Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2015-05-27T20:10:51Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_IdentificaçãoProteínasAssociadas.pdf: 9965361 bytes, checksum: d5313388c3380d6c40007f75d982c4ac (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2015-05-28T17:04:40Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_IdentificaçãoProteínasAssociadas.pdf: 9965361 bytes, checksum: d5313388c3380d6c40007f75d982c4ac (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-28T17:04:40Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_IdentificaçãoProteínasAssociadas.pdf: 9965361 bytes, checksum: d5313388c3380d6c40007f75d982c4ac (MD5) Previous issue date: 2015 / O alto conteúdo de compostos organossulfurados nos derivados de petróleo compromete sua qualidade; assim, sua remoção ou conversão a substâncias menos tóxicas são importantes etapas durante o processo de refino. Os limites de concentração para esses compostos estão sob rígido controle em diversos países com o objetivo de minimizar seu impacto negativo sobre a saúde animal e o ambiente. Dentre eles, o dibenzotiofeno (DBT) é um hidrocarboneto policíclico aromático que contém um átomo de enxofre em substituição em sua estrutura. Devido à importância dessas moléculas na oncogênese, e a escassez de investigações toxicológicas relacionadas ao DBT, este trabalho propôs realizar uma avaliação dos efeitos tóxicos e moleculares promovidos por um tratamento crônico de ratos Wistar com dose sub-letal (30 mg/kg) de DBT e seu derivado oxidado DBTO2 (dibenzotiofeno sulfona), ambos administrados durante 10 semanas. Em paralelo, seus efeitos tóxicos foram comparados com aqueles provocados pelo tratamento com o agente mutagênico clássico, 1,2-dimetilhidrazina (DMH), administrado na mesma dose durante o mesmo período. Na 14ª semana após a última dose, os animais foram sacrificados para uma avaliação inicial da contagem de células sanguíneas e das funções hepáticas e pancreáticas. Não foram observadas alterações nesses parâmetros. Entretanto, análises histopatológicas revelaram lesões de caráter pré-neoplásico nos intestinos dos animais tratados com DBT e DBTO2 que mostraram-se comparáveis em intensidade e alterações morfológicas com aquelas encontradas no cólon de animais tratados com DMH. Em concordância com esse achado, os marcadores tumorais CD44 e CEA (antígeno carcinoembrionário), utilizados em ensaios de imunohistoquímica demonstraram aumento de expressão de aproximadamente três vezes para os animais dos grupos Testes em relação aos animais dos grupos Controle. Análises proteômicas realizadas por eletroforese bidimensional (2D SDS-PAGE) demonstraram padrões de expressão proteica diferenciados entre os diferentes grupos. Além da análise proteômica, foi realizado ensaio de seleção de peptídeos ligantes de proteínas especificamente relacionados às alterações promovidas pelos indutores químicos utilizados, empregando a técnica de Phage Dislay. Tal metodologia permitiu a pré-seleção de seis peptídeos específicos e relacionados aos mecanismos de desenvolvimento/manutenção de câncer. A identificação das proteínas diferencialmente expressas observadas por 2D SDS-PAGE e, das proteínas alvo que interagem com peptídeos específicos relacionados às alterações promovidas por esses agentes químicos, auxilia no avanço do entendimento acerca dos mecanismos envolvidos no estabelecimento das lesões encontradas nos animais tratados com DBT e DBTO2. ____________________________________________________________________________________________________________________ / ABSTRACT: The high content of organosulfur compounds in petroleum derivatives compromises their quality and, therefore, their removal or conversion to less toxic substances are important steps during oil refining. The concentration limits of such compounds in fuels are under strict control worldwide with the aim to minimize their negative impact upon animal health and the environment. Among them, dibenzothiophene (DBT) is a polycyclic aromatic hydrocarbon containing a sulfur atom replacing a carbon in the main structure. Given the importance of such molecules during oncogenesis and the scarcity of toxicological investigations related to DBT, this work proposes an evaluation of the toxic effects promoted by a chronic treatment of Wistar rats with a sub-lethal dose (30 mg/kg) of DBT and its oxidized derivative DBTO2 (dibenzothiophene sulfone), both administered during 10 weeks. In parallel, their toxicological effects were compared to those inflicted by treatment with the classic mutagenic compound, 1,2-dimethylhydrazine (DMH), given at 30 mg/kg for the same period. At the 14th week after the last dose, the animals were sacrificed for the initial evaluation of blood cell counts and assessment of hepatic and pancreatic functions. We have observed no alterations in either blood cell parameters or indication of liver and spleen injuries. However, pre-neoplastic lesions in the small intestine of DBT and DBTO2 treated animals were comparable