metabolism, and cytosolic NADH metabolism. These results suggest that decreasing muscle growth rate decreases muscle glycolysis and ATP generation. The fourth study used only the twelve Nellore cattle harvested at 480 kg of BW. The aim of this study was to evaluate the differential proteome and phosphoproteome between bulls and steers during conversion of muscle to meat, as well as after 14 d of aging. Twelve male Nellore calves were used (247 kg, and 8 months old) and six calves were randomly selected for surgical castration one week before weaning. Post-weaning calves were fed the same diet and were harvested after 230 d on feeding. Longissimus muscle was sampled just after stunning (0d postmortem), at deboning (1d postmortem) and after aging (14d postmortem) for proteome analysis. The carcass traits were evaluated at deboning and meat shear force was measured at 1, 7, and 14 d postmortem. Muscle protein extract was separated by 2D-PAGE and stained sequentially for phosphoprotein (Pro-Q Diamond) and for total protein (Colloidal Coomassie). Differentially abundant protein spots between sex condition or across postmortem time were excised for protein identification by MALDI- TOF/TOF. Castration upregulated (P < 0.05) the abundance of glycolytic enzymes, while the oxidative phosphorylation protein ATP5B was downregulated (P < 0.05). In addition, abundance of troponin T fast isoform (TNNT3) was upregulated by castration (P < 0.05), while the slow isoform (TNNT1) tended to decrease (P < 0.10) abundance. The creatine kinase M-type was markedly fragmented postmortem. Abundance of phosphorylated PGM1 increased during the first 24 h postmortem and was highly correlated with carcass pH. The abundance of one spot of heat shock cognate 71 kDa protein (HSC70) markedly increased after aging. Further, abundance of the phosphorylated myofibrillar proteins ACTA1 and MYLPF were positively correlated with sarcomere shortening. In conclusion, our finds demonstrated that abundance and phosphorylation of glycolytic enzymes affect meat quality during conversion of muscle to meat. Overall, castration markedly increased carcass fatness and intramuscular fat, whereas whole body glucose sensitivity and conversion of muscle to meat seems to be similar between bulls and steers.

Submitted by Helena Bejio (helena.bejio@unioeste.br) on 2017-11-16T23:15:40Z No. of bitstreams: 2 Caroline H Werle 2017.pdf: 634463 bytes, checksum: 09e0fb6431be9fa9efd28079cc3d19a3 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-11-16T23:15:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Caroline H Werle 2017.pdf: 634463 bytes, checksum: 09e0fb6431be9fa9efd28079cc3d19a3 (MD5) license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Previous issue date: 2017-02-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The objective of this study was to evaluate the best level of DDGSinclusion in the diet of lactating cows. For this purpose, five lactating Dutch cows distributed in a 5x5 Latin square were used, fed diets containing 0%, 8%, 16%, 24% and 32% inclusion levels of DDGS in DM. The parameters evaluated were dry matter and nutrient intake and digestibility, microbial synthesis, milk production and composition, blood parameters and economic viability. The data were submitted to analysis of variance and polynomial regression considering the inclusion levels of DDGS at the 5% probability level. Thus, a reduction in the dry matter intake, organic matter, crude protein and non­fibrous carbohydrates and an increase in the intake of ethereal extract, neutral detergent fiber and total digestible nutrients were observed. The animals' body condition score was not altered despite the reduction of body weight to inclusion levels. The digestibilities of crude protein, neutral detergent fiber, total carbohydrates and total digestible nutrients increased linearly with inclusion of the co­product in the diet. Dry matter digestibility was reduced according to the inclusion levels. Milk production was not influenced by DDGS inclusion levels. There was no change in allantoin excretions and in the production of microbial protein per kilogram of total digestible nutrients. Fasting plasma cholesterol levels at four hours after feeding presented a linear increasingeffect due to the fat content in the co­product composition. The fasting creatinine content was reduced with increasing inclusion levels. The economic return was higher for the levels with inclusion of the co­product in the diet. Thus, the use of DDGS in the feeding of lactating cows can be performed up to the 32%. / Objetivou­se avaliar o nível de inclusão do DDGS na dieta de vacas em lactação. Foram utilizadas cinco vacas holandês em lactação, distribuídas em um quadrado latino 5x5, alimentadas com dietas contendo níveis de 0%, 8%, 16%, 24% e 32% de inclusão de DDGS na MS. Os parâmetros avaliados foram ingestão e digestibilidade da matéria seca e dos nutrientes, síntese microbiana, produção e composição do leite, parâmetros sanguíneos e viabilidade econômica. Os dados foram submetidos à análise de variância e regressão polinomial considerando os níveis de inclusão de DDGS ao nível de 5% de probabilidade. Desta