in intensity and morphology to those found in the colon of DMH-treated animals. In agreement with this finding two tumor markers CD44 and CEA (carcinoembrionic antigen), were detected by immunohistochemistry and demonstrate approximately three fold higher for treated animals when compared to control groups. Proteomic analyses by 2D electrophoresis (2D SDS-PAGE) reveal different expression patterns for Test groups when compared to Control groups. In addition to the proteomic analysis, we also performed a selection of test specifically protein binding peptides related to changes produced by chemical inducers used employing the Phage Display technique. This methodology allowed the pre-selection of six specific peptides related to the mechanisms of development/maintenance of cancer. The identification of differentially expressed proteins observed by 2D SDS-PAGE, and of proteins that interact with specific peptides related to alterations caused by such agents, assists in advancing understanding of mechanisms involved in the establishment of lesions found in animals treated DBT and DBTO2.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde. Programa de Pós-Graduação em Odontologia / Made available in DSpace on 2012-10-26T10:42:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 302226.pdf: 6814844 bytes, checksum: d0f9d471e4a9d4600a15e0c07a30debd (MD5) / A queilite actínica (QA) é uma doença potencialmente malignizável causada pela exposição solar crônica e excessiva. A radiação ultravioleta (UV) presente nos raios solares pode levar a alterações genotípicas e fenotípicas nas células epiteliais, as chamadas displasias epiteliais. O diagnóstico correto desta doença é de extrema importância, pois permite a prevenção da sua progressão para o carcinoma epidermóide de lábio (CEL), uma doença maligna e de prognóstico ruim. Este estudo retrospectivo teve como objetivo determinar o perfil clínico dos pacientes portadores de QA e CEL diagnosticados na UFSC e correlacioná-lo com os achados histopatológicos das lâminas utilizadas para o diagnóstico. Foram avaliadas informações clínicas dos pacientes presentes nos prontuários e fichas de solicitação de exame histopatológico e as características histológicas das lesões, conforme os critérios de displasia epitelial segundo a OMS, a classificação das displasias epiteliais segundo a OMS e o sistema binário de classificação de 64 casos de QA, e o estágio de invasão, o padrão de invasão e o grau de ceratinização em 70 casos de CEL presentes nos arquivos do Laboratório de Patologia Bucal/UFSC e do Serviço de Anatomia Patológica do HU/UFSC. A correlação dos dados foi realizada por meio de analise estatística. Observou-se que a presença de disceratose e pérolas de ceratina está fortemente associada à QA classificada como displasia intensa e que estas podem ser consideradas características representativas de proximidade entre as QA mais graves e o CEL. Também as alterações relacionadas com o núcleo como, por exemplo, hipercromatismo nuclear, pleomorfismo nuclear, anisonucleose, aumento do número e tamanho dos nucléolos, maior número de mitoses e mitoses atípicas sinalizam maior gravidade da lesão e indicam piora no grau da displasia. Critérios que foram observados nesse trabalho e podem ser auxiliares na diferenciação do carcinoma in situ para o CEL invasivo foram perda de adesão intercelular, presença de mitoses, pérolas de ceratina e disceratose. O conhecimento das características clínicas e histológicas da QA e do CEL propicia uma melhor compreensão dos fatores que, possivelmente, estão associados com a transformação maligna a partir da displasia epitelial. Os resultados estudados devem ser ratificados por trabalhos que abranjam um volume maior de casos, e podem ser decisivos para determinar o prognóstico dos pacientes portadores de QA. / Actinic cheilitis (AC) is a potentially malignant disease caused by chronic and excessive sun exposure. Ultraviolet (UV) radiation from sunlight can lead to genotypic and phenotypic alterations in epithelial cells, called epithelial dysplasia. The correct diagnosis of this disease is extremely important because it allows the prevention of progression to squamous cell carcinoma of the lip (SCCP), a malignant disease with poor prognosis. This retrospective study aimed to determine the clinical profile of patients diagnosed with AC and SCCP at UFSC and correlate them with histopathological findings. Clinical information present in medical and histopathological solicitation records and histopathological features of lesions according to the WHO's classification of dysplasia and according to WHO#s classification criteria for epithelial dysplasias and according the binary system of classification were evaluated. Also in SCCP were evaluated pattern of invasion,stage of invasion and degree of keratinisation. 64 cases of AC and 70 cases of SCCP present in the Oral Pathology Laboratory/UFSC and the Service of Pathology HU / UFSC were studied. The correlation of the data was performed using statistical analysis. It was observed that the presence of dyskeratosis and keratin pearls is strongly associated with severe dysplasia and may be characteristics representative of proximity between the severe AC and SCCP. Also the changes related to the nuclei, for example, nuclear hyperchromatism, nuclear pleomorphism, anisonucleosis, increase in the number and size of nucleoli, increased number of mitoses and atypical mitoses indicate severity of injury and indicate progression in the dysplasia spectrum. Criteria observed in this work which can help in differentiation between carcinoma in situ and invasive CEL were loss of intercellular adhesion, presence of mitoses, dyskeratosis and keratin pearls. Knowledge of clinical and histological features of AC and SCCP lead to a better understanding of the factors that are possibly associated with malignant transformation of epithelial dysplasia. The parameters in this work must be reinforced by studying a larger volume of cases, and can be decisive in determining the prognosis of patients with AC.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-08-04Bitstream added on 2014-06-13T18:54:35Z : No. of bitstreams: 1 falcaojunior_joa_me_botfm.pdf: 773288 bytes, checksum: f1ca4e53336a9ebe1facf54bc6aed560 (MD5) / O sistema imune, por meio da coordenação do funcionamento de várias células e proteínas, além de proteger contra infecções, atua na resposta do organismo contra células neoplásicas. As quimiocinas associam-se à modulação da resposta imune e apresentam importante papel na mediação do tráfego celular. O objetivo deste estudo é avaliar as quimiocinas, CCL2/MCP-1, CCL3/ MIP-1α, CCL4/MIP-1β, CCL5/RANTES e CXCL 8/IL-8 em mulheres com câncer epitelial de ovário (CEO). Métodos: Foram estudadas prospectivamente 16 pacientes com CEO e 18 pacientes sadias sem evidências de neoplasias malignas (grupo controle). As pacientes com CEO foram submetidas à laparotomia para citoredução. As dosagens das quimiocinas foram realizadas por meio da técnica de ensaio citofluorométrico com microesferas fluorescentes - Cytometric bead array (CBA) Foram utilizados os teste de Mann-Whitney e Kendall’s tau quando apropriados, sendo o valor de p<0,05 considerado significativo. Resultados: A idade das pacientes variou de 23 a 89 anos (58,7 + 2,3 anos). O estadiamento do tumor (FIGO) foi I em 4 casos (25%), III em 5 casos (31,3%) e estádio IV em 7 casos (43,8%). As dosagens séricas de CCL2/MCP-1 e CCL4/MIP-1β foram menores nas pacientes com CEO em comparação com o grupo controle (p=0,021 e p=0,031; respectivamente). Não houve diferença entre os grupos nos níveis de CCL3/ MIP-1α, CCL5/RANTES e CXCL 8/IL-8. O estadiamento tumoral não se associou com os níveis séricos das quimiocinas. A dosagem sérica de CA-125 não apresentou correlação com as quimiocinas estudadas. A resposta imune pode estar associada ao estabelecimento/manutenção do CEO e o estudo das quimiocinas pode ser um mecanismo para esta avaliação. / The dynamics of the host immune system enables defense against pathogenic agents and neoplasic cells through a wide range of mechanisms. Because chemokines are responsible for modulating the immune response in leukocyte migration processes to epithelial ovarian cancer (EOC)- affected tissues, we aimed to investigate CCL2/MCP-1, CCL3/ MIP-1 , CCL4/MIP-1 , CCL5/RANTES and CXCL 8/IL-8 in women with EOC. Methods: Sixteen patients diagnosed with EOC and 18 healthy women with no evidence of malign neoplasia (control group) aged from 23 to 89 years (mean SEM: 58.7+2.3 years) were included. The EOC patients underwent laparotomy and debulking surgery. Chemokines dosage assays were made using Cytometric bead array (CBA). Statistical analysis was performed using Mann-Whitney and Kendall’s tau, and p<0.05 was regarded as significant. Results: The tumor staging (FIGO) was classified into: I in 4 cases (25%), III in 5 cases (31.3%) and stage IV in 7 cases (43.8%). Sera chemokine dosage of CCL2/MCP-1 and CCL4/MIP-1 were lower in EOC patients compared to the control group (p=0,021 and p=0,031; respectively). No significant difference was observed in the levels of CCL3/ MIP-1 , CCL5/RANTES and CXCL 8/IL-8 between groups. No association between the chemokines analyzed and the epithelial ovarian cancer staging was found, and CA125 was not correlated with chemokine dosage. Conclusion: The establishment of epithelial ovarian cancer may be correlated with the host immune response dynamics, and the study of chemokines could be regarded as a valid diagnostic tool for evaluating the extent of the disease.