forma, observou­se redução na ingestão de matéria seca, matéria orgânica, proteína bruta e carboidratos não fibrosos e aumento na ingestão de extrato etéreo, fibra em detergente neutro e nutrientes digestíveis totais. O escore de condição corporal dos animais não foi alterado apesar de ocorrer a redução do peso corporal para os níveis de inclusão.Asdigestibilidades da proteína bruta, fibra em detergente neutro, carboidratos totais e dos nutrientes digestíveis totais aumentaram linearmente com a inclusão do coproduto na dieta. Já a digestibilidade da matéria seca reduziu conforme os níveis de inclusão. A produção de leite não foi influenciada pelos níveis de inclusão de DDGS. Não houve alteração para as excreções de alantoínae para a produção de proteína microbiana por quilograma de nutrientes digestíveis totais. Os teores de colesterol plasmático em jejum e quatro horas após a alimentação apresentaram efeito linear crescente devido ao teor de gordura na composição do coproduto. O teor de creatinina em jejum apresentou redução com o aumento dos níveis de inclusão. O retorno econômico foi maior para os níveis com inclusão do coproduto na dieta. Desse modo, a utilização de DDGS na alimentação de vacas em lactação pode ser realizada até o nível de 32% de inclusão.

Considerando-se que o aparecimento de lesões de cárie ao redor de restaurações é um fato clinicamente relevante e que a utilização de materiais restauradores liberadores de flúor é importante para inibir o aparecimento destas lesões, este trabalho teve por objetivo investigar, in vitro, a ação cariostática de alguns materiais restauradores estéticos. Cavidades padronizadas foram preparadas no centro de blocos dentes bovinos hígidos ou com lesão incipiente de cárie artificial. Os espécimes foram restaurados com: um cimento de ionômero de vidro convencional (Ketac Molar); um cimento de ionômero de vidro modificado por resina (Vitremer); uma resina composta modificada por poliácidos (Dyract AP) e uma resina convencional (Z-250). Além dos espécimes restaurados, outros quatro grupos correspondentes a controles também foram avaliados. Em seguida todos os grupos, com exceção de dois dos controles, foram submetidos a ciclagens de desmineralização e remineralização durante 14 dias, simulando situação de severo desafio cariogênico. Após este procedimento, os blocos foram seccionados longitudinalmente através do centro das restaurações e a perda mineral foi avaliada por meio de testes de microdureza Knoop em secção longitudinal, aplicados em três diferentes distâncias das paredes cavitárias / margem da restauração e em oito profundidades distintas em relação à superfície externa do esmalte. A análise estatística dos resultados (p<0,05) mostrou diferenças significantes entre os grupos, embora nenhum dos materiais estudados tenha sido capaz de impedir completamente a instalação da lesão. O material Vitremer demonstrou a melhor ação cariostática em esmalte bovino hígido. Os materiais Ketac Molar, em esmalte hígido ou desmineralizado, assim como o Vitremer em esmalte desmineralizado, apresentaram potencial cariostástico intermediário. A resina composta Z-250 e o compômero Dyract AP não demonstraram efeitos cariostáticos. Concluí-se portanto, que os cimentos de ionômero de vidro apresentaram ação cariostática superior aos demais materiais estudados. / Considering that caries around restorations is a serious problem in Dentistry and that some restorative materials with fluoride may be important to inhibit these lesions, this research had the aim to evaluate, in vitro, the cariostatic action of some aesthetic restorative materials. Standardized cavities were prepared in the center of both healthy blocks of bovine enamel or with incipient artifical caries lesions. The specimens were restored with: a conventional glass ionomer cement (Molar Ketac); a resin-modified glass ionomer cement (Vitremer); a polyacid-modified composite resin (Dyract AP) and a conventional composite resin (Z-250). Besides the restored specimens, other four corresponding controls the controls groups were also evaluated. All the groups, with exception of two of the controls, were submitted to a demineralization and remineralization cycling model for 14 days, simulating a situation of severe cariogenic challenge. After this procedure, the blocks were seccioned longitudinally through the restorations. Then mineral loss was evaluated using the Knoop microhardness profiles in longitudinal section, in three different distances of the cavities and in eight distinct depths in relation to the external surface of the enamel. The statistic analysis of the results showed significant differences (p<0,05) among the groups, although none of the studied materials were able to completely inhibt the installation of the lesions. Vitremer demonstrated the best cariostatic action in healthy bovine enamel. Ketac Molar, in healthy or demineralized enamel, as well as the Vitremer in demineralized enamel, had presented intermediate cariostatic potential. Z-250 and Dyract AP had not demonstrated cariostatic effect. The data suggest that, the glass ionomer cements demonstred better cariostatic action than the other restorative materials.