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2004Bitstream added on 2014-06-13T19:43:00Z : No. of bitstreams: 1 silvafilho_al_dr_botfm.pdf: 1160574 bytes, checksum: cb0a508d8531775b633de700cd5ef1b7 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O processo de carcinogênese implica a aquisição de alelos mutantes de genes supressores de tumor, aumento na proliferação celular e necessidade de angiogênese. Este estudo analisa a expressão das proteínas p53, Ki-67 e CD31 no tumor e nas margens vaginais após histerectomia radical em pacientes com carcinoma invasor do colo uterino. Métodos: Foram estudadas amostras de tumor ou de colo uterino normal e de margem vaginal anterior e posterior obtidas de 30 pacientes submetidas à histerectomia radical para carcinoma de células escamosas (CCE) do colo uterino estádio IB (FIGO) e 30 pacientes submetidas à histerectomia vaginal para tratamento de miomas uterinos (grupo controle). O material foi fixado em formol, incluído em parafina e processado para marcação imunohistoquímica para as proteínas p53, Ki- 67 e CD31. Resultados: A idade das pacientes variou de 27 a 73 anos (48,7 ± 10,4 anos). A expressão das proteínas p53, Ki-67 e CD31 foi maior no tumor que no colo uterino normal. As margens vaginais de histerectomia radical, de pacientes com CCE invasor do colo uterino, histologicamente negativas, apresentam uma maior expressão dessas proteínas em comparação às margens vaginais de pacientes com colo uterino normal. A expressão tumoral da proteína CD31 se correlacionou com a presença de invasão linfovascular, tamanho tumoral e metástases para os linfonodos pélvicos, mas não com o grau de diferenciação e acometimento parametrial. Não foi observada uma associação da expressão das proteínas p53 e Ki-67 no tumor com os achados anatomopatológicos estudados. A expressão desses marcadores nas regiões proximal e distal das margens vaginais, após histerectomia radical, não mostrou diferença significativa. Conclusões: A expressão das proteínas p53, Ki-67 e CD31 é maior no tumor e nas margens vaginais de... / The process of carcinogenesis implicates, among other factors, in the acquisition of mutant alleles of tumor-suppressor genes, the increase in cell proliferation and angiogenesis. This study was performed to evaluate the expression of p53, Ki-67 and CD31 in the tumor and in the vaginal margins of radical hysterectomy in patients with stage IB squamous cell carcinoma of the cervix. Methods: Samples were taken from the tumor or normal cervix, anterior and posterior vaginal margins of 30 patients with stage IB (FIGO) squamous cell carcinoma (SCC) submitted to radical hysterectomy (study group) and 30 patients with uterine myoma submitted to vaginal hysterectomy (control group). The tissue was fixed in formalin, included in paraffin and processed for immunohistochemical evaluation of p53, Ki-67 and CD31. Results: The age of the patients ranged from 27 to 73 years (49.4±11.7 years). The expression of p53, Ki-67 and CD31 is significantly higher in the tumor than in the benign cervix. The vaginal margins of radical hysterectomy in patients with cervical carcinoma, histologically negative for neoplasia, have a higher expression of these markers in comparison to the vaginal margins of patients with benign cervix submitted to vaginal hysterectomy. The expression of CD31 in the tumor was associated with lymphatic vascular space invasion, tumor size and pelvic lymph node metastasis, but not with grade of differentiation and parametrium involvement. There was no association between tumoral p53 and MIB-1 expression with the histopathological findings analyzed. There was no difference in p53, Ki-67 and CD31 expression between the proximal and distal vaginal margins in patients with carcinoma of the cervix.Conclusions: The expression of p53, Ki-67 and CD31 is higher in the tumor and in the vaginal margins of patients with SCC of the cervix than in the cervix and vaginal margins of the control group... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:50Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-07-28Bitstream added on 2014-06-13T19:43:36Z : No. of bitstreams: 1 massuia_fao_dr_botfm.pdf: 542037 bytes, checksum: 34cd5c4934d0641cd4288ea2b940150e (MD5) / O câncer de mama tem sido um dos maiores problemas de saúde pública, sendo responsável por alta taxa de incidência em mortalidade e morbidade, caracterizada como a segunda causa de morte entre as mulheres, mesmo como tratamento desta doença, o procedimento cirúrgico pode desenvolver comprometimentos emocionais e/ou físicos às pacientes como a alteração de sensibilidade. A fisioterapia desempenha um papel fundamental para a paciente, a reeducação sensitiva, pode oferecer estimulação dos receptores sensoriais, aumentando o seu limiar de sensibilidade. Embora compreendamos a participação dos nervos sensitivos na manutenção da resposta sensitiva, pouco se analisa a resposta da reeducação sensitiva no trajeto do nervo intercostobraquial (NICB) em sujeitos do sexo feminino pós-cirúrgico com queixa de hipoestesia. O presente estudo teve como objetivo verificar a resposta da reeducação sensitiva em mulheres submetidas à linfadenectomia axilar, pós mastectomia, avaliando a resposta nas diferentes técnicas de reeducação sensitiva como bolas, kit com diferentes texturas e drenagem linfática manual e verificar a permanência da resposta, após 3 meses. Sujeitos e método: Este estudo foi realizado no