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:02:24Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo160_1.pdf: 1487383 bytes, checksum: ad15a529c99efc35f8b6742e988839e0 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O presente trabalho teve como objetivo avaliar a produção de biogás a partir da glicerina bruta oriunda do biodiesel, utilizando-se dejetos bovinos como inóculo, o processo foi conduzido sob diferentes concentrações de glicerina em 20%, 25%, 30% e 40% (M/M) e inóculo de 10%, 20% e 30%(M/M). Os dejetos bovinos foram diluídos em solução nutriente preparada em água destilada utilizando-se para um 1L: K2HPO4 (Fosfato dibásico de potássio) - 2g; KH2PO4 (Fosfato monobásico de potássio) - 20g e Uréia 3,5g. As fermentações tiveram seu pH variados em 5,8, 6,6 e 8,0 e incubadas à 35° C sem agitação. Foram utilizados micro-reatores com volume útil de 40 mL hermeticamente fechados acopladas a uma seringa de 10 mL. Com o volume de biogás produzido foi realizado a avaliação cinética fenomenológica do processo de produção de biogás. Através do Kit EMBRAPA, foi avaliada a quantidade de metano de dióxido de carbono por estimativa em cada amostra. O tempo de fermentação foi em média 216 horas. Observou-se que as condições em que a concentração de glicerina foi 20%(M/M), pH 5,8 e concentração de inóculo 30%(M/M), a maior produção de biogás. Por outro lado, ao se estudar o efeito da concentração de glicerina para produção de biogás, verificou-se que a concentração de 40%(M/M), foi inibitória em todos os estudos

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-14T17:07:36Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 378860 bytes, checksum: 8a113d87112bb75d1f61ad7d1cb7bec4 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-14T17:07:36Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 378860 bytes, checksum: 8a113d87112bb75d1f61ad7d1cb7bec4 (MD5) Previous issue date: 2004-02-13 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O presente trabalho foi desenvolvido a partir de seis experimentos. No primeiro, avaliou-se o consumo e a digestibilidade dos nutrientes, o ganho de peso (GMD) e a conversão alimentar (CA) em bovinos de corte recebendo dietas à base de silagem de sorgo (SS) e pré-secado de capim-tifton 85 como volumoso, nas seguintes proporções: 0:100; 32:68; 66:34 e 100:0, respectivamente, com base na matéria seca. As dietas isonitrogenadas, foram formuladas de forma a conter aproximadamente 12% de proteína bruta, adotando-se uma relação volumoso:concentrado de 60:40, na matéria seca. Foram utilizados 24 animais mestiços (HxZ), inteiros, com peso vivo inicial médio de 360 kg, distribuídos em um delineamento em blocos casualizados. Após um período de adaptação de 15 dias, foram realizados três períodos experimentais de 28 dias. Para determinação da excreção fecal, utilizou-se a fibra em detergente ácido como indicador. Os consumos médios diários em kg/dia, de matéria seca (MS), matéria orgânica (MO), proteína bruta (PB), extrato etéreo (EE), carboidratos totais e nutrientes digestíveis totais (NDT) não foram influenciados pelas dietas, registrando-se valores médios de: 9,46; 9,05; 1,20; 0,52, 7,4 e 6,10 kg/dia, respectivamente. As digestibilidades aparentes da MS, MO, PB e EE foram influenciadas de forma quadrática pelo nível de SS no volumoso, estimando-se digestibilidades mínimas de 60,33; 61,58; 61,89 e 55,83% nos níveis de 44,80; 47,18; 50,95 e 51,21% de silagem de sorgo, respectivamente. O GMD e a CA foram influenciados de forma quadrática pelos níveis de SS, estimando-se valores máximos e mínimos de 1,25 kg/dia e 7,66 para os níveis de 60,95 e 67,04% de SS, respectivamente. No segundo ensaio, avaliou-se o consumo e a digestibilidade total e parcial dos nutrientes, a eficiência microbiana, o balanço de nitrogênio, a taxa de passagem da digesta ruminal, o pH e a concentração de amônia ruminal em bovinos de corte recebendo as mesmas dietas do primeiro experimento. Foram utilizados quatro animais mestiços (HxZ), fistulados no rúmen e abomaso, com peso médio de 364 kg, distribuídos em um quadrado latino 4x4. A relação volumoso:concentrado foi de 60:40, com base na matéria seca. Os consumos de matéria seca (MS), matéria orgânica (MO), proteína bruta (PB), carboidratos totais (CT) assim como as digestibilidades aparentes totais da PB, extrato etéreo, (EE), carboidratos não fibrosos (CNF) e fibra em detergente neutro (FDN) não foram influenciados pelas dietas, registrando-se valores médios de 6,01; 5,69; 0,76 e 4,64 kg/dia e 67,94; 82,42; 84,43 e 53,57%, respectivamente. Os consumos de EE, CNF, FDN e nutrientes digestíveis totais (NDT) e as digestibilidades aparentes totais da MS, MO e CT aumentaram linearmente com o incremento da proporção de silagem de sorgo no volumoso. As digestibilidades ruminais e intestinais de MS, CT, CNF e FDN não foram influenciadas pelas dietas. O pH não foi influenciado pelos tempos de coleta, nem pelas dietas, registrando-se valor médio de 6,21. A concentração de amônia foi influenciada pelos tempos de coleta, estimando-se valor máximo de 13,14 mg/100mL, às 2,90 horas após a alimentação. Para as dietas contendo 0; 32; 66 e 100% de silagem de sorgo no volumoso, estimaram-se taxas de passagem da digesta ruminal da ordem de 5,30; 4,27; 4,22 e 4,10 %/hora, respectivamente. A eficiência microbiana não foi influenciada pelo nível de silagem de sorgo na dieta. O balanço de nitrogênio (g/dia) aumentou linearmente com o incremento da proporção de silagem de sorgo no volumoso. A inclusão de cerca de 60% de silagem de sorgo no volumoso, promoveu máximo ganho de peso estimado. A associação da silagem pré-secada de capim-tifton 85, com silagem de sorgo, não promoveu grandes alterações nos consumos e digestibilidades dos nutrientes, bem como nas variáveis ruminais avaliadas, mostrando-se uma boa alternativa na suplementação volumosa de bovinos de corte. No terceiro experimento avaliou-se o consumo e a digestibilidade dos nutrientes, o ganho de peso, a conversão alimentar e o rendimento de carcaça em bovinos de corte recebendo dietas contendo 0; 0,5; 1,0 e 1,5% de uréia na matéria seca total. Foram utilizados 21 animais mestiços (HxZ), castrados, com peso vivo inicial médio de 290 kg, distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado. Utilizou- se a silagem de sorgo como volumoso numa relação volumoso:concentrado de 70:30, com base na matéria seca. O ensaio teve duração de 127 dias, sendo 15 dias de adaptação e quatro períodos de 28 dias para avaliações. Para determinação da excreção fecal, utilizou-se a fibra em detergente ácido como indicador. O consumo e a digestibilidade dos nutrientes não foram influenciados pelos níveis de uréia na dieta. Para o consumo e a digestibilidade aparente da matéria seca, verificaram-se valores médios de 8,42 kg/dia ou 2,33%PV e 64,52%, respectivamente. O ganho médio diário, a conversão alimentar e o rendimento de carcaça também não foram influenciados pelos níveis de uréia na dieta, registrando-se valores médios de 1,05 kg/dia, 8,07 e 48,72%, respectivamente. No quarto experimento avaliou-se o consumo e a digestibilidade total e parcial dos nutrientes, a eficiência microbiana, o balanço de nitrogênio, a taxa de passagem da digesta ruminal, o pH e a concentração de amônia ruminal em bovinos de corte recebendo as mesmas dietas do terceiro experimento. Foram utilizados quatro animais mestiços (HxZ), fistulados no rúmen e abomaso, com peso médio de 459 kg, distribuídos em um quadrado latino 4x4. Utilizou-se a silagem de sorgo como volumoso numa relação volumoso:concentrado de 70:30, com base na matéria seca. Excetuando- se o consumo de nutrientes digestíveis totais que diminuiu linearmente com o aumento dos níveis de uréia na dieta, os consumos dos demais nutrientes não foram influenciados pelas dietas. As digestibilidades aparentes totais e parciais dos nutrientes não foram influenciadas pelas dietas. O pH ruminal não foi influenciado pelos tempos de coleta nem pelas dietas, registrando-se valor médio de 6,46. A concentração de amônia foi influenciada pelos tempos de coleta, estimando-se valor máximo de 11,72 mg/100mL às 2,77 h após a alimentação. Estimaram-se taxas de passagem da digesta ruminal de 4,1; 4,4; 3,8 e 3,2 %/hora, para as dietas contendo 0; 0,5; 1,0 e 1,5% de uréia, respectivamente. A eficiência microbiana expressa nas diferentes formas não foi influenciada pelos níveis de uréia na dieta. O balanço de nitrogênio não foi influenciado pelas dietas. Nivéis de até 1,5% de uréia na matéria seca da dieta total podem ser utilizados nas formulações de rações para terminação de bovinos de corte HxZ em confinamento, sem comprometer o consumo, a digestibilidade dos nutrientes, parâmetros ruminais, bem como o desempenho animal. No quinto experimento avaliou- se o consumo e a digestibilidade dos nutrientes, o ganho de peso e a conversão alimentar de bovinos de corte