período de Agosto de 2004 a Novembro de 2006, no hospital estadual, na cidade de Santos-SP, composto por 120 pacientes do sexo feminino, submetidas à cirurgia de mama com esvaziamento axilar pela equipe médica representada por três mastologistas do referido hospital, que utilizam o mesmo procedimento cirúrgico para a preservação do NICB, subdivididas em quatro grupos de 30 pacientes cada. O GI (Estimulação sensitiva com bolas, sensiball, fisiobol e lisa), GII (com drenagem linfática), GIII (com Kit de diferentes texturas) e o GIV (Controle). A sensibilidade superficial foi avaliada por intermédio... / The breast cancer has been a major public health problem and is responsible for high rate of incidence in mortality and morbidity, characterized as the second leading cause of death among women, even as treatment of this disease, the surgical procedure can develop emotional commitments and / or physical for patients and the amendment of sensitivity. The physiotherapy plays a key role for the patient, the reeducation sensitive, can provide sensory stimulation of receptors, increasing the threshold of sensitivity. While we understand the participation of sensitive nerves in the maintenance of sensory response, little is analyzes the response in the path of reeducation sensory of the intercostobrachial nerve (NICB) in individuals female post-surgical complaint with the hypoesthesia. This study aimed to ascertain the response of sensory reeducation in women subjected to linfadenectomia axillary, post mastectomy, evaluating the response in the various techniques of sensory reeducation as balls, kit with different textures and lymphatic drainage manual and check the permanence of response, after 3 months. Individuals and method: This study was carried out from August 2004 to November 2006, the state hospital in the city of Santos-SP, composed of 120 patients were female, submitted to surgery for breast with emptying axillary represented by the medical team mastologists by three of the hospital, using the same surgical procedure for the... (Complete abstract click electronic access below)

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:33:24Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-10-26Bitstream added on 2014-06-13T21:06:03Z : No. of bitstreams: 1 ihlaseh_sm_dr_botfm.pdf: 3168974 bytes, checksum: ba6d3bf44009cc973a683d22ee61b086 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Diuron (3-(3,4-dichlorophenyl)-1,1-dimethylurea) is a substituted urea herbicide that at high dietary levels (2500 ppm) induces rat urinary bladder urothelial hyperplasia in 20 weeks and neoplasia in 2 years. The effects on the urothelium in a short period of exposure, however, have not been described. The present 7-day study evaluated the dose-dependent effects of urothelial alterations in the urinary bladder using histology, scanning-electron microscopy (SEM) and transcriptional profiling with Affymetrix microarrays. Six-week old male Wistar rats were treated with 0, 125, 500, 2500 ppm of diuron in the diet for 7 days. The numbers of differentially expressed genes (DEGs) in the exposed groups increased with dose. Diuron affected several functions involved with cell-to-cell interaction and tissue disorganization at transcriptional level, however, 7 days of exposure seemed to be insufficient to cause morphological lesions. Comparison of the gene expression observed at 7-day and 20- week time points indicates more differences than similarities. The present data suggests an initial adaptive response to protect the urothelium to the continuous exposure to diuron. By the 20th week, the protective response is suppressed and the mucosa develops simple hyperplasia, a morphologic consequence of cytotoxicity and necrosis followed by a continuous replacement of the epithelium. This process can explain the development of urothelial bladder tumors at the end of a 2-year exposure to diuron.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2012. / Submitted by Alaíde Gonçalves dos Santos (alaide@unb.br) on 2012-05-08T14:34:35Z No. of bitstreams: 1 2012_MaiteCevallosMijan.pdf: 2328262 bytes, checksum: c702ab2ca4a7e15057c07722b1071c5a (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2012-05-10T11:52:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_MaiteCevallosMijan.pdf: 2328262 bytes, checksum: c702ab2ca4a7e15057c07722b1071c5a (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-10T11:52:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_MaiteCevallosMijan.pdf: 2328262 bytes, checksum: c702ab2ca4a7e15057c07722b1071c5a (MD5) / A Terapia Fotodinâmica (TFD), cujo princípio é a atuação simultânea de três componentes: fármaco fotossensibilizador, luz em comprimento de onda específico e oxigênio molecular, tem se mostrado uma modalidade terapêutica promissora para o tratamento de diversas neoplasias malignas, dentre as quais o câncer de mama, altamente prevalente em mulheres em todo o mundo. Atualmente, a busca por novas formulações de fármacos fotossensibilizadores