recebendo dietas contendo feno de capim-tifton 85 e silagem de milho nas seguintes proporções: 100:0; 68:32; 35:65 e 0:100, com base na matéria seca. Foram utilizados 19 animais mestiços de Limousin, inteiros, com peso vivo inicial médio de 301 kg, distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado. A relação volumoso:concentrado foi de 58:42, com base na matéria seca. O ensaio teve duração de 99 dias, sendo 15 dias de adaptação e três períodos de 28 dias para avaliações. Para determinação da excreção fecal, utilizou-se a fibra em detergente ácido indigestível como indicador. Os consumos médios de matéria seca (MS), matéria orgânica (MO), proteína bruta (PB), carboidratos totais (CT) e fibra em detergente neutro (FDN) apresentaram efeito quadrático em função de níveis crescentes de silagem de milho. Para os consumos de MS e MO estimaram-se valores máximos de 7,52 e 7,08 kg/dia, para os níveis de 61,13 e 61,78% de silagem de milho, no volumoso, respectivamente. As digestibilidades aparentes da MS, MO e FDN não foram influenciadas pelos níveis de silagem de milho no volumoso. O ganho de peso médio diário e a conversão alimentar aumentou e decresceu de forma linear, respectivamente, com o incremento da proporção de silagem de milho no volumoso das dietas. A associação cerca de 60% silagem de milho e 40% de feno de capim-tifton 85 de baixa qualidade, constituindo 60% do volumoso da dieta, maximizou o consumo de matéria seca, sem grandes comprometimentos do ganho em peso. No sexto experimento avaliou-se o consumo e a digestibilidade dos nutrientes, o ganho de peso, a conversão alimentar e o rendimento de carcaça em bovinos de corte recebendo dietas contendo silagem de milho e concentrado nas seguintes proporções: 78:22; 63:37; 47:53 e 33:67, com base na matéria seca. Foram utilizados 23 animais mestiços (HxZ), castrados, com peso vivo inicial médio de 360 kg, distribuídos em um delineamento inteiramente casualizado. Após um período de adaptação de 15 dias, foram avaliados três períodos experimentais, sendo os dois primeiros de 21 dias cada um e o terceiro de 28 dias. Para determinação da excreção fecal, utilizou-se a fibra em detergente ácido indigestível como indicador. Observou-se incremento linear para os consumos dos nutrientes com o aumento dos níveis de concentrado na dieta. As digestibilidades aparentes da matéria seca; matéria orgânica; proteína bruta; carboidratos totais; carboidratos não fibrosos e fibra em detergente neutro apresentaram comportamento quadrático estimando-se digestibilidades máximas de 72,55; 73,50; 73,37; 72,85; 83,42 e 61,78% para os nos níveis de 40,97; 40,42; 41,47; 40,92; 35,41 e 36,92% de concentrado, respectivamente. O ganho de peso médio diário aumentou linearmente com o incremento do concentrado nas dietas. Contudo, o rendimento de carcaça e a conversão alimentar não foram influenciados pelas dietas, registrando-se valores médios de 50,40% e 7,82, respectivamente. Desta forma, em dietas para bovinos de corte em confinamento, em que a silagem de milho é utilizada como fonte de volumoso, recomendam-se níveis de concentrado próximos de 35 a 40% da dieta total com base na matéria seca, pois resultaram em maiores digestibilidades dos nutrientes, sem grande comprometimento do ganho de peso médio diário. / The actual proceed was developed after on six experiments. In the first experiment was evaluated the intake, digestibility of nutrients, daily gain and feed conversion were evaluated in beef cattle receiving diets based on sorghum silage and tifton 85 haylage as forage, in the following proportions: 0:100; 32:68; 66:34; and 100:0, respectively, in dry matter basis. The isonitrogenous diets were formulated to contain 12% of crude protein, adopting a relation forage:concentrate of 60:40, in dry matter basis. Twenty-four crossed animals (HxZ), intact, with initial mean body weight of 360 kg were distributed in a casualized blocks design. After an adaptation period of 15 days, three experimental periods of 28 days were conducted. In order to determine the fecal excretion, acid detergent fiber was used as marker. The mean daily intake, in kg, of dry matter (DM), organic matter (OM), crude protein (CP), ether extract (EE), total carbohydrates and total digestible nutrients were not affected by the diets, registering mean values of: 9.46; 9.05; 1.20; 0.52; 7.4; and 6.10 kg/day, respectively. The apparent digestibility of DM, OM, CP, and EE were influenced in a quadratic way by the level of sorghum silage in the forage, estimating minimum digestibility of 60.33; 61.58; 61.89; and 55.83% in the levels of 44.80; 47.18; 50.95; and 51.21% of sorghum silage, respectively. The mean daily gain and feed conversion were influenced in a quadratic way by the level of xiiisorghum silage in the forage, estimating maximum and minimum values of 1.25 kg/day and 7.66 to the levels of 60.95 and 67.04% of sorghum silage in the forage, respectively. In the second experiment the intake and the total and partial digestibility of nutrients, the microbial efficiency, the nitrogen balance, the passage rates of ruminal digesta, the pH and the ammonia ruminal concentration in beef cattle receiving the same diets of the first experiment. Four crossed animals (HxZ) fistulated in the rumen and abomasums, with mean body weight of 364 Kg were assigned to a 4X4 Latin square. The forage: concentrate ratio was 60:40, in dry matter basis. The mean daily intake of dry matter (DM), organic matter (OM), crude protein (CP), total carbohydrates (TC), the total apparent digestibility of CP as well, ether extract (EE), non-fiber carbohydrates (NFC) and neutral detergent fiber (NDF) were not influenced by the diets registering mean values of 6.01; 5.69; 0.76 e 4.64kg /day and 67.94; 82.12; 84.43 and 53.57%, respectively. The intake of EE, NFC, NDF and total digestible nutrients (TDN) and the total apparent digestibility of DM, OM and TC increased linearly with the increment of sorghum silage in the forage. The ruminal and intestinal digestibility of DM, TC, NFC and NDF were not influenced by the diets. The pH was not influenced by the collection time, or by the diets and the average values of 6.21 were registered. The ammonia concentration was influenced by the collection times, estimating the maximum value of 13.14 mg/ 100 ml, 2.90 hour after feeding. Ruminal digesta passage rates of 5.30; 4.27; 4.22 and 4.10% / hour were respectively estimated for diets containing 0; 32; 66 and 100% of sorghum silage in the forage. The level of sorghum silage in the diet did not influence the microbial efficiency. The balance of nitrogen (g/day) increased linearly with the increment of sorghum silage proportion in the forage. The inclusion of next 60% of sorghum silage in the forage promoted maximum estimated weight gain. The use of Tifton 85 haylage associated with sorghum silage has shown to be a great alternative of forage for finishing beef cattle. In the third experiment the intake, digestibility of nutrients, daily gain, feed conversion and the carcass yield in beef cattle receiving diets containing 0; 0.5; 1.0 e 1.5% of urea in total dry matter were analyzed. Twenty- one crossed animals (HxZ), castrated, with initial mean body weight of 290 kg were distributed in a completely casual design. Sorghum silage was used as forage adopting relation forage: concentrate of 70:30 in dry matter basis. The assay lasted 127 days, being 15 days of adaptation and four periods of 28 days for the evaluations. In order to determine the fecal excretion, acid detergent fiber was used as a marker. The intake and the digestibility of nutrients were not influenced by the proportions of urea in xivthe diets. For the intake and the apparent digestibility of dry matter, mean values of 8.42 kg/day or 2.33%PV e 64.52% were registered, respectively. The mean daily gain, the carcass yield and the feed conversion were not influenced by the proportions of urea in the diets, registering mean values of 1.05 kg/day, 8.07 and 48.72%, respectively. In the fourth the intake and the total and partial digestibility of nutrients the microbial efficiency, the nitrogen balance, the passage rates of ruminal digesta, the pH, and the ammonia ruminal concentration were evaluated in beef cattle receiving the same diets of the third experiment. It was used four crossbred animals (HxZ), fistulated in rumen and abomasums, with mean body weight of 459Kg were assigned to a 4x4 Latin square. It was used the sorghum silage as forage in forage: concentrate relation of 70:30, in dry matter basis. Excluding the intake of total digestible nutrients that decreased linearly with the increase of the levels of urea in a diet, the intakes of the nutrients were not influenced by diets. The total and partial related digestibilities of the nutrients were not influenced by diets. The pH was not influenced by the collection time or by the diets and