que potencializem os efeitos antitumorais da TFD, principalmente pela indução de resposta imune anti-tumoral e que minimizem efeitos adversos a tecidos normais adjacentes, tem sido constante. O presente estudo teve o objetivo de avaliar os efeitos da TFD mediada por Alumínio- Cloro-Ftalocianina (AlClFc) em formulação lipossomal no tratamento de câncer de mama in vitro e in vivo, bem como avaliar o perfil de resposta imunológica por meio da expressão de citocinas inflamatórias. Como resultados, puderam ser observados que a TFD mediada por AlClFc em formulação lipossomal foi altamente eficiente na ablação de células de carcinoma mamário murino – 4T1 in vitro – com mais de 90% de morte celular, induzindo preferencialmente necrose, seguida tardiamente por apoptose celular. A alta eficiência de tratamento também foi observada no modelo tumoral em camundongos Balb/C in vivo, onde foram constatados os três diferentes mecanismos de ação da TFD comumente descritos, tais quais: ação direta por necrose celular, ablação vascular acentuada e indução de resposta inflamatória caracterizadas principalmente pela expressão de citocinas pró-inflamatórias como IL- 1β e TNF-. Pôde-se concluir que a TFD mediada por AlClFc em formulação lipossomal é altamente efetiva no tratamento de câncer de mama, fornecendo suporte científico para que essa modalidade associada à nova formulação farmacêutica seja empregada, no mínimo, como adjuvantes terapêuticos a tratamentos cirúrgicos, permitindo maior controle tumoral por longos períodos e, possivelmente, maior controle dos focos metastáticos. _______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Photodynamic therapy (PDT),which acts by interaction of three main components: photosensitizer, light in specific wavelength and molecular oxygen, has shown to be a promising therapeutic modality applied to the treatment of various malignancies, among which breast cancer. Currently, the search for new formulations of photosensiting drugs that enhance antitumor effects of PDT, mainly by inducing antitumor immune response and by minimizing adverse effects to adjacent normal tissues has been increased. This study aimed to evaluate the effects of PDT mediated with aluminium-chlorine-phtalocyanine (AlClPc) in liposomal formulation to the treatment of breast cancer both in vitro and in vivo model, as well as to assess the profile of immune response through the expression of inflammatory citokines. As a result, it could be observed that PDT mediated with liposomal AlClPc was highly effective in the ablation of murine mammary carcinoma cells (4T1), in vitro, leading to more than 90% of cell death, mainly characterized by necrosis, followed by delayed apoptosis. The high efficiency of treatment was also observed in tumor model in Balb/C mice in vivo, where the three main mechanisms of PDT, commonly described, were achieved: direct cell harm by necrosis process, followed by vascular ablation and induction of inflammatory response mainly characterized by the expression of proinflammatory cytokines such as IL-1β and TNF-α. It was concluded, therefore, that PDT mediated with liposomal AlClPc is highly effective in treating breast cancer. This provides scientific support to perform this new formulation to be used at least as an adjuvant therapy to surgical treatments. This would allow greater tumor control for long periods and possibly greater control of metastasis.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, 2012. / Submitted by Tania Milca Carvalho Malheiros (tania@bce.unb.br) on 2012-05-22T15:53:16Z No. of bitstreams: 1 2012_BeatrizChiyinMa_Parcial.pdf: 679359 bytes, checksum: 745fe0d28c99a874c375aa950267b2be (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2012-05-24T12:09:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2012_BeatrizChiyinMa_Parcial.pdf: 679359 bytes, checksum: 745fe0d28c99a874c375aa950267b2be (MD5) / Made available in DSpace on 2012-05-24T12:09:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2012_BeatrizChiyinMa_Parcial.pdf: 679359 bytes, checksum: 745fe0d28c99a874c375aa950267b2be (MD5) / O câncer de mama é o tipo de câncer mais comum entre as mulheres e apresenta taxas crescentes de incidência e de mortalidade no mundo. Os tratamentos convencionais para esta doença consistem em técnicas não-específicas, que oferecem riscos de dano a tecidos sadios ou erradicação incompleta das células malignas. É nesse sentido que a terapia fotodinâmica, TFD, modalidade terapêutica que utiliza um fotossensibilizante, FS, sensível a luz de comprimento de onda específico capaz de induzir efeitos tóxicos a células e tecidos-alvo, tem se destacado como uma promissora abordagem tecnológica a ser utilizada no tratamento de diversos tipos de câncer. Um grande número de FS tem sido testado para aplicação na TFD, dentre eles destaca-se o Alumínio-Cloro Ftalocianina, AlClPc, mas sua elevada hidrofobicidade gera entraves que comprometem a eficácia de sua atuação. Diante disso, estratégias para contornar esse problema conduziram ao desenvolvimento de uma formulação constituída por AlClPc associado ao copolímero poli(vinil metil éter-co-anidrido maleico) PVM/MA, AlClPc-NP, com potencial para ser utilizado como FS na TFD. Nesse contexto, o presente trabalho teve como foco a avaliação da eficácia do Alumínio-Cloro Ftalocianina associado ao PVM/MA como fotossensibilizantea ser utilizado na terapia fotodinâmica, em um estudo in vitro. Para tal, utilizou-se como modelo células das linhagens murinas tumoral (4T1) e não-tumoral (NIH/3T3), e também linhagens celulares humanas tumoral (MCF-7) e não-tumoral (MCF-10A). Os resultados mostraram que células de todas essas linhagens incorporam o AlClPc-NP, e os efeitos do tratamento com o fármaco mostraram que o copolímero PVM/MA, não associado ao AlClPc, não é citotóxico para as quatro linhagens celulares estudadas. O AlClPc-NP não submetido à irradiação luminosa não se mostrou citotóxico em concentrações menores ou iguais a 2,0 µM, mas ao ser irradiado, induziu citotoxicidade em todas as linhagens celulares, sendo essa toxicidade menos pronunciada sob irradiação luminosa de baixas densidades de energia e em células não-tumorais. Além disso, as análises do perfil de morte celular mostraram que a TFD mediada pelo AlClPc-NP induz morte celular por apoptose sob irradiação luminosa de baixa densidade de energia, enquanto que em alta densidade de energia induz morte celular por necrose, sendo esses resultados corroborados pelas análises de fragmentação do DNA. Os efeitos citostáticos e citotóxicos observados no tratamento da TFD mediada pelo AlClPc-NP sobre células tumorais oferecem excelentes perspectivas do potencial desse fármaco como fotossensibilizante para utilização na terapia fotodinâmica. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / Breast cancer is the most common type of cancer among women, with increasing incidence and mortality rates worldwide. Ordinary treatments for this disease consist of non-specific techniques which offer risks of damaging healthy tissues or incomplete eradication of malignant cells. Therefore, photodynamic therapy, PDT, a therapeutic modality which uses a photosensitizer (PS) sensitive to light of specific wavelength capable of inducing toxic effects to target tissues and cells, has emerged as a promising technological approach to be used in the treatment of several types of cancer. A large number of PS has been tested for use in PDT, with emphasis to Chloroaluminum Phthalocyanine (AlClPc), however, its high hydrophobicity creates obstacles that undermine the effectiveness of its performance. For this reason, strategies to circumvent this problem led to the development of a formulation consisting of AlClPc associated with the copolymer poly(vinyl methyl ether-co-maleic anhydride), PVM/MA, (AlClPc-NP) with potential to be used as a PS in PDT. In this context, this study focused on evaluating the effectiveness of Chloroaluminum Phthalocyanine associated with PVM/MA as a photosensitizer to be used in photodynamic therapy, in vitro study. For this, murine tumor cell line (4T1) and non-tumor cell line (NIH/3T3) were used as models, as well as human tumor cell line (MCF-7) and non-tumor cell line (MCF-10A). The results showed that cells of all lineages take up the AlClPc-NP, and the effects of drug treatment showed that PVM/MA, not associated with the AlClPc, is not cytotoxic to all four cell lines studied. AlClPc-NP without light irradiation no induce cytotoxic effects in concentrations less than or equal to 2,0 µM. However, with light irradiation, was able to induce cytotoxicity in all cell lines: this toxicity was less intense in light irradiations with low energy densities in non-tumor cells. Furthermore, PDT mediated by AlClPc-NP induce cell death by apoptosis in light irradiation with low energy density, while in high energy density induce cell death by necrosis, these results were confirmed with analysis of DNA fragmentation, i.e. PDT with low energy density did not induce DNA fragmentation. Thus, the cytostatic and cytotoxic effects observed in treatment with PDT mediated by AlClPc-NP in tumor cells offer great prospects for the potential of this drug as a photosensitizer for use in photodynamic therapy.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2007. / Submitted by Aline Jacob (alinesjacob@hotmail.com) on 2010-01-19T21:37:37Z No. of bitstreams: 1 2007_RobertaAlvesHiga.pdf: 2185644 bytes, checksum: e8d0d53ea7f6cb269655fe61467bc4ec (MD5) / Approved for entry into archive by Lucila Saraiva(lucilasaraiva1@gmail.com) on 2010-01-19T22:23:07Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_RobertaAlvesHiga.pdf: 2185644 bytes, checksum: e8d0d53ea7f6cb269655fe61467bc4ec (MD5) / Made available in DSpace on 2010-01-19T22:23:07Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_RobertaAlvesHiga.pdf: 2185644 bytes, checksum: e8d0d53ea7f6cb269655fe61467bc4ec (MD5) Previous issue date: 2007-06-15 / O Ipê Roxo (Tabebuia avellanedae), uma árvore da família Bignoniácea encontrada