the average values of 6.46 were registered. The ammonia concentration was influenced by the times of collect, estimating the maximum value of 11.72mg/100ml, 2.77 after feeding. It was estimated passage rates of ruminal digesta of 4,1; 4,4; 3,8 e 3,2%/hour, to diets containing 0; 0.5; 1,0; and 1,5% of urea, respectively. The microbial efficiency stated in different ways was influenced by the levels of urea in a diet. The balance of nitrogen was not by the levels of urea in a diet. Levels of 1.5% of urea in the dry matter of the total diet can be used in the preparation of diets for finishing beef cattle (HxZ) without compromising the consumption, digestibility, ruminal parameters and the animal performance as well. In the fifth experiment the intake, digestibility of nutrients, daily gain and feed conversion were evaluated in beef cattle receiving diets containing Tifton 85 grass hay and corn silage as forage in the following proportions: 100:0; 68:32; 35:65; and 0:100, in dry matter basis. Nineteen Limousin crossed with Zebu, intact, with initial mean body weight of 301 kg were distributed in a completely casualized design. The forage:concentrate ratio was 58:42, in dry matter basis. The assay lasted 99 days, being 15 days of adaptation and three periods of 28 days for the evaluations. In order to determine the fecal excretion, undigestible acid detergent fiber was used as a marker. The mean daily intake of dry matter (DM), organic matter (OM), crude protein (CP), total carbohydrates (TC) and neutral detergent fiber (NDF) were influenced in a quadratic way by the level of corn silage. The estimated maximum values of intakes of DM and OM were 7.52 and 7.08 kg/day, for the levels of 61.13 and xv61.78% of corn silage in the forage, respectively. The apparent digestibility of DM, OM and NDF were not influenced by corn silage level in the forage. The mean daily gain and feed conversion increased and decreased linearly, respectively, with the increment of corn silage proportion in the forage fraction of the diets. The combination of next 60% corn silage and 40% Tifton 85 grass hay of low quality, in a 60% forage diet, maximized the dry matter intake, without compromise the weight gain. In the sixth experiment the intake, digestibility of nutrients, daily gain, feed conversion and the carcass yield in beef cattle receiving diets containing corn silage and concentrated in the following proportions78:22; 63:37; 47:53 and 33:67, in dry matter basis were analyzed. Twenty- three crossed animals (HxZ), castrated, with initial mean body weight of 360 Kg were distributed in a completely casual design. After an adaptation period of 15 days, three experimental periods were evaluated, the first two periods of 21 days each and the third one of 28 days. In order to determine the fecal excretion, indigestible acid detergent fiber was used as a marker. A linear increment was observed for the intake of the nutrients with the increase of the levels of concentrate in the diet. The apparent digestibility of dry matter, organic matter, crude protein, total carbohydrates; non-fiber carbohydrates and neutral detergent fiber were influenced in a quadratic way estimating maximum digestibility of 72.55; 73.50; 73.37; 72.85; 83.42 and 61.78% for the levels of 40.97; 40.42; 41.47; 40.92; 35.41 and 36.92% in the concentrate, respectively. The mean daily gain increased linearly with the increment of concentrate in the diets. However, the carcass yield and the feed conversion were not influenced by the diets, registering mean values of 50.40% and 7.82% respectively. Therefore in diets for beef cattle in feedlot, where corn silage is used as forage, levels of concentrate around 35% and 40% of the total diet in dry matter basis is recommended, because they presented higher levels of nutrient digestibility, without compromising the weight gain.