no Brasil, é conhecida pela medicina popular como agente antitumoral contra várias neoplasias, entre elas o câncer colorretal. O objetivo do presente trabalho é estudar a ação antitumoral da β-lapachona, que é um constituinte extraído do ipê roxo, na carcinogênese colônica induzida experimentalmente pelo azoximetano em camundongos. Foram utilizados 50 camundongos divididos em 5 grupos: grupo I administrado AOM; grupo II - β-lapachona; grupo III - veículo (diluente); grupo IV - veículo + AOM; e grupo V - β-lapachona + AOM. Observou-se presença de focos de criptas aberrantes em todos os animais dos grupos I e IV, 50% no grupo II e 90% no grupo V. Concluiu-se que o azoximetano induz lesões do tipo focos de criptas aberrantes hiperplásicas e displásicas em cólon de camundongos e que a β-lapachona extraída do ipê roxo não apresentou efeito protetor das lesões induzidas pelo azoximetano em cólon de camundongos. _________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The Purple Ipe (Tabebuia avellanedae), a tree of the Bignoniacea family found in Brazil, is known by the popular medicine as antitumoral agent against some neoplasias, between them the colorretal cancer. The objective of the present work is experimentally to study the antitumoral action of β- lapachone, that is an extracted constituent of purple ipe, in colonic carcinogenesis azoximethane-induced in mice. 50 mice divided in 5 groups had been used: group I: AOM; group II: β-lapachone; group III: vehicle (diluente); group IV: vehicle + AOM; e group V: β-lapachone + AOM. Presence of aberrant crypt foci was observed in all the animals of groups I and IV, 50% in group II and 90% in group V. It concluded that the azoximetano induces injuries of the type aberrant crypt foci hyperplastic and dysplastic in cólon of mice and that b-lapachone extracted of purple ipe did not present protective effect of the induced injuries for the azoximetano in colon of mice.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2007. / Submitted by Bárbara Gomes (barbara.lrg@gmail.com) on 2010-02-04T19:32:28Z No. of bitstreams: 1 2007_PauloTadeudeSouzaFigueiredo.pdf: 9187336 bytes, checksum: 65c97c7f467a0249f692f8f7ea642eed (MD5) / Approved for entry into archive by Marília Freitas(marilia@bce.unb.br) on 2010-02-04T19:40:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_PauloTadeudeSouzaFigueiredo.pdf: 9187336 bytes, checksum: 65c97c7f467a0249f692f8f7ea642eed (MD5) / Made available in DSpace on 2010-02-04T19:40:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_PauloTadeudeSouzaFigueiredo.pdf: 9187336 bytes, checksum: 65c97c7f467a0249f692f8f7ea642eed (MD5) Previous issue date: 2007 / A tomografia computadorizada (TC) representa um grande avanço no diagnóstico de neoplasias malignas. Por isso, o objetivo principal deste trabalho foi avaliar a contribuição da TC no estadiamento e acompanhamento de pacientes com carcinoma espinocelular de lábio, boca e orofaringe. Como objetivos específicos, o trabalho avaliou a importância deste exame no estadiamento (definição do TNM), comparou o estadiamento clínico com o tomográfico e também caracterizou os principais aspectos visualizados em exames tomográficos de pacientes em acompanhamento pós-tratamento. A amostra constituiu-se de pacientes atendidos no Centro de Câncer Bucal do Hospital Universitário de Brasília e foi dividida em dois grupos distintos. Nos dois grupos estudados, o estadiamento clínico foi realizado por um médico cirurgião de cabeça e pescoço e comparado com o estadiamento tomográfico, este último realizado por três radiologistas (dois cirurgiões-dentistas e um médico). O primeiro grupo foi composto de 16 pacientes com diagnóstico inicial de carcinoma de lábio, boca e orofaringe. No grupo 1, além da comparação do estadiamento clínico com o tomográfico, foram analisadas as concordâncias para a avaliação tomográfica dos três observadores. O outro grupo foi composto de 16 pacientes em acompanhamento pós-tratamento. No grupo 2, além da comparação da avaliação clínica com a tomográfica para presença de recidiva clínica, osteorradionecrose e metástase em linfonodos, foi realizada avaliação das concordâncias intra-observador e interobservadores para a análise tomográfica. Na tomografia foi verificada a presença de alterações musculares. Foram utilizados os testes estatísticos de Mcnemar e Qui-quadrado, com níveis de significância de 95%. Em relação ao grupo 1, verificou-se que a tomografia computadorizada foi capaz de delimitar e definir lesões avançadas, detectar linfonodos clinicamente negativos e verificar a presença de infiltrações ósseas não observadas clinicamente. Não houve concordância entre o estadiamento clínico e o tomográfico. No grupo 2, a tomografia computadorizada detectou alterações musculares, presença de recidiva tumoral e de metástases em linfonodos. Houve concordância interobservador para os aspectos estudados. A tomografia computadorizada demonstrou, portanto, ser uma ferramenta auxiliar importante no diagnóstico e acompanhamento.