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-17T11:39:54Z No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 275775 bytes, checksum: 1a7b24a9d4a1b02a01b3128bec3ff97c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-17T11:39:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.PDF: 275775 bytes, checksum: 1a7b24a9d4a1b02a01b3128bec3ff97c (MD5) Previous issue date: 2001-03-23 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Objetivou-se avaliar dois protocolos para sincronização de ovulação em gado de leite. Os animais foram alocados em dois tratamentos (T1 e T2), sendo que as fêmeas do T1 receberam buserelina (análogo do GnRH) (10μg, Dia 0), PGF 2α (250 mg, Dia 7) e buserelina (10μg, Dia 9), e as fêmeas do T2 receberam semelhante tratamento, mas no lugar da segunda dose de buserelina receberam 1 mg de benzoato de estradiol (BE) no Dia 8. Os animais do T1 foram inseminados 24 horas após a segunda aplicação de buserelina e os do T2 foram inseminados 35 horas após a aplicação de benzoato de estradiol. A dinâmica folicular e a concentração de progesterona plasmática foram monitoradas em oito vacas de cada tratamento. A primeira administração de GnRH induziu a ovulação em 31% das vacas (5/16) e a atresia folicular ocorreu em 56% das vacas tratadas (9/16). A emergência de uma nova onda folicular ocorreu 1,93±1,23 dias após a administração do GnRH em 87,5% das vacas (14/16). Após a administração de PGF 2α ocorreu luteólise completa em 56% das vacas (9/16). O diâmetro máximo dos folículos ovulatórios foi similar nos animais dos dois tratamentos. A ovulação dos animais do T1 foi observada 31,0 ± 8,19 horas após a aplicação do GnRH e nos do T2 decorridas 40,74 ± 3,96 horas após a aplicação do BE. Nas vacas do T1, a sincronização de ovulação ocorreu dentro de um intervalo de 20 horas após a segunda aplicação de GnRH versus a sincronização mais precisa das vacas do T2, que ocorreu dentro de 9 horas. Nesse experimento, observou-se 100% de ovulação no T1 após a aplicação do GnRH e 87,5% no T2 após a aplicação de BE. Porém, apesar dos excelentes resultados encontrados na sincronização de ovulação, as taxas de gestação obtidas nos animais deste experimento foram baixas nos dois tratamentos, no T1 foi de 16,7% e no T2 de 17,4% diagnosticadas aos 139 dias. Os folículos dominantes dos animais do experimento tiveram seus períodos de dominância prolongados, apresentando aproximadamente 7 dias nos dois tratamentos. Com base nos resultados obtidos, concluiu-se que os dois tratamentos foram efetivos em sincronizar a ovulação dos animais tratados, porém resultaram em baixas taxas de gestação, provavelmente decorrente do prolongamento da duração do período de dominância que foi observado nos animais de ambos os tratamentos e que pode ter levado a queda da qualidade dos ovócitos derivados desses folículos. / The objective of this study was to evaluate two protocols in order to synchronize the ovulation in dairy cattle. The dairy cows were assigned into two treatments (T1 e T2), the animals from T1 received buserelin (10μg, Day 0), PGF 2α (250 mg, Day 7) and buserelin (10μg, Day 9), and the animals from T2 received the same treatment, but 1 mg of estradiol benzoate on day 8 replaced the injection of GnRH on day 9. The animals from T1 were inseminated 24 hours after the second buserelin and the T2 ones were inseminated 35 hours after the estradiol benzoate injection. The follicle development and the plasma progesterone concentration were monitored in eight cows of each treatment. The first administration of GnRH induced ovulation in 31% of the cows (5/16) and follicle atresia in 56% of treated cows (9/16). The emergence of a new follicle wave occurred 1.93±1.23 days after GnRH administration in 87.5% of the cows (14/16). A complete luteolysis occurred after PGF 2α administration in 56% of the cows (9/16). The ovulatory follicle maximum diameter was similar in the two treatments. The ovulation time of the animals from T1 was 31.0 ± 8.19 hours after the GnRH administration and time for T2 40.74 ± 3.96 hours after BE administration. The ovulation time for the cows of T1 occurred within 20 hours from the end of treatment versus the ovulation time for the T2 cows that occurred within 9 hours in a shorter time than the first ones. The animals from T1 showed 100.0% ovulation rate after GnRH administration and 87.5% in T2, after BE administration. Despite, the excellent results of the ovulation time the pregnancy rates were low in the animals from both treatments of this experiment, being 16.7 and 17.4%, respectively, detected on day 139. The dominant follicles extended their life for about 7 days in the two treatments. Based on the results of this experiment, it is concluded that the two treatments were effective in synchronizing ovulation of the treated animals, but the low pregnancy rates, probably occurred because of the extended life of the dominant follicle from the cows of both treatments, which could be the cause of the decreased in oocytes quality of these follicles.